传代细胞培养分析
细胞的传代实验报告
一、实验目的1. 了解细胞传代培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握细胞传代培养的基本技术，包括细胞消化、计数、接种和观察等。
3. 观察细胞在不同代数的生长情况，分析细胞传代过程中的变化。
二、实验原理细胞传代培养是指在原代培养的基础上，将细胞从培养瓶中取出，通过消化、计数、接种等步骤，将细胞转移到新的培养瓶中继续培养。
细胞传代培养的目的是为了获得足够数量的细胞，满足后续实验的需求。
细胞传代培养可分为原代培养和传代培养。
原代培养是指从组织或细胞中直接获取细胞进行培养；传代培养是指将原代培养的细胞进行消化、计数、接种等操作，转移到新的培养瓶中继续培养。
三、实验材料1. 培养基：DMEM培养基、胎牛血清、青霉素、链霉素、胰蛋白酶。
2. 培养器具：细胞培养瓶、培养皿、移液器、吸管、无菌操作台、显微镜等。
3. 试剂：生理盐水、75%乙醇、碘伏、双氧水、氯化钠等。
四、实验步骤1. 原代培养（1）取适量组织或细胞，用生理盐水清洗，然后用剪刀剪碎。
（2）将剪碎的组织或细胞放入培养皿中，加入适量胰蛋白酶，37℃消化5-10分钟。
（3）消化结束后，用吸管轻轻吹打培养皿，使细胞分散。
（4）将细胞悬液转移到细胞培养瓶中，加入适量DMEM培养基，37℃、5%CO2培养箱中培养。
2. 传代培养（1）待细胞生长至80%-90%融合时，用胰蛋白酶消化细胞。
（2）消化结束后，用吸管轻轻吹打细胞，使细胞分散。
（3）将细胞悬液转移到计数板中，用生理盐水洗涤计数板，计数细胞数量。
（4）根据计数结果，调整细胞悬液浓度，将细胞接种到新的细胞培养瓶中。
（5）将细胞培养瓶放入培养箱中，继续培养。
3. 观察细胞生长情况（1）每天观察细胞生长情况，记录细胞形态、生长速度等。
（2）通过显微镜观察细胞在不同代数的生长情况，分析细胞传代过程中的变化。
五、实验结果与分析1. 细胞传代培养成功，细胞生长情况良好，细胞形态正常，生长速度较快。
2. 随着细胞传代次数的增加，细胞生长速度逐渐减慢，细胞形态逐渐发生变化，部分细胞出现老化现象。
细胞传代培养实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞传代培养的基本操作流程。
2. 熟悉细胞传代培养过程中的注意事项。
3. 了解细胞传代培养在生物科学研究中的应用。
二、实验原理细胞传代培养是指将已经生长到一定阶段的细胞，通过特定的方法进行分离、洗涤、消化、计数和稀释等步骤，将细胞转移到新的培养容器中继续培养的过程。
细胞传代培养是维持细胞生长、扩大细胞数量和保持细胞特性的重要手段。
三、实验材料1. 细胞：HeLa细胞2. 培养基：DMEM/F12培养基（含10%胎牛血清）3. 试剂：0.25%胰蛋白酶、10%FBS、PBS缓冲液、酒精4. 仪器：超净工作台、倒置显微镜、细胞培养箱、离心机、移液枪、培养瓶/皿、吸管等四、实验步骤1. 准备阶段（1）将HeLa细胞从培养瓶中取出，用PBS缓冲液轻轻洗涤一次，去除残留的培养基。
（2）准备胰蛋白酶工作液，将其置于37℃水浴中预热。
（3）准备含有10%FBS的培养基，将其置于37℃水浴中预热。
2. 分离细胞（1）用移液枪吸取适量胰蛋白酶工作液，滴加到细胞培养皿中的细胞层上。
（2）将培养皿置于37℃、5%CO2的培养箱中消化2-3分钟。
（3）倒置显微镜下观察细胞，当大部分细胞变圆且亮时，加入等体积含有10%FBS的培养基终止消化。
（4）用移液枪轻轻吹打细胞，使其成为细胞悬液。
3. 计数（1）取适量细胞悬液，使用细胞计数仪或显微镜配合琼脂滴定法计数。
（2）根据计数结果，调整细胞密度至所需的浓度，一般为每毫升105-106个细胞。
