毛细管电泳芯片精品PPT课件
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第五章毛细管电泳
蛋白分析 构体分析 糖脂研究
第十五页，本课件共有103页
在核酸/核苷酸分析中的应用
核酸、基因疫苗的质量控制 碱基、核苷和核苷酸的分析
纯度检测、片段收集和微量制备
PCR产物分析和dsDNA分析
蛋白质-DNA相互作用测定
基因突变测定 基因表达测定
DNA序列测定(CEQ2000XL)
第三十二页，本课件共有103页
电渗（electroosmotic flow ,EOF）
电渗流是一种液体相对于带电的管壁移动的现 象。
在毛细管电泳里在所指的电渗是：在高电压下， 溶液中的正电荷与毛细管管壁表面的负电荷之 间作用，引起流体朝负极方向运动的现象。
和电泳淌度相似，电渗淌度（ eo ）可表 示为：
毛细管电泳中的zeta电势
第一种：毛细管壁上的zeta电势
熔硅毛细管表面上的zeta电势正比于它表面上的 电荷数与对离子层厚度的乘积，但电荷数和对离子 层厚度又会受到对离子的性质、缓冲液的pH、缓冲 液中阳离子和熔硅基表面间的平衡等因素的影响。
对于熔硅或聚四氟乙烯材质的毛细管，管壁
上的zeta电势是毛细管电泳中的一个重要参数，对
毛细管电泳与平板凝胶电泳的比较
检测器选择 定量 自动化 分辨率
毛细管电泳 多
与 HPLC 相当 容易 高
平板凝胶电泳 少
困难 困难
低
第七页，本课件共有103页
毛细管电泳与HPLC的比较
相同之处：
1. 快速高效分离技术 2. 可定量 3. 全自动化 4. 可用不同模式 5. 在许多领域逐步取代HPLC
第四十页，本课件共有103页
毛细管电泳的分类及主要应用方向
按分离机理分：
毛细管区带电泳（CZE）
第十五页，本课件共有103页
在核酸/核苷酸分析中的应用
核酸、基因疫苗的质量控制 碱基、核苷和核苷酸的分析
纯度检测、片段收集和微量制备
PCR产物分析和dsDNA分析
蛋白质-DNA相互作用测定
基因突变测定 基因表达测定
DNA序列测定(CEQ2000XL)
第三十二页，本课件共有103页
电渗（electroosmotic flow ,EOF）
电渗流是一种液体相对于带电的管壁移动的现 象。
在毛细管电泳里在所指的电渗是：在高电压下， 溶液中的正电荷与毛细管管壁表面的负电荷之 间作用，引起流体朝负极方向运动的现象。
和电泳淌度相似，电渗淌度（ eo ）可表 示为：
毛细管电泳中的zeta电势
第一种：毛细管壁上的zeta电势
熔硅毛细管表面上的zeta电势正比于它表面上的 电荷数与对离子层厚度的乘积，但电荷数和对离子 层厚度又会受到对离子的性质、缓冲液的pH、缓冲 液中阳离子和熔硅基表面间的平衡等因素的影响。
对于熔硅或聚四氟乙烯材质的毛细管，管壁
上的zeta电势是毛细管电泳中的一个重要参数，对
毛细管电泳与平板凝胶电泳的比较
检测器选择 定量 自动化 分辨率
毛细管电泳 多
与 HPLC 相当 容易 高
平板凝胶电泳 少
困难 困难
低
第七页，本课件共有103页
毛细管电泳与HPLC的比较
相同之处：
1. 快速高效分离技术 2. 可定量 3. 全自动化 4. 可用不同模式 5. 在许多领域逐步取代HPLC
第四十页，本课件共有103页
毛细管电泳的分类及主要应用方向
按分离机理分：
毛细管区带电泳（CZE）
高效毛细管电泳技术30页PPT
高效毛细管电泳技术
16、自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事， 只想现 在的事 。现在 有成就 ，以后 才能更 辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的 人只能 引为烧 身，只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
ห้องสมุดไป่ตู้
16、自己选择的路、跪着也要把它走 完。 17、一般情况下)不想三年以后的事， 只想现 在的事 。现在 有成就 ，以后 才能更 辉煌。
18、敢于向黑暗宣战的人，心里必须 充满光 明。 19、学习的关键--重复。
