乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分析
乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分
析
目的乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白结果的相关性分析；方法随机收集239例住院患者，采用两种检测方法测定C-反应蛋白浓度，并比较其检测结果相关性；结果当C-反应蛋白浓度>20mg/L（r=0.944）时乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法相关性较C-反应蛋白浓度20mg/L）86例进行统计分析。
1.4统计方法计量资料用x±s表示，采用SPSS19.0对数据进行统计分析。
2结果
两种方法对不同浓度的CRP检测比较，由表1可见，在低、中值时，全血CRP与血浆CRP相关性不如高值相关性好，相关系数分别为r=0.786、0.822、0.944。具有统计学意义，见表1。
表1可得：不同的方法检测CRP结果有一定的差异，需要早日完善其检测的标准化，当CRP低浓度表达时采用速率散射免疫比浊法检测更为敏感和准确，可认为两种检测方法测定CRP结果有差异。
3讨论
CRP是由肝脏细胞合成和分泌的非特异性炎症反应因子。IL-6、IL-1、TNF-a 等能够调节其生成。CRP的高低与急性冠脉综合征病情的严重程度存在一定的相关性，可作为监测病情、预测冠心病严重性的常规指标之一，对观察疗效、判断预后也具有重要意义[4]，同时，血浆CRP水平与青年脑梗死患者病情的发展、预后也密切相关，是青年脑梗死的危险因素，检测其含量可判断患者脑梗死的严重程度及预后[5]。
乳胶增强透射免疫比浊法基本原理是将抗体吸附于乳胶颗粒上，当抗原抗体结合时，乳胶随之发生凝集反应，形成不同大小的乳胶颗粒，从而阻断光线的透射，通过透射光线的减弱程度判断乳胶凝集的程度。其具有快速、准确和简便的特点[6]。速率散射免疫比浊法是以一定波长的光沿水平轴照射，当碰到免疫复合物后将可导致光线的散射，抗原抗体复合物的形成速率与光的散射强度成正比，还能动态测定抗原抗体结合反应效率。
在本研究中发现，当CRP浓度小于20mg/l时，乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白相关性低，P＜0.05，具有统计学意义，两种方法检测CRP结果具有显著差异。当CRP浓度大于20mg/l时，二者检测方法相关系数为0.944，说明这两种检测方法的检测效率有所提高。根据以往的文献报道及本实验室经验，我们认为当CRP低浓度表达时，乳胶增强透射免疫比
浊法由于抗原抗体结合较少，乳胶凝集物形成较小，对光线的阻断能力较弱，而速率散射免疫比浊法可以通过检测抗原抗体结合速率，而不依赖于凝集物的大小来评估CRP的浓度，这也与本实验中随着CRP浓度的升高，两种检测方法的相关系数增大相吻合，所以我们认为低浓度的CRP表达，速率散射免疫比浊法较乳胶增强透射免疫比浊法更敏感和准确。
目前，临床应用的测定CRP方法较多，但不同检测方法之间，不同测定仪之间存在着差异，这不利于临床对该指标的有效应用。此外，实验室诊断某个体是否处于健康状态，其判断依据是指标的临界值。然而，不同的检测体系中参考值的范围不一致，这也会给临床诊断造成困难。因此，CRP测定方法标准化问题有待于医学工作者进一步的研究和探讨。美国CAP室间质评也将引入hs-CRP 作为一个独立的分析调查项目，美国CDC目前正在进行hs-CRP免疫测定的标准化工作，WHO已有CRP免疫测定的国际参考标准85/506，IFCC/ BCR/ CAP 已有次级标准-血浆蛋白CRM 470（CRP是其中14种项目之一，美国Dade Behring 公司生产），这些都为国内外开展hs-CRP测定的标准化工作提供了条件。
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高敏C-反应蛋白测定试剂盒(胶乳免疫比浊法)产品技术要求首医
高敏C-反应蛋白测定试剂盒（胶乳免疫比浊法） 适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人体血清中的C反应蛋白的含量。 1.1包装规格 试剂1:2×60mL，试剂2:2×20mL；试剂1:1×60mL，试剂2:1×20mL 1.2产品组成 试剂1：PBS 100mmol/L，PEG 4%。 试剂2：羊抗人CRP抗体胶乳颗粒适量，NaN 0.1%，吐温-20 0.2%。 3 2.1 外观 试剂1为无色透明溶液；试剂2为稍有混浊的透明液体；试剂盒各组分齐全、完整，液体无渗漏，包装标签文字符号清晰牢固不易脱落，外包装完整无破损。 2.2 装量 液体试剂的净含量应不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在570nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应不大于1.0。 2.4 分析灵敏度 测定1.0mg/L C反应蛋白时，吸光度变化值ΔA≥0.01。 2.5准确度 采用比对试验，相关系数r≥0.975,[0.1，3]mg/L区间内，线性绝对偏差应不超过±0.45mg/L；(3，300]mg/L区间内，线性相对偏差应不超过±15%。 2.6 精密度 2.6.1 重复性
