万乳康中盐酸左旋咪唑含量测定方法的研究
复方盐酸左旋咪唑注射液含量测定方法的建立
５ ０ ｍ Ｌ容量瓶 中用 水稀 释至 刻度线 ，摇匀 即得 。
２ ． ２ ． ２ 供试 品溶液 的制备 取本 品 ２Байду номын сангаасｍ Ｌ（ 约相 当
于 盐 酸左 旋 咪 唑 ５ ０ ｍｇ ） ，置 ５ ０ ｍＬ容 量 瓶 中 ，用
表 １ 复 方 盐酸 左 旋 咪 唑 注射 液 中黄 芪 多 糖 的 平均 含 量
中 ，用 水稀 释 至刻 度 ，摇 匀 ，再 吸取 １ ０ ｍＬ置于
乙胺调节 ｐ Ｈ值至 ４ ． ０ － ４ － ０ ． ０ ５ ）一乙腈 （ ８ Ｏ： ２ ０ ） ；
流速为 １ ． ０ ｍＬ ／ ｍｉ ｎ ；进 样 量 为 ２ ０ Ｌ 。在 上 述 色
谱条件下 ，盐酸左旋 咪唑峰与杂峰的分离度符 合要求 ，保 留时间为 ２ ． ７ ｍ ｉ ｎ 左右 ，保 留时间适 中 ，色谱 图见图 １ ；另外 ，波长扫描 图谱 见 图
究
２ ． １ 黄芪 多糖含 量测 定
２ ． １ ． １ 对 照 品溶 液 的制 备 取 在 １ ０ ５ ￣ Ｃ干 燥 至 恒 重 的无 水 葡 萄 糖 Ｏ ． １ ｇ ，精 密 称 定 ，至 １ ０ ０ ｍＬ容 量 瓶 中 ，加 水 溶 解并 稀 释 至 刻度 线 ，摇 匀 ；精 密量 取 ｌ Ｏ ｍ Ｌ ，置 １ ０ ０ ｍＬ容 量瓶 中 ，加 水 至刻度
线 ，摇匀 ，即得 。
其吞噬 、趋化功能 ，诱导机体产生各种 细胞 因 子 ；提 高补体 活性 ，增强机 体 巨噬细胞功 能 ， 提高抗 体产生水 平 ，可用 于动物 的抗 菌消 炎 、 抗病毒 、抑制肿瘤和促进生长等方面＿ ３ ＿ 。二者合
用 ，杀 虫 的 同时 增 强 机 体 免 疫 功 能 、提 高 机 体 抵抗 力 ，效 果 明显 。
万乳康中盐酸左旋咪唑含量测定方法的研究
１１ 仪器 与设 备 ．
Ａ ｉｅｔ１０高 效 液 相 色谱 仪 ， ｇｉ ｌ０ ｌｎ
２０ ０３版 兽药 质量 标 准采 用 高 效 液相 色谱 法 测 定该 制剂 中盐 酸左 旋 咪 唑 的 含 量 ¨ ， 动 相 为 甲 Ｊ流
醇 一 （５：５ （ 冰 乙酸 调 ｐ 为 ４ ２ ， 该 流 水 ６ ３）用 Ｈ ． ）在
万 乳康为农 业部兽药质量标 准 ２０ ０ ３版¨ 中
收 载 的一个 制 剂 ， 要成 分 为 淫羊 藿 、 芪 和盐 酸 主 黄
谱峰对称 ， 样品重复性好 ， 灵敏度高 ， 检测 时间短 ， 可 以很 好 地控制 万乳 康 的质量 。
１ 仪 器与试 药
左旋咪唑 ， 具有增强免疫 的功能 ， 用于防治奶牛 隐
ＬＩ Ｓ Ｕ ｕ—ｍｅ ，ＬＩＨｕ ｉ ａ—ｃ ｎ，ＨＡＮ ，ＸＵ ｎ—ｆ ｎ ｅ Ｌｉ Ｙｉ Ｙ ｏ— ｉｇ ＷＡ Ｇ Ｊｎ—ｈ ｎ Ｈ Ｎ ａ ｊ ， Ｎ ｕ ｎ ｏｇ
（ ｅａ ｒ ｉ ￣ ｕｅｖｉｇＡ ｅｃ ｅ ｒ ａｙＤｒｇ ， ｈｎｚｏ ５０ ２ Ｃ ｉ Ｈ ｎ ｎＰｏ ｎ ｌ ｐｒｉｎ ｇｎｙｏ ｔｉ ｒ ｕ ｓ Ｚ ｅｇｈｕ４ ０ ０ ； ｈｎ ｖｃ Ｓ ｓ ｆＶ ｅ ｎ ａ）
［ 摘
要 ］ 建立 了万 乳康 中盐酸左 旋 咪唑含 量测定 的高 效液 相色谱 法。样 品经 稀 乙醇溶 液提 取 ， ，． ４６ｍｍ×１０ｍｎ 色谱柱 ， ５ ／） 流
进高效液相色谱 仪进行检测 。色谱条 件 ： ｅｕｉＸ ＰＣ ２ （ Ｖ ｎ ｓ Ｂ （ ）５ ｌ
动相为 乙腈 一 ． ｏ Ｌ磷酸溶液 （ 二 乙胺 调 ｐ ． ） ２ ７ ） 检 测 波 长 ２４ ｎ 进样 量 为 １ ０ １ｍ ｌ ／ 用 Ｈ ６ ８ （ ８： ２ ， １ ｍ， ０
盐酸左旋咪唑栓含量测定方法的研究
盐酸左旋咪唑栓含量测定方法的研究
王昕;刘树春
【期刊名称】《天津药学》
【年(卷),期】1999(011)001
【摘要】采用一阶导数光谱法和反相高效液相色谱法，分别对测定盐酸左旋唑栓
的含量方法进行了研究。
在一阶导数光谱法中，在242nm，波长处，盐酸左旋咪唑有最大吸收幅，辅料及空白溶液均不干扰测定，其平均回收率为100．6％，RSD为0．73％（斜体n＝7）。
在反相高效液相色谱法中，用十八烷基硅烷健合硅胶柱，以甲醇-0．04mol磷酸氢二钾（58∶42），用磷酸调pH值至7．0为
流动相，盐酸苯海拉明为内标物，检测波长为220nm，平均回收率为100．9％，RSD为0．43％（n＝6）。
方法专属性强，结果准确、快速。
【总页数】3页(P62-64)
【作者】王昕;刘树春
【作者单位】天津市药品检验所;天津市药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R978.63
