医学检验--常用血清酶和同工酶测定的临床意义

常用血清酶和同工酶测定的临床意义1.连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）2.连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性3.连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）4.连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）5.连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP）6.连续监测法测定血清中谷氨酰基转移酶（GGT）7.淀粉酶（AMY）测定8.比色法测定酸性磷酸酶（ACP）连续监测法测定血清肌酸激酶（CK）CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体。

正常人体中有三种同工酶，即CK-BB（CK1）、CK-MB（CK2）和CK-MM（CK3）。

CK作用后生成的磷酸肌酸含高能磷酸键，是肌肉收缩时能量的直接来源。

CK需要镁离子激活。

1.原理酶偶联反应测定CK活性浓度。

在340nm监测NAD（P）H的生成量，可计算出CK的活性浓度。

2.生理变异年龄、性别和种族对CK含量都有一定影响。

CK含量和肌肉运动密切相关。

3.参考值男性38～174U/L（37℃）；女性26～140U/L（37℃）。

4.临床意义升高：（1）心肌梗死。

心肌梗死发生后2～4h此酶即开始升高，12～48h达最高峰值，可高达正常上限的10～12倍，在2～4天降至正常水平。

（2）病毒性心肌炎。

（3）肌营养不良症、皮肌炎、骨骼肌损伤。

（4）脑血管意外、脑膜炎、甲状腺功能低下等疾病及一些非疾病因素如剧烈运动、各种插管及手术、肌肉注射冬眠灵和抗生素。

降低：甲亢，长久卧床者总CK（主要为CK-MM）可下降。

5.CK同工酶检测原理及临床意义CK是由两种不同的亚基M和B组成的二聚体，正常人体中有三种同工酶：在细胞线粒体内还有另一种CK同工酶，称为CK-Mt。

（1）检测方法：琼脂糖凝胶电泳法CK同工酶免疫特性和电泳迁移率各不相同。

在电泳时，CK-BB迁移最快，走在阳极白蛋白区；CK-MB居中，位于α2和β球蛋白区；CK-MM最慢，位于阴极γ-球蛋白区；CK-Mt迁移率最低，位于CK-MM之后。

