11级微生物及技术第1次作业

试述外毒素和内毒素性质及其作用的不同点。

（1）外毒素（exotoxin）有些细菌在其生命活动过程中产生毒素能释放到周围环境中，称为外毒素。产生外毒素的细菌主要是革兰氏阳性菌。如白喉杆菌、破伤风杆菌、肉毒杆菌、金黄色葡萄球菌以及少数革兰氏阴性菌。如痢疾杆菌、霍乱弧菌等。细菌外毒素有以下特点：①毒性强，如纯化肉毒杆菌外毒素结晶1mg可杀死2,000万只小白鼠，对人的最小致死量约为10-4mg，破伤风毒素对小白鼠的致死量为10-6mg，白喉毒素对豚鼠的致死量为10-3mg。②对机体组织有选择性的毒性，如白喉杆菌外毒素主要抑制蛋白质合成，特别是影响肽链延长，引发心肌炎、肾上腺出血及神经麻痹等；破伤风外毒素主要毒害脊髓前角运动神经细胞，引起所属肌肉的痉挛强直。③具有抗原性，外毒素的化学成分为蛋白质，有抗原性，即以外毒素刺激机体可产生大量的抗毒素，抗毒素能中和外毒素使其无毒。外毒素用甲醛处理后，脱毒变成类毒素，但仍保持抗原性。（2）内毒素（exotoxin）是革兰氏阴性菌的细胞壁成分，细菌在生活状态时不释放出来，只有当细菌死亡自溶或粘附在其它细胞时，才表现其毒性。内毒素的主要化学成分是脂多糖中的类脂A成分。内毒素的致病作用无特异性，即各种革兰氏阴性菌对人类引起基本相同的反应。少量内毒素可引起机体发热反应；大量内毒素进入血液，可使血管透性改变，局部出血，颗粒性白细胞增多或减少和体重下降，严惩毒时能导致内毒素性休克。内毒素毒性比外毒素小得多。内毒素是外源性致热原，它可能激活中性粒细胞等，使之释放出一种内源性热原质，作用于体温调节中枢引起发热。

单克隆抗体

单克隆抗体将所需要的抗体形成细胞选出并能在体外进行培养即可获得已知特异的单克隆抗体（1分）。部分形成的杂交细胞既能继续在体外培养条件下生长繁殖又能分泌抗SRBC抗体，称这种杂交细胞系为杂交瘤（1分）。这种杂交瘤细胞既具有骨髓瘤细胞能大量无限生长繁殖的特性，又具有抗体形成细胞合成和分泌抗体的能力。它们是由识别一种抗原决定簇的细胞克隆所产生的均一性抗体，故称之为单克隆抗体（1分）。

抗原提呈细胞

是一类重要的抗原呈递细胞，TD抗原需经单核吞噬细胞加工、处理后才能以膜表面抗原肽－MHC分子复合物形式由单核吞噬细胞提呈给具有相应抗原识别受体的T细胞，启动免疫应答。（2分）具有呈递抗原的这类细胞称为抗原呈递细胞（1分）。种类：单核吞噬细胞、树突状细胞、并指细胞、朗格汉斯细胞等（2分）。

类毒素

类毒素：外毒素经0.3%甲醛作用后，成为失去毒性而保留抗原性的类毒素。类毒素和外毒素抗原性强，剌激机体可产生抗毒素（2分）。因抗毒素能中和游离外毒素，故类毒素可用于预防接种，如破伤风类毒素等（1分）。

革兰氏染色

通过固定、涂片、干燥、染色（1分）（结晶紫、碘液、95%乙醇、复红）（1分）将细菌染成兰色革兰阳性菌；红色革兰阴性菌（1分）。

药物敏感试验

是在体外测定微生物对药物敏感程度的试验。(2分)连续稀释法和琼脂扩散法。(1分)

热原质

热原质即菌体中的脂多糖，大多是革兰氏阴性菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应，故名热原质（1分）。热原质耐高热，高压蒸汽灭菌不能使其破坏，加热（180℃4h；250℃45'；650℃1'）才使热原质失去作用（1分）。因此，在制备和使用生物制品、注射液、抗生素等过程中应严格无菌操作，防止细菌污染，保证无热原质存在（1分）。

高压蒸气灭菌法

是一种最常用、最有效的灭菌方法。利用密闭的蒸气锅，加热产生蒸气，不使之外溢，容器内随着蒸气压力的不断增加，温度也会随之提高（1分）。通常压力在103.4kPa（1.05Kg/cm2）时，容器内温度可达121.3℃，经15－30min，可杀死所有的细菌繁殖体和芽胞。凡耐高温、不怕的物品，如手术器械、敷料和一般培养基等，均可用此法灭菌。（2分）

卡介苗

用于预防结核病的减毒活疫苗。(1分)卡介二人将牛结核杆菌经13年长期人工培养，连续传代230代后，获得的细菌毒力高度减弱，仍保持免疫原性的变异株。(2分)

