不同造模剂诱导大鼠高尿酸血症模型的可行性比较

痛风动物模型的研究现状及评价

痛风动物模型的研究现状及评价 （作者:___________单位: ___________邮编: ___________） 【摘要】通过对痛风性关节炎和痛风性肾病的动物模型相关文献的系统回顾，对模型制作的现状，常用模型的特点及应用进行了总结和评价。目前常见的痛风动物模型在稳定性，持久性，制作程序的标准化等方面需要继续努力改进，复制出更接近于人类嘌呤代谢障碍和（或）尿酸排泄障碍所形成的持久稳定的高尿酸血症模型是基础和关键。应用现有模型进行相关的实验研究需注意根据模型特点和研究目的合理选择，加强多种模型的联合应用，并注意实验结果的合理评价。 【关键词】痛风；动物模型；痛风性关节炎；痛风性肾病 痛风(gout)是由于嘌呤代谢紊乱和（或）尿酸排泄障碍所导致的一种异质性疾病，其临床特点是高尿酸血症、痛风性急性关节炎反复发作、痛风石沉积、特征性慢性关节炎和关节畸形，常累及肾引起慢性间质性肾炎和肾尿酸结石形成。随着人们生活方式的改变，痛风患病率有明显上升趋势，20年间，痛风在我国发病率已上升至7.6/10万，南方和沿海经济发达地区发病率尤高［1，2］，因此越来越受到医学界的重视。几十年来国内外学者不断努力，已探索性地建立了一些疾

病动物模型，可供研究参考。高尿酸血症是引起痛风重要的前提和生化基础，但是痛风的患病率远低于高尿酸血症［3］，故本文主要讨论痛风性关节炎和痛风性肾病的动物模型制作。 1 痛风性关节炎的动物模型 1.1 鼠兔等哺乳动物痛风性关节炎模型由于鼠兔等哺乳动物体内嘌呤代谢途径与人类不同，难以从嘌呤代谢紊乱方面来复制痛风性关节炎的模型，因此人们将尿酸钠盐（MSU）直接注射局部关节以获得类似临床痛风性关节炎的动物模型。 早在19世纪80年代，Coderre等［4］就采用MSU 0.2 ml 注射大鼠踝关节的方法，造出急性痛风性关节炎的动物模型。陈文照等［5］在研究痛风宁疗效时，采用MSU溶液0.2 ml注入大鼠右侧踝关节腔，模型动物受试关节周围软组织明显充血水肿，受试关节滑膜细胞内线粒体、内质网等细胞器明显肿胀，确认造模成功。金红兰等［6］将5％尿酸盐溶液50 μl，注入痛风模型组大鼠右后肢内踝的胫跗关节腔内，每个动物仅注射1次，24 h后，模型大鼠内踝的胫跗关节均出现不同程度的关节肿胀、行走迟缓、足爪卷曲、肢体不愿着力负重，个别动物后肢过度俯屈甚至跛行。踝关节及其周围组织的钾离子浓度明显高于正常，局部解剖发现尿酸盐结晶沉着于踝关节腔内，光镜下可见明显的关节炎病理改变。王斌等［7］将大鼠双侧后腿膝关节周围剃毛，消毒皮肤，轻度弯曲膝关节，经关节正中进针，用TB注射器6号针头将2％尿酸钠晶体溶液0.2 ml通过髌上韧带注

