超声波提取植物总黄酮
超声波辅助提取鱼腥草总黄酮的工艺研究
1
1∶5
60
15
40
2
1∶10
70
30
50
3
1∶15
80
45
60
2 结果与分析 2.1 因素试验结果 2.1.1 料液比对鱼腥草总黄酮提取的影响
根据图 1 可知，当料液比为 1∶5 至 1∶10 时，提取所获的总黄酮得率逐渐增大，当料液比为 1： 10 时总黄酮得率最大，随后慢慢降低，故正交试验设计中选取提取料液比为 1∶5 ~ 1∶15.
根据图 4 可知，当提取温度在 40℃ ~ 50℃时，提取所获的总黄酮得率逐渐增大，当提取温度 达 50℃时，这时总黄酮得率最大，50℃后总黄酮得率逐渐降低 . 故正交试验设计中选取提取时间 为 40℃ ~ 60℃.
图 4 提取温度不同对总黄酮提取的影响 2.2验结果的基础上设计正交试验方案，选取各因素中鱼腥草总黄酮得率较高 3 个 水平进行正交试验，正交实验结果见表 2.
根据图 3 可知，当超声提取时间为 15 ~ 30 min 时，提取所获的总黄酮得率逐渐增大，当超声 提取时间达 30 ~ 45 min 时，总黄酮得率没有变化，这时得率最大，45 min 后总黄酮得率逐渐降低，
·31·
故正交试验设计中选取提取时间为 15 ~ 45 min.
图 3 提取时间不同对总黄酮提取的影响 2.1.4 提取温度对鱼腥草总黄酮提取的影响
C 提取时间/min 1（15） 2（30） 3（45） 3 1 2 2 3 1 2.010 1.990 2.130 0.140
D 提取温度/℃ 1（40） 2（50） 3（60） 2 3 1 3 1 2 2.010 2.057 2.063 0.053
总黄酮得率/% 1.87 1.92 2.03 2.13 2.24 2.13 2.12 2.03 1.92
超声波辅助提取芙蓉花中总黄酮的研究
超声波辅助提取芙蓉花中总黄酮的研究摘要:用单因素试验方法探讨超声波辅助提取芙蓉花中总黄酮的最佳提取条件,考察了提取温度､乙醇体积分数､提取时间､超声功率对提取结果的影响｡结果表明,在提取温度60 ℃,乙醇体积分数80%,提取时间20 min,超声功率400 W时,芙蓉花中总黄酮的提取率为2.95%,提取效果最好,且优于回流提取法｡关键词:芙蓉花;总黄酮;提取;测定Ultrasonic-assisted Extraction of Flavonoids from Flos Hibisci Mutabilis Abstract: Single factor tests were adopted to optimize the ultrasonic assisted extraction of flavonids from flower of Hibiscus mutabilis (Flos Hibisci Mutabilis). The effects of extaction temperature, time, enthanol concentration and ultrasonic power on extraction ratio were studied. The results indicated that the best extraction efficiency could be achieved if extracting at 80 ℃for 20 min when ethanol concentration was 80%; and ultrasonic power was 400 W. The yield of total flavonoids under these conditions was 2.95%; and it was superior to the heating recirculation method.Key words: Flos Hibisci Mutabilis; total flavonoids; extraction; determination芙蓉花为锦葵科(Malvaceae)植物木芙蓉(Hibiscus mutabilis L.)的花,别名叫拒霜花,分布于四川､云南､山东等地｡近年来研究证明,芙蓉的花､叶中含有芸香甙等黄酮类化合物[1,2],因此芙蓉花可入药,主治肺热咳嗽､吐血､目赤肿痛等｡但芙蓉花的药用成分分析尚未见报道｡黄酮类化合物是一类重要的天然有机化合物,广泛存在于植物中,具有抗炎､抗菌､抗病毒､抗氧化､抗肝毒等多种生理活性,一直受到国内外的广泛重视,研究进展很快[3-6]｡为进一步扩展芙蓉花的药用价值,对芙蓉花中总黄酮进行了提取与测定｡