黄芩苷提取物制备最佳工艺条件论文
黄芩苷提取工艺研究
黄芩苷提取工艺研究黄芩苷是一种天然植物活性成分，主要存在于黄芩等植物中，具有许多重要的医学应用价值。
因此，黄芩苷的提取工艺研究具有重要意义。
本文将对黄芩苷提取工艺的研究进行探讨。
一、黄芩苷的生物学特性黄芩苷是一种黄酮苷类成分，分子式为C21H20O12，分子量为448.4，可溶于水、乙醇、浓酸和碱溶液。
黄芩苷具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤、抗菌和抗病毒等多种生物学活性，具有广泛的药理学应用价值。
二、黄芩苷提取工艺的研究进展1.传统黄芩苷提取方法目前，传统的黄芩苷提取方法主要有水煎法、水提法、酒精提取法、辅助溶剂提取法等。
其中，酒精提取法是最常用的提取方法，其提取率高，但同时会伴随着一些不利因素，如热过程中易分解等。
2.新型提取技术近年来，越来越多的学者开始对新型的提取技术进行研究。
如超声波提取技术、微波提取技术、超临界提取技术等。
这些新型技术对提高黄芩苷的提取效率、提高产品纯度、缩短提取时间和降低成本都有积极作用。
3.优化提取工艺为了提高黄芩苷的提取效率和提取纯度，许多学者对黄芩苷的提取工艺进行了优化。
主要是对提取温度、提取时间、料液比、提取剂浓度等因素进行了研究，并采用响应面法、正交试验等方法进行了优化。
三、提取工艺的影响因素1.提取时间随着提取时间的延长，黄芩苷的提取量会逐渐增加，但到一定时间后会趋于平稳，如提取24小时后，提取率不再明显提高。
2.提取剂浓度提取剂浓度对黄芩苷的提取率有显著影响，一定浓度下提取率会逐渐增加，但超过一定浓度后，提取率反而会降低。
3.料液比料液比与提取率呈正相关关系，即料液比越高，提取率越高。
4.提取温度黄芩苷的提取温度也是影响提取率的重要因素之一。
通常提取温度在70℃左右时，提取效果最佳。
四、提取工艺的优化在黄芩苷的提取过程中，应该综合考虑各种因素的影响，优化提取工艺。
在具体操作中，应该选用适当的提取剂、控制提取温度、加强对提取剂浓度和料液比的调控等来优化提取，确保提取的质量和成本的平衡。
黄芩苷提取条件的实验设计(精)
黄芩苷提取条件的实验设计【摘要】目的：优选黄芩苷的提取工艺。
方法：通过正交设计试验，以黄芩苷的得率为指标，考察粒度、温度、超声时间对提取效果的影响。
结果：黄芩苷的最佳提取工艺为0.6~0.9mm的中档片加50%乙醇50倍量，温度60℃，超声振荡15min。
结论：该提取工艺提净率高、简单方便。
【关键词】黄芩；黄芩苷；正交试验黄芩（Radix Scutellariae）为唇形科植物黄芩（Scutellariae baicalensiS Georgi）的干燥根，具有清热燥湿，泻火解毒、止血、安胎的作用［1］。
其主要成分有黄芩苷元（Baicalein）、黄芩苷（Baicalin）、汉黄芩素（Wogonin）,此外尚含β-谷固醇（β-Sitosterol）等,其中黄芩苷是主要有效成分，具有抗菌、消炎之作用［2］。
传统的提取方法有温浸法、煎煮法、加热回流法、索氏法等。
超声波提取法是利用超声波的空化作用加速有效成分浸出的一种新发展起来的技术。
超声方法与传统方法相比较，具有设备简单，提取时间短，提取率高等特点。
本实验利用超声波提取法，设置L9(34)正交试验，以黄芩的含量为指标，紫外法检测，寻求超声提取的最佳提取工艺条件［3］。
1 仪器与试药 V-530型紫外分光光度计；AS 5150A型超声波清洗器；普利赛斯92SM-202A型电子分析天平。
黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所生产，批号：0715-200111）。
黄芩为市售药村，经周口市药检所鉴定。
乙醇为分析纯，水为蒸馏水。
2 方法与结果 2.1 原料的预处理将黄芩净洗切制分为3档，厚度1~2mm为厚档片，0.6~0.9mm为中档片，0.5mm以下的为薄档片。
干燥后分装样品袋中，备用。
2.2 黄芩苷的含量测定方法2.2.1 测定波长的选择精密称取黄芩苷对照品适量，用50%的乙醇溶液配制成为15μg/ml的溶液，以50%乙醇为空白，用V-530型紫外分光光度计，在200~350nm的波长范围内扫描，在278nm波长处有最大吸收。
黄芩中黄芩苷提取工艺的研究
黄芩中黄芩苷提取工艺的研究【摘要】目的探讨黄芩中黄芩苷的最佳提取工艺。
方法选取温浸法、煎煮法、加碱温浸法中较佳方法，考察粒度、次数、提取时间和次数、分离方式等因素对黄芩苷收率的影响。
结果煎煮法效果优于其他两种方法，煎煮法提取黄芩苷的最佳工艺条件为：粒度40目，煎煮2次，物料比1∶10和1∶5，时间60 min和30 min，双层滤布过滤再离心分离，70℃保温60 min，酸沉静置3 h抽滤，50%乙醇洗涤2次，干燥得黄芩苷产品。
黄芩苷收率可达13.67%，其含量为85.7%，黄芩苷在pH 3.98低温水浴液中性质较稳定。
