常用缓冲溶液的配制方法
最全常用缓冲液配方及缓冲范围
最全常用缓冲液配方及缓冲范围缓冲液是一种能够维持溶液pH值相对稳定的溶液。
它可以减少酸碱反应的影响，使物质在酸碱环境中保持稳定。
在生命科学实验室和工业生产中，常用的缓冲液有许多种。
下面是最常用的一些缓冲液配方及其缓冲范围。
1. Phosphate缓冲液：Phosphate缓冲液通常由磷酸二氢盐和磷酸氢二盐组成。
它的pH范围为2.1-7.4，在生物化学和细胞生物学实验中得到广泛应用。
配方1：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.0-2.8-0.2M磷酸氢二盐，pH5.8-7.4配方2：-0.1M磷酸二氢盐，pH2.1-3.1-0.2M磷酸氢二盐，pH5.6-7.42. Tris缓冲液：Tris缓冲液由三羟甲基氨基甲烷（Tris）和其酸盐组成。
它的pH范围为7-9，在分子生物学和生化实验中广泛使用。
配方：- 1 M Tris HCl，pH 7.4-9.0- 1 M Tris base，pH 7.0-9.23.MES缓冲液：MES缓冲液是一种针对中性pH值（5.5-6.7）的缓冲液，常用于细胞生物学和酶活性实验。
配方：-0.1MMES，pH5.5-6.74.HEPES缓冲液：HEPES缓冲液是一种适用于细胞培养和酶活性实验的缓冲液，其pH 范围为6.8-8.2配方：-0.1MHEPES，pH6.8-8.25.CAPS缓冲液：CAPS缓冲液是一种适用于生化实验的缓冲液，其pH范围为9.7-11.1配方：-0.1MCAPS，pH9.7-11.1这些是最常用的缓冲液配方及其缓冲范围，可以根据实验的需要选择合适的缓冲液。
需要注意的是，在配制缓冲液时应使用高纯度的化学品，并根据实验要求精确控制缓冲液的pH值。
此外，在实验过程中应注意缓冲液的保存和稳定性，以确保实验结果的准确性。
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
生物化学实验常用缓冲液的配制方法
一、TRIS-HCl缓冲液的配制
1、TRIS-HCl缓冲液的配制原理
TRIS-HCl缓冲液，也称为三胍盐缓冲液，是一种有机盐缓冲液。
其配制原理是将三胍钠(三胍氢氯化钠)和氢氯化钠混合在一起，以获得所需的pH值，使其达到缓冲效果。
缓冲效果可以使溶液保持稳定的pH值。
2、TRIS-HCl缓冲液的配制
（1）准备实验室试剂
三胍钠（TRIS），氢氯化钠（NaCl）和蒸馏水
（2）计算配制配方
根据欲得到的pH值和需要的量，计算配制配方。
（3）放置容器
将三胍钠和氢氯化钠分别放入容器中。
（4）添加蒸馏水
用蒸馏水将两种盐分别稀释至相等比例。
（5）搅拌混合
用搅拌器或磁力搅拌器将两种盐混合均匀。
（6）温度调节
将混合物加热至37℃，保持温度，节省时间。
（7）校准pH
用pH计校正混合物的pH值，确保其在正确的pH范围内，调节pH值。
（8）放入瓶中
将缓冲液放入容器中，容器密封后存放，防止受污染。
二、枸橼酸缓冲液的配制
1、枸橼酸缓冲液的配制原理
枸橼酸液是一种有机碱性液，其原理是将枸橼酸(Citric acid)和碳
酸钙(CaCO3)混合在一起，以获得所需的pH值，使其达到效果。
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液配制方法 Prepared on 24 November 2020常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（L）X毫升 mol/L甘氨酸+Y毫升 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升甘氨酸分子量 = ， mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（ mol/L）X毫升 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = ， mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量 = ， mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = ， mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（ mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量， mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量， mol/L溶液为29.41克/毫升。
6．乙酸–乙酸钠缓冲液（ mol/L）Na2Ac·3H2O分子量 = ， mol/L溶液为27.22克/升。
7．磷酸盐缓冲液（1）磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液（）Na2HPO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为85.61克/升。
Na2HPO4·12H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。
NaH2PO4·2H2O分子量 = ， mol/L溶液为克/升。
磷酸盐是化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH2PO4： pKa1＝，pKa2＝；Na2HPO4：pKa1＝，pKa2＝配酸性缓冲液：用NaH2PO4，pH＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH＝6～8，配碱性缓冲液：用Na2HPO4，pH＝10～12。
