生化实验七 淀粉中还原糖含量的测定
还原糖含量的测定
05
结果分析与解读
数据处理与图表绘制
数据处理
对实验数据进行整理、筛选和计算， 确保数据的准确性和可靠性。
图表绘制
根据处理后的数据，绘制图表以直观 地展示实验结果，如柱状图、折线图 等。
结果解读与误差分析
结果解读
根据实验结果，分析还原糖含量的变化趋势和规律，判断实 验是否符合预期。
误差分析
对实验结果进行误差分析，找出误差来源，如操作误差、仪 器误差等，以提高实验的准确性和可靠性。
部分多糖
多糖是由多个单糖通过脱 水缩合形成的，部分多糖 也具有还原性，如淀粉、 纤维素等。
还原糖与非还原糖的区别
还原性
还原糖具有还原性，能够还原斐林试 剂或班氏试剂；非还原糖则没有还原 性，不能还原斐林试剂或班氏试剂。
结构
性质
还原糖通常具有较高的反应活性，而 非还原糖则较低。
还原糖通常含有醛基或酮基，而非还 原糖则没有这些基团。
02
还原糖基础知识
定义与性质
定义
还原糖是指具有还原性的糖类，能够 还原斐林试剂或班氏试剂的糖。
性质
还原糖具有醛基或酮基，因此具有还 原性，可与斐林试剂或班氏试剂发生 氧化还原反应。
还原糖的种类
01
02
03
单糖
单糖是最简单的糖类，也 是最具还原性的糖，如葡 萄糖、果糖等。
双糖
双糖是由两个单糖通过脱 水缩合形成的，如麦芽糖、 乳糖等。
色谱法
总结词
色谱法是一种分离和测定复杂混合物中各组 分含量的方法。在测定还原糖含量时，通常 使用高效液相色谱法，将样品中的还原糖与 其他组分分离，通过检测器检测各组分的含 量，从而计算出还原糖的含量。
详细描述
淀粉中还原糖的测定
淀粉中还原糖的测定
淀粉是葡萄糖的重要前体，它的还原糖的测定是淀粉的酶水解分解过程中得到更多的葡萄糖的研究重点之一。
淀粉中还原糖的测定是指检测淀粉酶水解分解时得到多少葡萄糖。
它可以不同程度地揭示淀粉水解过程中多种反应物和反应机制，从而为淀粉研究和使用提供理论指导。
常用淀粉还原糖测定包括银蓟素法和紫色葡萄糖酶缓冲液（CERB）法。
银蓟素法通常使用复银蓟素（AIF3 ）作为还原剂，并用银溶液用作指示剂。
其原理是复银蓟素可以与葡萄糖反应，形成无色化合物，在添加银溶液后，无色化合物反应为深蓝色化合物，因此，用反应液的蓝色强度来表示淀粉水解中可以生成的葡萄糖量。
紫色葡萄糖酶缓冲液法（CERB）测定淀粉中生成的葡萄糖量，采用一定浓度的葡萄糖酶和一定浓度的磷酸柠檬酸钠缓冲液（pH 7.5）在中性环境下，葡萄糖酶将糖原分解成葡萄糖，而丙二醛大量生成，丙二醛和磷酸柠檬酸形成一种紫色混合物，并在530 nm处吸收光谱，计算其浓度来表示淀粉水解中的葡萄糖量。
淀粉的葡萄糖量有许多影响因素，如淀粉的粒径大小，水解温度、淀粉活性、淀粉溶液的pH值等。
淀粉还原糖测定可以反映淀粉水解过程中反应物和反应机制，可以用来研究淀粉的水解活性，进而洞察淀粉活性和可食用食品性能的关系。
淀粉中还原糖含量的测定实验报告
淀粉中还原糖含量的测定实验报告实验目的：了解淀粉中还原糖的含量测定方法,掌握其操作技能。
实验原理：淀粉在加热过程中会被分解为半乳糖单元,再由半乳糖单元与水分解产生葡萄糖和果糖,这些糖叫做还原糖。
还原糖会与硝酸铜溶液发生化学反应,生成蓝色沉淀。
利用这一特性,可以用硝酸铜法测定淀粉中还原糖的含量。
实验仪器：试管、恒温水浴、移液管、手持离心机、比色皿、分光光度计等。
实验材料：淀粉溶液、葡萄糖标准品、醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液、硝酸铜试液、碱式氯化钾溶液。
实验步骤：1.准备工作：将硝酸铜试液浓度稀释至0.1mol/L,将酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液PH值调至4.5,将碱性氯化钾溶液稀释至10%。
