透射比浊法和散射比浊法测定血清胱抑素C的方法学评价
透射比浊法和散射比浊法测定血清胱抑素C的方法学评价王建琼;牛华;刘莉
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】2011(032)003
【摘要】目的探讨同一临床实验室不同分析系统之间检测血清胱抑素C的结果是否具有可比性.方法以散射比浊为比较方法,透射比浊为试验方法,分别检测40例患者新鲜血清,记录检验结果,去除离群值,计算回归方程,评估两分析系统的预期偏倚和相对偏倚.结果血清胱抑素C透射比浊法和散射比浊法测定结果的相关回归方程为Y=1.011X+0.13(r2=0.992 3).结论血清胱抑素C透射比浊法和散射比浊法测定结果的预期偏倚在可接受范围内.
【总页数】2页(P340-340,368)
【作者】王建琼;牛华;刘莉
【作者单位】云南省第一人民医院检验科,昆明,650032;云南省第一人民医院检验科,昆明,650032;云南省第一人民医院检验科,昆明,650032
【正文语种】中文
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免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较
免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测特定蛋白的抗干扰能力比较 目的：对免疫透射比浊法与免疫散射比浊法在检测特定蛋白抗干扰能力的效果进行对比。方法：收集血清样本，且制作浓度不同的特定蛋白混合血清，同时将比例不同的两种干扰物置于混合血清当中，之后再用免疫透射比浊法、免疫散射比浊法对其进行测定，且对干扰率加以计算，以了解两种检测方法的抗干扰能力。结果：CH在9000与15000时，免疫散射比浊法对IgM进行检测受到干扰;Hb在9.9与29.8浓度时，免疫散射比浊法对高浓度IgM、低浓度CRP检测时受到干扰;采取免疫透射比浊法对三种含有干扰物的特定蛋白进行检测时，未受到任何干扰影响。结论：在对CH、Hb等干扰物的抗干扰能力方面，免疫透射比浊法比免疫散射比浊法更为优越。 标签：特定蛋白;免疫透射比浊法;免疫散射比浊法 在临床上，对于人血清内特定蛋白的检测，一般是采取免疫散射比浊法、免疫透射比浊法进行检测;然而，在检测的过程中，如游离血红蛋白、脂蛋白等会对检测的结果带来一定的干扰，继而影响检测结果的准确性[1]。对此，为保证血清检测的准确性，笔者对免疫透射比浊法、免疫散射比浊法在特定蛋白抗干扰能力的效果进行探讨，具体报道如下。 1.资料与方法 1.1对象 本次研究的样本源自于某医院门诊与住院患者当天的新鲜血清，其中排除存在脂血、溶血、浑浊等血清。同时，事前准备好IgM、CRP等浓度不等的混合血清，具体为IgM低浓度1.0～1.5g/L，高浓度大于2.0g/L;CRP低浓度4～10mg/L，高浓度大于100mg/L。 1.2仪器设备 选用Dade Behring BNProSpec特定蛋白测定仪、Roche Modular P全自动生化分析仪，试验所用试剂皆为仪器配套试剂。同时选取三个干扰物，即FBil（游离胆红素）、CH（乳糜）、Hb（血红蛋白），每种干扰物各准备两瓶试剂盒，一瓶作为空白对照使用，另外，干扰物的浓度具体为FBil3280μmol/L、CH15000FTU、Hb49.6μmol/L[2]。 1.3研究方法 首先，对混合血清进行制备，之后依据干扰试剂盒上的制备顺序，配制干扰物;将2ml的蒸馏水加入到每一个干扰物与空白对照内，复溶。然后，按照1：9的比例，把已经准备好的干扰物和混合血清混合在一起，制作成干扰物样本，其中含有干扰物的为样本甲，未加干扰物为样本乙[3]。把两个样本分别制定浓度
评估肾小球滤过率的敏感指标
血清胱抑素C：评估肾小球滤过率的敏感指标 本文来自《中华检验医学网》 自从1985年以来，半胱氨酸蛋白酶抑制剂C (cystatin C)已被视为检测肾功能的良好标志物，由于其不受许多生理病理因素的影响，同肾小球滤过率(GFR)的其他标志物相比具有众多优越性。cystatin C在一系列生理病理过程中也发挥着作用，有重要的临床意义。 一、肾功能评价和肾功能标志物 临床评价肾脏疾病进展和严重程度，一般以肾功能为参考，肾功能一般以肾小球滤过率（GFR）反映。它是反映肾功能最重要的指标。GFR指在一定时间内通过肾小球的血浆量（定义为在单位时间内肾脏将若干容积血浆内的物质从体内清除，其单位一般为ml/min物质）。它不能直接测定，必须借助某物质的肾清除率来反映。 根据GFR标志物来源，分外源性和内源性。外源性标志物包括菊粉 ( inulin )、碘海醇( iohexol )、51Cr-EDTA、99mTc-DTPA等。内源性标志物包括血清肌酐 ( Scr )、尿素( Urea )、β2-微球蛋白（β2-MG ）、β-痕迹蛋白(BTP)以及血清胱抑素C ( Cystatin C，Cys C )。 二、肾小球滤过率检测现状 1、外源性标志物肾清除率测定方法被视为GFR评判的“金标准”，但存在许多不足。 首先这些物质费用昂贵；其次同位素标记的物质涉及放射暴露问题；另外标本采集、实验操作烦琐；碘海醇测定需要特殊仪器设备（射线荧光光谱仪）；加之受年龄、性别和体表面积的影响，尤其是无法实现危急患者检测的及时性，从而限制其在临床的应用。 2、内源性标志物是在评价肾小球滤过功能实验中最常用的指标。 理想内源性标志物应具备：⑴ 稳定的生成率；⑵ 稳定的血浓度，不受其他病理变化的影响，不与蛋白结合；⑶ 肾小球自由滤过；⑷ 肾小管不分泌、不重吸收；⑸ 无肾外清除。 目前常用的指标为血清肌酐( Scr )、尿素( Urea )、内生肌酐清除率( Ccr )，但由于受许多肾外因素，如年龄、性别、身高、肌肉量、膳食结构、机体疾病状况、药物等，以及肾小管对肌酐的分泌等影响，使这些指标不能满足内源性标志物的要求。 ⑴ 尿素( Urea ) 虽然首先被作为肾功能评价指标，但它不能满足内源性GFR标志物的要求，并且受机会疾病状况的影响较大，如充血性心衰、营养不良、进食困难等，而更为重要的是肾小管有明显的被动重吸收。 ⑵ 血清肌酐（Scre）作为肾功能主要评判指标已有40余年，由于检测简便和费用低廉而
