免疫球蛋白IgG测定
免疫球蛋白IgG测定
1 检验目的
指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 原理
免疫透射比浊法
抗免疫球蛋白G抗体和样本中的抗原形成抗原抗体复合物，出现凝集，进行透射比浊检测。通过加入PEG可促使反应迅速达到终点，可增加灵敏度，降低样本中抗原过剩导致假阴性的风险。
3 标本要求
3.1使用新鲜血清,不使用血浆.
3.2在采集血液后2h分离血清.
3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.
3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.
4 试剂
4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司IgG试剂盒,国械注进20142405056 YZB/GER 5724-2014）
4.1.1 试剂组成
R1:TRIS 缓冲液：20 mmol/l，pH 8.0；氯化钠：200 mmol/L；PEG：3.6%；防腐剂和稳定剂。
R2:抗人免疫球蛋白G抗体（羊）：取决于滴度；TRIS缓冲液：20 mmol/l；氯化钠：150 mmol/L；防腐剂。
4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8°C下保存期限：见试剂标签上的有效期。机上稳定期：4周。
4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。
4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的IgG校准品对自动分析仪进行校准。
4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。
5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪
6 操作步骤
6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。
6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。
6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。
7 质量控制
在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
8 计算方法
以IgG复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以g/l报告。
9 参考值
10 临床意义:
缺乏IgG易患化脓性感染，IgG＜5g/L，引起的原因较多，如有大量蛋白丢失的疾病（剥脱性皮炎、肠淋巴管扩张症、肾病综合症）淋巴网状系统肿瘤（林疤肉瘤、何杰金病），中毒性骨髓疾病等、慢性活动性肝炎和SLE时IgG升高明显。
11 操作性能
11.1 线性范围：3.0-35 g/l
11.2精密度
采用内部协议重复检测人样本和质控品（n=21），结果如下：
标准应用（IGG-2）
样本批内精密度批间精密度
均值变异系
数
% 均值变异系
数
%
g/L umol/
L g/L umol/
L
低值质控9.00 60.0 0.56 10.3
2
68.8 1.44
高值质控15.6
4
104.3 0.47 25.4
5
169.7 1.72
人血清 2.67 17.8 0.88 2.05 13.7 6.10 敏感应用（IGGC2）
样本批内精密度批间精密度
均值变异系
数均值变异系
数
mg/L nmol/mg/L nmol/
L % L %
高值质控167.
8
1119 0.65 166.
6
1111 1.27
低值质控320.
7
2139 1.38 327.
7
2185 2.07
人血清11.7 78.0 5.74 13.2
1
88.1 6.52
12 超出范围结果处理
本法线性上限为35 g/l。如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9％氯化钠溶液作1：4稀释，重新测定，结果乘以5。
13 病危报警值的处理
无警告/危急值
14 方法局限性
14.1准则：回收率在初始值±10%的范围内。
14.2标准应用（IGG-2）
14.2.1黄疸：I指数达到60（近似结合和非结合胆红素的浓度为60 mg/dL 或1026 µmol/L）时,未出现明显干扰。
14.2.3溶血：H指数达到1000（近似血红蛋白浓度为：621 umol/L（1000 mg/dL））时未出现明显干扰。
14.2.4脂血（脂肪乳剂Intralipid）：L 指数达到3000时未出现明显干扰。L指数（相当于浊度）和甘油三酯浓度之间的相关性较差。
14.2.5类风湿因子＜1200 IU/mL没有干扰。
多克隆样本中由于抗原过剩可能造成错误的低值在浓度达到440 g/L（44000 mg/dL；2935 umol/L）时。
14.2.6免疫球蛋白A,G,M之间没有交叉反应。
14.3敏感应用（IGGC2）：