1材料与方法1.1材料芙蓉花:采摘于成都市区｡仪器:722N分光光度计(上海精密科学仪器有限公司),KQ-400KDB型高功率数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司),AE240电子分析天平(瑞士梅特勒-托利多)｡试剂:无水乙醇､亚硝酸钠､硝酸铝､氢氧化钠,均为分析纯;芦丁标准溶液(0.2 mg/mL)｡1.2方法1.2.1样品溶液的制备将芙蓉花洗净后烘干,研磨成粉末后准确称取1.250 0 g粉末,加入乙醇溶液10 mL,经提取,冷却,过滤,从滤液中移取0.7 mL于50 mL容量瓶中用30%(V/V,下同)的乙醇定容｡1.2.2标准曲线的绘制吸取芦丁标准溶液1.0､2.0､3.0､4.0､5.0､6.0 mL于25 mL 比色管中,各加入50 mg/mL亚硝酸钠溶液1.0 mL､100 mg/mL硝酸铝溶液各1.0 mL､40 mg/mL氢氧化钠试液6.0 mL,用30%的乙醇定容至刻度,摇匀,静置后,在510 nm波长处测定其吸光度[7-9]｡以吸光度(A)为纵坐标,浓度(C//μg/mL)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程为■=0.011 3C+0.012 1,相关系数r=0.999 2｡2结果与分析2.1超声波辅助提取法单因素试验结果2.1.1乙醇体积分数对芙蓉花中总黄酮提取率的影响准确称取1.250 0 g芙蓉花粉末5份,分别加入不同体积分数的乙醇溶液10 mL,在提取温度50 ℃､超声功率400 W下提取30 min后,按前述方法测定吸光度,考察乙醇体积分数对芙蓉花中总黄酮提取率的影响,结果见表1｡结果表明,总黄酮提取率随乙醇体积分数的增加而先增加,但增加到80%后又随乙醇体积分数的增加而降低,因此选择80%的乙醇溶液为浸提剂｡2.1.2提取温度对芙蓉花中总黄酮提取率的影响称取质量为1.250 0 g芙蓉花粉末5份,分别加入80%(V/V,下同)的乙醇溶液10 mL,分别在超声功率400 W､不同提取温度下(30､40､50､60﹑70 ℃)提取30 min后抽滤,滤液用30%的乙醇定容至50 mL｡分别精密移取0.7 mL提取液于50 mL比色管中,按前述方法测定吸光度,考察提取温度对芙蓉花中总黄酮提取率的影响,结果(表2)表明,总黄酮提取率随提取温度的增加而增加,但是在60､70 ℃之间增加已经不明显了,考虑到仪器损耗及仪器最大温度的限制等方面因素(仪器最高温度为70 ℃),因此最佳提取温度为60 ℃｡2.1.3超声功率对芙蓉花中总黄酮提取率的影响按前面的单因素试验方法,在提取温度50 ℃,不同超声功率下提取30 min后抽滤,考察超声功率对芙蓉花中总黄酮提取率的影响,结果(表3)表明,随着超声功率的提高,提取率不断上升,试验中最佳超声功率为400 W｡2.1.4提取时间对芙蓉花中总黄酮提取率的影响按前述方法,分别在提取温度50 ℃､超声功率400 W､不同提取时间下提取后抽滤,考察提取时间对芙蓉花中总黄酮提取率的影响｡结果(表4)表明,随着提取时间的延长,提取率先上升后下降,在提取时间为20 min时提取率最大,因此最佳提取时间是20 min｡2.2单因素综合试验结果按相同的试验方法,用80%的乙醇,提取温度60 ℃,提取时间20 min和超声功率400 W提取,得到提取率为2.95%｡2.3回流提取试验结果称取1.250 0 g芙蓉花粉末,加入80%的乙醇溶液10 mL,常压下水浴加热至60 ℃回流提取20 min后,测定吸光度,结果得到总黄酮提取率为2.80%｡而超声波辅助提取总黄酮的提取率为2.95%,所以超声波辅助提取法提取效率更高｡2.4精密度试验结果准确移取0.7 mL芙蓉花样品稀释液,连续测定5次吸光度,计算其变异系数｡由数据得到其S为0.290 0%,CV为0.75%,说明该试验方法精密度较好｡2.5重复性试验结果取芙蓉花粉末5份,按超声波辅助提取法制备样品溶液,测定吸光度,计算其变异系数得S为0.360 4%,CV为0.98%,说明其重复性较高｡2.6加标回收试验结果移取芦丁标准溶液1.0､2.0 mL各两份于4个50 mL比色管中,向加入了1.0 mL 标准溶液的两个比色管中分别加入0.6~0.7 mL样品稀释液,同样于有2.0 mL标准溶液的两个比色管中分别加入0.6､0.7 mL样品稀释液,按试验方法操作｡结果表明,芦丁回收率是102.36%~108.47%,平均回收率为105.84%,CV为2.66%,说明采用本方法对芙蓉花中总黄酮含量进行定量分析是可行的,结果稳定可靠｡