用血清样品或质控样品重复测试所得的变异系数（CV）应不大于8.0%。2.6.2 批间差 试剂（盒）批间相对极差应不大于10.0%。 2.7线性 试剂线性在[0.1，300]mg/L区间内： a) 线性相关系数|r|应不小于0.990； b) [0.1，3]mg/L区间内，线性绝对偏差应不超过±0.45mg/L；(3，300]mg/L区间内，线性相对偏差应不超过±15%。 2.8稳定性 原包装试剂2～8℃避光保存有效期12个月，到效期末进行检验，检验结果应符合2.3、2.5、2.7的要求。
乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分析
乳胶增强透射比浊法和速率散射比浊法检测C—反应蛋白相关性分 析 目的乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白结果的相关性分析；方法随机收集239例住院患者，采用两种检测方法测定C-反应蛋白浓度，并比较其检测结果相关性；结果当C-反应蛋白浓度>20mg/L（r=0.944）时乳胶透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法相关性较C-反应蛋白浓度20mg/L）86例进行统计分析。 1.4统计方法计量资料用x±s表示，采用SPSS19.0对数据进行统计分析。 2结果 两种方法对不同浓度的CRP检测比较，由表1可见，在低、中值时，全血CRP与血浆CRP相关性不如高值相关性好，相关系数分别为r=0.786、0.822、0.944。具有统计学意义，见表1。 表1可得：不同的方法检测CRP结果有一定的差异，需要早日完善其检测的标准化，当CRP低浓度表达时采用速率散射免疫比浊法检测更为敏感和准确，可认为两种检测方法测定CRP结果有差异。 3讨论 CRP是由肝脏细胞合成和分泌的非特异性炎症反应因子。IL-6、IL-1、TNF-a 等能够调节其生成。CRP的高低与急性冠脉综合征病情的严重程度存在一定的相关性，可作为监测病情、预测冠心病严重性的常规指标之一，对观察疗效、判断预后也具有重要意义[4]，同时，血浆CRP水平与青年脑梗死患者病情的发展、预后也密切相关，是青年脑梗死的危险因素，检测其含量可判断患者脑梗死的严重程度及预后[5]。 乳胶增强透射免疫比浊法基本原理是将抗体吸附于乳胶颗粒上，当抗原抗体结合时，乳胶随之发生凝集反应，形成不同大小的乳胶颗粒，从而阻断光线的透射，通过透射光线的减弱程度判断乳胶凝集的程度。其具有快速、准确和简便的特点[6]。速率散射免疫比浊法是以一定波长的光沿水平轴照射，当碰到免疫复合物后将可导致光线的散射，抗原抗体复合物的形成速率与光的散射强度成正比，还能动态测定抗原抗体结合反应效率。 在本研究中发现，当CRP浓度小于20mg/l时，乳胶增强透射免疫比浊法和速率散射免疫比浊法检测C-反应蛋白相关性低，P＜0.05，具有统计学意义，两种方法检测CRP结果具有显著差异。当CRP浓度大于20mg/l时，二者检测方法相关系数为0.944，说明这两种检测方法的检测效率有所提高。根据以往的文献报道及本实验室经验，我们认为当CRP低浓度表达时，乳胶增强透射免疫比
胶乳增强免疫比浊反应原理
胶乳增强免疫比浊反应原理： 免疫比浊反应原理： 当样本中的待测抗原与试剂中的特异性多克隆抗体相遇后，即可发生特异性的结合反应（一个抗原具有多个不同的抗原决定簇（反应位点），可以连接多个不同的对应位点抗体；而抗体具有两个相同的抗原结合位点，可以同时结合两个待测抗原；），从而形成网状的抗原-抗体分子复合物，引起溶液中浊度的变化，通过测试溶液中透射或散射的吸光度变化，从而确定样本中待测抗原的浓度； 胶乳增强免疫反应比浊原理： 基于免疫反应原理，和纳米颗粒的特殊效应（表面效应、量子尺寸效应、小尺寸效应、宏观量子隧道效应），不只可以检测样本中的完全抗原，也可以检测样本中的半抗原、抗体，从而引起浊度变化，此时浊度与空白样本的不同作为待测物浓度的检测依据。 免疫透射比浊法 原理： 可溶性抗原与相应抗体反应后形成的免疫复物，使介质浊度发生改变，光线通过抗原抗体反应后的溶液时，被其中的免疫复合物微粒吸收，在保持抗体过量的情况下，吸光度（A 值）与免疫复合物量呈正相关。透射光强度和形成的免疫复合物呈反比。 优点：透射比浊法灵敏度比单扩高5-10倍，重复性好，结果准确，操作简便，且能用全自动或半全自动生化分析仪进行检测。 不足： ①抗体用量较大； ②溶液中存在的抗原-抗体复合物分子应足够大（35-100nm)，分子太小则阻挡不了光线的通过；数量要足够多，如果数量太少，则溶液浊度变化太小，对光通量影响不大。灵敏度较散射比浊法低； ③透射比浊测定在抗原-抗体反应的第二阶段，需在抗原抗体反应达到平衡后进行检测，耗时较长。 胶乳增强免疫比浊法 在一般的透射比浊法中，少量小分子免疫复合物极难形成浊度，要形成较大的免疫复合物，参与反应的抗原、抗体量应较大（浓度高），这无法满足高灵敏度检测项目的要求。胶乳增
