显微镜下霉菌(黑曲霉、根霉、青霉)形态观察图片只是课件
霉菌的培养与形态观察
山东大学实验报告
20年 月 日
姓名 系年级 学号
科目 题 目 组别
同组者:
第 1 页 共 5 页 微生物学实验报告·张连升
一、【目的要求】
1. 学习并掌握霉菌的形态观察法——小室培养法;
2. 了解四类常见霉菌(青、根、毛、曲霉)的形态特征;
3. 巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
二、【实验原理】
1. 霉菌可产生分枝的菌丝体,分为基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据(本次实验观察青霉、曲霉、根霉和毛霉菌四种霉菌)。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约 3-10μm),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。
2. 观察霉菌的形态有多种方法,常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)。
3. 载玻片培养观察法(小室培养法):用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。
三、【实验器材】
1. 菌种:
曲霉,青霉,根霉和毛霉培养 7d 的马铃薯琼脂平板培养物
2. 培养基:
马铃薯培养基(简称PDA)(配方见附表)
3. 仪器和其他用品:
平皿,载玻片,盖玻片,无菌吸管,U 型玻璃棒,解剖刀,镊子,50%乙醇,20%甘油,显微镜,接种环,酒精灯等
四、【实验内容】
1. 配培养基:根据报告后附录准确称取实验所需各种物质的质量,配置PDA培养基150ml,121℃灭菌20分钟;
实训七 霉菌的形态观察
实训七 霉菌的形态观察
一、实验目的
1、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法;
2、了解常见霉菌如青霉、黑曲霉、毛霉、根霉的基本形态特征;
3、学会用直接制片观察法和载玻片培养法观察霉菌形态。
二、实验原理
(一)霉菌形态特征
霉菌是真核微生物,由复杂的菌丝体组成。菌丝体为无色透明或暗褐色至黑色,或呈现鲜艳的颜色。菌丝较粗大,皆呈管状,分枝或不分枝。固体培养基上的霉菌菌丝可分为营养菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝。
①营养菌丝,深入培养基内吸收营养物质;
②气生菌丝,向空中生长的营养菌丝;
③繁殖菌丝,部分气生菌丝发育到一定阶段,分化为繁殖菌丝,产生孢子。繁殖菌丝及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
根据菌丝中是否存在隔膜,可把霉菌菌丝分成无隔膜菌丝和有隔膜菌丝两类。低等真菌的菌丝无隔膜,整团菌丝体就是一个单细胞,其中含有多个细胞核。高等真菌的菌丝有隔膜,被隔膜隔开的一段菌丝就是一个细胞,菌丝体由很多个细胞组成,每个细胞内有一个或多个细胞核。隔膜上有一至多个小孔,使细胞间的细胞质和营养物质可以相互沟通。
(二)霉菌菌落特征
霉菌的菌落较疏松,常呈绒毛状(曲霉)、棉絮状(毛霉)、蜘蛛网状(根霉)或毡毯状(青霉)的菌落。通常菌落大小比细菌和放线菌菌落大几倍到几十倍。在固体培养基上菌落最初通常是白色或浅色,长出各种颜色的孢子后,根据孢子的不同形状、构造和颜色,菌落表面呈不同结构和色泽,如黄、绿、青、黑、橙等。有些霉菌的培养基正面和反面呈现不同的颜色,这是因为菌丝分泌一些水溶性色素扩散到培养基内。在不同成分的培养基上,同一霉菌可形成不同特征的菌落,但不同霉菌在固定的培养基上形成菌落的形状、大小、颜色等特征是稳定的,因此菌落特征是鉴定霉菌的重要依据之一。
(三)霉菌的形态观察方法
霉菌的菌丝较粗大,细胞易收缩变形,而且孢子容易分散,所以常用乳酸石炭酸棉蓝染色液制片,可使细胞不变形。染液呈蓝色,可增强反差,同时具有防腐作用,且不易干燥,防止孢子飞散,并能保持较长时间。若用水封片,菌丝会因渗透作用膨胀,水也易使菌丝、孢子和气泡混为一团,影响观察。
实验三 酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察
实验三 酵母菌、霉菌、放线菌的形态观察
一 目的要求
1.观察酵母菌的个体形态及出芽生殖方式,学习区分酵母菌死活细胞的实验方法。
2.掌握酵母菌的菌落特征及其与细菌菌落的区别。
3.学会识别霉菌的菌落特征,掌握霉菌的乳酸石炭酸制片法。
4.学习观察霉菌个体形态及各种无性孢子的方法。
5.学会观察放线菌的菌落特征,个体形态及其繁殖方式。
二 实验原理
1.酵母菌是不运动的单细胞真核微生物,多数是圆形或椭圆形,其大小通常比常见细菌大几倍甚至十几倍。用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型,因此,具有还原能力的酵母活细胞是无色的、而死细胞或代谢作用微弱的衰老细胞则呈蓝色或淡蓝色,借此即可对酵母菌的死细胞和活细胞进行鉴别。
2.霉菌形态比细菌、放线菌复杂,个体比较大,具有分支的菌丝体和分化的繁殖器官。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。因此,在观察时要注意菌 丝直径大小,菌丝体有无隔膜,营养菌丝有无假根,无性繁殖形成的孢子是那一种?孢子是怎样着生的?