3小结通过超声波辅助提取法对芙蓉花中总黄酮进行提取,利用单因素条件法,考察了乙醇体积分数､提取温度､超声功率､提取时间对提取率的影响,从而得出:乙醇体积分数﹑提取温度﹑超声功率﹑提取时间均会对芙蓉花中总黄酮含量的提取有影响｡其中最佳的试验条件为提取时间20 min,乙醇体积分数80%,提取温度60 ℃,超声功率400 W｡此条件下总黄酮提取率为2.95%｡超声波辅助提取法与回流提取法相比较,超声波辅助提取法对芙蓉花中总黄酮的提取要优于回流提取法｡芙蓉花中总黄酮的提取结果与大豆总黄酮含量对比,大豆中总黄酮含量一般为0.24%和0.22%[10],或者更低,比芙蓉花中总黄酮含量低,所以芙蓉花中总黄酮具有潜在的开发价值｡参考文献:[1] 姚莉韵,陆阳,陈泽乃. 木芙蓉叶化学成分研究[J]. 中草药,2003,34(3):201-203.[2] 陈仁通,陈玲. 木芙蓉中的化学成分[J].中草药,1993,24(5):227-229.[3] 汤容,樊瑞霞. 大豆异黄酮抗癌作用的研究进展[J]. 中国药学杂志,1999,34(7):435-437.[4] 吴立军. 天然药物化学[M]. 北京:人民卫生出版社,2004.[5] JANKUN J,SELMAN S H,SWIEREZ R,et al. Why drinking green tea could prevent cancer[J]. Nature,1997,387(6633):561.[6] 侯艳宁,朱秀媛,程桂芳. 黄芩苷的抗炎机理[J]. 药学学报,2000,35(3):161-164.[7] 黄德娟,黄德超,陈毅峰. 水蕹菜总黄酮含量的测定[J]. 食品科技,2008,33(11):219-221.[8] 毕和平,韩长日,张连华,等. 海南木莲总黄酮含量的测定[J]. 自然科学,2005,18(4):348-350.[9] 陈登丰,李烈辉,罗茂玉. 正交设计法优选银杏叶黄酮类化合物提取工艺的研究[J]. 制剂与技术,2010,17(16):134-135.[10] 魏福华,张永忠,井乐刚,等. 紫外分光光度法测定大豆中大豆异黄酮[J].理化检验-化学分册,2006,42(6):461-463.。
超声波法优化瓜蒌根中总黄酮的工艺提取
超声波法优化瓜蒌根中总黄酮的工艺提取摘要：采取新鲜瓜蒌根为原料，利用超声波法提取瓜蒌根中的总黄酮。
通过正交试验方法确定了最佳优化工艺条件；最后表明，精密称取5g瓜蒌根干燥粉末，以体积分数为85%的乙醇作为溶剂，确定瓜蒌根中的黄酮的最佳提取工艺为：超声时间20min，超声功率40w，超声温度40℃，瓜蒌根中总黄酮提取率可达2.13%左右。
AbstractUsing fresh Trichosanthes root as raw material, the totalflavonoids in Trichosanthes root were extracted by ultrasonic method. The optimum process conditions were determined by orthogonal test. The results showed that, by accurately weighing 5g dried powder of Trichosanthis root and using 85% ethanol as solvent, the optimal extraction process of protein in Trichosanthis root was determined as follows: ultrasonic time of 30min, ultrasonic power of 40w, ultrasonic temperature of 35℃, the extraction rate of t otal flavonoids in Trichosanthis root could reach about 2.13%.天花粉属葫芦科植物瓜蒌（Trich-osanthes kirilowii Maxim）或双边瓜蒌（Trichosanthes rosthornii Harms）的干燥根。
响应面法优化牛蒡根总黄酮超声波提取工艺
响应面法优化牛蒡根总黄酮超声波提取工艺牛蒡（Arctium lappa L.）是一种常见的中草药材，被广泛应用于中药和保健品领域。
