金刚藤分散片中薯蓣皂苷元HPLC法测定研究

中国医学创新2012年1月第9卷第2期MedicalInnovationofChina，January．2012，Vol.9No.2论著

体眼的首选术式加以临床应用，安全性高，术后并发症少，且具有适用证广、手术简便、裸眼视力恢复效果好等明显优势。当然，由于本组研究样本较少，要确定其远期疗效及并发症发生情况，仍有待于进一步观察。

参考文献［1］唐莉，刘陇黔．硬性透气性角膜接触镜矫正复杂性无晶状体眼疗

效观察［J］．国际眼科杂志，2005，5（6）：1201－1203．［2］王道芸，李海燕，黄莉．前房型人工晶状体在白内障手术中的应

用［J］．国际眼科杂志，2010，10（1）：191．

［3］韩非，蒋炜，段烈英，等．玻璃体切除术后无晶状体眼二期前房型

人工晶状体植入术临床观察［J］．临床眼科杂志，2009，17（2）：148．［4］李海武，郭海科，张洪洋．虹膜固定型人工晶状体治疗无晶状体

眼临床研究［J］．广东医学，2008，29（2）：262－264．［5］HansenSO，TetzMR，SolomonKD．Decentrationofflexiblelooppos-teriorchamberintraocular1ensesinaseriesof222post－mortemeyes［J］．OPhthalmology，1998，95：344－349．（收稿日期：2011－12－06）（本文编辑：陈丹云）

金刚藤分散片中薯蓣皂苷元HPLC法测定研究刘卫东王建成付庆霞

作者单位：276003山东省临沂市人民医院（刘卫东，付庆霞）；山东省临沂市药品检验所（王建成）通讯作者：刘卫东

【摘要】目的建立金刚藤分散片中薯蓣皂苷元的测定方法。方法采用HPLC测定薯蓣皂苷元的含量，色谱柱为ODS－C18（4.6mm×250mm，5μm）不锈钢柱（Merck公司），以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，流动相为乙腈－水（90∶10），流速为

1ml/min；柱温为35℃；检测波长为203nm。结果薯蓣皂苷元在40～360μg/ml浓度范围内具有良好的线性关系（r=0.9996，n=5），平均回收率为100.00%，RSD%=1.08（n=6）。结论HPLC法简单、准确、重复性好，可用于金刚藤分散片的含量测定。【关键词】薯蓣皂苷元；金刚藤分散片；高效液相色谱法；含量测定

DeterminationofDiosgenininthedispersibletabletsofjingangtengbyHPLCLIUWei－dong，WANGJian－cheng，FUQing－xia．ThePeople'sHospitalofLinyi，Linyi276003，China【Abstract】ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofDiosgenininthedispersibletabletsofjingangteng．MethodsTheODS－C18（4.6mm×250mm，5μm）wasadoptedwithacetonitrile－water（90∶10）asmobilephaseataflowrateof1.0ml/min．thetem-peraturewas35℃andthedetectionwavelengthwas203nm．ResultsThelinearrangeofDiosgeninwas40～360μg/ml（r=0.9996）andtheaveragerecoveryofDiosgeninwas100.00%（RSD=1.08%，n=6）．ConclusionThemethodwaseffective，accurateandreproducible，anditwasapplicableforthequalitycontrolofdispersibletabletsofjingangteng．【Keywords】Diosgenin；Thedispersibletabletsofjingangteng；HPLC；Contentdeterminationdoi：10.3969/j.issn.1674－4985.2012.02.002

金刚藤具有清热解毒、消肿散结之功效，药效学与临床实验显示，金刚藤在治疗妇科炎症及肿瘤方面有着明显的疗效，而且还具有降低血糖、镇痛的药理作用［1］。分散片与一般片剂相比，崩解时间短，分散状态佳，临床应用显效快速。《卫生部药品标准》中药成方制剂第9册中收载的“金刚藤糖浆”质量标准中无含量测定项。为了有效控制金刚藤分散片的质量，笔者参考金刚藤（菝葜）及薯蓣皂苷元含量测定研究的相关资料［2］，建立了薯蓣皂苷元的含量测定项，采用高效液相色谱法测定成品制剂中薯蓣皂苷元的含量，并进行了相应的方法学研究。试验结果表明，该方法灵敏度高，重现性好，阴性无干扰，能很好地控制药品的质量。1材料与方法1.1材料高效液相色谱仪（SPD－10Avp检测器，LC－10ATvp溶剂输送泵，岛津公司），ANASTAR色谱工作站；Dis-coveryC18柱（4.6mm×250mm，5μm）；薯蓣皂苷元对照品（中国药品生物制品检定所，批号：1539－200001）；金刚藤分

