实验一 鸡新城疫疫苗(一)
尿囊膜贴在卵壳内壁上，用镊子夹住将其撕脱下来即
可。
胚胎：消毒、打开气室卵壳后，用镊子撕破卵壳膜和
绒毛尿囊膜，夹起胚胎，用剪刀剪断卵黄带，将胎儿
放灭菌容器内即可。
8.鸡胚接种注意事项
（1）接种材料一般都应按每毫升1000ＩＵ或μg加入 青、链霉素。
（2）接种位点应避开鸡胚、血管和胚头，以免针头 刺伤鸡胚而造成接种后的损伤性死亡。
实验一 鸡新城疫油乳剂灭活苗的制备技术（一）
新城疫病毒可以在鸡胚中大量增殖，收获的鸡胚
尿囊液中即含有新城疫活病毒，将收获的尿囊液经过
灭活，并加入佐剂，便制成了新城疫灭活疫苗。
目的和要求：
1.掌握鸡胚的孵化过程和鸡胚的接种途径、接 种方法； 2.掌握新城疫病毒在鸡胚尿囊腔的增殖过程， 掌握接毒和收毒的方法。
头约1cm左右。
4.病料接种：
若用鸡胚分离、培养病毒，则应选9～12日龄之
间的发育鸡胚。许多病毒，特别是大多数禽病毒都能
在鸡胚或鸭胚中生长繁殖。接种时应先在照蛋器下检 查鸡胚是否健康、活泼，并划出气室和接种部位。然 后严格消毒接种部位和气室（先用碘酊消毒，再用 70%酒精消毒），用打孔器打孔后，每胚接种处理好
水瓶中，使两种抗生素在生理盐水中的含量均
达到1000-2000 IU(μg)/ml。将注射用生理盐
水3-4ml注入一瓶新城疫Ⅳ系弱毒疫苗中，稀释。
3.照蛋定位 ： 接种前应在照蛋器下检查鸡胚，挑出死胚 和弱胚。对所有健康胚应先用红铅笔画出气室 位臵，再于胚胎侧画出接种位点（进针点）， 接种点应避开大血管，靠近气室边缘处，离胚
此法适用于马立克氏病毒、披膜病毒、衣
原体及立克次氏体的分离、培养。接种方法：
气室端蛋壳消毒后，在气室中央打一小孔，用
带7号针头的注射器垂直刺入约3cm，注射接种
物0.1～0.2mL。石蜡封口，继续在37℃孵化，
每天翻蛋2次。
6.接种后的孵化和观察
接种后继续在37℃孵化，每天照蛋2次，死胚随 时取出。一般24h内死亡的胚多因创伤或细菌污染所
可用镊子轻轻压下羊膜及胎儿，然后再吸。每个鸡胚 一般可收8mL左右尿囊液。
羊水：吸完尿囊液后，可用镊子夹住羊膜，将巴氏吸
管直接插入羊膜腔吸取羊水，然后再用镊子提起羊膜
或压住胎儿，直至羊水收获干净。相当一部分病毒其
羊水和尿囊液可以混合，如新城疫，支气管炎、法氏
囊病毒等。有些不能混合，则应将两者单收、单放。 绒毛尿囊膜：如要收获整个尿囊膜，则在消毒、打开 蛋壳、撕去壳膜后，将整个卵内容物倒出，这时绒毛
（2）根据接种部位，病毒种类或需要，收获相 应的鸡胚材料如尿囊液、羊水、绒毛尿囊膜、 胎儿、卵黄囊等，有时需要收获全胚（除去卵 黄和蛋白），如新城疫病毒、马脑炎病毒等。
尿囊液：气室打开后，用无菌眼科镊子慢慢撕去卵壳 膜，然后夹住绒毛尿囊膜轻轻提起，用巴氏吸管刺破
绒毛尿膜直接吸取尿囊液。为防止羊膜堵住吸管口，
（2）绒毛尿囊膜接种
该方法主要用于痘病毒、喉气管炎病毒和马立克氏 病毒等的分离培养。将卵壳消毒后，先在气室上打一小
孔，再于胚胎侧靠近气室处避开大血管用钢锯条将蛋壳
打开一个4ｍm见方的小口，用刀尖小心撬开蛋壳，不能 损伤卵壳膜，形成卵窗。用针尖轻轻挑破卵窗中心的卵 壳膜，但不能损伤卵壳膜下的绒毛尿囊膜。
活胚可看到清晰每日观察一次，
将胚动呆滞或没有运动的、血管昏暗模糊者，即
可能是已死或将死的鸡胚，要随时加以淘汰。生
长良好的蛋胚一直孵育到接种前，具体胚龄视所
拟培养的病毒种类和接种途径而定。
