正交试验培养基配方
B因素：RB=Xmax-Xmin (B列的X值）
C因素：RC=Xmax-Xmin (C列的X值）
D因素：RD=Xmax-Xmin (D列的X值）
3
1.5
1.0
KNO3
注：每瓶装液量为100mL。
菌种制备：斜面培养1周以上，30mL无菌水制成菌悬液使用。
正交表及试验方案
试验号
因素
发酵液酶活力单位
（U/mL）
A
B
C
D
淀粉
（g/瓶）
麸皮
（g/瓶）
无机氮源（0.4g/瓶）
1
0.5
0
(NH4)2SO4
t1
2
0.5
0.5
NH4Cl
t2
3
0.5
1.0
KNO3
D因素：T1=t1+t5+t9；T2=t2+t6+t7；T3=t3+t4+t8
A因素：X1=T1/3；X2=T2/3；X3=T3/3（A列的T值）
B因素：X1=T1/3；X2=T2/3；X3=T3/3（B列的T值）
C因素：X1=T1/3；X2=T2/3；X3=T3/3（C列的T值）
D因素：X1=T1/3；X2=T2/3；X3=T3/3（D列的T值）
t3
4
1.0
0
NH4Cl
t4
5
1.0
0.5
KNO3
t5
6
1.0
1.0
(NH4)2SO4
t6
7
1.5
0
KNO3
t7
8
1.5
0.5
(NH4)2SO4
t8
9
1.5
1.0
NH4Cl
t9
对照
1
0
(NH4)2SO4（0.4g）+ NH4Cl（0.15g）
T1
T2
T3
X1
X2
X3
R
固定因素组分的加入：利用1000mL三角瓶，先加入500mL自来水，加热，称取8gNa2HPO4.12H2O溶解配成溶液，各量取100mL分别加入到9个试验号三角瓶中，轻摇混匀。
说明：基础培养基参考初筛和复筛摇瓶培养基，每瓶分别称取豆粕粉3.0g、CaCO30.1g。
L9（34）极差分析计算：
A因素：T1=t1+t2+t3；T2=t4+t5+t6；T3=t7+t8+t9
B因素：T1=t1+t4+t7；T2=t2+t5+t8；T3=t3+t6+t9
C因素：T1=t1+t6+t8；T2=t2+t4+t9；T3=t3+t5+t7
L9（34）正交表
试验号
列号（代表因素）
1（A）
2（B）
3（C）
4（D）
1
1
1
1
1
2
1
2
2
2
3
1
3
3
3
4
2
1
2
3
5
2
2
3
1
6
2
3
1
2
7
3
1
3
2
8
3
2
1
3
9
3
3
2
1
正交设计的因素水平表
水平
因素
A
B
C
Dห้องสมุดไป่ตู้
淀粉（g/瓶）
麸皮（g/瓶）
无机氮源（0.4g/瓶）
1
0.5
0.0
(NH4)2SO4
2
1.0
0.5
NH4Cl
实验五 青霉素发酵培养基正交优化试验_百替生物