结论该实验结果为大规模提取生产黄芩苷提供理论依据。
【关键词】黄芩黄芩苷提取工艺稳定性Abstract:ObjectiveTo investigate the best extracting technology of baicalin from Scutellaria baicalensis Georgi.MethodsThe best extraction method was selected from controlled temperature water immersing，decoction and controlled temperature alkali added water immersing method，and the affecting factors on yield and content of baicalin were investigated.ResultsThe decoction method was better than others，the good technology conditions were as follows:decocted the Scutellaria baicalensis 2 times with decuple water in 60 min and 5 folds water 30 min，respectively，then removed the residue with doublefiltration cloth and centrifuged，kept the temperature at 70℃ for 60 min，laid aside 3 hours，separated with centrifuge，dried the residue and obtained the baicalin product.The yield and content of baicalin was 13.67% and 85.7% respectively，the baicalin was stable at pH3.98.ConclusionThe results provide a theoretical basis for large-scale prodution of baicalin.Key words:Scutellaria baicalensis Georigi; Baicalin; Extracting technology; Stability黄芩Scutellaria baicalensis Georgi具有清热燥湿、泻火解毒、止血安胎等功效。
黄芩苷提取工艺研究
黄芩苷提取工艺研究目的：对现有黄芩苷提取工艺中的水提、酸沉、水洗、醇洗各参数进行优化，为今后黄芩苷的提取和纯化提供参考。
方法：以黄芩苷含量为指标，通过正交设计实验，对影响水提、酸沉、水洗、醇洗工艺的因素进行考察，并进行方差分析。
结果：确定了提取黄芩苷的最佳工艺条件。
结论：该提取工艺合理，黄芩苷收率高，质量易于控制。
[Abstract] Objective: To define the optimal parameters of extracting with water, depositing with acid, washing with water and ethanol in the extracting of baicalin from scutellaria. And to supply a reference for the extraction and purification of baicalin in future. Methods: Using the content of baicalin as an assessing index，the optimum extracting conditions which were about extracting with water, depositing with acid，washing with water and ethanol were selected by orthogonal design andthe analysis of variance. Results: The optimum extracting conditions of baicalin were selected. Conclusion: The extraction technology is reasonable ,the yield of baicalin is high, and the quality is easily controlled.[Key words] Baicalin;Decoctionpieces;Coarse powder; Glacial acetic acid; Ethanol; Ultraviolet spectrophotometry; Analysis of variance黄芩中含多种黄酮类化合物，主要为黄芩苷（baicalin）[1-3]、黄芩苷元（baicalein）、汉黄芩苷（wogonoside），汉黄芩素（wogonin）、黄芩新素（skullcapflavone）I和II[4,5]等, 具有抗菌、抗病毒、抗变态反应、抗炎、抗氧化，增强机体免疫力，镇静与降压，利胆与解痉等作用[6,7]。
