常用的细菌实验
微生物细菌实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解细菌的基本形态结构。
2. 掌握细菌的分离、纯化和鉴定方法。
3. 学习细菌生理生化反应的检测原理和应用。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，具有典型的原核细胞结构。
通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以鉴定细菌的种类。
三、实验材料与仪器1. 材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌等纯菌株。
2. 仪器：显微镜、接种环、培养皿、酒精灯、无菌水、生理盐水、革兰氏染色液、生理生化试剂等。
四、实验方法1. 细菌形态观察- 将细菌涂布在载玻片上，进行革兰氏染色。
- 使用显微镜观察细菌的形态、大小、染色性等特征。
2. 细菌分离与纯化- 将纯菌株接种于琼脂平板，进行划线分离。
- 观察菌落特征，挑选单菌落进行纯化。
3. 细菌生理生化反应检测- 进行糖发酵试验、吲哚试验、甲基红试验、V-P试验等。
- 观察反应结果，判断细菌的生理生化特性。
五、实验结果与分析1. 细菌形态观察- 大肠杆菌：革兰氏阴性，呈杆状，两端钝圆。
- 金黄色葡萄球菌：革兰氏阳性，呈球形，呈葡萄串状排列。
- 肺炎克雷伯菌：革兰氏阴性，呈短杆状，两端钝圆。
2. 细菌分离与纯化- 划线分离后，观察到单菌落形成。
3. 细菌生理生化反应检测- 糖发酵试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均能发酵葡萄糖。
- 吲哚试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- 甲基红试验：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌均呈阳性。
- V-P试验：金黄色葡萄球菌呈阳性，大肠杆菌、肺炎克雷伯菌均呈阴性。
六、讨论与分析1. 通过观察细菌的形态、染色和生理生化反应，可以初步鉴定细菌的种类。
2. 细菌的生理生化反应具有特异性，可用于细菌的鉴定和分类。
3. 在实际应用中，细菌的分离、纯化和鉴定是微生物学研究和临床诊断的重要环节。
七、实验结论1. 通过本次实验，我们掌握了细菌的基本形态结构、分离、纯化和鉴定方法。
2. 我们学会了利用生理生化反应进行细菌的鉴定和分类。
3. 本实验有助于提高我们对微生物学基本理论的认识和应用能力。
细菌斜面接种实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握细菌斜面接种的基本操作方法。
2. 熟悉斜面培养基的制作和保存方法。
3. 学习通过斜面接种法分离纯化细菌。
4. 了解细菌在不同培养基上的生长特性。
二、实验原理斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，通过将细菌接种到含有营养成分的斜面培养基上，使细菌在适宜的环境中繁殖生长。
斜面培养基通常由琼脂、蛋白胨、牛肉膏等成分组成，提供细菌生长所需的碳源、氮源、生长因子等。
三、实验材料1. 细菌样品：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
2. 斜面培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂斜面。
3. 实验器材：接种环、酒精灯、无菌试管、无菌培养皿、无菌水、记号笔等。
四、实验步骤1. 斜面培养基制备- 称取25g牛肉膏蛋白胨琼脂，加入100ml蒸馏水，加热溶解。
- 将溶液煮沸10分钟，以去除杂菌。
