牛疱疹病毒—4对牛繁殖的影响综述
牛疱疹病毒—4对牛繁殖的影响综述作者：刘兰泉来源：《江苏农业科学》2016年第05期摘要：牛疱疹病毒-4（BoHV-4）是丙型疱疹病毒科的新成员，对奶牛血管内皮细胞、乳腺组织、子宫内膜、胎儿组织均有很强的亲和力，对牛的繁殖机能具有不同程度的影响。
综述BoHV-4对牛繁殖的影响，旨在为其致病机理的研究提供依据。
关键词：牛疱疹病毒-4；繁殖；影响中图分类号： S852.65+3文献标志码： A文章编号：1002-1302（2016）05-0311-02牛疱疹病毒-4（Bovine herpesvirus，BoHV-4）是导致牛生殖障碍的主要病毒之一，该病毒在细胞中的培养和生长特性（宿主范围窄、复制周期长等）与巨细胞病毒（CMV）相似，感染组织培养细胞后均形成高密度包涵体和巨细胞，因此被归入乙型疱疹病毒亚科[1]。
BHV-4具有疱疹病毒共有的一般形态特征，病毒粒子直径约为150 nm，有囊膜核衣壳，呈立体对称的正20面体。
该病毒对乙醚、氯仿、丙酮等脂溶剂均很敏感[1]。
目前，BoHV-4可感染牛、绵羊、山羊、豚鼠、猫、狮子等[2]，导致其生殖障碍。
1BoHV-4的病毒生物学BoHV-4主要在黏膜上皮细胞内增殖，通过被感染的单核细胞在生物体内传播。
在感染的急性阶段，病毒主要在血液淋巴细胞内增殖；感染后7～8周，病毒的增殖速度最快[3]。
该病毒对子宫内膜和内皮细胞具有显著的亲和力，并以此方式侵入各种组织和器官。
BoHV-4不仅感染子宫和乳腺，在脾脏、膀胱、中枢神经系统、神经节、肝脏、肺脏、鼻腔黏膜、淋巴结、胸腺、扁桃体、小肠中也可分离到[4]。
BoHV-4对分裂细胞的亲和力较高，可穿过胎盘屏障在胎儿内大量复制。
首次感染后，病毒潜伏在淋巴细胞和巨噬细胞内，建立潜伏感染，病毒复制可被应激或地塞米松治疗重新激活[5]。
2BoHV-4的流行病学1963年，Bartha等首次从患有呼吸系统疾病和结膜炎的犊牛体内分离到BoHV-4[6]；此后，很多国家相继分离到该病毒。
在全球动物中，BoHV-4血清阳性率为4.2%～30.0%[7]，在某些猪群的发病率甚至高达80%。
动物的年龄显著影响其血清阳性率，于2～3岁后急剧升高。
野生动物似乎不参与BoHV-4的传播[8]。
3BoHV-4的致病性BoHV-4已被发现与多种疾病直接相关，如腹膜炎、不孕、流产、子宫炎、阴道炎、睾丸炎、乳腺炎、腹泻（与隐孢子虫有关）、新生儿猝死、肺炎、小牛眼部疾病、脑炎、皮肤损伤、滑膜炎、蹄叶炎[9]，但在健康动物体内也能分离到该病毒。
模型试验表明，接种BoHV-4后妊娠雌性发展为阴道炎、子宫内膜炎或流产；与此相反，试验感染牛通常无症状或仅有轻微的临床症状。
BoHV-4可与其他传染因子协同致病，感染BoHV-4的病例中75%已被鉴定出含有细菌、真菌或其他病毒。
基于流行病学观察BoHV-4对生殖的影响，与健康动物相比，患子宫炎的动物具有更高的血清阳性率、流产及不育症发病概率[10]。
3.1子宫炎BoHV-4在子宫内膜细胞中复制会引起细胞病变效应[2]，在患有子宫炎（定义为子宫内感染，发生于产犊后 21 d）、子宫内膜癌的动物体内，以及被感染动物的阴道、子宫、腹膜液、血液中均可分离到BoHV-4。
生殖器液体病毒排出可能在产后持续长达21 d。
在子宫内膜炎（定义为产后子宫炎症超过21 d，对健康不产生任何影响）病例体内也分离到了该病毒[11]。
在疾病的急性期，32%～86%的奶牛体内检测不到BoHV-4抗体。
在牛场，患严重子宫炎的母牛体内可分离到BoHV-4，药物治疗后症状并无缓解。
经产母牛中子宫炎的患病率可达到59%。
Wellemans等报道，牛人工感染BoHV-4后死亡率很高，10头感染牛中4头于病毒攻击后17～72 d死亡[12]。
