痰液标本的报告与解释
痰标本涂片培养的结果分析
痰标本涂片培养的结果分析摘要】目的：通过对呼吸科患者进行痰涂片镜检测，探究痰涂片镜检对痰液细菌培养作用价值。
方法：从来我院诊治的2016年1月—2018年12月的呼吸科门诊患者中随机抽取1200份，并进行痰涂片染色和细菌培养，对痰涂片标本培养过程进行跟踪观察并进行对比分析。
结果：1200份标本中，含有500份革兰氏染色涂片，占总标本的41.67%，其中，含有230份检出细菌，占500分革兰氏染色涂片的46%，白细胞内有60份标本检出细菌，占230分检出细菌标本的26.09%；在1200分标本中有420份抗酸染色涂片标本，占35%，其中有10份抗酸杆菌，占420份抗酸染色涂片的2.4%。
结论：痰标本涂片镜检验痰培养的结果具有可靠性，对于临床诊断具有重要意义，是一项值得推广使用的检验方法。
【关键词】涂片培养；痰标本；革兰染色；抗酸染色【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8231（2019）05-0349-01随着人们饮食结构和生活方式的改变，各种疾病发病率逐年上升。
在医院诊疗过程中，患者常需要进行各种检查，包括泌尿系统感染患者实施尿液检查，呼吸道感染患者实施痰液检查等。
下呼吸道感染患者的痰涂片是通过自然咳嗽所获取，痰涂片极易受到口腔内的正常细菌所污染，降低病原菌的检出率，还会导致细菌培养结果与临床症状不相符[1]。
痰涂片镜检的检验结果准确率高，痰涂片检验结果的阳性率有效提高[2]，痰标本涂片为呼吸道感染的诊疗和诊断提供有效证据[3]。
笔者从来我院诊治的2016年1月—2018年12月的呼吸科门诊患者中随机抽取1200份，并进行痰涂片染色和细菌培养，获得临床效果较为显著，如下。
1.资料和方法1.1 一般资料从来我院诊治的2016年1月—2018年12月的呼吸科门诊患者中随机抽取1200份，主要分为A级、B级，C级标本送至科室重新采集。
1.2 方法（1）采集晨痰。
将收到的痰液，作为标本分为A、B、C类级：A类主要为浓痰，白细胞超过25，上皮细胞低于10，合格；B类有部分浓痰，白细胞超过25，上皮细胞低于25，较为合格；C类有口水或者泡沫痰，白细胞低于10，上皮细胞超过25，不合格。
痰标本的名词解释
痰标本的名词解释当我们感受到身体不适时，经常会出现咳嗽的症状。
这是我们呼吸系统在通过咳嗽的方式清除异物或是害虫引起的刺激。
而其中的一种检查方法就是痰标本的收集与分析。
在医学领域中，痰标本是指通过咳嗽时咳出的痰样物，可以对其中的成分和病菌进行检测，从而帮助医生确定疾病的类型和进一步的治疗方案。
痰标本的收集通常需要在早晨起床后进行，因为此时的痰样物浓度较高。
在进行采集前，需要先进行口腔的清洁，以避免其他细菌的污染。
当清洁完毕后，需要向后弯腰并深呼气几次，以促进痰样物的咳出。
咳嗽时，要尽量将痰样物吐到干净的容器中，避免其外溅或被其他细菌污染。
一旦完成痰样物的收集，就需要进行分析与检测。
首先，医生会对痰样物的颜色、质地和气味进行观察。
正常情况下，痰样物应该是白色或透明的，呈黏稠状。
如果痰样物呈现黄绿色或者带有血丝，表明可能存在感染或炎症等疾病。
医生还会通过闻气味来判断是否存在感染或其他异常情况。
接下来，通过显微镜下的细胞学检测，医生可以观察到痰样物中的细胞类型和数量。
在正常情况下，痰样物中会有一些上皮细胞、嗜酸性粒细胞和中性粒细胞等。
然而，如果痰样物中存在过多的某种细胞类型，比如嗜酸性粒细胞过多，可能表明存在咳嗽性哮喘等疾病。