牛蒡根中含有丰富的总黄酮类化合物，具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生物活性。
牛蒡根总黄酮的提取工艺对其有效成分的提取率和品质具有重要影响。
超声波提取技术因其高效、节能、环保等特点，被广泛应用于中草药中有效成分的提取工艺优化。
在本研究中，我们将采用响应面法对牛蒡根总黄酮的超声波提取工艺进行优化，以提高提取率和品质。
一、材料与方法1.实验材料牛蒡根由当地市场购得，并经过鉴定确认为Arctium lappa L.采集地点为XX省XX市XX县，采集季节为XX月。
牛蒡根干燥后粉碎成细粉备用。
2.超声波提取在实验室条件下，取一定量的牛蒡根粉末，加入适量的乙醇为提取溶剂，在一定的温度和时间条件下进行超声波提取。
在实验中，我们将考察不同因素（如料液比、提取温度、超声功率、提取时间等）对牛蒡根总黄酮提取率的影响，以找出最佳的超声波提取工艺条件。
3.总黄酮含量分析采用高效液相色谱法（HPLC）测定牛蒡根总黄酮的含量。
通过标准曲线法计算牛蒡根总黄酮的含量，并根据提取率计算提取效果。
二、结果与讨论经过优化后，最终得到的牛蒡根总黄酮提取率为3.25%，总黄酮含量为18.5mg/g。
与未优化的工艺条件相比，总黄酮提取率和含量分别提高了27.5%和18.2%。
可见，响应面法优化的超声波提取工艺能够显著提高牛蒡根总黄酮的提取效果，提高了其经济效益和市场竞争力。
在实际工程中，超声波提取技术已经被广泛应用于中药材的有效成分提取工艺中。
通过对实验数据的统计分析和多因素交互影响的研究，采用响应面法可以有效地优化提取工艺条件，提高有效成分的提取率和品质。
超声波提取技术与响应面法的结合在中药材提取工艺优化中具有广阔的应用前景。
本研究通过响应面法优化了牛蒡根总黄酮的超声波提取工艺，得到了最佳的提取工艺条件，并取得了良好的提取效果。
超声波提取植物总黄酮
实验一植物材料中总黄酮分离提取--超声波提取植物总黄酮一、实验目的为充分利用天然植物资源，避免资源的浪费，探讨植物总黄酮的提取及鉴别方法。
二、实验原理采用超声波乙醇浸提法从植物材料（黄芩、银杏叶、枇杷叶）中提取黄酮类物质，并用分光光度法测定含量。
利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响。
三、实验材料原料：黄芩、银杏叶、枇杷叶试剂：95%乙醇AR；无水乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；芦丁标准品、蒸馏水其它：滤纸、吸管、容量瓶、漏斗、试管四、实验仪器超声波清洗器（超声工作频率40kHz）；紫外可见分光光度计；抽滤机电炉子水浴锅五、实验步骤（一）试剂配制a.硝酸铝（10%）：称取20 g硝酸铝溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，贴标签备用。
b.亚硝酸钠（5%）：称取10 g亚硝酸钠溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，贴标签备用。
c.芦丁标准溶液（2 mg/ml）：称取芦丁2 g于1000 mL容量瓶中，加蒸馏水溶解并定容至刻度，混匀，贴标签备用。
d.乙醇溶液（60%）：600ml无水乙醇，溶于蒸馏水，定容至1000 ml容量瓶中，混匀，贴标签备用。
e.氢氧化钠溶液（4%）：40 g氢氧化钠溶于水，定容至1000 ml容量瓶中，混匀，贴标签备用。
（二）总黄酮成分提取取干燥植物材料（黄芩、银杏叶、香樟叶），粉碎。
称取约5 g，加80 ml 95%乙醇，浸泡20min，超声波提取30 min，抽滤。
滤渣再加80 ml 95 %乙醇，浸泡20min，再次超声波提取30 min，抽滤，合并两次滤液，减压回收（水浴加热）乙醇至滤液仅剩5～7 ml为止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，得样品液。
（三）定量实验-总黄酮的含量测定1. 波长的选择取样品液适量，在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700 nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510 nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。
总黄酮的提取方法
总黄酮的提取方法总黄酮是一类在植物中广泛存在的生物活性物质，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌等多种生物活性。