实验五青霉素发酵培养基正交优化试验[实验目的]1、掌握培养基的原理2、了解培养基优化的原理和试验设计方法3、通过实验确定青霉素发酵的较适培养基[实验原理]1、掌握培养基的原理a碳源、氮源许多碳源和氮源都是复杂的有机物大分子,如淀粉、黄豆饼粉等,用这类原料作为培养基时,微生物必须要具备分泌胞外淀粉酶和蛋白酶的能力,但不是所有的微生物都具备这种能力的.相应的酶水解/葡萄糖:成本高b代谢的阻遏和诱导碳源、氮源:根据微生物的特性和培养的目的,注意快速利用的碳(氮)源和慢速利用的碳(氮)源的相互配合葡萄糖:具体利用葡萄糖产生的分解代谢产物会阻遏或抑制某些产物合成所需的酶系的形成或酶的活性.氮源的诱导或阻遏:蛋白酶类,受培养基中蛋白质或多肽的诱导,而受铵盐、硝酸盐的阻遏;应以有机氮源为主c合适的C、N比碳氮:过多则容易形成较低的pH;不足则容易引起菌体的衰老和自溶，显著影响微生物生长繁殖和产物合成。
氮源:过多,菌体生长过于旺盛,pH偏高,不利于代谢产物的积累;不足则菌体繁殖量少,从而影响产量。
碳氮比:菌丝体生长阶段氮源需求高;孢子生长阶段氮源需求低.100:(0.2~2.0)d pH的要求微生物在利用营养物质后,由于酸碱物质的积累或代谢酸碱物质的形成会造成培养体系的pH的波动.因而在配制培养基选取营养成分时,除了要考虑营养的需求外,还要考虑其代谢后对培养体系pH缓冲体系的影响2、培养基优化的原理和试验设计方法a培养基优化的基本原理一个批发酵(流加发酵):可以分为生长期和产物形成期两个阶段。
第一阶段:控制菌体的生长,目的是使长好的菌体能够处于最佳的产物合成状态,即如何控制有利于微生物催化产物合成所需酶系的形成。
第二阶段:控制产物的合成;找出影响反应速度变化的主要因素并加以控制使产物的形成速度处于最佳或底物的消耗最经济。
b实验设计方法单因子实验确定培养基的成分：多因子实验确定各成分对培养基的影响大小及适宜浓度多因子:通过较少的实验次数获得所需的结果,正交实验设计、相应面分析等为了追求可比性，正交表中的每个水平都要有适当的重复。
正交设计法筛选紫芝菌丝液体培养基的研究
天 津 农 学 院 学 报 Ｊｕ ｌ ｆ ｉｎｉＡｇｉ ｌ ｒｌ ｉｅｓｙ ｏｍａ ｏ ａｊ ｒ ｕｔ ａ Ｕｎ ｒ ｔ Ｔ ｎ ｃ ｕ ｖ ｉ
Ｖ０ ．７，Ｎ Ｏ２ １１ ．
Ｊｎ ，００ ｕ ｅ２ １
文章编号 ：１ ０— ３４ （０ ０ ２ ０ １—４ ０ ８ ５ ９ ２ １ ）０－ ０ ４ ０
Ａｓ ｅ ｕ ｔ ｈ ｅｍｙ ｅｉ ｌ ｅｌ ｔ ｉ ｅ ｓ ａ ｉ ｇ ｆ ｓ ａ ｈ ｄ６ ０ ０ ｎ ｄ Ｇａ ｏ ｅ ｍａＳ ｎ ｎ ｉ ｈ ｐ ａｃ ｕ ｄ ｇ ｏ ｗｅ ｌ ｎｆ ｕ ａ ｓ ｒ ｓ ｌ，ｔ ｃ ｌ ｌ ｓ ｎ ｔ ｈ ｋ ｎ ａ ｋ ｒ ｃ ｅ ０ ，ａ ｎ ｄ ｒ ｉ ｅ ｓｓ ｙ ｈ ｏ ｌ ｒ ｗ ｌ ｉ ｒ ｙ ａ ａｐ ｅ ｈ ｌ ｅ ｏ ｄ
１ ％、蔗糖 ２０ ． ０ ．％、蛋 白胨 Ｏ２ ．％、Ｋ Ｐ ４ ．％、Ｍｇ Ｏ ・ Ｈ２ ． ％。以筛选 出的液体种子初 Ｈ２Ｏ １ ０ Ｓ ４ ７ Ｏ０ ５ ０ 始培养基进行 ３因素 ３水平正交设计，获得了最优 的液体种子培养基配方为：玉米面 １ ％、蔗糖 ． ５