- 待溶液冷却至50-60℃时，加入无菌水调整pH至7.0-7.2。
- 将溶液分装至无菌试管中，每管10ml。
- 将试管置于高压蒸汽灭菌锅中，121℃灭菌15分钟。
- 灭菌后，待培养基冷却至45-50℃时，将试管倾斜45°，使培养基沿试管壁流下，形成斜面。
- 待培养基凝固后，将试管倒置，置于无菌环境中保存。
2. 斜面接种- 将待接种的细菌样品接种环在酒精灯上灼烧灭菌。
- 待接种环冷却后，挑取适量细菌样品，沿斜面培养基壁涂抹。
- 重复上述步骤，接种第二管斜面培养基。
3. 培养- 将接种后的斜面培养基放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
4. 观察与记录- 观察斜面培养基上的细菌生长情况，记录菌落形态、颜色等特征。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上生长良好，形成金黄色、表面光滑、边缘整齐的菌落。
2. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上生长良好，形成白色、表面光滑、边缘整齐的菌落。
六、实验讨论1. 斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，适用于分离纯化细菌。
2. 在斜面接种过程中，无菌操作至关重要，避免杂菌污染。
细菌革兰氏染色实验报告
细菌革兰氏染色实验报告实验目的，通过革兰氏染色技术，观察细菌的形态特征，进一步了解细菌的分类和结构。
实验原理，革兰氏染色是一种常用的细菌染色技术，通过革兰氏阳性和阴性细菌在染色过程中的不同反应，来区分细菌的特性。
革兰氏阳性细菌在染色后呈紫色，而革兰氏阴性细菌在染色后呈粉红色。
实验步骤：1. 取一架无菌玻片，用无菌针头沾取待检测的细菌样本，涂抹在玻片上形成薄而均匀的细菌涂片。
2. 将玻片在火焰中加热灭菌，使细菌附着在玻片上。
3. 用染色剂革兰氏紫涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
4. 用碘液滴在玻片上，静置1分钟后用水冲洗干净。
5. 用去色剂酒精滴在玻片上，静置数秒后用水冲洗干净。
6. 用染色剂粉红色涂染玻片，静置1分钟后用水冲洗干净。
7. 用纸巾吸干玻片上的水分，然后在玻片上滴一滴甘油作为封片剂。
8. 将盖玻片贴在涂片上，用显微镜观察细菌的染色情况。
实验结果及分析：经过革兰氏染色处理后，观察到样本中细菌的染色情况。
根据染色结果，可以初步判断细菌的分类。
革兰氏阳性细菌呈紫色，而革兰氏阴性细菌呈粉红色。
通过观察细菌的形态特征，可以进一步了解细菌的分类和结构。
实验结论：通过本次实验，我们成功使用了革兰氏染色技术，观察到了细菌的染色情况，并初步判断了细菌的分类。
革兰氏染色技术是一种简单而有效的细菌分类方法，对于细菌学研究具有重要意义。
总结：细菌革兰氏染色实验是细菌学实验中的基础实验，通过本次实验，我们深入了解了革兰氏染色技术的原理和步骤，掌握了正确的实验操作方法。
通过观察细菌的染色情况，我们对细菌的分类和结构有了更深入的认识，为今后的细菌学研究奠定了基础。
在今后的实验中，我们将继续深入学习细菌学知识，不断提高实验技能，为科学研究和实验应用做出更大的贡献。
细菌革兰染色实验报告
细菌革兰染色实验报告细菌革兰染色实验报告细菌革兰染色是一种常用的细菌分类和鉴定方法，通过染色技术可以将细菌分为革兰阳性和革兰阴性两类。
本次实验旨在通过细菌革兰染色方法对不同细菌样本进行染色，并观察染色结果，从而了解细菌的结构和特性。
实验材料和方法：1. 细菌培养物：本次实验使用了两种不同的细菌培养物，分别是革兰阳性细菌培养物和革兰阴性细菌培养物。
2. 革兰染色试剂：包括革兰染色碱液、革兰染色酮液、碘液和洗涤液。
3. 实验器材：玻璃片、培养皿、显微镜等。
