熊果酸液相检测方法(1)
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HPLC 法测定迷迭香叶提取物中熊果酸的含量
1 试剂
超纯水
甲醇(色谱纯)
乙腈(色谱纯)
磷酸
2 对照品
熊果酸对照品
3 仪器和用具
万分之一电子天平
玻璃仪器:容量瓶
0.45μm 微孔滤膜及针筒式过滤器
超声波清洗器
日本岛津LC-15C 型高效液相色谱仪
4 色谱条件
色谱柱:Diamonsil ® C18(2) 5μ 250×4.6mm
流动相:甲醇﹕乙腈﹕水﹕磷酸=57﹕33﹕10﹕0.01(V/V )
流速:1.0mL/min
检测波长:210nm
进样量:20μL
柱温:40℃
5 操作步骤
供试品溶液的制备
取样品约30mg (精确至0.1mg )至25mL 容量瓶,加15mL 甲醇超声溶解,溶解后加甲醇定容至刻度,摇匀,再取1mL 定容至10mL 容量瓶,摇匀,过0.45μm 微孔滤膜,待测。 标准品溶液的制备
精密称取熊果酸标准品适量,加甲醇配成浓度为0.12mg/mL 左右的溶液,过0.45μm 微孔滤膜,待测。
将标准品溶液、供试品溶液各20μL 分别注入高效液相色谱仪中检测。
6 计算
含量(%)=%1001
221⨯⨯⨯⨯⨯P M A V C A 其中 1A :样品峰面积
2A :标准品峰面积
C:标准品浓度(mg/mL)2
M:样品称样量(mg)1
V:样品的稀释体积(mL)P:标准品的含量