散片自制（批号：070118、070119、070120）；乙腈为色谱纯，水为纯化水，其他试剂为分析纯。1.2方法

1.2.1色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅

胶为填充剂；以乙腈－水（90∶10）为流动相；流速为1ml/min；柱温为35℃；检测波长为203nm。理论板数按薯蓣皂苷元峰计算应不低于8000。图谱见图1、图2、图3。

图1对照品溶液1.2.2对照品溶液的制备精密称取薯蓣皂苷元对照品适

量，加乙腈制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。—3—论著中国医学创新2012年1月第9卷第2期MedicalInnovationofChina，January．2012，Vol.9No.2图2供试品溶液图3阴性对照溶液1.2.3供试品溶液的制备参考《中国药典》2010年版一部

中菠葵原药材的含量测定方法［3］，并根据上述试验结果，将

供试品溶液的制备方法定为：取金刚藤分散片10片，精密称定，研细，取约2g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醇适量，加热回流至提取液近无色，挥去溶剂，加水50ml与盐酸10ml，再加石油醚50ml，水浴回流水解3h，冷却，用石油醚

（60℃～90℃）振摇提取5次，每次40ml，合并提取液，蒸

干，残渣加乙腈超声溶解并转移至25ml量瓶中，加乙腈至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。1.2.4线性关系考察精密称取薯蓣皂苷元对照品

20.0mg，置50ml量瓶中，用乙腈溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取上述溶液各1ml、3ml、5ml、7ml、9ml置10ml量瓶中，加乙腈稀释至刻度，摇匀；分别精密吸取上述溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图。以薯蓣皂苷元的

峰面积（A）为纵坐标（Y），以薯蓣皂苷元溶液的浓度（μg/ml）为横坐标（X），按最小二乘法进行线性回归；回归方

程：Y=5513.7X+21862，r=0.9996。1.2.5加样回收率试验取已知含量的金刚藤分散片样品

（批号：070119，含量：1.56mg/片）10片，研细，混匀，取约

1g，精密称定，平行5份，精密加入浓度为0.312mg/ml的对

照品溶液10ml，按供试品溶液的制备方法制备，作为样品溶液，分别精密吸取上述样品溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，计算回收率。1.2.6精密度试验精密吸薯蓣皂苷元对照品溶液

（0.218mg/ml）20μl，注入液相色谱仪，重复测定5次，RSD为1.06%，表明仪器精密度良好。1.2.7重复性试验取同一批号（批号：070119）金刚藤分

散片样品，按供试品溶液的制备方法制备，平行6份，分别测定，RSD为1.09%，结果表明分析方法重复性良好。1.2.8稳定性试验精密吸取金刚藤分散片供试品溶液

20μl，注入液相色谱仪，在0h、2h、4h、6h、8h、12h分别进

样，RSD为1.03%，表明供试品溶液在12h内稳定。1.2.9样品测定精密称取薯蓣皂苷元对照品适量，加乙

腈制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液；取本品10片，精密称定，研细，取粉末约2g，精密称定，置索氏提取器中，加乙醇适量，加热回流至提取液近无色，挥去溶剂，加水50ml与盐酸10ml，再加石油醚50ml，水浴回流水解3h，冷

却，用石油醚（60℃～90℃）振摇提取5次，每次40ml，合并提取液，蒸干，残渣加乙腈超声溶解并转移至25ml量瓶中，加乙腈至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20μl，注入液相色谱仪。根据上述试验结果及稳定性试验结果，考虑到原药材的来源，以及制剂生产、贮藏等因素，暂定本品每片含金刚藤以薯蓣皂苷元（C27H42O3）计，不得少于1.3mg。

2结果

2.1线性关系考察试验结果表明，薯蓣皂苷元在40～360μg/ml浓度范围内，浓度与其峰面积线性关系良好。2.2加样回收率试验试验结果表明，金刚藤分散片含量

测定的加样回收率良好。见表1。2.3重复性试验结果表明分析方法重复性良好。2.4样品含量测定结果见表2。

表1加样回收率试验结果取样量（g）样品含量（mg）对照品加入量（mg）测得量（mg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）0.99943.1123.126.238101.19100.001.081.00093.1243.126.23599.711.00083.1223.126.278101.150.99913.1073.126.17698.370.99983.1213.126.246100.161.00053.1183.126.21999.39表2样品含量测定结果批号薯蓣皂苷元含量（mg/片）RSD（%）批号0701181.571.83批号0701191.570.99批号0701201.561.953讨论本研究首次建立了测定金刚藤分散片有效成分薯蓣皂苷元的HPLC的方法，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈一水（90∶10）为流动相；流速为1ml/min；柱温为35℃；检测波长为203nm。理论板数按薯蓣皂苷元峰计算应不低于8000。对该方法进行了干扰试验、回收率试

—4—