残留溶剂检查方法的选择和验证要点
残留溶剂检查方法的选择和验证要点
一、概述
药物中的残留溶剂系指在原料药或辅料的生产中，以及制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。
按有机溶剂的毒性和对环境的危害，ICH将有机溶剂分为避免使用、限制使用、低毒和毒性依据尚不足四种情况。
因残留溶剂会影响产品的安全性，故需对其进行研究。
二、残留溶剂检查方法的选择
残留溶剂的测定一般采用气相色谱法，推荐使用毛细管色谱柱-顶空进样系统，当然也可以使用普通填充柱，溶液直接进样方法。
对不宜采用气相色谱法测定的含氮碱性化合物，如N-甲基吡咯烷酮等可采用其它方法，如离子色谱法等。
测定残留溶剂应从以下几个方面考虑：确定被测的有机溶剂、选择合适的色谱柱、制备供试品溶液和对照品溶液、选择合适的进样方法和满足检测灵敏度要求的检测器，下面分别进行介绍：1、确定被测的有机溶剂
根据制备工艺确定被测有机溶剂的范围。
通常应对制备工艺过程中使用的二类以上溶剂和重结晶用溶剂，以及根据工艺特点要求的其它溶剂进行残留量的研究。
建议对合成最后三步使用的三类溶剂也进行研究，这样能更好地对未知峰进行归属；对制剂过程中使用的有机溶剂也建议考察其残留情况，特别是缓、控释微丸包衣过程使用的有机溶剂更应引起注意。
残留溶剂的限度要求同ICH的规定。
2、选择合适的色谱柱
按照相似相溶的原理选择色谱柱。
毛细管柱有极性柱、非极性柱、弱极性柱和中等极性柱。
填充柱有高分子多孔小球或涂渍适宜固定液的填充柱。
测定含氮的碱性有机溶剂时，由于普通气相色谱仪的不锈钢管路、进样器衬管等对有机胺等含氮的碱性化合物具有较强的吸附作用，致使其检出的灵敏度降低。
通常采用弱极性色谱柱或经碱处理过的色谱柱分析含氮的碱性有机溶剂，如果采用胺分析专用柱进行分析，则效果更好。
3、供试品和对照品的制备
顶空进样方法通常以水为溶剂，对于非水溶性的药物，可采用DMF、DMSO或其他适宜溶剂。
溶液直接进样方法用水或合适的溶剂溶解样品。
制备供试品的溶剂的选择应兼顾供试品和被测有机溶剂的溶解度，且所用溶剂应不干扰被测有机溶剂的测定。
水是首选溶剂，特别是顶空进样系统。
因为水中不含有机溶剂，故干扰较少，
且在FID检测器上，以水为溶剂时，各残留溶剂的灵敏度最高。
当药物不溶于水时，可加入适当的酸或碱以增加药物的溶解度，最好选用不挥发的酸或碱。
以DMSO等为溶剂时，可加入一定量的水以增加检测的灵敏度，或用盐析的方法增加灵敏度。
测定含氮的碱性溶剂时，供试品溶液应不呈酸性，以免被测物与酸反应后不易汽化。
对照品的制备方法应与供试品的制备方法相同。
在申报资料中发现对照品（溶液）为直接进样，供试品则为固体直接顶空进样，供试品和对照品不但制备方法不同，而且进样方法和进样量也不同，无法进行比较。
提请申报单位注意。
4、供试品溶液和对照品溶液浓度的确定
配制供试品溶液的浓度应满足定量测定的需要，一般供试品取样量在0.1～1g之间。
限度检查时对照品溶液的浓度可按规定的限度配制，定量测定时按实际残留量配制，浓度相差最好以不超过2倍为宜。
5、检测器的选择
一般选用FID检测器，对含卤素的有机溶剂如氯仿等，采用ECD检测器可得到更高的灵敏度。
通常可根据药物溶剂的残留情况选择合适的检查方法。
当需要检查的有机溶剂数量不多，且极性差异较小时，可选择毛细管色谱柱-顶空进样-等温法。