2.接种材料的制备 ：
将青霉素和链霉素分别注入注射用生理盐
（3）接种点最好选在胚头左侧，因一般人均右手持
注射器，注射时易往左侧倾斜，这样不易刺伤鸡胚。
（4）接种后注射口和气室孔均应用石蜡切实密封，
防止细菌污染造成死亡。死亡鸡胚应随时取出，以免
时间过长细菌繁殖并对周围鸡胚造成污染。 （5）鸡胚取出冷冻时应保持气室向上，否则收获尿 囊液时很困难。
在针尖挑破处滴一滴灭菌生理盐水或甘油，然后
用吸头在气室小孔上吸气，使胚内造成负压，这时卵
窗处绒毛尿囊膜下陷而形成人工气室，此时可见生理
盐水或甘油迅速渗入。用注射器滴加2～3滴接种物于
卵窗的绒毛尿囊膜上，以透明胶纸封住卵窗。气室小 孔用石腊密封，接种后的鸡胚平放在孵化箱中，卵窗 向上，不要转动。
（3）卵黄囊接种
致，故弃去不用。24h以后死亡的胚，取出后放4℃冰
箱，并作上记号。接种后的孵化时间长短随病毒种类
不同而不同，一般新城疫病毒、支气管炎病毒、减蛋
综合征病毒和法氏囊病毒要孵化48～120h，喉气管炎 病毒、马立克氏病毒要孵化48～96h，痘病毒要孵化
4～5ｄ，脑脊髓炎病毒要孵化至小鸡出壳。
7.收毒
接种鸡胚孵化到规定时间后，应从孵化器中取 出放4℃环境冷冻36h左右，或在-10℃以下速冻4h左 右，但不得使鸡胚冻结，否则易发生溶血。冷冻完 毕按下列步骤收毒： （1）鸡胚放于蛋盘或蛋架上，气室向上，用碘酊、 酒精消毒后，以无菌镊子敲开气室蛋壳或去掉人工 卵窗的透明胶纸，暴露卵膜。注意不要让卵壳碎屑 掉入鸡胚内。
的接种材料0.2mL。接种后要用石蜡将孔口封死，放
37℃环境中继续孵育96h。不同病毒其接种部位、方 法和培养时间不尽一样。
（1）尿囊腔接种
这是最常用的接种方法，鸡新城疫、减蛋综合征病 毒、传染性支气管炎病毒、法氏囊病毒等均可采用这种 方法。蛋壳消毒后，先在气室上打一小孔，再于胚胎一 侧靠近气室处所画位点打一小孔，用带5～7号针头的注 射器插入孔内约1.5cm，接种材料0.2mL。进针时针头与 蛋壳应保持30℃角，不应垂直进针，注射完毕，立即用 溶化的热石蜡将注射口和气室上小孔密封，然后放回 37℃孵化箱孵化96h。并保证气室朝上。
实验材料 ：
白壳鸡胚、孵化箱、１mL注射器、蛋托、新城 疫Ⅳ系弱毒苗、注射用生理盐水、青霉素、链 霉素等
实验内容：
1.鸡胚的选择和孵化：孵育前的鸡胚先用清水以 布洗净，再用干布擦干，放入孵卵器内进行孵育 （37℃，相对湿度45%～60%），孵育三日后，鸡 卵每日翻动1～2次。孵至第4日，用检卵灯观察 鸡胚发育情况，未受精卵，只见模糊的卵黄黑影， 不见鸡胚的形迹，这种鸡卵应淘汰。
《动物病毒学实验》课件：实验一 病毒在鸡胚中的培养
一、原理
鸡胚为活的动物机体，组织分化程度低，病毒易 于增殖，可选择不同的日龄和接种途径，感染病毒的 组织和液体中含大量病毒。
二、实验目的
了解鸡胚的基本结构与功能，掌握常用的鸡胚 接种方法。
三、鸡胚的结构与功能
➢卵壳 ➢壳膜 ➢气室 ➢绒毛尿囊膜
➢尿囊腔 ➢羊膜与羊膜腔 ➢卵黄 ➢卵白
五、受精卵的选择
➢最好是来自SPF鸡群，以降低母源抗体的影响 ➢受精卵的壳最好是白色的 ➢受精卵必须新鲜，保存在5-20℃不要超过10天，
保存一个月的受精卵，孵化率将近于零。
六、孵育
➢温度：37.5-38.5℃ ➢相对湿度：50%-60% ➢新鲜空气流通，特别是在孵化5-6天以后 ➢翻卵：从孵育后第3天开始，每天翻卵一次。
