真菌药敏试验方法比较[荟萃精制]
真菌药敏试验报告解读
真菌药敏试验报告解读
报告解读：
本次真菌药敏试验结果显示，对于不同的真菌菌株，药物的敏感性存在差异。
以下是对每种药
物的敏感性测试结果的解读：
1. 抗真菌药物A：
对真菌菌株A的浓度敏感性测试显示，抗真菌药物A在低浓度下可以有效抑制真菌生长，表现出良好的杀菌效果。
然而，随着浓度的增加，其对真菌的杀菌效果逐渐降低。
2. 抗真菌药物B：
对真菌菌株A的浓度敏感性测试表明，抗真菌药物B在各种浓度下均能有效抑制真菌的生长，表现出较好的杀菌效果。
尤其是在高浓度下，抗真菌药物B的杀菌效果更为显著。
3. 抗真菌药物C：
对真菌菌株A的浓度敏感性测试结果显示，抗真菌药物C对真菌生长的抑制作用相对较弱，尤其在低浓度时，其杀菌效果有限。
然而，在高浓度下，抗真菌药物C表现出一定的杀菌作用。
综合上述结果，不同真菌菌株对抗真菌药物的敏感性存在差异。
药物B在各种浓度下均表现出较好的杀菌效果，可以作为治疗真菌感染的一种有效选择。
抗真菌药物A和C在高浓度下也
具有一定的杀菌作用，但在低浓度下的抑菌效果较弱，需谨慎使用。
需要注意的是，本试验结果仅针对真菌菌株A进行了测试，对于不同的真菌菌株可能存在一
定的变异性，因此在临床实践中，应综合考虑真菌菌株的特点和药物的毒副作用等因素，进行
合理的抗真菌药物选择和应用。
药敏试验操作方法
药敏试验操作方法
药敏试验操作方法一般包括以下步骤：
1. 菌株选取：选择适当的病原菌株进行测试，一般使用已知药敏性的参比菌株作为对照。
2. 菌液的制备：将菌株接种到培养基上培养，培养至菌量合适后，采用生理盐水调制成适宜浓度的菌悬液。
3. 菌液的稀释：取一定数量的菌悬液，根据草浆法或直接法进行适当稀释，使菌量达到目标细菌的浓度，一般为0.5-2×10^8个CFU/mL。
4. 抗生素的制备：按照制备好的抗生素试纸或试剂盒的说明，将抗生素溶液或药片溶解成合适浓度的抗生素溶液。
5. 稀释菌液的扩散：将已制备好的菌液均匀涂布在含有良好的抗生素稀释浓度梯度的培养基上。
6. 培养基的培养：将涂布了菌液的培养基在合适的温度（通常为35-37）下培养约16-20小时。
7. 结果的解读：通过观察培养基上微生物的生长情况，判断细菌对抗生素的敏
感性。
一般，对抗生素敏感细菌培养后，会在培养基上形成清晰的抑菌圈，直径会随着对菌体敏感程度的增加而扩大。
8. 数据记录和分析：记录抗生素的名称、浓度、菌株信息、抗菌圈直径等数据，并进行统计和分析。
需要注意的是，药敏试验的具体操作方法可能会因实验目的、试验样本、试剂等因素而有所不同，因此在进行药敏试验前应详细阅读试剂盒或试纸的使用说明，并按照说明书操作。
酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法
酵母样真菌鉴定流程及药敏试验方法English response:Identification of yeast-like fungi and drug susceptibility testing are important steps in the diagnosis and treatment of fungal infections. The process of identifying yeast-like fungi involves several steps, including macroscopic and microscopic examination, biochemical tests, and molecular methods.First, the macroscopic examination involves observing the colony morphology on agar plates. Different species of yeast-like fungi have characteristic colony appearances, such as color, texture, and shape. This can provide initial clues to the identity of the fungus.Next, the microscopic examination involves observing the cellular morphology of the fungi using a microscope. This can reveal important features such as the presence of pseudohyphae, true hyphae, budding patterns, and theformation of spores. These characteristics can help narrow down the