斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估
血清淀粉样蛋白a60,其它指标正常
血清淀粉样蛋白a60是一种重要的生化指标，其浓度可以反映机体内部的炎症及免疫状态。
正常情况下，血清淀粉样蛋白a60的浓度应该在一定范围内，当其浓度异常时，可能意味着机体内部存在着某些疾病或异常情况。
值得注意的是，血清淀粉样蛋白a60的异常浓度不一定意味着疾病的存在，还需要综合其他指标进行综合分析。
以下是一些有关血清淀粉样蛋白a60的重要内容：1. 血清淀粉样蛋白a60的生化特点血清淀粉样蛋白a60是一种重要的生化指标，通常存在于血浆中，其主要作用是参与机体的免疫反应。
在炎症和感染等情况下，血清淀粉样蛋白a60的浓度会升高，以应对外界环境对机体的侵袭。
通过监测血清淀粉样蛋白a60的浓度变化，可以及时了解机体内部免疫状况及炎症程度。
2. 血清淀粉样蛋白a60的临床意义血清淀粉样蛋白a60作为一种重要的生化指标，在临床上具有很大的意义。
它可以作为发炎指标，帮助医生判断患者是否存在炎症反应。
血清淀粉样蛋白a60的浓度也可以反映免疫状态的变化，有助于了解患者的免疫状况。
血清淀粉样蛋白a60在肿瘤、风湿病、感染性疾病等方面也有一定的临床意义，可以作为辅助诊断的重要指标之一。
3. 血清淀粉样蛋白a60的异常浓度及处理方法当血清淀粉样蛋白a60的浓度异常时，可能意味着机体内部存在炎症、感染或免疫异常等情况。
但需要注意的是，异常浓度不一定意味着疾病的存在，还需要综合其他指标进行分析。
一旦发现血清淀粉样蛋白a60异常，建议立即就医，并进行必要的检查和治疗。
血清淀粉样蛋白a60作为一种重要的生化指标，在临床上具有重要的意义。
通过监测其浓度变化，可以及时了解患者的免疫状态和炎症程度，有助于医生进行诊断及治疗。
但需要注意的是，血清淀粉样蛋白a60异常浓度不一定意味着疾病的存在，还需要综合其他指标进行综合分析。
在临床实践中，医生需要结合患者的实际情况，谨慎判断，并进行个性化的诊疗方案。
4. 血清淀粉样蛋白a60的检测方法在临床上，血清淀粉样蛋白a60的浓度通常通过血液检测来获取。
人β淀粉样蛋白1—42检测标准
人β淀粉样蛋白1—42（Aβ1-42）是阿尔兹海默病（AD）中的一个重要生物标志物，其在临床诊断和疾病治疗中具有重要意义。
针对Aβ1-42的检测标准的建立，对于提高AD的早期诊断率、治疗效果评估及研究具有重要的意义。
本文将从Aβ1-42的生物学意义、检测方法以及检测标准的建立等方面展开详细介绍。
一、Aβ1-42的生物学意义Aβ1-42是一种由蛋白质降解产生的多肽，其在AD的发病机制中扮演着至关重要的角色。
在AD患者的脑组织中，Aβ1-42被发现形成了具有毒性的斑块，导致神经元的损伤和死亡，最终引发认知功能的丧失。
因此，Aβ1-42的检测可以作为AD的早期诊断指标，有助于早期干预和治疗。
二、Aβ1-42的检测方法目前常用的Aβ1-42检测方法包括酶联免疫吸附实验（ELISA）、质谱法和免疫荧光法等。
其中，ELISA是一种常规的检测方法，具有操作简便、成本较低的优势；质谱法则能够提供更加准确的定量结果；免疫荧光法则具有高灵敏度和高特异性的特点。