免疫散射比浊法和免疫透射比浊法测定免疫球蛋白结果比较
免疫散射比浊法和免疫透射比浊法测定免疫球蛋白结果比较刘少华;邓文平;李燕 【摘要】目的探讨免疫透射比浊法和免疫散射比浊法测定免疫球蛋白(Ig)水平的关系.方法用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法检测252例健康体检人群的血清Ig,同时测定IgG高、低值水平,分析两种方法测定结果之间的关系.结果健康体检人群中血清IgG水平免疫透射比浊法[(11.46±4.92)g/L]测定与免疫散射比浊法[(11.85±3.72)g/L]测定相比,差异无统计学意义(P>0.05);免疫透射比浊法 IgM[(1.51±1.06)g/L],免疫散射比浊法IgM[(1.60±0.91)g/L]和免疫透射比浊法IgA[(2.08±1.51)g/L],免疫散射比浊法IgA[(2.15±1.19)g/L]水平差异均无统计学意义(P>0.01).高、低值IgG用两种方法均可以测定.结论了解免疫功能水平时,测定Ig用免疫透射比浊法和免疫散射比浊法均可,但免疫散射比浊法更有利于病情的监测.%Objective To compare transmission turbidity and scatter turbidity method on measuration of serum immunoglobulin (Ig) levels. Methods Serum Ig concentration was measured by transmission turbidity and scatter turbidity method in 252 healthy people. The high level and low level of IgG were also measured. The relationship between the two methods was analyzed. Results The results showed that the levels of IgG[(11. 46 ±4. 92)g/L,(11. 85 ± 3. 72)g/L] ,IgM[(l. 51 ± 1. 06)g/L,(l. 60 ± 0. 91)g/L] and IgA [(2. 08± 1. 51)g/L, (2. 15 ± 1. 19)g/L] had no significant difference in healthy people(P>0. 05) measured by transmission turbidity and scatter turbidity method. High and low level of IgG can detect by transmission turbidity and scatter turbidity method. Conclusion Transmission turbidity and scatter turbidity method can both be used for
免疫透射比浊法与散射比浊法检测血清胱抑素C的方法学比较
免疫透射比浊法与散射比浊法检测血清胱抑素C的方法学比较目的对免疫透射比浊法测定血清胱抑素C的方法学性能行初步评价，并 与免疫散射比浊法进行比较。方法应用Rohe Modular P全自动生化分析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪分别对血清胱抑素C进行初步的方法学评价，包括精密度、线性回归试验、回收试验、干扰试验。结果免疫透射比浊法和免疫散射比浊法无论是批内还是批间精密度均符合要求，CV均0.95；免疫透射比浊法与免疫散射比浊法的回收率均>96%；干扰物试验结果显示血红蛋白、三酰甘油及胆红素均对测定无明显影响。结论免疫透射检验的灵敏度较高，检测范围广，与免疫散射试验的结果基本一致，系统误差小、抗干扰能力强，且更加快速、实用和便利。 [Abstract] Objective To initially evaluate the methodological properties of serum cystatin C by transmitted immunoturbidimetric assay and compare it with scatter turbidimetric assay. Methods Methodological evaluation was carried out for the serum cystatin C by Rohe Modular P automatic biochemical analyzer and SIEMENS BN ProSpec specific protein instrument，including precision，linear regression test，recovery test and interference test. Results Transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay both conformed to the requirements of intra-or inter-batch precision，and CV was 0.95；the recovery rates of transmitted