2019年-蝴蝶兰组培过程的技术关键-PPT精选文档
《蝴蝶兰组织培养》课件
引入基因工程技术
利用基因工程技术对蝴蝶兰进行遗传 改良，提高其抗逆性和生长速度。
优化培养条件
通过控制培养温度、光照、湿度等环 境因素，促进蝴蝶兰组织培养的快速 生长。
自动化与智能化技术应用
引入自动化与智能化技术，实现蝴蝶 兰组织培养过程的精准控制和高效管 理。
蝴蝶兰组织培养在花卉产业中的应用前景
快速繁殖优良品种
利用蝴蝶兰组织培养技术快速繁 殖优良品种，满足市场需求。
培育新品种
利用蝴蝶兰组织培养技术进行新 品种的培育，提高花卉产业的竞 争力。
01 02 03 04
保护濒危品种
通过蝴蝶兰组织培养技术保存濒 危品种的遗传资源，防止其灭绝 。
延长花期
通过蝴蝶兰组织培养技术调控花 期，满足节日和庆典等特殊场合 的需求。
外植体选择
选择健康、无病虫害的蝴蝶兰植株作为 外植体来源，通常使用花梗、叶片等作 为外植体。
VS
外植体处理
对外植体进行消毒处理，去除表面微生物 ，保证无菌条件，为后续培养打下基础。
蝴蝶兰愈伤组织的诱导与培养
愈伤组织诱导
将经过处理的外植体接种在愈伤组织诱导培养基上，在适宜的温度和光照条件下诱导出愈伤组织。
蝴蝶兰组织培养的应用前景
蝴蝶兰组织培养技术不仅可用于快速 繁殖和种质保存，还可应用于基因工 程和细胞工程等领域。
通过基因编辑技术，可以改良蝴蝶兰 的性状，提高其抗逆性和适应性。同 时，细胞培养可用于生产具有药用价 值的次生代谢产物。
02
蝴蝶兰组织培养技术流程
Chapter
蝴蝶兰外植体的选择与处理
实验操作步骤与注意事项
01
步骤二：外植体切割与接种
02
用无菌水冲洗消毒后的材料，用无菌滤纸吸干水分。
蝴蝶兰组织培养技术
不同外植体对蝴蝶兰原球茎诱导率的影响
二、原球茎途径
培养基： 原球茎诱导培养基：包括MS、1 /2MS、VW、B5、KC、 花宝及其改良型等,由于蝴蝶兰品种差异及外植体来源
T
不同导致不同品种及外植体对最适培养基的选择有所不 同。 原球茎增殖培养基：改良KC和1/2MS的培养基最佳。
二、原球茎途径
激素：
编号
培养基
Code
Medium
1
MS+NAA0.50 mg/L+6-BA2.00 mg/L
2
MS+NAA1.00 mg/L+6-BA2.00 mg/L
3
MS+NAA2.00 mg/L+6-BA2.00 mg/L
4
MS+NAA0.50 mg/L+6-BA3.00 mg/L
5
MS+NAA1.00 mg/L+6-BA3.00 mg/L
蝴蝶兰组织培养技术
班级：13级园艺班 学生：杨惠、杨颖霖、柯壮
LOGO
蝴蝶兰
兰科蝴蝶兰属，原产亚热带 雨林地区。其气根露在叶片周 围，既有吸收空气中养分的作 用，还有生长光合作用。新春 时节，从叶腋中抽出长长的花 梗，并开出形如蝴蝶飞舞般的 花朵，深受人们青睐，有“洋 兰王后”之称。分布在马来西 亚、印度尼西亚，及中国台湾 等地。
6
MS+NAA2.00 mg/L+6-BA3.00 mg/L
7
MS+NAA0.50 mg/L+KT0.10 mg/L
8
MS+NAA1.00 mg/L+KT0.10 mg/L
9
MS+NAA2.00 mg/L+KT0.10 mg/L
植物组织培养项目七 蝴蝶兰的组培技术
