菌种的保存与管理
菌种管理规范
菌种管理规范引言概述：菌种管理规范是指在实验室或生产环境中对菌种进行科学、规范的管理和操作。
菌种管理规范的制定和实施，能够确保菌种的纯度、稳定性和可追溯性，保证实验结果的准确性和可重复性。
本文将从菌种的存储、标识、记录、分发和销毁等五个方面，详细阐述菌种管理规范的相关内容。
一、菌种的存储1.1 温度控制：菌种的存储温度应根据不同菌种的特性进行合理选择，常见的存储温度有4℃、-20℃和-80℃。
应定期检查和记录存储设备的温度，确保菌种的存储温度稳定。
1.2 冷冻保护剂的使用：在低温存储时，应添加适当的冷冻保护剂，如甘油、DMSO等，以保护菌种的生物活性和稳定性。
1.3 存储容器的选择：应选择符合菌种存储要求的容器，如冷冻管、培养基斜面等，并在容器上标明菌种的相关信息。
二、菌种的标识2.1 命名规范：为了方便识别和管理，应为每个菌种制定统一的命名规范，包括菌种名称、属名、菌株编号等，避免重名或混淆。
2.2 标签标识：在菌种存储容器上应贴上清晰可见的标签，标注菌种的名称、菌株编号、存储日期、存储温度等信息，以便追溯和管理。
2.3 标本保存：对于重要的菌种，应保存其原始标本，如培养基斜面、冷冻备份等，以备不时之需。
三、菌种的记录3.1 菌种信息记录：建立菌种信息数据库，记录每个菌种的相关信息，包括菌种名称、来源、存储温度、存储日期、使用记录等，以便查询和管理。
3.2 菌种存储记录：对每个菌种的存储情况进行详细记录，包括存储温度、存储容器、存储位置等，以确保菌种的追溯和可靠性。
3.3 菌种使用记录：每次使用菌种都应记录相关信息，如使用日期、使用用途、使用人员等，以便追溯实验结果和质量控制。
四、菌种的分发4.1 分发程序：制定菌种分发的程序和标准操作规程，包括菌种的选择、分离、传代等，确保分发的准确性和菌种的纯度。
4.2 分发记录：对每次菌种分发进行详细记录，包括分发日期、分发数量、接收人员等，以便追溯和质量控制。
菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程
菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程传代用菌种采用甘油冷冻管保存法。
将菌种接种在适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，将菌液混合甘油并分装至冷冻管中，冷冻管标注菌种名称、代数、保存日期等信息，然后放置于-80℃冰箱中保存。
每年进行一次复苏和传代，保存时间不超过5年。
5.3.2.2液体石蜡保存法对于一些难以保存的菌种，采用液体石蜡保存法。
将菌种接种在适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，将菌液混合液体石蜡并分装至玻璃瓶中，瓶口用铝箔密封，标注菌种名称、代数、保存日期等信息，保存温度为-70℃。
每年进行一次复苏和传代，保存时间不超过5年。
5.4菌种的传代传代用菌种每年进行一次复苏和传代。
复苏后，将菌种接种至适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，按照规定的传代代数制备传代用菌种，并及时更新菌种库存记录。
5.5菌种的使用使用菌种前，应先确认菌种的品质和纯度，并按照规定的传代代数制备工作用菌种。
使用后，应及时更新菌种库存记录，并进行相应的消毒处理。
5.6菌种的销毁菌种在使用过程中，如出现变异或污染等情况，应及时进行应灭活处理，并填写《菌种销毁记录表》，经主管部门审核同意后，进行销毁处理。
菌种库存中长期未使用的菌种，应定期进行清理和销毁处理。
菌复苏、复壮；Sabouraud葡萄糖琼脂培养基：用于白色念珠菌复苏、复壮；青霉素-链霉素琼脂培养基：用于铜绿假单胞菌复苏、复壮。
