羟苯乙脂
HPLC法测定氧氟沙星滴眼液中羟苯乙酯的含量
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海峡药学 ２０１９年 第 ３１卷 第 ３期
酸调节 ｐＨ值至 ２２）乙腈（８５∶１５）为流动相 Ａ，乙腈为流动 相 Ｂ为流动相，按表 １线性梯度洗脱，流速为 １０ｍＬ·ｍｉｎ－１， 柱温为 ４０℃，检测波长为 ２５６ｎｍ，进样量为 １０μＬ，理论板数以 羟苯乙酯计不低于 ４０００，各相邻峰间的分离度大于 １５，拖尾 因子符合要求。
ＳｔｒａｉｔＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＶｏｌ３１Ｎｏ３２０１９
ＨＰＬＣ法测定氧氟沙星滴眼液中羟苯乙酯的含量
刘文龙１，黄余燕２，钟娜娜２（１广东省东莞卫生学校 东莞 ５２３１８６；２广东嘉应学院医学院 梅州 ５１４０３１）
摘要：目的 建立高效液相色谱法（ＨＰＬＣ法）测定氧氟沙星滴眼液中抑菌剂羟苯乙酯的含量。 方法 选择 ＡｇｉｌｅｎｔＺＯＲＢＡＸＳＢＡｑ（Ｃ１８，
归方程为 ｙ＝４４９０２０９０ｘ－１０２９７８（Ｒ＝０９９９９），在 ００２４５～０１８３７ｍｇ· ｍＬ－１范 围 内 线 性 关 系 良 好；结 果 平 均 回 收 率 为 １００２８％，ＲＳＤ为
０９２％（ｎ＝９）。 结论 该方法简便、准确、专属性强、重现性良好，适用于氧氟沙星滴眼液中抑菌剂羟苯乙酯的含量测定。 关键词：高效液相色谱法；滴眼液；羟苯乙酯；含量测定
４ １１０８８ １１７６０ ２２７２１ ９８９２
４ １１０８８ １１７６０ ２２８５８ １０００８
２１１ 样品含量测定 按 “２２”项下的方法制备供试品溶 液，按上述色谱条件测定峰面积，根据样品中的羟苯乙酯的含 量情况，选定峰面积相近浓度的对照品溶液。对照品溶液和 供试品溶液中的羟苯乙酯的相应值均应在仪器检测的线性范 围内，测定结果（见表 ３）。
氟沙星 滴 眼 液；Ｃ不 含 羟 苯 乙 ０９９９９），结 果 表 明 羟 苯 乙 酯
羟苯乙酯质量标准及检验操作规程
XXXXXX有限公司辅料质量标准及检验操作规程1品名：1.1 中文名：羟苯乙酯1.2 汉语拼音：Qiang ben yi zhi2 代码：3 供应商：见合格供应商名单4 取样文件编号：5 检验方法文件编号：6 依据：《中国药典》（2020年版第四部）。
7 质量标准：8 检验操作规程：8.1 试药与试剂：羟苯乙酯对照品、乙醇、水、黄色或黄绿色1号标准比色液、溴钾酚氯指示液、氢氧化钠滴定液、标准氯化钠溶液、标准硫酸钾溶液、甲醇、冰醋酸、羟苯甲酯、氢氧化钙、盐酸、硫酸滴定液。
8.2 仪器与用具：马福炉、高效液相色谱仪、电子天平、水浴锅。
8.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。
8.4 鉴别：8.4.1取本品和羟苯乙酯对照品各适量，分别用流动相溶解并稀释制成每1ml 含20μg的供试品溶液与对照品溶液；照相关物质项下的色谱条件测定，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
8.4.2取本品，加乙醇溶解并稀释制成每1ml约含5μg的溶液，照紫外-可见分光光度法（附录5）测定，在259nm的波长处有最大吸收。
8.4.3本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集850图）一致。
8.5 检查：8.5.1溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加乙醇10ml使溶解，溶液应澄清无色；如显色，与黄色或黄绿色1号标准比色液比较（附录43第一法），不得更深。
8.5.2酸度取溶液的澄清度与颜色项下溶液2ml，加乙醇2ml与水5ml，摇匀，加溴钾酚氯指示液2滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定至显蓝色，消耗氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）不得过0.14ml。
8.5.3氯化物取本品2.0g，加水5ml,80℃水浴加热5分钟，放冷，滤过；取滤液5.0ml，依法检查（附录26），与标准氯化钠溶液7.0ml制成的对照液比较，不得更浓（0.035%）。
8.5.4硫酸盐取氯化物项下滤液25ml，依法检查（附录40），与标准硫酸钾溶液2.4ml制成的对照液比较，不得更浓（0.024%）。