不同的检测方法适用于不同的实验需求，可以根据具体情况选择合适的方法进行检测。
三、Aβ1-42检测标准的建立针对Aβ1-42的检测标准的建立需要考虑到多个方面的因素，包括样本采集、保存和处理的标准化，检测方法的验证和准确性评价，以及结果的解释和临床应用等。
在建立Aβ1-42检测标准时，需要参考国际上已有的相关标准和指南，结合本地实际情况进行调整和完善。
同时，还需要进行大样本临床试验，收集足够的数据支持标准的建立，并不断进行修订和更新。
四、Aβ1-42的检测标准的意义建立Aβ1-42检测标准对于临床诊断和疾病治疗具有重要的意义。
首先，可以提高AD的早期诊断率，有助于采取早期干预措施，延缓疾病的发展。
其次，可以用于评估治疗效果，指导临床用药的选择和调整。
此外，还可以为科研人员提供标准化的实验方法，促进AD的相关研究和药物研发。
因此，建立Aβ1-42检测标准是非常必要和有意义的。
血清淀粉样蛋白ASAA
血清淀粉样蛋白A(SAA)血清淀粉样蛋白A(SAA)属急性时相蛋白，与临床最广泛使用的急性时相蛋白C-反应蛋白（CRP）相比较，有一个最重要的不同之处：病毒感染时SAA显着升高，而CRP在无细菌感染的病毒感染中不升高或仅在一个狭窄围范内也许有小幅升高。
SAA对细菌感染和其它疾病急性期的敏感性也类似于CRP，但对不同种类疾病稍有不同。
SAA 和 CRP 取长补短、互补应用为好。
一、SAA与病毒感染十年前SARS（严重急性呼吸系统综合症Severe Acute Respiratory Syndro）流行，遇到疑似呼吸系统感染患者时，接诊医生期望立刻知道患者是否受病毒感染？是不是SARS冠状病毒？因此欧美临床实验室研究人员对疑似患者血液SAA测试项目做了大量研究，得出了以下结论：SAA在各种病毒和细菌感染时均增高，增高幅度反映疾病严重程度，而不反映病因，不能区分SARS还是非SARS患者(Clinical Chemistry 52, No. 6, 2006)。
国际上众多研究报告普遍认同SAA 和CRP现在已经是判断炎症活动性的最敏感指证，而在病毒感染和肾移植排斥上，已证实SAA比CRP更为有用，但10年前无快速、可靠测定SAA的POCT方法，当时文献呼吁开发方便的SAA检测方法，以促进SAA 在临床实验室的广泛应用(Clin Chem Lab Med 1999; 37(4):381-388)。
呼吸系统病毒感染发病率很高，在老年人和幼婴儿中死亡率也不低，尤其是幼婴儿如处理不当，疾病变化快速而凶猛，但目前门急诊检验缺少诊断病毒感染的可靠指标。
病毒的相应抗体测定仅能指示该患者曾经感染过相关病毒，人体感染后产生抗体需较长时日，最快的IgM抗体也要感染后约5天才能检测到，而康复后抗体的消失又需很长时日，有的患者一辈子相应IgG抗体都呈阳性，个体差异极大，对医生处理决断的参考价值非常有限。
病毒感染患者发病后门急诊就诊时SAA就应升高，如同时测定的CRP在正常范围，则提示当时尚无细菌感染并发。
人β淀粉样蛋白1—42检测标准
人β淀粉样蛋白1—42（Aβ1-42）是阿尔茨海默病（AD）的致病因子之一，其在脑内的沉积是AD的早期标志。
因此，对Aβ1-42的检测对于AD的早期诊断和治疗具有重要意义。
一、检测方法目前常用的Aβ1-42检测方法主要有ELISA、质谱法和免疫荧光法等。