痛风动物模型的研究现状及评价

痛风动物模型的研究现状及评价 （作者： _________ 单位：___________ 邮编： ___________ ） 【摘要】通过对痛风性关节炎和痛风性肾病的动物模型相关文献的系统回顾，对模型制作的现状，常用模型的特点及应用进行了总结和评价。目前常见的痛风动物模型在稳定性，持久性，制作程序的标准化等方面需要继续努力改进，复制出更接近于人类嘌呤代谢障碍和（或）尿酸排泄障碍所形成的持久稳定的高尿酸血症模型是基础和关键。应用现有模型进行相关的实验研究需注意根据模型特点和研究目的合理选择，加强多种模型的联合应用，并注意实验结果的合理评价。 【关键词】痛风；动物模型；痛风性关节炎；痛风性肾病痛风（gout）是由于嘌呤代谢紊乱和（或）尿酸排泄障碍所导致的一种异质性疾病，其临床特点是高尿酸血症、痛风性急性关节炎反复发作、痛风石沉积、特征性慢性关节炎和关节畸形，常累及肾引起慢性间质性肾炎和肾尿酸结石形成。随着人们生活方式的改变，痛风患病率有明显上升趋势，20年间，痛风在我国发病率已上升至 7.6/10 万, 南方和沿海经济发达地区发病率尤高］1，2］，因此越来越受到医学界的重视。几十年来国内外学者不断努力，已探索性地建立了一些疾病动物模型，可供研究参考。高尿酸血症是引起痛风重要的前提和生化基础，但是痛风的患病率远低于高尿酸血症］3］,故本文主要讨论痛风性关节炎和痛风性肾病的动

物模型制作。 1痛风性关节炎的动物模型 1.1鼠兔等哺乳动物痛风性关节炎模型由于鼠兔等哺乳动物体内嘌呤代谢途径与人类不同，难以从嘌呤代谢紊乱方面来复制痛风性关节炎的模型，因此人们将尿酸钠盐（MSU直接注射局部关节以获得类似临床痛风性关节炎的动物模型。 早在19世纪80年代，Coderre等［4］就采用MSU 0.2 ml 注射大鼠踝关节的方法，造出急性痛风性关节炎的动物模型。陈文照等［5］在研究痛风宁疗效时，采用MSU溶液0.2 ml注入大鼠右侧踝关节腔，模型动物受试关节周围软组织明显充血水肿，受试关节滑膜细胞内线粒体、内质网等细胞器明显肿胀，确认造模成功。金红兰等 ［6］将5%尿酸盐溶液50 l，注入痛风模型组大鼠右后肢内踝的胫跗关节腔内，每个动物仅注射1次，24 h后，模型大鼠内踝的胫跗关节均出现不同程度的关节肿胀、行走迟缓、足爪卷曲、肢体不愿着力负重，个别动物后肢过度俯屈甚至跛行。踝关节及其周围组织的钾离子浓度明显高于正常，局部解剖发现尿酸盐结晶沉着于踝关节腔内，光镜下可见明显的关节炎病理改变。王斌等［7］将大鼠双侧后 腿膝关节周围剃毛，消毒皮肤，轻度弯曲膝关节，经关节正中进针，用TB注射器6号针头将2%尿酸钠晶体溶液0.2 ml通过髌上韧带注入大鼠膝关节腔，制成痛风性关节炎模型。最近，姚丽等］8］对大鼠急性痛风性关节炎动物模型进行