4. 传代（1）向含有预热的培养基的离心管中加入细胞悬液，并轻轻混匀。
（2）离心管离心，在1500 rpm速度下离心3-5分钟，以沉淀细胞。
（3）弃去上清液，保留沉淀的细胞。
（4）加入适量的新鲜培养基，将细胞重新悬浮。
（5）将细胞悬液转移到新的培养瓶中，置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
五、实验结果1. 成功完成细胞传代培养，观察到细胞在新的培养瓶中继续生长。
2. 细胞生长状态良好，细胞密度符合预期。
细胞的传代实验报告
细胞的传代实验报告细胞的传代实验报告细胞的传代实验是生物学研究中常用的一种实验方法，通过观察细胞在不同代数中的变化，可以了解细胞的生长、分裂和遗传特性等方面的信息。
本次实验旨在观察细胞在连续传代过程中的生长情况，并探讨细胞的传代对细胞特性的影响。
实验材料和方法：1. 实验材料：细胞培养基、细胞培养器具、显微镜等。
2. 实验方法：取一定数量的细胞，接种于含有适宜培养基的培养皿中，定期观察细胞的生长情况并记录。
实验过程：1. 第一代细胞接种：将细胞接种于培养皿中，加入适宜培养基，放置于恒温培养箱中，控制培养条件。
2. 观察细胞生长：每隔一段时间，取出培养皿，使用显微镜观察细胞的生长情况，包括细胞数量、形态和颜色等。
3. 细胞传代：当细胞达到一定密度时，将细胞进行传代，即将细胞分散到新的培养皿中，继续培养。
4. 连续传代：重复第2和第3步，观察细胞在连续传代过程中的变化。
实验结果：经过连续传代，观察到以下几个方面的变化：1. 细胞数量的增加：随着传代的进行，细胞数量逐渐增多。
初始接种的细胞数量较少，但随着细胞的分裂和生长，细胞数量呈指数增长。
这表明细胞具有较高的增殖能力。
2. 细胞形态的变化：在连续传代过程中，观察到细胞形态发生了一定的变化。
初始接种的细胞通常呈现典型的形态特征，如细胞核清晰可见，细胞质丰满。
但随着传代的进行，细胞形态逐渐变得不规则，细胞核变得模糊，细胞质出现空泡等。
3. 细胞生长速度的变化：在连续传代过程中，观察到细胞的生长速度逐渐减慢。
初始接种的细胞生长迅速，但随着传代的进行，细胞的生长速度逐渐减缓。
这可能是由于细胞在长时间培养中逐渐丧失了一些生长因子或细胞自身的功能受到了限制。
4. 细胞特性的变化：通过观察细胞在连续传代过程中的变化，可以发现细胞的特性也发生了一定的改变。
例如，细胞的分化程度可能发生变化，细胞的功能可能受到调控等。
这些变化可能与细胞的遗传特性和环境因素有关。
结论：细胞的传代实验结果表明，细胞在连续传代过程中会发生一系列的变化。
传代细胞培养实验报告单
实验名称：传代细胞培养实验实验日期：2023年4月10日实验者：张三一、实验目的1. 掌握哺乳动物细胞原代培养与传代培养的基本操作过程。
2. 熟悉细胞传代过程中所需的无菌操作技术。
3. 了解细胞传代对细胞生物学研究的重要性。
二、实验原理细胞培养是一种在人工条件下模拟体内生理环境，使细胞生长、繁殖或传代的技术。
细胞培养技术可以让我们直接观察活细胞，避免体内实验的复杂因素，为生物学研究提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象。
细胞培养分为原代培养和传代培养。
原代培养是指从生物体中取出组织或细胞进行首次培养，而传代培养则是在原代培养基础上，将细胞从一个容器转移到另一个容器中扩大培养。
传代培养的累积次数即为细胞的代数。
三、实验材料1. 培养基：DMEM培养基（含10%胎牛血清、1%青链霉素双抗）2. 细胞：小鼠成纤维细胞3. 工具：超净台、移液器、吸管、培养皿、离心机、显微镜、无菌操作箱、消毒剂等四、实验步骤1. 培养基配制：按照说明书配制DMEM培养基，加入胎牛血清和青链霉素双抗。