免疫比浊法测C反应蛋白
免疫比浊法是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是：当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂（聚乙二醇等）的作用下，自液相析出，形成微粒，使反应液出现浊度。当抗体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着检样中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照，即可计算出检样中抗原的含量。 抗体（Ab）与可溶性抗原（Ag）反应，形成一定结构的免疫复合物，成为悬浮于反应溶液中的微粒。在沉淀反应中形成的复合物微粒具有特殊的光学性质，可用仪器检测，提高了检测的速度、灵敏度和易操作性。 免疫比浊测定注意事项： 1、抗原或抗体量大大过剩，可出现可溶性复合物，造成误差。 2、应维持反应管中抗体蛋白始终过剩。 3、易受到脂血的影响。 分类 1.免疫透射比浊法抗原抗体结合后，形成免疫复合物，在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时，可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多，光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值，复合物的含量与光密度值成正比，同样当抗体量一定时，光密度值也与抗原含量成正比。本法较单向琼脂扩散试验和火箭电泳等一般免疫化学定量方法敏感、快速简便，但要求免疫复合物的数量和分子量达到一定高度，否则就难以测出。 2.免疫散射比浊法一定波长的光沿水平轴照射，通过溶液使遇到抗原抗体复合物粒子，光线被粒子颗粒折射，发生偏转，光线偏转的角度与发射光的波长和抗原抗体复合物颗粒大小和多少密切相关。散射光的强度与复合物的含量成正比，即待测抗原越多，形成的复合物也越多，散射光也越强。散射光的强度还与各种物理因素，如加入抗原或抗体的时间、光源的强弱和波长、测量角度等密切相关。散射比浊法又分为速率散射比浊法和终点散射比浊法。 3.免疫胶乳比浊法胶乳比浊法即是将待测物质相对应的抗体包被在直径为15－60nm的胶乳颗粒上，使抗原抗体结合物的体积增大，光通过之后，透射光和散射光的强度变化更为显著，从而提高试验的敏感性。 实验八免疫比浊法测定C-反应蛋白 【原理】 血清C反应蛋白（CRP）与试剂中抗人CRP抗体结合，形成免疫复合物，一起吸光度增加，在波长340nm和700nm处测定免疫复合物浊度。根据吸光度增加
体外诊断试剂 C反应蛋白(CRP)测定试剂盒(胶乳增强免疫比浊法)临床评价报告-血清
体外诊断试剂临床评价报告 产品名称：C反应蛋白测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法） 标本类型：血清标本 方案版本：V1.0 方案日期：2018年02月28日 试验时间：2018年03月至2018年03月 试验地点：********医院 产品注册申请人（盖章）：********生物科技有限公司 注册申请联系人：******** 注册申请联系人电话：******** 报告版本：V1.0 报告日期：2018年03月29日 保密声明 本报告中所包含的所有信息的所有权归********生物科技有限公司。因此，仅提供给研究者和监督管理部门等相关的医疗机构审阅。在未得到申办者书面批准的情况下，严禁将任何信息告知与本研究无关的第三方。