渐形成芽点，进而分化出芽。待芽长到1 cm以上时，
将其分切接种于培养基③中，继续长大形成壮苗。
蝴蝶兰芽的诱导
5.生根与炼苗移栽
将具有3-4 片叶，高约3-4 cm芽苗切下转移到培养基 ④中。因苗在生根培养基中生长缓慢，约 90 d转移 1 次，生根率达 100% 。移栽时，小心取出小苗，洗净 根部培养基，栽入消毒液浸泡过的水苔中。防阳光直
项目七
组培实例
蝴蝶兰的植物组织培养技术
学习目标
了解蝴蝶兰的简介； 了解蝴蝶兰组培的原因； 掌握蝴蝶兰的组织培养技术。
兰花介绍
一、蝴蝶兰简介
蝴蝶兰（Phalaenopsis aphrodite Rchb. F.）别名蝶兰、 台湾蝴蝶兰，为兰科、蝴蝶兰属多年生草本植物。原产 于亚热带雨林地区，分布在泰国、菲律宾、马来西亚、 印度尼西亚以及中国台湾。
射，保持湿度85%左右，温度25 ℃-30 ℃的环境，待
新根伸长、新叶长出时，每隔7 d喷1 次0.5%KH2PO4 溶液进行叶面追肥，成苗率95%以上。
思考题
1. 蝴蝶兰进行组培的原因？
2. 蝴蝶兰如何进行组培快繁？
3. 蝴蝶兰如何进行生根培养？
4. 蝴蝶兰如何进行炼苗移栽？
酪蛋白；壮苗培养基③1/2MS+20%香蕉泥；生根-1。
培养温度25 ℃-28 ℃，光照10 h/d，光照度为2 500
lx。
3. 愈伤组织及芽的诱导
将灭过菌的外植体接种于培养基①上，暗培养 4-5 d 后，转为光照培养15 d，根尖切口处膨大并产生绿色 瘤状愈伤组织，30 d后将愈伤组织切下接种到增殖培 养基②上，再培养30 d后从愈伤组织表面绿色颗粒逐
中，手动的大力摇晃试管，也可达到消毒的目的。
蝴蝶兰培养技术
生根培养
将蝴蝶兰丛生芽接种到生根培养基 MS+6-BA（1mg/L）+ NAA（0.5mg/L） +15%的椰汁
生根条件： 温度25℃ 光强2000Lx 每天光照16 h
炼苗与移栽
待培养瓶内小苗根长至8-10 cm 左右，根数 3-5条，叶数3-5片，叶宽1.5-2.5cm，叶片生 长健壮，即可出瓶移栽。
蝴蝶兰 (Phalaenopsis amabilis)
蝴蝶兰商业价值
蝴蝶兰作为四大洋兰之一，在国际 花卉市场占有重要的地位，不仅作 为重要的盆栽植物，其切花也被广 泛应用。在国内蝴蝶兰经常被选购 作为礼品赠送亲朋好友 ，在年宵花 卉市场上也无比畅销。
蝴蝶兰的繁殖方式
种子繁殖：种子小，胚发育不完全，没有胚 乳及其他组织，自然条件下萌发率极低且产 生实生苗变异性大 分株繁殖：蝴蝶兰是单茎性气生兰，植株很 少发育侧枝，分株繁殖系数极低 组织培养：是目前蝴蝶兰大规模生产的唯一 途径。
植物脱毒
植物次生代谢产物的生产 植物种质资源的离体保存
胚胎培养的应用
细胞融合
单倍体育种
蝴蝶兰简介
兰科(Orchidaceae) 蝴蝶兰属（Phalaenopsis） 原产于中国台湾、菲律宾、 蝴蝶兰的组织培养技术 印尼、泰国、马来西亚等 地。其花型奇特似蝶,花 色鲜艳,花期持久, 被称 为“兰花皇后”。
CoCl2· 6H2O
0.25
0.025
盐酸硫铵等
0.4
外植体的消毒
外植体用自来 水下冲洗干净 无菌水清 洗2-3遍 花梗放在用75% 酒精消毒30s 10%的次氯酸 钠钠浸10min
无菌水冲洗 4-5遍后待用。