十一、NDV接种鸡胚后对鸡胚的影响
NDV以尿囊腔接种于9-10日龄鸡胚，强毒株 在30-60h死亡，弱毒株3-6d死亡。死亡的鸡胚 以尿囊液含毒量最高，胚胎全身出血，以头部、 足趾、翅膀出血尤为明显。
十二、收毒
收毒前将鸡胚直立放置于4℃冰箱半小时以上，冻死 胚胎，防止出血。
根据接种途径的不同，收获相应的材料 1. 绒毛尿囊膜接种 收获接种部位绒毛尿囊膜 2. 尿囊腔接种 收获尿囊液（5-8ml） 3. 卵黄囊接种 收获卵黄囊或胚体 4. 羊膜腔接种 收获羊水（0.5-1ml）
• 实验结果观察：周四下午3:50 • 走之前签到，不能代签 • 实验报告选择思考题中3题作答
6.用1ml注射器滴2-3滴接种物于绒毛尿囊膜上。
7.用透明胶纸封住卵窗，或用玻璃纸盖于卵窗中， 周围涂上熔化的石蜡密封，气室中央的小孔用 石蜡密封。
8.胚横卧于卵箱中，不许翻动，保持卵窗向上。
（三） 尿囊腔接种 主要用于正粘病毒和副粘病毒，如流感病
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)
鸡新城疫抗体检测实验报告(一)背景介绍•鸡新城疫是一种常见的家禽传染病，严重影响鸡类养殖业。
•抗体检测可以有效判断鸡群是否感染鸡新城疫。
实验目的•确定一种高效准确的鸡新城疫抗体检测方法。
•提供可靠的数据支持，用于预防和控制鸡新城疫的传播。
实验设计•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•分为实验组和对照组，实验组注射疫苗，对照组不注射。
•定期进行血液检测，测量抗体水平。
实验步骤1.收集血样。
2.提取血清。
3.使用特定抗体试剂盒进行检测。
4.测量光密度值，判断鸡新城疫抗体水平。
5.记录实验结果。
实验结果•实验组鸡群的抗体水平明显高于对照组。
•实验组的鸡只无明显临床症状，对疫情具有稳定抵抗力。
•对照组鸡群出现多例感染病例，病死率较高。
结论与建议•鸡新城疫抗体检测方法可准确判断鸡群感染情况，为预防和控制疫情提供重要依据。
•注射疫苗可以提高鸡只的免疫力，减少感染风险。
•鼓励养殖场加强抗体检测工作，及时发现病例并采取相应措施。
致所有鸡农：鸡新城疫是一项严重威胁家禽行业的疾病。
本实验通过抗体检测方法，证明了注射疫苗可以提高鸡群的免疫能力，减少感染的风险。
希望您能严格按照抗体检测规程，提高鸡只的免疫力，保障养殖业的稳定发展。
感谢您的关注与支持！注意：本报告仅为实验结果总结，并非具体实验报告。
具体实验细节和数据可根据实际情况进行增删和修改。
实验方法•选取多个饲养场的鸡群作为实验对象。
•将实验组的鸡只注射鸡新城疫疫苗。
•对照组的鸡只不注射疫苗。
•按照一定周期，定期采集血液样本。
数据分析•对实验组和对照组的血液样本进行抗体检测。
•实验组的鸡只抗体水平明显升高，且持续稳定。
•对照组的鸡只抗体水平较低，易受感染。
结果讨论•实验结果证明，注射鸡新城疫疫苗可以有效提高鸡只的免疫力。
•抗体检测是一种可靠的方法，可以快速判断鸡群的感染情况。
•实验结果也表明，饲养场的防疫管理和养殖环境对感染鸡新城疫的影响较大。
结论•鸡新城疫抗体检测方法在预防和控制鸡新城疫方面具有重要意义。
鸡新城疫免疫抗体水平评价试验
入） 。振荡 混匀 ， 在室 温 ２ ０ ～ ２ ５ 。 【 ＝ 下静 置 ４ ０分钟 后 ， 观
②疫苗 重组新城疫灭活疫苗。 ③ 试剂 新 城疫 血凝 抑制 试 验抗 原 ，新 城疫 血
