L苯丙氨酸

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苯丙氨酸的生理功能

苯丙氨酸的生理功能

苯丙氨酸是人体必需的氨基酸之一,具有以下生理功能:
维持正常的生长发育:苯丙氨酸能够促进人体的生长发育,并有助于蛋白质的合成,这在一定程度上可以提高人体的免疫力。

促进大脑发育:苯丙氨酸对大脑的发育有积极的影响,适量摄入苯丙氨酸含量高的食物,如牛奶、鸡蛋等,有助于增强记忆力和提高思维灵敏度。

合成重要的神经递质和激素:苯丙氨酸在体内可以转化成酪氨酸,进而合成多种重要的神经递质和激素,如多巴胺、去甲肾上腺素等,这些物质对于调节人体的情绪、行为、睡眠等方面起着关键作用。

参与机体糖代谢和脂肪代谢:苯丙氨酸还参与机体的糖代谢和脂肪代谢,对于维持身体的正常生理功能有一定的作用。

预防大脑迟钝:苯丙氨酸的正常代谢可以产生酪氨酸,给孩子喂养低量的苯丙氨酸,使血药浓度维持在15~40mg/L,可以预防大脑迟钝。

此外,苯丙氨酸还具有减轻饥饿感、增强性欲、振奋精神、消除抑郁情绪等作用。

然而,苯丙氨酸的过度摄入也可能对健康产生不利影响,如增加心血管疾病的风险。

因此,建议在医生的指导下服用,并保持均衡的膳食习惯。

L-苯丙氨酸

L-苯丙氨酸

种子培养
斜面培养:LB培养基 斜面培养:LB培养基 种子培养基:蛋白胨1 氯化钠1 酵母粉0 种子培养基:蛋白胨1%;氯化钠1%;酵母粉0.5%;葡 萄糖2 萄糖2%;调pH=7.5;抗菌素Km(硫酸卡那霉素) pH=7 抗菌素Km(硫酸卡那霉素) 发酵培养基:Na2HPO4 12H 20g/L; 发酵培养基:Na2HPO4·12H2O20g/L;柠檬酸钠 6g/L; g/L; 谷 氨 酸 钠 0.4g/L; 酪 氨 酸 0.6g/L; 葡 萄 糖 g/L; g/L; 20g/L;Km40mg/L 20g/L;Km40mg/L 补料培养基:CaCL2 补料培养基: CaCL2·2H2O0.6g/L;酪氨酸 500mg/L;葡 g/L;酪氨酸500mg/L; 萄糖500g/L;MgSO4 萄糖500g/L;MgSO4·7H2O1g/L;VB1500mg/L;氨水28% g/L;VB1500mg/L;氨水28% 斜面培养→一级种子培养→二级种子培养→ 斜面培养→一级种子培养→二级种子培养→三级 种子培养→ 种子培养→发酵罐
L-苯丙氨酸在国内的生产状况
目前国内有10余家制药厂和试剂厂生产L 目前国内有10余家制药厂和试剂厂生产L- 苯丙氨 酸(见下表),但生产规模普遍偏小,产量极低, 见下表) 但生产规模普遍偏小,产量极低, 产品一般用于本厂生产药品和生化试剂, 产品一般用于本厂生产药品和生化试剂,不能满 足国内市场日益增长的需求。 足国内市场日益增长的需求。
提高L-苯丙氨酸产量的策略 提高L-苯丙氨酸产量的策略 L-
选育L 酪氨酸和L 选育L-酪氨酸和L-色氨酸营养缺陷型突变株 选育L 选育L- 苯丙氨酸 、 L-酪氨酸 ﹑ L-色氨酸抗性突 变株 敲除合成丙酮酸激酶基因来增加PEP的供应 敲除合成丙酮酸激酶基因来增加PEP的供应 扩增大肠杆菌中合成转酮醇酶( 扩增大肠杆菌中合成转酮醇酶(磷酸戊糖途径中 合成E 的关键酶)的基因来增加E 合成E4P的关键酶)的基因来增加E4P的供应 降低副产物乙酸的生成 筛选抗噬菌体(BP筛选抗噬菌体(BP-1)的突变菌株