immunoturbidimetric assay and scatter turbidimetric assay were both>96%；interferent test results showed that hemoglobin，triglyceride and bilirubin had no significant effects on the determination. Conclusion The sensitivity of immune transmission test is high，the detection range is wide，which is consistent with the result of scatter turbidimetric assay. The system error is small，the anti-interference ability is strong，and it is more rapid，practical and convenient. [Key words] Transmitted immunoturbidimetric assay；Scatter turbidimetric assay；Serum cystatin C；Methodology；Test 胱抑素C（CysC）又稱為半胱氨酸蛋白酶抑制剂C。近年来，由于高血压、糖尿病发病率的上升，其作为理想的反映肾小球滤过率的灵敏指标日益受到临床重视，国外对CysC的临床应用报道较多，认为其血浓度能够较准确地反映GFR[1-3]。目前已建立的多种测定方法，包括免疫荧光测定（FIA）、酶联免疫吸附法（ELISA）、免疫透射比浊法（PETIA）与免疫散射比浊法（PENIA），我们应用Rohe Modular P全自动生化分析仪与SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪对CysC进行了初步的方法学比较[4-5]，现将结果报道如下。1 材料与方法 1.1 仪器 免疫透射比浊法使用Rohe Modular P全自动生化分析仪、免疫散射比浊法使用SIEMENS BN ProSpec特定蛋白仪。
胶乳透射免疫比浊法
附件5 胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）注册技术审查指导原则 本指导原则旨在指导技术审评部门对胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）的技术审评工作，同时也为注册申请人注册申报资料的准备及撰写提供参考。 本指导原则是对胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）的一般要求，申请人应依据产品的具体特性确定其中内容是否适用，若不适用，需具体阐述理由及相应的科学依据，并依据产品的具体特性对注册申报资料的内容进行充实和细化。 本指导原则是供申请人和审查人员使用的指导文件，不涉及注册审批等行政事项，亦不作为法规强制执行，如有能够满足法规要求的其他方法，也可以采用，但应提供详细的研究资料和验证资料。应在遵循相关法规的前提下使用本指导原则。 本指导原则是在现行法规、标准体系及当前认知水平下制定的，随着法规、标准体系的不断完善和科学技术的不断发展，本指导原则相关内容也将适时进行调整。 一、适用范围 胱抑素C 测定试剂（胶乳透射免疫比浊法）是指基于透射免疫比浊法原理，利用半自动生化分析仪、全自动生化分析仪对人血清、血浆中的胱抑素C 进行体外定量分析的试剂。 目前胱抑素C 含量的测定方法主要是基于抗原抗体反应的
免疫方法，如胶乳免疫比浊法、胶体金免疫比色法、单向免疫扩散法、酶联免疫吸附法、放射免疫测定法、荧光免疫测定法等，免疫比浊法可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。其中透射免疫比浊法可适用于半自动生化分析仪、全自动生化分析仪，散射免疫比浊法需特定蛋白分析仪。 从方法学上讲，本指导原则仅适用于胶乳透射免疫比浊法, 不适用于散射免疫比浊法。 依据《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5 号）和《食品药品监管总局关于印发体外诊断试剂分类子目录的通知》（食药监械管〔2013〕242 号），胱抑素C 测定试剂（免疫比浊法）管理类别为二类，分类代号为6840。 二、注册申报资料要求 （一）综述资料综述资料主要包括产品预期用途、产品描述、方法学特征、生物安全性评价、研究结果总结以及同类产品上市情况介绍等内容，应符合《体外诊断试剂注册管理办法》（国家食品药品监督管理总局令第5 号）和《关于公布体外诊断试剂注册申报资料要求和批准证明文件格式的公告》（国家食品药品监督管理总局公告2014 年第44 号）的相关要求。相关描述应至少包含如下内容： 1. 产品预期用途及辅助诊断的临床适应证背景情况 （1）胱抑素 C 的生物学特征、结构与功能、在体内正常和病理状态下的代谢途径和存在形式。 胱抑素C（Cystatin C, CysC ）是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，也被称为Y—微量蛋白及—后球蛋白，广泛存在于各种组织的—— 2 —
胱抑素简介