凝 抑 制试 验 阳性血 清 ， １ ％鸡 红 细胞悬 液 ， 阿 氏液 ， ｐ Ｈ
察结 果 。 如果 环境 温度太 低或 者太 高 ， 可置 ２ ５ ℃温箱
数 作 为终点 ，终 点稀 释倍 数 除 以 ４即为 含 ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释 倍数 。所 以 ， ４ Ｈ Ａ Ｕ抗 原稀释倍 数 为 １ ： ６ ４ 。
③血凝抑制（ Ｈ Ｉ ） 试验（ 微量法） 在微量反应板
ｌ ～ ｌ ｌ 孔加入 ０ ． ０ ２ ５毫升 Ｐ Ｂ Ｓ ． 第 １ ２孑 Ｌ 加入 ０ ． ０ ５毫 升 Ｐ Ｂ Ｓ 。 吸取 ０ ． ０ ２ ５毫升被 检血 清加入 第 １ 孑 Ｌ 内， 充分 混 匀后 吸 ０ ． ０ ２ ５毫 升于 第 ２孔 ，依 次倍 比稀 释 至 第
制 ｌ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ：量 取 ４ ０毫 升 ２ ５ ｘ Ｐ Ｂ Ｓ ，加 入 ８ ． ５克氯 化 钠， 加蒸馏水 定容 至 １ ０ ０ ０毫升 。
３ ． 试 验 方 法
性、 败血 性传 染病 。 此 病 的特征是 鸡呼 吸困难 、 下痢 ， 神 经 紊乱 ， 黏膜 和浆 膜 出血 坏 死 ， 精神沉郁 ， 离 群呆
参照 Ｇ Ｂ ／ Ｔ １ ８ ９ ６ ３ — ２ ０ ０ ３ （ 高 致病 性 新城 疫 诊 断技
术》 中 的血凝 （ ＨＡ） 和血 凝抑 制 （ Ｈ Ｉ ） 试 验进 行 。
４ ． 血凝 试验 （ ＨＡ） （ 微 量 法） 测 定
死。 嗉囔 内有 充满 臭味 的稀 薄液 体和 气体 ， 腺 胃黏膜
鸡新城疫疫苗种类及使用方法
2023-11-05
目录
• 鸡新城疫疫苗种类介绍 • 鸡新城疫疫苗使用方法 • 鸡新城疫疫苗接种计划 • 鸡新城疫疫苗接种效果评估 • 鸡新城疫疫苗使用注意事项 • 鸡新城疫疫苗研究进展
01
鸡新城疫疫苗种类介绍
灭活疫苗
疫苗安全性
灭活疫苗对鸡群是安全的，不会通过接种 而传播病毒。
接种前的准备
接种前需要检查疫苗的名称、生产日期、 有效期和疫苗瓶有无裂纹、标签是否清晰 。
接种剂量
根据鸡的体重和疫苗种类确定接种剂量， 一般按照疫苗说明书推荐剂量进行接种。
03
鸡新城疫疫苗接种计划
雏鸡接种计划
01
02
03
7日龄
使用弱毒苗进行滴鼻点眼 接种，以刺激雏鸡在早期 产生免疫力。
14日龄
使用中等毒力疫苗进行饮 水免疫，同时进行滴鼻点 眼加强免疫。
每隔4-6个月
进行一次饮水免疫，以维持鸡群较高的抗体水平。在产 蛋高峰期时，应增加疫苗接种频次，以确保种蛋的母源 抗体水平较高，从而保护雏鸡免受病毒感染。
04
鸡新城疫疫苗接种效果评 估
抗体水平检测
抗体水平检测是评估疫苗接种效果的重要指标之一。通过检测血清中特异性抗体 的含量，可以了解疫苗诱导机体产生免疫应答的情况。
接种对象
灭活疫苗可用于各种年龄和品种的鸡群。
免疫持续时间
灭活疫苗的免疫持续时间较长，通常在2-3 个月以上。
使用方法
灭活疫苗通常采用肌肉注射或皮下注射的 方式进行接种。
弱毒疫苗
疫苗安全性
弱毒疫苗对鸡群也是安全的，但需 要注意接种的剂量和接种途径，以 免引起不良反应。
免疫持续时间
弱毒疫苗的免疫持续时间较长，通 常在1-2个月以上。
鸡新城疫实验报告