1. ELISA法：ELISA法是一种常用的检测Aβ1-42的方法。
该方法基于抗体与Aβ1-42的特异性结合，通过比色反应或荧光反应来测定Aβ1-42的浓度。
2. 质谱法：质谱法是一种高灵敏度、高分辨率的检测方法。
该方法通过将Aβ1-42分离出来，利用质谱仪进行检测。
3. 免疫荧光法：免疫荧光法是一种灵敏度较高的检测方法。
该方法通过将Aβ1-42标记上荧光探针，利用荧光显微镜进行检测。
二、标准化由于不同实验室使用的试剂盒和仪器不同，导致Aβ1-42的检测结果存在差异。
因此，需要建立标准化方法来确保不同实验室获得的结果具有可比性。
1. 标准曲线法：标准曲线法是一种常用的标准化方法。
该方法通过使用已知浓度的Aβ1-42标准品制备一系列浓度梯度的标准曲线，从而确定待测样品中的Aβ1-42浓度。
2. 质控品法：质控品法是一种更加严格的标准化方法。
该方法通过使用已知浓度的Aβ1-42质控品来验证试剂盒和仪器的准确性和稳定性，从而确保不同实验室获得的结果具有可比性。
三、参考值范围Aβ1-42的正常参考值范围因年龄、性别、种族等因素而异。
一般而言，正常人的Aβ1-42浓度应该在200-600 pg/mL之间。
四、意义与临床应用Aβ1-42的检测对于AD的早期诊断和治疗具有重要意义。
研究发现，AD患者的脑内Aβ1-42沉积量明显高于正常人群，因此Aβ1-42的检测可以作为AD的诊断标志物。
此外，Aβ1-42的检测还可以用于评估AD患者的疾病进展和治疗效果。
总之，Aβ1-42的检测是AD早期诊断和治疗的重要手段。
通过建立标准化方法和确定参考值范围，可以确保不同实验室获得的结果具有可比性，为AD的诊断和治疗提供更加可靠的依据。
新型猪囊尾蚴斑点免疫金渗滤法的建立及初步应用
的猪囊尾蚴抗原 ｃ Ｉ Ｃ 点于硝酸纤维素膜上 ， 用采检＇ Ａ 清中囊虫抗体 ， ａ ， ｉ 通过胶体金 标记的金黄 色葡萄球 茵 Ａ蛋 白 直接显 色， 阳性 者 出现 红 色斑点 ， 结果 易于判断 。结 果 ： Ｉ Ｆ Ｄ Ｇ Ａ检 测 ４ 囊虫病患者血清和 ４ 正常人 血清 ， ０份 ０份 敏
Ｌ ｂ ｒｔ ｒ ａ ｏ ａｏｙ，Ｆ ｚ ｏ ｅ ｅ ａ ｓ ｉ ｌ ｕ ｈ ｕ３ ０ ２ Ｃ ｉ ａ ｕｈ ｕＧ ｎ ｒｌ Ｈｏｐ ｔ ，Ｆ ｚ ｏ ５ ０ ５， ｈ ｎ ａ
【 ｂｔ ｃ】 Ｏ ｊ ｔ ｅ Ｔ ｓｂｓ ｎｗｓ ｐ ｐ ｏｉｍ ｎｇｌ ｆ ｒｉ ｓ ｙ（ ＩＦ ）ｆ ｅ ｃｎ Ａ ｓ ａｔ ｒ ｂ ｃｖ ｏｅ ａｌｈａ ｅ ｍ ｌ ｒ ｉ ｄｔｍ ｕｏｏ ｌａｏ ａ ａ ＤＧ Ａ ｏ ｄｔ ｔｇ ｅｉ ｔ ｉ ｉ ｅ ａｄ ｄｉ ｔｎ ｓ ｔ ｒ ｅｉ
感性为 ９ ％（ ８４ ）特异性 为 １０ ４ ／ ０ 。检测 ２ ５ ３／０ ， ０ ％（０ ４ ） ０份 包虫病 患者血清 ， 阳性 ， ３例 交叉反应 率为 １ ％（／ ０ ； ５ ３２ ） 检测 ２ ０份肝吸 虫病 患者血 清，０份肺吸 虫病患者血清 ，０份血吸 虫病患者血清 ， 未出现交叉反 应。与酶联免 疫 ２ ２ 均 吸 附试验对比 ， 测的总符合 率为 ９ 检 ５％， 差异无显著性（ ００ ） Ｐ＞ ．５ 。结论 ： Ｉ Ｆ Ｄ Ｇ Ａ简便 、 快速 、 准确 ， 于现 场应 用 ， 适 可用 于囊 虫病的诊断及流行病学调查。 关 键 词 囊 虫病 抗 体 斑 点 ｅｕｏａ ｎ ｐｔ ｎ ｅｕ ｙｔ ｅｃ ｓｃｌ ｌｓｅｉ ａｉ ｔｓｒ ｍ Ｙ Ｇ Ｘｉ ｇｙ ｅ Ｌ ｉ －ｅｇ Ｐ Ａ Ｍｅｉａ Ｃ ｎ ｅｆｒＭｅｉ ｉ ｌ ｅ ＡＮ ａ －ｕ ， ＡＮ Ｘａ ｐ ｎ， Ｌ ｄ ｌ ｅｔ ｏ ｄ ａ ｎ ｏ ｃ ｒ ｃ ｌ