胱抑素C（ cystatin c） 1983年Anastasi等首次在鸡蛋清中分离纯化得到高纯度的半胱氨酸蛋白酶抑制剂（cysteine proteinase inhibitor，CPI）后被命名为胱抑素C.是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ-微量蛋白及γ-后球蛋白，广泛存在于各种组织的有核细胞和体液中,是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质，分子量为13.3KD,由122个氨基酸残基组成,可由机体所有有核细胞产生，产生率恒定。循环中的胱抑素 c仅经肾小球滤过而被清除，是一种反映肾小球滤过率变化的内源性标志物,并在近曲小管重吸收，但重吸收后被完全代谢分解，不返回血液，因此，其血中浓度由肾小球滤过决定，而不依赖任何外来因素，如性别、年龄、饮食的影响，是一种反映肾小球滤过率变化的理想同源性标志物。 历史 由于没有合适检测技术.一直未能广泛应用,直到1994年Kyhse Andersen J等报道的颗粒增强透射免疫比浊法（particle enhanced turbidmetric immunoassay）和1997年Finney H 等报道的颗粒增强散射免疫比浊法（particle enhanced nephelometic immunoassay），这两种方法都能够在自动生化分析仪上测定胱抑素C，而且快速稳定。这样使胱抑素C可以更方便的应用于临床 肾脏功能包括肾小球的滤过功能、肾小管的重吸收及分泌功能，血中肌酐和尿素氮通过肾小球滤过进入尿液排出体外，因此血清尿素氮、肌酐是评价肾脏滤过功能的指标。血清尿素氮首先被作为肾功能的评价指标，但它不符合内源性肾小球滤过率（glomerular filtration rate，GFR）标志物的要求，当GFR减少到正常值的40%以前，尿素氮浓度升高缓慢，并且与外源性（蛋白质摄入量）与内源性（感染、肾上腺皮质激素的应用、胃肠出血等）尿素负荷的大小有关，更重要的是肾小管对尿素氮有明显的被动重吸收性。肌酐基本符合内源性GFR标志物的要求，目前国内外仍用血清肌酐作为临床常规评估肾小球滤过功能受损的指标．但只有当GFR下降1/3～1/2时．血清肌酐才有明显变化，而且受性别、饮食、肌肉量等因素的影响。因此，尿素氮、肌酐都不是评价肾功能的理想指标。血浆胱抑素C的含量较稳定，不易受其它因素的影响,它的浓度不但不受年龄、性别、肌肉量等因素的影响，而且也不受大多数药物以及炎症的影响。参考值(0.6---1.03).有研究表明：胱抑素 c的诊断准确性明显优于血清肌酐高血压发病逐年增加，所致肾损害是常见并发症之一，早期干预，对改善高血压患者预后有重要意义，高血压病通过引起良性小动脉肾硬化而导致高血压慢性肾损害，在良性小动脉肾硬化出现临床症状以前，常规血 液及尿液检查都正常的情况下，通过应用比较灵敏的检查手段仍能发现一些异常，这些可视为高血压病的早期肾损害糖尿病肾损害是糖尿病严重的慢性微血管并发症，也是糖尿病患者的主要死因之一，有超过30%的患者发展为肾功能衰竭及需要肾透析，相关专家认为，与其他指标相比，CysC检出糖尿病肾病的灵敏度为40%，特异性 为100%，因此有必要在诊断糖尿病而无证据有肾病患者中定期检测CysC浓度变化以观察其与糖尿病微血管病变的关系 急慢性排斥反应或免疫抑制剂治疗的副作用是肾移植手术后的最大危害，较早检出肾功能的损伤程度，有利于及时采取干预措施，当移植肾发生急性肾排斥时，血清CysC 的增高比血清Cr更明显也更早研究资料已表明，CysC是较血清BUN、Cr有更高的敏感性和特异性，对于评价肾小球滤过率有非常重要的价值，目前较多采用的颗粒增强免疫比浊法，技术已趋于成熟，操作简便，干扰因素少，对上述各种疾病的诊断及病情观察具有重要的临床意义。
血清胱抑素C—评估肾小球滤过率的敏感指标
血清胱抑素C—评估肾小球滤过率的敏感指标 自从1985年以来，半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(cystatin C)已被视为检测肾功能的良好标志物，由于其不受许多生理病理因素的影响，同肾小球滤过率(GFR)的其他标志物相比具有众多优越性。cystatin C 在一系列生理病理过程中也发挥着作用，有重要的临床意义。 一、肾功能评价和肾功能标志物 临床评价肾脏疾病进展和严重程度，一般以肾功能为参考，肾功能一般以肾小球滤过率（GFR）反映。它是反映肾功能最重要的指标。GFR指在一定时间内通过肾小球的血浆量（定义为在单位时间内肾脏将若干容积血浆内的物质从体内清除，其单位一般为ml/min物质）。它不能直接测定，必须借助某物质的肾清除率来反映。根据GFR标志物来源，分外源性和内源性。外源性标志物包括菊粉(inulin)、碘海醇(iohexol)、51Cr-EDTA、99mTc-DTPA等。内源性标志物包括血清肌酐(Scr)、尿素(Urea)、β2-微球蛋白（β2-M）、β-痕迹蛋白(BTP)以及血清胱抑素C(CystatinC，Cys C)。 二、肾小球滤过率检测现状 1、外源性标志物肾清除率测定方法被视为GFR评判的“金标准”；但存在许多不足。首先这些物质费用昂贵；其次同位素标记的物质涉及放射暴露问题；另外标本采集、实验操作烦琐；碘海醇测定需要特殊仪器设备（射线荧光光谱仪）；加之受 年龄、性别和体表面积的影响，尤其是无法实现危急患者检测的及时性，从而限制其在临床的应用。 2、内源性标志物是在评价肾小球滤过功能实验中最常用的指标。 理想内源性标志物应具备：⑴稳定的生成率；⑵稳定的血浓度，不受其他病理变化的影响，不与蛋白结合；⑶肾小球自由滤过；⑷肾小管不分泌、不重吸收；⑸无肾外清除。 目前常用的指标为血清肌酐(Scr)、尿素(Urea)、内生肌酐清除率(Ccr)，但由于受许多肾外因素，如年龄、性别、身高、肌肉量、膳食结构、机体疾病状况、药物等，以及肾小管对肌酐的分泌等影响，使这些指标不能满足内源性标志物的要求。⑴尿素(Urea)虽然首先被作为肾功能评价指标，但它不能满足内源性GFR标志物的要求，并且受机会疾病状况的影响较大，如充血性心衰、营养不良、进食困难等，而更为重要的是肾小管有明显的被动重吸收。⑵血清肌酐（Scre）作为肾功能主要评判指标已有40余年，由于检测简便和费用低廉而受欢迎。体内肌酐有外源性和内源性两类，外源性来源于膳食，内源性来源于肌肉中肌酸和磷酸肌酸的代谢。研究表明肌酐水平受年龄、性别、体形、身高、肌肉量以及膳食结构等诸多因素的影响，肾小管分泌肌酐也是不可忽视的因素，同一个体不同时间段以及不同个体肾小管分泌肌酐速率不同。研究表明约30%的慢性肾病患者GFR评估偏高，其主要原因就是肾小管对肌酐的分泌；如果药物抑制肾小管分泌、剧烈体育运动和进食荤食等则出现GFR评估偏低现象；另外，机体GFR下降至正常水平30%以下时，Scre才会升高。⑶内生肌酐清除率（Ccre）一直被认为是反映GFR较好的指标，但也存在很多不足之处。首先，24小时连续收集尿液标本，这给护理人员带来很大的工作量，而且经常收集不全，这会造成分析误差。其次，肾小管的排泌也会干扰Ccre的测定，引起Ccre假性增高。