无症状高尿酸血症动物模型的建立及初步研究

无症状高尿酸血症动物模型的建立及初步研究目的：建立新型的无症状高尿酸血症小鼠模型。方法：选取雄性尿酸氧化 酶基因敲除杂合子C57BL/6J小鼠和野生型C57BL/6J小鼠各20只，两类小鼠均按随机数字表法分为对照组和模型组，每组各10只，模型组给予高酵母饲料饲养并予以氧嗪酸钾盐悬液（1次/d，250 mg/kg）腹腔注射。分别于造模前和造模后第1、2、3、4周时鼠尾静脉取血检测小鼠血清尿酸水平（UA），并于造模后第5周取小鼠肾脏行病理切片及HE染色。结果：造模1周后，两模型组小鼠血清尿酸水平均较对照组明显升高，且杂合子模型组尿酸水平明显高于野生型模型组，比较差异均有统计学意义（P＜0.05），但肾脏病理切片HE染色显示，两种小鼠对照组和模型组均无明显病理变化。结论：以高酵母饲料饲养并予以氧嗪酸钾盐悬液腹腔注射处理的尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠所构建的高尿酸血症动物模型具有尿酸值高，模型稳定的特点，为较理想的小鼠高尿酸血症动物模型。 尿酸是人类嘌呤代谢的最终产物。在约1500万年前人类由于基因突变失去了尿酸氧化酶基因[1]，因此人类的尿酸水平高于其他物种，这种改变有利于人类适应当时的生存环境，但尿酸水平仍控制在一定范围内。现在所谓的高尿酸血症（hyperuricemia）是指嘌呤代谢紊乱和/或尿酸排泄障碍导致的血尿酸水平增高[2]。随着人们生活水平的提高及饮食结构的变化，高尿酸血症的发病率日渐增高[3-4]，由于雌性激素的作用尿酸水平在男性中比绝经前女性更高[5-6]。高尿酸血症动物模型，是研究高尿酸血症及筛选降尿酸药物的重要工具[7-9]。目前尚未见尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠制作高尿酸动物模型的报道，本实验对尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠进行高酵母饲养及氧嗪酸钾悬液腹腔注射处理，观察其血清尿酸等指标，目的在于获得尿酸值较高且稳定的理想高尿酸血症动物模型。1 材料与方法 1.1 实验材料 1.1.1 实验动物选择以C57BL/6J小鼠为背景的尿酸氧化酶基因敲除杂合子小鼠（基因型为Uox+/-）20只及野生型C57BL/6J小鼠（基因型为Uox+/+）20只，均为雄性，6～8周龄，体质量18～25 g，尿酸氧化酶基因敲除杂合小鼠构建于上海南方模式生物研究中心，由本院实验动物中心SPF级动物饲养房饲养。 1.1.2 仪器和试剂日本东芝TBA-40FR全自动生化分析仪；Nikon90i显微镜；高酵母饲料（北京科澳协力饲料有限公司）；氧嗪酸钾盐（美国Aldrich公司）。 1.2 实验方法 1.2.1 动物分组及建模杂合小鼠及野生型小鼠适应性饲养7 d后，按随机数字表法分别分为对照组和模型组，每组10只。模型组小鼠予以高酵母饲料饲养及氧嗪酸钾悬液腹腔注射（1次/d，250 mg/kg），对照组小鼠饲以普通小鼠颗粒饲料，并给予同体积蒸馏水腹腔注射。

微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响

微小剂量阿司匹林对正常小鼠及高尿酸血症模型小鼠血尿酸的影响 张海英1 卓来东2李玉珍1 （1.北京大学人民医院药剂科，北京 100044 2.北京大学药学院，北京 100083） 摘要：目的考察微小剂量阿司匹林对正常小鼠和高尿酸血症模型小鼠血尿酸、肌酐、尿素氮的影响。方法 120只小鼠，随机分为8组，分别为正常对照组、高尿酸血症模型对照组、正常给药组（3组）和高尿酸血症模型给药组（3组）。2组对照组分别给予0.5％羧甲基纤维素钠溶液，给药组按照12.5mg/kg、25mg/kg、50mg/kg的给药剂量分别给予阿司匹林溶液，每天1次，持续一周。一周后，正常阿司匹林给药组在灌胃结束1小时后取血，正常对照组立即腹腔注射0.5％CMC-Na，高尿酸对照组和阿司匹林实验组则腹腔注射尿酸溶液，并于注射后1小时取血样测定尿酸、肌酐和尿素氮。结果微小剂量阿司匹林对正常和高尿酸血症模型小鼠的肌酐、尿素氮影响不明显，但可显著升高血尿酸水平，在给药剂量为12.5mg/kg 时，升高比率最大。随给药剂量增加，血尿酸水平逐渐回落至基线，与对照组相比无显著性差异。结论微小剂量阿司匹林可导正常小鼠和致高尿酸血症模型小鼠血尿酸水平升高，且随给药剂量增加，这种影响减小。患者特别是痛风和高尿酸血症患者在应用微小剂量阿司匹林时应注意监测血尿酸浓度。 关键词：阿司匹林；高尿酸血症模型；血尿酸；肌酐；尿素氮 The effect of mini-dose aspirin on uric acid in normal mice and hyperuricemia model mice ZHANG Hai-ying, LI Yu-zhen (Department of Pharmacy, People’s Hospital, Peking University, Beijing 100044, China) ZHUO Lai-dong (School of Pharmaceutical Sciences, Peking University, Beijing 10083, China) ABSTRACT: OBJECTIVE The aim of study was to evaluate the effects of mini-dosages of aspirin on blood uric acid, creatinine and urea nitrogen in normal mice hyperuricemia model mice. METHODS 120 mice were randomized into 8 groups, consists of normal controlled group, hyperuricemia controlled group, normal experimental group (3 groups) and hyperuricemia experimental group (3 groups) . normal and hyperuricemia controlled groups were administrated 0.5% CMC-Na, normal and hyperuricmia experimental groups were administered aspirin as follow: 12.5mg/kg/d, 25mg/kg/d, 50mg/kg/d. The dosage of CMC-Na and aspirin keep a week. Then normal experimental groups blood was collected 1 hour later after the last administration for determination uric acid, creatinine and urea nitrogen. And normal controlled group received an intraperitoneal injection of 0.5%CMC-Na immediately after the last administration, at the same time hyperuricemia control group and three experimental groups treated with intraperitoneal