２０ ．％、蛋 白胨 ０１ ．％、Ｋ Ｐ ４ ．％、Ｍｇ Ｏ４ ７ Ｏ００ ％、ＶＢ 微量 。最终可达到每瓶 中的菌球 Ｈ２Ｏ Ｏ１ Ｓ ・ Ｈ２ ． ５ 数为 ６ ０ ，且菌丝在 ４ｄ的时间就可基本上生长 良好。 ０ ０ 关键 词：紫芝 ：菌球 ；液体培养基；正交设计 中图分类号 ：Ｑ １ ８５ 文献标识码 ：Ａ
．
ｏ ｓｒｅ ｅ ｂ ｅ ｖ ｄ ｔ ｍｙ ｅ ｉｌ ｅ ｌｔ ｎ ｔ ｅ ｅ ｄ ｃ ｌ ｒ ｄ ｕ ｈ ｃ ｌ ｐ ｌ ｓ ｉ ｓ ｅ ｕ ｔ ｅ ｍｅ ｉ ｍ ａ ｄ ｈ ｅ ｇ ｏ ｈ ｆ Ｇａ ｏ ｅ ｍａ ｉ ｅ ｓｓ ｈ ｐ ａ ｂ ｔ ｅ ｏ ｉ ａ ｅ ｈ ｕ ｎ ｔ ｒ ｗｔ ｏ ｎ ｄ ｒ Ｓ ｎ ｎ ｉ ｙ ｈ ｙ ｈ ｓ ｌ ｄ ｆ ｒ ｎ ａｉ ｎ， ｔ ｅ ｈ ａ ｉ ｉ ｕ ｄ ｓ ｅ ｄ ｕ ｏ ｏ ｎ ｐ ｗｄ ｒ １０ ， ｓ ｃｏ ｅ ２ ０ ， ｐ ｐ ｏ ｅ ０ ２ ， ＫＨ２ Ｏ４ ０ １ ， ｅ ｍｅ ｔ ｔ ｏ ｈ ｎ ｔ ｅ ｂ ｓｃ ｌ ｉ ｅ ｄ ｍｅ ｉ ｍ ｆ ｃ ｒ ｏ ｅ ． ％ ｑ ｕ ｒ ｓ ．％ ｅ ｔｎ ．％ Ｐ ．％ Ｍ ｇ Ｏ４ Ｈ２ ０ ０ ％ ａ ｅ ｃ ｎ ｒ ｄ Ａｌｏ ｉ ｉ ｏ ｔ ｚ ｄ ｔ ｅ ｓ ｅ ｕ ｔ ｒ ｄ ｕ ｉ ｈ ｅ ａ ｔｒｔ ｒ ｅ ｌ ｖ ｌｏ ｔ ｏ ｏ ａ Ｓ ・ ０ ． ５ ７ ｒ ｏ ｆ ｍｅ ． ｓ ， ｔ ｓ ｐ ｉ ｅ ｈ ｅ ｄ ｃ ｌ ｅ ｍｅ ｉ ｍ ｎ ａ ｔ ｒ ｅ ｆ ｃｏ － ｅ ｅ ｅ ｒ ｇ ，ｓ ｃ ｏ ｅ ２ ０ ，ｐ ｐ ｏ ｅ０ １ ，ＫＨ２ Ｏ４Ｏ １ ，Ｍ ｇ Ｏ４ Ｈ２ Ｏ０ ％ ，ａ ｄ ｍｉ ｉ ｍＶ ． ｘ ｅ ｍｅ ｔ ｈ ｔ ｓ ｏ ｎ ｐ ｗｅ ． ％ ｉ ｉ ｕ ｒ ｓ ．％ ｅ ｔ ｎ ．％ Ｐ ．％ Ｓ ・ ０ ．５ ７ ｎ ｎ ｍｕ Ｂ
利用正交旋转组合法优化平菇培养基研究
关键词 ： 菌丝长速 ； 菌丝干重； 正交旋转组合设计
中图分类号 ： ４ ．十 文献标识码 ： 文章编号 ： ０ －００ （００Ｏ —０６ 一Ｏ Ｓ６６１ ４ Ａ １ １ ０９２ １ ）３ １８ ３ ０ 为解决 平菇产量下降 、 品质欠佳、 转代次数不明 、 适 镁、 磷酸二氢钾原料按表 １ 量加到基础培养基 内。按 用
、
一 ２ ４ １ ．７ ３ ３
，
一
一 １３ １ ８ ．６８
一
１００ｍ 。 ０ Ｌ 培养基配方 ： 将葡萄糖 、 白胨 、 蛋 酵母粉 、 酸 硫
经方差检验 ： 型 （ ） １ １２８ Ｐ值＞ ０ １ Ｐ一 模 １Ｆ 一 ．７， ．（
作者简 介 ： 弓建 国（９ ４） 男 ， １ ５ ～ ， 副教 授 ， 主 要从 事 生物 及 农 艺 方 现 面的教 学 工作 。Ｅ ｍ ｉ ｇ ｎｊ ｎ ｕ ８ ８ ３ ２ １３ ＣＲ 。 － ａ ：ｏ ｇ ａ ｇ ｏ ８ ６ ８ ＠ ６ ．ＯＤ ｌ ｉ －
采用四因素五水平二次 回归正交旋 转组合设 计方 法ｌ ］设 葡 萄 糖 、 白胨 、 母 粉 、 机 盐 （ Ｓ ４ ５， 蛋 酵 无 Ｍｇ Ｏ ，