5.4.1.1.3复苏步骤：1.取出保存好的菌种管，用接种针在酒精灯上消毒；2.将接种针在75%酒精中消毒，再用酒精棉球擦拭消毒；3.用接种针在相应的培养基上进行接种；4.置于适宜温度下孵育，待菌落出现后进行传代或进行实验。
5.4.1.2标准菌株的确认通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法进行鉴定，确认菌株的纯度和种属。
5.4.1.3标准菌株的传代将菌株从原始保存方式中转移到新的保存方式中，确保菌株的保存和传承。
传代次数不宜过多，一般不超过10代。
菌种管理规范
菌种管理规范一、引言菌种管理是指对菌种的收集、保存、鉴定、分类、培养和利用等过程进行规范化管理的一系列操作。
规范的菌种管理对于保证菌种的质量、促进科学研究和推动产业发展具有重要意义。
本文旨在制定菌种管理规范，确保菌种资源的有效管理和利用。
二、菌种收集与保存1. 收集菌种应遵循合法、合规的原则，不得侵犯他人权益或违反相关法律法规。
2. 收集的菌种应具备明确的来源和采集信息，包括菌种名称、采集地点、采集时间等。
3. 收集后的菌种应立即进行保存，可采用冷冻、干燥、液氮等方法进行长期保存。
4. 菌种的保存条件应符合菌种的特性和保存要求，确保菌种的存活率和稳定性。
三、菌种鉴定与分类1. 对于新收集的菌种，应进行鉴定和分类工作，以确保菌种的准确性和可靠性。
2. 鉴定工作应由专业人员进行，使用权威的鉴定方法和标准，如形态学、生理生化特性、分子生物学等。
3. 鉴定结果应详细记录，包括鉴定依据、鉴定方法和结果等信息，并建立菌种的鉴定档案。
4. 分类工作应根据鉴定结果，将菌种归入相应的分类系统中，确保菌种的正确分类和命名。
四、菌种培养与保藏1. 菌种的培养应遵循无菌操作的原则，以确保菌种的纯度和稳定性。
2. 培养基的配制应符合菌种的生长需求，可根据菌种特性选择合适的培养基成分和条件。
3. 菌种的培养过程应记录详细的操作步骤和培养条件，以备后续参考和复制。
4. 对于重要的菌种，应进行定期传代和保藏，确保菌种的长期保存和可用性。
五、菌种利用与交流1. 菌种的利用应遵循科学研究和产业发展的需求，合理开展菌种资源的开发和利用。
2. 菌种的利用应符合相关法律法规，不得侵犯他人权益或违反伦理道德。
3. 菌种的交流应遵循学术规范和合作原则，确保菌种资源的公平合理利用。
4. 菌种的交流应记录详细的交流信息，包括交流对象、交流目的、交流内容等，以备后续参考和追溯。
六、菌种管理与监督1. 菌种管理应建立完善的管理制度和管理流程，明确责任和权限。
5菌种的管理和保藏
2024/7/3
7
低温、干燥、缺氧、缺乏营养等环境条件都可 以抑制微生物的代谢和生长繁殖，因此低温、 干燥和真空是菌种保藏的重要手段。 标准储备菌株经纯度和特性确认后保存时，可 将培养物等份悬浮于抗冷冻的培养基中，并分 装于小瓶中,建议采用低温冷冻干燥，液氮储存， 超低温冷冻(低于-70℃)等方法保存。
2024/7/3
19
⑵创造适宜的培养条件 ⑶用不同类型的细胞进行传代 ⑷采用有效的保藏方法
2024/7/3
20
定期检查
主要检查项目 菌落形态、革兰染色、显微镜下菌体形
态、生化特性及血清学检查。
2024/7/3
21
菌种的复壮 使衰退的菌种重新恢复原来的优良特性的 过 程验室主要采用分离纯化的方法。
2024/7/3
11
⑴ 挑选特征典型的纯菌菌落。 ⑵确定保藏的合适菌体。 ⑶选择最适宜的方法保藏。 ⑷定期对保藏的菌种进行检查。
2024/7/3
12
二、菌种的传代和使用
工作菌种的传代次数应严格控制，不得超过5代， （从菌种保藏中心获得的标准菌株为第0代）防止 过度的传代造成菌种变异。
1代是指将活的培养物接种到新鲜培养基中，任 何亚培养的形式均被认为是转种或传代一次。必要 时，实验室应对工作菌株的特性和纯度进行确认。
2024/7/3
2
菌种的来源
药品微生物检验用的试验菌应来自认 可的国内或国外菌种收藏机构的标准菌株， 或使用与标准菌株所有相关特性等效的商 业派生菌株。
2024/7/3