possible species of the fungus.Biochemical tests are then performed to further identify the yeast-like fungi. These tests may include carbohydrate assimilation tests, enzyme assays, and assimilation of nitrogen sources. The results of these tests can be compared to known patterns for different fungal species to aid in identification.In addition to traditional methods, molecular techniques such as polymerase chain reaction (PCR) and sequencing of specific genes can also be used for fungal identification. These methods can provide rapid and accurate identification of yeast-like fungi.Once the yeast-like fungi have been identified, drug susceptibility testing can be performed to determine the most effective antifungal treatment. The standard method for drug susceptibility testing of yeast-like fungi is the broth microdilution method. This method involves exposing the fungi to different concentrations of antifungal drugsin a liquid medium and observing the growth or inhibition of the fungi.In summary, the identification of yeast-like fungi involves a combination of macroscopic and microscopic examination, biochemical tests, and molecular methods. Once identified, drug susceptibility testing can help guide the selection of appropriate antifungal therapy.中文回答：酵母样真菌的鉴定涉及到几个步骤，包括宏观和微观检查、生化试验和分子方法。
抗真菌药敏试验ATBFUNGUS2微量稀释法、ROSCO纸片法和NCCLS纸片法的对比研究
抗真菌药敏试验ATBFUNGUS2微量稀释法、ROSCO纸片
法和NCCLS纸片法的对比研究
陈霁明;姚涌;汪学龙
【期刊名称】《热带病与寄生虫学》
【年(卷),期】2008(006)001
【摘要】目的对比研究白色假丝酵母菌的体外抗真菌药敏试验ATBFUNGUS2微量稀释法、ROSCO纸片法和NCCLS纸片法.方法采用前述3种方法 ,检测105株白色假丝酵母样真菌对氟康唑、依曲康唑、两性霉素、氟胞嘧啶的敏感性.结果体外抗真菌药敏试验ATBFUNGUS2微量稀释法、ROSCO纸片法和NCCLS纸片法用于检测白色假丝酵母样真菌有较好的一致性、重复性.结论 ATBFUNGUS2微量稀释法和ROSCO纸片法可以作为较好的体外抗真菌药敏试验方法在临床实验室推广使用.
【总页数】3页(P5-7)
【作者】陈霁明;姚涌;汪学龙
【作者单位】230032,安徽省池州市第二民医院检验科;合肥,安徽省医科大学病原生物学教研室;230032,合肥,安徽省医科大学病原生物学教研室;230032,合肥,安徽省医科大学病原生物学教研室
【正文语种】中文
【中图分类】R5
【相关文献】
1.ATBFUNGUS2微量稀释法测定酵母样真菌药敏试验初步研究 [J], 俞碧霞;徐成良;孔海深
2.ROSCO纸片法与ATBFUNGUS3微量稀释法抗真菌药敏试验结果对比分析 [J], 段新科;缪应业;刘小圆;郭照静;刘洪强
3.体外抗真菌药敏试验多量与微量稀释法对比研究 [J], 张晓冬
4.1998年美国NCCLS纸片法药敏试验法规中的主要变动 [J], 吕绳凯;葛平
5.1997年美国NCCLS药敏试验（纸片法）法规介绍——抗生素的选择与报告 [J], 潘云华;葛平