切成长约1 cm 带腋芽的切段。
蝴蝶兰的组织培养技术
外植体接种
将消毒好的外植体切取一定大小的部分，接种到准备好的培养基上，并注意避免 污染。
培养条件
温度控制
蝴蝶兰组织培养的温度应控制 在25℃左右，并保持恒温培 养。
光照条件
培养过程中需要提供适宜的光照 ，一般使用日光灯进行补光，并 控制光照时间和强度。
接种方式
接种方式包括斜面接种和平面接种等，不同的接种方式对蝴 蝶兰组织培养的效果也有所不同。接种时需要注意外植体的 位置、大小、深度等因素，以促进蝴蝶兰组织的生长发育。
04
蝴蝶兰组织培养的应用前景
快速繁殖蝴蝶兰
繁殖速度快
通过组织培养技术，可以快速 繁殖大量的蝴蝶兰，并且可以 保证每一株蝴蝶兰的品质和性
通过组织培养技术，可以大量繁殖蝴蝶兰苗木，降低生产成本，提高种植效率， 同时保护自然生态环境。
研究蝴蝶兰的组织培养技术，对于保护和开发利用蝴蝶兰资源，丰富我国花卉品 种，提高花卉产业的经济效益和生态效益都具有重要的意义。
02
蝴蝶兰组织培养的基本流程
材料的选取和准备
适宜外植体选择
应选取健康无病害的蝴蝶兰植株作为外植体，并尽量选取其 中幼嫩的部位如茎尖、侧芽等。
细胞培养
通过组织培养技术，可以建立蝴蝶兰的细胞培养体系，进而实现大规模的细 胞培养生产，为提取细胞产物提供充足的原材料。
05
结论
研究总结
成功建立了蝴蝶兰组织培养技术体系，确定了合 适的培养基配方、消毒处理和继代培养条件，实 现了植株快速繁殖和种质保存。
通过研究不同来源和不同成熟度种子的胚培养， 建立了高效胚培养体系，为蝴蝶兰种质创新和新 品种培育提供了新的途径。
蝴蝶兰组培课件
授粉时先将母本的花粉块除去,再将父本 的花粉块用小镊子镊起,轻轻地放在母本的柱头 上,因柱头和花粉块上都有粘液,花粉在柱头上 粘得牢, 不必担心花粉块脱落。
一般授粉后不需要套袋，用铅笔写好标 牌,挂在授粉母株上。晴天气温较高时,授粉后 结实率可达 95% 以上。
2）蝴蝶兰果实无菌处理
当蝴蝶兰果实呈黄绿色时,要及时采收 ,否 则易裂果。蝴蝶兰果实为萌果,果实大小长约 6.5~12.5 cm,直径 0.7~1.6cm,每个果实中含种 胚上万至几十万粒,兰花种子具有未分化的特点, 只是一团未分化的胚细胞,胚小,种皮宽大,呈纺 锤型，没有贮藏营养物质的组织,
兰花培养成功的关键，首先是形成无性繁殖系原球茎。
国 兰 原 球 茎 的 增 殖
2、花梗侧芽的培养
当兰花开花约一个月后，大 多选取已开有少数花的健壮 花序，切取带有花梗和芽的
节段
(1)采芽 将带腋芽的花梗进行冲洗，用10％的漂白粉 溶液表面灭菌20min，除去腋芽的苞叶，再在5％的漂白 粉溶液中表面灭菌3min，无菌水冲洗净。 (2) 带腋芽花梗组织，接种到培养基上。
(3)培养基和培养条件 诱芽培养基：MS+BA3 诱导原球茎：MS+BA5+NAA0、5 增殖：MS+BA3+NAA0、2+活性炭1.5克/L 生根：1/2MS+BA1+NAA0.5 PH：5.4 培养条件是光照强度2000Lx，光照时间每天13h，保持恒 温25℃。 生根之前可以进行过渡培养，不加激素。
经 1~2 个月的管理,待小苗长出1~2对新叶时移 栽到营养钵中。随着苗子的成长,逐渐更换大的营 养钵。