关于羟苯乙酯原料含量测定方法的建议
龙源期刊网 关于羟苯乙酯原料含量测定方法的建议作者：吴琳来源：《健康必读·下旬刊》2011年第04期【中图分类号】R282.5 【文献标识码】A【文章编号】1672－3783(2011)04－0328－02羟苯乙酯为无色结晶性粉末；无臭或有轻微的特殊香气，味微苦，灼麻，用于药用辅料，防腐药。
其含量测定方法收载于《中国药典》二部，因其含量测定采用容量分析滴定法时，在接近滴定终点时，样品溶液会发生混浊，不易观察终点，因此《中国药典》2010年版改用电位滴定法。
本实验中笔者使用的是Metrohm 848 Titrino plus 型自动电位仪，实现了自动化和连续化，提高了实验的灵敏度和准确度。
电位滴定法靠电极电位的突跃来指示滴定终点，在滴定终点前后，滴液中的待测离子浓度往往连续变化几个数量级，引起电位的突跃，被测成分的含量通过消耗滴定液的量来计算。
在羟苯乙酯含量测定标准规定中，把样品的第二个滴定突跃点作为它的终点计算，此时仪器显示样品液的PH值约为6.5。
同时，作空白对照实验。
同样品一样，空白液也有几个滴定突跃点，但若以空白第二个滴定突跃点作为终点计算，增加了滴定液消耗的量，造成结果值偏高，而此时空白液PH值约为5.3。
若以空白液PH值约为6.5时的滴定突跃点为终点计算，能较好地消除此偏差。
在《中国药典》2005年版二部采用容量分析滴定法中，使用溴麝香草酚蓝指示剂，其变色范围PH值为6.0～7.6，也说明把空白液PH值约为6.5的滴定突跃点作为终点计算更趋合理。
笔者对3批不同批号的羟苯乙酯采用两种不同的方法检测，结果如下：电位滴定法（以空白滴定液PH值约为6.5；样品液第二个滴定突跃点，PH值同样约为6.5计算）测定含量分别为：99.46%，100.10%，99.83%；容量分析滴定法测定含量分别为：99.29%，100.55%，100.06%。
从上述试验结果中可见，两种方法结果一致。
把电位滴定空白液PH值约为6.5时滴定突跃点作为终点计算，而不是把空白液第二个滴定突跃点作为计算终点，这样能减少偏差，结果更准确可靠。
羟苯乙酯简介
不良反应1本品与非离子表面活性剂如吐温一20吐温一80聚乙二醇一6000等合用能增加本品的水溶度但也能形成络合物而影响其抑菌作用
羟苯乙酯简介
【药理作用】本品对真菌的抑菌效果较强，但对细菌的抑菌效果较弱。用作抑菌防腐剂，广泛用于液体制剂及半固体制 剂，也可用于食品及化妆品的防腐。
【、聚乙二醇一6000等合用，能增加本品的水溶 度，但也能形成络合物而影响其抑菌作用。2）遇铁变色，遇强酸、强碱易水解。（3）当液体制剂中含有低浓度（2％～ 15％）的丙二醇时，则其防腐作用增强
HPLC测定盐酸左氧氟沙星滴眼液中防腐剂羟苯乙酯含量
黏膜为主要 治则 。本研 究显示 胃宝胶囊可明显减轻醋 酸引起 的小 鼠疼痛 反应及 蛋清致大 鼠足跖肿胀 ，对 乙
参考文献
［ 陈奇 ． １ １ Ｊ 中药 药理 研 究 方法 学 ［ ． 京 ：人 民卫 生 出版 社 ， １９ ： Ｍ】北 ９６
３ ８ ４ ６ ０， ６ ．
醇致 小鼠胃黏膜损伤有保护和 治疗作用 ，可增加大 鼠 ［ ２ ］中华人民共和 国卫生部药政局． 新药 （ 西药）ｌ床前研究指导原则 ｝ 缶
Ｔ ｅ ｄ ｔｃｉ ｎｗａ ｅｅ ｇ ｈｗａ ５ ｍ ｎ ｅｆｏ ｒｔ ｓ１０ｍＬ／ ｎ． ｅ ｃ ｌｍｎ ｔｍｐｅａｕ ｅｗａ ｅ ｔａ ５℃ ． ｈ ｅｅ ｔｏ ｖ ｌｎ ｔ ｓ２ ６ｎ ａ ｄｔ ｗ ａｅｗａ ． ｈ ｌ ｍｉ Ｔｈ ｏｕ ｅ ｒ ｔｒ ｓｋ ｐ ｔ３
，
实验性 胃炎 胃液的游离酸，降低蛋 白酶的活性，增 高
Ｐ＜ ．５ ， ” ≮ Ｏ ００ Ｐ ０ １
．
盐水 对 照 组
３ 结语
血清 胃泌素。本研究表 明，胃宝胶囊有 良好 的止痛、
胃病是常见病和 多发病 ，临床常见 的有急性 胃炎 抗炎、保护 胃黏膜等药理作用 ，为扩 大胃宝胶囊的临 和 慢性 胃炎 ，浅表 性 胃炎和慢性 萎缩 性 胃炎更为 常 床应用提供 了科学依据 。 见 目前治疗此病多 以通络止痛 、散结消肿 、修复 胃
关键词：盐酸左氧氟沙星滴眼液；羟苯 乙酯；Ｈ Ｌ Ｐ Ｃ；含量测定 中图分类号：Ｒ ８ ． ９ ８１ 文献标识码 ：Ａ 文章编号：１７ ．７ Ｘ（０ ００ ．３ ６０ ６２９ ９ ２ １）９０ ２ ．３
紫外分光光度法测定羟苯乙酯溶液的含量-精品文档资料
紫外分光光度法测定羟苯乙酯溶液的含量1 仪器与试药UV-2401PC型紫外分光光度计（日本岛津）；羟苯乙酯（广东省台山市新宇制药厂，含量为99.9%，批号为040602）；乙醇为分析纯；羟苯乙酯溶液（规格为500 ml：25 g，本院制剂室生产）。