电泳后进行酶促反应显色，观察结果。

（2）临床意义：正常血清中绝大部分为CK-MM的活性，含有少量的CK-MB，CK-BB含量极少，用一般方法测不出。

CK同工酶活性的变化见于以下情况。

1）CK-MB是目前公认的诊断急性心肌梗死最有价值的生化指标。

（诊断心梗现多用免疫化学法测定其质量）2）肌营养不良：肌肉创伤、皮肌炎患者CK-MM明显增高。

3）心肌梗死以外的心脏疾患有时也可有血清CK-MB的轻度升高。

连续监测法测定乳酸脱氢酶（LD）总活性乳酸脱氢酶是一种含锌的氧化还原酶类，人体以心、肾、骨骼肌含量最丰富，其次为肝、脾、胰及肺组织含量亦较多。

1.原理340nm处吸光度的增加速率与样品中LD活性成正比。

2.生理变异血清LD高低和性别关系不大，婴儿酶活性可达成年人两倍，儿童和少年活性比成年人高10%～l5%。

3.参考值血清LD-P法：109～245U/L（成人）。

4.临床意义血清LD活性增高主要见于心肌梗死、肝病、肺梗死、恶性肿瘤、白血病、恶性淋巴瘤等的辅助诊断。

某些肿瘤转移后所致的胸、腹水中LD活性往往也升高。

5.LD同工酶检测原理及临床意义LD是由H亚基和M亚基构成的四聚体，不同的组合方式构成五种同工酶。

1）方法琼脂糖电泳法血清LD同工酶目前常用琼脂糖凝胶电泳法测定。

2）临床意义LD同工酶在组织中的分布可将其分为三类。

以LD1为主，主要在心肌，可占总酶的50%，也存在于红细胞内；以LD5为主，存在于横纹肌，肝中也有；以LD3为主，存在于肺、脾等。

在成年人存在着如下规律：LD2＞LD1＞LD3＞LD4＞LD5①急性心肌梗死发作后早期，LD1升高更早更明显，可致LD1/LD2比值增高。

②活动性风湿性心肌炎、急性病毒性心肌炎及某些溶血性疾病，肾坏死、假性肥大性肌营养不良等，LD1及LD2的活性也升高。

③当急性肺部病变、白血病、胶原病、心包炎、病毒感染等LD2及LD3增高。

而恶性病时，LD3也常增高。

④肝炎、急性肝细胞损害及骨骼肌损伤时LD5常常增高。

而当心肌梗死并发充血性心力衰竭时，LD5也可升高。

常见疾病LD总酶和LD同工酶的变化连续监测法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）ALT和AST是体内最重要的两种转氨酶，辅酶是磷酸吡哆醛。

AST有两种同工酶，分别存在于细胞质（c-AST）和线粒体（m-AST），ALT绝大多数在细胞质内，可能有极少量在线粒体中。

ALT和AST在于体内多种器官和组织中，以含量从多到少为序：AST为心脏、肝、骨骼肌和肾等；ALT为肝、肾、心、骨骼肌等。

1.原理：采用酶偶联反应测定ALT的底物是α-酮戊二酸和丙氨酸。

在340nm处连续监测吸光度下降速率，从而计算出ALT活性浓度。

2.生理变异：此酶生理变异较小，无统计学意义。

3.临床意义：ALT常作为判断肝细胞损伤的灵敏指标，轻度损伤即升高，肝病早期诊断。

但其他疾病或因素亦会引起ALT不同程度的增高。

（1）急性病毒性肝炎ALT阳性率为80%～100%，最高可达500U以上，多为ALT＞AST。

监测ALT可以观察病情的发展，并作预后判断。

（2）慢性活动性肝炎或脂肪肝ALT轻度增高（100～200U），一般不超过参考值的3倍，或属正常范围，且AST＞ALT。

（3）肝硬化、肝癌ALT有轻度或中度增高，提示可能并发肝细胞坏死，预后严重。

（4）其他原因引起的肝脏损害，如心功能不全时，肝淤血可使ALT、AST明显升高：某些化学药物如异烟肼、氯丙嗪、苯巴比妥等可不同程度的损害肝细胞，引起ALT的升高。

（5）骨骼肌损伤、多发性肌炎等亦可引起转氨酶升高。

应注意两种情况：重症肝炎由于大量肝细胞坏死，此时血中ALT可仅轻度增高，临终时常明显下降，但胆红素却进行性升高，即所谓的“酶胆分离”，常是肝坏死征兆。

另一种情况是少数人血清中ALT长期持续升高，肝穿无明显病理改变，预后良好。

连续监测法测定血清（天）门冬氨酸氨基转移酶（AST）1.原理基质是门冬氨酸与酮戊二酸。

在340nm处监测吸光度的下降速率，从而计算AST活性。

2.生理变异：此酶生理变异较小。

3.参考值：成人<45U/L。

4.临床意义①主要用于诊断AMI；②AST也是肝炎患者的观察指标，且AST/ALT比值对判断肝炎的转归特别有价值；③ｍ-AST在判断肝实质细胞损害程度、急慢性肝炎的鉴别有一定价值。

