硝化细菌和反硝化细菌的分离纯化方案(新)
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硝化细菌相关培养基：
1、富集培养基：
硝化细菌富集培养基： KNO2 0.5g; KH2PO4 0.07g;
MgSO4 7H2O 0.055g; CaCl2 2H2O 0.05g;
蒸馏水100ml; 用5%Na2CO3调pH至8.0.
亚硝化细菌富集培养基： (NH4)2SO4 0.5g; KH2PO4 0.07g;
MgSO4 7H2O 0.055g; CaCl2 2H2O 0.05g;
蒸馏水100ml; 用5%Na2CO3调pH至8.0.
2、分离固体培养基：
硝化细菌平板分离固体培养基： KNO2 0.05 g； K2HPO4 3H2O 0.13 g；
MgSO4 7H2O 0.03 g； NaCl 0.12 g；
FeSO4 7H2O 0.02 g； CaCO3 (MgCO3) 0.1 g；
NaHCO3 0.2 g； H2O 100 mL；
琼脂：1.5—2.0g pH 7.5 ~ 8.0．
亚硝化细菌平板分离固体培养基：(NH4) 2SO4 0.05 g； K2HPO4 3H2O 0.13 g；
MgSO4 7H2O 0.03 g； NaCl 0.12 g；
FeSO4 7H2O 0.02 g； CaCO3 (MgCO3) 0.1 g；
NaHCO3 0.2 g； H2O 100 mL；
琼脂：1.5—2.0g pH 7.5 ~ 8.0．
3杂菌检验培养基：
（1）检查异养型细菌：
牛肉膏蛋白胨培养基（100ml）：酵母粉：0.5g 胰蛋白胨：1.0g
氯化钠：1.0g 琼脂：1g
(2)检查酵母菌：
豆芽汁葡萄糖培养基： 10%豆芽浸汁100ml 葡萄糖5g 琼脂1.5—2.0g
自然PH
(3)检查霉菌:
马铃薯葡萄糖培养基: 20%马铃薯浸汁100ml 葡萄糖2g 琼脂1.5—2.0g
自然PH
1、富集培养基：
反硝化细菌富集培养基: KNO3 2 g, 柠檬酸钠5 g, K2HPO4 1 g, MgSO4·7H2O
0.2g, 微量元素蒸馏水1 000mL, 121 ℃ , 灭菌20
min.
2、反硝化细菌分离培养基： KNO3 2 g, 柠檬酸钠5 g, K2HPO4 1 g, 微量元素
MgSO4·7H2O 0.2g, 蒸馏水1 000mL, 琼脂
121 ℃ , 灭菌20 min.
反硝化细菌为异养型菌，故可以在LB培养基上培养。