3
菌种保藏的中心任务
⒈广泛收集各种有用的微生物菌种。 ⒉选择最适宜的保藏方法。 ⒊研究、检验、交换和使用。
2024/7/3
4
菌种安全管理制度
菌种安全管理制度一、总则为规范菌种的保存、使用和管理，保障科研人员的安全，防止菌种泄漏和污染，特制定本管理制度。
二、适用范围本管理制度适用于实验室中保存和使用的各类微生物菌种，包括细菌、真菌、病毒等。
三、管理原则1. 确保菌种的安全性和实验室人员的安全；2. 保障菌种的质量和纯度；3. 准确记录菌种的来源、保存方式和使用情况；4. 严格遵守国家相关法律法规和实验室安全规定。
四、菌种的保存1. 菌种应保存在专门设计的冰箱或冷冻盒中，并标注清楚菌种的名称、来源、保存日期等信息；2. 对于高致病性或毒性菌种，应采取更加严格的保存措施，并设置专门的保存设施；3. 对于保存的菌种，定期进行质量检测，确保菌种的存活率和纯度。
五、菌种的使用1. 使用菌种的人员必须具备相关的培训和操作技能，严格按照规定的操作程序进行操作；2. 在使用过程中，应佩戴防护口罩、手套等个人防护装备，严禁直接接触菌种；3. 使用完毕后，及时清洗消毒工作台和相关器具，并做好消毒记录。
六、菌种的管理1. 实验室应设立专门的菌种管理负责人，负责菌种的存储、使用和管理；2. 对于特殊菌种，应制定详细的管理制度和安全操作规程，并加强监管；3. 定期对实验室菌种库进行审查，清理过期或失效的菌种；4. 对于重大事故隐患菌种，应严格限制存储和使用，并做好安全措施。
七、应急处理1. 对于菌种泄漏或污染的情况，应立即启动应急预案，采取适当的措施进行清理和处理；2. 对于工作人员可能受到的伤害，应及时进行紧急救护和处理；3. 启动事故调查机制，查清事故原因，及时采取改正和整改措施。
八、违规处理对于违反菌种安全管理制度的行为，将依据管理制度和相关规定做出相应的处理，包括但不限于责令整改、停止使用菌种、追究责任等。
九、菌种安全管理制度的落实1.立即成立由安全管理部门及科研人员组成的菌种安全管理小组，确定菌种安全管理责任人；2. 建立健全菌种安全管理制度文件，包括菌种保存使用制度、应急预案、违规处理制度等，并定期进行更新和修订；3. 对实验室的菌种存储设施进行调查、检测和整理，确保菌种的存储环境符合相关要求；4. 对实验室人员进行菌种安全管理培训，提高人员的安全意识和应急处置能力；5. 加强对实验室的菌种使用情况的监督和检查，确保菌种的合理使用。
菌种管理规范
菌种管理规范引言概述：菌种管理是生物技术领域中非常重要的一项工作，它涉及到菌种的保存、鉴定、培养和分发等方面。
规范的菌种管理能够保证菌种的纯度和可靠性，为科学研究和工程应用提供可靠的基础。
本文将从菌种的保存、鉴定、培养、分发和记录等五个大点，分别阐述菌种管理的相关内容。
正文内容：1. 菌种的保存1.1 保存条件：菌种保存需要提供适宜的环境条件，包括温度、湿度和光照等。
不同菌种对保存条件的要求不同，因此需要根据菌种的特性进行调整。
1.2 保存方式：常见的菌种保存方式包括冷冻保存、冷冻干燥保存和液氮保存等。
不同保存方式有其优缺点，需要根据菌种的特性和使用需求选择合适的保存方式。
2. 菌种的鉴定2.1 鉴定方法：菌种的鉴定是确定其物种和亚种的过程，常用的鉴定方法包括形态学鉴定、生理生化特性鉴定和分子生物学鉴定等。
鉴定方法的选择应根据菌种的特性和鉴定目的进行。
2.2 鉴定标准：菌种的鉴定需要依据一定的标准和参考物种进行比对。
国际上常用的鉴定标准包括国际菌种保存中心（CBS）和美国类型菌种文化集（ATCC）等。
3. 菌种的培养3.1 培养基选择：菌种的培养需要提供适宜的培养基，包括基础培养基和特定培养基。
基础培养基可根据菌种的需求选择，特定培养基则针对特定菌种的培养需求进行设计。
3.2 培养条件控制：菌种的培养需要控制适宜的温度、pH值和培养时间等条件。
不同菌种对培养条件的要求有所不同，因此需要根据菌种的特性进行调整。