当需要检查的有机溶剂数量较多，且极性、沸点差异较大时，可选择毛细管色谱柱-顶空进样-程序升温法；也可选择填充柱或适宜极性的毛细管柱直接进样法。
限度检查（一类、部分二类溶剂）时采用内标法或外标法；定量测定（含量超过0.1%的二类或需要定量控制的三类溶剂）时采用内标法或标准加入法。
顶空进样法还要对顶空温度和顶空时间进行选择。
顶空温度应根据溶解供试品溶剂的特性及供试品中残留溶剂的沸点选择。
以水为溶剂及测定低沸点残留溶剂时，顶空温度不宜超过85℃；测定沸点较高的残留溶剂时，通常选择较高的顶空温度；但此时应兼顾供试品的热分解特性，尽量避免供试品产生的挥发性热分解产物干扰测定结果。
以DMSO为溶剂时，顶空温度不宜超过115℃。
例如，在申报资料中发现，以水为溶剂，顶空温度为100℃，柱温60℃，结果高浓度的乙腈比低浓度的二氯甲烷的峰面积还小，原因是顶空温度太高，大量的水被蒸发（或浓度被稀释），随着水蒸汽的凝结，在水中溶解度大的乙腈的灵敏度下降，产生了与事实不符的实验结果。
顶空时间是要确保供试品溶液的气-液两相达到平衡，一般通过测定顶空时间与顶空气体浓度的浓度—时间曲线来确定。
顶空时间不宜过长，一般为30～45分钟，如果超过60min，可能引起顶空瓶的气密性变差,导致定量的准确性降低。
如果平衡时间选择10分钟，就不能保证气-液两相达到平衡。
注意对照品溶液与供试品溶液必须使用相同的顶空条件。
甲酰胺、2－甲氧基乙醇、2－乙氧基乙醇、乙二醇、N-甲基吡咯烷酮等不适宜用顶空法测定。
三、残留溶剂检查方法的验证
1、系统适用性试验
柱效：用被测物的色谱峰计算，填充柱法的理论板数应大于1000，毛细管色谱柱的理论板数应大于5000。
分离度：色谱图中被测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5。
重复性：以内标法测定时，对照品溶液连续进样5次，所得被测物与内标物峰面积之比的相对标准偏差(RSD)应不大于5%；以外标法测定时，所得被测物峰面积的相对标准偏差(RSD)应不大于10%。
2、准确度
在规定的范围内，至少9个测定结果。
设计三个不同的浓度进行测定，计算回收率和相对标准偏差，含量测定的回收率应大于98%。
进行回收率试验时，由于采用顶空进样系统，供试品与对照品处于不完全相同的基质中，此时应考虑气-液平衡过程中的基质效应。
标准加入法可以消除供试品溶液基质与对照品溶液基质不同所致的基质效应的影响，故通常采用标准加入法验证定量方法的准确性。
当标准加入法与其它定量方法的结果不一致时，应以标准加入法的结果为准。
标准加入法为精密称（量）取被测定的残留溶剂对照品适量，配制成适当浓度的对照品溶液，取一定量精密加入到供试品溶液中，根据外标法或内标法测定残留溶剂的含量，再扣除加入的对照品溶液的含量，即得供试液溶液中残留溶剂的含量；或按下式计算残留溶剂的量。
Cx=ΔCx/[（Ais/Ax）-1]，式中Cx为供试品中组分X的浓度；Ax为供试品中组分X的色谱峰面积；ΔCx为所加入的已知浓度的被测组分对照品；Ais为加入对照品后组分X的色谱峰面积。
3、专属性
对各种残留溶剂定位和进行混合溶剂的分离度试验，并附代表性图谱。
供试品中的未知杂质或其挥发性热降解产物易对残留溶剂的测定产生干扰。
如果未知杂质或其挥发性热降解产物与被测物的保留值相同（共出峰），或热降解产物与被测物的结构相同（如甲氧基热裂解产生甲醇）时，应通过试验排除干扰。