14.3.1黄疸：I指数达到60（近似结合和非结合胆红素的浓度为60 mg/dL 或1026 µmol/L）时,未出现明显干扰。
14.3.2溶血：H指数达到800（近似血红蛋白浓度为：497 umol/L（800 mg/dL））时未出现明显干扰。
14.3.3多克隆样本中由于抗原过剩可能造成错误的低值在浓度达到1400 mg/dL（9334 nmol/L）时。
14.3.4免疫球蛋白A,G,M之间没有交叉反应。联合其他比浊方法测定时，由于个体样本特性的差异（可使用电泳评估），本测试尚不能为单克隆γ-球蛋白病病人提供准确结果。
15 补救措施
当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。
16 参考文献：
16.1叶应妩，王毓山，申子瑜主编·全国临床检验操作规程·中华人民共和国卫生部医政司编·(第四版)
16.2钱士匀主编.临床生物化学及生物化学检验实验指导.人民卫生出版社，2012年第5版
16.3府伟灵,徐克前主编.临床生物化学检验.北京.人民卫生出版社,2012年第5版
16.4试剂说明书
免疫球蛋白IgG测定
免疫球蛋白IgG测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 原理 免疫透射比浊法 抗免疫球蛋白G抗体和样本中的抗原形成抗原抗体复合物，出现凝集，进行透射比浊检测。通过加入PEG可促使反应迅速达到终点，可增加灵敏度，降低样本中抗原过剩导致假阴性的风险。 3 标本要求 3.1使用新鲜血清,不使用血浆. 3.2在采集血液后2h分离血清. 3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次. 3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.
4 试剂 4.1 试剂：上海罗氏诊断产品有限公司IgG试剂盒,国械注进20142405056 YZB/GER 5724-2014） 4.1.1 试剂组成 R1:TRIS 缓冲液：20 mmol/l，pH 8.0；氯化钠：200 mmol/L；PEG：3.6%；防腐剂和稳定剂。 R2:抗人免疫球蛋白G抗体（羊）：取决于滴度；TRIS缓冲液：20 mmol/l；氯化钠：150 mmol/L；防腐剂。 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存：2-8°C下保存期限：见试剂标签上的有效期。机上稳定期：4周。 4.1.4变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染则试剂不能使用。 4.2 校准品：使用罗氏多项生化校准品提供的IgG校准品对自动分析仪进行校准。 4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。 5 仪器
AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤 6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。 6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。 6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。 6.4仪器操作步骤：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪操作规程。 7 质量控制 在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
人免疫球蛋白G(IgG)ELISA检测方法及步骤
人免疫球蛋白G(IgG) ELISA检测方法及步骤 人(Human) 免疫球蛋白G (IgG) ELISA检测试剂盒 本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆 试验原理： IgG试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知IgG浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将IgG和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中IgG的浓度呈比例关系。 试剂盒内容及其配制 试剂盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配制 96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)即用型 塑料膜板盖1块半块即用型 标准品：80g/L1瓶(0.6ml)1瓶(0.3ml)按说明书进行稀稀 空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)即用型 标准品稀释缓冲液1瓶(5ml)1瓶(2.5ml)即用型 生物素标记的抗IgG抗体1瓶(6ml)1瓶(3.0ml)即用型 亲和链酶素-HRP1瓶(10ml)1瓶(5.0ml)即用型 洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)按说明书进行稀释 底物A1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 底物B1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)即用型 标本稀释液1瓶(12ml)1瓶(6.0ml)即用型 自备材料 1．