胱抑素C评估IgA肾病肾小球滤过率的诊断价值
胱抑素C评估IgA肾病肾小球滤过率的诊断价值 【摘要】目的探讨血清胱抑素C（SCys c）检测在评估IgA肾病肾小球滤过率中的价值。方法将45例IgA肾病患者采用99mTc二乙三胺五醋酸肾动态显像检测肾小球滤过率（GFR），按照其肾小球滤过率值分为3组，并同时测Cys C 和血清肌酐（SCr）水平，采用统计学方法分析结果。结果在IgA肾病病患者中，SCys C随GFR的下降呈明显改变，对早期肾脏的损害明显优于SCr（P＜005）。相关性分析提示在IgA肾损害的患者中，SCysC与GFR有明显的负相关关系（P ＜0001）。结论SCysC检测在IgA肾病患者中能更为早期准确地发现肾功能损害，对临床评估IgA肾病的肾小球滤过率的动态变化有着积极意义。 【关键词】血清胱抑素C；肾小球滤过率；肾功能损害；99mTc二乙三胺五醋酸；肾动态显像 （Glumerulor Filtration Rate，GFR），前者操作程序繁冗复杂，临床上难以推广，而后者则有暴露患者于放射性同位素的风险且检测费用较高，故而需要寻找可替代上述检查的相对简单易行的指标。血清胱抑素C（serum cystatin C，SCysC）是一种较理想的内源性GFR标记物[1]。国内外均有大量研究探讨胱抑素在各种肾脏病如糖尿病肾病、高血压肾病及原发性肾小球疾病的肾功能评估的应用，已有文献报道不同病理的肾小球疾病肾功能与肾小球滤过率相关系数存在差异，但仍缺乏在具体各种不同病理类型肾小球疾病中的应用研究，本研究以99mTc二乙三胺五醋酸肾动态显像计算的eGFR为金标准对45例IgA肾病患者的SCysC、SCr实验室结果进行比较，探讨在IgA肾病患者中测定SCysC浓度来评估患者GFR的可行性和临床使用价值。 1资料与方法 11一般资料选取2011年1月至2012年6月IgA肾病患者45例。男24例，女21例；年龄19～59岁，平均（392±101）岁。原发疾病均为IgA肾病，病理分型为Lee分类法ⅠⅣ型；其中LeeⅠ型15例，Ⅱ型12例，Ⅲ型10例，Ⅳ8例。入院后均已第一时间完善血清胱抑素c（SCysC）、血肌酐（SCr）、及99mTc 二乙三胺五醋酸肾动态显像。 12方法SCysC采用粒子增强透射免疫比浊法（PETIA法）检测；Scr浓度采用酶法同时测定；采用99mTc二乙三胺五醋酸肾动态显像计算eGFR。按患者eGFR分为以下四组：A组（18例）eGFR＞80 ml/min；B组（例）50 ml/min≤eGFR ＜80 ml/min；C组（13例）30 ml/min ≤eGFR＜50 ml/min。 13统计学方法使用SPSS 115为统计学处理软件。数据以（x±s）及上下四分位数表示，经对数转换后近似正态分布，组间比较采用方差分析，不满足正态分布或方差不齐者采用KruskalWallis秩和检验，以P＜005为差异有统计学意义。SCysC与Scr、eGFR的相关性采用pearson相关分析。
胱抑素C(Cys-C)测定标准操作程序
胱抑素C（Cys-C）测定标准操作程序 1.摘要 胱抑素C检测常用于肾功能指标的监控，肾移植患者的术后检测和透析患者肾功能检测。 2.适用范围 程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清、血浆中CysC的浓度。 3.职责 使用AU5811自动生化分析仪进行测定胱抑素C浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,科室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。 4.检测方法 上海科华生物工程股份有限公司生产的胱抑素C（CysC）试剂盒采用的是乳胶增强免疫透射比浊法。 5.原理 待测人血清的胱抑素C（CysC）与试剂中包被于聚苯乙烯粒子上的纯化羊抗CysC抗体结合，形成不溶性免疫复合物，该免疫复合物由于包被的聚苯乙烯粒子而使浊度进一步放大，在羊抗CysC抗体足量的情况下，其浊度与人血清中CysC含量成正比，与相同条件下操作的校准品比较，通过剂量/反应曲线求出样本中CysC的含量。 6.仪器 AU5811自动生化分析仪 7.试剂 7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2试剂瓶内主要成分：Tris-HCL(PH7.4)缓冲液、0.1M 的NaN3、0.1M包被了羊抗CysC 抗体的聚苯乙烯粒子 7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为 12个月。试剂不可冰冻。 7.4试剂准备：试剂为即用式。 8.标准品和质量控制