2.样品制备：取1ml淀粉溶液加10ml酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液混合,放至沸水中加热5分钟,冷却至室温后离心取上清液,加50ml水调至粘度适宜。
3.标准品制备：取30mg葡萄糖溶于50ml水中,称取1、2、3、4、5ml混合溶液,并分别转移至不同的试管中,加入2ml酸性醋酸钠-醋酸酸钠缓冲液中。
4.加入试液：取淀粉样品0.5ml放入离心管中,加入2.5ml缓冲液和2.5ml硝酸铜溶液混合均匀,置于60℃水浴中加热15分钟后冷却,加入2.5ml碱性氯化钾溶液,静置10分钟。
5.比色测定：将标准品和样品离心管中的试液吸入移液管中,分别加入不同比色皿中静置10分钟后,用660nm的波长分光光度计检测蓝色产物溶液的吸光度值。
实验结果：样品试验：A值 = 0.45标准品试验：第一组：1ml葡萄糖,A值 = 0.12第二组：2ml葡萄糖,A值 = 0.24第三组：3ml葡萄糖,A值 = 0.37第四组：4ml葡萄糖,A值 = 0.49第五组：5ml葡萄糖,A值 = 0.60计算：以葡萄糖标准曲线计算样品中还原糖含量。
样品中还原糖含量 = (A值 - A0) / S其中,A0是淀粉试样的吸光度,S为标准曲线斜率。
计算得出样品中还原糖含量为3.5mg/ml。
淀粉含量的测定
实验二淀粉含量的测定一、原理淀粉测定可先除去样品中的脂肪及其中的可溶性糖、再在一定酸度下，将淀粉水解为具有还原性的葡萄糖。
通过对还原糖含量的测定，乘上一换算系数0.9，即为淀粉含量，反应式如下：H+(C6H10O5) n+n H2O—→nC6H10O6n×162.1 n×180.2根据反应公式，淀粉与葡萄糖之比为：162.1∶180.12=0.9∶1，162.1÷180.12=0.9即0.9g淀粉水解后可得1g葡萄糖。
淀粉水解后可得1g葡萄糖。
二、材料、仪器与试剂（一）材料：马铃薯、苹果、葡萄等。
（二）仪器：滴定管(15ml)、移液管（5ml）、烧杯、三角瓶（150ml）、容量瓶（500ml,250ml,100ml）、漏斗、研钵、酒精灯、铁架台、滴定管夹、水浴锅、分析天平。
（三）试剂：硫酸铜、酒石酸钾钠、氢氧化钠、盐酸、次甲基蓝、醋酸铅、硫酸钠、酚酞。
1．菲林试剂甲：称取硫酸铜34.639g加入蒸馏水溶解后，置于500ml容量瓶中，加水稀释到刻度，混匀。
2．菲林试剂乙：称取酒石酸钾钠173g及氢氧化钠50g，加蒸馏水溶解后置于500ml容量瓶中，加水稀释到刻度，混匀，过滤后待用。
3．蔗糖标准液的配制：用分析天平准确称取1g蔗糖，溶解后移入250ml容量瓶中定容，混匀后吸取50ml放入100ml容量瓶中，加2.5ml 12mol/L HCl，在沸水中煮10min，取出迅速用冷水冲洗冷却至室温，加1%酚酞2-3滴，加6mol/L NaOH中和至微红，定容，混匀，用此标准液滴定菲林试剂，求出标准蔗糖液1ml中蔗糖含量。
三、操作步骤（一）样品处理：称去皮切碎的苹果肉2g，置研钵中磨成匀浆，用蒸馏水冲洗转移入100ml 容量瓶中，加2.5ml 12mol/L HCl在沸水浴中煮10min，取出冷却，此时样品中的蔗糖水解成还原糖。
对含蛋白质较多的样品，可滴加10%Pb(Ac)2到溶液不再产生白色絮状沉淀时为止，加饱和Na2SO4除去多余的铅离子，然后加1%酚酞2-3滴，加6mol/L NaOH中和至微红，定容到100ml，摇匀后过滤待测。
还原糖含量的测定
2、测定样品中还原糖和总糖含量。 （1）提取样品中的还原糖： 立即用流动冷水冷却至室温 乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
立即用流动冷水冷却至室温
以1、2号管的吸光值，分别在标准曲线上查出相应的还原糖毫克数。 通过本次实验，掌握还原糖定量测定的基本原理，学习比色定糖法的基本操作，熟悉分光光度计的使用方法。