ＫＨ Ｐ ４４ Ｏ ） 个试验因子 ， ５ 各 个水平 ，６ ３ 个处理组合 ， 各
因子 设计 水 平 见表 １ 。
表１
因 素
养平菇母 种最佳用量比例 。
二次回归正交旋 转组合 表设 计 出 ３ 个 配方 ， ６ 每配方 重 复８ ， 次 每次重复 １ ， ０ｍＬ 装好试管后 ， 高压灭菌 ３ ｎ ０ｍｉ 之后 ， 将其摆成大小相同的斜面 。 ］ １４ 测定 内容 ． 菌丝生长速度 ： 将等量 的菌种接人 已编号的培养基
正交试验法优选中药巴布剂基质配方
糖浆作粘合剂,压成片子后,崩解和溶出较为理想,但因药片硬度较差,且片身较松、脆,使其脆碎度不理想,包衣后外观不合格,因此也不够理想。
而HPMC-K4具有较强的粘性,对质地疏松或脆硬的原料可增加其颗粒粘合性,改善药片的可压性,有效地促进药物的溶出和崩解。
因此,以HPMC-K4作为替硝唑片的粘合剂,可以克服其崩边、缺角、片松及崩解差的现象,压出的片硬度好,素片及薄膜衣片的外观光滑、完整,崩解度符合规定,溶出度较理想。
因此,通过此试验,我们选择210%HPMC-K4、50%乙醇作为替硝唑片的粘合剂。
参考文献[1]丁国华1替硝唑制剂研究及临床应用概况1药学实践杂志,1998,16(6):333～3341[2]侯金成1替硝唑的剂型研究与临床综述1中国药业,1999,8(9)601[3]陈连剑等1替硝唑分散片的制备与质量控制1中国医院药学杂志,2004,24(6):328～3301[4]林东武,俞宁1药用辅料羟丙甲纤维素的应用1海峡药学,2003,15(1):77～781[5]王庆玲,姜宏,孙迎冬,等1替硝唑制剂的研究进展1中国药业,2001,10(7)641正交试验法优选中药巴布剂基质配方吕妍,齐红(济南市药品检验所 济南 250001)摘要:目的 选择以聚乙烯醇、明胶、聚丙烯酸钠、丙二醇制备巴布剂的最佳基质配比。
方法 采用L9(34)正交试验法,以成型巴布剂基质的剥离强度为衡量指标,评定不同基质配比下巴布剂的质量。
结果 巴布剂的最佳基质配比为明胶-聚丙烯酸钠-丙二醇(5∶5∶6)。
结论 采用此最佳基质配比可制备质量较佳的巴布剂基质。
关键词:正交试验 中药巴布剂 基质中图分类号:R943 文献标识码:A 文章编号:1672-7738(2006)02-0114-02Orthogonal testing method optimal preparation m atrix formula of C ataplasmof T raditional Chinese MedicineLüYan,Q I Hong(Ji′nan Institute for Drug Control,Ji′nan,250001)ABSTRACT:OB JECTIVE To select the optimum proportion of matrix for the preparation process of Cataplasm