【相关文献】
1.盐酸左旋咪唑栓免疫调节作用的临床观察 [J], 李向东;王莹
2.盐酸左旋咪唑栓含量测定的方法改进 [J], 郭岚;苏培
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合英;张要京;王军红
4.复方盐酸左旋咪唑注射液含量测定方法的建立 [J], 王喜平;储君;周文萍;刘三侠;张要齐;孙雪峰
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用GC法测定盐酸左旋咪唑在驱虫药中的含量
用ＧＣ法测定盐酸左旋咪唑在驱虫药中的含量摘要：目的：测定驱虫药复方鹧鸪菜散中盐酸左旋咪唑的含量，以进一步提高其稳定性、重复性、回收率等。
方法：采用气相色谱法测定，色谱柱为30m.AC-1石英毛细管柱，检测器温度为230℃，以联苯胺为内标。
结果：线性范围0.5～2.5mg/mL，r=0.9993；回收率为99.4％，RSD＝0.74％。
结论：采用GC法测定，方法简便、精确、重现性好，可很好地控制盐酸左旋咪唑的内在质量。
关键词：盐酸左旋咪唑；气相色谱；含量测定复方鹧鸪菜散为驱虫药物，用于小儿蛔虫病。
其含量测定方法，部颁标准采用的是紫外分光光度法。
该方法较繁琐，且在实验过程中大量使用三氯甲烷。
本篇介绍采用气相色谱法将盐酸左旋咪唑分离并测定其含量，经检验，该方法简便，稳定性好。
1 仪器与试药气相色谱仪：岛津GC-14C；氢火焰离子化检测器（FID）：HW色谱工作站。
盐酸左旋咪唑对照品（中国药品生物制品检定所）；复方鹧鸪菜散（市售，0.3g/包）：由广东宏兴制药厂提供（批号为080411、080512、080613）；联苯胺（化学原料药，含量大于98％）。
所有化学试剂均为分析纯(广州化学制剂厂)，水为重蒸馏水。
2 方法和结果2.1 色谱条件色谱柱为30m.AC-1石英毛细管柱；检测器：氢火焰离子化检测器FID，氢气流速为50mL/min，空气流速为500mL/min；进样口温度为250℃，检测器温度为230℃，载气为高纯氮，标流量为0.1mL/min，分流比1/20，进样量为2μL，柱初始温度为230℃，停留10min，以10℃/min速度一阶升温到250℃。
2.2 内标溶液的配制在选定的色谱条件下，筛选试验结果表明，取联苯胺适量批号为(080203)，加乙醇溶解并稀释成10mg/mL的溶液，作为内标较为理想。
2.3 对照品溶液的配制取盐酸左旋咪唑适量，精密称定，加乙醇溶解并稀释成5mg/mL的溶液，摇匀，即得。
HPLC法测定盐酸左旋咪唑片的含量研究
ｄｏｉ：１０．１１７５１／ＩＳＳＮ．１００２－１２８０．２０１９．０８．０８ＨＰＬＣ法测定盐酸左旋咪唑片的含量研究周芷锦，林仙军，王彬，陈晓林（浙江省兽药饲料监察所，杭州３１１１０１）［收稿日期］２０１９－０６－０４㊀［文献标识码］Ａ㊀［文章编号］１００２－１２８０（２０１９）０８－００５１－０５㊀［中图分类号］Ｓ８５９．７９［摘㊀要］㊀建立盐酸左旋咪唑片中盐酸左旋咪唑含量测定的高效液相色谱法㊂采用ＡｇｉｌｅｎｔＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ－Ｃ１８（２５０ｍｍˑ４．６ｍｍ），５μｍ色谱柱，Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ＤＡＤ检测器，流动相为０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液（三乙胺调节ｐＨ值至７．０）－乙腈（８０ʒ２０，ｖ／ｖ）；进样量为２０μＬ；柱温为３０ħ；流速为１．０ｍＬ／ｍｉｎ；检测波长为２１４ｎｍ㊂结果表明：盐酸左旋咪唑在１．０２４ １０２．３９８μｇ／ｍＬ范围内线性关系良好（ｒ＝１．００００），高㊁中㊁低浓度回收率分别为９７．４％㊁９９．７％㊁９９．３％㊂该方法定性㊁定量准确，适用于盐酸左旋咪唑片中盐酸左旋咪唑的含量测定㊂［关键词］㊀盐酸左旋咪唑片；高效液相色谱法；二极管阵列检测器作者简介：周芷锦，从事兽药检测相关工作㊂Ｅ－ｍａｉｌ：ｍｉｙａ＿ｚｔ＠１６３．ｃｏｍＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅＴａｂｌｅｔｓｂｙＨＰＬＣＺＨＯＵＺｈｉ－ｊｉｎ，ＬＩＮＸｉａｎ－ｊｕｎ，ＷＡＮＧＢｉｎ，ＣＨＥＮＸｉａｏ－ｌｉｎ（ＺｈｅｊｉａｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒｙＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇａｎｄＦｅｅｄ，Ｈａｎｇｚｈｏｕ３１１１０１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈａｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅＴａｂｌｅｔｓｂｙＨＰＬＣ．ＡｇｉｌｅｎｔＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ－Ｃ１８（２５０ｍｍˑ４．６ｍｍ），５μｍｃｏｌｕｍｎｗａｓｕｓｅｄ．Ｔｈｅｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅｗａｓｐｏｔａｓｓｉｕｍｄｉｈｙｄｒｏｇｅｎｐｈｏｓｐｈａｔｅｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ（０．０５ｍｏｌ／Ｌ，ｐＨｖａｌｕｅａｄｊｕｓｔｅｄｔｏ７．０ｗｉｔｈｔｒｉｅｔｈｙｌａｍｉｎｅ）－ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（８０ʒ２０，ｖ：ｖ），ｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｖｏｌｕｍｅｗａｓ２０μＬ，ｔｈｅｃｏｌｕｍｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ３０ħ，ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｗａｓ１．０ｍＬ／ｍｉｎａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄａｔｔｈｅｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｏｆ２１４ｎｍ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔａｇｏｏｄｌｉｎｅａｒｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｗａｓａｃｃｅｐｔｅｄｉｎｔｈｅｒａｎｇｅｏｆ１．０２４ １０２．３９８μｇ／ｍＬ（ｒ＝１．００００）．ａｎｄｔｈｅｒｅｃｏｖｅｒｙｏｆｈｉｇｈ，ｍｅｄｉｕｍ，ｌｏｗ－Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｗｅｒｅ９７．４％，９９．７％，９９．３％．Ｔｈｅｍｅｔｈｏｄｉｓａｃｃｕｒａｔｅｉｎｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅａｎｄｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅＴａｂｌｅｔｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅＴａｂｌｅｔｓ；ｈｉｇｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｌｉｑｕｉｄｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ；ｄｉｏｄｅａｒｒａｙｄｅｔｅｃｔｏｒ㊀㊀左旋咪唑是一种广谱驱虫药，广泛应用于兽医临床治疗畜禽胃肠道线虫病㊁肺丝虫病和猪肾虫病当中㊂除作为驱虫药之外，盐酸左旋咪唑还具有免疫调节作用，是一种免疫增强剂，能提高巨噬细胞的吞噬能力，增强机体的体液免疫功能和细胞免疫功能［１］㊂研究发现，盐酸左旋咪唑可显著提高脾脏指数和法氏囊指数，对雏鸡有显著的增重效果，在一定程度上提高生长性能［２］㊂目前兽医使用中常见的剂型包括盐酸左旋咪唑片㊁盐酸左旋咪唑注射液㊂目前盐酸左旋咪唑片在‘中国兽药典（２０１５年版）“一部［３］，‘美国药典“（ＵＳＰ４０－ＮＦ３５）［４］中均有收入㊂‘中国兽药典（２０１５年版）“一部［３］中，含量测定标准采用氯仿提取，高氯酸滴定的方法㊂该方法主要存在氯仿毒性较大，且过程较为繁琐，容易出现误差较大等问题㊂‘美国药典“［４］采用高效液相色谱法，但对实验室仪器设备有较高的要求㊂基于文献参考［４］－［６］，本着优化简化实验条件和方法的目的，本文探讨用高效液相色谱法测定盐酸左旋咪唑片中盐酸左旋咪唑含量的方法研究㊂１㊀仪器与材料１．