L-苯丙氨酸质量标准和检验规程

L-苯丙氨酸质量标准和检验规程

目的:规范检验操作,确保检验结果的准确可靠。

适用范围:适用于L—苯丙氨酸的检验.责任者:化验员。

名称:L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine)化学名:L—α-氨基—β—苯丙酸(L-α-Amino-β-phenylpropionic Acid)结构式:分子式:C9H11NO2分子量:165。

19 CAS: 63—91-2一、中国药典2005年版(CP2005)本品为L—α-氨基-β-苯丙酸。

按干燥品计算,含C9H11NO2不得少于98。

5%。

在热水中易溶,在水中略溶,在乙醇中不溶;在稀酸或氢氧化钠试液中易溶.检验操作规程:1。

性状:本品为白色结晶或结晶性粉末;无臭,味微苦。

1。

1取本品适量于白色干净纸上观察,可轻闻其味道。

2。

比旋度:本品比旋度范围为-33。

0°至-35.0°2.1样品溶液:取本品1g,精密称定至0。

0001g,加水溶解并稀释成50ml的溶液(每1ml 中约含20mg的溶液)。

样品溶解一定要完全,可用超声机助溶,溶解完溶液需澄清.2.2空白溶剂:取溶解样品用超纯水适量.2.3测定:用读数至0。

001°并经过检定的旋光计检测。

将测定管用空白溶剂冲洗数次,缓缓注入空白溶剂适量(注意勿使发生气泡,测定管两端的玻璃镜片要擦拭干净),置于旋光计内校正读数,即空白溶剂的旋光度要为0.校正完毕以后用相同的方法检测样品溶液并记录下来,用同法读取旋光度3次,取3次的平均数。

2.4计算:比旋度=V×αL× m× (1-W)式中:V-—稀释倍数;α——所测旋光度的均值;L——测定用管的长度(dm)m——称样量;W--样品的干燥失重量2。

5以上溶液及测定的过程一定要调节温度至20℃±0.5℃3.鉴别:本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集983图)一致。

4.酸度:本品的pH值应为5。

4~6.0。

4.1pH计校正用标准缓冲液的配置。

2023年L-苯丙氨酸行业市场环境分析

2023年L-苯丙氨酸行业市场环境分析

2023年L-苯丙氨酸行业市场环境分析L-苯丙氨酸是一种非必需氨基酸,是体内合成肌肉蛋白质的重要成分。

它广泛应用于保健品、食品添加剂、化妆品、医药等领域,因此具有巨大的市场潜力。

本文将就L-苯丙氨酸行业的市场环境进行分析。

一、宏观经济环境宏观经济环境是影响L-苯丙氨酸行业发展的重要因素之一。

随着人们生活水平的提高,对保健品和化妆品等产品的需求也逐渐增加,这为L-苯丙氨酸行业带来了巨大的市场机遇。

同时,经济全球化也加速了L-苯丙氨酸的进出口,提高了产品的国际化程度。

二、政策环境政策环境是影响L-苯丙氨酸行业发展的另一个重要因素。

目前,我国对L-苯丙氨酸的生产和销售实行许可证管理,通过监管措施保障了消费者的健康。

同时,国家对生产企业实施了质量监管和检查,提高了行业的规范化程度。

三、竞争环境竞争环境是影响L-苯丙氨酸行业发展的重要因素之一。

当前,L-苯丙氨酸市场竞争激烈,主要竞争者包括国内外的知名企业,产品规格多样化。

因此,企业需要依靠技术、质量、价格等方面的优势来获得市场份额。

四、消费者环境消费者环境是影响L-苯丙氨酸行业发展的重要因素之一。

当前,随着人们生活方式的改变和健康意识的提高,对保健品和化妆品的需求逐渐增加,这为L-苯丙氨酸企业提供了广阔的市场。

消费者对企业的信誉度、产品质量、服务等方面的要求也越来越高,企业需要注重生产技术和服务质量,提高品牌形象。

五、技术环境技术环境是影响L-苯丙氨酸行业发展的重要因素之一。

当前,随着生产技术的不断革新和进步,L-苯丙氨酸的纯度和活性逐渐提高,同时产品的生产成本也得到一定的降低,提高了企业的市场竞争力。

综上所述,L-苯丙氨酸行业的市场环境从宏观经济、政策、竞争、消费者和技术等方面来分析,发现未来L-苯丙氨酸行业将有着广阔的市场前景,但同时也需要企业在生产技术和营销策略上进一步完善,提高企业的竞争力。