对第一类干扰，通常采用在另一种极性相反的色谱柱系统中对相同样品进行测定，比较不同色谱系统的测定结果的方法。
如二者结果一致，则可以排除测定中有共出峰的干扰；如二者结果不一致，则表明测定中有共出峰的干扰。
对第二类干扰，通常要通过测定已知不含该溶剂的对照样品来加以判断。
4、其它
可根据是限度检查还是定量测定选择具体的验证内容。
精密度：重复性和重现性，在规定范围内，至少9个测定结果。
设计三个不同的浓度进行测定。
一般保留时间的RSD〈1%，峰面积的RSD〈5%。
线性：至少制备5个浓度，R=0.99。
附回归方程、相关系数和线性图。
检测限和定量限：检测限为信噪比3:1或2:1时相应浓度或注入仪器的量。
定量测定时需验证定量限，其限度为信噪比10:1时相应浓度或注入仪器的量。
同时说明测试的过程和结果，并附图谱。
来源：国家食品药品监督管理总局药品审评中心。
残留溶剂分析方法验证方案
残留溶剂分析方法验证方案引言：残留溶剂是指在制药、食品、化妆品、印刷等工业生产过程中可能残留在最终产品中的有机溶剂。
残留溶剂的检测和分析对于保障产品质量和消费者的健康非常重要。
本文将介绍一个残留溶剂分析方法验证的方案，确保该方法能够准确、可靠地检测残留溶剂。
一、验证目的和范围1.验证目的：验证残留溶剂分析方法的准确性、精密度、特异性、灵敏度和线性范围等性能指标。
2.验证范围：本验证方案适用于残留溶剂分析方法的验证。
二、验证实验设计1.准备样品：收集一批含有已知浓度残留溶剂的样品，确保样品的浓度分布能够覆盖方法的线性范围。
2.准备溶剂标准品：根据实际需要，准备残留溶剂的标准品，浓度与样品中的残留溶剂浓度相对应。
3.确定分析方法：根据实际情况，选择一种适用的残留溶剂分析方法，确保该方法能够准确地检测样品中的残留溶剂。
4.验证参数：(1)准确性：通过对样品添加已知浓度的残留溶剂标准品，并进行多次重复测定，计算准确度参数。
(2)精密度：通过对样品进行多次重复测定，计算精密度参数。
(3)特异性：通过对样品进行干扰试验，判断分析方法是否能够准确检测出残留溶剂。
(4)灵敏度：通过对样品进行逐步稀释，测定最低检测限，并评估方法的灵敏度。
(5)线性范围：通过对样品不同浓度的残留溶剂进行测定，并绘制标准曲线，估算线性范围和相关系数。
三、验证结果和数据分析1.准确性参数：根据重复测定数据，计算准确度参数，如相对标准偏差（RSD）和回收率。
2.精密度参数：根据重复测定数据，计算精密度参数，如RSD。
3.特异性结果：记录干扰试验结果，判断方法是否能够准确检测出残留溶剂。
4.灵敏度结果：记录最低检测限，并评估方法的灵敏度。
5.线性范围结果：通过绘制标准曲线，记录线性范围和相关系数。
四、验证结论和建议1.准确性和精密度：根据验证结果，评估方法的准确性和精密度，并根据实际需要确定接受范围。
2.特异性：确认方法的特异性，并排除其他可能的干扰物。
残留溶剂分析方法验证方案DOC
残留溶剂分析方法验证方案DOC一、目的和范围该验证方案的目的是验证残留溶剂分析方法的适用性和可靠性，以确保其在实际样品中的准确性和精密性。
该验证方案适用于分析实验室中使用的残留溶剂分析方法，包括仪器和设备的检验的验证。