of Tradi2 tional Chinese Medicine by PVA,gelatia,sodium polyacrylate,and propylene glycol1METH ODS The L9(34)orthogonal test method was used and the stripping intensity was used as scale guideline to assess the cataplasm quality of different proportion of matrix1RESU LTS The optimum proportion of matrix of Cataplasm was gelatia-odium polyacrylate-Propylene glycol(5∶5∶6)1CONC L USION With this optimum proportion of matrix better quality Cataplasm can be prepared1 KE Y WOR DS:Orthogonal test;Cataplasm of Traditional Chinese Medicine;matrix 中药巴布剂是以水溶性高分子化合物或亲水性物质为基质,与中药提取物或粉末制成的外用贴膏剂。
产α-淀粉酶菌株产酶培养基组成优化正交试验PPT课件
• 引言 • 材料与方法 • 结果与分析 • 讨论与结论 • 参考文献
01
引言
背景介绍
01
介绍产α-淀粉酶菌株在食品、饲料、 生物能源等领域的应用价值。
02
阐述当前产α-淀粉酶菌株产酶水平 较低的问题，强调优化培养基组成 对提高产酶量的重要性。
够更好地促进菌株生长和酶产量。
优化方案确定确定最佳营Fra bibliotek成分组合完善培养基配方
根据正交试验结果，确定最佳的营养 成分组合，以提高菌株的生长和α-淀 粉酶的产量。
根据优化方案的结果，进一步完善培 养基配方，以提高α-淀粉酶的生产效 率和经济效益。
验证优化方案
通过实验验证优化方案的可行性，确 保其在实际生产中具有可重复性和可 扩展性。
试验器材
摇床、分光光度计、pH计、离心机 等。
试验方法
菌种活化
将保存的菌种进行活化，恢复其活性。
种子培养
将活化后的菌种接种至种子培养基中，在 适宜的温度和pH条件下进行培养，获得对 数生长期的种子。
产酶培养
数据处理
将种子按一定比例接种至不同配方的产酶 培养基中，在相同的条件下进行培养，测 定不同培养基的酶活性和菌体生长情况。
参考文献2
正交试验设计在微生物培养基优化中的应用
参考文献3
产酶菌株培养基优化对酶活性的影响研究
THANKS
感谢观看
酶活性测定
在优化过程中，需要建立可靠的酶活性测 定方法，以便准确测定菌株产酶的能力和 水平。
结论
最佳培养基组成
通过正交试验，可以确定 最佳的培养基组成，从而 提高菌株的产酶能力。
最佳培养条件
甘蔗健康种苗繁殖培养基正交试验分析