BoHV-4也可在健康无症状的动物生殖器样品中检测到。
BoHV-4在产犊时被重新激活，可能与血液中的高皮质醇水平及该时期的各种应激有关。
此外，在患有子宫炎动物的子宫液中分离到BoHV-4后，还分离到了化脓隐秘杆菌、大肠杆菌、链球菌属、柠檬酸杆菌属等细菌。
在感染BoHV-4 的22头患有子宫炎的病牛中，19头同时分离到了细菌和 BoHV-4[12]。
子宫内同时分离出的致病菌、BoHV-4以及试验接种的有限成功病例表明，BoHV-4感染是细菌发展的诱发因素。
BoHV-4现已被认为是产后子宫炎症发展的辅助因子。
牛产犊后，子宫腔被大肠杆菌、化脓性链球菌等环境中的细菌短暂污染，这些细菌通过TLR受体被子宫内膜上皮细胞识别，诱导炎症性细胞因子的合成。
这些细胞因子招募巨噬细胞等多形核细胞，从血液进入子宫内膜间质层。
在慢性感染的动物体内，巨噬细胞是BoHV-4定居的部位，因此也被招募进入已发炎的子宫壁。
生长于子宫内的细菌所产生的炎性分子激活了病毒复制，病毒的细胞病变效应导致子宫内膜细胞被感染和溶解[13]。
BoHV-4通过2条途径增加了炎症的严重程度，即LPS刺激巨噬细胞产生肿瘤坏死因子，在子宫内膜间质细胞活化NF-kB途径，增强了BoHV-4的复制和IL-8的产生；病毒复制也能诱导IL-8的合成，IL-8会促进子宫腔内白细胞的渗出[14-15]。
IL-8是最有效的中性粒细胞趋化及活化因子。
TNFα和IL-8促进中性粒细胞介导的组织损伤，刺激中性粒细胞的脱颗粒和脂质代谢，以及活性氧和蛋白酶的胞外释放。
单纯试验接种BoHV-4一般只引起轻微症状，这可能与细菌和高血皮质醇水平对产犊过程中BoHV-4复制的影响有关[13]。
3.2流产部分流行病学资料可表明BoHV-4与奶牛流产的关系。
在比利时，有流产史奶牛的BoHV-4血清阳性率（17.2%）显著高于健康奶牛（10.0%）[16]。
感染BoHV-4已被证明是流产的危险因素[17]，该病毒主要存在于流产胎儿的脾淋巴细胞、单核细胞中，偶尔在肝枯否氏细胞、肾小管中被发现，并被证明在胎盘上皮内复制，除了引起胎盘炎性浸润外没有任何特征性组织学病变。
BoHV-4通过破坏胎盘细胞引发胎盘炎症，改变与妊娠有关的免疫平衡，导致动物流产[18]。
3.3不孕不育血清BoHV-4阳性率高的牛大多发生不孕，69%的母牛检测到BoHV-4抗体，人工授精3～14次后仅有44%的奶牛受孕[19]。
据报道，屠宰场中不育母牛子宫内的BoHV-4检出率为87%[10]。
3.4胚胎移植建立胚胎移植可预防牛感染BoHV-4。
BoHV-4紧密附着于透明带上，不会感染胚胎细胞，除非透明带断裂。
体外产生的胚胎即时孵化后很难感染BoHV-4，而13%的胚泡细胞在相似条件下会感染BoHV-1。
可见，无论在体内或体外，BoHV-4均不会对胚胎发育造成风险[20]。
3.5公牛生殖器疾病比利时学者首次从患有无精症睾丸炎的公牛体内分离到BoHV-4。
该病毒可潜伏在睾丸和单核细胞内，被重新激活后通过鼻和眼部排泄，因此精子成为病毒传播的潜在载体[21]。
3.6乳腺疾病在临床或亚临床乳腺炎病例中已分离到BoHV-4，甚至在健康牛的乳汁中也分离到了该病毒。
然而，在患有临床型乳房炎牛所产的牛奶中，该病毒含量比健康牛所产牛奶高 6.4%。
据Kalman等报道，93%的亚临床乳房炎奶牛排泄BoHV-4，而健康奶牛仅为6%[22]。
该病毒存在于乳腺细胞和乳腺组织中。
在子宫内膜、乳腺上皮细胞中，BoHV-4入侵与细胞变性、脱落、化脓性炎症有关。
该病毒已在乳腺脓疱性皮炎、乳腺慢性溃疡性皮炎的皮肤中被发现[17]。
BoHV-4对乳腺的致病作用尚不明确。
单个乳房内接种病毒（连同鼻内接种）引起的亚临床乳房炎占感染者的50%，但并未引起临床型乳房炎。