检测痰样物中的病原体也是痰标本分析的重要步骤之一。
通过培养痰样物中的细菌和真菌，可以确定是否存在感染。
医生将痰样物涂抹在培养基上，利用培养基的营养和环境条件来培育潜在的致病菌。
一段时间后，医生可以观察到培养皿上的细菌或真菌生长情况，从而确定是否存在感染。
痰标本分析还可以通过其他方法来确定疾病的类型。
例如，通过痰样物中的遗传学检测，可以确定是否存在某些基因突变或染色体异常，并帮助医生对相关疾病进行诊断。
此外，还可以利用痰样物中的酶学检测来评估肺功能和炎症程度，以及检测是否存在肺癌等疾病的风险。
总体而言，痰标本分析是一项重要的医学检查方法，能够帮助医生了解疾病的类型和严重程度，以制定更为有效的治疗方案。
痰液检验及临床意义
痰液检验及临床意义一、痰液标本的采集与处理（一）操作1、痰常规标本：嘱患者晨起用清水漱口，然后用力咳出1~2口痰液，盛于蜡纸盒或广口容器内。
如查癌细胞，容器内应放10%甲醛溶液或95%乙醇溶液固定后送检。
2、痰培养标本：清晨痰量多，含菌量亦大，嘱患者先用复方硼砂含漱液，再用清水漱口，除去口腔中细菌，深吸气后用力咳出1 ~2口痰液盛于灭菌培养皿或瓶中，及时送检。
3、24小时痰标本：容器上贴好标签，注明起止时间，嘱患者将晨7时至次日7时的痰液全部留在容器中送检，不可将漱口液、唾液等混人。
（二）注意事项1、痰液标本收集法因检验目的不同而异，主要用自然咳痰法。
采集容器须加盖，痰液勿污染容器外(用不吸水容器盛留)。
2、痰液一般检查应收集新鲜痰，以清晨第一口痰为宜。
患者起床后刷牙，漱口(用3% H2O2及清水漱3次)，用力咳出气管深处呼吸道分泌物，勿混人唾液、鼻咽分泌物和漱口水，及时送检。
适用于常规检验、一般细菌检验、结核菌检查。
3、细胞学检查用上午9~10点深咳痰液及时送检（清晨第一口痰在呼吸道停留时间久，细胞可发生自溶破坏或变性而结构不清），应尽量送含血痰液。
4、浓缩法找抗酸杆菌应留24小时痰(量不少于5ml)，细菌检验应避免口腔、鼻咽分泌物污染。
5、幼儿痰液收集困难时，可用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反射，用棉拭子采取标本。
6、对无痰或少痰患者可用经459C加温100g/L氯化钠水溶液雾化吸人，促使痰液咳出;对小儿可轻压胸骨柄上方，诱导咳痰;昏迷患者可清洁口腔后用负压吸引法吸取痰液。
7、观察每日痰排出量和分层时，须将痰放人广口容器内，可加少量苯酚防腐。
8、标本不能及时送检，可暂时冷藏保存，但不宜超过24小时。
9、检验完毕后，标本及容器应按生物危害物处理。
二、痰液理学检验痰液理学检验有检测痰液的量、颜色、气味、性状等理学指标，为呼吸系统疾病诊断及疗效判断提供依据。
（一）结果判定1、量：以ml/24h计，无痰或仅有少量泡沫样或黏液样痰。
以下痰液标本符合
以下痰液标本符合
痰液作为临床上常见的样本之一，检测痰标本的合格，对于疾病的诊断和治疗具有重要意义。
以下是痰标本合格的四个标准：
首先，痰液样本应符合采样标准，即在清晨起床后、未进行口腔卫生和进食的情况下进行采集。
其次，痰样本应采集足够的量，一般建议不少于2ml。
第三，采集后应尽快送往实验室处理，避免过度吞咽和长时间存储对痰液的影响。
最后，样品的温度和湿度应控制在适宜的范围内，否则会影响检测结果。
除了上述标准，我们还需注意痰液样本中的其他影响因素，如血液、唾液和口腔分泌物等，这些因素会干扰检测结果，应加以排除。
因此，在痰标本的采集、保存和检测过程中，需要严格遵守相应的操作规范以确保检测结果的准确性和可靠性。