甘蔗 糖 业
２ １ 年第 ６期 ，２ １ ０ １ ０ １年 ｌ ２月
Ｓ ｇ ｒ ａ ｅａ ｄ Ｃａ ｅ ｕ ａ ． ， ｃ ２ １ ｕ ａ ｃ ｎ ｎ ｎ ｓ ｇ ｒ Ｎｏ ６ Ｄｅ ． ０ １
甘蔗健康 种苗 繁殖培 养基正 交试验 分析
樊而娜 ，何 慧怡，陈月桂 ，罗青 文，劳方业 ，谭 嘉娜 ，邓海华，杨俊 贤，李奇伟 ，齐永 丈
ｂ ｓ ｄｕ ｆ ｒｔｅｔｒｅｖ ｒ ｔ ｓｗｅｅｄｆｅｅ ｔ Ａｍｏ ｇ ｔｅｆｕ ｌｎ ｒ ｗｔ ｅ ｕａｏ ｓ ｔ ｅｍｏ ｔｉ ｏｔｎ ｅｔｍｅ ｉｍ ｈ ｈ ｅ ａ ｉ ｉ ｒ ｉ ｒｎ ． ｏ ｅｅ ｎ ｏ ｒ ａ ｔｇ ｏ ｈ ｒｇ ｌｔｒ，ｈ ｓ ｈ ｐ ｍｐ ｒ ｔ ａ
．
ＲＯＣ２ ，ｔ ｅ ｉ ｏ ｔｎ ａ ｔ ｒ ｗａ ＤＺ，ｆ ｌ ｗｅ ｙ ＮＡＡ，Ｐ ３ ｎ － ２ ｈ ｍｐ ｒ ｔ ｆ ｃｏ ｓ Ｔ ａ ｏｌ ｏ ｄ ｂ Ｐ ３ ａ ｄ ６ ＢＡ．Ｔｈ ｔ ｄ ｎ ｉａ ｅ ｈ ｔ ｔ ｅ ３ ｅ ｓｕ ｙ ｉ ｄ ｃ ｔ ｄ ｔ ａ ｈ ｃ ｍｂ ｎ ｔ ｎ ｏ ｅ ｃ ｎ ｅ ｔ ｔ ｎ ｏ ｈ ｒ ｗｔ ｅ ｕ ａ ｏ ｓ ｉ ｔ ｅ ｋ ｙ ｆ ｃｏ ｒ ｔ ｅ ｓ ｇ ｒ ａ ｅ ｈ ａｔ ｙ ｐ ａ ｔ ｏ ｉ ａ ｉ ｆ ｔ ｏ ｃ ｎ ｒ ｉ ｆ ｔ ｅ ｇ ｏ ｈ ｒ ｇ ｌｔ ｒ ｓ ｈ ｅ ａ ｔ ｒ ｆ ｈ ｕ ａ ｃ ｎ ｅ ｌ ｌｎ ｏ ｈ ａ ｏ ｏ ｈ ｐ ｏ ａ ａｉ ｇ ｅ ｃｅ ｃ ，ａ ｄ ｔ ｅ ｅ ｏ ｅ ｓ ｅ ｉ ｌ ｍｅ ｉ ｍ ｈ ｕ ｄ ｂ ｅ ｓ ｒ ｅ ｅ ｒ ａ ｖ ｒｅ ｏ ｅ ｈ ｎ ｅ ｔ ｒ ｐ ｇ ｔ ｆ ｉ ｎ ｙ ｎ ｈ ｒ ｆ ｒ ， ｐ ｃａ ｄ ｕ ｓ ｏ ｌ ｅ ｎ ｃ ｅ ｎ ｄ ｆ ａ ｉｔ ｔ ｎ ａ ｃ ｉ ｎ ｉ ｏ ｙ ｓ
正交试验设计经典案例
正交试验设计经典案例
一、L9(3^4)正交试验设计
这个实验设计是一个L9(3^4)正交试验设计，用于研究铜锌合金中锌的含量、冶炼时间、冷却速率和成型压力对铜锌合金硬度的影响。
在这个设计中，有四个因素（锌的含量、冶炼时间、冷却速率和成型压力）和三个水平（低、中、高）。
该试验的九个试验条件如下表所示。
2、L16(4^5)正交试验设计
这个实验设计是一个L16(4^5)正交试验设计，用于研究发酵生产中，发酵液pH 值、生物量、发酵温度、曲菌培养基和曲菌翻转次数对干酪根的质量影响。
在这个设计中，有五个因素（发酵液pH值、生物量、发酵温度、曲菌培养基和曲菌翻转次数）和四个水平（低、中低、中高、高）。
该试验的十六个试验条件如下表所示。
3、L16(4^5)正交试验设计
这个实验设计是一个L16(4^5)正交试验设计，用于研究太阳能集热器的建造，包括集热面积、集热器长度、集热器宽度、太阳能采集器的形状和位置对太阳能集热器效率的影响。
在这个设计中，有五个因素（集热面积、集热器长度、集热器宽度、太阳能采集器的形状和位置）和四个水平（低、中低、中高、高）。