黄芩中黄芩苷提取纯化工艺优化
黄芩中黄芩苷提取纯化工艺优化摘要】优化黄芩中黄芩苷的提取工艺。
方法：采用正交实验设计，以黄芩苷的提取率为指标，优选黄芩苷的最佳工艺条件。
结果：黄芩中黄芩苷的最佳提取工艺为：14倍量的沸水煎煮2次，1h/次，提取液调pH值1～2，80℃保温1小时，弃上清液，沉淀过滤，80℃干燥，粉碎即得。
结论：该工艺简单易行，时间周期短，适用于生产。
【关键词】黄芩；黄芩苷；提取；纯化1、仪器与材料多功能提取罐（河南衡阳市药物机械厂）、乙醇、盐酸（河南尔康制药股份有限公司）、氢氧化钠（天津市瑞金特化学品有限公司）、黄芩（云南白药集团股份有限公司，按2015版药典检验合格），黄芩苷标准品（中国药品生物制品检验所）2、方法与结果2.1 色谱条件：C18烷基硅烷键合硅胶柱；流动相：甲醇-水-冰醋酸（47：53：0.2）；检测波长：280nm[3]；流速：1.0mL/min；柱温：25℃，进样量20µL。
2.2 标准曲线的建立：精密称取黄芩苷标准品7.39mg，置于25mL容量瓶中，加甲醇使之溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为黄芩苷储备液（黄芩苷浓度为0.02956mg/mL。
分别取储备液0、1、2、3、4mL，置于5mL容量瓶中，以甲醇定容至刻度。
另取储备液，分别进样，以峰面积为纵坐标，浓度为横坐标进行回归，得线性回归方程Y=2.70811×10-8X＋0.00148（r=0.99974mg/mL），黄芩苷测定浓度线性范围为0.05912 ̴0.2956mg/mL。
2.3 精密度试验：将同一标准品溶液在1d内重复进样3次，连续测定3d，分别计算日内、日间精密度，结果分别为0.47%、1.99%，均小于2%，说明此方法重现性好。
2.4 加样回收率实验：取“2.5”项下样品，加入黄芩苷标准品溶液各1、2、3mL，配成低、中、高浓度各3份，以“2.2”项下方法计算，结果低、中、高种浓度的加样回收率分别为103.8%（RSD=1.21%）、98.4%（RSD=0.76%）、96.4%（RSD=1.32%。
中药黄芩中黄芩苷的提取工艺研究
干燥 至 恒 重 的 黄 芩 苷 标 样 ３ ９ ， 甲醇 定 容 至 １ 容 量 ． ４ｍｇ 用 Ｏｍｌ
瓶 中 ， 匀备 用 。 摇
２５２ 色谱条件 ．．
ＨＰ Ｉ Ｃ法 ， 动 相 为 甲 醇 ： 流 水 ８ ２ ， ０： ０
的 主 要有 效 成 分 为 黄 酮 类 化 合 物 ， 中 抗 菌 有 效 成 分 以 黄 芩 其 苷为主， 抑菌、 热、 压、 静、 尿 、 炎抗变态 反应 、 有 清 降 镇 利 抗 解 毒 等作 用 。在 实 际 生 产 中 ， 芩 的 提 取 工 艺 一 般 采 用 水 提 酸 黄 沉法［ ， ２ 碱提 酸沉 法 或 乙 醇 直 接 提 取 法 ［ 。为 了 更 好 地 利 ］ ３ ］
２ ５ １ 样 品溶 液 与 对 照 品溶 液 的 制 备 准 确 称 取 精 制 所 得 ．． 的黄 芩 苷 ， 甲 醇 溶 解 ， 却 后 将 溶 液 与 不 溶 物 全 部 转 移 至 用 冷
［３ 吴 寿 金 ， 泰 ， ３ 赵 秦永 琪 ， ． 代 中草 药 成 分 化学 ［ ． 京 ： 国 等 现 Ｍ］ 北 中
参 考
１ ９ ２ ９ ５： ７１
知 提取 时 间 （０ ３ ） ｉ ６ 士 ０ ｒ ｎ为 最 佳 提 取 时 间 。在 最 佳 提 取 温 ａ 度 、 取 次 数 和 提取 时 间 下 ， ｐ 为 ９的碱 性 溶 液 提 取 ， 提 用 Ｈ 后 续 处 理 同 ２ １结 果 见 表 ４ ．， 。
中药黄 芩 中黄 芩 苷 的 提取 工 艺 研 究
沙子健 付 双 许 凤
采 用 高效 液 相 色谱 法研 究 了不 同提 取 该 研 究 可为 黄 芩 苷 的 工业 【 要】 目的 摘 探 讨 中 药黄 芩 中黄 芩 苷 的提 取 工 艺 方 法
黄芩苷提取工艺研究
黄芩苷提取工艺研究黄芩苷（luteolin-7-glucoside）是一种常见的植物类食物素，具有良好的药理作用。
它有助于健康，可以降低血脂水平，抗过敏，抗氧化，抗肿瘤，预防心脑血管疾病，减少血糖水平和改善神经功能等。
因此，黄芩苷受到越来越多的关注。
由于它的稀有性，提取黄芩苷已成为研究的热点，为获取更多的黄芩苷，研究其不同的抽取技术具有重要的意义。