3.放线菌是指能形成分枝丝状体或菌丝体的一类革兰氏阳性细菌。常见放线菌大多能形成菌丝体,紧贴培养 基表面或深入培养基内生长的叫基内菌丝,基内菌丝生长到一定阶段还能向空气中生长出气生菌丝,并进一步分化产生孢子丝及孢子。孢子的表面光滑或粗糙、圆或椭圆,孢子有各种颜色,这些形态特点都是鉴定放线菌
的重要依据。
三 实验材料
1.菌种
(1)啤酒酵母、面包酵母、裂殖酵母、热带假丝酵母;
(2)毛霉、黑根霉、青霉、黑曲霉;
(3)白色链霉菌、红色链霉菌
2. 0.1%的美蓝染色液,乳酸石炭酸溶液、乳酸石炭酸棉蓝溶液, 芽孢染色液、无菌水、盖玻片、载玻片,接种钩,接种铲。
四 内容与步骤
1.酵母菌
(1)菌落特征和菌苔特征的观察。观察菌落表面干燥或湿润、隆起形状、边缘整齐度、大小、颜色 等,并用接种环挑菌,注意与培养基结合是否紧密。取斜面培养的啤酒酵母、面包酵母、热带假 丝酵母观察菌苔特征。
2023年霉菌实验报告
2023年霉菌实验报告
2023年霉菌实验报告1
一.实验目的
1.掌握配制马铃薯培养基(PDA)的一般方法。
2.学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
3.了解并掌握四类霉菌(根霉、毛霉、曲霉、青霉)的基本形态。
二.实验原理
1.霉菌
霉菌是可产生复杂分枝的菌丝体,其菌丝分基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。
霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约3~10μm),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。本实验采用毛霉、青霉,曲霉,根霉四种常见的霉菌作为菌种进行观察。
2.小室培养法
观察霉菌的形态有多种方法,常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法,本次实验采用载玻片培养观察法(小室培养法)。
用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上,沿琼脂边缘接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片横向生长。培养一定时间后,将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌自然生长状态,还便于观察不同发育期的培养物。 三.实验器材
1.菌种
曲霉(Aspergillussp.),青霉(Penicilliumsp.),毛霉(Mucorsp.)和根霉(Rhizopussp.)培养48h的马铃薯琼脂(PDA)斜面培养物。
2.培养基及试剂
马铃薯琼脂(PDA),20%甘油(无菌),乙醇。
3.仪器及其它用品
无菌操作台,解剖刀,镊子,无菌吸管,U型玻璃棒,普通光学显微镜,擦镜纸,绸布,酒精灯,载玻片,接种针,培养皿等。
四.操作步骤
1.培养基的配制
按附录所示配方称取PDA各组分,先将马铃薯去皮,切成小块称取20g煮沸
姓名系年级?学号?组别科目?题目霉菌的形态观察
【细菌菌落特征】 常见细菌特征性菌落
1
【细菌菌落特征】 常见细菌特征性菌落
细菌,酵母,霉菌的形态与菌落特征观察
实验四、细菌,酵母,霉菌的形态与菌落特征观察
一、实验目的
细菌:观察食品中常见细菌的平板菌落特征,了解细菌的菌落在细菌形态学检定上的重要性 酵母菌:1.学习并掌握观察酵母菌的形态及出芽繁殖的基本方式
2.学习区分酵母的死活细胞的实验方法
3.观察酵母的平板菌落特征,了解酵母菌的菌落在真菌形态学检定上的重要性
霉菌:1.学习并掌握观察四类常见霉菌形态特征的基本方法
2.掌握青霉,曲霉的小室栽片培养法,以便更好地观察其个体形态