蒸馏水。 2．加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3．振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 1．避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 2．实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 3．不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 1．试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。2．实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 3．不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 4．使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 5．使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。 6．洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 7．底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 8．加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 9．按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。 样品收集、处理及保存方法 1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。 2、血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。 3、细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。 4、组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液 5、保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高
免疫球蛋白G(IgG) 免疫比浊法
项目免疫球蛋白G（IgG） 方法免疫比浊法 目录1．检测原理 2．标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3．试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂与校准血清的稳定性 4．仪器 5．操作 6．计算 7．操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8．参考值 9．临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理 405nm
样本中IGG + 试剂中的IGG抗体-----------------大分子免疫复合物 在405nm监测生成的复合物的浊度变化，与样本中IGG含量成正比。 2. 标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 不使用抗凝剂。 2.4 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清置洁净试管加盖2-8℃保存。 3．试剂 3.1 试剂： R1：PEG4 缓冲液： 包含高分子强化剂的磷酸盐缓冲液。含有0.095%的叠氮化钠。 R2：IgG抗血清，含0.095%的叠氮化钠。 3.2：校准血清 使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的多项免疫类标准液。其中包含免疫球蛋白G的定值。 校准频次： 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。 3.3 试剂与校准血清的稳定性： 原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。
主管检验师临床医学检验免疫学和免疫检验 第十八章 体液免疫球蛋白测定