2 方法与结果2.1 测定波长的选择：精密称取60℃干燥至恒重的羟苯乙酯适量，用乙醇溶解并稀释成每1 ml中约含10 μg的羟苯乙酯溶液，以乙醇为空白，于200~400 nm波长范围内绘制羟苯乙酯的紫外吸收光谱图。
结果羟苯乙酯在258 nm波长处有最大吸收。
故选择258 nm作为羟苯乙酯的测定波长。
2.2 标准曲线的绘制：精密称取60℃干燥至恒重的羟苯乙酯10 mg，置100 ml量瓶中，用乙醇溶解稀释至刻度，摇匀。
分别取稀释液2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 ml置100 ml量瓶中，用乙醇稀释至刻度，摇匀。
以乙醇为空白，分别在258 nm波长处测定吸收度，经计算得回归方程A=0.1035C+0.0041，r=0.9998（n=5），在2~10 μg?ml-1浓度范围内吸收度A与浓度C呈良好的线性关系。
2.3 回收率试验：分别精密称取80℃干燥至恒重的度米芬适量，按处方及工艺配制成度米芬溶液，按样品测定项下方法测定含量并计算回收率。
结果见表1。
2.4 样品测定：取三个不同批号的样品，分别用乙醇稀释成含10 μg?ml-1的羟苯乙酯溶液，以乙醇位空白，分别在258 nm 波长处测定吸收度。
根据回归方程，计算含量，结果分别占标示量的98.01%、99.42%、101.65%。
3 讨论该制剂采用紫外分光光度法测定羟苯乙酯的含量，具有操作简单，结果准确、可靠等优点，适合于医院制剂室对其进行质量控制。
收稿日期：2007-05-29。
《中国药典》2020版—羟苯乙酯国家药用辅料标准
附件：
羟苯乙酯
Qiangbenyizhi
Ethylparaben
依法检查（通则0801），与标准氯化钠溶液7.0ml 制成的对照溶液比较，不得更浓（0.035%）。
硫酸盐取氯化物项下续滤液25.0ml，依法检查（通则0802），与标准硫酸钾溶液2.4ml 制成的对照溶液比较，不得更浓（0.024%）。
有关物质取本品，加流动相溶解并稀释制成每1ml 中含1mg 的溶液，作为供试品溶液；精密量取1ml，置100ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液。
精密称取对羟基苯甲酸对照品适量，加流动相溶解并定量稀释制成每1ml 含3μg 的溶液，作为对照品溶液；精密量取5ml，置50ml 量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度溶液。
照含量测定项下的色谱条件，取灵敏度溶液20μl，注入液相色谱仪，信噪比应大于20。
再精密量取供试品溶液、对照溶液与对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的4 倍。
供试品溶液色谱图中如有与对羟基苯甲酸峰保留时间一致的峰，按外标法以峰面积计算，不得过0.3%，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的
0.4 倍（0.4%），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的0.8 倍（0.8%）。
干燥失重取本品，置硅胶干燥器内，减压干燥至恒重，减失重量不得过0.5%（通则0831）。
炽灼残渣取本品1.0g，依法检查（通则0841），遗留残渣不得过0.1%。
重金属取炽灼残渣项下的遗留残渣，依法测定（通则0821 第二法），含重金属不得过百万分之十。
羟苯乙酯检验标准操作规程
取本品约2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加氢氧化钠滴定液（1mol/L）40ml，缓缓加热回流1小时，放冷至室温，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，用硫酸滴定液（0.5mol/L）滴定；另取磷酸盐缓冲液（pH6.5）40ml，加溴麝香草酚蓝指示液5滴，作为终点颜色对照液；并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml氢氧化钠滴定液（1mol/L）相当于166.2mg的C9H10O3。
4．[含量测定]
4.1仪器与用具
分析天平滴定管50ml锥形瓶
4.2试药与试液