研究摘要 目的：评价********生物科技有限公司生产的C反应蛋白测定试剂盒（胶乳增强免疫比浊法）用于血清C反应蛋白检测时，其诊断检测能力与已上市的同类生化试剂盒无差异。 方法：本次临床试验采用同步盲法对比试验。 结果：********医院共检测124例受试者样本，按方案剔除标准共剔除样本3例，其中0例为线性范围外标本，3例为离群值标本，剔除率为2.42%，最终纳入分析121例，其中男性59例，女性62例，平均年龄34.69±21.31岁（包括9例新生儿）。 本次临床试验结果的Pearson相关系数接近1，说明两种试剂的相关关系越 密切。回归方程的截距（a）的95%CI包括0，斜率（b）接近1，说明两种试 剂的一致性比较好。根据说明书中对准确度允许偏差的标准，医学决定水平处偏 倚均在允许偏差范围内。 考核试剂与参比试剂检测浓度的差值Bland-Altman散点图显示：两种试剂检测浓度差值为-0.0534±0.8428mg/L（均值±标准差），两种试剂检测浓度差值的均值±1.96SD范围在-1.7390mg/L到 1.6322mg/L之间。超出置信区间的百分比为：0.00%。考核试剂与参比试剂检测浓度的差值百分比Bland-Altman散点图显示：两种试剂检测浓度差值百分比为-0.2060±7.5190%（均值±标准差），两种试剂检测浓度差值百分比的均值±1.96SD范围在-15.2441%到14.8321%之间。超出置信区间的百分比为：0.00%。经计算，考核试剂定性检测结果参考范围外标本符合率为100.00%（96.34%,100.00%），参考范围内标本符合率为98.70%（94.11%,99.72%），总符合率为99.17%（94.87%,99.97%）。进行Kappa一致性分析，Kappa值k=0.9822。对含干扰物质样本的检测，考核试剂和参比试剂检测结果无差异，表明考核试剂和参比试剂的抗干扰性能有较好的一致性。 结论：本中心在本次临床试验共检测121例有效样本，通过对考核试剂和参 比试剂检测浓度的Pearson相关系数、回归方程、Bland-Altman图进行分析，显 示两种试剂检测血清C反应蛋白浓度有良好的一致性。符合率及Kappa一致性 分析显示考核试剂与参比试剂对结果的判断有良好的一致性。
胶乳免疫比浊法
胶乳免疫比浊法 胶乳免疫比浊法（immunoelectrophoresis,IPE）是一种用于测 定机体内抗原、抗体和其他物质浓度的快速、准确的分析技术，它被广泛应用于临床医疗、疾病研究、环境检测、食品安全等领域。 这种免疫比浊法是由美国科学家史蒂夫布赖斯特（Steve Briese）于1959年发明的，它利用了免疫学联合电泳来检测和定量抗体和抗原。该方法主要由以下几步组成：1）抗体样本和抗原样本混合，使 双方发生交联反应；2）将反应液置于一特定的电泳板上，使用电流 将未发生免疫反应的抗原和抗体分别迁移到不同的比浊带内；3）用 后胶乳法对免疫比浊带进行处理，使抗体和抗原相应的结合；4）在363nm波长下记录比浊带的位置，以测定抗体的浓度。 由于胶乳免疫比浊法抗体定量分析的准确性、灵敏性和特异性比其他检测方法要强，因此，该方法已经被广泛用于定量检测机体内抗体类分子与抗原之间的相互作用。 在临床医疗中，胶乳免疫比浊法常用于检测抗球蛋白（IgG）、抗体调节蛋白（IgA）、抗体结合蛋白（IgM）、抗原抗体复合物等，也可以用于检测肿瘤标志物和糖皮质激素（ACTH）等激素。此外，这种技术还被用于研究疾病的免疫学机制，检测血清中的抗原和抗体，以及免疫诊断某些疾病。 此外，由于胶乳免疫比浊法可以快速、准确的检测抗体，因此也被广泛用于食品安全检测中。例如，它可以用来检测食品中的抗生素残留、致敏物质、化学污染物等，以保证食品安全。
通过胶乳免疫比浊法可以快速准确地测量抗原和抗体的浓度，该方法在临床医学、疾病研究、环境检测和食品安全等领域具有重要的应用价值。然而，胶乳免疫比浊法也存在一些不足，例如，由于测量物质的相互作用太多，检测结果容易受干扰。此外，某些抗体、抗原和其他物质在复杂体系中可能会发生复合反应，从而使得结果不准确。 因此，在使用胶乳免疫比浊法检测抗原、抗体和其他物质浓度时，应该结合其他技术，如免疫荧光定量技术、免疫酶联技术等，进行多种检测，以提高结果的准确性和可靠性。 总的来说，胶乳免疫比浊法是一种强大的分析技术，它具有准确性、灵敏性、特异性和快速性，应用于临床研究、环境检测和食品安全领域有着重要的意义。
C反应蛋白(超敏CRP)检测--散射比浊法
1.预期用途 适用于人体血液、体液中特定蛋白含量测定。 2.检测原理 用散射比浊法，可溶性抗原与特异性的抗体反应形成不溶性复合物，当光线通过反应悬液时发生散射并由特定蛋白分析仪检测到。散射光值的多少与测试样品中的特定蛋白浓度成一定比例，仪器会自动计算出样品中特定蛋白浓度。 3.储存条件及有效期 储存在（2-8）℃，无腐蚀性气体的冷库中，试剂盒保质期为一年；开启后的缓冲液和样品处理液可保持稳定3个月，质控和抗血清可稳定1个月。 4.样本要求 采用新鲜手指血，或者EDTA或肝素抗凝血进行测定，抗凝血在（2-8）℃储存最长不超过72h，测定当天稀释样本。 5.适用仪器 适用于特定蛋白分析仪Nephstar Plus。 6.检验方法： （1）、特定蛋白分析仪Nephstar Plus开机，刷全程全血C反应蛋白磁卡更新，核对试剂批号等信息。 （2）、将试剂平衡至室温后，取2ul全血标本加入预分装处理缓冲液的测量杯中，轻轻摇匀，并将测量杯放进仪器的测量孔。 （3）、屏幕显示“请加入试剂”。 （4）、取60ul抗血清加入测量杯中并同时按下反应启动键。 （5）、仪器自动进行检测。 7.参考范围： （1）、根据CRM470标准，健康成人血清CRP参考范围为:<5mg/L，而根据文献资料，超敏CRP（hsCRP）<3mg/L,建议各实验室根据所检测的患者群体建立自己的参考范围。 （2）、诊断和治疗不能只依赖CRP检测结果。必须同时考虑临床病史和其他实验室检测结果。 8.检验结果的解释： 1、C反应蛋白是一种经典炎症反应急性期蛋白，在急性炎症时其浓度升高和降低都比红细胞沉降率快。CRP升高表现为非特异性，在多种组织受到侵犯时，其浓度都可升高，例如在感染性疾病，风湿性关节炎，心肌梗塞等，测定CRP 对于追踪随访和监测这些疾病，以及在某些情况下鉴别诊断都非常有用。 超敏CRP是根据测定方法更敏感而命名，称为高敏感或超敏感CRP，国内一般简称为超敏或高超敏CRP。 在新生儿实践中发现，一般新生儿血清CRP水平小于2mg/L,大于此值即与细菌感染的严重程度有关。超敏CRP还在冠心病、中风、周围血管栓塞等疾病预测中发挥重要作用，对于心血管疾病危险性评估具有重要意义。
C反应蛋白的检测与临床应用进展
C反应蛋白的检测与临床应用进展 C反应蛋白( CRP) 是人体急性时相蛋白( APP) 中最主要、最敏感的标志物 之一。在临床上常作为一种检测感染过程和自身免疫疾病的工具, 如病毒与细菌 的鉴别诊断、疾病治疗监测、系统性红斑狼疮( SLE) 等。近年来, 随着研究的 不断深入和 CRP 检测手段的不断改善, 特别是运用高敏感方法测出的超敏C反 应蛋白( hs CRP) 可作为冠状动脉疾病( CVD)的一种独立危险因素, 也可作为心 血管疾病和动脉硬化的预测指标] , CRP已逐渐引起临床的重视。现对 CRP 的生 物化学特征、检测方法及临床应用等进行综述如下。 1 CRP 的生物化学特征 1. CRP的发现 CRP是1930年由Tillett和Francis发现的肺炎患者血清中一 种与肺炎球菌(现称肺炎链球菌)非特异性的菌体多糖成分C多糖(CPS)发生沉淀 反应的物质。 CRP的来源与分布 CRP主要由肝细胞在白细胞介素6、白细胞介素1、肿瘤坏死因子刺激下合成, 炎性反应局部巨噬细胞也可少量产生。正常合成 率 1~ 10 mg/ d, 急性炎性反应时每天合成大于1 g。CRP不能通过胎盘, 在体 内分布甚广, 除血液外, 胸腔积液、腹水、心包液、关节液中均可测出。 2 常用检测方法 目前, CPR 的检测方法一般分为定性和定量两类。常用的检测方法有免疫扩 散法, 乳胶凝集试验, 放射免疫法测定( RIA) 及酶联免疫吸附试验( ELISA) 等。 2. 1 ELISA 法该检测采用双抗夹心法, 将检测缓冲液和血液样本在检测瓶 中进行混合, 荧光标记缓冲液中的抗CRP抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原 抗体复合物, 当混合样品被放到检测板的样本上并且通过毛细血管作用扩散到硝 化纤维基质的测试带上, 该复合物被测试带上的抗CRP抗体所捕获, 荧光抗体的 信号强度反映了被捕获的CRP数量, 经过免疫荧光分析仪的检测, 能够反映出血 中CRP的浓度。ELISA法的灵敏度可以达到0. 007 mg / L( hs CRP) 。
高敏C反应蛋白检验方法及原理
高敏C反应蛋白检验方法及原理 目前，高敏C反应蛋白（high sensitive C-reaction protein，hs-CRP）的测定以透射比浊法为主，主要在自动生化分析仪上完成。 一、免疫透射比浊法 （一）原理 用包被有抗人C反应蛋白（C-reaction protein，CRP）抗体的微粒试剂与含有CRP的样品在适宜条件下反应，形成抗原-抗体复合物，导致反应液浊度的增加，导致550nm波长处的吸光度增加，吸光度的增加量与CRP的浓度成比例，根据这一原理即可求得待测样品的浓度。如测定方法的灵敏度能达到0.3mg/L的高敏感性，可确定CRP 的轻微升高，则称hs-CRP。 （二）主要试剂 由试剂盒提供，可能会略有不同，主要包括：包被有抗人CRP抗体的冻干粉、分析缓冲液等。 （三）操作步骤 严格按照试剂盒说明书上机操作，主要测定参数如下：①分析方法：两点终点法。②测光点：15～31。③样品/R1/ R3：12/240/20。 ④波长：546nm。 （四）参考区间
0～3.0mg/L。 （五）评价 1.首次测定不用稀释，如果测定结果超过测量范围，用0.9%NaCl 稀释并充分混匀后再测定。 2.样品混浊会影响测定，轻微混浊的标本均应2000g离心15分钟后再测定。下列浓度的干扰物对本法无影响：Hb ≤5g/L，TG≤10mmol/L，TB≤400μmol/L，RF≤500IU/ml。 3.样品可为新鲜或冷冻的血浆或血清，血清和EDTA或肝素抗凝的血浆可于冰箱中保存7天，血清和肝素抗凝的血浆在-20℃可以保存6个月。 二、ELISA法 （一）原理 双抗体夹心法，参见缺血修饰清蛋白的ELISA法测定。 （二）主要试剂 由试剂盒提供，可能会略有不同，主要包括：CRP抗血清、CRP 标准液、酶标抗CRP抗体、包被液、洗涤液、稀释液、底物液、终止液等。 （三）操作步骤 严格按照试剂盒说明书操作，主要步骤如下：包被→加样→加酶