在小苗管理期间要经常喷水,但水苔不能积水 或过湿 ,防止烂根。每隔 2~3 周追1次稀薄液体肥 料 ,定期喷洒杀菌剂 ,预防病害发生。当开花时根 据育种目标选择优良植株，然后进行无性繁殖。
蝴蝶兰的组织培养技术
01
技术要求高
组织培养技术需要专业的知识和 技能，操作过程复杂，成本较高 。
变异风险
02
03
培养条件严格
长期进行组织培养可能导致基因 突变和变异，影响植物的遗传稳 定性。
组织培养需要在特定的温度、湿 度、光照等条件下进行，对设施 要求较高。
对未来研究的展望
优化培养条件
进一步研究蝴蝶兰组织培养的最优条件，提高培 养效率和成功率。
定期观察记录培养情况，及 时调整培养条件，促进蝴蝶 兰的生长和发育。
03
蝴蝶兰组织培养的关键技术
外植体的选择与处理
外植体的选择
选择健康、无病虫害的蝴蝶兰植株作 为外植体来源，通常使用花梗、叶片 、根等部位。
外植ห้องสมุดไป่ตู้的处理
对外植体进行消毒处理，去除表面微 生物，保证无菌条件，为后续培养打 下基础。
培养条件与环境控制
温度控制
适宜的温度是蝴蝶兰组织培养的重要条件，通常控制在25℃左右 ，以促进细胞分裂与增殖。
光照调节
适当的光照强度和时间对蝴蝶兰组织培养至关重要，通常使用散射 光或弱光，避免阳光直射。
湿度控制
保持培养环境相对湿度在70%-80%之间，以防止培养基过度干燥 或湿度过高。
细胞分裂与增殖
细胞分裂
在外植体上诱导细胞分裂，形成愈伤组织，进而分化出新的 植株。
组织培养技术在植物繁殖、种质资源 保存、基因工程和细胞工程等领域具 有广泛的应用价值。
02
蝴蝶兰组织培养的基本步骤
材料的选取与处理
选取健康、无病虫害的蝴蝶兰 植株作为材料来源。
对选取的材料进行清洗，去除 泥土和残叶。
将材料切割成适当大小的小块 ，一般以2-3厘米长的茎段为宜 。
蝴蝶兰组织培养技术要点分析
园艺园林 282023.01蝴蝶兰组织培养技术要点分析张 婷(广东省惠州市农业科学研究所，广东 惠州 516000)摘要：近年来蝴蝶兰开始频繁出现在各地区的花卉市场中，因此，相关科研单位、企业开始逐渐增加对其生产投入以及组织培养力度。
但是，现阶段蝴蝶兰生产所有的组织培养基配方、培养环境以及规格苗生产中栽培基质等尚未与国际先进水准齐平，导致蝴蝶兰产业在实际发展中受到严重限制。
本文主要是对蝴蝶兰组织培养技术要点进行分析。
关键词：蝴蝶兰；组织培养技术；原球茎本文研究了蝴蝶兰组织培养的相关技术，通过实验论证了在散射光环境下幼叶诱导蝴蝶兰原球茎能够达到最佳效果。
最佳培养基为MS+6-BA6毫克/升水解乳蛋白500毫克/升+蔗糖5克/升（pH=5.4）；最适增殖培养基为MA+6-BA2毫克/升+NAA1毫克/升+水解乳蛋白500毫克/升+蔗糖25克/升+琼脂5克/升（pH=5.4）；最适生根长苗培养基为1/2MS+IBA1.5毫克/升+NAA0.05毫克/升+0.3%活性炭+蔗糖25克/升+琼脂5克/升（pH=5.4）。
1 蝴蝶兰组织培养技术的注意事项1.1 培养基添加物对蝴蝶兰增值与分化的影响一般可以在蝴蝶兰组织培养中添加适量天然物质，能够供给蝴蝶兰幼苗微量营养成分、生长激素等，像是在其中加入120毫克/升香蕉泥，就能够对原有pH值进行缓冲，以此达到壮苗与生根作用。