第十八章体液免疫球蛋白测定 免疫球蛋白（Ig）是由浆细胞合成和分泌的一组具有抗体活性的蛋白质，按其重链性质共分IgG、IgA、IgM、IgD和IgE五类。 IgG有4个亚型（IgG l、IgG2、IgG3、IgG4）。IgA除有IgA1和IgA2两个亚型外，尚有分泌型IgA（sIgA），它们的单体结构基本相同。 IgM也有2个亚型IgM1和IgM2。 第一节血清IgG、IgA、IgM测定 IgG是血清中含量最高的免疫球蛋白，其中以IgG1含量最多。 IgG是血液和细胞外液中的主要抗体。 也是机体再次免疫应答的主要抗体。 大多数抗感染抗体与自身抗体都为IgG类。 IgA可分为血清型和分泌型两类。 血清型IgA主要以单体形式存在。 分泌型IgA由J链连接的二聚体和分泌成分组成。 是参与黏膜局部免疫的主要抗体。 主要存在于胃肠道和支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中。 IgM为五聚体。 是分子量最大的免疫球蛋白，又称巨球蛋白。 主要存在于血液中。 是个体发育过程中最早合成和分泌的抗体。 是抗原刺激诱导的体液免疫应答中最早出现的抗体。 血清免疫球蛋白IgG、IgA、IgM定量测定方法一般有单向环状免疫扩散法、火箭免疫电泳法、ELlSA、免疫比浊法、放射免疫分析法等。 临床常用单向环状免疫扩散法和免疫比浊法来测定血清免疫球蛋白含量。 一、血清IgG、IgA、lgM测定 （一）单向环状免疫扩散法 该法的原理是将抗血清均匀地分散于琼脂或琼脂糖凝胶内，胶板上打孔，孔内注入抗原或待测血清，抗原在含有抗血清的胶内呈放射状（环状）扩散，在抗原抗体达到一定比例时形成可见的沉淀环。 在一定条件下，抗原含量越高，沉淀环越大。 （二）免疫比浊法 该法具有检测范围宽、测定结果准确、精密度高、检测时间短（一般在几分钟内即可完成测试）、敏感度高、稳定性好等优点。 二、血清IgG、IgA、IgM测定的临床意义 （一）年龄 新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG，故血液中含量较高，接近成人水平。 （二）免疫球蛋白IgG、IgA、IgM均升高 慢性肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化患者血清中可见3种Ig均升高。
免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的定量检测—单向琼脂扩散法
免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的定量检测—单向琼脂扩散法 【申请单】请完成申请单所要求项目 ×××市人民医院检验申请单 姓名 性别年龄 门诊号住院号 诊断或症状 检验标本 检验目的 送检科室医师 送检日期年月日 【方法选择】 表13-2 免疫球蛋白IgG、IgA、IgM的定量检测 方法单向琼脂扩散法火箭免疫电泳速率散射比浊法ELISA 放射免疫分析法本次检查选择√ 以检测待检人血清IgG为例。 【材料准备】 1.抗原：待检人血清、IgG免疫球蛋白工作标准品（IgG含量为10mg/ml）。 2.抗体：羊抗人IgG抗血清（单扩效价1：100）。 琼脂糖或琼脂粉、生理盐水、NaN3，载玻片、微量加样器、打孔器、5ml吸管、吸耳球、三角烧瓶、湿盒、水浴箱、温箱、半对数坐标纸。 【操作方法】 将1.0%～1.5%琼脂（用PH8.2、0.05M的巴比妥缓冲液配成）加热溶化，加0.01%（0.1g/L）NaN3，置于56℃水浴中备用。 吸取99ml已经融化的琼脂于三角烧瓶中，置于56℃水浴中，将预温的羊抗人IgG抗血清1ml与琼脂充分混合，继续保温于56℃水浴中备用。
制板：取4ml抗体琼脂溶液倾注于玻片中上，制成厚1.5mm的琼脂板，置室温冷却凝固。浇板时要薄厚均匀、平整、无气泡。 打孔：待琼脂凝固后，用打孔器打孔，孔径为3mm，孔距10～12mm。要求孔打得圆整光滑，孔缘不能破裂、底部勿与玻片分离。 稀释免疫球蛋白工作标准及待检人血清：1支IgG免疫球蛋白工作标准品加0.5ml蒸馏水溶解后使用。 加样：将上述稀释的IgG免疫球蛋白工作标准品分别滴入相应的抗体孔内，其余孔滴加待检的稀释血清，每个检样加两个孔，每孔滴加10微升。 扩散：将琼脂板置水平湿盘内，放进37℃温箱，IgG免疫板扩散24小时后取出置黑色背景前观察结果，（如果沉淀环不清晰，可用1%鞣酸液浸泡免疫板半小时后观察，或者用生理盐水浸泡2～3小时候观察），必要时可以染色后观察。 【结果判断】 绘制标准曲线及血清标本中IgG定量测定：测量沉淀环直径。沉淀环直径的大小除与抗原量相关，还与分子量和扩散时间有关。这种沉淀环直径与抗原含量的关系不是直线相关，而是对数关系： Fehey曲线：适用于小分子抗原和较短时间（24小时）扩散的结果处理。使用半对数纸划线，浓度的对数与沉淀环之间呈线性关系。公式表示：logC／d＝K（C＝抗原浓度，d ＝沉淀环直径，K＝常数）。
免疫球蛋白检查的意义