二、主要内容提取黄芩苷的工艺研究包括物理方法，化学方法和生物方法。
（1）物理法提取黄芩苷。
这是一种很简单的提取方法，不会产生有害的副产物，因此它被称为绿色抽取。
它以热、动力学和微生物的形式抽取黄芩苷，例如超声波抽取、空气过滤、球磨和磨碎等。
（2）化学法提取黄芩苷。
这是一种典型的有机抽取方法，包括溶剂萃取、提取和提取。
它的缺点是用于提取有害的有机溶剂，需要完全清理有害物质。
（3）生物法提取黄芩苷。
这是一种新兴的芳香化合物提取技术，它使用生物催化剂或酶来提取黄芩苷。
该技术不但可以提供高品质的提取物，而且还可以有效地提取出黄芩苷的其他化合物。
三、优缺点物理方法提取黄芩苷的优点是绿色抽取，速度快，无有害副产物，缺点是效率低，无法提取高浓度黄芩苷。
化学方法提取黄芩苷的优点是提取效率高，提取特定组分，缺点是产生有害副产物，提取过程需要复杂的步骤。
生物方法提取黄芩苷的优点是绿色抽取，抽取速度快，能够提取出多种活性组分，缺点是高维度的酶介导抽取，效率较低。
四、结论黄芩苷的抽取有物理法，化学法和生物法。
物理法抽取绿色，效率较低；化学法抽取快速，但有害溶剂会产生有害副产物；而生物法的抽取速度快，能够有效抽取出多种活性组分，且绿色安全，但高维度酶介导抽取，效率较低。
未来，我们应根据不同抽取需求，选择合适的抽取方法，以获取高质量的黄芩苷。
黄芩中黄芩苷提取工艺的研究
黄芩中黄芩苷提取工艺的研究黄芩是一种常用中药材，具有清热解毒、泻火解毒、抗感染、抗炎等多种药理作用。
其中，黄芩苷是一种重要的活性成分，广泛应用于医药领域。
为了提高黄芩苷的提取效率和纯度，需要对黄芩中黄芩苷提取工艺进行研究。
1. 黄芩苷的提取方法常用的黄芩苷提取方法有醇提法、水煎法、蒸馏法等。
其中，醇提法是目前应用最广泛的一种方法。
醇提方法的优点是提取效率高、操作简便、提取时间短、纯度高等。
但醇提方法也存在一些缺点，如对环境的污染较大、醇类有毒性等。
2. 黄芩苷提取工艺的优化为了提高黄芩苷的提取效率和纯度，可以对黄芩苷提取工艺进行优化。
优化方法包括改进提取剂类型、改进提取工艺条件、改进提取设备等。
2.1 改进提取剂类型醇提法中常用的提取剂有乙醇、甲醇、乙醚等。
可以根据黄芩中黄芩苷的特性，选择适合的提取剂，提高提取效率和纯度。
比如，选择丙酮作为提取剂，可以在短时间内提取出较多的黄芩苷，并保证较高的纯度。
2.2 改进提取工艺条件提取温度、提取时间、提取液比、颗粒度等因素都会影响黄芩苷的提取效率和纯度。
通过调整这些提取工艺条件，可以使黄芩苷的提取效率得到提高。
比如，提取温度选择60°C，提取时间选择6小时，提取液比选择1:20，颗粒度选择40目左右，可以获得较高的黄芩苷提取效率和纯度。
2.3 改进提取设备提取设备的性能也会影响黄芩苷的提取效率和纯度。
优化提取设备可以提高提取效率、提高产率、节约能源等。
比如，使用微波辅助提取设备进行黄芩苷的提取，可以在短时间内提取出较高的黄芩苷，并保证较高的纯度。
3. 黄芩苷的应用前景黄芩苷具有广泛的应用前景，可应用于预防和治疗多种疾病。
黄芩苷具有抗菌、抗病毒、抗炎、清热解毒等多种药理作用。
黄芩苷还可以用于抗肿瘤、降低血糖、治疗肝炎等方面。
随着对黄芩苷提取工艺的不断优化，其应用前景将更加广阔。
总之，黄芩中黄芩苷的提取工艺研究对于提高黄芩苷的提取效率和纯度，推动其应用前景的发展，具有重要意义。
黄芩中黄芩苷提取的工艺研究
黄芩中黄芩苷提取的工艺研究何自强;张惠玲;李传坤【摘要】Taking Radix Scutellariae as raw material and methanol as extracting agent , baicalin was extracted from Scutellaria baicalensis Georgi by methanol extraction and acid precipitation method .The influences of concentration of methanol ,extraction temperature , extraction time and solid‐liquid ratio were studied through the single factor test and orthogonal test . The optimum extraction conditions were determined as follows :concentration of methanol 65% ,extraction temperature80 ℃ ,extraction time 2 .5 h and ratio of solid‐to‐liquid 1∶10 ,combining with visual analysis and analysis of variance .The extraction rate was 23 .03% under these conditions .High extraction rate ,high purity and good reproducibility can be got .