１㊀仪器㊀高效液相色谱仪，Ａｎｇｉｌｅｎｔ１２６０，配ＡｎｇｉｌｅｎｔＤＡＤ检测器；ＭＥＴＴＬＥＲＴＯＬＥＤＯＸＳ２０５电子天平；ＫＱ－５００Ｅ型超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；ＭＥＴＴＬＥＲＴＯＬＥＤＯ３２０酸度计㊂１．２试剂㊀乙腈㊁甲醇均为色谱纯，德国默克公司；磷酸二氢钾㊁磷酸㊁三乙胺均为分析纯；水为超纯水㊂盐酸左旋咪唑对照品来源为中国食品药品检定研究院，批号１００１６７－２０１２０３，含量９９．９％㊂１．３㊀样品㊀实验样品由杭州新港动物药业有限公司等四家单位提供，４个批次２５ｍｇ规格的样品批号分别为：２０１９０１０１，１８０５２９，１９０１２２，２０１８０７０３；２个批次５０ｍｇ规格的样品批号分别为：１７０９０１，１９０３０１㊂２㊀方法与结果２．１㊀溶液的配制２．１．１㊀对照品溶液配制㊀取盐酸左旋咪唑对照品约１０ｍｇ，精密称定，置２００ｍＬ容量瓶中，加入适量流动相溶解，并用流动相稀释至刻度，摇匀㊂２．１．２㊀供试品溶液配制㊀取本品２０片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于盐酸左旋咪唑５０ｍｇ），置１００ｍＬ容量瓶中，加入流动相适量，超声１０ｍｉｎ溶解，用流动相稀释至刻度，摇匀；过滤，精密量取续滤液５ｍＬ，置５０ｍＬ容量瓶中，用流动相定容，摇匀㊂２．２㊀色谱条件及系统适应性试验㊀采用十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（ＡｇｉｌｅｎｔＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ－Ｃ１８，４．６ｍｍˑ２５０ｍｍ，５μｍ），流动相为０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液（三乙胺调节ｐＨ值至７．０）－乙腈（８０ʒ２０，ｖ／ｖ）；进样量：２０μＬ；柱温：３０ħ；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；用二极管阵列检测器在１９０ ４００ｎｍ范围内进行扫描，记录２１４ｎｍ波长处的色谱图㊂盐酸左旋咪唑对照品光谱图（图１），盐酸左旋咪唑对照品溶液色谱图（图２），供试品溶液色谱图（图３）㊂图１㊀盐酸左旋咪唑对照品溶液光谱图Ｆｉｇ１㊀ＳｐｅｃｔｒｏｇｒａｍｏｆＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｕｂｓｔａｎｃｅ图２㊀盐酸左旋咪唑对照品溶液色谱图Ｆｉｇ２㊀ＳｏｌｕｔｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆＬｅｖａｍｉｓｏｌｅＨｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｕｂｓｔａｎｃｅ图３㊀供试品溶液色谱图Ｆｉｇ３㊀Ｓｏｌｕｔｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｍｏｆｔｈｅｓａｍｐｌｅ２．３㊀线性关系考察㊀取盐酸左旋咪唑对照品，精密称定，加流动相制成１００μｇ／ｍＬ的溶液，并配制成１㊁２．５㊁５㊁１０㊁２５㊁５０㊁１００μｇ／ｍＬ等一系列浓度的对照品溶液㊂分别精密吸取２０μＬ，注入色谱仪，测定㊂以对照品浓度（Ｘ）为横坐标，峰面积值（Ｙ）为纵坐标进行线性回归，绘制标准曲线㊂在１．０２４ １０２．３９８μｇ／ｍＬ范围内线性关系良好，线性回归方程为Ｙ＝８９．７１５Ｘ＋１４．７６５，线性相关系数为１．００００㊂２．４㊀回收率试验㊀以批号１９０３０１的样品作为本底样品，精密称取９份，每三份为一组，称取量为应称取样品量的一半（约相当于盐酸左旋咪唑２５ｍｇ），置１００ｍＬ容量瓶中；另精密称取盐酸左旋咪唑对照品，高㊁中㊁低浓度对照品加入量按照应称取量的８０％㊁１００％㊁１２０％的比例加入上述的三组１００ｍＬ容量瓶中，并按照２．１．２的方法配制回收率试验用溶液㊂按照２．２色谱条件，精密量取２０μＬ，注入色谱仪中，记录色谱图㊂计算回收率，回收率＝（实测量／加入量）ˑ１００％，实测添加量＝测得总量－本底盐酸左旋咪唑量㊂回收率结果如表１所示，平均回收率为９７．４％㊁９９．７％㊁９９．３％，说明检测方法的准确度良好㊂表１㊀回收率结果表Ｔａｂ１㊀Ｒｅｓｕｌｔｓｏｆｒｅｃｏｖｅｒｙｔａｔｅ添加浓度本底称样量／ｇ本底含量／ｍｇ对照品添加量／ｍｇ测得总量／ｍｇ回收率／％平均回收率／％ＲＳＤ／％８０％０．１０１０２４．８３１５．３５３９．７７９７．３０．１０２４２５．１７１５．５２４０．１６９６．５０．１０１３２４．９０１５．４４４０．