大豆蛋白对高尿酸血症大鼠的影响及其代谢相关机制的初步研究

目录 中文摘要 (Ⅰ) Abstract (Ⅱ) 缩略语/符号说明 (Ⅷ) 前言 (1) 研究现状、成果 (1) 研究目的、方法 (2) 一、高尿酸血症大鼠模型的建立 (3) 1.1材料与方法 (3) 1.1.1材料 (3) 1.1.2方法 (4) 1.1.3统计方法 (8) 1.2结果 (8) 1.2.1不同方法对大鼠一般情况影响 (8) 1.2.2不同方法对大鼠血尿酸影响 (10) 1.2.3不同方法对大鼠肾功能影响 (12) 1.2.4不同方法对大鼠血脂影响 (13) 1.2.5不同方法对大鼠酶活性影响 (13) 1.3讨论 (14) 1.3.1高尿酸血症模型建立的意义 (14) 1.3.2高尿酸血症模型动物的选择 (15) 1.3.3高尿酸血症模型方法的选择 (15) 1.3.4不同方法造模的鉴定 (16) 1.3.5不同方法对大鼠一般情况、脂代谢的影响 (16) 1.4小结 (16) 二、大豆蛋白对高尿酸血症大鼠的影响 (17) 2.1材料与方法 (17) 2.1.1材料 (17) 2.1.2方法 (18) 2.1.3统计方法 (21) V

2.2结果 (21) 2.2.1大豆蛋白对大鼠机体代谢的作用 (20) 2.2.1.1大豆蛋白对大鼠一般情况影响 (21) 2.2.1.2大豆蛋白对大鼠血尿酸影响 (21) 2.2.1.3大豆蛋白大鼠血肾功能影响 (23) 2.2.1.4大豆蛋白对大鼠糖脂代谢影响 (24) 2.2.1.5大豆蛋白对大鼠酶活性影响 (25) 2.2.2大豆蛋白对高尿酸血症大鼠影响 (26) 2.2.2.1大豆蛋白对高尿酸血症大鼠一般情况影响 (26) 2.2.2.2大豆蛋白对高尿酸血症大鼠血尿酸影响 (27) 2.2.2.3大豆蛋白对高尿酸血症大鼠肾功能影响 (28) 2.2.2.4大豆蛋白对高尿酸血症大鼠糖脂代谢影响 (30) 2.2.2.5大豆蛋白对高尿酸血症大鼠酶活性影响 (33) 2.2.2.6大豆蛋白对高尿酸血症大鼠血清代谢产物影响 (33) 2.3讨论 (38) 2.3.1大豆蛋白对大鼠机体代谢的影响 (37) 2.3.2大豆蛋白对高尿酸血症大鼠血尿酸、肾功能影响 (39) 2.3.3大豆蛋白对高尿酸血症大鼠血糖血脂影响 (40) 2.3.4大豆蛋白对高尿酸血症大鼠血清代谢产物影响 (40) 2.4小结 (42) 结论 (44) 参考文献 (45) 发表论文和参加科研情况说明 (50) 综述 (51) 综述参考文献 (55) 致谢 (60) 个人简历 (61) VI

