食品级乳酸菌表达系统研究进展
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4
噬菌体 !A2 爆发式诱导的表达系统
基于乳酸乳球菌噬菌体 !A2 启动子，建立了一个精巧的表
达系统 ;B<。把 ("# C 作为报告基因放在 !A2 启动子后面， 构建成质 产 生 大 量 的 "= 粒后转入乳酸乳球菌中， 被 !A2 噬 菌 体 感 染 后 ， 半乳糖苷酶 ;B<。 质粒在未被噬菌体 !A2 感染前在宿主菌内是低拷 贝的，而一旦被感染后， 2@4 D 内基因的表 达 量 可 以 增 加 2 999 倍以上 ;B<。虽然这种诱导表达趋于完美， 但因为存在特定的寄主 噬菌体交互作用， 很难在工业上大规模生产。
导， 而被葡萄糖、 核糖、 阿拉伯糖抑制 ;23<。把无启动子的 #"$=3> 基 转化到戊糖乳杆菌中表达， 发现 因连接在 ./(? 基因的启动子下， 在分别含木糖和葡萄糖培养基中生长时， *?# 的活 性 差 别 很 大 ， 前者表达的 *?# 活性比后者的高出 >9@39 倍 ;23<。由于木 糖 较 昂 贵， 因而此系统没有被大量地用于工业化生产。
R2B2=0G4 JCB; 1>M1=B2A @= 977>$<81>2 <2=2 2OI82AA@7= A4A02JA ;1M2 622= J1>2 978
S282 0;2 82B2=0 1>M1=B2A @= 5.? 2OI82AA@7= A4A02JA @=BGC>@=< 0;2 ;7A0A 5.? 1=> A2G2B0@M2 J18T28A 78 J18T28
> N+ 值诱导的表达系统
乳酸菌的最主要特 征 之 一 是 产 生 乳 酸 ， N+ 值 诱 导 的 表 达 系 统是根据 !?( 的产酸特点发展而来的。 !?( 的 N+ 值 依 赖 性 启 动子常会对其他的环境因子产生应答 ， 例 如 在 谷 氨 酸 依 赖 性 酸 胁迫阻抗下， 4"5 启动子可以使编码氨基丁酰谷氨酸逆向转运体 和谷氨酸脱羧酶的 4"5*( 操纵子进行表达。在此基础上 研 究 出 了 N+ 值 诱 导 表 达 系 统 ， 在 91B X/0 Y ! ’6*0 的 存 在 下 ， 这种诱导 的表达系统活性可以提高 2 999 倍以上 ;4><。
V!+W
!Q!
。 H107= 等 研 究 了 51B. 和 51BR 的 启 动 子 活
性。他们分别把报告基因 7&8.? 连接在 51B. 和 51BR 的启动子 后面， 并在乳酸乳球菌中表达， 在分别以 葡 萄 糖 和 乳 糖 为 碳 源 的 培养基中生长， % 种启动子的活性分 别 提 高 了 + 倍 和 ’ 倍 V!YW。 这 个表达系统被成功地用于破伤风毒素 （0201=CA 07O@= 981<J2=0 L ， 的表达， 其表达量达到细胞总蛋白的 %%^V!+W。 把 无 启 动 子 \\]L ） 的 (34$-Y （B;G781JI;2=@B7G 1B204G081=A9281A2 ， 氯霉素乙酰转移酶， 基 因 连 接 在 51B. 启 动 子 下 ， 并增加了该启动子两侧的核 L.\） 苷酸序列， 其表达受到 51BR 阻遏物调节。由于在含有乳 糖 培 养 基中生长， 生成中间代谢产物 Y$磷酸塔格糖抑制了 54
木糖诱导的表达系统 戊糖乳杆菌 （!"#$%&"#’(()* +,-$%*)* ） 的 ./( 基 因 受 到 木 糖 诱
B V?2:9 表达系统