该试验的十六个试验条件如下表所示。
以上这些都是经典的正交试验设计案例，这些设计都遵循着统计学中的一些原则和方法，有效地结合了多个因素的影响，将因素控制在一定范围内，从而帮助我们更好地理解问题并提出相应的解决方案。
正交试验设计
正交试验设计1 正交试验设计的概念及原理 1.1 基本概念利用正交表来安排与分析多因素试验的一种设计方法。
特点：在试验因素的全部水平组合中，仅挑选部分有代表性的水平组合进行试验。
通过部分实施的试验结果，了解全面试验情况，从中找出较优的处理组合。
考察增稠剂用量、pH 值和杀菌温度对豆奶稳定性的影响。
每个因素设置3个水平进行试验 。
全面试验：可以分析各因素的效应，交互作用，也可选出最优水平组合。
全面试验包含的水平组合数较多，工作量大，在有些情况下无法完成 。
若试验的主要目的是寻求最优水平组合，则可利用正交表来设计安排试验。
● 正交试验是用部分试验来代替全面试验的，它不可能像全面试验那样对各因素效应、交互作用一一分析； ● 当交互作用存在时，有可能出现交互作用的混杂。
● 虽然正交试验设计有上述不足，但它能通过部分试验找到最优水平组合，因而很受实际工作者青睐。
1.2 基本原理在试验安排中，每个因素在研究的范围内选几个水平， 可以理解为在选优区内打上网格，如果网上的每个点都做试验，就是全面试验。
3个因素的选优区可以用一个立方体表示。
3个因素各取3个水平，把立方体划分成27个格点。
若27个网格点都试验，就是全面试验。
A2 A3A1B1C1B3 B2A 因素：增稠剂用量，A1、A2、A3B 因素：pH ，B1、B2、B3C 因素：杀菌温度，C1、C2、C33因素3水平33＝271.2 基本原理正交设计就是从选优区全面试验点（水平组合）中挑选出有代表性的部分试验点（水平组合）来进行试验。
A1B1C1 A1B2C2A1B3C3A2B1C2A2B2C3A3B1C3A3B2C1A3B3C2A2B3C1A1B1C3A1B3C1A2B1C1 A2B2C1A2B3C3A3B1C1A3B2C39个组合保证了A 的每个水平与B 、C 的各个水平在试验中各搭配一次。
任一因素的每个水平都与另外两个因素的每个水平相组合且组合１次。
正交试验优化添加天麻的黑木耳多糖发酵培养基
天麻 （ ｈ ｏ ａ ｒ ｉ ） Ｒ ｉ ｍａ ｓ ｏ ａ 为兰科为多年生寄生菌植物 ， ｚ Ｇ ｔｄ ｅ 以蜜环菌的菌丝或菌丝分泌物为营养来源。天 麻主产于四川 、 云南 、 贵州 ， 其干燥块茎富含天麻素 ， 以入药。具有平肝、 可 息风、 止痉作用 ， 主治头痛眩晕、
肢体麻木 、 Ｊ 惊风 、 ， Ｌ ＇ ｂ 癫痫抽搐等症 。 ３ 文献 研究表 明 ， 向培 养基 中添加适 当的 中 药 ， 可促 进 真菌 的生 长 或者 提 高 活 性产 物 的产 量 Ｌ 。本 实 验 ４ Ｊ
０ 前
言
黑木耳 （ ｒ ｕａｉ ｒ ｕａ 是 一种 药食 两用 真菌 。它在分 类学 上 隶属 层 菌纲 ， 耳 目， Ａｕｉ ｌｒ Ａｕｉ ｌ） ｃ ａ ｃ 木 木耳 科 ， 木耳