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药敏试验判定标准
药敏试验判定标准
药敏试验是评估细菌或真菌对不同抗生素或抗真菌药物的敏感性的一种实验方法。
根据药敏试验的结果，可以对患者进行个体化的治疗选择。
药敏试验主要根据药物对细菌或真菌的最低抑菌浓度（MIC）进行判定，以下是药敏试验判定标准的一般指导：
1. 敏感（S）：菌株对药物的MIC低，表示菌株对该药物敏感。
2. 中度敏感（I）：菌株对药物的MIC中等，表示菌株对该药物的敏感性较低。
3. 高度耐药（R）：菌株对药物的MIC高，表示菌株对该药物耐药。
4. 缺乏临床数据（NC）：该菌株与此药物之间的敏感性还没有明确的临床数据。
5. 不适用（NA）：该药物对该菌株没有药敏试验的意义。
需要注意的是，药敏试验的结果仅供临床参考，并不绝对
决定治疗方案。
临床医生应结合患者的具体情况、病原体
的临床意义、药物的不良反应等因素进行综合判断和决策。
药敏实验的原理实验报告
药敏实验的原理实验报告药敏实验的原理实验报告引言药物敏感性测试是一种常见的实验方法，用于确定细菌或真菌对不同药物的敏感性和抗性。
该实验报告旨在介绍药敏实验的原理、实验步骤和结果解读。
实验原理药敏实验的原理基于细菌或真菌对不同抗生素、抗真菌药物的敏感性差异。
在实验中，我们通常使用纸片扩散法或微量稀释法来评估药物的抗菌或抗真菌活性。
实验步骤1. 样品准备：收集需要测试的细菌或真菌样品，并进行纯化和培养。
2. 制备培养基：根据实验要求，制备适当的培养基，确保其含有必要的营养物质。
3. 纸片扩散法：将含有不同抗生素或抗真菌药物的纸片放置在含有细菌或真菌的培养基上，培养一段时间后观察生长情况。
4. 微量稀释法：将不同浓度的药物溶液加入含有细菌或真菌的培养基中，培养一段时间后观察生长情况。
5. 结果记录：记录不同药物对细菌或真菌的抑制效果，通常使用抑菌圈直径或最小抑菌浓度来评估药物的活性。
实验结果与讨论药敏实验的结果通常以抑菌圈直径或最小抑菌浓度来表示。
抑菌圈直径越大，说明药物对细菌或真菌的抑制作用越强。
最小抑菌浓度越低，说明药物对细菌或真菌的抑制作用越强。
根据实验结果，我们可以判断细菌或真菌对不同药物的敏感性和抗性。
如果细菌或真菌对某种药物表现出高度敏感性，那么该药物可能是治疗感染的有效选择。
相反，如果细菌或真菌对某种药物表现出抗性，那么该药物可能无法有效治疗感染。
实验注意事项1. 实验过程中要注意无菌操作，以避免外源性污染对结果产生干扰。
2. 实验中使用的药物应符合相关法规和规定，确保其安全性和有效性。
3. 实验室人员应遵守相关实验室安全规范，保护自身和他人的安全。
结论药敏实验是一种常见且重要的实验方法，用于评估细菌或真菌对不同药物的敏感性和抗性。
通过实验结果，我们可以选择合适的药物来治疗感染，并避免使用对细菌或真菌无效的药物。
药敏实验在临床医学和药物研发中具有重要的应用价值，可以指导临床用药和药物研发的方向。
真菌的鉴定及药敏试验分析
真菌的鉴定及药敏试验分析真菌对人类健康的危害包括由病原性真菌、条件致病真菌所致的深部真菌病和浅部真菌病；由气传真菌所致的变态反应真菌症即过敏；由污染真菌产毒所致的真菌中毒症。
随着医学的发展，特别是抗生素的广泛使用，大量治疗手段的开展，免疫障碍疾病的大量发生，使真菌感染的情况日益增加，医院感染中的真菌感染也不断增加，因而，掌握真菌检验的方法就成为检验工作中的一个重要组成部分。
1 材料与方法1.1 真菌来源收集临床送检标本所分离出的真菌120例，男性84例，女性36例，其中痰液96株，粪便11例，咽拭子12例、尿液5例、血液4例，分泌物3例。
1.2 采集及处理根据真菌侵犯组织和器官的不同而采集不同的标本，而采集最合适的标本是决定能否找到病原性真菌的关键，要尽量用消毒方法采集标本以免污染。
深部真菌病的标本如血液、脑脊液、脓液、尿、痰等应及时收集检查，一般不超过1～2h，以免变质污染，标本采取前，应忌用药。
为避免污染杂菌，在收集标本时，应严格无菌操作，必要时在培养基内加入抗生素类。
1.3 检验方法1.3.1 酵母样菌的检验直接涂片法各类标本，除脑脊液、尿、胸水、腹水等需离心沉淀后取沉淀物作涂片外，其他均可用生理盐水或10％～40％KOH作涂片后直接镜检或用革兰、墨汁、0.1％甲苯胺蓝染色后镜检。
分离酵母样菌所选用的培养基为沙保弱固体或液体培养基，在培养基中可加入各种抗生素抑制细菌的生长、有利于真菌生长含抑制剂的霉菌琼脂。
将备类标本直接接种上述培养基，除新型隐球菌需同时接种两支培养基；一支孵育于37℃，另一支孵育于22～28℃，其他酵母菌均孵育于22～28℃。
每日观察生长情况。
根据酵母菌在培养基上的菌落特征及在玉米粉吐温80培养基上生长物在显微镜下生长情况可作初步鉴定。
1.3.2 丝状真菌的检验某些丝状真菌如孢子丝菌或荚膜组织胞浆菌的直接涂片，必须染色后检查。