二、实验室设备和试剂1.装备：（1）高效液相色谱仪（HPLC）（2）气相色谱仪（GC）（3）质谱仪（MS）2.试剂：（1）残留溶剂标准物质（2）气相色谱柱（3）质谱校准物三、验证参数1.准确性：通过添加已知浓度的标准物质到实际样品中，检测其残留浓度与添加浓度之间的差异来评估方法的准确性。
2.精密性：通过重复测定同一样品多次，计算相对标准偏差（RSD）来评价方法的精确性和重复性。
3.线性范围：通过在一系列浓度范围内测定溶剂标准物质的浓度，并绘制峰面积与浓度的线性回归曲线来评估方法的线性范围。
4.检出限和定量限：通过测定稀释系列标准物质的峰高或峰面积，并根据信号噪声比进行计算来确定方法的检出限和定量限。
四、方法验证步骤1.准备一系列已知浓度的溶剂标准物质，尽量覆盖预计样品中的溶剂浓度范围。
2.对每个标准物质进行HPLC、GC和MS的分析，记录峰高或峰面积。
3.根据测定结果绘制标准曲线，并计算线性回归方程和相关系数。
4.确定方法的线性范围，并计算线性回归曲线的斜率、截距和相关系数。
5.随机选择多个实际样品并进行多次测定（至少3次），计算RSD。
6.将已知浓度的标准物质添加到实际样品中，分析其残留浓度，并与已知浓度进行比较，计算准确性。
7.测定不同浓度的稀释系列标准物质的峰高或峰面积，并计算检出限和定量限。
8.整理实验数据并进行统计分析，评估方法的可靠性和适用性。
五、验证结果与评价根据验证结果，对方法的准确性、精密性、线性、检出限和定量限进行评价。
如果结果符合规定的标准和要求，则证明方法可靠且可应用于实际样品中。
如果结果不符合要求，则需要对方法进行修正或重新验证。
六、记录和报告将验证过程的所有数据、结果和评价进行详细记录，形成验证报告。
溶剂残留测定法
(DMSO),聚乙二醇等，用顶空进样测定的灵敏度不如直接进样，不适宜 采用顶空法 。
三、残留溶剂的测定方法
2.溶液的制备：空白溶液，供试品溶液和对照品溶液
A. 溶解性（应重视）
供试品要能完全溶解 （特殊情况下，常温下不能溶解的能热溶解的也 行），对照品也要能完全溶解。通常以水为溶剂；对于非水溶性药物，可 采用N，N-二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亚砜(DMSO)或其他适宜溶剂。
(4)弱极性色谱柱：固定液为(5%)苯基-ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ95%)甲基聚硅氧烷(DB-5)、 (5%)二苯基-(95%)二甲基硅氧烷共聚物的毛细管柱等。
2. 填充柱
以直径为0.18-0.25mm的二乙烯苯-乙基乙烯苯型高分子多孔小球或 其他适宜的填料作为固定相。
三、残留溶剂的测定方法
1.如何根据已有的方法进行残留溶剂的检测？ A. 根据质量标准确定实验方案
30～60分钟； ③ 采用高沸点的溶剂（如DMF,DMSO）时，每次进样之后最好程序升
温时柱子高温烧一段时间。
三、残留溶剂的测定方法
④ 系统适用性试验
(1)用待测物的色谱峰计算，毛细管色谱柱的理论板数一般不低于 5000；填充柱的理论板数一般不低于1000。
(2)色谱图中，待测物色谱峰与其相邻色谱峰的分离度应大于1.5。拖 尾因子应≤2.0。
顶空平衡时间：一般为30～45分钟，以保证供试品溶液的气-液两相 有足够的时间达到平衡。顶空平衡时间通常不宜过长，如超过60分钟， 可能引起顶空瓶的气密性变差，导致定量准确性的降低。