０８９８．３９７．４０．９１００％０．１０１８２５．０３２５．０８４９．８２９８．８０．１０１９２５．０５２４．９８５０．０２９９．９０．１０１５２４．９５２４．９３４９．９７１００．４９９．７０．８１２０％０．１０１７２５．００３４．７２５９．４４９９．２０．１０２３２５．１５３５．２１５９．９１９８．７０．１０１６２４．９８３４．９７５９．９０９９．９９９．３０．６２．５㊀精密度㊀取回收率试验的９份样品测定，ＲＳＤ值按照高㊁中㊁低浓度三组分别为０．９％，０．８％，０．６％，说明精密度良好㊂２．６㊀稳定性试验㊀取重复性试验的供试品溶液，在０，１．５，３，６，１２，１６ｈ时间点进样，测得器峰面积分别为４４８３．８７７４４，４４７４．６６２６０，４４９２．７６３１８，４４８２．００４３９，４５１６．７０２６４，４５０１．６９９２２，其检测结果的ＲＳＤ为０．３％，说明在１６ｈ内供试品溶液基本稳定㊂２．７㊀耐用性试验㊀采用三台不同的液相和三根不同品牌的色谱柱分三组对批号为２０１９０１０１的样品进行含量测定㊂Ａ组为Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ＤＡＤ液相色谱仪，配ＡｇｉｌｅｎｔＣ１８（４．６ｍｍˑ２５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱；Ｂ组为Ａｇｉｌｅｎｔ１２６０ＶＷＤ液相色谱仪，配ＷａｔｅｒｓＣ１８（４．６ｍｍˑ２５０ｍｍ，５μｍ）色谱柱；Ｃ组为Ｗａｔｅｒｓ２６９５－２４８７液相色谱仪，配ＡｇｉｌｅｎｔＣ１８（４．６ｍｍˑ１５０ｍｍ，５μｍ）液相色谱柱㊂样品配制方法如２．１．２，色谱条件见２．２，含量测定结果如表２所示，同一样品三组含量测定结果分别为１００．５％，１０１．３％，１０１．２％，ＲＳＤ值为０．５％，说明该检测方法对液相和色谱柱品牌无特殊要求，耐用性良好㊂２．８㊀实际样品含量测定㊀取１．３中的所有样品，每个样品平行３次，依法测定其含量，结果见表３㊂表２㊀不同液相与不同品牌色谱柱的含量测定比较Ｔａｂ２㊀ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｃｏｎｔｅｎｔｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔＨＰＬＣａｎｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｂｒａｎｄｃｏｌｕｍｎｓ组别称样量／ｇ含量／％平均含量／％组内ＲＳＤ／％组间ＲＳＤ／％ＡＢＣ０．１８１３１００．５９０．１８２１１００．１４０．１８１２１００．６３０．１８１３１００．７２０．１８２１１０１．４４０．１８１２１０１．７３０．１８１３１０１．０６０．１８２１１０１．０８０．１８１２１０１．６０１００．５０．３１０１．３０．５１０１．２０．３０．５表３㊀液相测定结果Ｔａｂ３㊀ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｒｅｓｕｌｔｓｏｆＨＰＬＣ批号规格／ｍｇ称样量／ｇ含量／％平均含量／％ＲＳＤ／％２０１９０１０１２５０．１８１３１００．５９０．１８２１１００．１４０．１８１２１００．６３１００．５０．３１８０５２９２５０．１３７１１００．１４０．１３４５１００．２７０．１３４１１００．３２１００．２０．１１９０１２２２５０．２２８９９９．５７０．２２９５１００．１６０．２２９２１００．０６９９．９０．３２０１８０７０３２５０．２２３７１０６．３１０．２２５６１０６．２９０．２２５０１０４．７５１０５．８０．８１７０９０１５００．２２６９１０７．６５０．２２６４１０６．８７０．２２６４１０６．１３１０６．９０．７１９０３０１５００．２０４２１０２．２６０．２０３８１０２．０１０．２０４１１０１．２２１０１．８０．５３㊀讨论与结论３．１㊀与容量分析结果比较㊀取６批次样品，按照‘中国兽药典（２０１５年版）“一部中盐酸左旋咪唑片的含量测定项下的滴定法进行测定，结果见表４，并与高效液相色谱法比较，两者相对偏差均不超过１．０％，结果无显著差异㊂但滴定法存在以下问题：一是需使用毒性较大的三氯甲烷进行提取；二是步骤过长过多，实验误差较大；三是终点蓝色难以判断，容易过终点误读，导致实验结果偏高㊂相比较而言，高效液相色谱法更简便，也无需三氯甲烷㊁醋酐等危险化学试剂，更有利于实验的开展，实验结果也更为准确可靠㊂表４㊀液相含量测定与容量分析结果比较Ｔａｂ４㊀ＣｏｍｐａｒｉｓｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎＨＰＬＣａｎｄｖｏｌｕｍｅｔｒｉｃａｎａｌｙｓｉｓ样品批号规格／ｍｇ液相含量／％滴定含量／％相对偏差／％２０１９０１０１２５１００．