将 转 座 子 #EP2:=!#.2 插 入 序 列 插 入 乳 酸 球 菌 染 色 体 上 无 启动子的 ("# C 的前面， 产生了大量能表达 "= 半乳糖苷酶的重 组 在不同的条件下都能 子， 其中表达量最高 的 是 V?2:9 启 动 子 ;4B<， 产生大量的 "=半乳糖苷酶。该启动子受低 N+ 值、 低温等因子的 正 调 节 ， 细 胞 生 长 在 N+B14 时 产 生 的 " = 半 乳 糖 苷 酶 要 比 在 在 2BW 时 产 生 的 酶 比 在 A9W 时 多 ， 在稳定期产生的 N+:19 时多， 酶比对数期多。 把来源 V?2:9 片段整合到多克隆载体中， 并导入 乳酸乳球菌， 该菌株在不同的条件下产生的酶 量 变 化 为 3@B9 倍 不等 ;4B<。
［7’0 8.-"(］ G1B0@B 1B@> 61B028@1U <2=2 2OI82AA@7=U 977>$<81>2 2OI82AA@7= A4A02J
乳酸菌 （G1B0@B 1B@> 61B028@1 ， 是一类能利用碳水化合物 5.? ） 包括乳杆菌属、 乳球菌属等至 产 生 乳 酸 的 革 兰 阳 性 菌 的 通 称 V!W， 少 %) 个 属 V%W。 作 为 重 要 的 益 生 菌 ， 乳酸菌已被广泛地应用于食 品、饮料和微生态制剂等行业中，被公认为 是 安 全 的 （<2=281GG4 食品级微生物 V!W。乳酸菌产生的一些酶、 XR./ ） 82<18>2> 1A A192 ， 抗微生物多肽能使食物美味可口且长久保持 V%W。乳酸杆菌通过重 建肠道菌群平衡，有利于人类及某些 动 物 宿 主 恢 复 并 提 高 健 康 状态。 与其他微生物如大肠杆菌、 酵母菌 等 相 比 ， 对乳酸菌的分子 有关乳酸菌的一些调控元 生物学研究起始较晚。但近 !" 年来， 件、 代谢机制已被研究清楚， 并建立了一 系 列 适 合 乳 酸 菌 的 表 达 包 括 糖 诱 导 的 表 达 系 统 V*W、 噬 菌 体 !)! 爆 发 式 诱 导 的 表 系 统 V)D*W， 达系统 V+DYW、 乳链球菌素调控表达系统 V’D-W、 温控表达 系 统 V#$!!W等 。 这 些表达系统的质粒或其他 Z[. 片段 （如转座子、 噬菌体 Z[. ） 不 以抗生素作为选择标记，并且可以使 外 源 蛋 白 的 表 达 提 高 数 十 倍到上千倍。已经形成了很多食品级的精密、 安全的选择标记并 这些选择标记主要包括 ) 类， 即糖类利用标 用 于 食 品 工 业 中 V!%W， 记、 营养缺陷标记和编码细菌素抗性或免疫性的标记。具有严格 控制的启动子对于外源基因在宿主菌中 的 有 效 表 达 是 必 需 的 V-W。 与大肠杆菌相比， 乳酸菌作为基因工程菌表达外源蛋白 V!)W不会产 生内毒素， 表达的产物直接与人类健康有 关 系 ， 所以建立食品级 的表达系统受到了研究者的重视。在此， 我们就乳酸菌表达系统 的研究进展做一简要介绍。
［收稿日期］ %""Y$!!$"% ［作者简介］张虎成 （!#’’$ ） ， 男， 博士研究生 ［通讯作者］陈薇， （H$J1@G ） B;2=N2@"%%Y_41;77QB7J
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乳链球菌素表达系统
最著名的表达系统之一是乳链球菌素表达系统 （EFGFE=H/EI