基因工程菌发酵生产L-苯丙氨酸工艺优化

基因工程菌发酵生产L-苯丙氨酸工艺优化

基因工程菌发酵生产L-苯丙氨酸工艺优化时间:2005-5-17 10:56:24 作者:不详来源:中国发酵工业网点击数:本站另注:L-苯丙氨酸已在国内江苏部分厂家有发酵工业规模化生产,但仍然推荐此文供大家研究参考,了解工艺配方和分析方法。

L-苯丙氨酸(L-phe)是人和动物体内不能合成的8种氨基酸之一,人们称其为必须氨基酸。

L-phe在生物体内是转化成L-酪氨酸的原料,因而L-phe成为一些氨基酸输液和氨基酸饮膳所必须的成分。

而且,L-phe是合成药物麦角胺、抗生物质和维生素B6的重要原料。

同时,L-phe也是合成一些抗癌药物的中间体[1]。

在食品工业中,L-phe最主要的用途是合成二肽甜味剂,俗称蛋白糖。

基于L-phe广泛的应用前景,近年来L-phe成为氨基酸行业单品中产量增长最快的一种。

目前,L-phe的生产方法有酶法、发酵法等,直接发酵法具有可利用廉价原料直接生产L-phe的优点,发酵法生产L-phe,国外报道产酸率为2.8%,L-phe在我国还未实现规模生产[2]。

本实验对构建的重组L-phe基因工程菌E.coLiHB101. 进行发酵实验,研究了其发酵工艺条件及营养物质的流加对产物L-phe积累的影响。

1实验材料与方法1.1发酵用菌株基因重组工程菌E.coLiHB101. 。

1.2培养基1.2.1种子培养基蛋白胨1%;氯化钠1%;酵母粉0.5%;葡萄糖2%;调pH=7.5;抗菌素Km(硫酸卡那霉素)。

1.2.2发酵培养基Na2HPO4·12H2O20g/L;Na-citrate6g/L;Na-gLutamat e0.4g/L;酪氨酸0.6g/L;葡萄糖20g/L;Km40mg/L。

1.2.3补料培养基CaCL2·2H2O0.6g/L;酪氨酸500mg/L;葡萄糖500g/L;MgSO4·7H2O1g/L;VB1500mg/L;氨水28%。

1.3培养方法1.3.1摇瓶培养250mL锥形瓶内装LB培养基25mL,接种菌种斜面后,于旋转摇床上,在37℃培养12h。

L-苯丙氨酸成分介绍

L-苯丙氨酸成分介绍

产品名称:L-苯丙氨酸
别名:L-苯基丙氨酸
CAS号:15099-85-1
含量:99%
级别:食品级
包装:1*25kg
性质:L-苯丙氨酸为无色至白色片状晶体或白色结晶性粉末,是一种营养增补剂,是必需氨基酸之一。