2. 细胞复苏：将冻存细胞从-80℃冰箱取出，放入37℃水浴中解冻，轻轻摇匀后移入离心管，1000 rpm离心5分钟，弃上清，加入适量DMEM培养基重悬细胞。
3. 细胞接种：将重悬细胞接种于培养皿中，放入培养箱中培养，保持细胞密度在80%-90%。
4. 细胞传代：当细胞密度达到80%-90%时，进行细胞传代。
具体操作如下：a. 吸除旧培养基，用PBS缓冲液清洗细胞2-3次。
b. 加入适量胰蛋白酶，37℃水浴消化细胞，显微镜下观察细胞变圆、收缩，待大部分细胞脱离培养皿底面时，立即终止消化。
c. 加入适量DMEM培养基终止消化，用吸管轻轻吹打细胞，使其分散均匀。
d. 将细胞接种于新的培养皿中，放入培养箱中继续培养。
5. 细胞观察：在显微镜下观察细胞生长状态，记录细胞形态、生长速度等指标。
五、实验结果1. 细胞在培养皿中生长良好，细胞形态正常，呈梭形。
动物细胞传代培养分析
动物细胞传代培养分析动物细胞的传代培养是用来研究和繁育动物细胞的技术，对于生物科学和医学研究具有重要意义。
传代培养可以使动物细胞在无限期内继续增殖，为各种研究提供了充足的细胞资源。
本文将介绍动物细胞传代培养的原理、方法和应用。
一、传代培养的原理动物细胞的传代培养是通过将初始细胞（初代细胞）在一定培养条件下生长和分裂，定期收获一部分细胞进行继代，从而使细胞持续增殖。
动物细胞的传代培养基于以下原理：1.细胞增殖：传代培养的基本原理是细胞自身的生长和分裂能力。
在适当的生长条件下，细胞会进入细胞周期，经过细胞分裂产生新的细胞。
2.分离和分散：细胞传代过程中需要经常将细胞进行分离和分散，避免细胞过度密集或形成细胞聚集。
细胞分散是为了保证细胞的生长和增殖。
3.培养基的调配：细胞传代需要提供适宜的培养基满足细胞增殖的需求。
培养基的配方要包含必需的营养物质、生长因子和维生素等。
二、传代培养的方法传代培养主要有以下几个步骤：1.准备培养基：根据需要的传代次数，准备足够的培养基。
培养基的配方可以根据具体的细胞类型和研究需要进行调整。
2.细胞解离：将细胞从培养皿或瓶子中收集，用细胞解离液将细胞分散为单细胞悬浮状态。
细胞解离的方法主要有酶消化法和机械分散法。
3.计数和接种：用细胞计数仪进行细胞数目计数，然后计算出相应的接种细胞数目。
将细胞接种到新的培养皿或瓶子中，使其适当分散。
4.培养和观察：将接种好的细胞置于恒温培养箱中，提供适宜的培养条件（温度、湿度、CO2浓度等）。
定期观察细胞的生长状态和形态特征。
5.细胞收获：根据细胞传代的周期和细胞增殖速率，定期收获适量的细胞用于下一次传代或其他实验。
三、传代培养的应用1.基因表达研究：传代培养可以用来研究细胞的基因表达和细胞信号通路。
通过诱导细胞分化、抗体染色和PCR等方法，可以分析细胞的转录水平和蛋白质表达。
2.细胞毒性和药物筛选：传代培养可以用于药物毒性评价和新药筛选。
细胞传代的实验报告
一、实验目的1. 理解细胞传代培养的基本原理和操作步骤。
2. 掌握细胞传代培养的方法，提高细胞培养的纯度和活力。
3. 分析细胞传代过程中可能遇到的问题及解决方法。
二、实验原理细胞传代培养是指将培养的细胞从原代培养瓶中取出，通过胰蛋白酶消化分散成单个细胞，再将其转移到新的培养瓶中进行培养的过程。
细胞传代培养的目的是为了获得更多的细胞，并保持细胞的生长活力和纯度。
细胞传代培养的基本原理是利用细胞增殖的特性，将原代培养的细胞分散成单个细胞，再进行培养。
细胞传代培养过程中，需要注意以下几点：1. 细胞传代频率：细胞传代频率过高会导致细胞生长活力下降，过低则可能引起污染。
2. 胰蛋白酶浓度：胰蛋白酶浓度过高会损伤细胞，过低则难以将细胞分散成单个细胞。