总之，痰液作为临床诊断和治疗中不可或缺的样本之一，其质量和准确性直接影响疾病的诊断和治疗效果。
只有符合痰标本合格的四个标准和相应的操作规范，才能确保获得准确的检测结果，为疾病的早期诊断和治疗提供科学依据。
痰液标本的报告与解释
痰液标本的报告与解释
关键词：细胞菌种保藏中心细胞库 ATCC 北京标准物质网
一、阳性结果报告
(一)显微镜结果
根据镜下观察结果，进行报告。
如“抗酸染色后，中间部分的菌丝为革兰阳性，而四周放射的末端为革兰阴性”。
(二)培养结果
痰及呼吸道标本，培养出引起下呼吸道感染性疾病的病原体(表34-2)等具有临床意义。
均应报告“XX细菌生长”及相应的药敏试验结果。
二、阴性结果报告
(一)显微镜结果
根据镜下观察结果，进行报告。
如“未见真菌”或“未见抗酸杆菌”。
(二)培养结果
当培养足够时间未生长目的菌时，可进行阴性报告，如“经48小时培养无细菌生长”或“有正常菌群生长”。
临床检验中痰标本的采集存放和结果解读
临床检验中痰标本的采集存放和结果解读一、痰标本的分析前阶段的操作痰标本的分析前阶段包括检验项目的申请、采集标本前的患者准备、标本采集、样本运送以及标本到达实验室后的标本处理、储存等内容。
有数据显示，标本采集缺乏标准化程序引起的差错占全部诊断过程发生差错的60%～70%[1,2,3]。
因此，规范化分析前操作，对减少实验误差，提高检验质量尤为重要。
临床检验中所说的"痰"比患者日常理解的痰概念更为严格。
日常生活中人们提到的痰成分较复杂，通常为鼻腔分泌物反流成分、唾液、口腔黏膜、咽部分泌物以及下呼吸道分泌物组成的混合物。
而临床检验中需要的痰仅指下呼吸道分泌物。
由于鼻、咽、上呼吸道和下呼吸道各部位定植和入侵致病的细菌种类不一样，因此，如果采集的痰标本混合了除下呼吸道分泌物以外的其他物质，会在一定程度上影响检验结果，甚至会造成检验结果的错误而误导医生。
1.痰标本采集的容器：标本采集容器需为灭菌、有盖的一次性容器;为标本采集方便，容器最好是广口。
灭菌容器保证了痰标本后续的细菌/真菌培养的准确性，有盖的要求主要是考虑到痰标本是有潜在致病性标本，采集后应密封运送至实验室。
现在国内临床最常用的痰采集盒为灭菌螺旋帽一次性塑料瓶。
2.痰标本采集前的患者准备：为除去口腔内杂菌的干扰，要求患者在采集痰标本前，在医生或护士的直接指导下，清洗咽部、刷牙或漱口(建议用3%H2O2及清水漱3次)[4]。
同时指导患者咳前深吸气，争取用力咳出呼吸道深部的痰液，并尽量避免混入口腔、鼻咽分泌物。
如果以明确呼吸道感染致病菌为目的，患者最好在使用抗生素前进行痰标本检验，临床意义更大。
3.痰标本的采集[4]744-745：根据使用目的不同，采集要求不同。
(1)用于培养鉴定：以患者早晨醒来咳出的第一口深痰为最好，因为清晨第一口痰在呼吸道停留时间久，检测出致病菌的可能性更大。
其他时间段的痰也可使用。
细菌培养要求痰量>1 ml，真菌培养要求痰量3～5 ml。
药敏报告痰培养报告规范解读及要点总结
药敏报告痰培养报告规范解读及要点总结药敏报告是通过检测抗感染药物在体外对病原微生物有无抑菌或杀菌作用所形成报告，体外药敏试验是对某种抗菌药物在体内治疗有效性预测的先决条件，并可作为临床上治疗感染性疾病时的重要选药参考。
如下图：以上为纤支镜痰培养及药敏报告解释一些概念在药敏报告中除病人一般信息以外，经常出现若干个专业名词。
＞MIC：minimum inhibitory concentration，最低抑菌浓度。