L-苯丙氨酸溶于水,微溶于乙醇、乙醚。

L-苯丙氨酸是营养增补剂。

在大多数食品的蛋白质中几乎非限制氨基酸。

L-苯丙氨酸可添加于焙烤食品,除强化苯丙氨酸外,与糖类起氨基-羰基反应,可改善食品的香味。

安泰生物科技有限公司是以销售食品添加剂为主的公司,从事多种食品添加剂产品的销售。

公司坚持"质量为本,科技创新"的宗旨,
从原料采购、工艺操作到品质检验,都严格遵守国际质量标准进行管理,竭诚服务于广大新老客户。

苯丙氨酸


食品工艺上:
可添加于焙烤食品中,强化苯丙氨酸的营养作用, 还与糖类发生氨基-羧化反应以改善食品店品香味, 并补充人体所需功能性食品氨基酸平衡;
L-苯丙氨酸是生产新型保健型甜味剂阿斯巴甜的主要原料。 阿斯巴甜是经世界卫生组织( WHO)、粮农组织( FAO) 专家联席委员会认定的A⑴级安全性食品添加剂,目前有120 多个国家、地区政府批准特点,其甜度是蔗糖的200倍, 热值不到其二百分之一,是高血压、心脏病、糖尿病人 最理想的甜味剂,但苯丙酮尿症患者不宜食用。
作为人体所需八大氨基酸之一 在食品,医药,营养,抗癌生产等等方 面的显著特点 所以,有必要对此氨基酸进行合理生
产。
苯丙氨酸的生产:以氯苯为原料,与 CO2经一步双羟基合成反应生产苯丙 酮酸(条件:压力2~5Mpa,温度 40~60)
文献摘录于:韩文爱 陈立群教授
因此:有必要对此氨基酸进行进一步的理解探究与合理 开发
That's
L-苯丙氨酸是具有生理活性的芳香族氨基酸,是人体和动物不能靠自身自然合 成的必需氨基酸之一,是复配氨基酸输液的重要成份;
用于医药,是苯丙氨苄、甲酸溶肉瘤素等 氨基酸类抗癌药物的中间体,也是生产肾 上腺素、甲状腺素和黑色素的原料;已有 研究表明,L-苯丙氨酸可作为抗癌药物的 载体将药物分子直接导入癌瘤区,其效果 是其他氨基酸的3~5倍。这样既可以抑制 癌瘤生长,又可以降低药物的毒副作用。
苯丙氨酸系统命名为“2-氨基苯丙酸”,是α-氨基酸的一种, 具有生物活性的光学异构体为L-苯丙氨酸( L-Phenylalanine) 比旋光度为-35.1°。苯丙氨酸是人体必需氨基酸之一。苯丙氨 酸广泛用于医药和阿斯巴甜的主要原料。 L-苯丙氨酸在生物体内可被辅酶四氢生物喋呤不可逆地转化为 L-酪氨酸( L- Tyrosine),后继续分解,经转氨基生成少量苯 丙酮酸 但先天性苯丙氨酸羟化酶缺陷患者,苯丙氨酸不能羟化生成酪 氨酸,苯丙酮酸生成就增多,在血和尿中出现苯丙酮酸,导致 智力发育障碍,称为苯丙酮尿症( PKU),故此类患者应忌食 含苯丙氨酸的食品。

苯丙氨酸

苯丙氨酸科技名词定义中文名称:苯丙氨酸英文名称:phenylalanine;Phe定义:学名:2-氨基-3-苯基丙酸。

一种芳香族的非极性的α氨基酸。

L-苯丙氨酸是组成蛋白质的20种氨基酸中的一种氨基酸,是哺乳动物的必需氨基酸和生酮生糖氨基酸。

符号:F。

所属学科:生物化学与分子生物学(一级学科);氨基酸、多肽与蛋白质(二级学科)本内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布百科名片苯丙氨酸系统命名为“2-氨基苯丙酸”,是α-氨基酸的一种,具有生物活性的光学异构体为L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine)比旋光度为 -35.1°。

苯丙氨酸是人体必需氨基酸之一,常温下为白色结晶或结晶性粉末固体,减压升华,溶于水,难溶于甲醇、乙醇、乙醚。

目录简介性质制备应用参见检查含量测定简介性质制备应用参见检查含量测定展开简介L-苯丙氨酸的契线式苯丙氨酸Phenylalanine Phe苯丙氨酸系统命名为“2-氨基苯丙酸”,是α-氨基酸的一种,具有生物活性的光学异构体为L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine)比旋光度为-35.1°。

苯丙氨酸是人体必需氨基酸之一,常温下为白色结晶或结晶性粉末固体,减压升华,溶于水,难溶于甲醇、乙醇、乙醚。

苯丙氨酸广泛用于医药和阿斯巴甜的主要原料。

L-苯丙氨酸在生物体内可被辅酶四氢生物喋呤不可逆地转化为L-酪氨酸(L-Tyrosine),后继续分解,经转氨基生成少量苯丙酮酸,但先天性苯丙氨酸羟化酶缺陷患者,苯丙氨酸不能羟化生成酪氨酸,苯丙酮酸生成就增多,在血和尿中出现苯丙酮酸,导致智力发育障碍,称为苯丙酮尿症(PKU),故此类患者应忌食含苯丙氨酸的食品。