20、懦弱的人只会裹足不前，莽撞的 人只能 引为烧 身，只 有真正 勇敢的 人才能 所向披 靡。
1、最灵繁的人也看不见自己的背脊。——非洲 2、最困难的事情就是认识自己。——希腊 3、有勇气承担命运这才是英雄好汉。——黑塞 4、与肝胆人共事，无字句处读书。——周恩来 5、阅读使人充实，会谈使人敏捷，写作使人精确。——培根
ห้องสมุดไป่ตู้
毛细管电泳和超临界流体色谱法PPT课件
CZE载体＋带电荷的胶束
属自由溶液电泳型，但可通 过加添加剂引入色谱机理。
CZE扩展的色谱型
由缓冲液、不溶于水的有机 CZE扩展的色谱型 溶剂和乳化剂构成的微乳液。
各种电泳用凝胶或其他筛分 介质。 建立pH梯度的两性电解质
CEZ载体＋液相色谱固定相
属非自由溶液电泳，含有 “分子筛”效应。
按等电点分离，属电泳型， 要求完全抑制电渗流动。
5、SFC联用技术 SFC/MS联用、SFC/NMR联用
第24页/共26页
第二节 超临界流体色谱法
第25页/共26页
谢谢您的观看！
第26页/共26页
4、分离效率与谱带展宽
n 5.54( tR )2， H Ld
W0.5
n
柱效和塔板高度，Ld为进样口到检测器的距离。
H 2D ， n Ldu , n map ELd
u
2D
2D
毛细管电泳只有纵向扩散项，时电驱动的扁平流型系统
自 热： Ed (c)1/3 1500
扩散与吸附： 2
2DLd u
属非自由溶液色谱型
含有电解质的非水体系
属自由溶液电泳型
第6页/共26页
第一节 毛细管电泳
二、毛细管电泳的理论基础
1、电泳和电泳淌度
uep mepE
E为电场强度；mep为溶质的淌度（溶质在给予缓冲液
中单位时间和单位电场强度下移动的距离）。
mep
ez i 4h
e和h分别为介质的介电常数和黏度，zi是粒子的Zeta 电势，Zeta电势和粒子的表面电荷成正比，和粒子分
第一类TC＜190℃ CO2、乙烷、丙烯等，分离热稳
第20页/共26页
第二节 超临界流体色谱法
属自由溶液电泳型，但可通 过加添加剂引入色谱机理。
CZE扩展的色谱型
由缓冲液、不溶于水的有机 CZE扩展的色谱型 溶剂和乳化剂构成的微乳液。
各种电泳用凝胶或其他筛分 介质。 建立pH梯度的两性电解质
CEZ载体＋液相色谱固定相
属非自由溶液电泳，含有 “分子筛”效应。
按等电点分离，属电泳型， 要求完全抑制电渗流动。
5、SFC联用技术 SFC/MS联用、SFC/NMR联用
第24页/共26页
第二节 超临界流体色谱法
第25页/共26页
谢谢您的观看！
第26页/共26页
4、分离效率与谱带展宽
n 5.54( tR )2， H Ld
W0.5
n
柱效和塔板高度，Ld为进样口到检测器的距离。
H 2D ， n Ldu , n map ELd
u
2D
2D
毛细管电泳只有纵向扩散项，时电驱动的扁平流型系统
自 热： Ed (c)1/3 1500
扩散与吸附： 2
2DLd u
属非自由溶液色谱型
含有电解质的非水体系
属自由溶液电泳型
第6页/共26页
第一节 毛细管电泳
二、毛细管电泳的理论基础
1、电泳和电泳淌度
uep mepE
E为电场强度；mep为溶质的淌度（溶质在给予缓冲液
中单位时间和单位电场强度下移动的距离）。
mep
ez i 4h
e和h分别为介质的介电常数和黏度，zi是粒子的Zeta 电势，Zeta电势和粒子的表面电荷成正比，和粒子分
第一类TC＜190℃ CO2、乙烷、丙烯等，分离热稳
第20页/共26页
第二节 超临界流体色谱法
毛细管电泳课件
一、离子分析 阳离子
阴离子
高效毛细管电泳在药物研发中的应用
二、手性化合物分析
手性药物的对映体在生物体内因 为立体选择性，将作为不同的分 子加以识别。导致具有各自的药 理活性和毒性。
例如：R-反应停是安眠药，S-式 致胎儿畸形；
常用手性选择剂：环糊精及其衍生 物；手性冠醚；手性表面活性剂 （氨基酸衍生物、胆酸钠、牛磺脱 氧胆酸及其钠盐、低聚糖等天然手 性表面活性剂）
高效毛细管电泳在药物研发中的应用
四、临床应用和食品安全检查
毛细管电泳法测定微量清蛋白/肌酐( Alb/Cr) 比值，用于诊断糖尿病肾病
[2] 赵绍林, 吴惠毅, 吉艳等,高效毛细管电泳法同时测定尿液清蛋白和肌酐 [J].临床检验杂志,2007,25(5):338-340.