５１０１．００．２１８０５２９２５１００．２１００．２ɤ０．０５１９０１２２２５９９．９９８．２０．９２０１８０７０３２５１０５．８１０５．００．４１７０９０１５０１０６．９１０７．６０．３１９０３０１５０１０１．８１０２．５０．３３．１㊀提取方式的选择㊀在提取溶剂选择上，分别采用了６５％甲醇㊁甲醇和流动相三种溶剂进行超声提取㊂结果表明纯甲醇提取后样品峰形较差，６５％甲醇和流动相提取后的样品峰形较好，本文采用了流动相提取㊂在是否过滤的选择上，过滤与不过滤峰面积相对偏差为０．２％，对含量测定影响不大，由于过滤后溶液更澄清，更有利于第二步配制，本文采用了过滤的方法㊂在超声时间的选择上，实验过程中分别采用了超声５㊁１０㊁２０ｍｉｎ三种方式，峰面积分别为５２５５．３３３５０，５２６２．２７６８６，５２４７．１３６２３，ＲＳＤ为０．１％，因此选择超声时间为１０ｍｉｎ㊂３．２㊀检测波长的选择㊀对盐酸左旋咪唑溶液在１９０ ４００ｎｍ波长范围内扫描，扫描结果表明在２１２ｎｍ波长处有最大吸收，结合文献［５］－［６］报道中基本选择２１４ｎｍ为检测波长，基于２１２和２１４ｎｍ属于光谱扫描误差内，因此还是选择２１４ｎｍ为检测波长，与文献保持一致㊂３．３㊀流动相的选择㊀本文采用了甲醇－０．２％磷酸溶液以及乙腈－０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液两种流动相配比进行试验，供试品溶液采用流动相进行稀释配制成５０μｇ／ｍＬ的溶液㊂结果表明，甲醇－０．２％磷酸溶液流动相下的盐酸左旋咪唑峰峰形不理想，峰形有较明显的拖尾现象，且有较明显的溶剂吸收峰，出峰时间在８ｍｉｎ左右，理论板数在８０００左右㊂而乙腈－０．０５ｍｏｌ／Ｌ磷酸二氢钾溶液（三乙胺调节ｐＨ值至７．０）（２０ʒ８０，ｖ／ｖ）的流动相下的盐酸左旋咪唑峰峰形对称性良好，无干扰，无拖尾，出峰时间在１３ｍｉｎ左右更为合理，无明显的溶剂吸收峰，理论板数在１００００以上㊂因此选择后者作为流动相更适宜㊂采用高效液相色谱法对盐酸左旋咪唑片中盐酸左旋咪唑的含量进行测定，对提取溶剂，提取方式和色谱条件进行了研究和优化，方法学验证结果表明该方法定量准确，与现行有效标准的含量结果一致，为盐酸左旋咪唑片的质量控制提供了更快捷㊁便利的操作方法㊂参考文献：［１］㊀林燕飞，张琴，高芳芳．盐酸左旋咪唑对免疫低下小鼠免疫功能的影响．［Ｊ］．食品与药物，２０１８，２０（６）：４６０－４６４．ＬｉｎＹＦ，ＺｈａｎｇＱ，ＧａｏＦＦ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｒｈｅｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｐｅｒ⁃ｔｉｅｓｏｆｂｕｔｅｎａｆｉｎｅｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅｇｅｌｂｙｒｏｔａｔｉｏｎａｌｒｈｅｏｌｏｇｙ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇ，２０１８，２０（６）：４６０－４６４．［２］㊀郭洋，刘敏跃，李鹏，等．盐酸左旋咪唑对雏鸡免疫功能及生长性能影响的研究［Ｊ］．饲料工业，２０１５，３６（１０）：１０－１２．ＧｕｏＹ，ＬｉｕＭＹ，ＬｉＰ，ｅｔａｌ．Ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｌｅｖａｍｉｓｏｌｅｏｎｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉ⁃ｃａｌｆｕｎｃｔｉｏｎａｎｄｇｒｏｗｔｈｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅｉｎｃｈｉｃｋｅｎｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｅｅｄＩｎｄｕｓｔｒｙ，２０１５，３６（１０）：１０－１２．［３］㊀中国兽药典委员会．中华人民共和国兽药典．２０１５年版一部［Ｓ］．ＣｈｉｎｅｓｅＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａＣｏｍｍｉｔｔｅｅ．ＣｈｉｎｅｓｅＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ，ｖｏｌｕｍｅ１，２０１５Ｅｄｉｔｉｏｎ［Ｓ］．