注:本条目只介绍具有生物活性的L-苯丙氨酸性质参数IUPAC中文命2-氨基苯丙酸名三字母简写Phe单字母简写 F分子式C9H11NO2摩尔质量165.19 g/mol熔点283℃沸点295℃密度1290kg/m3pKa1 2.20 (-COOH)pKa2 9.31 (-NH3+)等电点(pI)5.48蛋白质出现几3.9%率标准摩尔生成焓标准摩尔燃烧焓CAS号63-91-2SMILES化学性质主条目:α-氨基酸苯丙氨酸具有氨基酸的通性,包括与酸碱反应,生成内盐、氨基与2,4-二硝基氟苯(DNFB)亚硝酸、卤代烃反应、羧基的成酯、酸酐、酰胺反应。

l-苯丙氨酸 标准

l-苯丙氨酸标准L-苯丙氨酸是一种非必需氨基酸,是蛋白质结构的组成部分之一。

它是一种可以通过饮食或合成来供给给身体的氨基酸。

L-苯丙氨酸在身体内发挥着多种重要的生理功能,尤其是对于神经递质的合成和调节起着重要作用。

L-苯丙氨酸是合成多巴胺、肾上腺素和去甲肾上腺素的前体。

这三种神经递质在中枢神经系统和末梢神经系统中起着重要的调节作用,与情绪、注意力、记忆等认知功能紧密相关。

因此,L-苯丙氨酸的供应可以改善认知功能和抑制情绪障碍。

L-苯丙氨酸还参与合成甲状腺素。

甲状腺素是一种重要的激素,对能量代谢、生长发育和体温调节起着至关重要的作用。

L-苯丙氨酸的供应可以维持正常的甲状腺功能,促进代谢的平衡,并保持身体的健康状态。

L-苯丙氨酸还具有抗氧化作用。

氧化应激是机体内氧自由基产生过多、抗氧化系统失调时产生的一种状态,对细胞和组织造成损伤,参与导致多种疾病的发生。

L-苯丙氨酸可以通过清除自由基并稳定细胞膜来发挥抗氧化作用,保护细胞免受氧化应激的损伤。

L-苯丙氨酸还有助于诱导肌肉生长和恢复。

作为一种氨基酸,它参与蛋白质的合成和修复,对于肌肉的生长和恢复至关重要。

许多研究已经发现,在运动和锻炼时,补充L-苯丙氨酸可以提高肌肉合成和恢复的效率,促进肌肉的生长和发展。

总之,L-苯丙氨酸作为一种非必需氨基酸,在人体内发挥着多种重要的生理功能,包括合成神经递质、调节认知功能和情绪、参与代谢平衡、具有抗氧化作用以及促进肌肉生长和恢复等。

因此,合理的摄入L-苯丙氨酸对于维持身体健康和提高生活质量具有重要的意义。

但需要注意的是,摄入L-苯丙氨酸时需根据个体情况进行调整,以免过量摄入产生负面影响。

发酵法生产L-苯丙氨酸的研究进展 王凯

发酵法生产L-苯丙氨酸的研究进展摘要:L-苯丙氨酸(L-phenylalanine, L-Phe) 是一种广泛应用于食品、饲料添加剂以及医药等领域中的必需氨基酸,主要的工业生产方法为原料廉价易得,环境污染小的微生物发酵法。

综述了国内外发酵法生产L-苯丙氨酸的关键技术和策略以及最新研究进展情况。

关键词:L-苯丙氨酸;发酵法;基因工程技术;工艺优化1. L-苯丙氨酸的性质和用途苯丙氨酸(Phenylalanine)又称α-氨基化肉桂酸,分子式C9H11O2N,分子量165.19,属于带苯环的芳香族氨基酸。