3. 细胞密度：细胞密度过高会导致细胞之间竞争营养物质，过低则会影响细胞生长速度。
三、实验材料1. 细胞：原代培养的细胞（如人胚胎肾细胞、小鼠成纤维细胞等）。
2. 培养基：DMEM培养基、胎牛血清、胰蛋白酶。
3. 仪器：无菌操作台、超净工作台、培养箱、显微镜、移液器、培养瓶等。
四、实验步骤1. 将原代培养的细胞从培养瓶中取出，用移液器加入适量的胰蛋白酶，置于37℃水浴锅中消化。
2. 观察细胞消化情况，待细胞完全分散成单个细胞时，立即加入等量的胎牛血清终止消化。
3. 将细胞悬液转移至新的培养瓶中，加入适量的培养基，混匀。
4. 将培养瓶置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。
5. 每隔一定时间（如3-5天）观察细胞生长情况，待细胞长满培养瓶底时，重复上述步骤进行细胞传代。
6. 观察细胞生长活力和纯度，分析细胞传代过程中可能遇到的问题及解决方法。
五、实验结果与分析1. 细胞生长活力：通过观察细胞在培养瓶中的生长情况，可以判断细胞传代培养的成功与否。
细胞生长活力高的细胞在培养瓶中生长迅速，细胞形态正常。
2. 细胞纯度：通过观察细胞在显微镜下的形态，可以判断细胞纯度。
纯度高的细胞形态一致，无杂质。
细胞传代培养实验报告
细胞传代培养实验报告实验目的：通过细胞传代培养，掌握细胞培养技术，并观察细胞生长情况，练习实验记录与实验报告的写法。
实验原理：细胞传代培养是指将细胞从一个培养瓶中移植到下一个培养瓶中，继续培养和增殖的过程。
传代培养的目的是实现细胞扩增，为后续实验做准备。
在传代培养的过程中，细胞需要注意以下几个方面：1. 分离细胞：当细胞密度达到一定程度后，需要将细胞进行分离，以避免过度生长造成的细胞损伤。
2. 细胞传代：将分离好的细胞移植到一个新的培养瓶中，进行传代培养。
3. 细胞检验：需要对传代培养的细胞进行检验，检查其是否健康，是否存在任何异常现象。
实验步骤：1. 取出细胞冻存管并放置室温10-20min，使其解冻为细胞悬液。
2. 用DMEM培养基将细胞悬液稀释为1:2。
3. 将扩展细胞培养的培养瓶制备好，取出离心好的FBS（胎牛血清）及抗生素，加入培养基中。
将培养瓶放入恒温摇床中高速振荡10min。
4. 恒温摇床停止震荡并将培养瓶放入其上方。
使用无菌的移液管将稀释好的细胞悬液滴加入培养瓶。
5. 放回恒温摇床进行培养。
6. 细胞达到对数生长期后(通常在3～4天后)，可用0.25%溶解液对细胞进行消化，在显微镜下观测细胞是否已完全消化，同时根据细胞的形态和大小评估细胞的状态。
7. 将细胞悬液稀释为1:3或1:4，并用相同方法进行传代培养，通常每5～7天进行一次传代培养。
实验结果：经过正确的传代培养方法，细胞在恒温摇床中缓慢而稳定地增殖。
在进行下一次传代培养前，需要仔细地检查细胞是否充满了培养瓶。
在观察细胞时，需要特别注意细胞的形态、大小、数量以及任何异常现象。
掌握这些指标有助于评估细胞的状态和健康程度，为后续实验做好准备。
通过本次的细胞传代培养实验，我们成功地掌握了细胞培养技术，并且观察到细胞在不同阶段生长的不同特点。
熟练掌握本技术对于生物医学研究和生产制造都是至关重要的。
本次实验的成功也提醒我们在日常实验操作中需要注意细心认真，保证实验的准确性和有效性。
细胞复苏传代实验报告
一、实验目的1. 掌握细胞复苏和传代的基本操作流程。
2. 了解细胞生长周期及细胞传代的意义。
3. 观察细胞在不同培养条件下的生长状态。
二、实验原理细胞复苏是指将冻存的细胞恢复到正常生长状态的过程。
细胞传代是指将培养的细胞从一个容器转移到另一个容器中，以增加细胞数量。
细胞复苏和传代是细胞培养过程中的重要环节，对于细胞生长、实验研究具有重要意义。