相关资料指出，在培养基中加入适量椰乳或香蕉泥，能够促进原球茎的增值。
在蝴蝶兰丛生芽中加入一定的添加物，能够促进和诱导幼苗生根。
而在其内加入高浓度活性炭，能够促进原球茎增值。
1.2 原球茎继代中褐化的防治蝴蝶兰与其他兰科植物类似，原球茎状体在继代培养过程中易褐变死亡，很难增值。
通过将1克/升活性炭加入到培养基中，并在合适时间内将原球茎褐化的部分进行切除，并重新配置新鲜的培养基，防治外植体出现褐变死亡，将10%椰子水加入培养基中，能够让原球茎更快生长，在其增值环节中有效抑制褐变现象。
蝴蝶兰的组织培养技术
蝴蝶兰的组织培养技术蝴蝶兰的组织培养技术蝴蝶兰为兰科多年生附--生草本，又名蝶兰，是兰科植物中栽培最为广泛的种类之一，主要分布在热带及亚热带地区。
其花形奇特，色彩艳丽，花期持久，素有“兰中皇后”的美誉，具有极高的观赏和经济价值，在国内外花卉市场上极受欢迎。
蝴蝶兰是单茎气生兰，植株上极少发育侧枝，比其他种类的兰花更难于进行常规无性养殖。
组织培养是建立蝴蝶兰快速养殖无性系的重要手段。
1 外植体的选择蝴蝶兰的茎尖、茎段、叶片、花梗侧芽、花梗节间、根尖等部位都已有培养成功的报道，方法各异，难度各有高低。
蝴蝶兰不同外植体的成活率有差异，其中花梗侧芽的成活率最高，达75%；其次为花梗，成活率为 62.5%；叶片和根尖最差，分别为12.5%和 7.5%。
针对不同外植体，取材方法也不同，通常取花梗节之间1~2cm长的幼嫩部分，切取长 2~3mm 的切段作为外植体。
2 基本培养基的选择蝴蝶兰组织培养所采用的基本培养基包括 MS、1/2MS、VW、B5、KC、花宝及其改良型等，其中1/2MS对蝴蝶兰原球茎增殖效果最好。
3 外源激素的选择目前常使用的外源激素主要是生长素类（如IAA、2,4-Ｄ和NAA）和细胞分裂素类（如BA、ZT、KT）。
蝴蝶兰组织培养中常用的细胞分裂素为 6-BA，较高浓度（1~8mg/L）的 6-BA 能促进蝴蝶兰原球茎增殖，较低浓度（0.1~0.5mg/L）的 6-BA 则能促进原球茎分化。
适宜浓度的 6-BA 配合较低浓度的 NAA，更有利于原球茎的增殖，2.0mg/L 6-BA 和 0.3mg/L NAA配合使用是蝴蝶兰原球茎增殖的最佳组合。
4 培养基添加物对蝴蝶兰增殖和分化的影响蝴蝶兰组织培养中常加入一些天然物质如椰乳、香蕉泥、番茄汁、苹果汁等，这些物质能提供一些必要的微量营养成分、生理活性物质和生长激素等，如加入100~200mg/L香蕉泥，具有较大的 pH 缓冲作用，有利于兰科植物的壮苗和生根。
蝴蝶兰的组织培养
蝴蝶兰的组织培养蝴蝶兰属单茎类兰花,其常规繁殖方法有分株法和播种法。
在常规繁殖中，有三个难以解决的问题：第一，用分株繁殖方法增殖缓慢，不利于新品种的推广；第二，种子繁殖困难，因兰花种子十分微小，胚很细弱，种子中几乎没有贮藏营养物，在自然条件下，绝大多数种子会在发芽过程中夭折，只有少数种子遇到菌根才能萌芽；第三，病毒感染严重，降低种性。
采用无菌播种和组织培养的方法进行蝴蝶兰的无性系繁殖，可以在一定程度上解决上述三个问题，成为目前大量繁殖蝴蝶兰的主要途径。
外植体的选择和消毒取蝴蝶兰花梗在自来水下用细软毛刷轻刷表面，并吸干表面水分，剪成2一3cm长的茎段。