鸡新城疫实验报告鸡新城疫实验报告引言：近年来，鸡新城疫成为了农业领域的一大难题。
鸡新城疫是由新城疫病毒引起的一种高度传染性疾病，对家禽养殖业造成了严重的经济损失。
为了更好地了解鸡新城疫的传播机制和防控措施，我们进行了一系列的实验研究。
实验一：病毒传播途径的探究我们选取了一批健康的鸡只，并将其分为多个实验组。
首先，我们在实验组A中注射了新城疫病毒，并将其与实验组B中的鸡只隔离。
结果显示，实验组A中的鸡只出现了明显的疾病症状，而实验组B中的鸡只则保持了健康状态。
这表明，鸡新城疫主要通过直接接触传播。
接着，我们进行了进一步的实验，将实验组A中的鸡只与实验组C中的鸡只共同放置在同一笼子中。
结果显示，实验组C中的鸡只也出现了鸡新城疫的症状。
这表明，鸡新城疫也可以通过空气传播。
实验二：病毒的抗体检测为了进一步研究鸡新城疫的传播机制，我们对实验组A中的鸡只进行了抗体检测。
实验结果显示，实验组A中的鸡只体内出现了新城疫病毒的抗体。
这表明，鸡新城疫病毒可以在感染后引起鸡只产生免疫反应，从而形成抗体。
实验三：疫苗的防控效果评估为了评估疫苗的防控效果，我们选取了一批健康的鸡只，并将其分为两组。
实验组A中的鸡只接种了新城疫疫苗，而对照组B中的鸡只则未接种疫苗。
随后，我们将实验组A和对照组B中的鸡只分别与感染新城疫病毒的鸡只接触。
结果显示，实验组A中的鸡只未出现明显的疾病症状，而对照组B中的鸡只则出现了鸡新城疫的症状。
这表明，新城疫疫苗对鸡新城疫具有一定的防控效果。
实验四：环境因素对病毒传播的影响为了研究环境因素对鸡新城疫的传播影响，我们进行了一系列的实验。
首先，我们在实验室中设置了不同温度和湿度的环境，并将感染新城疫病毒的鸡只放置在其中。
结果显示，高温和低湿度环境下，鸡新城疫的传播速度更快。
这表明，环境因素对鸡新城疫的传播起到了一定的影响。
结论：通过一系列的实验研究，我们对鸡新城疫的传播机制和防控措施有了更深入的了解。
鸡常用疫苗及使用方法
对经过二次活疫苗免疫过的种母鸡，在18—20周龄和40—42周龄时颈部皮下注射
10个月
在40—42周龄时注射第二次灭活苗后，才能保证产蛋后期的种母鸡有较高的母源抗体，并使子代抗体均匀一致
10
鸡传染性支气管炎疫苗H52
用于4周龄以上的鸡
滴鼻或是饮水
15
鸡痘弱毒冻干苗
预防鸡痘
按含毒实量，用50%甘油磷酸缓冲盐水稀释50倍，20日龄以下及刺种1下，20日龄以上刺种2下，60日龄后在刺种1下
雏鸡2个月，大鸡5个月
接种苗后10天抽测0.5%的鸡，刺种部有痘痂形成则有效，否则应重新接种
16
传染性支气管炎、鸡新城疫二联活疫苗
预防鸡新城疫和鸡传染性支气管炎
4—7日龄雏鸡
5
鸡新城疫油乳剂灭活疫苗
预防鸡新城疫
雏鸡0.25ml，成鸡0.5ml，皮下注射
注射育苗后2周产生免疫力，免疫期3—6个月不等
必须逐只注射，剂量一定要准确，严禁冻结保存，免疫后仍需要进行监测，疫苗质量影响免疫期
6
鸡马立克病三价冷冻疫苗
同二价苗
同二价苗。含I、II、III型3000个蚀斑单位以上
接种器具必须灭菌。
屠宰前28日内禁用。
当鸡群新城疫或禽流感H9亚型的HI抗体少于4.0log2时，应根据生产需要合理安排免疫。
两个月以上的幼鸡及成年鸡
2
鸡新城疫II系活疫苗
预防鸡新城疫
10倍稀释后滴鼻、点眼、注射、饮水或气雾免疫
7—9天产生免疫力，免疫期受多种因素影响，3—6周不等
免疫后10天应监测抗体，滴度不上升时应继续免疫，并采取必要的措施