速率散射比浊法的原理
速率散射比浊法的原理 一、前言 速率散射比浊法是一种常见的水质检测方法，其原理基于光的散射和吸收现象。本文将详细介绍速率散射比浊法的原理。 二、光的散射和吸收现象 在介质中传播的光线会发生散射和吸收现象。其中，散射是指光线遇到介质中的微粒或分子时，被微粒或分子所折射而改变传播方向的现象。而吸收则是指介质中某些物质对特定波长的光线具有吸收能力，使得这些波长的光线被吸收后不再传播。 三、速率散射比浊法原理 速率散射比浊法利用了水中悬浮颗粒物对光线的散射作用。当一束单色激光垂直照射到水样中时，水中悬浮颗粒物会使得部分光线发生散射，并且这些被散射出来的光线会以不同角度扩散出去。此时，如果在特定角度上检测这些扩散出去的光线，则可以获得一个与颗粒物浓度成正比的散射强度信号。
具体来说，速率散射比浊法主要包括以下几个步骤： 1. 发光器发出一束单色激光，照射到水样中。 2. 水样中的悬浮颗粒物会使得部分光线发生散射，这些被散射出来的光线会以不同角度扩散出去。 3. 在特定角度上检测这些扩散出去的光线，并获得一个与颗粒物浓度成正比的散射强度信号。 4. 通过比较样品和标准溶液的散射强度差异，计算出水样中悬浮颗粒物的浓度。 四、仪器设备 速率散射比浊法需要使用一些特殊的仪器设备。其中，主要包括： 1. 发光器：用于发出一束单色激光照射到水样中。 2. 接收器：用于在特定角度上检测被散射出来的光线，并获得一个与颗粒物浓度成正比的散射强度信号。 3. 滤波器：用于滤除非目标波长范围内的光线。
4. 标准溶液：用于比较样品和标准溶液的散射强度差异，计算出水样中悬浮颗粒物的浓度。 五、应用范围 速率散射比浊法广泛应用于水质检测领域。例如，可以用于监测自来水厂、污水处理厂等工业和城市生活中的供水和排水系统中的悬浮颗粒物浓度。此外，速率散射比浊法还可以用于海洋科学研究、环境保护、食品安全等领域。 六、总结 速率散射比浊法是一种基于光的散射现象实现的水质检测方法。通过检测被悬浮颗粒物所散射出来的光线，可以计算出水样中悬浮颗粒物的浓度。该方法具有操作简便、灵敏度高等优点，在许多实际应用场景中都得到了广泛应用。
C反应蛋白CRP测定
C反应蛋白CRP测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确 2 原理 免疫透射比浊法 样品和试剂R1加入 加入试剂R2启动反应 包被在乳胶上的抗C反应蛋白抗体和样本中的抗体形成抗原抗体复合物，出现凝集，进行透射比浊检测。 3 标本要求 3.1使用新鲜血清,不使用血浆. 3.2在采集血液后2h分离血清. 3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,2天后测定的血清置 -150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次. 3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.
4试剂 4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司CRP试剂盒,国械注进20142405056 YZB/GER 5724-2014） 4.1.1试剂组成: R1:TRIS 缓冲液：16 mmol/l，pH 7.4；防腐剂。 R2:包被抗CRP鼠单克隆抗体的乳胶颗粒：0.1%；氨基乙酸缓冲液：50 mmol/L，pH 8.0；防腐剂。 4.1.2试剂准备:可随时取用, 2-80C可稳定到有效期，试剂避免冷冻。 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：2－8°C下保存期限：见试剂标签上的有效期. 机上稳定期：90天 4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。 4.1.5注意事项：试剂中含防腐剂,稳定剂，避免接触皮肤及粘膜。
4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的CRP校准品对自动分析仪进行校准。 4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。 5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤 6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。 6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。 6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。 6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