4. 菌种的分发4.1 分发要求：菌种的分发需要满足科学研究和工程应用的需求，同时要保证菌种的纯度和可靠性。
分发过程中需要采取一系列措施，如制备分生孢子、制备冻干粉和制备液体培养物等。
4.2 分发方式：常见的菌种分发方式包括直接分发和间接分发。
直接分发是将菌种直接提供给用户，间接分发是通过菌种库或合作单位进行分发。
分发方式的选择应根据实际情况进行。
5. 菌种的记录5.1 记录内容：菌种的记录需要包括菌种的基本信息、保存和鉴定的结果、培养条件和分发情况等。
微生物菌种常规保藏技术规程
微生物菌种常规保藏技术规程一、前言微生物菌种的保藏是微生物研究中非常重要的一环，它对于保障菌种的长期保存和研究使用具有重要的意义。
本技术规程旨在规范微生物菌种的常规保藏技术，确保其安全、稳定和可持续使用。
二、常规保藏技术1. 冻干法（Lyophilization）：将培养的微生物菌株悬液在前冷冻过程中给予低温、高真空条件，使其中的水分直接从冰态升华为气态，从而避免了常规冻存法中由于结冰时水晶体的生成对菌体的危害，从而达到保存微生物菌株的目的。
操作步骤：a. 微生物培养物经适当稀释后应当倒入试管中，滴入约1ml 20%乳糖溶液在表面形成一层薄膜，待乳糖凝固后，在加入4ml 0.5-0.7%匀浆的2%干燥乳铁粉液，将试管摇匀，再灌入16ml混合液保持无气泡，放置于冰浴上。
b. 待培养物温度达到0摄氏度，再清洗喷雾器，灌入76％露醇20ml，培养物放入冷板上，适当时间后将试管封口放入冷板上经杀菌后真空泵连接，把真空泵打开，通过真空泵提供的条件慢慢降低压强，一般12小时后真空泵关闭。
c. 提供适当温度下作干燥处理，通常使用倍耐安减压干燥器空干40-80小时，干燥后的干燥灸试管，将试管放入吸气瓶中后置入-40—-50摄氏度低温冷冻管内低温保存(一般保存温度为—40摄氏度或更低)，备用空干矿温度—20摄氏度或更低。
2. 酶解冻存法（Enzymatic freezing）：在培养基中添加蔗糖，结合酶解冻存方法，经冻干后的菌种耐冻性和储存时间明显提高。
操作步骤：a. 将微生物分别接种于琼脂平板上，预培养24小时，取2-3份储备品。
菌液于冻干菊花瓶中进行前冷冻，真空抽气消耗20分钟。
b. 平均地用EP管管接受，采用3次“起冻—冷冻”的方法完全冻干，最后0.1至0.3ml真菌液在5摄氏下冷冻6小时，然后在5摄氏下还原18小时。
c. 移除冻存，延长试验保存时间。
必须在-80摄氏下保存。
3. 液氮冻存法（Liquid nitrogen freezing）：液氮冷冻法是现在应用最广泛的冷冻保存方法，在液氮的作用下，微生物菌种在-196摄氏度下冷冻，保持良好的生物活性。
菌种保藏管理
菌种保藏管理菌种保藏管理是指对微生物菌种进行保存、管理、鉴定和利用的一系列工作。
菌种保藏管理的目的是保护微生物资源，促进微生物资源的研究和利用，防止微生物污染和传播，维护科学研究的诚信和公正。
一、菌种保存菌种保存是指将微生物菌株保存在适宜的条件下，以保证其生命活力和遗传稳定性。
常见的菌种保存方式有以下几种：1. 冷冻保存：将菌株在-70℃以下的低温条件下保存，可保存数年至数十年。
2. 干燥保存：将菌株在低湿度条件下干燥保存，可保存数年至数十年。
3. 液氮保存：将菌株在液氮中保存，可保存数十年至数百年。
4. 长期培养：将菌株在适宜的培养基上连续传代培养，可保存数年至数十年。
二、菌种管理菌种管理是指对保存的菌株进行鉴定、分类、记录和更新等工作。
常见的菌种管理工作有以下几个方面：1. 鉴定和分类：对保存的菌株进行鉴定和分类，确定其种属和亚种。
2. 记录和更新：对保存的菌株进行详细的记录和更新，包括菌株来源、保存时间、保存方式、鉴定结果等信息。
3. 质量控制：对保存的菌株进行质量控制，包括检测菌株的纯度、活力和遗传稳定性等指标。
4. 分发和交换：将保存的菌株分发给需要的研究人员或机构，或与其他机构进行菌株交换。
三、菌种利用菌种利用是指利用保存的菌株进行科学研究和应用开发。