两个月以内的雏鸡
鸡新城疫疫苗使用方法
鸡新城疫疫苗使用方法
鸡新城疫疫苗是一种用于预防鸡新城病的疫苗，通常使用以下方法进行接种：
1. 鸡新城疫疫苗的接种途径主要有皮下接种和眼鼻滴剂接种两种方式。
- 皮下接种：将疫苗按照适当剂量注射到鸡的胸腹皮下组织中。
在选定注射点后，用酒精或碳酸盐消毒皮肤，然后使用一支专门用于接种的注射器进行接种。
接种时要保证注射速度适中，避免疫苗溢出。
接种后轻轻按摩注射点，有助于加速吸收。
- 眼鼻滴剂接种：将疫苗滴于鸡的眼睛或鼻孔中，让鸡自行吞咽疫苗。
这种方法比较简便，适合于幼鸡和大批量接种时使用。
2. 在接种前，请先将疫苗摇匀均匀，确保疫苗内的沉淀均匀分散。
3. 接种时要注意卫生和消毒，保证接种工具和场地的清洁与无菌。
4. 接种时间通常根据具体情况，可根据养殖场的疫情、鸡龄等因素来确定最佳接种时序和接种间隔。
5. 在接种后，鸡应保持一定的观察时间，以确保没有出现异常情况。
同时，也要注意疫苗的保质期和存储条件。
重要提示：以上只是一般的接种方法概述，具体使用方法应根据鸡新城疫疫苗的产品说明书和兽医的建议进行操作。
如果您需要接种鸡新城疫疫苗，请务必咨询专业兽医的指导和协助。
鸡新城疫灭活疫苗
鸡新城疫灭活疫苗Ji Xinchengyi MiehuoyimiaoNewcastle Disease Vaccine，Inactivated本品系用鸡新城疫病毒La Sota株（CVCC A V1615）接种鸡胚培养，收获感染鸡胚液，用甲醛溶液灭活后，加矿物油佐剂混合乳化制成。
用于预防鸡新城疫。
【性状】外观均匀乳剂。
剂型单相苗为油包水型。
取一清洁吸管，吸取少量疫苗滴于冷水表面，除第1滴外，均应不扩散；双相苗为水包油包水型。
取一清洁吸管，吸取少量疫苗滴于清洁冷水表面，应呈云雾状扩散。
稳定性吸取疫苗10 ml加入离心管中，以3000 r/min离心15分钟，管底析出的水相应不超过0.5 ml。
黏度按附录3102进行检验，应符合规定。
【装量检查】按附录3104进行检查，应符合规定。
【无菌检验】按附录3306进行检验，应无菌生长。
【安全检验】用30～60日龄SPF鸡6只，每只肌肉或颈背部皮下注射疫苗1.0 ml，观察14日，应不出现因疫苗引起的局部或全身不良反应。
【效力检验】采用血清学方法进行检验，结果不符合规定时，可采用免疫攻毒法进行检验。
下列方法任择其一。
（1）血清学方法用30～60日龄SPF鸡15只，10只各皮下或肌肉注射疫苗20 μl（1/25羽份），另5只作对照。
接种后21～28日，每只鸡各采血分离血清，按附录3404进行HI 抗体效价测定。
对照鸡HI抗体效价均应不超过1︰4，免疫鸡HI抗体效价的几何平均值应不低于1∶16。
（2）免疫攻毒法用30～60日龄SPF鸡15只，10只各皮下或肌肉注射疫苗20 μl（1/25羽份），另5只作对照。
接种后21～28日，每只鸡各肌肉注射新城疫病毒北京株（CVCC A V1611）强毒0.5 ml（含105.0 ELD50），观察14日。
对照鸡应全部死亡，免疫组应至少保护7只。
【甲醛和汞类防腐剂残留量测定】分别按附录3203和3202进行测定，应符合规定。
检验步骤(标准版)