。 乳链球菌素 （EFGFE ， 乳链菌肽） 是一种具 ’&*" ） J7/00KL KMN7KGGF/E ， 有抗微生物活性的小分子多肽， 广泛用于 食 品 防 腐 ， 对人体安全 （激酶） 和 ’FG$ 双组分调节系统的控 无毒。 它的生物合成受 ’FGO 具有传感蛋白作用的 ’FGO 能够识 制 ;:<。细胞外有乳链球菌素时， 导致下游基 别乳链球菌素， 使 ’FG$ 磷 酸 化 去 激 活 -’* ? 启 动 子 ， 因的表达。这种小肽信息素依赖的调 节 系 统 在 革 兰 阳 性 菌 中 广 该系统表达的产物可以达到细胞总蛋白的 29Q@>9Q， 泛存在 ;2P<。 目的基因的表达与诱导物乳链菌素的浓度在 产量提高数千倍 ;49<。 一定范围内成正比例。丙氨酸消旋酶 成 功 地 在 这 种 表 达 系 统 中 真 核 生 物 蛋 白 质 也 能 用 该 系 统 实 现 过 量 表 达 ;44<， 用 获 得 表 达 ;42<， 基于该系统， 这种表达系统制成的活菌疫苗也已有报道 ;4A<。 %R7SFT 等建立了诱导性的乳酸杆菌表达系统 ;4U<， 这些表达系统适用于多 种乳酸菌， 如乳球菌 （!"#$%#%##)* ） 、 链球菌 （0$1,+$%#%##)* ） 、 芽孢 杆菌 （2"#’(()* ） 等。 该表达系统有很多优点： 可用作食品级表达系统， 易控制、 低成本， 很多宿主菌都可以应用该系统， 控制 严 紧 ， 细胞不裂解， 可用信号肽引导。
食品级表达系统研究进展
食品级表达系统研究进展食品级表达系统被定义为一套包括宿主和表达载体在内的安全的、完整的表达系统，这个表达系统所涉及到的材料和技术，包括菌株(必须来自食品级微生物GRAS)、DNA、转化和表达所使用的材料、选择标记和培养、表达条件等都必须是对环境、对人体无任何毒副作用的、可以被食品工业接受和认可的[1-3]。
自从这个定义被提出后，近年来关于食品级基因工程表达系统的研究日益增多，其中研究的最多的是食品级乳酸菌表达系统。
乳酸菌是食品微生物的重要成员，是一类对人和动物健康有益的细菌，属于GRAS微生物。
最近十多年来，乳酸菌表达系统的研究取得长足进步。
其中食品级表达系统更是重要的研究热点。
食品级表达系统是一种不依靠传统抗生素标记选择的表达系统，这类表达系统具有以下三个特点：（1）载体必须是食品级的，不得含有非食品级功能性DNA片段，传统的乳酸菌载体都带有一个或多个编码特定功能性抗生素抗性的基因，虽然为遗传操作时保持一定的选择压力，对载体的选择作用是有效的，但将抗生素抗性基因投放到环境或人和动物体内，由于抗性因子的转移，将可能引起生物安全性问题，因此，带有抗性基因的表达系统是不能在食品中应用。
（2）表达宿主必须是安全的、特性清楚而稳定的食品级微生物，如乳酸菌及其他已在食品工业中得到长期而广泛应用的菌株；（3）诱导物必须是食品级的，如乳糖、蔗糖、嘌呤等可被人食用的物质。
目前主要作为基因工程菌的有乳酸球菌、乳酸杆菌和双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和酿酒酵母。
大量的克隆和表达载体被研究开发来改善基因工程乳酸菌的性能，这些基因工程乳酸菌在奶制品和食品发酵等方面有非常大的应用前景。
然而，抗生素标记的存在使得这些基因工程乳酸菌有潜在的不安全性，因此近几年来发展了许多食品级乳酸菌表达系统，目前主要有4种方法构建食品级乳酸菌表达系统。
第一种方法是采用非抗生素抗性选择标记来构建食品级乳酸菌表达系统。
应用于乳酸菌的非抗生素抗性选择标记包括显性选择标记和营养缺陷型标记。
食品级乳酸菌基因表达系统的研究进展
２ 食品级载体选择标记
传统的乳酸菌载体为保持一定的选择压力都带有一