属。黑木耳性平 ， 味甘 ， 富含多糖 ， 可以入药… 。研究发现 ， １ 黑木耳 的生物学活性主要来 自其产生 的多糖成 分， 具有降血脂 、 降血糖 、 抗肿瘤、 抗凝血、 抗辐射等多种生物学活性［ 引。
１ ２ 培 养方 法 ．
斜面培养 ： 于母种试管中切 出黄豆大小菌丝块 ， 接于斜面中部 。２ ５℃培养 ７ｄ ．
液体 种子 培养 ： 培养好 的斜 面菌种切 成黄 豆 大小 ， 接到 液体 培养基 中 ， 支斜 面接一 瓶 。５０ｍＬ三 将 转 一 ０
角瓶装液量 １０ｍ ，５℃ ， ５ ｍ ｎ摇床培养 ４ｄ ５ Ｌ ２ １０ｒ ｉ， ／ ． 摇瓶发酵培养 ：５ ２０ ｍＬ三角瓶装液量 １０ｍＬ 接种量为 １ ％， ０ ， ０ ２ ５℃ ，５ ｍｉ， １０ｒ ｎ摇床培养 ５ｄ ／ ．
第 ６期
张 大为 ， ： 交试验优 化 添加 天麻 的 黑木耳 多糖发 酵培 养基 等 正
中国被毛孢菌摇瓶发酵菌丝体培养基的正交优化实验
中国被毛孢菌摇瓶发酵菌丝体培养基的正交优化实验优化中华被毛孢的液体培养条件。
其方法是通过18srDNA及系统进化树对中华被毛孢进行鉴定分析，然后以中华被毛孢菌丝体生物量为指标,采用单因素试验和正交试瞪研究菌丝体液深层发酵的培养条件。
然而结果是单因素试验表明,最佳的氮源为蛋白陈，其次为牛肉膏;最佳碳源为葡萄糖,其次为蔗糖和麦芽糖。
正交设计试验表明，菌株的液体发酵的最佳配方:浓度1%葡萄糖+浓度0.5%蛋白胨+浓度0.1%酵母粉+浓度0.01%维生素B, +浓度0.05% KH,PO, +浓度0.05% MgSO;在该浓度培养下，菌丝体生物量可达到20.8g/L。
其次结论该方法优化了中华被毛孢的液体培养条件,为中华被毛孢的的开发利用提供依据。
珍贵药材冬虫夏草( Cordyceps sinensis) 的药用价值已引物。
以提取的基因组起广泛关注,但冬虫夏草的人工培育难度极大,野生资源稀DNA为模板,以上述设计引物为扩增引物，克隆真菌的缺。
为利用冬虫夏草的药用价值,对冬虫夏草真菌进行发酵18srDNA序列，测序,将测序的结果在NCBI上进行BLAST利用，是当前冬虫夏草开发的重要途径之一。
比对,选取部分同源序列和中华被毛孢的18S rDNA序列利智等的研究表明,中国被毛孢( Hisuella sinensis)是冬虫夏草用clustaLx软件包进行序列同源进化比对,将得到的结果运的真菌无性型" 0。
笔者先通过18srDNA及系统进化树对用MEGA4. 0软件采用邻位相连( Neighbor - joining)算法构所引进的冬虫夏草无性型进行分子鉴定,再研究菌丝体的液建系统进化树8]。
体培养工艺，以期为冬虫夏草的开发利用奠定基础。
接种方法与接种条件。
将不同培养基灭菌(121 C,1材料与方法30 min)冷却后,取4 ~5瓶生长良好的液体种子,用纱布过滤发酵液,得到菌丝体,将菌丝体转人玻璃匀浆器中研磨。