人血清淀粉样蛋白A（SAA）酶联免疫分析要点
人血清淀粉样蛋白A（SAA）酶联免疫分析要点人血清淀粉样蛋白A(SAA)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号：CSB-E08589h检测范围：156 ng/ml - 10000 ng/ml最低检测限：39 ng/ml特异性：本试剂盒可同时检测天然或重组的人SAA，且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期：6个月预期应用：ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中SAA含量。
说明1．试剂盒保存：-20℃（较长时间不用时）；2-8℃（频繁使用时）。
2．浓洗涤液低温保存会有盐析出，稀释时可在水浴中加温助溶。
3．中、英文说明书可能会有不一致之处，请以英文说明书为准。
4．刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质，此为正常现象，不会对实验结果造成任何影响。
概述血清淀粉样蛋白A（serum amyloid A，SAA)是一种急性时限反应蛋白，属于载脂蛋白家族中的异质类蛋白质，相对分子量约12000。
在急性时限反应中，经IL-1、IL-6和TNF 刺激，SAA在肝脏中由被激活的巨噬细胞和纤维母细胞合成，可升高到最初浓度的100-1000 倍，但半衰期极短，只有50分钟左右。
血清淀粉样蛋白A 与高密度脂蛋白(HDL)有关，它能在炎症期间调节高密度脂蛋白的代谢。
血清淀粉样蛋白A 一个特别重要的特性是其降解产物能以淀粉样蛋白A (AA) 原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症疾病中这是一种严重的并发症。
与C 反应蛋白(CRP) 类似，血清淀粉样蛋白A 的含量浓度是反映感染性疾病早期炎症的敏感指标，有助于诊断炎症、评估其活性、监控其活动及治疗。
但是，血清淀粉样蛋白A 检测在诊断发生病毒感染、肾移植排斥反应的患者（特别是进行免疫抑制治疗的患者）以及用肾上腺皮质激素治疗的囊性纤维化患者方面，比C 反应蛋白更确凿。
研究发现，在患炎性关节炎的案例中，血清淀粉样蛋白A 与疾病活动性的关系最密切。
蛋白a脱落残留标准
蛋白a脱落残留标准蛋白质A（Protein A）是一种常见的生物试剂，常用于免疫学实验中，如ELISA、免疫印迹等，以提高实验的灵敏度和特异性。
然而，蛋白A的脱落残留可能会对实验结果产生干扰，因此需要对其残留量进行严格控制。
一、蛋白A脱落残留标准的意义蛋白A是一种具有免疫原性的蛋白质，其脱落残留可能会引起非特异性结合，干扰实验结果。
因此，建立蛋白A脱落残留标准具有重要意义。
该标准可以用于检测实验中蛋白A的脱落残留量，确保实验结果的准确性。