常用的45种缓冲溶液的配制
常用的45种缓冲溶液的配制1.乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L 氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。
2.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。
3.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
4.三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
5.乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。
6.巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。
7.巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。
8.巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g 加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。
9.甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。
10.邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。
缓冲液配制方法
25.5
5.8
42.3
4.5
8.7
5.2
28.8
5.9
43.7
4.6
11.1
5.3
31.6
4.7
13.6
5.4
34.1
邻苯二甲酸氢钾Mr = 204.23，0.1mol/L溶液为20.42g/L
9．磷酸盐缓冲液
(1)磷酸氢二钠—磷酸二氢钠缓冲液（0.2mol/L）
pH
0.2mol/L
Na2HPO4/ml
pH
Na＋浓度
/mol/L
柠檬酸/g
C6H8O7·H2O
氢氧化钠/g
NaOH(97%)
盐酸/ml
HCl(浓)
最终体积/L*
2.2
0.20
210
84
160
10
3.1
0.20
210
83
116
10
3.3
0.20
210
83
106
10
4.3
0.20
210
83
45
10
5.3
0.35
245
144
68
10
5.8
0.45
50
11.0
10.0
50
43.0
9.6
50
23.0
10.1
50
46.0
硼砂Na2B4O7·10H2O，Mr = 381.43，0.05mol/L溶液为19.07g/L
硼砂/ml
0.2mol/L
硼酸/ml
7.4
1.0
9.0
8.2
3.5
6.5
7.6
1.5
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）甘氨酸分子量= 75.07，0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。
2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）邻苯二甲酸氢钾分子量= 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液Na2HPO4分子量= 14.98，0.2 mol/L溶液为28.40克/升。
Na2HPO4·2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液①使用时可以每升中加入1克克酚，若最后pH值有变化，再用少量50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1mol/L溶液为29.41克/毫升。
7．磷酸盐缓冲液242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。
NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。
实验常用试剂缓冲液的配制方法
实验常用试剂缓冲液的配制方法实验室中经常使用各种试剂和缓冲液进行实验。
下面我将介绍一些常用试剂和缓冲液的配制方法。
1.磷酸盐缓冲液磷酸盐缓冲液一般有三种类型的配方：PBS（磷酸盐缓冲盐溶液）、PBST（含Tween-20的磷酸盐缓冲盐溶液）和TBS（三氯甲烷缓冲盐溶液）。
配制PBS缓冲液：-加入适量的8.0g/L氯化钠和0.2g/L磷酸氢二钠到1L去离子水中。
-调整pH值至7.4，采用10M氢氧化钠（NaOH）或者盐酸（HCl）。
-用去离子水稀释至1xPBS。
配制PBST缓冲液：-配制1xPBS。
- 加入0.1%（v/v）Tween-20。
-混合均匀。
配制TBS缓冲液：-加入2.42g/L三氯甲烷到1L去离子水中。
-加入20g/L三甲基氯化胺到溶液中。
-调整pH值至8.0，采用盐酸（HCl）。
-用去离子水稀释至1xTBS。
2.毛细管电泳缓冲液毛细管电泳缓冲液的配制方法取决于电泳类型，一般包括凝胶和毛细管电泳。
配制凝胶电泳缓冲液：-加入8g/L琼脂糖和0.4g/L硼酸到1L去离子水中。
-用热板搅拌器加热，搅拌至溶解。
-冷却至室温后，调整pH值至8.3，采用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）。
-用去离子水稀释至所需浓度。
配制毛细管电泳缓冲液：-加入10mM氢氧化钠（NaOH）和1mM二硼酸氢钠到500mL去离子水中。
-调整pH值至9.2，采用盐酸（HCl）。
-加入1mM十二烷基硫酸钠。
-用去离子水稀释至所需浓度。
3.蛋白质含量测定蛋白质含量测定一般采用BCA法、Lowry法或Bradford法。