C-反应蛋白 CRP 免疫比浊法
目录 1．检测原理 2．标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3．试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4．仪器 5．操作 6．计算 7．操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8．参考值 9．临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理 570-600nm 样本中CRP + 试剂中的CRP抗体-----------------大分子免疫复合物
在570-600nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中CRP含量成正比。 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 不使用抗凝剂。 2.4 标本处理： 血清在2 - 8°C 下储存不超过一周或在-20°C可保存2个月。 3．试剂 3.1 试剂： 本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司hCRP试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： 3.2：校准血清 使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的多项免疫类标准液。其中包含HCRP。 校准频次： 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。
两种检测方法测定C反应蛋白的对比分析
两种检测方法测定C反应蛋白的对比分析 摘要】目的：乳胶增强散射免疫比浊法和胶体金法检测C反应蛋白(CRP)的结果 比较分析。方法：分别采用雅培C8000型全自动生化分析仪与南京基蛋生物科技FiA8000免疫定量分析仪在5个浓度阶段检测水平的C反应蛋白标本结果。结果：CRP浓度为3.0～80.0mg/L,对2种方法检测干扰10%,在可接受范围内。乳糜微粒 ≤3000mg/dl时免疫定量分析仪不受影响(干扰10%)。相关分析的结果显示两种方 法5个浓度阶段检测结果的相关性良好(r=0.98,P=0.01)。结论：乳胶增强散射免疫 比浊法和胶体金法在线性范围内的精密度、抗干扰性、线性范围符合要求。虽然 系统间测定结果存在一定偏倚,但也符合临床检测要求。 【关键词】 C反应蛋白；乳胶增强散射免疫比浊法；比对试验 【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）05-0144-02 Two kinds of detection method was developed for the determination of CRP Liu Yong, Wu Yushuang, Cai Huaiying. Shuicheng county People's Hospital of Liupanshui, in Guizhou province, Liupanshui 553006, China 【Abstract】Objective Latex enhanced scattering immune turbidimetric method and colloidal gold method detection of c-reactive protein (CRP) as a result of the comparative analysis. Methods With abbott C8000 type full automatic biochemical analyzer with nanjing egg biotechnology FiA8000 immune quantitative analyzer in five concentration phase detection levels of c-reactive protein specimen results. Results CRP concentration is 3.0 ~ 80.0 mg/L, the interference of two methods is 10%, within the acceptable range. Chyle