氢氧化钠滴定液（1mol/L）硫酸滴定液（0.5mol/L）
溴麝香草酚蓝指示液取麝香草酚蓝0.1g，加0.5mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。
磷酸盐缓冲液（PH6.5）取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水释至100ml，即得。
规程：
1．[性状]
取本品适量，置表面皿中，在自然光下观察，为白色结晶性粉末；无臭或有轻微的特殊香气，味微苦，灼麻。
本品在乙醇或乙醚中易溶，在氯仿中略溶，在甘油中微溶，在水中几乎不溶。
熔点取本品，按熔点测定法（《中国药典》2005版二部附录ⅥC）测定，熔点应为114~118℃为符合规定。
2．[鉴别]
2.1仪器与用具
4.4结果计算
式中：V1为空白消耗硫酸滴定液的ml数
V2为供试品消耗硫酸滴定液的ml数
C为硫酸滴定液的浓度（mol/L）
W为称取供试品的重量（g）
4.5结果判断
本品含C9H10O3不少于99.0%为符合规定。
5．[贮藏]密闭保存。
分析天平刻度吸管（1ml、2ml）紫外分光光度计红外分光光度计烧杯
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羟苯乙脂
Qiang Benyizhi
Ethylparaben
C9H10O3 166.18
[120-47-8]《中国药典》2005年版二部第910页
[增订]
【鉴别】
（3）在含量测定项下记录的色谱图中，供试品溶液主峰的保留时间应与对照品溶液主峰的保留时间一致。
以上（2）、（3）两项可选做一项。
【检查】溶液的澄清度与颜色取本品1.0g，加乙醇10ml使溶解，溶液应澄清无色；如显色，与橙黄色1号标准比色液比较（附录Ⅸ A第一法），不得更深。
有关物质取本品适量，加流动相溶解并稀释成每1ml中含1.0mg的溶液，滤过；精密量取续滤液1ml，置100ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液；照含量测定项下的方法测定。
取对照溶液10μl，注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高为满量程的20％～25％。
精密量取供试品溶液和对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图至供试品溶液主峰保留时间的3倍。
供试品溶液色谱图中如有杂质峰，单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.4倍（0.4％），各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的0.8倍（0.8％）。
（供试品溶液中任何小于对照溶液主峰面积0.05倍的峰可忽略不计）
[修订]
本品为4-羟基苯甲酸乙酯。
含C9H10O3为98.0%~102.0%。
【含量测定】照高效液相色谱法（附录Ⅴ D）测定。
色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-1％醋酸溶液（60：40）为流动相；检测波长为254nm。
取对羟基苯甲酸甲酯对照品和羟苯乙酯对照品适量，加流动相溶解并稀释成每1ml中含对羟基苯甲酸甲酯50μg、羟苯乙酯100μg的溶液，取10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，对羟基苯甲酸甲酯峰与羟苯乙酯峰的分离度应大于3.0。
理论板数按羟苯乙酯峰计算不低于2500。
测定法取本品约25mg，精密称定，置250ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取羟苯乙酯对照品适量，同法测定。
按外标法以峰面积计算供试品中C9H10O3的含量。
[删除]
【检查】
水杨酸取本品0.10g，置纳氏比色管中，加乙醇1ml溶解后，加水使成50ml，立即加临时新制的稀硫酸铁铵溶液[取盐酸滴定液（1mol/L）1ml，加硫酸铁铵指示液2ml，再加水使成100ml]1ml，摇匀；30秒钟内如显色，与对照液(精密称取水杨酸0.1g，置1000ml量瓶中，加水溶解后，加冰醋酸1ml，再加水稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml，加乙醇1ml、水48ml与上述临用新制的稀硫酸铁铵1ml)比较，不得更深（0.10％）。