总黄酮的提取方法主要分为常规提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界流体提取法等。
下面将详细介绍这些方法的原理和操作步骤。
1. 常规提取法：常规提取法是最常用的总黄酮提取方法之一。
该方法的原理是将植物样品与某种适合的溶剂进行浸提，溶剂中的总黄酮溶解出来，然后通过过滤和浓缩得到黄酮提取物。
操作步骤：(1) 将研磨后的植物样品与适量的溶剂加入烧瓶中，一般常用的溶剂有乙醇、甲醇、乙酸乙酯等。
(2) 将烧瓶放入提取装置中，加热浸提，提取时间一般为1-3小时，提取温度根据溶解度可在25-60之间选择。
(3) 提取结束后，使用滤纸、膜过滤或离心等方式分离固液，将液相收集到锥形瓶中。
(4) 将液相进行浓缩，可采用旋转蒸发、真空浓缩或减压浓缩等方法。
(5) 最后得到的黄酮提取物可在低温下保存或进行进一步的分离和纯化。
2. 超声波辅助提取法：超声波辅助提取法是在常规提取法的基础上结合超声波技术进行提取。
超声波的作用可以通过物理振荡和微压力变化，促使溶剂渗透进入植物细胞中，增加提取效率。
操作步骤：(1) 将样品与适量的溶剂放入超声波提取仪中，超声波输出频率一般在20-100 kHz之间。
(2) 开始超声波处理，提取时间一般较短，通常为10-30分钟。
(3) 提取完成后，进行过滤和浓缩等步骤，得到黄酮提取物。
3. 微波辅助提取法：微波辅助提取法是一种利用微波辐射能量加热样品，从而促进溶质的溶解和渗透的方法。
操作步骤：(1) 将植物样品与适量的溶剂放入微波辅助提取系统中。
(2) 设置合适的微波功率和时间，一般微波功率选取在200-1000 W之间，时间一般为5-20分钟。
(3) 提取完成后，进行过滤和浓缩等步骤，得到黄酮提取物。
4. 超临界流体提取法：超临界流体提取法是在超临界温度和压力条件下利用超临界流体作为溶剂进行提取的方法。
超声波法提取山竹皮中总黄酮的研究
无水 乙醇 、 甲醇 、 乙醚 、 酮 、 酸 铝 、 硝 酸 丙 硝 亚
钠、 氢氧 化 钠 均 为分 析 纯 ， 售 ； 市 山竹 皮 ： 购 ； 市 芦
丁（ 工作对 照品 ： 质量分数 为 ９． ） 天津一方 ０５ ：
科技 有 限公 司 。 ＵＳ２５ 紫外一 见分 光 光 度计 ： ５０型 可 Ｈ本 岛津
公 司 ；２ ７ ２型可 见 分 光 光 度 计 ： 海 光 学 仪 器 厂 ； 上
１ｍＬ， 匀 ， 止 ； 硼 （ 氧 化 钠 ） ４ 溶 液 摇 静 加 氢 一
１ 再 加水 至 刻 线 ， 匀 ， 止 放 置 。采 用 紫 ０ｍＬ，ห้องสมุดไป่ตู้摇 静
外分光光度法确定芦 丁的最大吸收波长 ， 供试品
摘
要： 为获取 山竹 皮 中总黄酮的最佳提 取工 艺， 用超 声波提 取法 对山竹皮 总黄酮进行 提取 ， 采 以
芦 丁 为 标 准 品 ， 波 长 ５ ０ｎ 处 测 定 吸 光 度 ， 回 归 方程 Ｙ＝０ ０ ０９Ｘ— Ｏ ０ ７ ｒ ． ９ ）。 实验 在 ０ ｍ 得 ． １ ． ２ —Ｏ ９ ７ ８（ ８
司； ＡＵＸ ３０型 电子 天平 ： －２ 日本 岛津制 作所 。
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１２ １ 总黄酮 的提 取 ．．
称取 ２ ｇ山竹 皮 ， 用 （ 乙醇 ） ０ 的 乙 醇 一８
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超声波辅助酶法提取牡丹皮总黄酮的工艺流程
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牡丹皮是一种具有丰富药用价值的植物材料，其中含有丰富的黄酮类化合物，具有多种药理活性。
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实验一植物材料中总黄酮分离提取
--超声波提取植物总黄酮
一、实验目的
为充分利用天然植物资源，避免资源的浪费，探讨植物总黄酮的提取及鉴别方法。
二、实验原理
采用超声波乙醇浸提法从植物材料（黄芩、银杏叶、枇杷叶）中提取黄酮类物质，并用分光光度法测定含量。
利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的有效成分进入溶剂，从而增加有效成分的提取率，缩短提取时间，并且还可避免高温对提取成分的影响。
三、实验材料