二、蛋白A脱落残留标准的制定制定蛋白A脱落残留标准需要以下步骤：1.确定实验条件：确定实验中使用的抗体、抗原等试剂以及实验温度、时间等条件。
2.建立检测方法：选择合适的检测方法，如ELISA、免疫印迹等，以检测蛋白A的脱落残留量。
3.设定标准曲线：使用已知浓度的蛋白A标准品制作标准曲线，以确定蛋白A的浓度与检测信号之间的关系。
4.确定标准限值：根据实验要求和实际情况，确定蛋白A脱落残留的标准限值。
通常情况下，该限值应低于实验中使用的抗体浓度。
5.制定标准操作流程：根据检测方法和实验条件，制定标准的操作流程，包括样本处理、加样、孵育、洗涤等步骤。
6.验证标准：对制定的标准进行验证，以确保其可靠性和准确性。
可以采用交叉验证的方法，对不同的实验样本进行检测，以评估标准的重复性和稳定性。
三、蛋白A脱落残留标准的实施和应用实施蛋白A脱落残留标准需要以下步骤：1.对实验人员进行培训：对实验人员进行培训，确保他们了解标准的制定依据、操作流程和注意事项。
2.规范实验操作：在实验中严格遵守标准操作流程，确保每个步骤都符合要求。
3.检测样本：按照标准对实验样本进行检测，并对结果进行分析。
如果样本中蛋白A的脱落残留量高于标准限值，应采取相应措施进行处理，如重新制备抗原或更换抗体等。
4.监督和质量控制：对实验过程进行监督，确保每个环节都符合标准要求。
同时，对实验结果进行质量控制，以确保数据的准确性和可靠性。
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斑点免疫金渗滤法定量测定血清淀粉样蛋白A方法的建立及性能评估血清淀粉样蛋白Ａ（ｓｅｒｕｍａｍｙｌｏｉｄＡ，ＳＡＡ）是一类多基因编码的多态性蛋白家族，为组织淀粉样蛋白Ａ的前体物质，属急性时相反应蛋白。
已有研究表明，在细菌、真菌、病毒感染，动脉粥样硬化，心血管疾病，急性移植排斥反应，肿瘤等疾病中均可检测到血清ＳＡＡ升高，对临床诊断有较好的参考价值。
尽管如此，目前国内尚只有一种乳胶增强速率散射比浊法（ｌａｔｅｘｅｎｈａｎｃｅｄｒａｔｅｎｅｐｈｅｌｏｍｅｔｒｙ，ＬＥＲＮ）试剂经国家食品药品监督管理局（ＳｔａｔｅＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＡｄｉｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ，ＳＦＤＡ）批准用于临床标本ＳＡＡ的检测，但由于其检测成本相对较高、需配套仪器等原因，ＳＡＡ检测尚未在临床中广泛应用。
斑点免疫金渗滤法（ｄｏｔｉｍｍｕｎｏｇｏｌｄｆｉｌｔｒａｔｉｏｎａｓｓａｙ，ＤＩＧＦＡ）因其简便、快速、安全等特点在急诊医学、输血医学、现场诊断及个体自我体检等方面应用非常广泛，已经成为临床医学检验快速诊断（ｐｏｉｎｔｏｆｃａｒｅｔｅｓｔ，ＰＯＣＴ）领域中的主要检测技术。
我们建立了基于ＤＩＧＦＡ的免疫金渗滤试剂板条（ＳＡＡＤＯＴ）定量测定血清ＳＡＡ并评估其分析性能。
材料和方法一、材料１．试验材料３株抗人ＳＡＡ单克隆抗体抗ＳＡＡ１、抗ＳＡＡ２和抗ＳＡＡ３购自ＨｙＴｅｓｔ公司（芬兰）。
硝酸纤维素膜购自ＷｈａｔｍａｎＬｔｄ公司（英国）。