腺嘌呤、鸟嘌呤致高尿酸血症大鼠肝脏损害的研究-

腺嘌呤、鸟嘌呤致高尿酸血症大鼠肝脏损害的研究* 目的：观察腺嘌呤、鸟嘌呤作用高尿酸血症大鼠肝脏时，肝脏功能变化情 况及透射电镜下肝脏超微结构的变化。方法：选用实验用雄性Wistar大鼠36只，随机分为A组（对照组）、B组（造模对照组）、C组（腺嘌呤组）、D组（腺嘌呤淀粉糊组）、E组（腺嘌呤、鸟嘌呤组）、F组（鸟嘌呤组），每组6只。B、C、D、E、F组连续给予酵母浸膏溶液15 g/（kg·d）灌胃7 d，诱导高尿酸血症代谢模型。造模成功后，B组给予淀粉糊灌胃，C组给予20 mg/（kg·d）腺嘌呤淀粉糊混合液灌胃，D组给予10 mg/（kg·d）腺嘌呤淀粉糊混合液灌胃，E组10 mg/（kg·d）腺嘌呤混合10 mg/（kg·d）鸟嘌呤淀粉悬液灌胃，F组给予20 mg/（kg·d）鸟嘌呤淀粉糊混合液灌胃。持续14 d后，测定各组大鼠血清ALT、AST、UA，并作肝脏组织电镜切片观察肝脏损伤情况。结果：（1）电镜下观察C组溶酶体明显增多，分散在细胞核周围，并有深色颗粒物质。D组溶酶体数量略有增多，脂滴增多，开始进入溶酶体。E组溶酶体增多，脂滴增多，出现深色颗粒状物质。F组胆小管中有少量深色颗粒状物质。（2）C～F组大鼠谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平与B组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）；C～E组血尿酸值与B组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。C、D、E组大鼠的谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血尿酸水平均高于F组。结论：腺嘌呤、鸟嘌呤对高尿酸血症大鼠的肝脏均有损害，腺嘌呤损害作用较大。腺嘌呤致使大鼠谷丙转氨酶、谷草转氨酶水平显著升高，其作用高于同等剂量的鸟嘌呤。腺嘌呤对大鼠血尿酸水平有明显作用。 标签：腺嘌呤；高尿酸血症；鸟嘌呤；肝脏损害；超微结构 高尿酸血症是痛风的发病前兆，它指的是血液中尿酸浓度高出正常范围的一种机体状态[1]。痛风及高尿酸血症好发于男性中老年人群，其患病率与年龄增长呈逐正相关[2-4]。伴随生活水平的提高及居民饮食结构的变化，亚洲地区无症状高尿酸血症及痛风的发病率逐渐升高，并呈现年轻化趋势[3，5]。其产生的两大主要原因是，尿酸排泄减少以及嘌呤代谢障碍[6]。目前研究多认为，高尿酸血症的发生，多是由于体内细胞的DNA 分解代谢、产生的嘌呤代谢障碍[7-9]。腺嘌呤、鸟嘌呤是构成人类及大鼠DNA的主要嘌呤。本实验通过研究腺嘌呤、鸟嘌呤的不同组合对大鼠肝脏功能及肝脏超微结构产生的影响，初步探究两者对肝脏的损伤程度差异及两者间有无相互作用。 1 材料与方法 1.1 实验动物健康雄性Wistar大鼠36只（青岛市实验动物和动物实验中心提供），体质量（230±20）g。 1.2 主要仪器与试剂OLMPUS AU2700Beckman全自动生化分析仪（日本OLMPUS公司），JEM-1200EX透射电镜（日本JEOL公司）。腺嘌呤V900471-25G （美国Sigma公司），鸟嘌呤V900473-25G（美国Sigma公司），酵母浸膏（北京双旋微生物培养基制品厂，批号20140320）。ALT、AST、UA试剂盒（上海科华诊断用品有限公司）。