%以黄芩为原料、甲醇为提取剂，采用醇提酸沉法从黄芩中提取黄芩苷．通过单因素试验和正交试验探讨了甲醇浓度、提取温度、提取时间、料液比4个醇提条件对黄芩苷提取率的影响，结合直观分析和方差分析，确定最佳提取条件：甲醇浓度为65％，提取温度为80℃，提取时间为2．5 h ，料液比为1∶10，黄芩苷提取率可达到23．03％．该方法提取率高，纯度高，重现性好．【期刊名称】《安徽大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2016(040)003【总页数】7页(P73-79)【关键词】黄芩苷;提取;醇提酸沉法;单因素试验;正交试验【作者】何自强;张惠玲;李传坤【作者单位】武汉生物工程学院化学与环境工程系，湖北武汉430415;武汉生物工程学院化学与环境工程系，湖北武汉430415;武汉生物工程学院化学与环境工程系，湖北武汉430415【正文语种】中文【中图分类】O658;TQ041黄芩(Radix Scutellariae)为唇形科植物黄芩(Scutellaria baicalensis Georig)的干燥根[1]，其主要活性成分为黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、汉黄芩苷等[2-4].其中黄芩苷(baicalin)是从黄芩根中提取分离出来的一种黄酮类化合物，别名黄芩甙，淡黄色针晶或粉末，分子式为C21H18O11，熔点223～225 ℃[5-7].黄芩苷具有一定的脂溶性,在不同的溶剂中溶解度差异较大[6].黄芩苷易溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、吡啶，微溶于甲醇、乙醇、热冰醋酸，难溶于甲酸、乙酸、丙酮，几乎不溶于水、乙醚、苯、氯仿等溶剂[6-7].黄芩苷有羧基呈酸性，可溶于NaHCO3、Na2CO3和NaOH等碱性溶液，但在碱性溶液中不稳定，渐变成暗红色[6-7].黄芩苷具有显著的生物活性，具有清热解毒、抑菌抗炎、降压、镇静、利尿、利胆、抗变态反应、抗癌等作用，在临床医学已占有重要的地位[8-10].同时，黄芩苷还能吸收紫外线，清除氧自由基，抑制黑色素的生成，可作为一种功能性原料用于化妆品中[9,11].因此，黄芩苷具有较高的开发前景.目前，黄芩苷的提取方法主要有溶剂提取法、超声波提取法、微波提取法和超临界流体提取法等[10,12].从目前已发表的文献看，溶剂提取法以乙醇作提取剂居多，但甲醇提取未见报道，而黄芩苷在甲醇中溶解度高于乙醇[6].笔者以黄芩为原料、甲醇为提取剂，采用醇提酸沉法从黄芩中提取黄芩苷.以黄芩苷提取率为评价指标，重点探讨了醇提过程中甲醇浓度、提取温度、提取时间、料液比4个单因素对黄芩苷提取率的影响，再以单因素试验结果为依据进行正交试验，结合直观分析和方差分析确定最佳工艺条件.1.1 材料与试剂黄芩，购于武汉市阳逻心连心大药房；黄芩苷标准品(HPLC≥98%)，上海伊卡生物有限公司.甲醇、无水乙醇、HCl、NaOH均为分析纯.1.2 仪器与设备AUY120电子天平,日本岛津公司；TU-1810 紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司；TG16-WS台式高速离心机,长沙湘智离心机仪器有限公司；RE-52 AAA旋转蒸发器,上海嘉鹏科技有限公司；DHG-9053A型电热恒温鼓风干燥箱,上海一恒科技有限公司；XT-4双目显微熔点测定仪,北京泰克仪器有限公司. 1.3 实验方法1.3.1 黄芩苷的提取工艺1.3.1.1 黄芩苷的提取[10,13]称取5.0 g黄芩粗粉，置于圆底烧瓶中，加入一定体积的某浓度(体积分数)的甲醇溶液，浸泡过夜；将黄芩粗粉液回流提取一定时间后，抽滤，滤液减压蒸馏，得浓缩液；将浓缩液加热至80 ℃，用10%的HCl溶液调节pH为1.5～2.0，保温30 min后，室温静置12 h，离心机离心5 min，转速为7 500 r·min-1,弃去上清液；将沉淀移入烧杯中，加入10倍水，充分搅拌使成为均匀的混悬液，滴加20%NaOH溶液调pH至6.5～7，静置15 min后，离心，弃去沉淀；将上清液加热至40 ℃，搅拌下加入等体积与浸泡液浓度相同的甲醇溶液，混合均匀，静置10 min，离心，弃去沉淀；将上清液用HCl溶液调节pH为1.5～2.0，放置析出沉淀.抽滤后，沉淀用蒸馏水洗2～3次，抽干，60 ℃以下干燥，得粗制黄芩苷，称重，计算提取率.1.3.1.2 黄芩苷的精制[14]称取黄芩苷粗品，加10倍量水搅拌均匀，20%NaOH溶液调pH为 6.5～7，黄芩苷全部溶解后，加活性炭适量拌匀，80 ℃水浴保温30 min，抽滤除去活性炭，滤液用浓HCl调至pH为1～2，加入等体积95%乙醇(黄芩苷在甲醇和乙醇中的溶解度分别为1.569 mg·mL-1和1.458 mg·mL-1[4]，黄芩苷在乙醇中的溶解度比甲醇小.