最早由Schulze在1897年从羽扇豆幼苗中发现和分离,接着Fischer 于20世纪初由动物性蛋白质中成功分离得到[1]。

其光学异构体一共有三种,分别为L-型,D-型及外消旋D,L-型,其中的L-型具有生物活性,呈白色或无色的结晶粉末状,有苦味,常温下溶解度较低,为29.6g/L,并难溶于甲醇和乙醇等有机溶剂[2]。

L-苯丙氨酸在自然界广泛存在,但其含量都不高,在卵、乳和动物蛋白中,含量5~6%,在植物性蛋白质中含量占1%,石油蛋白中占到8%,单细胞蛋白中占3~5%[3]。

L-Phe还主要存在于纤维蛋白、蛋白及血红蛋白中,影响甲状腺激素和毛发、皮肤的黑色素,还参与消除一些内脏的功能的损耗。

它是人体必需但自身无法合成的八种必需氨基酸之一,L-Phe的人体代谢障碍是一些先天性代谢疾病的病因,因此在医药行业中,L-Phe是一些氨基酸输液和营养剂中的必需成分。

除了直接用于合成医药外,还是医药类培养介质的配制中间体及载体,如抗肿瘤药物的药物载体。

在食品行业中,L-Phe可用于配制调味剂,强化营养作用。

自从20世纪80年代以来,由于食品双肽甜味剂阿斯巴甜(Aspartame,简称APM)的开发应用,L-Phe作为其合成原料之一,经济价值有了进一步的提高[4]。

2.L-Phe的生产方法随着市场需求的不断增长,L-Phe的生产受到越来越多的关注。

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它是氨基酸,是两性物质,在水中的解离很弱,无法用酸或碱准确滴定。

将它溶于冰醋酸,其碱性解离显著增加,可用溶于冰醋酸的高氯酸准确滴定外观、熔点、旋光性、uv(紫外)、FTIR(红外)、NMR(核磁共振)、水分、残渣、非水滴定、重金属(ICP—MS,ICP—AOE,比色法)、液相色谱(含量、纯度)曲曲流觴水 18:21:07是L-苯丙氨酸结构式L-苯丙氨酸(63-91-2)的性状:1.本品为白色结晶或结晶性粉末;无臭,味苦。

284℃熔化并分解。

在水中略溶(2.97%,25℃),在乙醇申几乎不溶。

在受热、光照、空气中稳ˉ定,碱性下不稳定。

等电点pH=5.48,pKα-COOH=1.83,pKα-NH3+=9.13。

2.苯丙氨酸是芳香族氨基酸,属必需氨基酸,对幼儿尤其重要。

在生物体内经曲莽草酸、分支酸和苯丙酮酸合成,分解代谢则通过苯丙氨酸加氧酶的作用转化为酪氨酸,进而分解为乙酰乙酸进人TCA循环。

其生理作用与酪氨酸有关。

可影响甲状腺激素和毛发、皮肤的黑色素。

正常人每天需要2.2g。

D-型与L-型的生理效果相同。

最低需要量(mg/kg·d):成人男子31;幼儿169。

用途L-苯丙氨酸(63-91-2)的用途:本品是氨基酸类药。

用于氨基酸输液、综合氨基酸制剂及营养强化剂,大量用于合成新型甜味剂天冬甜素(aspartame,L-天冬氨酸、本品结合的二肽甲酯)。

是必需氨基酸之一。

在大多数食品的蛋白质中几乎非限制氨基酸。

可添加于焙烤食品,除强化苯丙氨酸外,与糖类起氨基一羰基反应,可改善食品香味。

按我国GB2760—86规定可用作香料。

该品是多种抗癌药物及二肽甜味的原料。

描述1.L-苯丙氨酸(63-91-2)的生产方法:本品制备方法很多,有蛋白质水解提取法,直接发酵法,化学合成等。

化学合成法有苯甲醛法和苯乙醛法。

(1)苯甲醛法:以苯甲醛和乙酰甘氨酸作用生成乙酰氨基桂皮酸,然后催化加氢还原,得乙酰-DL-苯丙氨酸,最后经氨基酰化酶水解,可拆分生成本品。

利用氨基酰化酶的专一性,只水解Ac-L-phe的酰氨键,生成本品,而不能水解Ac-D-phe的酰胺。

然后根据本品和Ac-D-phe在水中的溶解度不同进行分离。

而分离出的Ac-D-phe又可经消旋化生成Ac-DL-phe。

再一次重复水解、分离。

依次类推,可将Ac-DL-phe 全部转化为本品。

固定化氨基酰化酶的制备:将DEAE-sephadexa-50放入去离子水中充分浸泡后,再依次用10倍量的0.5mol/LHCl和0.5mol/LNaOH溶液充分搅拌处理30min。