3.观察霉菌的平板菌落特征,了解霉菌的菌落特征在丝状真菌形态学检定上的重要性
二、实验原理
1.细菌:将单个微生物细胞或多个同种细胞接种于固体培养基表面,经适宜条件培养,以母细胞为中心,在有限空间中大量繁殖,扩展成一堆肉眼可见的有一定形态构造的子细胞群落,成为菌落。若将某一纯种细胞大量密集接种于固体培养基表面,菌体生长的各菌落连接成片,称为菌苔。各种细菌在平板上生成的菌落均具有一定特征,对细菌的分类,鉴定有重要意义,菌落主要用于微生物的分离,纯化,鉴定,计数等研究和选种,育种等实际工作中。
2.酵母菌:以出芽繁殖为主要特征的不运动的单细胞真核微生物,其细胞核与细胞质有明显分化,个体大小比常见细菌大几倍甚至几十倍,酵母菌的形态通常有球状,卵圆状,椭圆状,柱状,或香肠状等多种。酵母菌的无性繁殖主要有芽殖,裂殖与产生掷孢子和厚垣孢子。有性繁殖通过结合产生子囊孢子。酵母菌的母细胞在一系列的芽殖后若长大的子细胞与母细胞不分离,就会形成藕节状的假菌丝,称假丝酵母。 美蓝是一种无毒的弱氧化剂染料,其氧化型呈蓝色,还原型呈无色。用美蓝对酵母的活细胞进行染色时,由于细胞的新陈代谢作用,细胞内具有较强的还原能力,能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。 2
实验七 霉菌的培养和观察
实验七 霉菌的培养和观察
摘要
通过在一定固定环境下培养根霉,毛霉,曲霉,青霉四种霉菌,先通过菌种的外形对其有一个“宏观”的认识,然后再在显微镜低倍或高倍镜下分别观察四种菌的形态,孢子囊及孢子形态,菌丝形态等方面。发现根霉,曲霉和青霉菌丝均有横隔;青霉的分生孢子小梗呈扫帚状等现象。
关键词
土豆培养基(PDA) 分生孢子梗(Conidiophore) 载片培养
一、 实验目的
(1) 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法。
(2) 了解四类霉菌(根霉、毛霉、黑曲霉、青霉)的基本形态。
二、 实验原理
霉菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和繁殖菌丝组成,其菌丝比细菌及放线菌粗几倍到几十倍。可以采取直接制片和透明胶带法观察,也可以采取载玻片培养观察法,通过无菌操作将薄层培养基琼脂置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,使菌丝体在盖玻片和载玻片之间的培养基中生长,将培养物直接置于显微镜下可观察到霉菌自然生长状态并可连续观察不同发育期的菌体结构特征变化。对霉菌可利用乳酸石炭酸棉蓝染液进行染色,盖上盖玻片后制成霉菌制片镜检。石炭酸可以杀死菌体及孢子并可防腐,乳酸可保持菌体不变形,棉蓝使菌体着色。同时,这种霉菌制片不易干燥,能防止
孢子飞散,用树胶封固后可制成永久标本长期保存。
三、 实验器材
1、菌种
根霉(Rhizopus),毛霉(Mucor),黑曲霉(Aspergillus niger),青霉(Penicillium)
2、试剂
马铃薯20g,蔗糖2g,琼脂2g,水100mL,20%甘油等。
3、仪器
分析天平,玻璃棒,三角瓶,小烧杯,加热器,漏斗,纱布,培养皿,载玻片,盖玻片,U 型玻棒,解剖刀,镊子,接种环,移液管,酒精灯,显微镜等。
四、 实验内容
(1) 配制马铃薯培养基
配制200ml马铃薯培养基(PDA),其成分配比及配制方法见附录。灭菌后无菌操作,取培养基分别倒少量于灭菌培养皿中,使之凝固成薄层。再将这一层培养基用解剖刀切割为若干1cm²左右的琼脂块。
霉菌的形态观察
实验三、霉菌的形态观察
一、实验目的:
(1)观察霉菌的群落特征
(2)观察霉菌个体形态及各种无性孢子的形态
(3)掌握霉菌的制片方法
二、实验原理:
霉菌是由许多较之在一起的菌丝体构成。在超市的条件下,霉菌可以生长出丝状,绒毛状或蜘蛛网状的菌丝体。单个菌丝在显微镜下观察呈管状,有的霉菌其菌丝有横隔膜,将菌丝分割为多细胞,成为有隔菌丝。有点霉菌,其菌丝没有横隔膜,称为无隔菌丝。菌丝的直径比一般细菌和放线菌菌丝大几倍到几十倍。菌落形态较大,质地较疏松,其疏松程度不等,颜色各异。菌丝体经制片后可用低倍或高倍显微镜观察。在观察时,要注意菌丝直径大小,菌丝体有无横隔膜,营养菌丝有无假根,无性繁殖或有性繁殖时形成的孢子种类及着生方式。
由于霉菌的菌丝较大,而且孢子容易飞散,如将菌丝体制与水中易变形,故观察时用浸片法将其置于乳酸石碳酸棉溶液中、菌丝和孢子染成蓝色,保持菌丝体圆形,使细胞不易干燥,并有杀菌作用。
三、实验材料:
(1)菌种:产黄青霉、黄曲霉、黑根霉
(2)时间和溶液:乳酸石炭酸棉溶液
(3)仪器和其他物品:显微镜、接种环、载片、擦镜纸等
四、实验内容:
(1)霉菌菌落特征观察
大小 菌丝高低 生长密度 孢子颜色 菌落表面
产黄青霉 较大 较矮 密 黄绿 絮状
黄曲霉 较小 较高 较密 白 絮状
黑根霉 大 高 密 白 絮状
(2)个体观察
产黄青霉:顶囊 分生孢子梗 分生孢子小梗 分生孢子 有横隔膜
黄曲霉:分生孢子梗 分生孢子小梗 分生孢子 有横隔膜
黑根霉:假根 匍匐枝 孢子顶囊 孢子囊舟 孢子囊 孢子囊孢子
五、实验结果:
六、讨论
(1)霉菌的无性繁殖和有性繁殖的孢子各有几种?
无性繁殖——无形孢子:游动孢子、包囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子、芽孢子掷孢子
有性繁殖——有性孢子:卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子
(2)细菌、放线菌、霉菌菌落特征如何识别?
工业用霉菌分类
工业用霉菌分类
凡生长在营养基质上形成绒毛状、网状或絮状菌丝的真菌统称为霉菌。霉菌在自然界分布很广,大量存在于土壤、空气、水和生物体内外等处。霉菌喜偏酸性环境。大多数为好氧性微生物。多腐生,少数寄生。工业上常用的霉菌有藻状菌纲的根霉、毛霉、犁头霉;子囊菌纲的红曲霉;半知茵类的曲霉、青霉等。
1,根霉(Rhizopus)
根霉在自然界分布很广,是一种常见的霉菌。它对环境的适应性很强,生长极迅速。幼龄菌落为白色,棉絮状。中期为灰黑色。老熟后菌丝丛中密布黑色小点,即孢子囊。菌丝无
横隔,为单细胞真菌。
在培养基上生长时,由营养菌丝体产生弧形生长的匍匐菌丝,向四周蔓延。匍匐菌丝接触培养基处,分化成一丛假根。从假根着生处向上生出直立的孢子囊柄,其顶端膨大形成圆形的囊,称为孢子襄。裹内生有许多孢子。成熟后的孢子囊壁破裂,释放出孢子。
根霉在生命活动中分泌的淀粉酶,能将淀粉转化为糖。因此,根霉可作为常用的糖化菌种。我国民间酿制甜酒用的小曲主要含有根霉。由于根霉能分泌丰富的淀粉酶,而且又含有酒化酶,所以在生产中可边糖化边发酵。又因为根酶生长要求的温度较高,因而适于在高温季节使用。
根霉的应用十分广泛。目前常用的菌种有米根霉、华根霉、河内根霉和甘薯根霉。
(1)米根霉(Rhizopus oryzae) 米根霉的最适温度37℃,41℃时还能生长。米根霉的淀粉酶活力极强,多作糖化菌使用。也具有酒精发酵能力及蛋白质分解能力。大量存在于酒药与酒曲中。此菌由于耐高温,特别为在夏季生产豆腐乳提供了方便条件,解决了豆腐乳旧法生产只能在冬季进行的困难。
(2)华根霉(Rhizopus chinentis) 华根霉的最适温度为30℃。当发酵温度达45℃时,一般还能生长。此种菌淀粉液化力强,有溶胶性。能产生酒精、芳香脂类等物质。在酒药与酒曲中大量存在。它是酿酒所必需的主要霉菌,也是酸性蛋白酶和豆腐乳生产中的主要菌种。
放线菌和霉菌的形态观察
实验四 放线菌和霉菌的形态观察
实验报告
一.实验目的
1.学习并掌握微生物的制片及简单染色的基本技术。