8.1校准程序：使用上海科华公司提供的标准品对自动分析仪进行校准。 按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品响应量通过合适的数学模型绘制校准曲线。 8.2质控品：无。 8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。 8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》 8.5室间质评： 9.标本 、肝素钠抗凝的血浆样本，避免溶血。 9.1标本为新鲜血清样本，或采用EDTA·Na 2 若不能及时测定，请将血清与凝血块分离或相应抗凝剂抗凝的血浆与血细胞分离后的上清样本，尽快置于-20℃保存，避免反复冻融。 9.2标本拒收：由实验室人员核收送来标本，如有溶血、已被污染、标识不清或与申请 单不符状况，一律要求重新留取标本。 9.3标本处理：收集编号后离心获取血清/血浆以备检测使用。 10.测定程序 10.1分析参数：详见参数表。 10.2操作步骤：签收样本→离心→上机检测→审核报告→签发报告→标本保存。 10.3获取结果：在AU5811仪器上或AU5811传送的中文系统电脑上查找相应结果。 10.4结果报告：对检验后的结果进行审核，系统分析，判断结果的可报告性。可报告的 结果直接发报告，对不可报告结果进行复检后发报告。 11.计算 标准品校准项目后，测定室内质控，质控结果符合质控要求后方可测定样本。无需手工计算，每个标本的结果自动打印 12.废液处理 参阅检验科《安全手册》废液处理标准规程处理。 13.操作性能 13.1可报告范围：本法对CysC检测范围为0-8.00 mg/L。当样品测定值超过上限时，应 将样品用9 g/L氯化钠溶液作倍比稀释，重新测定，结果乘以稀释倍数。 13.2特异性/干扰：当样品中胆红素浓度≤485umol/L，血红蛋白浓度≤10g/L，乳糜≤2% 时对测定结果的影响可忽略。
不同时期糖尿病肾病患者血清HCY、Cys C含量检测的临床意义
不同时期糖尿病肾病患者血清HCY、Cys C含量检测的临床意义目的血清同型半胱氨酸（HCY）和胱抑素C（Cys C）的水平在不同时期 糖尿病肾病（DN）患者中的表达变化和意义。方法采用酶法和免疫比浊法检测80例糖尿病肾病患者和80例正常健康者中血清HCY和Cys C水平。结果与对照组相比，DN患者血清中HCY和Cys C水平升高，并且与病情的严重性相关（均P＜0.01）；同时DN患者血清中HCY和Cys C水平呈显著正相关（r=0.679，P＜0.01）。结论随着DN的进展，血清HCY和Cys C含量升高，且与DN病变严重程度相关，血清HCY和Cys C含量检测有助于判断DN病情的程度。 [Abstract] Objective To explore expression changes of HCY and Cys C level in serum of patients with diabetic nephropathy （DN）in different periods and its clinical significance. Methods HCY and Cys C level in serum of 80 DN patients and 80 healthy patients were measured by enzymatic method and immune turbidimetry. Results The HCY and Cys C level in serum of DN patients was increased when compare to the control group and it was related to the severity of the disease （P＜0.01）. At the same time，the HCY and Cys C level in serum of DN patients was significant positive correlation （r=0.679，P＜0.01）. Conclusion The HCY and Cys C level in serum increase with the development of DN and it is related with the severity of the disease. Content measurement of HCY and Cys C in serum can help to predict the severity of disease. [Key words] Diabetic nephropathy；HCY；Cys C 糖尿病肾病（diabetic nephropathy，DN）是糖尿病（DM）最严重的并发症之一，是由于慢性微血管的病变导致的并发症之一，其后果会造成慢性肾功能衰竭。近来有研究发现，在糖尿病患者中高同型半胱氨酸血症是独立于其它危险因子的最强危险因素[1]。CysC清除的唯一器官是肾脏循，因此血清CysC是评价肾功能早期损害的灵敏标记物，可用于检测DM的早期肾损害[2]。本研究通过检测DN患者不同时期血清HCY和CyC的浓度的差异表达，早期监测肾脏损害，旨在能够可逆DN肾脏的病变，对DN肾病的预防和进展具有极其重要意义。 1 资料与方法 1.1 一般资料 2013年6月～2014年2月入住我院的DN患者80例，其中男37例，女43例，平均年龄（50.8±15.8）岁，根据Mogensen糖尿病肾病诊断标准及糖尿病肾病分期[3]：Ⅰ期（n=18）为糖尿病肾病前期，以高滤过和肾脏增大为特征，表现为GFR升高；Ⅱ期（n=22）为糖尿病肾病隐性期，运动后可有尿微量白蛋白排泄率的增高，开始出现肾小球结构损害；Ⅲ期（n=25）为早期DN期，尿微量白蛋白排泄率持续在20～200μg/min；Ⅳ期（n=15）为临床糖尿病肾病期，尿微量白蛋白排泄率大于200μg/min，或者尿蛋白总量>0.5g/24h，肾小球滤过率下降，
血清胱抑素C在早期糖尿病肾病患者的临床表达