免疫球蛋白检查意义 免疫球蛋白是人体血清和体液中具有抗体活性一类蛋白质。又称丙种球蛋白。具有抗菌、抗病毒作用和加强细胞吞噬作用，并能在补体协同下，杀灭或溶解病原微生物。是机体抗御疾 病重要成分。 血清免疫球蛋白可分为五种类型，即ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ。其正常值由于检查对象、年龄、地区和方 法不同而差异。 各种免疫球蛋白不但量上有区别，而且在功能上也各有 特点： ＩｇＧ：具有抗菌、抗病毒、抗毒素作用大部分抗体属于ＩｇＧ。它是唯一能通过胎盘免疫球蛋白。ＩｇＧ增高见于ＩｇＧ型多发性骨髓瘤、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、慢性活动性肝炎、结核病、黑热病及某些感染性疾病等。降低见于肾病综合征、某些肿瘤、白血病、重链病、轻链病及某些免疫缺陷病。 ＩｇＡ：ＩｇＡ具有抗细菌和抗病毒作用。不能通过胎盘，小儿只能从母乳中得到。 免疫球蛋白A(IgA)：参考值：成人0.7～3.9克/升。在人体血液中IgA分为两型，即血清型和分泌型，前者以单体形式存在，后者是由一种连接二聚体和分泌片组成，且合成和分泌部位在肠道、呼吸道、乳腺、唾液腺和泪腺，因此主要存在于胃肠道、支气管分泌液、初乳、唾液和泪液中，是参及粘膜部位免疫主要
抗体，在局部抗感染中发挥重要作用。婴儿正是通过初乳获得分泌型IgA，达到自然被动免疫效果。 ＩｇＡ增高见于ＩｇＡ型多发性骨髓病、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎、肝硬化、湿疹、血小板减少等疾病。降低见于重链病、轻链病、吸收不良综合征、某些免疫缺陷病、反复呼吸道感染、输血反应、自身免疫性疾病等。 ＩｇＭ是一种高效能抗体，杀菌力强，特别是对大肠杆菌等革兰氏阴性菌有效。 免疫球蛋白M（IgM）：参考值：成人0.4～3.5克/升。是个体发育过程中最早合成和分泌抗体，在胎儿发肓晚期即可产生IgM，在新生儿中含量极微，出生逐渐升高，到1/2～1岁时达到成人水平。在脐带血中此抗体含量增加提示胎儿有宫内感染（如风疹病毒、巨细胞病毒等）。天然血型抗体为IgM，由血型不合输血所引起溶血反应亦是由此抗体所致。当机体遇有病原体感染时，IgM是体液免疫应答中产生最早抗体，在临床上检测此抗体可特异性早期诊断和治疗疾病。 临床意义：增高见于巨球蛋白血症、自身免疫性疾病（系统性红班狼疮、类风湿关节炎、干燥综合征）、病毒感染、慢性淋巴细胞性白血病和恶性淋巴瘤。降低见于多发性骨髓瘤、烧伤、营养不良和免疫低下疾病。
免疫球蛋白检验方法
免疫球蛋白检验方法 一、适用范围 适用于检测人血清、血浆中免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM、IgE）水平。 二、原理 免疫球蛋白的检测利用免疫沉淀反应，配制特异性抗血清与病人标本混合，当IgG、IgA、IgM、IgE抗体形成沉淀时，以比色检测，检测抗体浓度的变化，从而检测血清中免疫球蛋白含量。 三、试剂盒选择 抗体用于免疫球蛋白检测的试剂盒应选择经认证的、适用于检测人免疫球蛋白（IgA、IgG、IgM、IgE）水平的试剂盒（如ELISA试剂）。 四、仪器使用 根据使用的试剂盒类型，选择适当的仪器，如ELISA仪、比色检测仪等，以便进行免疫球蛋白检测。 五、样本收集 根据使用的试剂盒，收集血清或血浆样本，每次检测取0.5ml样本，如果多次检测，可放置在4℃保存，4℃以下冷冻保存不超过一个月。 六、试剂配制 1．将用于 ELISA 检测的准备好的抗体、病人标本等试剂放置室温，将其涂层板中； 2．按照试剂盒的使用说明，准备其他试剂，并用抗体标本反应
液调整到稀释抗体的浓度； 3．将抗体标本反应液和病人标本混合涂洒到涂层板的检测格中，放置室温反应15分钟； 4．用洗涤液洗涤检测格，然后用抗体反应液复活格中的抗体，放置室温反应10分钟； 5．用洗涤液洗涤检测格，然后用检测液检测抗体，放置室温反应1小时； 6．用洗涤液洗涤检测格，然后用终止液终止反应，放置室温反应30分钟； 7．将涂层板置于比色检测仪中，检测抗体浓度的变化，从而检测血清中免疫球蛋白的含量。 七、报告 根据比色检测仪结果，判定血清中IgA、IgG、IgM、IgE含量，并根据参考值报告免疫球蛋白水平。
保健食品中免疫球蛋白IgG的测定
保健食品中免疫球蛋白IgG的测定 Determination of immunoglobulin content in health food ━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━━ ━━━━━━━━━ 1适用范围 本方法规定了初乳粉中免疫球蛋白IgG的测定。 本方法适用于初乳粉中免疫球蛋白IgG的测定。 本方法最小检出量：2.0μg。 本方法最小检出浓度：当取样量0.1g，稀释至25mL，进样量20μL时，最小检出浓度为0.5mg/mL。 本方法最佳线性范围：0.2~1.0mg/mL。 2 方法原理 根据高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下免疫球蛋白IgG与配基连接，在pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。 3 试剂 3.1 pH6.5 0.05mol/L 磷酸盐缓冲液·········A液3.2 pH2.5 0.05mol/L 甘氨酸盐酸缓冲液········B液3.3 IgG标准贮备液：称取IgG标准品（Sigma化学公司）