表示抗菌药物的抗菌活性大小，指在体外培养细菌 18 至 24 小时后能抑制培养基内病原菌生长的最低药物浓度。
＞S：susceptible，指病原体微生物对抗生素敏感。
常规药物剂量治疗时平均血药浓度即可 > MIC 值的 5 倍以上。
＞I：intermediate，指病原体微生物对抗生素中度敏感（或称中介）。
常规药物剂量治疗平均血药浓度仅可相当于或略高于 MIC 值。
提高药物剂量，或者对体内药物浓聚的部位或体液的感染，仍可望获得疗效。
＞R：resistant，指病原体微生物对抗生素耐药。
药物对病原体的 MIC 高于常规剂量时平均血药浓度，或者病原体能产生灭活药物的酶，则无论其 MIC 值高低，仍应判定此种情况为耐药。
＞BAP：Blood Agar Plate，即血琼脂平板，是最常用的增菌（营养）培养基。
痰液、肺泡灌洗液培养结果通常以 BAP 培养半定量方式报告，我院微生物室常报告病原菌为 1+ 至 4+。
一般来说，合格痰标本（低倍镜下鳞状上皮细胞 < 10 个而白细胞 > 25 个）中优势菌中度以上生长（+++），或者合格痰标本中致病菌少量生长但与痰涂片结果一致，或者连续三天内多次痰培养均为同种细菌，或者痰培养阴性但痰涂片镜检发现典型病原菌，也可认为有参考意义。
临床上经支气管镜或者人工气道吸取痰液、防污染样本毛刷标本、支气管镜肺泡灌洗液等方式所取标本进行培养时，结果低于 3+，也应高度重视。
痰液标本细菌学检验(一)
痰液标本细菌学检验（一）关键词：细胞库菌株培养中心 atcc 北京标准物质网一、检验程序痰及呼吸道标本的细菌学检验程序见图34—1。
二、检验方法(一)显微镜检查1．一般细菌涂片检查挑取标本中脓性或带血部分涂片进行革兰染色镜检，描述观察到的细菌的染色性、形态及排列等特征，可发出初步报告。
2．结核分枝杆菌涂片检查挑取标本干酪样或脓性部分做抗酸染色和金胺“O”荧光染色，前者用油镜，后者用荧光显微镜检查。
具体操作详见第十五章分枝杆菌属检验。
3．放线菌及诺卡菌涂片检查将痰液用生理盐水反复洗涤数次，挑取黄色颗粒(硫黄颗粒)或不透明着色斑点，置玻片上并覆以盖玻片，轻压后置高倍镜下观察。
如见中央为交织的菌丝，其末端粗杆呈放线状排列时揭去盖玻片，待干后做革兰染色及抗酸染色镜检。
4．下呼吸道其他标本检查支气管肺泡灌洗液等直接取自下呼吸道的标本，不易受上呼吸道杂菌的污染，涂片检菌的意义较大。
可取离心沉淀物进行革兰染色与抗酸染色检查。
(二)培养和鉴定1．痰培养标本的前处理于痰标本中加入一定量无菌生理盐水，剧烈振荡5～10秒后，将沉淀于管底的脓痰小片取出，置于另一试管中，同法再处理2次，可洗去痰中的正常菌群。
然后向洗涤过的痰液中加入等量pH 7. 6的1％胰酶溶液，放置35℃环境90分钟，使痰液均质化后备用。
2．培养基与培养环境(1)血琼脂平板：适用于分离多种细菌，需氧环境，可分离β-溶血性链球环境培养，分离肺炎链球菌和β-溶血性链球菌。
根菌，葡萄球菌；置于5％CO2据血琼脂平板生长的菌落特征及镜检形态，得出初步结果，再按各类细菌特性做进一步鉴定。
环境培养，常用于分离嗜血杆菌和脑膜(2)巧克力色琼脂平板：置于5％CO2炎奈瑟菌等有特殊营养需求的细菌。
(3)中国蓝琼脂平板／麦康凯平板：需氧环境培养，常用于分离肠杆菌科细菌。
(4)TTC-沙保弱培养基：需氧环境培养，用于分离白假丝酵母菌及其他酵母菌、诺卡菌、放线菌以及烟曲霉菌等。