实验步骤：1. 取一小滴革兰阳性细菌培养物，涂抹在玻璃片上，使其均匀分布。
2. 用火焰将玻璃片加热，使细菌固定在玻璃片上。
3. 滴加革兰染色碱液，静置片刻，然后用洗涤液洗净。
4. 滴加革兰染色酮液，静置片刻，然后用洗涤液洗净。
5. 滴加碘液，静置片刻，然后用洗涤液洗净。
6. 用洗涤液洗净后，将玻璃片在显微镜下观察。
实验结果：在显微镜下观察，革兰阳性细菌呈现紫色或深蓝色，而革兰阴性细菌呈现红色或粉红色。
这是因为革兰阳性细菌具有较厚的胞壁，可以保留革兰染色碱液和革兰染色酮液的颜色，而革兰阴性细菌的胞壁较薄，无法保留这两种试剂的颜色。
通过观察细菌的染色结果，我们可以进一步了解细菌的结构和特性。
革兰阳性细菌的厚胞壁使其在抗生素的作用下更加耐受，而革兰阴性细菌的薄胞壁使其对抗生素更加敏感。
这也是为什么在临床上，对于感染性疾病的治疗，需要根据细菌的革兰染色结果来选择合适的抗生素。
此外，细菌的革兰染色结果还可以帮助鉴定细菌的种类。
革兰阳性细菌主要包括葡萄球菌、链球菌等，而革兰阴性细菌主要包括大肠杆菌、沙门氏菌等。
根据不同的细菌种类，我们可以进一步了解其生长条件、致病性以及对人体的影响。
细菌革兰染色实验是一种简单而有效的细菌分类和鉴定方法，通过观察细菌的染色结果，我们可以了解细菌的结构、特性以及种类。
这对于临床医学、食品安全等领域都具有重要意义。
在今后的研究和实践中，我们可以进一步探索细菌革兰染色方法的应用，以及与其他检测技术的结合，提高细菌鉴定的准确性和效率。
微生实验报告 2012.12.实验十二、细菌常用生理生化反应实验结果观察测定
微生实验报告姓名：王晶晖专业年级：2011级生物技术学号：040312011032实验十二细菌常用生理生化反应实验结果观察一、结果观察1、葡萄糖发酵实验直接观察试管：试管变黄者为葡萄糖发酵阳性菌，不变者为阴性菌。
2、V. P. 反应和甲基红试验:将培养好的液体培养基分装于两个干净的小试管中,在一管中滴入2-3滴甲基红试剂, 溶液变红的为甲基红阳性菌,不变的为甲基红阴性菌. 在另一管中加入V. P. 试剂,在37℃保温15分钟, 变红者为阳性菌,不变者为阴性菌。
3、吲哚实验在培养好的液体培养基中加入1厘米高的乙醚,振荡,静置分层,加入2-4滴吲哚试剂,在掖面交界出现红色者为吲哚反应阳性菌,不变者为阴性菌。
4、硝酸盐还原实验在点滴板上滴入革里斯试剂A液和B液，如过溶液变红说明有亚硝酸盐，为硝酸盐还原阳性菌，如果不变色需要再倒出部分培养基在另外的小孔中再滴如耳苯胺试剂，如果变蓝，说明此菌为阴性菌；如果不变色，说明此菌为硝酸盐还原强阳性菌。
5、柠檬酸盐实验直接观察斜面，斜面变兰色者为柠檬酸盐利用阳性菌，不变者为阴性菌。
6、明胶水解向培养好的明胶培养基中加入酸性氯化汞或三氯乙酸溶液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为明胶水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌。
7、淀粉水解实验向培养好的淀粉培养基平板上加入碘液，并铺满平板，菌落周围出现透明圈的菌为淀粉水解阳性菌，没有透明圈的菌为阴性菌。
8、硫化氢产生实验直接观察培养好的培养基，出现黑色沉淀者为阳性菌，不变者为阴性菌。