对于生产过程中引入的有机溶剂，应在后续的生产环节予以有效去除。 除正文已明确列有“残留溶剂”检查的品种必须对生产过程中引入的有机 溶剂依法进行该项检查外，其他未在“残留溶剂”项下明确列出的有机溶 剂或未在正文中列有此项检查的各品种，如生产过程中引入或产品中残留 有机溶剂，均应按通则“0861 残留溶剂测定法”检查并应符合相应溶剂 的限度规定。
残留溶剂方法学验证方案
残留溶剂方法学验证方案残留溶剂是指在其中一种溶剂处理过程中，溶剂不能完全挥发，残留在处理物中的化合物。
残留溶剂的测试和分析对于保证产品质量和安全性非常重要。
下面是一个关于残留溶剂方法学验证方案的简要说明，包含实验步骤、仪器设备、数据处理和结果评估等。
1.实验目的：验证残留溶剂的测试方法是否准确可靠，适用于特定产品或材料的检测。
2.实验步骤：2.1样品准备：选取代表性的产品样品或材料样品，并按照标准或法规的要求制备样品。
2.2定量添加溶剂：根据实际应用情况，向样品中添加已知浓度的溶剂，以模拟实际环境中的残留情况。
2.3提取和浓缩：使用适当的提取方法（如固相萃取、溶剂萃取等）将残留溶剂从样品中提取出来，并将提取液浓缩。
2.4仪器分析：使用适当的分析仪器（如气相色谱-质谱联用仪、高效液相色谱仪等），对浓缩后的提取液进行定量分析。
3.仪器设备：3.1分析仪器：根据需要选择适当的分析仪器，如气相色谱-质谱联用仪（GC-MS）、高效液相色谱仪（HPLC）、液相色谱-质谱联用仪（LC-MS）等。
3.2样品制备设备：如研磨仪、超声波清洗器、离心机等，用于样品制备和处理。
4.数据处理：4.1标准曲线绘制：根据已知浓度的溶剂标准品，利用分析仪器进行测定，得到残留溶剂的峰面积与浓度之间的关系，绘制标准曲线。
4.2样品测定：将提取液注入分析仪器，进行测定。
根据标准曲线，计算样品中残留溶剂的浓度。
5.结果评估：5.1方法验证：通过实验结果，验证残留溶剂的测试方法是否能准确测定残留溶剂的浓度，并评估方法的重复性和精密度。
5.2检出限和定量限：根据实验结果，计算出测定方法的检出限和定量限，评估方法的敏感度和适用范围。
5.3结果分析：对于不同样品的测定结果，进行统计分析和比较，评估残留溶剂的含量是否符合标准要求。
5.4结论：根据实验结果，得出对于残留溶剂测试方法的验证结论，并提出改进建议。
以上为残留溶剂方法学验证方案的简要说明，具体实验细节和方法参数需要根据实际情况进行调整。
残留溶剂GC检查方法的设计验证
02
溶剂
03
温度
04
不分流进样
05
顶空瓶体积
八、提高灵敏度
利用盐析作用，即在水溶液中加入无机盐（硫酸钠）来改变挥发性组分的分配系数。常用高浓度，甚至用饱和浓度。盐析作用对极性组分的影响远大于对非极性组分的影响。
例如在水溶液样品溶剂中加入0.01mol/L氯化钠溶液可使甲醇、乙醇灵敏度提高5倍（这种方法不常用）。
不可研磨样品，必须原态取样
01
不可超声、不能加热溶解样品
02
样品置顶空瓶中压盖后可以超声、加热
03
样品与对照品配制方法一致，避免基质效应
04
前述三类溶剂取样量尽可能大，至少0.1g/ml
05
四、供试品制备
01
进样方式首选顶空，基线干净
02
卤代烃直接进样容易灭火
五、进样方式
ICH限度并不是最高要求
不主张使用污染性大、毒性大的溶媒！
前述三类溶剂如果顶空进样应选择K小的溶媒！
其次溶媒是否能溶解待测溶剂？