作者简介 ： 平 （９ ５ ） 唐 １７～ ，男 ，江苏南京人，讲师 ，在读博士研究生 ，研究方向 ：基因表达与调控。 通讯作者 ：郭锡杰
唐平等：食品级乳酸菌基 因表达系统的研究进展
２ ９
个或多个编码特定抗生素 （ 红霉素、氯霉素 ）抗性的基 因，由于抗性 因子具有可转移性 ，将其释放 到环境或被
在Ｌ１ｃｉ 功地 表达 了来源脯 氨酸亚氨基 肽酶 的基因 ． ｔ成 ａ ｓ
ｐｅ 【 。 ｐｉ
人或动物摄人体 内会带来严重的生物安全性后果 ，美国
片球 菌、链球菌及双 歧杆菌等 。传统乳制 品制 作有着 几 千年的历史 ，其 中的乳酸菌是 重要的可利用 生物资 源 ，乳球 菌和乳杆 菌的许多种通 常是被认为具有 安全 （ ｅ ｅａ ｙｒｇ ｒｅ —ｓ ａｅ Ｇ ｎ ｒｌ — ａｄ ｄａ— ｆ，ＧＲ Ｓ ｌ ｅ ｓ Ａ ）的特性 ，是一 种 食 品级 的微 生物 … 。在过 去 的２ 年 里 ，Ｌ ０ ＡＢ的特
用前景 十分广 阔。
包 括 内源性质粒 的去除 、电穿 孔方法的建立 等 ，已建
立 了一系列具有不同用途 的选择标记和突变系统等 ， 以及Ｌ Ｂ的模式菌Ｌ ｃｏｏ ｃｓ ａｔ 的基 因组 的测序完 Ａ ａｔｃｃｕ ｃ ｓ ｌ ｉ 成 【 ，这些都为Ｌ Ｂ ３ ］ Ａ 在食 品 、医药工程方面的应用提 供 了可能，而食品级的高效表达系统的构建和应用更是
１ 乳酸基 因工程菌
乳酸菌是人和大多数动物肠道内的常见 细菌 ，已证
明其在食品工业各个领域中的长期应用不具有致病性 ，
乳酸菌的生态学与功能研究进展
乳酸菌的生態學與功能研究進展近年来，乳酸菌备受科学家们的重视，因为它们在食品工业领域中发挥了巨大的作用，而且乳酸菌也是人类肠道微生物群落中最常见的菌种之一。
研究表明，乳酸菌不仅仅能够促进食品的发酵和保存，还能够对人体健康产生积极的影响。
本文将通过介绍乳酸菌的生态学特征和功能研究进展，来进一步了解乳酸菌的重要性。
一、乳酸菌的生态学特征乳酸菌是一种异养菌，生活在一些富含糖类物质的环境中，例如乳制品、蜂蜜、水果和蔬菜等。
尽管乳酸菌在这些食品中广泛存在，但它们也可以从外部环境中获得营养，形成菌群并繁衍生息。
在肠道微生物群落中，乳酸菌是最常见的细菌之一。
研究表明，肠道乳酸菌有助于促进食物消化、增强人体免疫力、降低血压和血脂等。
针对不同的环境，不同类型的乳酸菌会有不同的生态学特征。
乳酸菌的生长度外，还有一些值得关注的特点。
乳酸菌可以通过共生等方式形成生物膜，这有助于维持群体的稳定性。
在发酵过程中，乳酸菌还能够生成一些有益物质，例如各种氨基酸、胆碱等物质。
不同类型的乳酸菌在共生群体中有着各自的优势，因而对于不同的食品，我们可以针对不同类型的乳酸菌进行不同的配合，从而更好地促进食品的品质和口感。
二、乳酸菌的功能研究进展乳酸菌在食品工业领域中已经发挥了非常重要的作用，但在人类的健康方面，乳酸菌的作用研究尚不完全明确。
一些研究表明，肠道微生物群落中有利益物种和不利益物种之分，乳酸菌便贡献着不可或缺的一份力量。
首先，乳酸菌可以协助人体对一些食物进行消化和吸收。
比如，这些细菌可以分解乳糖，帮助体内人体对乳制品进行消化。
其次，乳酸菌还可以抑制肠道中有害细菌的生长，如对引起食物中毒的沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等，乳酸菌都有着抑制作用。
最后，乳酸菌还能够促进免疫功能的增强，消除胆固醇，吸附肠内毒素等。
近年来，乳酸菌的功能研究受到越来越多的关注。
研究表明，人体肠道中的微生物群落不仅仅是一种单纯的众生物群体，而是一种高度协调组织，其中不同种类的细菌通过互相促进，形成了一种微生态平衡。