［４］㊀美国药典４０．［Ｓ］．２０１７ＵＳＰ４０－ＮＦ３５［Ｓ］．２０１７．［５］㊀刘素梅，李华岑，韩立，等．万乳康中盐酸左旋咪唑含量测定方法的研究［Ｊ］．中国兽药杂志，２０１０，４４（２）：２６－２８．ＬｉｕＳＭ，ＬｉＨＣ，ＨａｎＬ，ｅｔａｌ．Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｌｅｖａｍｉｓｏｌｅｈｙｄｒｏ⁃ｃｈｌｏｒｉｄｅｉｎＷａｎＲｕｋａｎｇ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＶｅｔｅｒｉｎａｒｙＤｒｕｇ，２０１０，４４（２）：２６－２８．［６］㊀李忠红，张玫，樊夏雷，等．三国药典盐酸左旋咪唑片含量测定方法比较［Ｊ］．中国药事，２０１１，２５（５）：４９７－４９９．ＬｉＺＨ，ＺｈａｎｇＭ，ＦａｎＸＬ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄｓｏｆｌｅｖａｍｉｓｏｌｅｔａｂｌｅｔｓｉｎｔｈｒｅｅｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＡｆｆａｉｒ，２０１１，２５（５）：４９７－４９９．（编辑：陈希）。
2010年国内动物疫病监测计划之三：猪甲型H1N1流感监测计划
ｇｍ 对照品溶液上高效液相色谱仪进行测定 ， ／Ｌ 盐酸
２ １ 国 内动 物 疫病 监测 计 划 之 三 ： 甲型 Ｈ １ 感 监 测 计 划 ００年 猪 １ 流 Ｎ
１ 监测范围 猪。重点对种猪场 、 规模饲养场 和屠宰场 的猪进行监测 。
９ ９ ９ ９ ９ ９ ６ ７ ８ ４ ５ ９ ８ ３ １ ７ ２ ６ ９ ９ ２ １ ６
图 ５ 甲醇 一水 （５：５ 为流 动相 时色谱 图 ６ ３）
左旋 咪唑 色谱 峰 形 较 兽 药质 量 标 准 所 用 流 动相 有
９
一
２９ 样 品测定 取 ５ ． 批万乳康 ， ２ ３ 按 ． 项下供试 品制备 方法进 行处 理 ， Ｌ ＨＰ Ｃ分析 ， 结果见 表 ４ 。
２ ０ ， ３ ５） ５６— ８ ． ０７ ２ （ ： ８ ５８
［ ］ 徐灿辉 ， ４ 何维为． 高效液相色谱法 测定盐酸左旋咪唑片 的含 量［ ］ Ｊ ．中国药业 ， ０ ７ １ （ ） １ — ３ ２０ ， ６ ７ ： １． ２ ［ ］ 王勇忠． ５ 高效液相色谱法测定盐 酸左旋咪唑搽剂 的含量 ［ ］ Ｊ．
１ ３月和 １ １ ， — ０— ２月 每月对 固定监测点进行一次监测（ 北方地 区可根据具体情况进行调整 ） 。发现可疑 病例 ， 随时采样 ， 时检测 。 及 ３ 监测数量 每次监 测数量不低于 ５ ０份鼻咽拭子或组织样品 ， 全年监测数 量不低 ９ Ｏ份 ， 规模饲养场不低 １０份 ， ２ 屠宰场不低 于 ９ ０份 。
３ ２ 按 照 ２０ ． ０３版 兽 药 质量 标 准 中 的方 法 测 定 万 乳康 中盐酸 左 旋 咪 唑含 量 ， 品测 定 重复 性 差 ； 样 采 用本研 究方 法进行 测定 ， 品重 复性 好 ， 敏度 高 ， 样 灵
HPLC-DAD法检测盐酸左旋咪唑注射液中左旋咪唑的含量
科研动态48 中国动物保健 | 2018.12HPLC-DAD 法检测盐酸左旋咪唑注射液中左旋咪唑的含量*林仙军1，章荣叶2，周芷锦1，汤赛飞3，王彬1，陈晓林1，陆春波1（1.浙江省兽药饲料监察所 杭州 311101；2.台州市屠宰管理所 浙江台州 318000；3.浙江建安检测研究院有限公司 杭州 310006)摘要：本研究建立了HPLC-DAD法测定盐酸左旋咪唑注射液中左旋咪唑含量的方法。
采用Agilent Eclipse XDB-C18（250 mm×4.6 mm，5µm）色谱柱，流动相为0.05mol/L磷酸二氢钾溶液-乙腈（80∶20，v/v），流速为1.0mL/min，进样量为10μL，柱温为30℃，用二极管阵列检测器在190~400nm扫描，记录212nm波长处的色谱图。
左旋咪唑在1~500μg/mL浓度范围内线性良好，相关系数为0.999 99。
在2.5、5.0和10.0mg/g三个添加浓度下，加样回收率为99.1%~100.5%，RSD≤1.5%，检测限为2.5mg/g。
本方法简便快捷，准确度和灵敏度高，可用于左旋咪唑注射液的质量控制。
关键词：左旋咪唑；高效液相色谱；含量测定；二极管阵列检测器盐酸左旋咪唑是广谱驱虫药和生物反应调节药[1]，对牛、羊、猪、犬、猫和禽的胃肠道线虫、肺线虫及猪肾虫病具有良好驱虫活性[2-3]。