人血清ＳＡＡ标准品购自英国国家生物制品检定所（ＮａｔｉｏｎａｌＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｔａｎｄａｒｄｓａｎｄＣｏｎｔｒｏｌ，ＮＩＢＳＣ，ＮＩＢＳＣｃｏｄｅ：９２／６８０）［１３］，使用时稀释至相应浓度。
２．试剂和仪器ＮＬａｔｅｘＳＡＡ试剂盒为德国西门子公司产品，配套的测定仪器为ＢＮＰｒｏｓｐｅｃ特定蛋白分析仪；Ｑｐａｄ金标数码定量阅读仪（上海奥普生物医药有限公司）；ＡｖａｎｔｉＪＥ离心机（美国ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｔｅｒ公司）３．研究对象血清取自２０１２年４至５月瑞金医院体检中心２４０名表观健康者，其中男１２０名（年龄２１～５６岁），女１２０名（年龄２４～５８岁）。
该２４０名体检者均无明显的炎症和感染指标，各项体检指标正常。
二、ＳＡＡ-ＤＯＴ的研制１．胶体金溶液、免疫金溶液和反应板的制备参见文献。
２．抗体的确定（１）抗体配对：商品化的３株单克隆抗体分别包被胶体金和硝酸纤维素膜，经组合得到６组配对，检测不同ＳＡＡ浓度的血清标本，根据反应曲线确定最佳的抗体对，分别用于标记胶体金和包被硝酸纤维素膜；（２）抗体工作浓度：最佳抗体对确定后，用７．５、１０和１５μｇ／ｍＬ抗体分别标记胶体金，用０．５、１．０和１．５ｍｇ／ｍＬ抗体分别包被硝酸纤维素膜，并组成９种组合。
将此９种组合测定不同ＳＡＡ浓度的血清，根据反应曲线确定ＳＡＡＤＯＴ中抗体的最佳工作浓度。
３．标准曲线制备ＳＡＡ高值血清稀释至５、１０、５０、１００、１５０、２００和２５０ｍｇ／Ｌ，每个浓度血清重复检测３次，取平均值绘制标准曲线。
４．操作步骤的确定将血清用标本稀释液做１００倍稀释。
在反应板上滴加２滴封闭液，待其完全渗入。
取１００μＬ稀释后的血清加至一洁净Ｅｐ管中，再加入１００μＬ免疫金溶液，充分混匀，并将其全部加至反应板中；待完全渗入后，再滴加２滴清洗液至反应板。
液体完全渗入后，将反应板条置于金标数码定量阅读仪上对反应斑点灰度进行检测，计算出血清中ＳＡＡ的浓度。
三、ＳＡＡＤＯＴ的性能分析１．敏感性制备０、２．５、５、１０和２０ｍｇ／Ｌ的５个不同浓度的检测限样本及空白样本（０ｍｇ／Ｌ）做１０次批内重复测定，另外４个样本做天间重复测定，共做１０ｄ。
定，共做１０ｄ［１４１５］。
２．精密度分别测定２个浓度的血清样本（１０和１００ｍｇ／Ｌ）。
批内精密度由１ｈ内重复测定２０次得到的结果计算。
２份样本每天分别测定１次，连续测定２０ｄ，计算得到天间精密度。
３．准确度回收试验根据文献配制系列回收血清样本，每份样本测定３次，结果取平均值，计算回收率［１５］。
干扰实验根据中华人民共和国卫生部和国家标准化管理委员会颁布的《干扰实验准则》确定各干扰物及其浓度，胆红素为３４２μｍｏｌ／Ｌ、甘油三酯为３７ｍｍｏｌ／Ｌ、血红蛋白为２ｇ／Ｌ、防腐剂（０．５％ＮａＮ３），并配制干扰实验样本和对照样本。
将此２种样本各重复测定６次，统计分析两者之间有无差异［１５］。
方法学比对共测定４０份血清标本，随机分为５组。
每天用ＳＡＡＤＯＴ和ＮＬａｔｅｘＳＡＡ试剂盒分别测定８份临床血清样本，每份血清检测２次，连续做５ｄ，每种方法得到８０个数据。