准确称取0.1g食用面粉放置于100ml三角 然后以葡萄糖浓度为横坐标，吸光值为纵坐标，绘制出标准曲线。
准确称取1g食用面粉放置于100ml三角瓶中，加少量蒸馏水调成糊状，再加入50ml蒸馏水，摇匀，置于50℃水浴条件下20分钟，使还 原糖浸出；
瓶中，加入10ml 6mol/L HCl及15ml蒸馏 还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，其基本原理是用比色法对还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（
还原糖
总糖
2.0
1.0
0
1.0
1.5
1.5
同时一起在沸水浴中加热5min*
冷却
立即用流动冷水冷却至室温
蒸馏水(ml)
21.5
21.5
吸光值(A540)
结果处理
以1、2号管的吸光值，分别在标准曲线 上查出相应的还原糖毫克数。按下列公式 计算出样品中还原糖和总糖的百分含量：
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法，其基本原理是用比色法对还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量（
可 适 当 延 长 沸 水 浴 时 间 ； 若 不 显 蓝 色 ， 则 还原糖以葡萄糖含量计）。
立即用流动冷水冷却至室温
待水解液冷却至室温后加入1滴酚酞指示剂，用6mol/L NaOH中和至微红色，在4000rpm、5分钟条件下离心，得到的上清液转移到
实验七 食品中还原糖的测定(综合性)教学文稿
实验七食品中还原糖的测定(综合性)实验七面粉中还原糖的测定（综合性实验）课程：食品检验与分析班级：2011级食品1、2班地点：A13-0405 指导教师：蔺芳（一）直接滴定法一、实验原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，如乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作为指示剂，用样液直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，达到终点时，稍过量的还原糖把蓝色的次甲基蓝指示剂还原为无色，而显出氧化亚铜的鲜红色。
根据样品液消耗体积，计算出样品中还原糖的含量。
各步反应式（以葡萄糖为例）如下：(1) Cu2SO4＋2NaOH = 2Cu(OH)2↓＋Na2SO4(2) Cu(OH)2＋KNaC4H4O6= KNaC4H2O6Cu ＋2H2O(3) C6H12O6＋6KNaC4H2O6Cu＋6H2O = C6H12O7＋6KNaC4H4O6＋3Cu2O↓＋H2CO3从上述反应式可知，1mol葡萄糖可以将 6mol Cu2＋还原为Cu+。
但实际上此反应为非定量反应，即不能根据反应式直接计算出还原糖含量。
因此在测定过程中要严格遵守所规定的操作条件，如热源强度(电炉功率)、锥形瓶规格、加热时间、滴定速度等。
二、适用范围及特点本法又称快速法，特点是试剂用量少，操作和计算都比较简便、快速，滴定终点明显。
适用于各类食品中还原糖的测定。
但测定酱油、深色果汁等样品时因色素干扰，滴定终点常常模糊不清，影响准确性。
本法是国家标准分析方法。
三、试剂及玻皿配置仪器 1. 200mL 烧杯 2 个 2. 100mL、250mL、1000mL 容量瓶各 1 个3. 5.0mL 移液管 4 支 4. 25mL、 100mL 量筒各 1 个 5. 250mL 锥形瓶 4 个6. 800W 电炉 1 个7. 恒温水浴锅、干燥箱8. 碱式滴定装置 1 套9. 玻璃珠（适量） 10. 滤纸、漏斗及过滤装置 11. 分析天平试剂 1. 碱性酒石酸铜甲液：称取 15g硫酸铜(Cu2SO4·5H2O )及 0.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释到 1000mL。