食品级乳酸菌表达系统研究进展
维普资讯
生 物 技 术 通 讯 Ｌ Ｔ ＥＲ Ｎ Ｉ ＴＥ ＮＯＬ Ｅ Ｔ Ｓ Ｉ Ｂ Ｏ ＣＨ ＯＧＹ ｖ ｌ ８ Ｎｏ一 一 ｒ，２ ０ Ｈ ｏ Ｏ２ Ｍａ ０ ７ － １ ． ・ ． ，
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文 章编 号 ：０ ９ ０ ０ （０ ７０ — ３ ５ ０ １０ — ０ ２２０ ）２ ０ ４ — ３
［ 键 词 ］ 乳 酸 菌 ； 品 级 ； 菌 疫苗 ； 因表 达 ； 关 食 活 基 表达 系统
［ 圈分 类 号 ］ Ｑ ８ 中 ７
［ 献标识码］ Ａ 文
Ａｄｖ ｎ ｅ ｎ Ｅｘ ｅ ｓｏ Ｓ ｓ ｅ ｓ ｏ ｃ ｉ ｉ ｃ ｅ ｉ ａ ｃ ｓ ｉ ｐｒ ｓ ｉ ｎ ｙ ｔ ｍ ｆ ｒ Ｌａ ｔｃ Ａｃ ｄ Ｂａ ｔ ｒａ
乳 酸 菌 （ ｃｉ ａｉ ｂ ｃ ｒ ，ＡＢ 是 一 类 能 利用 碳 水 化 合 物 １ ｔ ｃｄ ａｔ ａ Ｌ ） ａ ｃ ｅ ｉ 产 生 乳 酸 的 革 兰 阳性 菌 的 通 称 ｆ 包 括 乳 杆 菌 属 、 球 菌 属 等 至 Ｉ １ ， 乳 少２ ３个 属 。 作 为 重 要 的 益 生 菌 ， 酸 菌 已被 广 泛 地 应 用 于 食 乳 品 、饮 料 和 微 生 态 制 剂 等行 业 中 ，被 公认 为是 安 全 的 （ｅｅａ ｙ ｇｎｒ ｌ ｌ ｒｇｒｅ ｓｓｆ， Ｒ Ｓ 食 品级 微 生 物＿ ｅａｄｄ ａ ａ Ｇ Ａ ） ｅ １ 】 。乳 酸 菌 产 生 的一 些 酶 、 抗 微 生物 多肽 能 使 食物 美 味 可 Ｅ且 长久 保 持 ｌ 。乳 酸杆 菌 通 过 重 建肠 道 菌 群 平 衡 ，有利 于人 类 及 某 些 动物 宿 主恢 复 并 提 高 健 康
乳酸菌食品级基因表达系统
［ ］ 它由 "7CH,A+ 等 > 以此构建了一个乳酸菌食品级载体 &ST4，
乳酸乳 球 菌 一 个 质 粒 的 最 小 复 制 子、 乳球菌的赭石突变 （UCQ6A） 抑制基因 $/3( 及一段人工合成的含有 44 个限制酶 切点的多克隆位点组成。载体大小约 ?HK。当与嘌呤生物合 成途径中的基因发生赭石突变的宿主联合使用时， $/3( 便可 用作选择性标记。依照同样的策略， 用琥珀突变 （ -FKA6） 抑 制基因 $/3> 构建了可抑制嘧啶营养缺陷的一个食品级载体 &ST?33 。无义突变抑制基因较之其它食品级标记有许多 优点。它使用灵活， 可在多种培养基上进行选择； 其基因产 物是 @<-， 而不是蛋白质， 因此不会有酶活性或抑菌作用。 但 D@<- 抑制基因可能会导致多效效应， 这是它不利的因素。 ?@A 细菌素抗性或免疫性标记 ， 在乳酸乳球菌中发现有一些菌株不产乳链菌肽 （ <7J7E）
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营养缺陷型标记 这一类选择性标记是建立在 D@<- 抑制基因基础上的。
通过双交换使 含质粒的乳酸乳球菌 NI3$&7 的 染 色 体 上， 产生 F9C Q 表型。当将克隆有 ,+04 基因的质 ,+04 基因失活， 粒导入 ,+04 缺陷株时就恢复了 F9C R 表型。因为在乳糖中生 长需要乳糖操纵子编码的完整酶系， 其中包括由 ,+04 编码 的可溶性载体酶 ! GF9C 。因此， ,+04 基因就起选择性标记的 作用。编码 ,+04 的质粒可稳定地存在于这个乳酸乳球菌培 养物中。 乳杆菌中有少数株系可利用 L/木糖作为碳源， 而且与