４．线性范围的确定取浓度为１０和２０００ｍｇ／Ｌ的２份血清配制成８个浓度的系列血清，用于评价线性范围。
每个浓度血清做４次重复测定，对试验数据进行统计处理，得到ＳＡＡＤＯＴ的线性范围。
５．参考区间的确定２４０名表观健康者根据年龄分为２０～２９岁、３０～３９岁、４０～４９岁和５０～５９岁４组。
每组根据性别再分为男、女２个亚组，每个亚组３０例。
用ＳＡＡＤＯＴ测定各组血清，对结果进行统计分析，观察性别和年龄对ＳＡＡ浓度的影响，确定２４０名表观健康者ＳＡＡ的临界值和参考区间。
６．血清样本稳定性将ＳＡＡ浓度为１５和１７５ｍｇ／Ｌ的血清分别在４和－２０储存，一定时间后进行检测，并与新鲜血清检测结果进行比较，观察ＳＡＡ在４和－２０中的稳定性。
四、统计学方法采用ＳＰＳＳ１３．０统计学软件对数据进行统计学分析。
正态分布时２组间比较采用独立样本的ｔ检验，多组间比较采用方差分析，线性范围采用直线相关分析；非正态分布时２组间比较采用ＭａｎｎＷｈｉｔｎｅｙＵ检验，多组间比较采用ＫｒｕｓｋａｌＷａｌｌｉｓＨ检验，方法间比较采用Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析。
Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。
结果一、ＳＡＡＤＯＴ的检测参数１．基本特性用于制备ＳＡＡＤＯＴ的最适抗体对为抗ＳＡＡ１和抗ＳＡＡ３。
抗ＳＡＡ１用于标记胶体金颗粒，最佳工作浓度为１０μｇ／ｍＬ，每次测试免疫金溶液用量为１００μＬ。
抗ＳＡＡ３用于包被硝酸纤维素膜，最佳工作浓度为１ｍｇ／ｍＬ，包被每块反应板的抗体用量为３μＬ。
血清标本需先做１００倍稀释，每次测定用量１００μＬ。
２．标准曲线ＳＡＡＤＯＴ标准曲线见图１，公式为Ｙ＝－１４．２５４Ｘ＋１０５２５，ｒ２＝０．９８２。
该曲线为ＳＡＡ浓度在０～２５０ｍｇ／Ｌ时的标准曲线。
当样本中ＳＡＡ浓度＞２５０ｍｇ／Ｌ时，需对样本稀释后再进行检测。
二、ＳＡＡＤＯＴ分析性能１．敏感性ＳＡＡＤＯＴ的检测限试验结果显示，浓度为２．５、５、１０和２０ｍｇ／Ｌ样本天间ＣＶ分别为７０．３０％、２０．７７％、１２．４６％和１１．８９％。
ＳＡＡＤＯＴ在测定５ｍｇ／Ｌ的ＳＡＡ样本时天间ＣＶ最接近２０％（为２０．７７％），所以ＳＡＡＤＯＴ的检测限为５ｍｇ／Ｌ。
２．精密度ＳＡＡＤＯＴ重复测定１０ｍｇ／ＬＳＡＡ血清的批内和天间结果分别为１０．２±０．９２和（１０．５±１．１９）ｍｇ／Ｌ，计算得批内和天间变异系数（ｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓｏｆｖａｒｉａｔｉｏｎ，ＣＶ）分别为９．０７％和１１．３３％。
ＳＡＡＤＯＴ重复测定１００ｍｇ／ＬＳＡＡ血清的批内和天间结果分别为１０２．１±１０．４３和（１０３．０±１１．８８）ｍｇ／Ｌ，计算得批内和天间ＣＶ分别为１０．２１％和１１．５３％。
３．准确度回收实验显示，ＳＡＡＤＯＴ的回收率为８６．４％；血清中含３４２μｍｏｌ／Ｌ胆红素、３７ｍｍｏｌ／Ｌ甘油三酯、２ｇ／Ｌ血红蛋白及０．５％ＮａＮ３对检测结果无明显影响（Ｐ＞０．０５）。
方法学比对结果显示，用ＳＡＡＤＯＴ和ＮＬａｔｅｘＳＡＡ试剂盒检测ＳＡＡ的浓度主要分布于０～２００ｍｇ／Ｌ之间，对２组数据进行Ｓｐｅａｒｍａｎ相关分析，相关系数（ｒ）＝０．９９５（Ｐ＜０．０５）。