盐酸左旋咪唑注射液质量标准收载于《中国兽药典》2015年版一部[4]，标准采用三氯甲烷萃取、高氯酸滴定法（非水测定法）进行含量测定，方法操作繁琐、费时，高氯酸滴定液能与多种药物反应，专属性不高。
检测中所用试剂三氯甲烷、醋酐等对人体有危害性，对环境污染也较严重。
目前文献报道测定盐酸左旋咪唑含量的方法除高氯酸滴定法外，主要以高效液相色谱法为主，有测定饲料[5]、绵羊血浆[6]、猪鸡组织[7]、盐酸左旋咪唑粉[8]、复方盐酸左旋咪唑注射液[9]和万乳康[10]等各类样品中盐酸左旋咪唑的含量，以及盐酸左旋咪唑原料中的有关物质[11]，但目前尚未见高效液相色谱法（HPLC）测定盐酸左旋咪唑注射液中左旋咪唑含量的报道。
盐酸左旋咪唑片的含量测定方法学研究
盐酸左旋咪唑片的含量测定方法学研究摘要目的：建立HPLC法检查盐酸左旋咪唑片的含量测定方法。
方法：采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.75%磷酸二氢铵溶液（用二异丙胺调节pH 值至7.0）-乙腈（70:30）为流动相；检测波长为 215nm；进样体积10μl。
结果：方法的专属性、准确度、精密度及耐用性良好；在盐酸左旋咪唑的进样量为0.8μg～3.6μg范围内，盐酸左旋咪唑进样量与色谱峰面积线性关系良好，平均回收率为99.68%，RSD为0.74%（n=9）。
结论：本方法简便、快速、灵敏，可有效检测盐酸左旋咪唑的含量。
关键词：盐酸左旋咪唑；含量；HPLC盐酸左旋咪唑是常用的抗蠕虫药，临床应用广泛，常见的制剂有普通片、肠溶片、颗粒剂、栓剂、糖浆剂等[1]。
盐酸左旋咪唑除作为驱虫药之外，盐酸左旋咪唑还具有免疫调节作用，是一种免疫增强剂，能提高巨噬细胞的吞噬能力，增强机体的体液免疫功能和细胞免疫功能[2]。
中国药典2020年版二部已经收载了盐酸左旋咪唑和盐酸左旋咪唑片的质量标准，但是其含量测定的方法均为高氯酸滴定法，国家药典委员会发布了盐酸左旋咪唑片国家标准征求意见稿[3]，新标准中采用高效液相色谱法检测盐酸左旋咪唑的含量，本研究将对该方法进行详细的方法学研究，以判断该方法是否适合于盐酸左旋咪唑片的质量控制。
1 仪器与试药高效液相色谱仪（岛津2010）；色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱（4.6mm×150mm×5μm）；盐酸左旋咪唑（批号：210101、210102、210103，实验室自制）；盐酸左旋咪唑对照品(批号：100167-201203)，盐酸左旋咪唑杂质对照品(批号：100020-201305)，均购自中国食品药品检定研究院。
甲醇、乙腈为色谱级；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果本品含量检查方法参照国家药典委员发布的盐酸左旋咪唑片标准征求意见稿中色谱条件进行。
2.1 色谱条件色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.75%磷酸二氢铵溶液（用二异丙胺调节pH值至7.0）-乙腈（70:30）为流动相；检测波长为 215nm；进样体积10μl；流速：1.0ml/min。
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万乳康中盐酸左旋咪唑含量测定方法的研究
万乳康中盐酸左旋咪唑含量测定方法的研究
建立了万乳康中盐酸左旋咪唑含量测定的高效液相色谱法.样品经稀乙醇溶液提取,进高效液相色谱仪进行检测.色谱条件: Venusil XBP C18(2)(5 μm,4.6 mm×150 mm)色谱柱,流动相为乙腈-0.1 mol/L磷酸溶液(用二乙胺调pH 6.8)(28:72),检测波长214 nm,进样量为10 μL.盐酸左旋咪唑的浓度在5～200 μg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为y=44.806x+73.099,相关系数r=0.999 7.该方法简便,灵敏度高,可以更好地控制万乳康的质量.
作者：刘素梅李华岑韩立徐银凤臧合英张要京王军红 LIU Su-mei LI Hua-cen HAN Li XU Yin-feng ZANG He-ying ZHANG Yao-jing WANG Jun-hong 作者单位：河南省兽药监察所,郑州,450008 刊名：中国兽药杂志英文刊名：CHINESE JOURNAL OF VETERINARY DRUG 年，卷(期)：2010 44(2) 分类号：S859.79 关键词：万乳康盐酸左旋咪唑高效液相色谱法。