然后用去离子水洗至中性,最后分别用0.1mol/L及0.01mol/L的pH=7.0的磷酸缓冲液处理1-2h,滤干,备用。

取经培养40-50h的米麯扩大麯,用其6倍量的支离子水分2次提取,提取液用2mol/L 的NaOH溶液调pH至6.7-7.0。

然后按100L酶液和1kg湿DEAE-sephadex A-50的比例混合,于0-4℃搅拌吸附4-5h后,过滤取DEAE-sephadexA-50,并分别用去离子水0.1mol/LNaAc 溶液、0.01mol/L的pH=7.0的磷酸缓冲液洗涤3-4次。

过滤得固定化氨基酰化酶,加1%甲苯放入冷库中贮存备用。

酶水解:在1000L水解罐中,加入700L0.1mol/L的Ac-DL-phe钠盐溶液,再逐步加入6mol/L的HCl调溶液pH至6.7-7.0,再加入15-20kg固定化氨基酰化酶,维持50℃约4h进行酶选择性水解反应后,过滤取滤液,得酶水解液(含本品和Ac-D-phe混合液)。

分离:将酶水解液用6mol/L的HCl调pH至4.8-5.1,减压浓缩至35L左右,并将其放置于0℃结晶过夜,过滤取结晶,用10L冷乙醇洗涤,于80℃烘干3-4h,得本品的粗品,滤液和洗涤液合并,减压浓缩至20L左右,得Ac-D-phe溶液,待外消旋化后再重复进行酶水解、分离。

Ac-D-phe的外消旋化:将Ac-D-phe溶液60L,加入100L反应罐中,加入醋酐18.5L,在25-45℃,搅拌30min,冷却放置6h。

再用浓HCl调pH值至1.5-2.0,5℃结晶过夜,过滤取结晶,水洗,滤干40℃真空干燥,得Ac-DL-phe。

精制:在100L反应罐中,加入5kg本品的粗品,加50L去离子水,加热至100℃,搅拌使其全溶,再加入药用活性炭0.25kg,搅拌脱色半小时后,趁热过滤,滤液移入200L 结晶罐中,冷却至40℃,加入50L,40℃的95%乙醇,用6mol/L的HCl调pH至5.48,于0℃结晶过夜,过滤取结晶,用95%乙醇洗涤,抽干,80℃干燥3-4h,得本品的成品。

母液再回收。

(2)苯乙醛法:适用Bucherer反应,生成苯甲基乙内酰脲,然后碱性解得DL-苯丙氨酸(DL-phe)。

将DL-phe与醋酐作用生成Ac-DL-phe后,按上述方法进行拆分,可得本品。

2.L-苯丙氨酸(63-91-2)的质量标准:中国药典2000年版指标名称指标C9H11O2含量/% ≥98.5比旋度(20mg/mLH2O) -33.0°~-35.0°溶液颜色、澄清度无色澄清溶液的透光率(0.50g/25mLH2O,430nm)/% ≥98PH值 5.4~6.0氯化物/% ≤0.02硫酸盐/% ≤0.02铵盐/% ≤0.02其他氨基酸/% ≤0.02干燥失重/% ≤0.2炽灼残渣/% ≤0.1重金属≤0.0002铁盐/% ≤0.001砷盐/% ≤0.0002热原符合规定3.贮藏:密闭保存。

4.注意事项:可影响甲状腺激素和毛发、皮肤的黑色素。

最低需求量(mg/kg·d):成年男子31,幼儿169。

5.L-苯丙氨酸(63-91-2)的推荐用量:(1)占食品中总蛋白量的5.8%。

(2)FEMA(mg/kg):焙烤食品110;冷冻乳品60.0;肉制品10.0;软糖268;明胶、布丁60.0;乳制品66.0;调味品10.0;糖果和糖霜268;甜沙司220。