见图２。
４．线性范围ＳＡＡＤＯＴ的线性范围为５～２３０ｍｇ／Ｌ，其回归方程的截距和斜率分别为ａ＝－０．７６６２，ｂ＝１．００９１，差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），见图３。
５．参考区间２４０名表观健康者ＳＡＡ测定结果见表１。
ＳＡＡ浓度在各年龄组中呈偏态分布，故以中位数和９５％可信区间进行统计分析。
各年龄组内ＳＡＡ浓度在男、女性之间无明显差异（Ｐ＞０．０５）；随着年龄增长ＳＡＡ浓度逐渐升高，５０～５９岁组ＳＡＡ浓度中位数和临界值均高于其他３组，但只与２０～２９岁组、３０～３９岁组差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５），而与４０～４９岁组相比，差异无统计学意义（Ｐ＜０．０５）。
如果不考虑性别和年龄因素，所有２４０名表观健康者ＳＡＡ浓度中位数为５．７ｍｇ／Ｌ，９５％可信区间为０～９．６ｍｇ／Ｌ。
将２４０名表观健康者根据年龄分为＜５０岁组和≥５０岁组，２组ＳＡＡ浓度中位数分别为５．３和６．２ｍｇ／Ｌ，９５％可信区间分别为０～８．２和０～１０．４ｍｇ／Ｌ。
≥５０岁组ＳＡＡ浓度中位数和临界值明显高于＜５０岁组（Ｐ＜０．０５）。
６．ＳＡＡ的稳定性在４放置９ｄ内检测结果稳定，第９天检测结果与第１天检测结果间差异无统计学意义（Ｐ＞０．０５），但放置第１１天时的检测结果和第１天比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１），见图４（ａ）、（ｂ）。
血清于－２０条件下４个月内检测结果稳定（Ｐ＞０．０５），但放置第５个月时的检测结果与第１天的检测结果相比明显降低（Ｐ＜０．０１），见图４（ｃ）、（ｄ）。
讨论目前，国内用于临床患者血清ＳＡＡ测定的商品化试剂较少，因此血清ＳＡＡ测定在临床疾病中的应用受到一定程度的制约。
我们研制的ＳＡＡＤＯＴ基于ＤＩＧＦＡ，应用双抗体夹心法原理检测ＳＡＡ。
由于每株抗体所针对的ＳＡＡ抗原决定簇不同，因此选择合适的抗体至关重要。
经配对比较，最终选用抗ＳＡＡ１标记胶体金颗粒、抗ＳＡＡ３包被硝酸纤维素膜，其敏感性和线性结果较其他抗体配对组合更好。
机体受炎症刺激后血清中ＳＡＡ浓度可达基础浓度的１０００倍，用双抗体夹心法检测ＳＡＡ浓度较高的血清样本时有可能产生Ｈｏｏｋ效应，此时需对血清预先稀释。
虽然稀释倍数越高ＳＡＡＤＯＴ的检测范围越大，但较高的稀释倍数也会降低检测敏感性。
实验证明，血清经稀释５０倍后即可避免由于ＳＡＡ浓度较高而产生的Ｈｏｏｋ效应，经１００倍稀释后既能满足常见临床样本的检测，也仍具有相对较好的检测敏感性。
所以，我们选择将血清预稀释１００倍后检测。
对于ＳＡＡ浓度较高的血清样本（＞２３０ｍｇ／Ｌ）需扩大稀释倍数后再测定，测定结果按相应稀释倍数计算获得。
我们根据ＥＰ文件对ＳＡＡＤＯＴ的检测限、精密度、准确度、线性范围、参考区间等方面的性能进行了验证。
２０％的天间ＣＶ是试验诊断所允许的最大不精密度，所以将天间ＣＶ为２０％或最接近２０％的检测限样本浓度作为检测系统可定量报告分析物的检测限最为保险，可确保测定结果是准确的［１４１５］。