乳酸菌食品级高效表达载体系统的研究进展
综述与专治乳酸菌食品级高效表达载体系统的研究进展张金宝1,乌云塔娜2(1.内蒙古扎兰屯农牧学校,内蒙呼伦贝尔162650;2.呼伦贝尔市新巴尔虎右旗畜牧局动物疫控中心,内蒙古呼伦贝尔162650)摘要:乳酸菌以其遗传工程可行并操作简单,在建立和研究乳酸菌食品级高效表达载体系统方面具有十分重要的实际意义。
本文对乳酸菌食品级高效表达载体系统的最近研究及其在外源基因表达方面的应用概况进行初步总结。
指出食品级乳酸菌工程及其表达产物可直接用于食品工业、医药和保健品等领域,是具有巨大应用前景的技术。
关键词:乳酸菌(LAB);食品级;表达载体系统中图分类号:T S201.6文献标识码:A文章编号:1004-6704(2008)06-0042-03The Food Grade Inducible Over ProductionExpression System of Lactic Acid BacteriaZH ANG Jin-Bao,WU Yun-tana(1.Zalantun F armets and Sc hools in I nner M ong oli,Zalan tun,I nner M ong li162650;2.X in baery ou qi ise ase Cintrol Ceter,Zanlantun,162650)Abstract:T he g enetic pro ject of the L actic A cid Bacteria(LA B)is simple o per ated。
T hat already w idely used in to ex press many other sour ces g ene.Study the Fo od-Gr ade Inducible Over-P roduct ion Ex pression System-of L actic Acid Bacteria hav e v ery impo rtant significance.In this paper,T here are preliminary co nclusio n the research o f t he Fo od-Gr ade Inducible O-v er-P roduct ion Expressio n Sy stem-o f Lactic Acid Bacter ia at r ecently and it's used in to ex press other g ene aspects.Key words:lactic acid bacter ia;fo od-gr ade;over-production;ex pression system乳酸菌(Lactic acid bacteria,LAB)是一群革兰氏阳性厌氧细菌,能发酵碳水化合物(如葡萄糖),主要代谢产物是乳酸的各类细菌的统称。
乳酸杆菌表达系统的研究进展
乳酸杆菌表达系统的研究进展丁轲程安春(四川农业大学动物科技学院四川雅安625014)乳酸杆菌是一种常见的益生菌，它的应用已有几百年的历史，是一种公认的具有GRAS(Generally Regarded As Safe)有益微生物。
该菌广泛存在于人、动物和植物中，可以产生多种物质，如短链脂肪酸、过氧化氢、细菌素、蛋白质和各种酶类等。
尤其重要的是它是人和动物肠道中最重要的优势菌群之一，对于机体的代谢、免疫调节等方面起着极其重要的作用。