血清胱抑素C在早期糖尿病肾病患者的临床表达 刘会萍 【摘要】目的探讨血清胱抑素C(CysC)对糖尿病早期肾损害的诊断价值.方法分别检测53例2型糖尿病患者(研究对象)和20例健康人员(对照组:N组)的血清CysC、β2-MG、血清肌酐(Scr)、内生肌酐清除率(Ccr)等相关指标进行比较.结果CysC、β2-MG、Ccr均与VAER有良好的相关性,CysC与相关指标的相关性最强.结论血CysC较血肌酐、内生肌酐清除率能更敏感、更准确的反映2型糖尿病早期肾损害,是肾脏早期损伤的重要标志. 【期刊名称】《中国实用医药》 【年(卷),期】2012(007)009 【总页数】2页(P14-15) 【关键词】糖尿病肾病;血清胱抑素C;β2-微球蛋白;早期诊断 【作者】刘会萍 【作者单位】261021 山东省潍坊市潍城区经济开发区人民医院 【正文语种】中文 糖尿病肾病(diabetic nephropathy，DN)是糖尿病(diabetes mellitus，DM)常见的微血管并发症，也是导致慢性肾衰竭的最主要的因素之一。糖尿病肾病一旦发展到终末阶段，往往较其他的肾脏病更加难以控制，预后不良，是糖尿病最常见致死原因之一。然而，早期糖尿病肾病有一定的可逆性，因此，早期诊断糖尿病肾损
害并进行有效干预，对糖尿病肾病患者延缓病情进展、改善预后有极其重要的意义。 1 研究对象 选取我院住院及门诊诊治的2型糖尿病患者53例，所选患者均符合世界卫生组织(WHO)1999年提出的糖尿病分型及诊断标准。其中男35例，女18例，年龄(60.28±4.80)岁，病程1～27年。应用口服降糖药物或皮下注射胰岛素治疗。排 除急慢性感染、应用大剂量糖皮质激素、高血压病患者及使用血管紧张素转化酶抑制剂或血管紧张素II受体阻断剂因而对尿蛋白量产生影响的患者及其他影响尿蛋 白的因素。并且患者血肌酐在133 μmol/L以下。正常对照组20例为我院体检中心健康体检人群。根据尿白蛋白排除率(UAER)将所选取的2型糖尿病患者分为3组:A组:正常白蛋白尿期:UAER＜20 μg/min;B组:持续微量白蛋白尿期:UAER 在20～200 μg/min;C组:大量白蛋白尿期:UAER＞200 μg/min。 2 研究方法 2.1 观察指标检测血清胱抑素 C、β2-微球蛋白、尿白蛋白、血尿素氮、血肌酐，并计算内生肌酐清除率。 2.2 试剂与测定方法血清胱抑素C采用透射比浊法，尿白蛋白采用散射比浊法， 试剂均为北京九强生物技术有限公司生产。血肌酐采用吸收光谱分析法，试剂由德赛诊断系统(上海)有限公司生产。血β2-微球蛋白采用乳胶凝集比浊法。试剂由威特曼生物科技南京有限公司生产。糖化血红蛋白采用离子交换色谱分析法，试剂由Bio-rad公司直接生产。 2.3 相关数值计算公式及单位内生肌酐清除率:采用C-G公式。Ccr= [(140-年 龄)×体重/(72×血肌酐)](女性×0.85)。BMI=体重/身高2，其中体重以Kg为单位，身高以m为单位。体重指数以Kg/m2为单位。 2.4 标本采集和处理尿标本采集选用首次中段清洁晨尿，留尿前72 h避免剧烈运动。女性患者避免月经期留尿。尿液排出后在60 min内送检。血液标本均选取空
血清胱抑素C和β2—微球蛋白对糖尿病早期肾病的诊断评价
血清胱抑素C和β2—微球蛋白对糖尿病早期肾病的诊断评价 【摘要】目的探讨监测血清胱抑素C（CysC）和β2-微球蛋白在糖尿病早期肾病的临床意义。方法采集糖尿病肾病（DN）患者50例，糖尿病未发肾病（DM）患者50例和正常对照组健康人员50例血清，用免疫比浊法检测血清CysC，和β2-微球蛋白，同时用酶法检测Cr的浓度，对所测结果进行统计分析。结果糖尿病肾病（DN）组和糖尿病未发肾病（DM）组血清CysC和β2-微球蛋白水平明显高于对照组，P＜0.01。糖尿病未发肾病（DM）组在血肌酐阴性的条件下血清CysC和β2-微球蛋白阳性率分别为44%和36%，明显高于肌酐阳性率。结论血清CysC和β2-微球蛋白在肾损伤早期比肌酐升高更明显，是评价早期肾病的敏感特异性指标，对于临床上发现糖尿病早期肾损害具有指导意义。 【关键词】胱抑素C；β2-微球蛋白；早期肾损害 糖尿病是一种以慢性高血糖为特征的慢性消耗性疾病，糖尿病肾病（diabetics nephropathy，DN）是糖尿病最严重的慢性并发症之一，对患者进行早期诊断和采取有效的治疗与监控，可以有效的预防糖尿病并发症的发生和发展[1]，明显改善患者预后并延长其寿命。近年来，有研究表明半胱氨酸抑制酶C（Cystatin C），β2-微球蛋白为检测肾小球率过率的可靠新指标，其监测早期肾损害的灵敏度远高于肌酐和尿素，现报告如下。 1 资料与方法 1. 1 一般资料选择2011年1月～2011年8月在本院治疗的糖尿病未伴糖尿病肾病（DM）的患者50例，其中男28例，女22例，年龄45～60岁，平均（53.2±6.7）岁，经治疗血糖均控制在正常范围，血尿素、肌酐等肾功能指标均正常。选择同时期住院治疗的糖尿病肾病（DN）患者50例为糖尿病肾病组，其中男26例，女24例，年龄42～65岁，平均（5 2.8±5.6）岁，病程均＞2年并出现持续性或间歇性蛋白尿、肾功能障碍等，符合糖尿病肾病的诊断标准。经治疗血糖控制在正常范围。所有糖尿病患者均符合世界卫生组织（WHO）1999年提出的糖尿病诊断及分型标准[2]。另选择在本院体检的健康体检者50例作为对照组，其中男27例，女23例，年龄40～60岁。平均（54.3±5.5）岁，肾功能正常，无糖尿病，高血压，恶性肿瘤等能引起肾功能损害的疾病。3组患者性别比、平均年龄等情况比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。 1. 2 标本采集3组受检者均采集晨起空腹静脉血3 ml，离心后分离血清，要求无脂血，无溶血，无黄疸，并在2 h内完成测定。 1. 3 检查方法和仪器CysC采用免疫透射比浊法，参考范围0.6～1.55 mg/L；β2-微球蛋白测定采用免疫透射比浊法，参考范围0～3 mg/L；血肌酐采用酶法，参考范围36～132 μmol/L。所用仪器为日立7660，试剂为上海合富公司提供的原装试剂。