二、实验结果1、葡萄糖发酵实验阳性：大肠杆菌（半固体培养基变黄，左图）阴性：恶臭假单胞菌（保持紫色不变，右图）2、V. P. 反应和甲基红试验：（1）V．P．实验阳性：大肠杆菌（加入40%的KOH溶液10～20滴，再加入等量的α-萘酚溶液，放入37℃恒温箱中保温15～30分钟，培养液出现红色，右图）阴性：产气杆菌（同上操作，培养基不变色，左图）（2）甲基红试验阳性：产气杆菌（加入 M．R．试剂3-4滴后变红，左图）阴性：大肠杆菌（加入 M．R．试剂3-4滴后不变色，右图）3、吲哚实验阳性：大肠杆菌（乙醚层呈现玫瑰红色，右图）阴性：产气杆菌（左图）4、硝酸盐还原实验阳性：大肠杆菌（滴入革里斯试剂后变红，左下图）阴性：恶臭假单胞菌（滴入二苯胺试剂后变蓝，右上图）5、柠檬酸盐利用实验阳性：产气杆菌（溴麝香草酚蓝的斜面呈蓝色，右图）阴性：大肠杆菌（斜面培养基不变色，左图）6、明胶水解实验阴性：大肠杆菌（菌落周围没有出现透明圈，上图）7、淀粉水解实验阳性：枯草杆菌（加入碘液，菌落周围出现透明圈，下图）阴性：大肠杆菌（菌落周围没有出现透明圈，上图）8、产硫化氢实验阳性：变形杆菌（出现黑色沉淀，左图）阴性：大肠杆菌（未出现黑色沉淀，右图）思考题1、你的实验结果与实验预期是否相同？如果不同试分析原因。
细菌浊度实验方法
细菌浊度实验方法全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：细菌浊度实验方法是一种用于测定水样中细菌浓度的常见实验方法。
在水质监测和研究中，细菌浊度实验方法被广泛应用，它能够快速准确地测量水样中细菌的数量，为水质评估和控制提供重要数据。
本文将详细介绍细菌浊度实验方法的原理、步骤及注意事项。
一、细菌浊度实验方法的原理细菌浊度实验方法利用了细菌在水样中产生的浑浊度来间接反映细菌的数量。
细菌在水样中繁殖会形成一种混浊的胞外物质，使水样的透明度下降，产生浑浊度。
通过测量水样的光学密度（OD值）或浑浊度值，可以计算出水样中的细菌数量。
1. 样品采集：首先需要采集水样，注意保持样品的卫生和无菌。
2. 样品预处理：如果水样中含有固体颗粒或悬浮物，需对样品进行预处理，如过滤或离心。
3. 制备标准曲线：首先需要准备一系列不同浓度的细菌标准溶液，然后根据标准曲线测量其OD值或浑浊度值。
4. 处理样品：将处理后的水样与细菌培养基混合，使细菌在样品中繁殖。
5. 测量浑浊度：使用光学密度计或浊度计测量水样的OD值或浑浊度值。
6. 计算细菌数量：根据水样的OD值或浑浊度值与标准曲线的对照，计算出水样中细菌的数量。
7. 结果分析：根据实验结果评估水样中细菌的浓度，为水质评估提供数据。
1. 样品处理要求严格，避免污染和外源细菌的干扰。
2. 操作过程中需严格遵守实验室操作规范，保证实验数据的准确性和可靠性。
3. 标准曲线制备应该注意标准溶液的配制精确和标定操作的准确性。
4. 测量时需注意仪器的校准和环境条件的控制，以确保测量结果的准确性。
5. 实验结果应该与其他方法相互验证，提高数据的可信度。
第二篇示例：细菌浊度实验是一种用于检测水质净化效果的常见方法。
通过测量水样中细菌的数量来判断水质的好坏，从而评估不同处理方法的清洁效果。
这种方法可以帮助我们了解水质的卫生状况，为改善水环境提供科学依据。
细菌浊度实验的基本原理是利用细菌的生长特性，通过在富含营养物质的培养基上培养细菌，并观察细菌的数量和种类来评估水样的卫生情况。
实验六、细菌分解代谢系列实验
3、明胶液化试验
明胶是一种动物蛋白。明胶培养基本身低于 20℃时凝固，高于25℃则自行液化。某些细 菌能够产生蛋白酶将明胶水解成小分子物质， 因此培养后的培养基即使在低于20℃的温度 下，明胶也不再凝固，而由原来的固体状态 转化为液体状态。
三、操作步骤：
（一）淀粉水解试验：
(1)准备淀粉培养基平板：将熔化后冷却至50℃左右的淀粉培养基 倒入无菌平皿中，待凝固后制成平板。
（二）油脂水解试验：
（1）将装有油脂培养基的三角瓶置于沸水浴中 熔化，取出并充分振荡（使油脂均匀分布）， 再倾入无菌平皿中，待凝固制成平板。
（2）划线接种于同一平皿的两边(其中一种是 金黄色葡萄球菌作为对照菌)。置于37℃恒温箱 培养24h，取出后观察平板底层长菌的地方， 如出现红色斑点，即说明脂肪被水解了，此反 应为正反应。
（三）明胶液化试验：
（1）接种：用穿刺接种法接种大肠杆菌或产气肠杆菌 于明胶培养基中。