真菌的形态和结构通过染色更为清楚，不染色涂片不易保存，染色涂片可长期保存。
抗真菌药物敏感试验法
抗真菌药物敏感试验法吴绍熙;郭宁如【期刊名称】《四川生理科学杂志》【年(卷),期】1997(000)003【摘要】近数十年来,真前感染患者的发病率明显增高,新抗真菌药物也大批涌现,耐药菌株在临床上亦时有发生。
因此,抗真菌药物敏感试验成为临床实验室中的一个重要技术。
然而,与抗细菌药物敏感试验有所不同,在国内外至今尚未有一个规范的标准测试方法可被公众接受,这可能与真菌本身生长缓慢,体积大又具厚的胞壁等有关。
1992年,美国国家临床实验标准委员会(NCCLS)抗真菌药物组首先提出一个初步方案,规定了有关酵母样菌的抗菌药物敏感【总页数】3页(P38-40)【作者】吴绍熙;郭宁如【作者单位】中国医学科学院皮肤病研究所;中国医学科学院皮肤病研究所南京210042;南京 210042【正文语种】中文【中图分类】R96【相关文献】1.曲霉菌临床分离株的分子鉴定及体外抗真菌药物敏感性分析 [J], 张莉莉;王强兄;沈亮亮;冀燕芬;邓淑文;赵敬军2.2014～2018年北京协和医院酵母菌血流感染菌种分布和抗真菌药物敏感性分析[J], 刘文静; 赵颖; 郭莉娜; 刘亚丽; 张丽; 朱任媛; 徐英春; 孙宏莉; 张小江; 杨文航; 肖盟; 王瑶; 杨启文; 窦红涛; 王贺3.Sensititre YeastOne显色药敏板与微量肉汤稀释法检测曲霉体外抗真菌药物敏感性的一致性研究 [J], 李颖;王贺;张戈;刘文静;徐英春4.两株非典型烟曲霉临床株抗真菌药物敏感性和形态异常相关分子机制研究 [J], 姜媛;张彩云;孔庆涛;桑红5.39株指/趾甲分离黄曲霉复合体(Aspergillus sec-tion Flavi)菌种鉴定和抗真菌药物敏感性 [J], 许雪;邓淑文;王晓东;赵蓉芬;张虹;于农;Mohammad Javad Najafzadeh;史冬梅;陆敏因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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培养基： Mueller-Hinton琼脂
补充 2％
Glucose
0.5ug/ml Methylene blue dye
PH7.2-7.4
优点：有较好的重复性和稳定性
操作简便，价廉
缺点：目前只限氟康唑
行业培训
15
NCCLS纸片扩散法
0.5麦氏比浊标准（约为1~5×106CFU/ml）。
200ul菌悬液 200ulRPMI汤
10
酵母菌的NCCLS M27-A各药物折点
粘膜及系统性感染： 氟康唑（除克柔念珠菌）
粘膜感染： 伊曲康唑
粘膜及系统性感染： 5-氟嘧啶
敏感：
中介： 耐药：
敏感：
中介： 耐药：
敏感：
中介： 耐药：
≤ 8µg/ml
－ ≥64µg/ml
≤0.125µg/ml
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9
微量肉汤法
氟康唑的稀释方法同常量法，但起始浓度为2×常量法的 浓度（即128µg/ml ），终浓度为0.25µg/ml 。
氟康唑：1-10孔分别为 100ul 菌悬液：1-10孔分别为 100ul
。37℃。37℃
64 32 16 8 4 2 1 .5 .25 .125 ＋ －
35 ℃
其新余型菌隐株球4菌8小72时小读时取行，M业I培C训结果
先将氟康唑粉末溶于蒸馏水，然后用配制好的RPMI1640液倍比稀释， 使其起始浓度为640µg/ml, 终末浓度为1.25µg/ml，分装无菌洁净的 12mm×75mm试管：
64 32 16 8
4
2 1 0.5 .25 .125 ＋
－
前10管： 0.2ml氟康唑＋1.8ml菌液
念珠菌属 35 ℃孵育48小时 新型隐球菌 72小时
氟康唑对标准菌株 24h抑菌环直径（mm)的质控允许范围
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5
真菌体外药敏用培养基
E-test法 ：
在RPMI液体培养基中补充葡萄糖，使其终浓度为2%。
NCCLS纸片扩散法 ：
Mueller-Hinton 琼脂 补充2%葡萄糖和0.5μg/ml美蓝
丹麦ROSCO纸片扩散法 ：
改良的SHADOMY（ PH7.0）培养基 主要成分：酵母粉，葡萄糖，天冬氨酸，磷酸缓冲液等。
抑菌环直径 （mm)
MIC （ug/ml)
敏感（S)
>=19
<=8
剂量依赖性敏感 （SDD) 耐药（R)
15-18 <=14
16-32 >=64
S＝Susceptible SDD=Susceptible－Dose Dependent R=Resistant
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17
酵母菌纸片扩散法敏感试验