2.初步了解细菌﹑放线菌﹑酵母菌及霉菌的形态特征和相互区别。3.巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
二.实验原理
对个体较小的细菌进行制片时采取涂片法,通过涂抹使细胞个体在载玻片上均匀分布,避免菌体堆积面无法观察个体形态,通过加热固定使细胞质凝固,使细胞固定在载玻片上,这种加热处理还可以杀死大多数细菌面且不破坏细胞形态。
放线菌菌丝体由基内菌丝、气生菌丝和孢子丝组成,制片时不采取涂片法,以免破坏细胞及菌丝体形态。通常采用插片法或玻璃纸法并结合菌丝体简单染色进行观察。在插片法中,首先将灭菌盖玻片插入接种有放线菌的平板,使放线菌沿盖玻片和培养基交接处生长面附着在盖玻片上,取出盖玻片可直接在显微镜下观察放线菌在自然生长状态下的形态特征,而且有利于对不同生长时期的放线菌形态进行观察。在玻璃纸法中,采用的玻璃纸是一种透明的半透膜,将放线菌菌种接种在覆盖在固体培养基表面的玻璃纸上,水分及小分子营养物质可透过玻璃纸被菌体吸收利用,而菌丝不能穿过玻璃纸而与培养基分离,观察时只要揭下玻璃纸转移到载玻片上,即可镜检观察。由于孢子丝形态,孢子排列及形状是放线菌重要的分类学指标,可采用印片法将放线菌菌落或菌苔表面的孢子丝印在载玻片上,经简单染色后观察。
单细胞的酵母菌个体是常见细菌的几倍甚至几十倍,大多数采取出芽方式进行无性繁殖,也可以通过接合产生子囊孢子进行有性繁殖。由于细胞个体大,采取涂片的方法制片有可能损伤细胞,一般通过美蓝染液水浸片法或水–碘液浸片法来观察酵母菌形态及出芽生殖方式。同时,采用美蓝染液水浸片法还可以对酵母菌的死、活细胞进行鉴别。美蓝对细胞无毒,其氧化型呈蓝色,还原型无色。由于新陈代谢,活细胞胞内有较强还原能力,使美蓝由蓝色氧化型转变成无色的还原型,染色后活细胞呈无色。死细胞或代谢能力微弱的衰老细胞胞内还原能力弱,染色后细胞呈蓝色或淡蓝色。
霉菌形态观察实验报告
一、实验目的
1. 学习并掌握观察霉菌形态的基本方法;
2. 了解四类常见霉菌(曲霉、毛霉、青霉、根霉)的基本形态特征;
3. 巩固显微镜操作技术及无菌操作技术。
二、实验原理
霉菌属于真菌的一种,可产生分枝的菌丝体,分为基内菌丝和气生菌丝。气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比细菌和放线菌粗得多(约3~10μm),常是细菌菌体宽度的几倍至几十倍,因此,用低倍显微镜即可观察。
三、实验器材
1. 菌种:曲霉(Aspergillus sp.)、青霉、根霉(Rhizopus sp.)、毛霉(Mucor sp.);
2. 培养基:马铃薯琼脂平板;
3. 染色剂:乳酸石炭酸棉蓝染色液;
4. 实验器材:载玻片、盖玻片、接种针、显微镜、无菌操作台、酒精灯、镊子、无菌水等。
四、实验步骤
1. 霉菌接种
(1)将曲霉、青霉、根霉、毛霉分别接种于马铃薯琼脂平板;
(2)置于恒温培养箱中,培养条件为25℃、湿度70%;
(3)培养2~5天后,观察菌落特征。
2. 霉菌制片
(1)用无菌操作将培养好的霉菌菌落挑取少量;
(2)将霉菌菌落涂布于载玻片上,用盖玻片轻轻压平; (3)将载玻片置于乳酸石炭酸棉蓝染色液中,染色3~5分钟;
(4)取出载玻片,用无菌水冲洗干净,晾干。
3. 霉菌观察
(1)将制片置于显微镜下,用低倍镜观察霉菌菌落特征;
(2)观察菌丝的粗细、颜色、分隔情况,以及孢子的形状、大小、颜色等;
(3)对比四类常见霉菌的形态特征。
五、实验结果与分析
1. 菌落特征观察
(1)曲霉:菌落呈放射状,菌丝呈淡黄色,孢子呈球形,颜色为绿色;
(2)青霉:菌落呈圆形,菌丝呈蓝绿色,孢子呈椭圆形,颜色为蓝绿色;
(3)根霉:菌落呈白色,菌丝呈白色,孢子呈椭圆形,颜色为白色;
(4)毛霉:菌落呈白色,菌丝呈白色,孢子呈球形,颜色为白色。