水、DMF、DMSO、不挥发酸碱溶液，不可使用盐酸液和氨水，顶空进样可选择在80~90°C加热能溶解样品的试剂。
苯、甲苯、三氯甲烷等水溶性不好的溶剂，可先用少量乙醇或甲醇溶解待查溶剂再用水稀释。
三、溶媒
直接进样：
水、合适的有机溶媒或混合液。对于非极性色谱柱，水对柱有影响，会缩短柱的使用寿命。
A
B
顶空小平加盖后可超声加热助溶
有报道加5%SDS助溶。
助溶方式：
不可超声或加热助溶＊ ，以免残留溶剂挥发；如果顶空进样，样品置顶空瓶封盖之后可以超声或加热溶解。
大颗粒样品不可以研磨取样，只能取原态样品（或冷冻粉碎）。
残留溶剂测定的要求和测定方法
GC条件与系统适用性试验 CHP05版之二
• 以直径为0.25～0.18mm的二乙烯苯－乙基乙 烯苯型高分子多孔小球作为固定相，柱温为80～ 170℃；并符合下列要求： (1) 用待测物的色谱峰计算的理论板数应大于 1000； (2) 以内标法测定时，内标物与待测物的两个 色谱峰的分离度应大于1.5； (3) 以内标法测定时，每个标准溶液进样5次， 所得待测物与内标物峰面积之比的 相对标准偏差 不大于5％；若以外标法测定,所得待测物峰面积 的相对标准偏差不大于10％。
标准溶液和供试品液的制备 CHP05版之三
•
精密称取各药品项下规定的有机溶剂和 内标物质适量，分别加入无有机物的水溶 解并配制成浓度为10.0μg/ml的标准及内标 贮备液。精密量取上述标准及内标贮备液 各0.1～1ml，加无有机物的水稀释至 10.0ml，混匀，即得。用外标法测定时只 量取标准贮备液稀释。 精密称取供试品0.1～1g,加无有机物的 水或合适的无有机物的水溶液使溶解，并 稀释至10.0ml，混匀，即得。
企标控制溶剂 DMF
实际检出 乙醇
A B C D
无
乙醇
DMF 甲醇、氯仿、甲 苯
乙醇、甲苯 无
30040701 30040702 30040703
E
041101 041102 041103
甲醇、乙醇、环 乙醇、乙醚 己烷、DMF、 DMSO
盐酸头孢他美酯残留溶剂的控制
厂家 A B C D E F G 申报生产工艺中涉及的溶剂 甲苯、二氯甲烷 甲苯、二氯甲烷 乙醇、丙酮 乙酸乙酯 实际检出的残留溶剂 异丙醇 异丙醇、石油醚 异丙醇 异丙醇
（3）确证：通常通过标准加入法已经可以确
定初步判定的残留溶剂种类的正确与否， 但对一些微量残留的一类溶剂或产品生产 工艺中未提及的溶剂，为慎重起见，可采 用气相－质谱联用或气相－红外光谱联用 技术对所检测到的残留溶剂做进一步的确 证。
残留溶剂方法验证方案
残留溶剂方法验证方案残留溶剂方法验证是一种常用的分析技术，用于检测和确定样品中残留的溶剂成分。
该方法主要通过提取和分离样品中的残留溶剂，并使用合适的分析仪器进行定性和定量分析。
本文将介绍残留溶剂方法验证的步骤和注意事项。
一、验证步骤1. 确定验证的目的和范围：首先需要明确验证的目的是为了确认样品中是否存在残留溶剂，以及残留溶剂的种类和含量。
范围包括验证的样品类型、溶剂种类、检测限和精确度要求等。
2. 选择合适的提取方法：根据样品的性质和溶剂的特点，选择合适的提取方法。
常用的提取方法包括溶剂浸提、固相微萃取、超声波提取等。
3. 分离和纯化：通过色谱技术或其他适当的分离方法，将提取得到的样品中的残留溶剂与其他组分分离开来，以便后续的定性和定量分析。