NCCLS M44-P. 2003
真菌常用的体外药敏试验 方法比较
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1
真菌药敏试验临床难以开展的原因
1.按照NCCLS推荐的稀释法,操作繁琐 2.有些药只能用于某种菌的抗菌活性测定 3.纸片法试验未得到NCCLS 认可 4.E试验价钱太贵 5.药敏孵育时间因菌种而不同
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2
体外敏感试验与临床治疗相关性
真菌体外药敏试验结果与口咽部真菌感染结果相关 性好
菌悬液均匀涂布于药敏板上 步骤同细菌敏感试验操作一致， 35～37℃孵育18～24小时， 对于生长缓慢的菌株如新型隐球菌，菌液需 调至
1麦氏单位，孵育48小时， 光滑念珠菌也需孵育48小时读取抑菌环直径。
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16
酵母菌纸片扩散法敏感试验
NCCLS M44-P. 2003 氟康唑解释标准和相应的最小抑菌浓度
接种浓度约为1～5×103CFU/ml
E-test法和NCCLS纸片扩散法：用菌液浊度为0.5麦氏单位。
Rosco纸片扩散法：
1. 念珠菌：
0.5麦氏浊度，生理盐水1：10稀(1~5×105CFU/ml)
2. 隐球菌属：
1.0麦氏浊度
3. 其它酵母菌： 0.5麦氏浊度，生理盐水1：1稀释
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7
常量肉汤法(M27-A)
－ ≥1µg/ml
≤4µg/ml
8~16µg/ml ≥32µg/ml
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11
酵母菌E-test法
瑞典AB Biodisk MIC
优点：有较好的重复性和稳定性
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12
E-test法
0.5麦氏比浊液 （约为1~5×106CFU/ml）。
菌悬液均匀涂布于药敏板上
35 ℃培养24小时读取结果
光滑念珠菌 新型隐球菌 等生长较慢的菌种需适当延长培养时间。
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6
菌液制备
将受试菌在沙保罗培养基上转种，以保证其纯度和活性。用0.85%的盐 水制成酵母菌悬液，调整其浊度达到0.5麦氏比浊标准（约为 1~5×106CFU/ml）。
常量稀释法：用RPMI1640液体稀释2000倍
接种浓度约为0.5~2.5×103CFU/ml
微量稀释法：用RPMI1640液体稀释1000倍
对于深部的真菌感染，抗真菌药物敏感性试验同临 床治疗的相关性还有待进一步证实
体外敏感试验没有考虑到真菌对抗真菌药物在体内 的动力学和复杂的生物学作用
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3
真菌体外药物敏感试验方法
NCCLSM27-A：常量肉汤稀释法，微量肉汤稀释法 E-test法 NCCLS M44-P纸片扩散法 (仅限氟康唑) 丹麦Rosco纸片扩散法(NCCLS未认可)
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4
真菌体外药敏用培养基
常量肉汤和微量肉汤法RPMI1640液制备：
RPMI
10.4g
MOPS（三氮吗啡啉丙磺酸）
34.53 g
蒸馏水900ml溶解后，用1M NaOH调节PH至7.0（25℃）， 用蒸馏水溶至 1000ml，
高压灭菌后，冷却至50 ℃
加入RPMI1640用0.22µm滤膜抽滤除菌，4℃保存。
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13
E-test法评价
准确性高,且操作简便 E-test法得到的MIC值在某些菌种中要低于NCCLS
推荐的常量肉汤稀释法测得的MIC 20%浓度CO2的环境中，可使此方法的结果更真实
反映药物对致病菌的敏感性
缺点：1.价格太高 每片40-50元 2. 吡咯类MIC终点不好确定
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14
读取MIC结行业果培训
2ml菌液 1.8ml1640
8
常量稀释法
药敏结果判定
氟康唑，伊曲康唑，两性霉素为100%抑制 其他唑类药物为80%抑制
（取0.2ml的生长对照菌液加入0.8mlRPMI液体培养基的菌液浓度）
质控株
克柔念珠菌ATCC 6258 近平滑念珠菌ATCC 22019 白念珠菌ATCC 90028 白念珠菌ATCC 24433