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痰液标本的报告与解释第一篇：痰液标本的报告与解释痰液标本的报告与解释关键词：细胞菌种保藏中心细胞库 ATCC 北京标准物质网一、阳性结果报告(一)显微镜结果根据镜下观察结果，进行报告。
如“抗酸染色后，中间部分的菌丝为革兰阳性，而四周放射的末端为革兰阴性”。
(二)培养结果痰及呼吸道标本，培养出引起下呼吸道感染性疾病的病原体(表34-2)等具有临床意义。
均应报告“XX细菌生长”及相应的药敏试验结果。
二、阴性结果报告(一)显微镜结果根据镜下观察结果，进行报告。
如“未见真菌”或“未见抗酸杆菌”。
(二)培养结果当培养足够时间未生长目的菌时，可进行阴性报告，如“经48小时培养无细菌生长”或“有正常菌群生长”。
第二篇：痰液标本采集法痰液标本采集法操作内容一、操作目的根据医嘱采集痰标本，进行临床检验，为诊断和治疗提供依据。
二、评估患者1、询问、了解患者身体状况，评估病人能否自行咳嗽咳痰；标准分 5三、操作要点四、指导患者2、观察患者口腔粘膜有无异常和咽部情况，向病人作好解释，取得病人合作。
1、仪表：符合要求2、操作用物：治疗盘、痰液收集器、化验单、一次性无菌手套、温开水、纱布、手电筒、治疗巾、胶水或胶布、弯盘。
3、操作步骤：1）核对医嘱，准备用物。
2）核对患者床号、姓名，评估患者。
3）洗手、戴口罩。
4）携用物至病人床旁，再次核对。
5）协助患者清洁口腔，取合适体位。
6）取治疗巾置于患者颌下。
7）采集痰标本：①能自行留痰者：戴手套。
嘱病人用温开水漱口，观察有无食物残渣，帮助患者拍背，嘱患者深呼吸数次后用力咳出气管深处的痰液于无菌痰液收集器内，盖好瓶盖。
②人工辅助呼吸者：戴无菌手套，将痰液收集器连接在负压吸引器上，打开吸引器开关，将导管插入咽喉深部，留取痰液标本5～10ml后加盖。
8）再次核对，将化验单副联贴于痰液收集器上，注明留取时间。
9）用纱布擦净患者口唇，脱手套。
10）整理床单位，协助患者取舒适体位。
询问患者需要。
11)洗手，取口罩。
12）记录。
13）按要求将痰标本送检。
4、操作速度：完成时间限7分钟以内1、告知患者检查目的、采集方法、采集时间。
2、指导患者正确留取痰标本，告知患者留取痰液前要先漱口，然后深吸气，用力咳出第一口痰，留于容器中。
3、告知患者不可将唾液，漱口水，鼻涕等混入痰中。
4 6 10 2 3 3 2 3 3 3 4 3五、注意事项1、护士在采集过程中要注意根据检查目的选择正确的容器。
2、患者做痰培养及痰找瘤细胞检查时，应及时送检。
3、留取24小时痰液时，要注明起止时间。
六、综合评分1、用物缺一项或者不符合要求扣1分2、仪表、着装一项不符合要求扣2分3、沟通指导一项不到位扣2分4、操作程序颠倒一处扣1分5、操作程序错误或遗漏一处扣2分6、一般违反操作原则扣5分7、严重违反操作原则扣10分以上8、操作时间每超过规定时限20%扣1分第三篇：痰液细菌学检查痰液细菌学检验痰涂片镜检：选择痰标本中脓细胞成团块状分布，集中而不稠密，且周围无鳞状上皮细胞或无大量成团状分布的细菌球的区域为读片区，认真收寻视野中脓细胞聚集处的脓细胞胞浆中有无吞噬的细菌及细菌的染色排列特征.接种培养：血平板、巧克力平板、麦康凯/沙氏平板培养观察：一、G+菌：BA生长、Choc不生长、MecK不生长1、G+c菌：①葡萄球菌：淡黄色/白色，中等大小，较凸，规则圆形，β/γ溶血，较湿润，除金黄色葡萄球菌外，一般不具有临床意义；②微球菌：黄色/白色/橙色，中等大小，较凸，规则圆形，不溶血，较干燥，不易乳化较葡萄球菌生长缓慢，该菌一般无临床意义；③链球菌：白色/灰白色、凸起小菌落，β溶血为溶血型链球菌；灰白隆起中心扁平或凹陷，1.0-1.5mm大小的宽大а溶血为肺炎链球菌，该菌是最常见的肺部感染病原菌，在社区获得性感染中有重要的地位；细如针尖，白色凸起а溶血的为草绿色链球菌，自然咯痰标本中的草绿色链球菌一般不具有临床意义；④肠球菌：灰白，低凸，2.0mm左右之а溶血菌落，较湿润，但一般不具有临床意义；⑤口腔球菌：白色凸起较大菌落，不溶血，黏着，接种针挑之则整个菌落挑起，琼脂上不留痕迹。