朊粒

朊病毒不具备病毒结构，称为感染性蛋白质。可引起人的震颤病、克雅病，另外还可引起人类慢性退化性功能紊乱病，老年痴呆症、多发性硬化症等。(3分)

干扰素

肿瘤和免疫调节干扰素(IFN)是个体出生后，由病毒或干扰素诱生剂剌激多种细胞主要是巨噬细胞、单核细胞、淋巴细胞后所产生的一种糖蛋白。（1.5分）可分为：α、β、γ三种(0.5分)，其功能是抗病毒、抗肿瘤和免疫调节（1分）。

何为同种异型抗原？常见的同种异型抗原有哪些？

同种异型抗原：在同一种属的不同个体之间，由于基因的不同，细胞表面的抗原结构也存在差异（2分）。例如人类的红细胞（ABO）、白细胞（HLA）、血小板、Rh血型抗原等组织上均有同种异型抗原存在（3分）。

简述细菌特殊结构及其生物学意义？

荚膜，鞭毛，菌毛，芽胞（2分）意义：有的与致病性有关：菌毛、荚膜；有的与细菌的形态鉴定有关：芽胞、鞭毛；有的与细菌的抵抗力有关：芽胞。（3分）

细菌群体生长繁殖可分为几个期?简述各期特点?

细菌群体的生长繁殖规律以细菌的生长曲线反映细菌的生长规律：（1分）迟缓期；对数期：典型，以此期为试验菌；稳定期；衰亡期（4分）。

简述药物敏感试验的步骤及注意事项？简述药物敏感试验的步骤及临床意义？

抑菌试验。K－B划线接种细菌；贴药敏纸片；培养及结果观察；对比进行判断敏感或耐药（3分）药敏纸片间的距离，纸片距平板边缘15mm，各纸片中心相距24mm；实验室试验条件经标准菌株监测稳定后，不要轻易变动（2分）。

细菌药物敏感试验是一种体外抑菌试验。以抑菌环的大小判断细菌对药物的敏感性，主要目的是：一是帮助临床医生选用效果最佳的抗生素药物进行治疗；二是进行流行病学调查，了解耐药菌株变异情况，为抗菌药物的社会应用提供依据。（2分）K－B划线接种细菌；贴药敏纸片；培养及结果观察；对比进行判断敏感或耐药（3分）。

何为细菌的热原质？有何临床意义？

热原质即菌体中的脂多糖，大多是革兰氏阴性菌产生的。注入人或动物体内能引起发热反应，故名热原质。热原质耐高热，高压蒸汽灭菌不能使其破坏，加热（180℃4h；250℃45'；650℃1'）才使热原质失去作用（3分）。意义：制备和使用生物制品、注射液、抗生素等过程中应严格无菌操作，防止细菌污染，保证无热原质存在（2分）。

简述全身感染及常见的类型？

机体发生感染后，病原菌及其毒素代谢产物向全身扩散，引起全身症状。(1分)毒血症、菌血症、败血症、脓毒血症(4分)

请简述霍乱肠毒素的组成及致病机制？

1. 霍乱肠毒素是目前已知的致泻毒素中最为强烈的毒素，是肠毒素的典型代表。由一个A亚单位和5个相同的B亚单位构成。B亚单位可与小

肠粘膜上皮细胞GM1神经节苷脂受体结合，介导A亚单位进入细胞，A亚单位在发挥毒性作用前需经蛋白酶作用裂解为A1和A2两条多肽。

A1作为腺苷二磷酸核糖基转移酶可使NAD（辅酶I）上的腺苷二磷酸核糖转移到G蛋白上，称GS，GS的活化可使细胞内cAMP水平升高，主动分泌Na+、K+、HCO3—和水，导致严重的腹泻与呕吐。(3分)2.鞭毛、菌毛及其它毒力因子霍乱弧菌活泼的鞭毛运动有助于细菌穿过肠粘膜表面粘液层而接近肠壁上皮细胞。(2分)

简述结核菌素试验的实际应用?

结核菌素试验一般使用旧结核菌素（简称OT）或精制纯蛋白衍生物(简称PPD)（1分）。试验法常规使用5个单位OT（2000倍稀释0.1ml）或PPD-S0.0001mg注入受试者前臂掌侧皮内，48～72小时内出现红肿硬节直径大于5毫米者为阳性，虽有红肿但无硬结或硬结直径不到5毫米者为阴性。（2分）应用于：受拭者处于原发感染早期，变态反应尚未发生，或正患严重的结核病如全身粟粒性结核和结核性脑膜炎时机无反应能力，或患其他严重疾病（麻疹、结节病、恶性肿瘤），如用过免疫抑制剂时，结核菌素反应均可转为阴性（2分）。

何为细胞因子及生物学活性？

细胞因子是机体的免疫细胞和非免疫细胞能合成和分泌小分子的多肽类因子，它们调节多种细胞生理功能，这些因子统称为细胞因子（2分）。细胞因子包括白介素、肿瘤坏死因子、干扰素等（1分）。生物活性：抗感染和抗肿瘤作用；免疫调节作用；剌激造血细胞增殖分化；参与调节炎症反应。（2分）