（2）培养：放20℃恒温箱中培养48h。若细菌在20℃下 不长，则应放在最适温度下培养。 （3）观察结果：观察培养基有无液化情况及液化后的 形状。 因明胶在低于20℃时凝固，高于25℃时自行液化，若 是在高于20℃下培养的细菌，观察时应放在冰浴中观 察，若明被被细菌液化，即使在低温下明胶也不会再 凝固。
二、实验原理
1、乙酰甲基甲醇试验 a、实验目的：检测细菌分解葡萄糖的代谢产物 b、原理：某些细菌在糖代谢过程中，分解葡萄糖 产生丙酮酸，丙酮酸脱羧通过缩合和脱羧后转变 成乙酰甲基甲醇，然后被还原成2，3—丁二醇。 乙酰甲基甲醇在碱性条件下，被空气中的氧气氧 化成为二乙酰，二乙酰再与蛋白胨中的精氨酸的 胍基作用生成红色化合物，此为乙酰甲级甲醇反 应。在试管中加入α—萘酚时，可促进反应出现。
细菌革兰氏染色的实验报告
细菌革兰氏染色的实验报告细菌革兰氏染色的实验报告一、引言细菌革兰氏染色是一种常用的实验方法，用于区分细菌的结构和特性。
通过革兰氏染色，可以将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性两类，从而在临床诊断和疾病治疗中起到重要的作用。
本次实验旨在探究细菌革兰氏染色的原理和操作方法，并通过观察染色结果，进一步了解细菌的特性。
二、实验材料与方法1. 实验材料：- 细菌培养物：选择两种细菌菌株，一种为革兰氏阳性细菌，另一种为革兰氏阴性细菌。
- 革兰氏染色试剂：包括紫晶染液、碘液、脱色剂和红色染色液。
- 玻璃片和显微镜片：用于制作细菌涂片和观察染色结果。
2. 实验方法：- 步骤一：取两种不同的细菌培养物，分别在玻璃片上制作细菌涂片。
- 步骤二：将制作好的细菌涂片分别加入紫晶染液，静置5分钟。
- 步骤三：用蒸馏水冲洗玻璃片，使其清洁。
- 步骤四：加入碘液，静置1分钟。
- 步骤五：用脱色剂冲洗玻璃片，直到无色流出。
- 步骤六：加入红色染色液，静置1分钟。
- 步骤七：用蒸馏水冲洗玻璃片，使其清洁。
- 步骤八：将玻璃片放在显微镜片上，用显微镜观察细菌染色结果。
三、实验结果与讨论通过观察细菌染色结果，可以清晰地看到两种细菌的差异。
革兰氏阳性细菌在染色后呈紫色或蓝色，而革兰氏阴性细菌则呈红色。
这是因为细菌细胞壁的结构不同导致的。
革兰氏阳性细菌具有较厚的层状细胞壁，由多层的胞外多糖和蛋白质组成。
在染色过程中，细菌细胞壁的多糖会与紫晶染液结合，形成复合物。
而碘液的加入会使复合物更加稳定，不易被脱色剂去除。
因此，革兰氏阳性细菌在染色后仍保持紫色或蓝色。
相反，革兰氏阴性细菌细胞壁较薄，主要由一个薄层的胞外脂多糖组成。
在染色过程中，细菌细胞壁的脂多糖无法与紫晶染液结合，因此无法形成复合物。
碘液的加入也无法稳定脂多糖，使其被脱色剂去除。
因此，革兰氏阴性细菌在染色后会被红色染色液覆盖，呈现红色。
细菌革兰氏染色的结果可以帮助我们快速区分细菌的类型，从而指导临床的诊断和治疗。
革兰染色实验报告
革兰染色实验报告引言：细菌的分类和鉴定对于研究微生物多样性和疾病的发生机制具有重要意义。
革兰染色是一种常用的细菌分类和鉴定方法，可将细菌分为革兰阳性和革兰阴性两类。
本实验旨在通过革兰染色实验，探索细菌革兰染色后的显微观察结果，以及对结果的分析和判断。
实验材料与方法：实验所需材料包括：试管、细菌培养物、无菌吸管、革兰染色剂、洗涤剂、显微镜等。
1. 取一株经过培养的细菌，将细菌悬浮液放入试管中。
2. 轻轻将细菌悬浮液用唧筒吸取至1/3试管容积。
3. 将细菌悬浮液与革兰染色剂混合均匀，静置1分钟。
4. 加入洗涤剂，用蒸馏水冲洗2-3次，每次冲洗后用纸巾吸干。
5. 将试管反转放在显微镜物镜下，调节放大倍率至1000倍，进行观察和记录。
实验结果：通过显微镜观察，我们可见到染色后细菌细胞的显色情况。
1. 革兰阳性细菌：革兰阳性细菌在革兰染色后呈现紫色或蓝色，细胞和孢子结构清晰可见。