0.0100g,用pH6.5 0.05mol/L磷酸盐缓冲液溶解并定容至10.0mL,摇匀，浓度为1.0mg/mL。 3.4 IgG标准系列溶液：以IgG标准贮备液，用pH6.5 0.05mol/L磷酸盐缓冲液稀释成含IgG 0.2mg/mL, 0.4mg/mL, 0.6mg/mL, 0.8mg/mL, 1.0mg/mL的标准系列。临用时配制。 4 仪器和设备 HPLC仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。 5 分析步骤 5.1 试样处理：称取0.1g（精确至0.001g）试样，用A液稀释至25.0mL,摇匀，通过0.45μm微孔滤膜后进样。 A倍柱体积的10再用倍柱体积的重蒸水洗柱，5先用5.2.1 液平衡柱，进样，按洗脱程序进行洗脱。 5.2.2 HPLC参考条件 色谱柱：Pharmacia HI-Trap Protein G柱，1mL。 波长：280nm 移动相： A液 B液进行梯度洗脱，见下表。 梯度洗脱表： Gradient
免疫数蛋白lgg的正常范围
免疫数蛋白lgg的正常范围 免疫球蛋白IgG，属于体内最主要的免疫球蛋白之一。它在人 体免疫系统中发挥着重要的作用。IgG免疫球蛋白由免疫系统 中的B细胞合成，是一种抗体，具有抗体的聚合性和中和病 原微生物的能力。 IgG的正常范围是指在人体健康状态下，IgG免疫球蛋白在血 液中的浓度的参考区间。正常范围可以有一定的变化，具体参考值取决于不同的实验室和测量方法。一般情况下，IgG的正 常范围通常在700-1700毫克/分升之间。 IgG免疫球蛋白正常范围的参考值会受到多个因素的影响，包 括年龄、性别和个体差异等。婴儿出生后，IgG浓度会逐渐上升，达到成人水平大约需要6个月到1年的时间。对于成人，IgG浓度在健康状态下一般会保持相对稳定。 除了参考范围外，IgG的浓度也可以用于评估免疫系统的功能。例如，IgG浓度下降可能意味着免疫系统存在问题或者存在某 种疾病。IgG的测量结果可以帮助医生判断患者的免疫状态， 并辅助诊断免疫相关疾病。 正常情况下，IgG免疫球蛋白的浓度应该与机体的免疫功能保 持一定的平衡。如果IgG的浓度过高或者过低，都可能会导 致免疫功能的异常。例如，免疫缺陷病患者常常会出现IgG 浓度过低的情况，增加了感染的风险。而过高的IgG浓度可 能与某些免疫系统异常或肿瘤有关。
正常范围的IgG参考值应该基于大量的人群统计数据得出，并由经验丰富的医学实验室进行验证。在实际应用中，医生会根据患者的具体情况，结合其他检测指标和临床症状来综合判断免疫系统的功能状态。 总结起来，IgG免疫球蛋白是免疫系统中重要的抗体，正常范围通常在700-1700毫克/分升。正常范围的IgG参考值是通过大量的人群统计数据得出的，可作为评估免疫功能的一个重要指标。但是在实际应用中，还需要综合其他检测指标和临床症状来进行综合判断，从而更准确地评估免疫系统的功能状态。
人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析
人免疫球蛋白G(IgG)酶联免疫分析 试剂盒使用说明书 本试剂盒仅供研究使用。 检测范围：96T 2.5μg/ml -80μg/ml 使用目的： 本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中免疫球蛋白G(IgG)含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人免疫球蛋白G(IgG)水平。用纯化的抗-IgG抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入免疫球蛋白G(IgG)，再与HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的免疫球蛋白G(IgG)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人免疫球蛋白G(IgG)浓度。 试剂盒组成 标本要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀 2.加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、 待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl，待测样品孔中先加样品稀释液40μl，
然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3.温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4.配液：将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用 5.洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此 重复5次，拍干。 6.加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。 7.温育：操作同3。 8.洗涤：操作同5。 9.显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色 15分钟. 10.