三、实验材料1. 试剂：DMEM培养基、胎牛血清、双抗、PBS、75%酒精。
2. 仪器：水浴锅、台式离心机、细胞计数仪、CO2培养箱、倒置显微镜、移液枪、移液管、细胞培养瓶。
四、实验步骤1. 细胞复苏（1）将冻存的细胞取出，放入37℃水浴锅中，边振荡边使其解冻，直至细胞悬液呈半透明状。
（2）用移液枪将细胞悬液转移至离心管中，离心5min，800rpm。
（3）弃去上清液，加入适量DMEM培养基，轻轻吹打使细胞重悬。
（4）将细胞悬液转移至培养瓶中，放入CO2培养箱中培养。
2. 细胞传代（1）待细胞贴壁生长至80%左右，用吸管轻轻吹打，使细胞脱离培养瓶壁。
（2）将细胞悬液转移至离心管中，离心5min，800rpm。
（3）弃去上清液，加入适量DMEM培养基，轻轻吹打使细胞重悬。
（4）将细胞悬液按1:2的比例转移至新的培养瓶中，放入CO2培养箱中培养。
3. 细胞观察（1）每隔24小时观察细胞生长状态，记录细胞数量、形态等。
（2）用倒置显微镜观察细胞形态，拍摄细胞照片。
五、实验结果与分析1. 细胞复苏后，细胞形态正常，生长状态良好。
2. 细胞传代过程中，细胞数量逐渐增加，生长状态稳定。
3. 观察细胞形态，细胞呈典型的上皮细胞形态，细胞质均匀，细胞核清晰。
4. 通过细胞计数仪对细胞进行计数，计算细胞生长倍数。
六、实验结论1. 本实验成功复苏和传代了细胞，为后续实验研究提供了细胞来源。
2. 通过细胞复苏和传代，可以增加细胞数量，满足实验需求。
3. 观察细胞生长状态，细胞生长稳定，为后续实验研究提供了有力保障。
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①用螺旋口瓶培养细胞时，需将瓶 盖微松，以保证通气。
②保持培养箱内空气干净。定期消毒
③箱内加灭菌蒸馏水于槽中以保持箱内湿度， 避兔培养液蒸发。
细胞培养常用的培养瓶、 培养皿、6孔板、96孔板
常用玻璃器皿清洗
在组织细胞培养中，体外细胞对任何有害物质 都非常敏感,均能影响培养细胞的生长 微生物产品附带杂物 上次细胞残留物 非营养成分的化学物质 浸泡（自来水）、刷洗（洗衣粉）、酸泡（24 小时）、流水冲洗、蒸溜水浸泡和冲洗、50℃ 烘干
培养基：1640培养基（含10%小牛血清）
四、实验步骤
1．生长良好的原代细胞，一般经过3-5天左右可 形成致密单层。
2．倒去原瓶内培养液。
3．消化。向培养瓶内加入0.25%的2ml胰 蛋白酶消化液浸泡细胞，2分钟后倒去多余 消化液，剩余的酶液继续作用。(也可以直 接消化作用6min左右）。
优点：标准化生产，组分和含量相对固定，成本 低
缺点：只能维持细胞不死，不能促进细胞增殖生 长。使用时还要添加一定比例的天然培养基。例 如血清。
一般说来，含5％小牛血清的培养基对大多 数细胞可以维持细胞不死，但支持细胞生长 一般需加 10％血清。
CO2培养箱设定的条件为37 ℃, 5％ CO2 。
进而细胞发生衰退死亡。
传代细胞培养
原代培养的细胞在瓶壁相互汇合后，需要 将其分开至多个新的培养瓶，叫传代。
否则因为接触抑制和密度抑制现象，引起 细胞衰老，停止生长甚至死亡。
三、实验材料
用具器材： 移液枪，枪头、细胞培养瓶、倒置显微镜、
酒精灯、液体储存瓶、试管架等。 实验药品：0.25％胰酶，D－Hanks，1640
实验中所用溶液的配制：
D-Hanks工作液试剂配方
氯化钠 8g 磷酸氢二钠（Na2HPO4 ·12H2O） 0.132g 氯化钾 0.4g NaHCO3 0.35g D-葡萄糖 1g
0.1% 酚红液 1ml
三蒸水 800ml ，溶解后定容到1000ml。
113 ℃灭菌15min。
消化液：胰蛋白酶是一种黄白色粉末，用D－ hanks配置。 常用的浓度是0.25％ 。PH7.4 用滤器过滤除菌。