因此，重结晶时选用乙醇)，50 ℃水浴保温30 min，析出沉淀，放置过夜，抽滤，少量乙醇洗涤沉淀，抽干，60 ℃以下干燥，得精制黄芩苷，测其熔点.1.3.2 黄芩苷最大吸收波长的确定[15-16]精确称取黄芩苷标准品20 mg，溶于20 mL 50%(体积分数)乙醇溶液中.准确移取5 mL上述溶液，置于10 mL容量瓶中，用50%乙醇定容，配成质量浓度为0.5 mg·mL-1的黄芩苷标准溶液.准确移取黄芩苷标准溶液0.1 mL，用50%乙醇定容至10 mL容量瓶中.以50%乙醇溶液作为参比液，测其吸光度，得最大吸收波长为278 nm(见图1).1.3.3 黄芩苷标准曲线的绘制[16]分别移取0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 mL的黄芩苷标准溶液于10 mL容量瓶中，用50%的乙醇定容后，在278 nm波长下测吸光度，以质量浓度C(μg·mL-1)为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线(见图2).该标准曲线的回归方程为：A=0.041 3C+0.065 6，R2=0.998 9.1.3.4 黄芩苷含量的测定准确称取30 mg黄芩苷产品，50%乙醇溶液溶解后，定容至10 mL容量瓶中，然后，精确移取0.05 mL于10 mL容量瓶中，定容、摇匀，在278 nm波长下测其吸光度.根据标准回归方程计算黄芩苷含量，再求出黄芩苷产品提取率.黄芩苷含量和提取率的计算公式如下其中：X为黄芩苷的含量(%)；Y为黄芩苷的提取率(%)；C为样品溶液的质量浓度(μg·mL-1)；V为测量液的体积(mL)；n为样品稀释的倍数；m1为测吸光度所用的黄芩苷产品的质量(mg)；m2为黄芩苷产品的质量(mg)；m0为黄芩粗粉的质量(mg).2. 1 甲醇浓度对黄芩苷提取率的影响称取黄芩粗粉5 g，分别用40%，50%，60%，70%，80%的甲醇溶液浸泡过夜后回流提取，固定其他3个因素：料液比1∶10、提取时间2 h、提取温度80 ℃.按1.3.4的方法测定提取物含量，计算黄芩苷提取率，考察甲醇浓度对黄芩苷提取率的影响.结果如图3所示.由图3可知，甲醇浓度为40%时，黄芩苷提取率仅2.78%，随着甲醇浓度增大，提取率迅速提高；甲醇浓度为60%时，黄芩苷提取率达到最大值；继续增加甲醇浓度，黄芩苷提取率下降.低浓度时，甲醇极性较大，鞣质、蛋白质、黏液等高分子水溶性杂质的溶出量增加，黄芩苷提取率较低；甲醇浓度达到60%，甲醇水溶液极性与黄芩苷极性相近，利于黄芩苷的溶出；甲醇浓度高于60%时，甲醇溶液极性较小，黄芩苷溶出量急剧下降.综合考虑各因素，确定最佳甲醇浓度为60%.2.2 提取温度对黄芩苷提取率的影响称取黄芩粗粉5 g，提取温度分别为50，60，70，80，90 ℃，固定其他3个因素：甲醇溶液浓度60%，回流提取2 h，料液比1∶10.按1.3.4的方法测定提取物含量，计算黄芩苷提取率，考察提取温度对黄芩苷提取率的影响.结果如图4所示. 由图4可知，提取温度低于70 ℃，黄芩苷提取率随温度升高而下降，70 ℃后提取率迅速增加；80 ℃时提取率达到最大值.说明在80 ℃时，黄芩苷在溶液中的溶解度最大；而高于80 ℃时，可能造成黄芩苷部分分解，导致提取率下降.综合考虑各因素，确定最佳提取温度为80 ℃.2.3 提取时间对黄芩苷提取率的影响称取黄芩粗粉5 g，提取时间分别为1，2，3，4，5 h，固定其他3个因素：甲醇溶液浓度60%，料液比1∶10，提取温度80 ℃.按1.3.4的方法测定提取物含量，计算黄芩苷提取率，考察提取时间对黄芩苷提取率的影响.结果如图5所示.由图5可知，提取时间在1～2 h时，黄芩苷提取率增幅较大，2 h时达到最大值.超过2 h，黄芩苷提取率迅速下降.可能随着提取时间的增加，黄芩中的鞣质、蛋白质、黏液等高分子水溶性杂质的溶出量增加，将黄芩苷分子包裹起来，阻止了黄芩苷向溶液中扩散，导致黄芩苷提取率下降.2.4 料液比对黄芩苷提取率的影响称取黄芩粗粉5 g，料液比分别为1∶8，1∶9，1∶10，1∶11，1∶12，固定其他3个因素：甲醇溶液浓度60%，回流提取2 h，提取温度80 ℃.按1.3.4的方法测定提取物含量，计算黄芩苷提取率，考察料液比对黄芩苷提取率的影响.结果如图6所示.由图6可知，料液比在1∶8～1∶11之间时，黄芩苷提取率逐渐增大，因为料液比越大，黄芩粗粉与有机溶剂的接触面积越大，有利于黄芩苷的析出.料液比达到1∶11时，提取率最大，说明在此料液比下，大部分黄芩苷已被浸提出来.继续增大料液比，黄芩苷提取率缓慢下降，可能是鞣质、蛋白质、黏液等高分子水溶性杂质溶出，料液比过大，消耗的溶剂量增多，浓缩、干燥能耗增加，生产成本增大.