高效毛细管电泳在药物研发中的应用
类型 紫外-可见 荧光 激光诱导荧光 电导
检测限/mol 10-13～10-15 10-15～10-17 10-18～10-20 10-18～10-19
特点 加二极管阵列，光谱信息 灵敏度高，样品需衍生 灵敏度极高，样品需衍生 离子灵敏，需专用的装置；高效ຫໍສະໝຸດ 细管电泳特点及分离模式高效
快速
微量
自动化 低成本
细菌脂多糖和蛋白聚糖测定
毛细管电泳测定Escherichia coli K4 脂多糖（LPS）
[1].Odile FR, Donatella C, Mario DR. High-performance CE of Escherichia coli K4 cell surface polysaccharides [J]. Electrophoresis 2009, 30:3877–3883. [2]. Nicola Volpi, Francesca M , Jiraporn S. Electrophoresis for the analysis of heparinpurity and quality[J]. Electrophoresis,2012, 33:1531–1537.
毛细管电泳原理及分析策略课件
以上内容涵盖了毛细 管电泳的基本原理和 分析策略课件的部分 内容。在实际应用中， 还需根据具体需求和 样品特性选择合适的 分离模式和分析方法。
CATALOGUE
毛细管电泳分析方法
毛细管电泳的定性分析方法
峰识别法
紫外可见光谱法
质谱联用法
毛细管电泳的定量分析方法
01
02
外标法
内标法
03 标准加入法
数据处理 原始数据的获取，通过电泳仪器获取原始电泳图谱数据。
数据预处理，包括基线校正、峰识别、去噪等步骤，以提高数据质量。
毛细管电泳实验数据处理和分析方法
毛细管电泳实验数据处理和分析方法
01
02
03
04
实验结果展示和讨论
结果展示 通过图表、电泳图谱等方式清晰展示实验结果，包括分离效果、组分定量等信息。
毛细管电泳原理及 分析策略课件
contents
目录
• 毛细管电泳简介 • 毛细管电泳原理 • 毛细管电泳分析方法 • 毛细管电泳在分析化学中的应用策略 • 毛细管电泳实验技术 • 前沿进展与未来展望
CATALOGUE
毛细管电泳简介
毛细管电泳的定义和发展历程
定义
发展历程
毛细管电泳的技术特点
01
环境污染物分析策略
重金属离子分析
毛细管电泳可用于环境水样中重金属离子的分离和检测，为环境监测和污染治理 提供依据。
有机污染物分析
采用毛细管电泳-质谱联用技术，可实现环境中有机污染物的痕量分析和结构鉴 定，提高环境分析的准确性和灵敏度。
CATALOGUE
毛细管电泳实验技术
毛细管电泳实验准备和操作技巧
对比不同实验条件下的结果，展示实验条件对分离效果和定量的影响。
毛细管电泳和毛细管电色谱ppt课件
像高效液相色谱，可以分别不带电荷的物质。
像毛细管电泳法，不需求压力泵系统的情况 下，提供了微量体积试样溶液的高效分别 经过电渗流泵，而不是经过机械保送流动相 经过固定相的。明显地简化了保送体系。
电渗泵产生的是塞子式流动轮廓，而不是流 体动力学轮廓，因此毛细管电色谱的分别柱 效比高效液相色谱法高。