免疫比浊法测定的胱抑素C试剂盒性能验证和评价
免疫比浊法测定的胱抑素C试剂盒性能验证和评价 朱薇;王静;王丽娜;乔正梅 【摘要】目的对使用免疫比浊法测定的胱抑素C(Cys-C)试剂盒进行实验室验证和评价,以确定该试剂盒分析性能的可靠性,评价其是否符合临床应用需要.方法根据美国临床实验室标准协会颁布的《临床化学设备操作精密度评价核准指南》、《定量分析方法的线性核准指南》、《临床化学干扰试验核准指南》要求,分别对使用免疫比浊法Cys-C试剂盒的准确度、精密度、线性范围、抗干扰物质进行试验.结果准确度测量:高水平质量控制偏差为2.76,低水平质量控制偏差为0.42,偏差 <10%.精密度测量标准差为0.32,变异系数为0.45%,偏差<5%.线性范围:在理论水平0~200范围内,相关系数Y=0.9917 X+0.4681, r2=1呈线性关系.干扰物质血红蛋白测量值最高105.5 mg/L,最低102.5 mg/L;胆红素测量值最高104.0 mg/L,最低41.0 mg/L;抗坏血酸测量值最高104.0 mg/L,最低86.0 mg/L;未对试验产生干扰.结论该试验使用的Cys-C检测试剂盒在准确度、精密度、线性范围、抗干扰物质试验等方面分析性能可靠,能满足临床应用需要和保证课题数据准确性的要求.%Objective To conduct the laboratory validation and evaluation on cystatin C(Cys-C)reagent kit by using the immu-noturbidimetry assay to determine the reliability of this reagent kit analytical performance and to evaluate whether,guaranteeing the project data accuracy.Methods The accuracy,precision,linearity and anti-interference materials of the Cys-C reagent kit(immuno-turbidimetry)were detected according to the standard requirements of EP 5-A,EP6-A and EP7-A promulgated by CLSI.Results The high level of quality control deviation in the accuracy measurement was 2.76 and which of the low level was 0.42,deviation<10%;the precision
建立胱抑素C试剂盒不确定度分析方法
建立胱抑素C试剂盒不确定度分析方法 目的以胱抑素C试剂盒为例，探索体外诊断试剂的不确定度方法。方法笔者首先根据体外诊断试剂盒溯源过程的特点，将不确定度的定义解释为：在某概率下，测量值的估计区间与真实值的估计区间之间最大的差距。本研究，笔者首先设计试验确定了测定校准过程中引入的误差值，然后将涉及的标准误差代入测量不确定度表示指南规定的误差传播公式，最终计算得到了测量结果的不确定度。结果本研究针对产品的特点，提出了一个适用于计算体外诊断试剂不确定度的方法，使用这一方法得出胱抑素C试剂盒测量样品浓度为两个浓度时的扩展不确定度。结论计算体外诊断试剂不确定度的一项重要内容是确定校准过程引入的误差，本研究提供的计算方法具有很强的可操作性。 标签：胱抑素C；体外诊断试剂；溯源；不确定度 近年来研究表明胱抑素C（Cys c）在评估肾小球过滤速度（GFB）中优于血肌酐，Cys c在检测方法上已从非均相法发展到自动化快速均相检测法，颗粒增强透射免疫比浊法是以多克隆抗体为基础的改良免疫比浊分析法，整个分析过程只需几分钟，可利用生化分析仪进行比浊测定，这些研究为Cys c在临床广泛应用奠定了基础[1-2]。溯源是通过一条具有规定不确定度的不间断的比较链，使测量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性[3]。用于体外诊断的医学器具，欧盟指出“溯源性”为具体的必备条件之一[4]。因此对体外诊断试剂进行溯源性分析是必然的趋势。 测量不确定度表示指南（GUM）[5]是由国际标准化组织（ISO）、国际电工委员会（IEC）、国际计量局（BIPM）、国际法制计量组织（OIMI）、国际理论化学与应用化学联合会（IUPAC）、国际理论物理与应用物理联合会（IUPAP）、国际临床化学联合会（IFCC）等7个最具权威性的国际学术团体联合公布的标准。我国在1999年将其等同转换为国家标准，编号为JJF1059-1999[6]。根据这一标准测量不确定度的定义是：表征合理赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数。为了使IVD试剂溯源过程更加容易理解，使溯源过程更具可操作性，本研究在不违背原定义的情况下将其解释为：在某概率下，测量值的估计区间与真实值的估计区间之间最大的差距。这一差距涵盖了被测量值的分散性，分散性越大不确定度越大。 目前溯源理论和技术已经成熟，有很多研究可以借鉴[7-8]。但是体外诊断试剂又有其特殊性，因为在进行分析之前，首先要对测量系统进行校准（定标），以消除系统误差。然而，定标品存在的不确定性，往往被人们忽略。本研究正是考虑了这一实际情况，并结合胱抑素C试剂盒定标的特点，提出了一个比较合适的方法用来评估定标过程引入的误差，从而使试剂的不确定度更加完整。 1材料与方法 1.1仪器