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]
![还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]](https://img.taocdn.com/s3/m/73e5e828cec789eb172ded630b1c59eef8c79ab9.png)
还原糖的测定实验报告[生物化学实验报告]实验一糖类的性质实验〔一〕糖类的颜色反响一、实验目的1、了解糖类某些颜色反响的原理。
2、学习应用糖的颜色反响鉴别糖类的方法。
二、颜色反响〔一〕α-萘酚反响1、原理糖在浓无机酸〔硫酸、盐酸〕作用下，脱水生成糠醛及糠醛衍生物，后者能与α-萘酚生成紫红色物质。
因为糠醛及糠醛衍生物对此反响均呈阳性，故此反响不是糖类的特异反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂莫氏试剂：5％α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g，溶于95％酒精中，总体积达100mL，贮于棕色瓶内。
用前配制。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL1％淀粉溶液100mL0.1％糠醛溶液100mL浓硫酸500mL4、实验操作取5支试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液、1％淀粉溶液、0.1％糠醛溶液各1mL。
再向5支试管中各参加2滴莫氏试剂，充分混合。
倾斜试管，小心地沿试管壁参加浓硫酸1mL，慢慢立起试管，切勿摇动。
观察记录各管颜色。
〔二〕间苯二酚反响1、原理在酸作用下，酮醣脱水生成羟甲基糠醛，后者再与间苯二酚作用生成红色物质。
此反响是酮醣的特异反响。
醛糖在同样条件下呈色反响缓慢，只有在糖浓度较高或煮沸时间较长时，才呈微弱的阳性反响。
实验条件下蔗醣有可能水解而呈阳性反响。
2、器材试管及试管架，滴管3、试剂塞氏试剂：0.05％间苯二酚－盐酸溶液1000mL，称取间苯二酚0.05g 溶于30mL浓盐酸中，再用蒸馏水稀至1000mL。
1％葡萄糖溶液100mL1％果糖溶液100mL1％蔗糖溶液100mL4、实验操作取3试管，分别参加1％葡萄糖溶液、1％果糖溶液、1％蔗糖溶液各0.5mL。
再向3支试管中各参加塞氏试剂5mL，充分混合。
将试管同时放入沸水浴中，观察记录各管颜色。
(二)糖类的复原作用一、实验目的1、理解并掌握糖类的复原性质；2、学习常用的鉴定糖类复原性的方法。
还原糖的测定方法还原糖和总糖的测定
还原糖的测定方法还原糖和总糖的测定还原糖和总糖的测定3,5-二硝基水杨酸比色法一、目的掌握还原糖和总糖测定的基本原理，学习比色法测定还原糖的操作方法和分光光度计的使用。
二、原理还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。
还原糖是指含有自由醛基或酮基的糖类，单糖都是还原糖，双糖和多糖不一定是还原糖，其中乳糖和麦芽糖是还原糖，蔗糖和淀粉是非还原糖。
利用糖的溶解度不同，可将植物样品中的单糖、双糖和多糖分别提取出来，对没有还原性的双糖和多糖，可用酸水解法使其降解成有还原性的单糖进行测定，再分别求出样品中还原糖和总糖的含量(还原糖以葡萄糖含量计)。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其它产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质颜色的深浅成正比关1系，利用分光光度计，在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线并计算，便可求出样品中还原糖和总糖的含量。