该菌偶尔可引起肺部的严重感染，一般好发生于COPD病人和肺气肿病人；⑥孪生球菌：白色、凸起细小菌落，β溶血，生长慢48h仅0.2~0.4mm，在含羊血的MH琼脂上不生长。
该菌是上呼吸道的正常菌群组成之一，一般不导致肺部感染；2、G+ b—依靠溶血特征，菌落形态、菌落大小、菌体形态区分：①棒状杆菌：白色1.0-1.5mm左右大小，较干燥，不溶血/狭窄β溶血的为白喉或一般棒状杆菌；小而湿润，灰白/无色，半透明的为J-K棒状杆菌；灰白细小，β溶血的可能为假结核、化脓放线菌、溶血分泌杆菌；除白喉杆菌外，假结核、化脓放线菌、溶血分泌杆菌是罕见的咽喉部病源菌，棒状杆菌一般不导致肺部感染；②乳杆菌：细小，白色凸起а溶血菌落，有特殊的酸臭味，口腔正常菌群，无临床意义；③芽孢杆菌：灰白大菌落，表面粗糙如毛玻璃状、蜡状、边缘不规则，不同种类菌落形态差异巨大，宽大β溶血。
延长培养时间，菌落从湿润变得干燥，边缘呈放射状扩散，形成叶状、掌状、雪花状、齿轮状等，常常为痰培养的污染菌；根据形态分为G-b（革兰阴性杆菌）、G-co（革兰阴性球菌）、以及根据对特殊营养的需求对苛养性G-b进一步分类，常见的如嗜血杆菌，军团菌等：BA生长、Choc生长、MecK生长，——Gram染色：G-b—氧化酶、分科琼脂颜色肠杆菌：氧化酶（-），分科琼脂上黄色湿润大菌落；弧菌：氧化酶（+），分科琼脂上淡黄色扁平大菌落；非发酵菌：氧化酶（+/-），分科琼脂上蓝色/无色透明小菌落—鲍曼不动杆菌为中等大小，菌落聚集处产不扩散黄色色素，分离菌落为兰色；BA生长、Choc生长、MecK不生长，——Gram染色：G-co—氧化酶（+）、触酶（+）奈瑟菌：白色/黄色中等大小菌落，该类细菌为口腔常见正常菌群，该菌在痰培养中含量的高低反应了标本采集状态的合格程度，大量出现提示培养结果将是不可信的；卡他莫拉菌：白色小菌落（24h内），菌落有脆性，用接种环推之可移，是儿科和老年病人常见的下呼吸道病原菌；BA不生长/细小、Choc生长、MecK不生长，——Gram染色：G-b、菌体细小或呈扭曲之长丝状嗜血杆菌：灰色/无色，半透明，1.5-2.0mm的多为流感嗜血杆菌，该菌为最常见的肺部感染病原菌，可发生于各个年龄层次，其高携带与COPD发病有较强的相关性；灰色略黄，不透明，1.0-1.5mm的多为副流感嗜血杆菌。
一般副流感嗜血杆菌不导致肺部感染，大量出现提示培养结果将是不可信的；BA不生长、Choc不生长、MecK不生长、BCYE-а生长/或在含有L-半胱氨酸、铁离子、复合抗生素选择剂的强化血琼脂上生长—Gram染色：G-b、菌体细、长丝状,提示可能为军团菌：该菌在BCYE-а上48~72 h为中等大小扁平菌落，灰白色，较粘着；该菌具有较强的生物危险性，其中嗜肺军团菌可传染；感染性腹泻一送检指征1具感染性腹泻症状：包括细菌性腹泻或病毒性，如志贺菌、沙门菌、弧菌科、致病性大肠埃希菌、小肠结肠炎耶尔森菌和轮状病毒等；2患者长期使用抗生素后的腹泻：要考虑抗生素相关性腹泻，可能引起的致病菌有念珠菌、金黄色葡萄球菌、艰难梭菌。