典型的革兰阳性细菌有葡萄球菌、链球菌等。
在实验中，我们观察到一个球形细菌，在显微镜下呈现出深紫色，细胞整齐排列，形状规则。
这一结果表明该细菌为革兰阳性。
2. 革兰阴性细菌：革兰阴性细菌在革兰染色后呈现粉红色或无颜色，细胞结构不明显。
典型的革兰阴性细菌有大肠杆菌、沙门氏菌等。
在实验中，我们观察到一个长条状细菌，在显微镜下呈现出粉红色，细胞形状参差不齐，细胞壁不明显。
这一结果表明该细菌为革兰阴性。
结果分析与讨论：革兰染色作为一种常用的实验方法，其原理是利用细菌细胞壁的结构差异对其进行分类。
革兰阳性细菌具有较厚的细胞壁，可以吸收和保持革兰染色剂的结晶染色，呈现紫色或蓝色。
革兰阴性细菌则具有较薄的细胞壁，难以吸收和保持革兰染色剂，因此呈现粉红色或无颜色。
根据实验结果和观察所得，我们可以初步判断细菌的革兰染色结果。
然而，仅凭一次观察可能存在误差。
为得到更准确的结果和判断，建议在实验中进行多次观察并与其他分类和鉴定方法相结合，如形态学观察、生化试验等。
细菌的分离培养实验报告
分离培养实验是一种常见的微生物学实验，旨在从样品中分离出单独的细菌株并在培养基中培养它们。
这种实验通常在医学、食品安全和环境监测等领域中使用。
要进行分离培养实验，首先需要准备样品和培养基。
样品可以是液体、固体或气体，通常是从环境中收集的。
培养基是一种特殊的基质，其中添加了必要的营养物质，可以满足细菌生长的需要。
分离培养实验的步骤如下：
1 准备样品：从样品中收集尽量多的微生物，通常是通过悬浮、切
片或气液分离方法来获得。
2 分离细菌：通常使用分离培养基，其中含有一种叫做营养不全的
培养基，可以限制细菌的生长。
通过在分离培养基中制备细菌悬浮液或细菌膜，可以分离出单独的细菌株。
3 在培养基中培养细菌：将分离出的细菌接种到适当的培养基中，
然后在适当的条件下培养。
4 识别细菌：通过对细菌的形态、生长和代谢特征进行分析，可以
确定细菌的种类和特性。
常用的方法包括显微镜观察、生理生化测试、免疫学方法和分子生物学方法。
分离培养实验在微生物学中非常重要，因为它可以为进一步研究细菌的生理、生化和遗传特性提供基础。
此外，分离培养实验也可以用来鉴定病原体、检测食品中的有害微生物、监测环境中的细菌污染等。
在实验报告中，应该详细记录分离培养实验的全部过程，包括样
品的来源、分离方法、培养条件、识别方法等。
同时，还应该记录实验结果，包括分离出的细菌株数量、识别结果等。
最后，应当对实验进行总结，并在可能的情况下提出建议或改进建议。
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常用的细菌试验
1. 细菌抹片、制备及染色
细菌细胞微小，无色而半透明，原样直接在普通光学显微镜下观察，只能大致见其外貌；制成抹片和染色后，则能较清楚地显示其形态和构造，也可以根据不同的染色反应，作为鉴别细菌的一种依据。
1.1细菌抹片的制备
1.1.1玻片准备：载玻片应清晰透明，洁净而无油渍，滴上水后，能均匀展开，附着性好。
如有残余油迹，可按下列方法处理：
1.1.1.1滴上95%的酒精2~3滴，用洁净纱布揩擦，然后在酒精灯上轻轻通过几次。
1.1.1.2若上法仍未能去除油渍，可再滴1~2滴冰醋酸，用纱布擦净，在在酒精灯上轻轻通过。
1.1.2抹片：所用材料情况不同，抹片方法亦有差异。
1.1.
2.1液体材料（如液体培养物、血液、渗出液、乳汁）可直接用灭菌接种环取一环材料于玻片的中央均匀的涂成适当大小的薄层。
1.1.
2.2不是液体材料（如菌落、脓、粪便等）则应先用灭菌接种环取少量生理盐水或蒸馏水，置于玻片中央，然后再用灭菌接种环取少量材料，在液滴中混合，均匀涂布成适当大小的薄层。
1.1.
2.3组织脏器材料，先用镊子夹持局部。
然后以灭菌或洁净剪刀取一小块，夹出后将其新鲜切面在玻片上压印或涂成一薄片。
1.1.