但随着基因工程技术的发展日趋完善，人们已不再满足于乳酸杆菌自身固有的功能，特别是当前由于疫苗免疫和菌(毒)株的残留毒力之间的矛盾，促使人们寻求能良好表达外源抗原且安全的疫苗载体候选菌株，乳酸杆菌便自然成为最佳选择菌株之一，因此近年来在疫苗载体的研究中日益受到重视，但其研究却远远落后于病原微生物。
现就这一方面作一综述。
1 乳酸杆菌表达载体的优点乳酸杆菌作为表达载体有许多独特的优势，这主要是因为乳酸杆菌是人和动物体内最优势的益生菌株之一，许多研究都表明它的有无和多寡都对机体有着至关重要的影响，以它为表达系统有其它菌株不可比拟的优点，主要表现在以下方面：①乳酸杆菌是至今发现的唯一没有致病性的一个种；②它在人和动物体内占绝对优势，以它为表达系统，较其它菌株更易达到较高的表达量；③若选择非抗性标记，则该表达系统中的菌体、选择性标记、诱导物均为食品级，为生产绿色安全的食品提供了可能；④乳酸杆菌菌体本身就对机体有益生作用，其分泌多种物质更是机体必不可少的，若再在其载体上克隆入外源基因，这样就可集菌体、自泌物质和外源蛋白于一体；⑤乳酸杆菌对机体粘膜有极强的粘附作用，因此构建的乳酸杆菌基因工程菌就可在粘膜处不断繁殖，持续向机体释放目的蛋白；⑥乳酸杆菌可直接口服，能够耐受胃液中的强酸和小肠上段的胆盐，这样就免去了目的蛋白的体外提纯等后加工。
2 乳酸杆菌质粒1976年Chassy[1]首先发现乳酸杆菌中存在质粒，质粒在不同的乳酸杆菌中分布不均，Vescovo等[2]对159株乳酸杆菌进行质粒抽提，发现L. reuteri、L. helveticus 和L. acidophilus 含质粒的比率较高，分别为63%、27%和20%，L. casei仅有4%的菌株含有质粒，L.plantarum、L. brevis 和L. coryniformis没有发现质粒。
乳酸菌及其生物工程研究新进展
乳酸菌及其生物工程研究新进展摘要：近年来，乳酸菌及其生物工程研究取得了新的进展。
通过利用生物工程技术，可以对乳酸菌进行精确的遗传改造和代谢工程，以实现更好的功能表达和产物产量。
在人体健康方面，乳酸菌被广泛应用于益生菌制剂的研究与开发。
乳酸菌可以在人体肠道中促进有益菌的生长，抑制致病菌的生长，从而维持肠道菌群的平衡，改善消化系统功能，增强免疫力，并可能对炎症性肠病、过敏反应和肠道肿瘤等疾病的预防和治疗具有潜在的作用。
基于此，本篇文章对乳酸菌及其生物工程研究新进展进行研究，以供参考。
关键词：乳酸菌；生物工程；研究；进展引言乳酸菌是一类重要的细菌，被广泛应用于食品和医药领域。
近年来，乳酸菌及其生物工程研究取得了新的进展，为人们的生活和健康带来了许多积极影响。
1乳酸菌的生物工程研究内容1.1乳酸菌代谢途径和乳酸产生机制的研究乳酸菌通过糖类的发酵作用产生乳酸。
研究人员深入研究乳酸菌的代谢途径和调控机制，以提高乳酸的产量和质量。
此外，还探索了不同种类乳酸菌对不同糖类的利用能力和底物特异性，以实现多糖的高效利用。
1.2乳酸菌的功能改良和开发新品种生物工程技术给乳酸菌的功能改造和新品种的开发提供了有力工具。
通过基因工程手段，可以改变乳酸菌的代谢路径或酶活性，使其具有更多的产酸能力、抗菌能力、耐受性或特定功能。
此外，还可利用分子改造技术提高其生产效能和稳定性。
1.3乳酸菌在食品工业和医药领域的应用乳酸菌广泛应用于食品工业中，例如用于制作酸奶、奶酪、发酵肉制品等。
通过乳酸菌的发酵作用，不仅可以改善食品的口感和质量，还能够提高食品的卫生安全性和保质期。
此外，乳酸菌还被应用于医药领域，包括肠道健康维护、免疫调节、抗菌和抗肿瘤等方面。