二标本采集和注意事项1.标本采集：（1）粪便标本: 采集粪便中的粘液、脓血、水样部位。
（2）直肠拭子: 如不能立即培养，应将标本放入运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油中保存运送。
（3）呕吐物：（4）可疑食品。
2.注意事项：（1）采集新鲜粪便；（2）在急性期采集标本；（3）用药前采集标本；（4）厌氧菌培养应在床边接种。
三常见肠道病原微生物的分离与鉴定1.志贺菌：志贺菌属是引起人类细菌性腹泻的最常见病原菌之一。
以其O抗原将志贺菌属分为4个血清型，痢疾志贺菌、福氏志贺菌、鲍氏志贺菌、宋内志贺菌。
我国大部分地区以福氏志贺菌为主。
（1）分离培养：取粪便的粘液或脓血部分，接种于SS琼脂和麦康凯琼脂平板上，35℃过夜培养；（2）初步鉴定：挑选无色透明、中等大小、圆形、光滑的菌落接种于KIA和MIU培养基上，35℃过夜培养；（3）最后鉴定：取乳糖（斜面）阴性，发酵葡萄糖产酸不产气，硫化氢、动力、脲素酶阴性，吲哚阴性的菌落作生化反应和血清凝集试验；（4）非典型株的处理：对生化反应和血清凝集试验结果不符合者，可用琼脂和肉汤交替传代，一般经5-10代后可恢复典型性状；（5）临床意义：志贺菌属的致病作用主要是侵袭力和内毒素，个别菌的某些型能产生外毒素。
2.沙门菌：沙门菌属广泛存在于自然界中，已发现有2000多个血清型，但只有少数几个血清型对人类致病。
鼠伤寒沙门菌是常见肠道致病菌，由其引起的腹泻病和院内交叉感染居各沙门菌感染之首，尤其以免疫功能未健全的婴幼儿易感（1）分离培养：取患者的粪便（肠热症患者2周以后，胃肠炎病人早期）、尿液、血液或骨髓液、其他体液、分泌物、呕吐物或食物等标本，接种增菌培养基或直接接种于SS琼脂和麦康凯琼脂平板上，35℃过夜培养；（2）初步鉴定：挑选无色透明中心呈黑色、中等大小、圆形、光滑的菌落接种于KIA和MIU培养基上，35℃过夜培养；（3）最后鉴定：取乳糖（斜面）阴性，发酵葡萄糖产酸产气（伤寒沙门菌不产气），硫化氢不定，动力阳性，脲素酶、吲哚阴性的菌落作生化反应和血清凝集试验；（4）临床意义：沙门菌属对人类致病临床上表现为肠热症（伤寒和副伤寒）、败血症和食物中毒（肠炎沙门菌、鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌和鸭沙门菌等）。
3.致病性弧菌：致病性弧菌已成为夏秋季急性流行性腹泻和食物中毒的重要、常见病原菌，包括弧菌属、气单胞菌属和邻单胞菌属。
溶血素和肠毒素是弧菌属重要的致病因子；气单胞菌能产生肠毒素、溶血素和细胞毒素等。
（1）分离培养：取患者的粪便、呕吐物或食物等标本，接种增菌培养基（碱性胨水）或直接接种于SS琼脂、庆大琼脂或TCBS琼脂平板上，35℃过夜培养；（2）初步鉴定：悬滴标本运动活泼（可作制动试验），革兰染色阴性，具有多型性；在选择平板上菌落形态典型；在KIA培养基上不分解乳糖，分解葡萄糖产酸不产气（个别产气），不产硫化氢；氧化酶阳性（麦氏弧菌为阴性）；（3）最后鉴定：进行生化反应和血清凝集试验。
4.致腹泻大肠埃希菌(DCEC)：DCEC是引起小儿腹泻的一组重要病原微生物。
1945年Bray首次报告了大肠埃希菌引起的婴幼儿腹泻，生化反应和血清凝集试验作为DCEC的最后鉴定。
(1)产肠毒素型大肠埃希菌（ETEC）：ETEC有30个血清型，可产生两种肠毒素，即耐热肠毒素（ST）和不耐热肠毒素（LT）；(2)肠致病性大肠埃希菌（EPEC）：EPEC有18个血清型，是流行性婴幼儿腹泻的病原菌，具有高度传染性。