2.4如有多个样品同时需要制成抹片，只要染色方法相同，亦可以在同一张玻片上有秩序地排好，做多点涂抹，或者先用蜡笔在玻片上划分成若干小方格，每方格涂抹一种样品，需要保留的标本片，应贴标签，注明菌名、材料、染色方法和制片日期等。
1.1.3干燥：上述涂片，应让其自然干燥。
1.1.4固定：有两类固定方法
1.1.4.1火焰固定：将干燥好的抹片，是涂抹面向上，以其背面在酒精灯上来回通过数次，略做加热（但不能太热，以不烫手为度）进行固定。
1.1.4.2化学固定：血液、组织、脏器等抹片要做姬姆萨染色时，不用火焰固定，而应用甲醇固定，可将已干燥的抹片浸入甲醇中2~3分钟，取出晾干：或者在抹片上滴加数滴甲醇使其作用2~3分钟，自然挥发干燥，抹片如作瑞氏染色，则不必先作固定。
染料中含有甲醇，可以达到固定的目的。
1.2常用的染色方法
常用的细菌染色方法，主要有两种类型：
1.2.1简单染色法：只应用一种染料进行染色的方法，如美兰染色法。
1.2.2复染色法：应用两种或两种以上的染料或再加媒染料进行染色的方法。
如革兰氏染色、抗酸性染色法、瑞特氏染色法和姬姆萨染色法等。
1.2.2.1吕氏碱性美兰染色法：
1.2.2.1.1染液配制：美兰0.3g、95%乙醇30ml、0.01%氢氧化钾溶液100ml。
将美兰溶解于乙醇中，然后与氢氧化钾溶液混合。
1.2.2.1.2染色法：抹片在火焰上固定后，加染液于玻片上，染色3~5分钟。
水洗、吸干、镜检。
1.2.2.2瑞氏染色发
1.2.2.2.1染液配制：瑞氏染色剂粉0.1g、白甘油1.0ml、中性甲醇60.0ml。
置燃料于一个干净的乳钵中，加甘油研磨至完全细末，再加入甲醇使其溶解，溶解后盛于棕色瓶中一星期，过滤于中性的棕色瓶中，保存于暗处，该染色剂保存时间愈久，染色的色泽愈鲜。
1.2.2.2.2染色法：图片任其自然干燥；加染色液约1ml于涂片上，染色1分钟，是标本被染液中甲醇所固定；再加上与染色液等量的磷酸盐缓冲液或蒸馏水（或自来水）用口吹气，是染色液与蒸馏水充分混合，并防止染料的沉淀，经5分钟左右，使表面显金属的闪光；冲洗、吸干、镜检。
注：磷酸二氢钾缓冲液：磷酸二氢钾6.63g、无水磷酸钠2.56g、蒸馏水100ml。
1.2.2.3吉姆萨氏染色法
1.2.2.3.1染液配制：取吉姆萨氏染色剂粉末0.6g，加入甘油50ml，置于55~60℃温度中1.5~2小时后，加入甲醇50ml，静置一日以上，过滤后即可应用。
1.2.2.3.2染色法：加姬姆萨氏染色液10滴于10ml蒸馏水中，配成稀释的溶液，所用蒸馏水必须为中性或微碱性（必要时可加1%
碳酸钠液1滴于水中，使其变为微碱性）；抹片任其自然干燥，浸于盛有甲醇的玻缸中或滴加甲醇数滴于玻片上固定3~5分钟；于后将玻片浸入盛有染色液的染色缸中，染色30分钟或者染色数小时至24小时，过夜亦可；水洗、吸干、镜检。
1.2.2.4革兰氏染色法
1.2.2.4.1革兰氏液的配制：
1.2.2.4.1.1龙胆紫原液：龙胆紫粉末5g，加95%酒精100ml。
石炭酸龙胆紫液：龙胆紫原液10ml，5%石碳酸液90ml混合，虑过后备用。
1.2.2.4.1.2碘溶液（鲁格氏液）：碘片1g、碘化钾2g、蒸馏水300ml
现将碘化钾2g加水30ml使其溶解，再将研碎的碘片1g加入，完全溶解后再加足量的蒸馏水，使其全量为300ml。
1.2.2.4.1.3脱色液：95%酒精。
1.2.2.4.1.4稀释复红：
碱性复红原液：碱性复红粉末10g，加95%酒精100ml。
石炭酸复红液：碱性复红原液10ml，5%石炭酸液90ml混合，放置过夜后滤过，贮褐色瓶中备用。
稀释石炭酸复红液：石炭酸复红液10ml、蒸馏水90ml混合后，即为稀释复红。
1.2.2.4.2革兰氏染色法
1.2.2.4.2.1在已干燥，固定好的抹片上，滴加龙胆紫染色液，
经1~2分钟，水洗。