综合考虑各因素，确定最佳料液比为1∶11.2.5 最佳工艺条件的选择选取甲醇浓度(A)、提取温度(B)、提取时间(C)、料液比(D)作为参考因素，设计3水平，以黄芩苷提取率为考察指标设计L9(34)正交试验，通过直观分析和方差分析确定黄芩苷提取的最佳工艺.因素水平表见表1，正交试验直观分析结果见表2，方差分析结果见表3.由表2直观分析结果可知：影响黄芩苷提取率的因素按影响程度由大到小排列为RA>RB>RC>RD,并得到最佳提取工艺为A3B2C3D1，即为甲醇浓度65%，提取温度80 ℃，提取时间2.5 h，料液比1∶10.由表3方差分析结果可知：F0.01(2,2)<FA，因素A水平的改变对试验指标有高度显著影响；F0.05(2,2)<FB<F0.01(2,2)，因素B水平的改变对试验指标有显著影响；F0.1(2,2)<FC<F0.05(2,2)，因素C水平的改变对试验指标有一定影响.直观分析结果与方差分析结果一致.2.6 黄芩苷提取工艺的验证实验以黄芩苷提取的最佳工艺进行3次平行实验，验证提取工艺的稳定性.即称取黄芩粗粉5 g，用浓度65%的甲醇溶液浸泡、回流提取，提取温度80 ℃，提取时间2.5 h，料液比1∶10.按上述工艺提取黄芩苷，结果见表4.由表4可知，以最佳工艺条件进行验证实验，黄芩苷的提取率稳定，重现性好.笔者以黄芩为原料、甲醇为提取剂，采用醇提酸沉法从黄芩中提取黄芩苷，通过单因素试验和正交试验考察了甲醇浓度、提取温度、提取时间、料液比4个因素对黄芩苷提取率的影响，结合直观分析和方差分析结果，确定最佳提取条件：甲醇浓度为65%，提取温度为80 ℃，提取时间为2.5 h，料液比为1∶10，黄芩苷提取率最大达到23.03%.雷燕妮等[1]以乙醇提取黄芩苷，提取率为12.32%；周芳等[6]采取醇提酸沉法提取黄芩苷，提取率为18.39%；马爽等[15]以乙醇为提取剂，采用超声波法提取黄芩苷，提取率为10.05%.与已报道的文献相比，该方法简单可行，黄芩苷提取率较高，且重现性好.黄芩苷在甲醇中的溶解度高于乙醇[6]，以甲醇作提取剂可提高黄芩苷的提取率.黄芩苷几乎不溶于水，而甲醇可与水以任意比例互溶，因此粗制的黄芩苷可通过多次水洗去除提取时残留的甲醇.精制后的黄芩苷，用XT-4双目显微熔点测定仪测其熔点为219～223 ℃，与理论值223～225 ℃[4]相近，说明该工艺条件下，提取后的黄芩苷纯度较高.如用于工业化生产，后处理较简单，可直接用于后续研究.【相关文献】[1] 雷燕妮, 张小斌. 中药黄芩苷的提取工艺研究[J]. 陕西农业科学, 2012 (6): 121-124.[2] 石俊英, 张小伟, 张会敏. 正交试验法优选黄芩苷提取纯化工艺[J]. 山东中医药大学学报, 2008, 32 (5): 413-415.[3] 雷泞菲, 彭书明, 周嘉峪, 等. 黄芩中黄芩苷提取工艺的研究[J]. 时珍国医国药, 2007, 18 (11): 2664-2666.[4] 莫金钢. 黄芩苷的提取分离与结构修饰[D]. 长春：东北师范大学生命科学学院,2007.[5] 莫金钢, 赵骥明, 张黎丽. 黄芩苷提取工艺的研究[J]. 长春：东北师范学院学报 (自然科学版), 2008, 27 (2): 47-50.[6] 周芳, 池汝安. 黄芩苷制备工艺的优化[J]. 湖北农业科学, 2006, 45 (6): 814-816.[7] 郑必胜, 王能青, 赵欣. 黄芩苷的水提法工艺研究[J]. 现代食品科技, 2008, 24 (1): 48-51.[8] 王玥, 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黄芩苷提取工艺研究
（#999<%7<%& 收稿）
黄芩苷提取工艺研究
作者： 作者单位： 刊名：
英文刊名： 年，卷(期)： 被引用次数：
黎万寿， 陈幸 四川省中药研究所,成都610041
中草药 CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS 2000,31(2) 52次
2011(2)
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黄芩苷提取物的制备最佳工艺条件研究摘要：目的以黄芩苷为指标，优化黄芩酶解提取的最佳工艺条件。
方法运用正交设计筛选酶解参数。
以高效液相色谱法测定黄芩苷，并计算其收率。
结果当复合酶用量为底物的1％，保温沉淀时间1.5 h，提取温度50℃，提取时间2 h时，黄芩苷收率达17.2%。
结论在优化的酶解条件下，黄芩苷的收率最高。
该研究为黄芩苷提取物的制备提供了一种新方法。
关键词：正交设计；黄芩；酶解；黄芩苷
【中图分类号】r284
黄芩为唇形科植物scutellaria baicalensis geo.的干燥根，性寒味苦，具有清热燥湿、泻火解毒的功效。
黄芩苷（baicalin）是黄芩中的主要有效成分。