由于多糖水解为单糖时，每断裂一个糖苷键需加入一分子水，所以在计算多糖含量时应乘以0.9。
三、实验材料、主要仪器和试剂1( 实验材料小麦面粉;精密pH 试纸。
2( 主要仪器(1)具塞玻璃刻度试管:20mL×11(2)大离心管:50mL×2(3)烧杯:100mL×1(4)三角瓶:100mL×1(5)容量瓶:100mL×3(6)刻度吸管:1mL×1;2mL×2;10mL×1(7)恒温水浴锅(8)沸水浴(9)离心机(10)扭力天平(11)分光光度计3( 试剂(1)1mg/mL 葡萄糖标准液2准确称取80?烘至恒重的分析纯葡萄糖100mg，置于小烧杯中，加少量蒸馏水溶解后，转移到100mL 容量瓶中，用蒸馏水定容至100mL，混匀，4?冰箱中保存备用。
(2)3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂将6.3g DNS 和262mL 2M NaOH 溶液，加到500mL 含有185g 酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g 结晶酚和5g 亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，贮于棕色瓶中备用。
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实验七淀粉中还原糖含量的测定
一、目的
掌握还原糖含量的测定方法，学习用比色法测定还原糖的方法；
二、原理
单糖和某些寡糖含有游离的醛基或酮基，有还原性，属于还原糖；而多糖和蔗糖等属于非还原性糖。
还原糖在碱性条件下加热被氧化成糖酸及其他产物，3,5-二硝基水杨酸则被还原为棕红色的3-氨基-5-硝基水杨酸。
在过量的NaOH 碱性溶液中此化合物在540nm处有最大吸收，在一定浓度范围内还原糖的量与光吸收值呈线性关系，利用比色法可测定样品中还原糖的含量
三、器材
1、吸管1.0mL（×2）、5.0mL（×1）、0.1mL（×1）、0.2mL（×1）、0.5mL（×3）
2、试管1.5cm×15cm（×10）
3、分光光度计 ,水浴锅、电子分析天平,电炉、容量瓶（100mL×1）、玻璃漏斗、量筒、研钵和三角烧瓶。
四、试剂与材料
1、标准葡萄糖溶液（1.0mg/mL）：准确称取干燥恒重的葡萄糖100mg，溶于蒸馏水并定容至100mL，混匀，4℃冰箱中保存备用。
2、3,5-二硝基水杨酸（DNS）试剂：将6.3g DNS和262mL 2mol/L NaOH溶液，加到500mL含有185g酒石酸钾钠的热水溶液中，再加5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解，冷却后加蒸馏水定容至1000mL，存储于棕色瓶中备用。
3、食用面粉
五、操作
1、1. 葡萄糖标准曲线的制作：取8支15mm×180mm试管，按下表加入1.0mg/ml葡萄糖标准液和蒸馏水。
吸光度为纵坐标，葡萄糖含量（mg ）为横坐标做图得标准曲线。
2、样品中还原糖的提取和测定
称取1.5g 食用面粉加水约5mL ，在研钵中磨成匀浆，转入三角烧瓶中，并用约20mL 蒸馏水冲洗研钵2～3次，洗出液也转入三角烧瓶中。
于50℃水浴中保温约0.5h （使还原糖浸出），取出，冷却后定容至50mL 。
过滤，取1.0mL 滤液进行还原糖的测定。
六、计算
按照下列公式分别计算实验材料中还原糖的浓度
W （还原糖%）＝ ×100
式中：W ：还原糖质量分数（%）C 1：查曲线所得葡萄糖质量（mg ） V 1：还原糖提取液总体积（ml ）/测定时取用体积（ml ） m ：样品质量（mg ）
C 1V
1
m。