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11.测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止 液后15分钟以内进行。 操作程序总结： 1.准备试剂，样品和标准品 2.加入准备好的样品和标准品，37℃反应30分钟 3.洗板5次，加入酶标试剂，37℃反应30分钟 4.洗板5次，加入显色液A、B，37℃反应10分钟 5.加入终止液 6.15分钟之内度OD值 7.计算 计算 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4．请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
免疫球蛋白(IgG)定量测定试剂盒标准操作程序
免疫球蛋白（IgG）测定标准操作程序 1.摘要 本试剂盒适用于体外临床检验，用于测定人血清中免疫球蛋白IgG的含量。 IgG的主要功能是与抗原结合，并进一步触发抗原的分解。 2.适用范围 程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清、血浆中IgG的浓度。 3.职责 使用日立7600自动生化分析仪进行测定IgG浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行,室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。 4.检测方法 上海科华生物工程股份有限公司生产的免疫球蛋白（IgG）试剂盒采用的是免疫透射比浊法。 5.原理 样本中的IgG与试剂中相应的抗体相遇，立即形成抗原抗体免疫复合物，在特定的缓冲环境中形成浊度，其浊度在合适的抗体浓度存在时与抗原含量成正比，与相同条件下操作的校准品比较，即可求出样品中IgG的含量。 6.仪器 日立7600自动生化分析仪 7.试剂 7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2试剂瓶内主要成分： 磷酸缓冲液（PH7.2）、Tween20、PEG、NaN3、羊抗人IgG抗体。 7.3试剂稳定性：试剂避光保存于2-8℃，若无污染，可稳定至失效期，本试剂有效期为 12个月。试剂不可冰冻。R1、R2：打开后冷藏于分析仪中可稳定28天。 7.4试剂准备：试剂为即用式。 8.标准品和质量控制 8.1校准程序：使用上海科华生物工程股份有限公司试剂盒内提供的标准品对自动分析仪 进行校准。由a、b、c、d、e五只组成，浓度见瓶签。校准品可溯源至国际参考物质ERM470。 8.2质控品使用某某公司提供的生化复合定值质控血清做为室内质控品。每日在测定前做
免疫球蛋白检验结果解读
免疫球蛋白检验结果解读 1.免疫球蛋白G（英文缩写IgG） 【参考区间】 新生儿:6.6~17.5g/L（6600~17500mg/dL）。 3个月:2.0~5.5g/L（2000~5500mg/dL）。 6个月:2.6~6.9g/L（2600~6900mg/dL）。 9个月:3.3~8.8g/L（3300~8800mg/dL）。 12个月:3.6~9.5g/L（3600~9500mg/dL）。 2岁:4.7~12.3g/L（4700~12300mg/dL）。 4岁:5.4~13.4g/L（5400~13400mg/dL）。 8岁:6.3~15.0g/L（6300~15000mg/dL）。 12岁:7.0~15.5g/L（7000~15500mg/dL）。 成人:7.0~16.0g/L（7000~16000mg/dL）。 【解读要点】 （1）血清IgG降低:可由先天性低免疫球蛋白血症所致，如先天性无丙球血症和先天性无胸腺症患者血中IgG明显降低;也可由获得性低免疫球蛋白血症所致，如淋巴肉瘤、肾病综合征和中毒性骨髓疾病等。
（2）血清IgG增高:可见于非特异型多株峰免疫球蛋白增殖症，如慢性感染、子宫内感染、自身免疫病、肝脏疾病（如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化和隐匿性肝硬化）;也见于特异型单株峰免疫球蛋白增殖症即M蛋白血症，如多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、重链病、半分子病、轻链病和非排泌型骨髓瘤等。 （3）血清IgG降低易引起反复的化脓性细菌感染。 2.免疫球蛋白A（英文缩写IgA） 【参考区间】 6个月:0.08~0.57g/L（80~570mg/dL）。 9个月:0.11~0.76g/L（110~760mg/dL）。 12个月:0.14~0.91g/L（140~910mg/dL）。 2岁:0.21~1.45g/L（210~1450mg/dL）。 4岁:0.30~1.88g/L（300~1880mg/dL）。 8岁:0.46~2.51g/L（460~2510mg/dL）。 12岁:0.58~2.91g/L（580~2910mg/dL）。 成人:0.70~5.00g/L（700~5000mg/dL）。 【解读要点】 （1）IgA降低:可由先天性或获得性低免疫球蛋白血症所致，常见于先天性或获得性无丙球血症和先天性无胸腺症、淋巴肉瘤、肾病