2乳酸菌在食品工业中的应用2.1发酵食品酸奶是利用乳酸菌对牛奶进行发酵而制成的乳制品。
乳酸菌将牛奶中的乳糖发酵成乳酸，使得牛奶呈现出酸味，并且有益于消化吸收。
酸奶中的乳酸菌还可以促进肠道健康，增强免疫功能。
乳酸菌的研究现状及应用——食品微生物学进展作业
学号：2014051532《食品微生物学进展》结课论文题目：乳酸菌的研究现状及应用学院(系)：专业年级：学生姓名：指导教师：完成日期：2014年12月31日目录1 常见乳酸菌的分类 (3)2 乳酸菌的生理学特性及功能 (3)3 乳酸菌的应用 (4)3.1 乳酸菌在食品行业中的应用 (4)3.1.1作为食品中的防腐剂 (4)3.1.2作为食品的增稠剂、乳化剂和稳定剂 (4)3.2 乳酸菌在动物生产中的应用 (4)3.2.1乳酸菌在仔猪生产中的应 (4)3.2.2乳酸菌在家禽生产中的应用 (5)3.2.3乳酸菌在水产养殖中的应用 (5)3.3 乳酸菌在医学领域上的应用 (5)3.3.1免疫调节作用 (5)3.3.2抗菌功能 (6)3.3.3解毒功能 (6)3.3.4 肠道保护作用 (6)3.3.5 乳酸菌的抗癌作用 (6)3.3.6 乳酸菌制剂预防幼儿胃肠道、泌尿道感染的作用 (6)3.5 乳酸菌的其他应用 (7)4 乳酸菌应用的展望 (7)参考文献 (8)乳酸菌的研究现状及应用摘要：本文介绍了乳酸菌的生物特性及功能，综述了乳酸菌的应用现状，并对其发展前景作出展望。
关键词：乳酸菌；生物特性；生理功能；应用现状Advances in the research and application of Lactic acidbacteriaAbstract：This article reviews the Lactic acid bacterias’physiological characteristics, biological function and its current application, and forecasts the future of this research.Key Words: Lactic acid bacteria; physiological characteristics; physiological characteristics; current application、1 常见乳酸菌的分类乳酸菌（lactic acid bacteria，LAB）是一类能利用可发酵碳水化合物产生大量乳酸的细菌的通称。
乳酸乳球菌表达系统的研究进展_王永刚
图 1 NICE 系统蛋白表达示意图
2 乳酸乳球菌表达系统的应用
乳酸乳球菌是肠道内的常见菌种， 其作为一种食 品级的安全微生物已越来越受到科研工作者的青睐。 目前对乳酸乳球菌应用最多的是食品工业和医药行 业。 2.1 L. lactis 表达系统应用于食品工业
目前， 构建乳酸菌乳球菌食品级载体-受体系统， 寻找一些在乳酸乳球菌中的克隆和表达中有价值的基 因已成为乳酸菌分子遗传学研究的趋势并在食品研究 和生产领域具有重大意义。 乳酸菌食品级高效表达系 统 （NICE） 是 现 阶 段 应 用 最 广 的 高 效 诱 导 表 达 系 统 ， 由 于 NICE 系 统 的 诱 导 剂 、 宿 主 菌 和 载 体 都 是 安 全 的 食品级的， 其应用前景相当广阔。 如若在该系统中加 入诱导物乳链菌肽后诱导率可达 1 000 倍以上 。 ［12-13］ 因 此， 在可控蛋白的生产中该系统是首选表达系统， 同 时在生产表达时该系统具有良好的安全性， 所以可用