在工作台上按以下程序进行灭菌处理：将材料放入经高温灭菌过的烧杯中；加入70％的酒精浸泡20秒；0.1％的HgCl消毒8分钟，分2次进行，每次4分钟，灭菌后用无菌水冲洗5次，每次2分钟；用解剖刀切除坏死部分后，接入培养基。
用此方法既能有效地消毒又不会对培养材料产生毒害，培养材料接入培养基后无褐化坏死现象出现。
无菌材料的试管培养培养材料的选择是蝴蝶兰组培决繁的关键。
腋芽节位以下第3、4节花梗芽是最适宜的外植体，而谷胧甘肽200mg/L既能很好地抑制褐化，又能促进试管苗的生长和分化，是蝴蝶兰组织培养中最合适的褐化抑制剂。
B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L是较适宜的愈伤组织诱导培养基，B5+6BA1.0mg/L＋NAAO.2mg/L是较适宜的分化培养基，1/2MS+IBA1.2mg/L＋NAA0.05mg/L及2%蔗糖是较适宜的生根培养基。
将消毒后的无菌培养材料接种在愈伤组织诱导培养基上，其培养基为B5+GA32.0mg/L＋NAAO.lmg/L，培养基pH调至5.8，培养室温度控制在24士2℃。
接种后遮光放置4一5天，而后每天光照12小时，2周后，切口处开始膨大，产生淡绿色瘤状愈伤组织，并不断增大。
4周后将愈伤组织切下转接到分化培养基B5+6BA1.0mg/L＋NAA0.2mg/L上，转瓶后愈伤组织的体积和重量成指数级增加，4周左右愈伤组织表面出现较大绿色颗粒，并形成芽点，继而分化出丛生芽。
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我所从事蝴蝶兰组织培养研究的主 要成果：
• ——2019年，制定省级农业标准《蝴蝶兰试管苗 生产技术规程》（DB44/T128范与推广》获汕头市农业技术推广奖一等奖；
• ——2019年，《蝴蝶兰“满天红”的组培快繁与 规模化生产技术》获汕头市科技进步奖二等奖；
五、组培污染的控制（略）
谢谢！
蝴蝶兰组培过程的技术关键
高级农艺师 张秀珊
个人简介
本人于2019年6月毕业于华南农业大学园艺 系果树专业，同年7月份分配至广东梅雁集团股份 有限公司工作，主要从事螺旋藻的养殖和产品开 发，2019年认定为助理农艺师资格；2019年7月， 由梅雁公司调入汕头市农科所工作。十年来，本 人一直在农科所生物中心，主要从事园艺植物组 织培养和花卉选育种的研究和开发工作。2019年 12月评定为农艺师资格，2019年12月评定为高级 农艺师资格。
④外植体的最佳成熟度： 叶片：叶龄3-5天 花梗腋芽：第一朵花现蕾时 茎尖或根尖：无菌苗或株龄40天内的植株
2．外植体的消毒
无菌的外植体材料是蝴蝶兰组培成功的重要前提和根本保证，而 消毒是获得无菌外植体的有效方法，它通过一些表面消毒剂来杀死外 植体表面的微生物，又尽可能保持外植体的生命力。因此，消毒处理 是蝴蝶兰组培工作中的重要一环。
注意事项：消毒时间因外植体的种类或成熟度不同而不同。
三、外植体的接种
1．接种室和工作台的清洁和消毒 2．接种工具的准备：酒精灯、接种盘、高温灭菌器、接种刀、镊子 等。 3．接种具体操作过程（略） 4．注意事项： ——严格规范无菌操作，尽量降低因操作不当造成的污染； ——严格工具的消毒工作，尽量减少病毒的交叉感染； ——切取外植体的工具要锐利且切割动作要快，防止挤压，以免使 材料受损伤； ——切取外植体时切口或切点要适宜、准确（例如：切花梗时，下 端切口45°，上端切口平面。切芽时，去掉顶芽）； ——外植体在培养容器内的分布要均匀，以保证必要的营养面积和 光照条件。