particles 3000 mg/dl or less quantitative analyzer is not affected when immune interference (10%). Correlation analysis results show that the two methods of five phase concentration detection results of good correlation (r = 0.98, P0.01). Conclusions Latex enhanced scattering immune turbidimetric method and the precision of the colloidal gold method in linear range, anti-interference, linear range meets the requirements. Although the system have a certain bias between the determination results, but also meet the requirements of clinical testing. 【Key words】C-reactive protein; Latex enhanced scattering Immune turbidimetry; The comparison test C反应蛋白(CRP)是一种炎症急性识相反应物，它是由肝细胞合成的一种急性 反应蛋白，是内源性免疫反应蛋白五聚环蛋白家族成员[1]。近年来，大量文献报道，CRP在预测及评估疾病进展方面具有较大的临床价值[2-3]。随着科学技术不 断更新，新的检验技术不断应用于临床，故CRP检测方法也受到越来越多的重视。为了提高我科CRP检测的质量，现对我科雅培C8000型全自动生化分析仪（乳胶 增强散射免疫比浊法）与南京基蛋生物科技FiA8000免疫定量分析仪（胶体金法）测定CRP结果比对分析，以确保为临床科室提供CRP检测结果的准确性与可靠性。 1.材料与方法 1.1 仪器与试剂 FiA8000免疫定量分析仪使用原装配套检测板，由南京基蛋生物科技有限公 司提供，苏食药监械（准）字2013第2401155号，批号为：140319077。仪器用 该公司提供质控液校准，测定时严格按照操作说明；生化分析仪使用雅培C8000 型全自动生化分析仪，室内质控优良，室间质评合格。试剂购自武汉长立生物科 技有限公司，批号为：13030109；采用胶乳增强比浊法测定，试剂在有效期内使
超敏-C反应蛋白检测(免疫比浊法)
超敏-C反应蛋白检测（免疫比浊法） 一、用途 本产品用于体外定量测定血清、血浆样品中超敏-C反应蛋白（HS-CRP）的含量。 二、临床意义 （一）概述 C-反应蛋白（CRP）是急性时相反应蛋白，由5个完全相同的非糖基化的亚单位构成，分子量为115000-140000D。在细胞因子IL-6家族诱导下，CRP在肝中合成迅速。在急性时相反应高峰时肝合成蛋白质能力的20%是CRP的合成。C-反应蛋白能激活补体，引发调理作用，增强细胞的吞噬功能，对血小板凝集和血块收缩有抑制作用。 （二）临床意义 1. hs-CRP与心血管疾病 （1）hs-CRP可作为ACS的预后指标 重度不稳定心绞痛（UAP）患者入院时，若CRP浓度≥3mg/L，其心绞痛的复发、冠状动脉血管置换术、心肌梗死和心血管疾病致死等心血管事件发生率比CRP<3mg/L的患者高. CRP≥3mg/L的UAP患者出院时有较高的再住院及发生心肌梗死的危险。出院时测定hs-CRP比入院时测定能更好地预测90天的不良后果.
此外，hs-CRP有助于鉴别出心肌肌钙蛋白（cTn）阴性而死亡率增高的患者。因此Morrow等认为，应当考虑联合使用cTn和hs-CRP来评估 ACS危险程度。 （2）hs-CRP是未来发生冠脉事件的预测指标 前瞻性研究显示，hs-CRP是已知冠心病患者未来心血管病发病和死亡的预测指标。 高水平的hs-CRP患者未来发生卒中危险增加2倍，未来发生心肌梗死危险增加3倍，未来发生周围血管疾病的危险增加4倍。 （3）hs-CRP与其他生化指标对冠心病危险的预测价值hs-CRP对冠心病的预测价值明显高于的传统的冠心病危险因素如血脂、脂蛋白和载脂蛋白.如总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、载脂蛋白AI和B（apoAI、apoB）。 诸多冠心病危险因素，如肥胖、高血压、糖尿病、冠心病家族史及各种生化指标，仅仅只有hs-CRP和TC/HDL-C有单独的预测价值 . 另有研究发现，hs-CRP能鉴别那些血脂水平在合适范围的个体冠心病发生的危险性。 （4）在冠心病的危险性评估时，hs-CRP与血脂指标均是独立的变量，如将两者同时检测并进行联合分析，其意义更大。