在典型的毛细管电泳分别中，溶质的分别基于溶质间电泳 速率的差别。电渗流的速率绝对值普通大于粒子的电泳速率， 并有效地成为毛细管电泳的驱动力。溶质从毛细管的正极端 进样，带正电的粒子最先流出，中性粒子次之，带负电的粒 子在中性粒子之后流出。溶质依次经过检测器，得到与色谱 图极为类似的电泳分别图谱。
21.1.5. 分别原理
21.3.1. 毛细管区带电泳〔capillary zone electrophoresis; CZE〕 21.3.1.1. 根本操作条件
毛细管区带电泳也称为毛细管自在溶液区带电泳，是毛细 管电泳最根本、也是运用最广的一种操作方式。其分别原理是 基于样品组分荷质比的差别。
需求控制的操作变量主要是电压、缓冲液浓度、pH值和添 加剂等。
填充柱毛细管电色谱 基于填充柱的电色 谱是各种电泳中最新出现的一种技术。 它是利用电浸透驱动极性溶剂经过反相 高效液相色谱毛细管柱，利用试样在两 相的分配进展分别。
胶束电动毛细管色谱 是在缓冲溶液中参 与浓度高于胶束临界浓度的外表活性剂。 胶束相在分别中起到了准固定相的作用，
毛细管电动色谱的优点
21.3.5. 其他毛细管电泳方式
• 微乳电动毛细管色谱〔MEECC〕 • 毛细管等点聚焦〔CIEF〕 • 毛细管等速电泳〔CITP〕
21.4. CEC运用〔离子分析、药物分析、氨基酸 和蛋白质分析等〕
反相CEC分别14种火药及其降解成分
像毛细管电泳法，不需求压力泵系统的情况 下，提供了微量体积试样溶液的高效分别 经过电渗流泵，而不是经过机械保送流动相 经过固定相的。明显地简化了保送体系。
电渗泵产生的是塞子式流动轮廓，而不是流 体动力学轮廓，因此毛细管电色谱的分别柱 效比高效液相色谱法高。
在典型的毛细管电泳分别中，溶质的分别基于溶质间电泳 速率的差别。电渗流的速率绝对值普通大于粒子的电泳速率， 并有效地成为毛细管电泳的驱动力。溶质从毛细管的正极端 进样，带正电的粒子最先流出，中性粒子次之，带负电的粒 子在中性粒子之后流出。溶质依次经过检测器，得到与色谱 图极为类似的电泳分别图谱。
21.1.5. 分别原理
21.3.1. 毛细管区带电泳〔capillary zone electrophoresis; CZE〕 21.3.1.1. 根本操作条件
毛细管区带电泳也称为毛细管自在溶液区带电泳，是毛细 管电泳最根本、也是运用最广的一种操作方式。其分别原理是 基于样品组分荷质比的差别。
需求控制的操作变量主要是电压、缓冲液浓度、pH值和添 加剂等。
填充柱毛细管电色谱 基于填充柱的电色 谱是各种电泳中最新出现的一种技术。 它是利用电浸透驱动极性溶剂经过反相 高效液相色谱毛细管柱，利用试样在两 相的分配进展分别。
胶束电动毛细管色谱 是在缓冲溶液中参 与浓度高于胶束临界浓度的外表活性剂。 胶束相在分别中起到了准固定相的作用，
毛细管电动色谱的优点
21.3.5. 其他毛细管电泳方式
• 微乳电动毛细管色谱〔MEECC〕 • 毛细管等点聚焦〔CIEF〕 • 毛细管等速电泳〔CITP〕
21.4. CEC运用〔离子分析、药物分析、氨基酸 和蛋白质分析等〕
反相CEC分别14种火药及其降解成分