1.2.2.4.2.2加革兰氏碘溶液于抹片上媒染，作用1~3分钟，水洗。
1.2.2.4.2.3加95%酒精于抹片上脱色，约30秒至1分钟，水洗。
1.2.2.4.2.4加稀释碳酸复红10~30秒钟，水洗。
1.2.2.4.2.5吸干、镜检。
革兰氏阳性菌呈蓝紫色，革兰氏阴性菌呈红色。
[注]在进行各种染色时都应注意，当抹片滴上染色液后，不可以直接将剩余染液倾去，应用水连染液一起充分洗去，然后进行下一步骤，以免发生沉渣粘附，影响染色效果。
2.细菌培养
2.1培养基
常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基、和艳阳培养基。
常用培养基制备的方法与步骤：配料——溶化——测定PH值——过滤——分装——高压——无菌检验，备用。
例如麦康凯培养基的制备方法：去麦康凯琼脂粉4.9g加1000ml无离子水中混合，放置20分钟隔石棉铁丝网微火煮沸使完全溶解，10磅10分钟高压灭菌。
冷至50℃左右倾入无菌平皿内，凝固后冷藏备用。
用途：作沙门氏菌分离培养及区别大肠杆菌。
2.2分离培养法
常用的细菌分离培养法有以下几种：
2.2.1需氧菌分离培养法
2.2.1.1平板划线分离培养法：此法为常用的细菌分离法。
平板划线分离培养的方式很多，可按习惯选择应用。
其目的是为了将被检材料作适当的稀释，使细菌长成独立存在的菌落，防止形成菌苔，以便根据菌落性状进行鉴别和纯培养。
2.2.1.2斜面划线分离培养法
2.2.1.3加热分离培养法
此法适用于芽孢菌的分离培养，尤其是当芽孢菌的病料中污染有非芽孢菌时，因芽孢菌耐热，故可采用法。
其操作方法：
2.2.1.
3.1将固体被检物用生理盐水作5~10倍稀释，然后放在80摄氏度温水中10分钟，以杀灭非芽孢菌。
2.2.1.
3.2用白金耳蘸取上述溶液，按划线接种法接种在适宜的培养基上，孵育24小时后，就可以分离出芽孢菌。
2.2.1.4增菌分离培养法
被检材料中如果含菌量较少，估计用上几种方法不易达到分离细菌的目的时，可先行增菌培养。
其法是将病料直接接种在普通肉汤培养基或血清肉汤培养基内，经18~24小时孵育后，再移植到其他适宜培养基内，以分离单个菌落。
2.2.1.5通过实验动物分离法
当分离某种原菌时，可将被检材料注射于感受性强的实验动物体内，如将结核菌材料注射于豚鼠体内，杂菌不得发育，而豚鼠终必得慢性结核病而死，实验动物死后，取心血或脏器用以分离细菌，有时甚至可以得到纯培养。
2.2.2厌氧菌分离培养法
厌氧菌生长繁殖的条件与需氧菌不同，它不需要氧气，当游离氧进入时，能使其死亡。
培养厌氧菌时，都应用无氧培养基或无氧环境，通常采用各种方法以阻止氧的进入和人工驱除氧。
艳阳培养方法很多，常用的有以下几种：
2.2.2.1加组织培养基分离培养法
即在液体培养基内加入肝、肾、心、脑、肉渣等组织作为还原性物质，吸收游离氧。
如在培养基表面加一层灭菌流动石蜡，以杜绝空气进入，则效果更佳。
2.2.2.2焦性没食子酸法
此法是应用焦性没食子酸与碱性溶液作用后，形成焦性没食子酸盐，以吸收游离氧而造成无氧条件。
本法操作简单，并容易分得单个菌落。
2.2.3二氧化碳培养法
2.2.
3.1蜡烛法
此法操作简单，不需要特殊设备，故较常用。
培养时将接种好的培养皿放入有盖子的大玻璃缸内（如圆形标本缸），取蜡烛一支放在缸内点燃，烛火需距缸口10cm，盖好缸盖。
周围涂凡士林，密封缸盖，当缸内氧气消耗完，蜡烛自灭，此时缸内约含10%的二氧化碳，将此缸置37℃条件下培养。
2.2.
3.2二氧化碳培养箱培养法
这是目前较先进的仪器设备，配有二氧化碳浓度控制系统及温控制指示系统，可用于细菌、细胞的培养，使用时按需要调整二氧化碳的浓
度及温度，将培养物置人培养。
3.细菌生化性状的检查
进行生化性状检查，必须用纯培养菌进行，不然容易出现错误的结果。
生化性状检查的项目很多，应当根据诊断的需要适当选择。