熊果酸液相检测方法(1)

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HPLC 法测定迷迭香叶提取物中熊果酸的含量

1 试剂

超纯水

甲醇(色谱纯)

乙腈(色谱纯)

磷酸

2 对照品

熊果酸对照品

3 仪器和用具

万分之一电子天平

玻璃仪器:容量瓶

0.45μm 微孔滤膜及针筒式过滤器

超声波清洗器

日本岛津LC-15C 型高效液相色谱仪

4 色谱条件

色谱柱:Diamonsil ® C18(2) 5μ 250×4.6mm

流动相:甲醇﹕乙腈﹕水﹕磷酸=57﹕33﹕10﹕0.01(V/V )

流速:1.0mL/min

检测波长:210nm

进样量:20μL

柱温:40℃

5 操作步骤

供试品溶液的制备

取样品约30mg (精确至0.1mg )至25mL 容量瓶,加15mL 甲醇超声溶解,溶解后加甲醇定容至刻度,摇匀,再取1mL 定容至10mL 容量瓶,摇匀,过0.45μm 微孔滤膜,待测。 标准品溶液的制备

精密称取熊果酸标准品适量,加甲醇配成浓度为0.12mg/mL 左右的溶液,过0.45μm 微孔滤膜,待测。

将标准品溶液、供试品溶液各20μL 分别注入高效液相色谱仪中检测。

6 计算

含量(%)=%1001

221⨯⨯⨯⨯⨯P M A V C A 其中 1A :样品峰面积

2A :标准品峰面积

C:标准品浓度(mg/mL)2

M:样品称样量(mg)1

V:样品的稀释体积(mL)P:标准品的含量

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