缺点： （1）来源受限。
（2）成分复杂，影响对某些实验产物的提取和 实验结果的分析。
（3）易发生支原体污染
合成培养基
合成培养基是根据细胞生存所需物质的种类和数 量，用人工方法模拟合成的。如TC199、MEM、 RPMI-1640、 DMEM等。
主要成分：氨基酸、维生素、碳水化合物、无机 盐和其它一些辅助物质。
中止消化、吹散细胞
4．分瓶扩大培养。每瓶再补加2.0毫升培养液， 混Leabharlann 细胞，37℃、5%CO2培养箱中培养。
分瓶培养
37℃、5％CO2培养
5．观察。细胞培养24小时后，即可进行观 察，观察的重点如下： ⑴ 首先要观察培养细胞是否污染。主要观 察培养液颜色的变化及浑浊度。 ⑵ 观察培养液颜色变化及细胞是否生长。 ⑶ 如细胞已生长，则要观察细胞的形态特 征并判断其所处的生长阶段。 ⑷ 观察完毕，可用台盘蓝染液对细胞进行 染色。以确定死、活细胞的比例。
培养基。 实验材料
1、培养细胞生长的条件
➢ 细胞的营养需要 ➢ 细胞的生存环境 温度: 37 ℃ O2 CO2: 5% pH: 7.2-7.4 渗透压 ➢ 无毒 ➢ 无污染
培养基
天然培养基： 天然培养基有血清、血浆和组织提取液
优点：营养成分丰富，培养效果好
血清的成分
血清中含有： ①多种蛋白质（球蛋白、铁蛋白等） ②多种金属离子； ③激素； ④促贴附物质 ⑤各种生长因子 ⑥转移蛋白 ⑦不明成分
五、作业
1、简述动物细胞传代培养的注意事项？
知识简介：
贴附生长型细胞 必须贴附于底物才能生长的细胞。大部分二倍体 动物细胞。
悬浮生长型细胞 不需要附着于底物而于悬浮状态下即可生长。见 于各种造血系统肿瘤细胞
原代培养
从体内取出细胞接种培养到第一次传代的 阶段，叫原代培养。
方法：无菌操作取出组织（或器官）
酶消化处理 分散成单个细胞 使其不断地生长和繁殖。
培养
动物细胞原代培 养过程图
细
原代培 养期
为新鲜组织自体内取出并在体外培养生长 至第一次传代的时期。
胞
系
的
传代期
生
长
原代培养的细胞生长一定时间之后，贴附型 细胞即融合成片而逐渐铺满底物的表面，便 应将原代细胞分开接种至2个或更多的新的
培养器皿中，即传代，此即成细胞系。
过
程
衰退期
一般有限细胞系在此期的细胞开始时虽仍 然存活，但增殖已很缓慢并逐渐完全停止，
在倒置显微镜下观察细胞消化变化，当观 察到大部分细胞出现胞质回缩、细胞变成 圆球形、细胞间隙增大现象时需终止消化。
消化数分钟
细胞基本皱缩变圆， 此时细胞可吹打下
4.终止消化：加培养液3-4ml，即可终止消 化E作用。
用吸管有序地吹打瓶壁细胞（从瓶底到瓶 口，从瓶的一侧到另一侧，注意吹打边角 细胞）。打匀后分装。
传代细胞培养
一、目的要求
掌握动物细胞培养的基本原理。 掌握动物细胞传代培养的技术方法。
二、基本原理
细胞培养(cell culture) :即是把来 自机体的组织经分散成为单个细胞， 放在类似于体内的体外环境中生存， 使其不断生长、繁殖或传代，借以观 察细胞的生长、繁殖、衰老等生命现 象。
可分为原代和传代培养两种方式。
消毒
细胞培养的最大危险是发生培养物的细菌、 真菌和病毒等微生物的污染
常见原因：
操作间或周围空间的不洁 培养器皿和培养液消毒不合格或不彻底 严格遵守操作常规，防止发生污染
2、 293T细胞
293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮 细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时 表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点 与启动子区的质粒可以复制。