连续监测法测定血清碱性磷酸酶（ALP）ALP指一组底物特异性较低，在碱性环境中（最适pH10左右）能水解很多磷酸单酯化合物的酶。

ALP广泛存在各器官组织中，含量以肝为最多，其次为肾、胎盘、小肠、骨等，妊娠时胎盘产生胎盘ALP。

一般认为骨中的ALP和骨的钙化作用关系密切。

血清中的ALP主要来自肝脏和骨骼。

ALP主要用于骨骼和肝胆系统疾病的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。

1.原理磷酸苯二钠比色法：测定ALP水解底物产生的酚。

磷酸苯二钠做底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇胺为磷酸酰基的受体。

在碱性环境下经ALP作用后产生黄色的对硝基酚，根据405nm处吸光度增高速率来计算ALP活性单位。

2.生理变异ALP变化与年龄密切相关，新生儿ALP略高于成年人，以后逐渐增高，20岁后降至成年人值，到老年期又轻度升高，可能与生理性的激素变化有关。

孕妇血清ALP在妊娠3个月即开始升高，是升高最明显的酶，9个月可达峰值，约为正常值的2倍。

升高的ALP来自胎盘，和胚泡壁的细胞滋养层的发育程度直接相关。

高脂餐后，血清ALP活性升高。

无黄疸肝脏疾病患者血中发现有ALP升高应警惕有无肝癌可能。

3.参考值女性：1～12岁＜500U/L；＞15岁40～150U/L；男性：1～12岁＜500U/L；12～15岁＜750U/L；＞15岁40～150U/L。

4.临床意义：在临床上，血清ALP活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断指标。

（1）血清ALP活性升高：见于骨Paget病、胆管梗阻、恶性肿瘤骨转移或肝转移、佝偻病、骨软化、成骨细胞瘤、甲状旁腺功能亢进及骨折愈合期。

（2）血清ALP活性降低：比较少见，主要见于呆小病，磷酸酶过少症，维生素C缺乏症。

甲状腺功能低下、恶性贫血等也可见血清ALP下降。

连续监测法测定血清谷氨酰基转移酶（GGT）GGT是一种底物特异性不高的酶，能作用于一系列含谷氨酰基的化合物。

各器官GGT的理化性质有差异，用琼脂糖电泳可分出4个区带。

在405～410nm处吸光度增高速率与GGT活性呈正比关系。

＋谷氨酰双甘肽L-γ谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺＋双甘肽GGT2-硝基-5-氨基苯甲酸黄色2.生理变异年龄与妊娠对GGT影响不大。

男性血中GGT含量明显高于女性，可能与前列腺有丰富的GGT有关。

酗酒会引起GGT明显升高，升高程度与饮酒量有关，诊断疾病时必须排除这一因素。

3.参考值：男性：11～50U/L（37℃）；女性：7～30U/L（37℃）。

4.临床意义（1）肾脏含GGT最高，测定尿中该酶活性有助于诊断肾小管疾患。

（2）GGT主要用于诊断肝胆疾病。

原发性肝癌、胰腺癌和乏特壶腹癌时，血清GGT活性显著升高，特别在诊断恶性肿瘤患者有无肝转移和肝癌术后有无复发时，阳性率可达90%，GGT同工酶Ⅱ与AFP联合检测可使原发性肝癌阳性率明显提高；在肝炎恢复期内，该指标仍升高时，指示肝炎未愈。

（3）嗜酒慢性酒精中毒或长期服用苯巴比妥等药物血清GGT活性常升高，口服避孕药会使GGT 值增高20%。

常见疾病谷氨酰基转移酶的变化淀粉酶（AMY）测定淀粉酶作用于淀粉的α-1，4糖苷键，Cl-是该酶的激活剂。

1.方法（1）碘-淀粉比色法测定。

（2）对-硝基苯麦芽七糖苷法。

PNP（对硝基苯酚）的生成引起405nm处吸光度的上升，上升速率与AMY的活力成正比。

（3）2-氯-4-硝基苯麦芽三糖苷法。

2.生理变异成年人血中AMY与性别、年龄、进食关系不大，新生儿AMY缺乏，满月后才出现此酶，逐步升高，约在5岁时达到成人水平，老年人AMY开始下降，约低25%。

碘-淀粉比色法：血清80～180U/L；尿液100～1200U/L。

对-硝基苯麦芽七糖苷法：血清淀粉酶：220U/L（37℃）。

尿淀粉酶：1200U/L（37℃）。

不同的方法血和尿淀粉酶测定值无可比性。

各实验室应针对本实验室选定的方法制定参考值。

4.临床意义淀粉酶主要由唾液腺和胰腺分泌，可通过肾小球滤过。

升高：（1）急性胰腺炎：血和尿中的AMY显著增高。

发病后8-12h血清AMY开始增高，12～24h达高峰，2～5天下降至正常。

尿AMY约于发病后12～24h开始升高，下降比血清AMY慢，在急性胰腺炎后期测定尿AMY更有价值。

碘-淀粉比色法结果如超过500U有意义。

（2）流行性腮腺炎（3）急性阑尾炎、肠梗阻、胰腺癌、胆石症、溃疡病穿孔及吗啡注射后等均可见血清AMY增高，但常低于500U。