1、鸡新城疫低毒力活疫苗（Lasota株）1、安全检验检验步骤：2~7日龄SPF鸡20只—→10只滴鼻免疫0.05ml（含10羽份）；10只不接种对照—→同条件分别饲养10日，因无不良反应（如有非特异性死亡，免疫对照组均不得超过1只）疫苗稀释：500羽/瓶—→加2.5ml生理盐水即可（200羽/ml即20羽/0.1ml即10羽/0.05ml）2、效力检验检验步骤：按瓶签注明羽份（500羽/瓶），用灭菌生理盐水将疫苗稀释至1羽/0.1ml—→再进行10倍系列稀释—→取3个适宜稀释度分别尿囊腔（AS）接种10日龄SPF鸡胚5枚（共15枚）每胚0.1 ml—→37℃继续孵育120h—→48h前弃去；48~120h内死亡鸡胚收获尿囊液（同一稀释度等量混合）分别测定红细胞凝集价；120h活胚逐个测红细胞凝集价（微量法不低于1:128者判为感染）—→计算EID50,每羽份病毒含量应≥106.0 EID50.疫苗稀释：500羽/瓶—→加５ml生理盐水（100羽/ml）—→10倍稀释（10羽/ml即1羽/0.1ml）—→再进行10倍系列稀释（一般取10-5、10-6、10-7）3、鉴别检验检验步骤：将疫苗用生理盐水稀释至105.0 EID50/0.1ml—→与等量抗鸡新城疫特异性血清混合—→室温作用60min—→尿囊腔（AS）接种10日龄SPF鸡胚10枚，每胚0.1 ml—→37℃继续孵育120h—→24~120h内应不引起特异性死亡，且至少存活8枚；—→每枚鸡胚红细胞凝试验应为阴性。
疫苗稀释：通过效力检验计算毒价，例如病毒含量为108.6 EID50/0.1ml要稀释至105.0 EID50/0.1ml，稀释103.6倍。
2、鸡新城疫中等毒力活疫苗（I系）1、安全检验检验步骤：2~8月龄健康易感鸡4只—→每只肌肉注射0.2ml？？？（含10个使用剂量）的疫苗—→观察10~14日，允许有不良反应，但须在14日内恢复，疫苗判为合格。
禽病学实验指导qbxsyzd
器材及试剂: 待检病毒:鸡新城疫病毒鸡胚尿囊液； 待检血清：抗鸡新城疫病病毒阳性血清； 生理盐水、1%鸡红细胞、96孔V形微量血凝板、 加样器等。
实验步骤
（一）血凝试验（HA）：取96孔板，按以下步 骤操作：
1、第一排1-12孔各加生理盐水50ul，第二排1-12 孔加生理盐水50ul为红细胞对照；
5. 静置3-4分，再拿起玻板轻轻转动，按下列标准记反应结果： ++++：出现大片凝集，液体完全透明，即100%凝集 +++：有明显凝集片和颗粒，液体几乎完全透明，即75%凝集 ++：有可见的凝集片和颗粒，液体不甚透明，即50%凝集 +：仅仅可以看见颗粒，液体混浊，即25%凝集 -：液体均匀混浊，无凝集现象 （同时应设阳性、阴性血清及抗原对照） 6. 结果判定：
（3）接种病毒：用18mm针头的1ml注射器吸 取鸡新城疫病毒，针头通过打出的孔进针， 刺入尿囊腔，注入0.1ml。
（4）用融化的石蜡封闭小孔，39℃孵化器中 孵化72h。
3 收获： 接种后每4小时照蛋一次，弃去24h内死亡胚。 （1）鸡胚放入普通冰箱内冷藏12h，使胎血凝固。 （2）分别用碘酒和酒精消毒卵壳，用灭菌剪刀除
血凝试验流程图
（二）血凝抑制试验（HAI）：取一96孔板，按 以下步骤操作：
1、4个单位抗原的制备：按HA试验测出的病毒 血凝价除以4即为4个单位血凝素的稀释度。
2、待检血清的稀释：第一、二、三排1-12孔各 加生理盐水50ul，于第一排第1孔中加入50ul待检 血清，反复吹吸3-5次混匀后，取50ul至第2孔混 匀，吸取50ul至第3孔……，依次稀释至第12孔， 弃去50ul，经倍比稀释，血清的稀释倍数为 21~212 。