6.鉴定试验:(1)取本品的水溶液(1→1000)5mL,加重铬酸钾溶液(1→1000)1mL煮沸,产生特有的臭气②。

(2)取本品水溶液(1→1000)5mL,加茚三酮试液1mL,加热3min,呈现红紫~蓝紫色。

(3)取本品10mg,加硝酸钾0.5g及硫酸2mL,水浴加热20min后,加盐酸羟胺溶液(1→10)5mL,在冰水中放置10min冷却后,立即加40%氢氧化钠溶液8mL,放置,呈现红紫色③。

熔点270-275 °C7.L-苯丙氨酸(63-91-2)的纯度试验:(1)溶解性:将本品0.2g溶于20mL水中,无色,其浊度应在透明以下。

(2)酸碱性:本品水溶液(1→100)的pH值用玻璃电极法测定必须是5.4~6.0④。

酸度取本品0.20g,加水20ml溶解后,依法测定(附录ⅥH),pH值应为5.4-6.0。

(3)比旋光度:本品在105℃干燥3h后,精确称量约1g,溶在水中至50mL,测定此液旋光度必须是-33~-35℃。

(4)氯化物:取本品0.5g,进行氯化物的常规试验,其量在0.01mol/L盐酸0.3mL 对应量以下⑤。

(5)铵盐:按"L-天门冬氨酸钠"的纯度试验(5)进行,但氨标准溶液用2mL⑥。

(6)砷:取本品0.5g,加2mol/L盐酸10mL,作为检液进行砷的常规试验,应符合要求⑦。

(7)重金属:取本品1g,加稀醋酸2mL及水40mL溶解,作为检液进行重金属的常规试验,其量必须在0.002%以下⑧。

(8)其它氨基酸:按"L-天门冬氨酸钠"的纯度试验(8)进行⑨。

(9)干燥失重:本品在105℃干燥3h,失重应在0.3%以下。

(10)强热残留物:本品的强热残留物应在0.1%以下。

非水滴定(11)定量法:本品在105℃干燥3h后,精确称量约0.3g,以下按"DL-丙氨酸"的定量法进行。

0.1mol/L高氯酸溶液1mL=16.52mg的C9H11NO2温度0℃20℃40℃60℃80℃100℃溶解度 1.98 2.74 3.77 5.20 7.18 9.90含量测定: 取本品约0.13g,精密称定,加无水甲酸3ml溶解后,加冰醋酸50ml,照电位滴定法(附录ⅦA),用高氨酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。

每1ml高氯酸滴定液(0.1mol/L)相当于16.52mg的C9H11NO2。

注解①本品对水的溶解度(g/dL)如上:②苯丙氨酸用重酪酸钾氧化,引起脱氨、脱碳酸生成苯乙醛。

此物有风信子样的香气,故可用于鉴别苯丙氨酸。

③将苯丙氨酸硝基化在碱性条件下与羟胺作用使其发色。

可用作定量法(→定量)。

④本品的解离常数pKCOOH=1.83 pKNH3+=9.13,pI=5.48。

⑤Cl的限量是0.021%。

⑥NH4的限量是0.02%。

⑦As2O3的限量是2ppm。

⑧Pb的限量是20ppm。

⑨在本条件下苯丙氨酸的Rf值约0.61。

其它的氨基酸的检测界限,在酸性、中性氨基酸中大约是0.05~0.1μg。

8.其他:①疏水参数计算参考值(XlogP):-1.5;②氢键供体数量:2;③氢键受体数量:3;④可旋转化学键数量:3;⑤拓扑分子极性表面积(TPSA):63.3;⑥重原子数量:12。

L苯丙氨酸红外测定羧基吸收峰:1600 ㎝-1羧酸负离子吸收峰:1720 ㎝-1溶液的透光率取本品0.50g,加水25ml溶解后,照紫外-可见分光光度法(附录ⅣA),在430nm的波长处测定透光率,不得低于98.0%。

L-苯丙氨酸(63-91-2)质谱(MS)。

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