现代药理研究表明：黄芩苷具有清热解毒、抗炎利胆、保肝、抗氧化和抗肿瘤等功能，在临床上被广泛应用。
中药材有效成分往往被包裹在细胞壁内，在药用植物有效成分提取过程中，选用适当的酶作用于药用植物材料，可以使细胞壁及细胞间质中的纤维素、半纤维素、果胶质等物质降解，破坏细胞壁的致密构造，减小细胞壁和细胞间质等传质屏障对有效成分从胞内向提取介质扩散的传质阻力，从而有利于有效成分的溶出。
目前，黄芩苷的提取工艺多以水提为主，运用生物酶解进行提取的报道不多。
为寻找酶解提取最佳工艺、提高黄芩苷的产率和纯度、减轻后处理的负担，本文运用正交设计全面考察了酶用量、提取时间和温度、保温沉淀时间等因素及其交互作用对黄芩苷收率的影响。
1 材料与方法
1.1 仪器美国安捷伦公司agilent 1100型高效液相色谱仪（包括四元泵，真空脱气机，自动进样器，柱温箱dad检测器）， agilent 1100化学工作站；上海安亭科学仪器厂anke lxj-ⅱb型离心机；上海跃进医学仪器厂数显式恒温水浴锅。
1.2 药材及试剂提取用复合酶（内含纤维素酶136万u/ml，半纤维素酶15万u/ml，果胶酶160万u/ml，β-葡萄糖酶0.8万u/ml）为宁夏和氏璧生物有限公司生产；黄芩苷对照品（自制，hplc归一化法计算其含量大于98%）；生药黄芩的干燥根（产地为青岛胶南黄芩gap产业基地），经青岛市炜伦生物技术有限公司汪志仁药师鉴定为唇形科植物scutellariabaicalensis geo.的干燥根。
甲醇为色谱纯，水为超纯水，醋酸为分析纯。
1.3 方法
1.3.1 黄芩药材前处理由于黄芩中黄芩苷酶的存在，提取前若未先除酶，湿润下的黄芩粉在32℃恒温5 h，则黄芩苷完全酶解，形成很不稳定的邻三羟基黄酮，极易氧化变成绿色醌类衍生物，影响黄芩苷含量的提取。
本实验采用的复合酶最佳提取温度为25～55℃。
为此，在进行实验前宜先将黄芩原药材粉碎，通过热蒸气加热30 min，以便“杀酶保苷”，避免原料中黄芩苷酶对黄芩苷提取的影响。
1.3.2 黄芩酶解工艺步骤将黄芩药材粉碎后，通过热蒸气加热30 min灭酶，再加入10倍水和适量的复合酶，按设计的技术参数
提取。
将提取液转移至离心杯中，5 000 r/min离心15 min，取上清液，加盐酸调ph值为2，在80℃保温，使黄芩苷析出。
过滤，沉淀物用水洗至ph=5.0，冻干，即得黄芩苷粗提物。
1.3.3 正交实验设计方案
1.4 黄芩苷含量测定
1.4.1 色谱条件色谱柱 beckman c18（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流动相为甲醇∶水∶醋酸＝47∶53∶0.2；流速1.0 ml/min，检测波长280 nm，进样量10 μl。
1.4.2 标准曲线的制备精密称取黄芩苷标准品5 mg，于25 ml 容量瓶中加甲醇溶解、定容。
再分别取2，4，5，6，8 ml置于10 ml 容量瓶加甲醇至刻度。
分别取10 μl，按上述色谱条件测定峰面积，以对照品进样量（μg）为横坐标（x），以峰面积值为纵坐标（y）进行线性回归，得回归方程及线性范围为：y=3×106x+1 517.4
（r=0.999 3）。
2 结果
正交实验结果可以看出，影响黄芩苷收率的因素依次为：
d>a>c>b（极值r的排列顺序）。
黄芩苷最佳酶解工艺为第2号实验：a1b2c2d2 ，即酶用量为底物的1％，加热提取温度50℃，提取时间2 h，保温沉淀时间1.5 h时，可得到最大的黄芩苷收率（17.2％）。
黄芩苷收率（%）=100（黄芩粗提取物的质量×黄芩粗提物中黄芩苷百分含量）/黄芩提取前质量
3 讨论
本文针对酶解工艺在黄芩提取的实际应用中运用较少、工艺不成熟的现状，将酶解工艺引入到黄芩的提取中，应用含有多种酶的复合酶，充分发挥酶解优势，对黄芩的酶解提取进行了研究。
运用正交实验确定了黄芩苷最佳酶解工艺。
为黄芩酶解工艺的中试放大提供了一定的参考依据，但由于投料量较少，在实际生产中还有待验证。
此外，由于黄芩自身的酶解，第1步采用蒸气加热以“杀酶保苷”是必要的。
在提取中本文没有进行二次提取，主要是考虑到在实际生产中一般均不采用二次提取，同时也是为了便于酸沉淀、抽滤、洗酸等工艺过程。
因为洗酸过程要反复进行3～4次，本方法可以缩短生产周期和减少酸的用量，提高酶解工艺的实用性。
黄芩苷ｃ2上的羟基易成盐，在酸性条件下黄芩苷分子就被还原出来，但这种反应要求的反应温度较高，若在低温条件下非常缓慢。
因而黄芩苷滤液加酸后，80℃保温是非常重要的条件，直接其影响收率。
考虑到在实际工业生产中的可操作性，保温时间不宜过长，为此本文尝试选取保温时间1～2 h。
结果表明1.5 h为最佳。
在最后一步的水洗调ph时，可选择水洗或醇洗。
从经济角度来说，水洗较佳。
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