原料：黄芩、银杏叶、枇杷叶
试剂：95%乙醇AR；无水乙醇AR；亚硝酸钠AR；硝酸铝AR；氢氧化钠AR；
芦丁标准品、蒸馏水
其它：滤纸、吸管、容量瓶、漏斗、试管
四、实验仪器
超声波清洗器（超声工作频率40kHz）；
紫外可见分光光度计；
抽滤机
电炉子
水浴锅
五、实验步骤
（一）试剂配制
a.硝酸铝（10%）：称取20 g硝酸铝溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，
贴标签备用。
b.亚硝酸钠（5%）：称取10 g亚硝酸钠溶于蒸馏水中，定容至200 mL，混匀，
贴标签备用。
c.芦丁标准溶液（2 mg/ml）：称取芦丁2 g于1000 mL容量瓶中，加蒸馏
水溶解并定容至刻度，混匀，贴标签备用。
d.乙醇溶液（60%）：600ml无水乙醇，溶于蒸馏水，定容至1000 ml容量瓶
中，混匀，贴标签备用。
e.氢氧化钠溶液（4%）：40 g氢氧化钠溶于水，定容至1000 ml容量瓶中，混
匀，贴标签备用。
（二）总黄酮成分提取
取干燥植物材料（黄芩、银杏叶、香樟叶），粉碎。
称取约5 g，加80 ml 95%乙醇，浸泡20min，超声波提取30 min，抽滤。
滤渣再加80 ml 95 %乙醇，浸泡20min，再次超声波提取30 min，抽滤，合并两次滤液，减压回收（水浴加热）乙醇至滤液仅剩5～7 ml为止，放置100 ml容量瓶中，用60%乙醇稀释至刻度，
得样品液。
（三）定量实验-总黄酮的含量测定
1. 波长的选择
取样品液适量，在0.30 ml 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420～700 nm波长范围测定络合物的吸光度，络合物于510 nm波长处有最大吸收，故测定时选用此波长。
2.标准曲线的绘制
分别精密吸取芦丁对照液（2 mg/ml）0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 ml于10 ml容量瓶中，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.40 ml，摇匀，静置6 min；再加10%硝酸铝溶液0.40 ml，摇匀，静置6 min；再加4%氢氧化钠溶液4.00 ml，用60%乙醇稀释至刻度，摇匀，静置15 min，以试剂作空白参比液，于510 nm 处测定吸光度。
管号 1 2 3 4 5 6 7
芦丁0.00 0.50 1.00 2.00 3.00 4.00 5.00
亚硝酸钠0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
硝酸铝0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
氢氧化钠 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00
60%乙醇 5.20 4.70 4.20 3.20 2.20 1.20 0.20
浓度0.00 0.10 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00
3.提取物含量的测定
精密吸取样品液1 ml，置10 ml容量瓶，按标准曲线的制备方法，测定其吸光度A，用标准曲线法计算样品中总黄酮的含量（mg/ml）。
管号 1 黄芩1 黄芩2 银杏1 银杏2 香樟1 香樟2
样品液0.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00 1.00
亚硝酸钠0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
硝酸铝0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40 0.40
氢氧化钠 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00 4.00
60%乙醇 5.20 4.20 4.20 4.20 4.20 4.20 4.20
六、实验讨论
利用本文所提供的超声波提取、纯化方法而得到的黄酮类物质其纯度较高。
超声波可以强化乙醇浸提法，达到省时、高效、节能的目的。
此过程是一个物理过程，浸提过程中无化学反应，被浸提的生物活性物质在一定时间内保持不变。
七、思考题
1、黄酮类化合物的生理作用？
2、在本实验中，哪些因素会影响测定结果？。