BCA法配制试剂：-在15mL玻璃试管中加入BCA试剂（提取液A）。
-加入0.1M硫酸（提取液B）。
-混合提取液A和提取液B，即得到试剂。
Lowry法配制试剂：-加入白蛋白标准品和Na2CO3/NaOH缓冲液（A液）到250mL锥形瓶中。
-混合硫酸/磷酸/酒精试剂（B液）。
-将A液倒入B液中混合，待用。
Bradford法配制试剂：-加入试剂A到450mL去离子水中。
常用缓冲溶液的配制方法
常用缓冲溶液的配制方法11．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）24Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05，0.2 mol/L溶液含35.61克/升。
柠檬酸C4H2O7·H2O分子量= 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
浓盐酸调节，冰箱保存。
6872柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H2O ：分子量294.12，0.1 mol/L 溶液为29.41克/毫升。
227．磷酸盐缓冲液242Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.22，0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。
Na 2HPO 4·H 2O 分子量 = 138.01，0.2 mol/L 溶液为27.6克/升 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03，0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。
242KH 2PO 4分子量= 136.09，1/15M 溶液为9.078克/升。
8．磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液（0.05M ）10．Tris –盐酸缓冲液（0.05M ，25℃）CHOCH2 NH2分子量=121.14;0.1M溶液为12.114克/升。
Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。
2472硼酸H2BO3,分子量=61.84,0.2M溶液为12.37克/升。
硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
12．甘氨酸–氢氧化钠缓冲液（0.05M）13．硼砂-氢氧化钠缓冲液（0.05M硼酸根）247214．碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液（0.1M）2+2+22N a HCO3分子量=84.01；0.1M溶液为8.40克/升。
元素的原子量表。
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常用缓冲溶液的配制方法
缓冲溶液是一种能够稳定溶液酸碱度的溶液，是化学和生物学实验中必不可少的试剂。
它们能够在一定范围内抵抗外界酸碱变化，保持溶液的PH值稳定，从而确保实验结果的准确性和可重复性。
本文将介绍一些常用的缓冲溶液的配制方法。
一、醋酸酸钠缓冲溶液
醋酸酸钠缓冲溶液适用于酸性条件下的实验。
它的PH值稳定在4.0左右，适用于生物学实验和某些化学分析。
配制方法：
1.称取3.9克醋酸酸钠三水合物（CH3COONa·3H2O）并溶解在80毫升蒸馏水中。
2.加入相同质量的冰乙酸，溶解均匀。
3.用蒸馏水稀释至100毫升。
将溶液过滤或使用磁力搅拌器搅拌，使溶液变得均匀。
二、磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲溶液
磷酸二氢钠/磷酸氢二钠缓冲溶液适用于酸性至中性条件下的实验。
它的PH值稳定在6.8-7.4范围内，适用于细胞培养和某些生物化学实验。
配制方法：
1.称取磷酸二氢钠（NaH2PO4）7.5克并溶解在200毫升蒸馏水中。
2.用氢氧化钠（NaOH）溶液调节至PH值7.4。
3.将溶液稀释至250毫升。
使用磁力搅拌器搅拌溶液使其均匀。
三、碳酸氢钠/碳酸钠缓冲溶液
碳酸氢钠/碳酸钠缓冲溶液适用于中性至碱性条件下的实验。
它的PH值稳定在9.6-11.0范围内，适用于某些酶反应和某些化学分析。
配制方法：
1.称取
2.54克碳酸氢钠（NaHCO3）和2.93克碳酸钠（Na2CO3）并溶解在200毫升蒸馏水中。
2.使用酚红指示剂滴定硫酸（H2SO4）溶液，直至PH值为10.0。
3.将溶液稀释至250毫升。
使用磁力搅拌器搅拌溶液使其均匀。
四、Tris缓冲溶液
Tris缓冲溶液适用于酸性至中性条件下的实验。
它是一种常用的生物化学缓冲溶液，适用于DNA/RNA电泳和蛋白质电泳等实验。
配制方法：
1.称取1
2.11克Tris氨基甲烷（Tris base）并溶解在800毫升蒸馏水中。
2.使用盐酸（HCl）溶液调节至PH值 7.4。
3.加入1克EDTA四钠盐并溶解。
4.用蒸馏水稀释至1升。
使用热板搅拌器搅拌溶液使其均匀。
这些缓冲溶液的配制方法只是其中的一部分常用缓冲溶液配制方法。
在实际实验中，根据具体实验要求，可以选择合适的缓冲剂和配制方法。
值得注意的是，在配制缓冲溶液时，应尽量使用高纯度的试剂，
避免杂质对实验的干扰。
结论：
缓冲溶液在化学和生物学实验中起着至关重要的作用。
了解和掌握
常用缓冲溶液的配制方法对于实验结果的准确性和可重复性至关重要。
通过本文介绍的一些常用的缓冲溶液配制方法，希望能给读者带来帮助。
在实际实验中，记得根据实验要求选择合适的缓冲剂和配制方法，并严格按照配方进行操作。
让我们共同提高实验的成功率和准确性。