二、外植体的选择和消毒
1．外植体的选择 除培养基成分外，决定蝴蝶兰组培成败的另一个重要因素就是外
植体的来源。虽然从理论上讲，植物细胞都具有全能性，能够再生新 植株，因此任何器官、任何组织，都可以作为外植体。但实际上，蝴 蝶兰的不同器官之间的分化能力有巨大差别，因此选择合适的外植体 就显得尤为重要。
• ——2019年，《蝴蝶兰杂交育种体系构建与新品 种选育》获汕头市科学技术奖一等奖。
今天，本人主要结合自己十年来在蝴 蝶兰组培工作方面的一些实践经验，与大 家共同探讨蝴蝶兰组培过程的主要技术措 施或一些需要注意的问题，以求推动我所 蝴蝶兰的组培工作更好、更快地发展。
一、培养基的研究和配制
1．在蝴蝶兰的组织培养中，培养基的种类与成 分是决定组培成功与否的关键因素之一。蝴蝶兰 不同品种、不同培养材料或不同的生长阶段对培 养基的要求都不同，因此，培养基的研究和选择 是一个非常关键的基础性工作，也是蝴蝶兰组培 生产中的关键环节之一。 2．在培养基的配制过程中，要保证所使用的各 种试剂或原材料的稳定性（如不使用过期的试剂， 不使用变质的椰子汁、香蕉等原材料）。 3．在培养基的配制过程中，要保证各种称量的 准确性。
①蝴蝶兰的组培外植体主要有叶片、花梗腋芽、花梗节间、茎尖、 根尖等，其中花梗腋芽是蝴蝶兰组培的最佳外植体，也是目前利用最 广泛的。
②在选择外植体时，应先选择生长健壮、无病虫害、不变异的母 株。
③在采取外植体前，对母株进行采前预处理（在采前5-7天，用 杀菌剂喷洒母株），可有效预防和降低内源性污染，提高诱导的成功 率。
前言
我所从事蝴蝶兰组织培养的研究工作始于 2019年。经过十多年的努力，现已发展成为一个 年产100多万苗的蝴蝶兰组培生产线，目前生产 的蝴蝶兰品种有几十种，主要有:“满天红”、 “汕农红皇后”、“汕农姑娘”、“红天鹅”、 “内山姑娘”、“新莎拉黄金”等优良品种；同 时，蝴蝶兰组培技术在蝴蝶兰的选育种、种质保 存等方面也发挥了重要作用。近几年来，每年出 圃的选育种中间材料有3万多苗，保存的品种资源 有几百个。
四、外植体的培养
1．培养环境的控制 2．增殖率的控制：主要靠激素调节 3．继代培养次数的控制：蝴蝶兰大多数品种 培养材料在组培过程中会随着继代培养次数的增 加而逐渐衰退，主要表现在种性退化、生长不良、 再生能力和增殖率下降、变异率提高等。 4．促根培养时苗体大小的控制 5．促根和炼苗阶段环境的控制
常用的消毒剂：0.1%的升汞溶液（HgCl2），成本很低，但不环 保，使用安全性较差，同时易残留，容易对外植体产生毒害作用）、 10%次氯酸钠溶液（NaClO，环保，使用安全，不残留，但成本较 高）。
消毒方法（以花梗腋芽为例）：
将取回的花梗用75%的酒精棉花擦干净表面的灰尘、残留的农药、 肥料、部分细菌、真菌等→将花梗剪成长4CM左右的花梗段（腋芽上 下各2CM左右）→剥去腋芽外的苞片→在超净工作台上用0.1%升汞 溶液（或10%次氯酸钠溶液）消毒13-20分钟→用无菌水清洗5-6次。