常见的菌种利用方式有以下几种：1. 研究应用：利用保存的菌株进行科学研究和应用开发，如发酵生产、药物研发、环境修复等。
2. 教学实验：利用保存的菌株进行教学实验，培养学生的实验技能和科学素养。
3. 保护利用：利用保存的菌株进行保护利用，促进微生物资源的可持续利用和保护。
总之，菌种保藏管理是保护微生物资源、促进科学研究和应用开发的重要工作，需要科学规范的管理和操作。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
5、菌种的常用保存方式
• • • • • • ①定期移植法 ②液体石蜡法 ③磁珠保藏法 ④冷冻干燥保藏法 ⑤液氮超低温保藏法 ⑥-80℃低温保藏法
五、实验室常用的标准菌种
• 附件：食品卫生微生物学检验(GB/T 4789)阳性对照用菌 GB 4789.2-2010菌落总数测定大肠埃希氏菌CICC 103892、 GB 4789.3-2010大肠菌群计数大肠埃希氏菌CICC 103895、 GB 4789.4-2010沙门氏菌检验肠炎沙门氏菌CICC 214826、 GB/T 4789.5-2003志贺氏菌检验福氏志贺氏菌CICC 215347、 GB/T 4789.6-2003致泻大肠埃希氏菌检验致泻大肠埃希氏菌 EPEC O26:K60CICC 103728、 GB 4789.10-2010金黄色葡萄球菌检验金黄色葡萄球菌CICC 2160012、 表皮葡萄球菌(阴性对照)CICC 1029413、 GB/T 4789.11-2003溶血性链球菌检验乙型溶血性链球菌-βCICC 1037314、 GB/T 4789.13-2ห้องสมุดไป่ตู้03产气荚膜梭菌检验产气荚膜梭菌CICC 2294915、 GB/T 4789.14-2003蜡样芽孢杆菌检验蜡样芽孢杆菌CICC 1004116、 GB 4789.15-2010霉菌和酵母计数白假丝酵母CICC 196517、
四、菌种的保存
• 1、定义：将微生物菌种用各种适宜的方法妥善 保藏，避免死亡、污染，保持其原有性状基本稳 定。 • 2、微生物保藏后能否保持其原有特征和特性的 影响因素： • ①菌种内在因素：本身健壮与否； • ②外在因素：培养基、培养条件（温度、水活度、 pH、氧、光等）。 • 3、实验室使用者建立菌种保存、使用登记表。 • 4、双人双锁保存在特定保藏箱（一般为冰箱）。
六、菌种的销毁
• 1、当原代菌种、保存菌种、工作菌种打开或 使用后，立即对其进行销毁，不作重复保存 和使用。 • 2、检测工作中产生的菌液也应立即进行销毁， 不作重复保存和使用。 • 3、销毁方法为高压蒸汽灭菌（121℃， 30min），同时用化学指示胶带对灭菌效果 进行验证。
二、菌种在微生物实验室的应用
• 1、生化分析用标准菌种进行测定 • 2、微生物实验中阳性对照
三、菌种获得方式
• 1、科学机构试验分离得到有用的菌种加以保存。 • 2、标准菌种应于专业的菌种保藏机构购买,并且 要其能提供溯源性证明。 • 3、常见菌种保存机构（购买） • CICC中国工业微生物菌种保藏管理中心 • CCCCM中国微生物菌种保存委员会 • ATCC美国标准菌种收藏中心 • NCTC美国国家典型菌种收藏所 • IPL法国里昂巴斯德研究所
菌种的保存与管理
菌种保存与管理
• • • • • • 一、微生物、菌种、菌株的 了解 二、菌种的在微生物实验室的应用 三、菌种获得方式 四、菌种的保存 五、微生物实验室常用的标准菌种 六、菌种废弃处理
一、微生物、菌种、菌株的 了解
• 1、微生物：包括病毒、类病毒、细菌、蓝绿 藻、真菌、地衣、微小藻类和原生动物等类群 的生物的总称。 • 2、菌种：微生物菌种指的是这些生物的种子。 • 3、菌株：又称品系,表示任何由一个独立分离 的单细胞(或单个病毒粒子)繁殖而成的纯种群 体及其后代。 • 4、因此,一种微生物的每一个不同来源的纯培 养物均可称为该菌种的一个菌株。