4. 分析仪器的选择和校准：选择合适的分析仪器进行残留溶剂的定性和定量分析。
常用的仪器包括气相色谱-质谱联用仪、液相色谱仪等。
在使用仪器前，需要进行校准和验证，确保分析结果的准确性和可靠性。
5. 定性和定量分析：根据仪器的分析原理和方法，进行残留溶剂的定性和定量分析。
定性分析主要是通过比对样品中残留溶剂的特征峰和质谱图，与标准品进行对比，确定残留溶剂的种类。
定量分析则是通过仪器的响应因子和标准曲线，计算出样品中残留溶剂的含量。
6. 数据处理和结果评定：根据分析结果，进行数据处理和统计分析，确定残留溶剂的含量是否符合规定的限量要求。
同时还要对分析的准确性和可靠性进行评定，包括重复性、中间精密度、回收率等指标。
7. 报告编制和归档：根据验证结果，编制验证报告，并将相关数据和记录进行归档。
报告中应包括验证的目的和范围、方法和仪器的选择、样品处理过程、分析结果和评价等内容。
二、注意事项1. 样品的选择和处理：样品应代表性，并且要注意样品的保存和处理方法，避免对残留溶剂的蒸发和降解。
2. 仪器的校准和验证：在使用仪器前，需要进行校准和验证，确保仪器的准确性和可靠性。
残留溶剂分析方法验证方案
***产品残留溶剂分析方法验证方案20**年**月验证方案的起草与审批方案实施日期：目录1.验证目的 (4)2.方法简介与确认范围 (4)3.标准品、供试品 (4)4.风险评估 (4)5.验证的可接受标准 (5)6.验证步骤 (6)6.1系统适应性 (6)6.2专属性 (6)6.3定量限与检测限 (7)6.4线性 (7)6.5准确度 (8)6.6精密度 (9)6.7范围 (9)6.8耐用性 (9)6.9样品测定 (10)7.偏差 (10)8.风险的接收与评审 (10)9.再验证 (10)10.确认结果评审和结论 (10)11.更改历史 (10)12. 附录 (10)1.验证目的根据法规的要求，分析方法应进行验证，证明采用的方法适合于相应的检测要求。
这个验证方案的目的是为验证提供具体方法参数、可接受标准和研究步骤。
2. 方法简介与确认范围***产品生产过程中用到有机溶剂乙醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、四氢呋喃，为了准确测定溶剂在成品中的残留量，现对该测定方法进行验证，验证包括方法的专属性、检测限与定量限、线性、范围、准确度、精密度及耐用性。
3. 标准品、供试品 3.1标准品3.2供试品4. 风险评估按照《质量风险管理规程》，质量控制部和质量管理部共同对分析方法进行了风险评风险评估人：评估日期：5.验证的可接受标准6.验证步骤6.1系统适应性精密称取乙醇200mg、丙酮200mg、二氯甲烷24mg、乙酸乙酯200mg、四氢呋喃28.8mg，置于已加入10ml二甲基亚砜的50ml量瓶中，用二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，作为对照溶液储备液；精密移取对照液储备液5ml，置于一100ml量瓶中，用二甲基亚砜稀释至刻度；精密移取5ml，置于20ml顶空瓶中，密封。
同法配制6份，连续顶空进样，记录色谱图，相邻组份之间的分离度R均应不小于1.5，各组份峰面积的相对标准偏差(RSD A)均应不大于10%。
6.2专属性a) 空白：精密移取二甲基亚砜5ml，置于20ml顶空瓶中，密封。
残留溶剂GC检查方法的设计验证
以下三点注意：
FID－质量型检测器，对有机物均有响应，只 是对难电离的卤代烃和氮/磷化合物灵敏度比 ECD、NPD检测器低很多。 ECD－半选择性的检测器，对多种类型化合 物均有响应。如果含有其他非卤代烃溶剂， 应进行系统适用性试验考察分离度。＊＊ 如果采用FID检测器，同时又采用填充柱测定 三氯甲烷，灵敏度达不到限度要求。＊
DM-35, DB-35, HP-35,SPB-35, BP-35, Rtx-35, ZB-35, 等
DM-1701, HP-1701, SPB-7, ZB-1701, Rtx-1701, CP-Sil19CB等
化学成分 100％二甲基 聚硅氧烷
5%苯基-甲基聚 硅氧烷
35%苯基65%甲基 聚硅氧烷
直接进样：
水、合适的有机溶媒或混合液。对于非极性 色谱柱，水对柱有影响，会缩短柱的使用寿 命。
助溶方式：
有报道加5%SDS助溶。 顶空小平加盖后可超声加热助溶
三、供试品溶液的配制
不可超声或加热助溶＊ ，以免残留溶剂 挥发；如果顶空进样，样品置顶空瓶封 盖之后可以超声或加热溶解。 大颗粒样品不可以研磨取样，只能取原 态样品（或冷冻粉碎）。
14%氰苯基 86%甲基聚硅 氧烷
中等/强极性
极性柱
极性柱
DB-225, HP-225, SP-225, BP-225, DB-23， Rtx-225, AT-225, OV－225等 化学成分 50％氰丙基甲 基聚硅氧烷 商品名
DB-WAX, HPINNOWAX, DB-WAXetr, CP-WAX,ZBWAX
五、色谱柱
非极性柱
弱极性柱
中低极性柱
中等极性柱
商品名
DM-1, DB-1, HP-1, SPB-1, BP-1, SE-30, Rtx-1, ZB-1, AT-1, CP-Sil5CB等
残留溶剂GC检查办法的设计与验证
七、进样方式
作为残留溶剂检查，顶空进样有许多优越性 ，不需要对样品进行特殊处理，不用担心样 品中不挥发组分对GC分析的影响。直接进样 对仪器要求低，由于部分实验室不具备顶空 进样器，该方法的应用也具普遍性。
当待测溶剂在有机相中的分配系数明显大于水相（ 例如三氯甲烷），对顶空进样来说采用有机相如 DMF为溶剂不是很好的选择（K大，灵敏度低）； 如果样品也只能在有机相中溶解，建议采用混合液 。
直接进样：
水、合适的有机溶媒或混合液。对于非极性 色谱柱，水对柱有影响，会缩短柱的使用寿 命。
助溶方式：
有报道加5%SDS助溶。 顶空小平加盖后可超声加热助溶
五、色谱柱
残留溶剂检查大多需要较高的分离度和检测 灵敏度，通常采用毛细管色谱柱。填充柱口 径大，造成溶剂峰扩散，检测灵敏度低＊。
实践证明，使用非极性至中等极性色谱柱， 配合适当柱温梯度可分离大部分有机溶剂。 通常当待查溶剂数目仅两、三种时，可用极 性较强的色谱柱，出峰快，分析时间短；当 溶剂数目较多时，还是优选非极性至中等极 性柱分离较好。
以下三点注意：
FID－质量型检测器，对有机物均有响应，只 是对难电离的卤代烃和氮/磷化合物灵敏度比 ECD、NPD检测器低很多。
ECD－半选择性的检测器，对多种类型化合 物均有响应。如果含有其他非卤代烃溶剂， 应进行系统适用性试验考察分离度。＊＊
如果采用FID检测器，同时又采用填充柱测定 三氯甲烷，灵敏度达不到限度要求。＊
四、顶空瓶中样品体积
顶空样品瓶中的样品体积（Vs）对分析结果影响很 大，因为它直接决定了相比β。