金黄色葡萄球菌、乳房链球菌等乳腺内细菌的感染，会引起病毒在乳腺免疫细胞、乳腺导管上皮细胞内激活和复制。
该病毒还可增加初始细菌性乳腺炎的严重程度和持续时间。
病毒通过免疫抑制作用（感染单核细胞）及破坏血管内皮导致乳腺炎的发展。
在乳腺中与子宫中相似，BoHV-4不是主要的致病因子[17]，只会引发亚临床型乳房炎。
4结论BoHV-4广泛存在于牛体内，致病力有限，但其连同细菌感染会加剧子宫、阴道、乳腺的某些临床疾病。
迄今尚无BoHV-4的可用疫苗，针对该病毒的治疗方法仅包括支持疗法和控制细菌生长繁殖。
尽管BoHV-4可导致奶牛致死性子宫炎，但其致病机理尚不明确，有待进一步研究。
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重庆地区牛病流行概况及其防制技术需求
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根据重庆市草食牲畜发展现状 ， 结合本地区奶牛 肉牛养殖 的实际 ， 研究 本市牛病 的流行 现状 、 展趋 发 势及其防制技术 需求 ， 为重庆市发展规模化养牛过程 中疫病 的防控提供一 些借鉴和参考 ， 对保障全市养牛
办 法 是 消 灭传 染源 ， 健 康 牛 进 行 免疫 注 射 。 国外 报 对
同时 ， 高 度 重视 Ｂ ＤＭ 的防 控 。 应 Ｖ ／Ｄ １ ． ２’细 菌性 疫病 普 遍 存 在 近 年 来 ， 的细 菌 性传 染 牛
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牛常见的27种疾病
牛常见的27种疾病牛是重要的农业动物之一，常见于农场和牧场。
与人类一样，牛也会患上各种疾病。
下面是牛常见的27种疾病，并对其中一些进行了详细描述：1. 牛流行性腹泻病：是由牛冠状病毒引起的一种高度传染性疾病，主要表现为腹泻、腹痛和发热。
它会导致牛的食欲下降和体重减轻。
2. 牛瘟热：是一种由牛瘟病毒引起的急性传染性疾病，主要表现为高热、咳嗽、眼结膜炎和严重腹泻。
它会导致牛的生产能力下降和死亡。
3. 牛疣：是一种由乳头疣病毒引起的皮肤疾病，主要表现为皮肤上出现颗粒状的瘤块。
它可以通过接触感染其他牛只。
4. 牛结核：是由结核分枝杆菌引起的慢性传染性疾病。
牛结核主要通过呼吸道传播，会导致牛的乳汁受污染，对人类健康构成威胁。
5. 牛疱疹：是由牛疱疹病毒引起的高度传染性疾病，主要表现为口腔和乳房的疱疹病变。
它会导致牛奶的质量下降和牛只生产力的减退。
6. 牛乳房炎：是由细菌感染引起的乳房组织炎症。
它会导致奶牛产奶量下降和乳房肿胀疼痛。
7. 牛呼吸道疾病：包括牛传染性鼻气管炎、牛病毒性腹泻和牛病毒性下呼吸道综合征等。
这些疾病主要由病毒引起，会导致牛的食欲不振和呼吸困难。
8. 牛痢疾：是由痢疾弯曲菌引起的肠道感染疾病，主要表现为腹泻、腹痛和发热。
它会导致牛的消化功能受损和体重减轻。
除了上述常见的疾病，牛还可能患上以下疾病：9. 牛传染性鼻气管炎10. 牛口蹄疫11. 牛肺炎12. 牛疯牛病13. 牛巴贝虫病14. 牛挤乳感染15. 牛肉毒中毒16. 牛病毒性腹泻17. 牛角皮炎18. 牛鼻疽19. 牛白血病20. 牛病毒性下呼吸道综合征21. 牛布鲁氏菌病22. 牛布鲁氏菌乳房炎23. 牛佝偻病24. 牛急性心包炎25. 牛传染性胸膜肺炎26. 牛结肠炎27. 牛发情障碍牛的健康对于农场和牧场的经营至关重要。
定期进行疫苗接种、加强卫生管理和合理的饲养环境，可以有效预防和控制这些疾病的出现和传播。
牛疱疹病毒4研究进展
ＨＶ一 本 生 物 学 特 征 ４基 由于 Ｂ ＨＶ一 ４在细胞 中的培 养 和生 长特 性 （ 主 ２ Ｂ 宿
Ｂ 一 有 疱疹 病 毒共 有 的 一般 形 态 特征 ， ＨＶ ４具 有 １ ０ｎ 而整 个病 毒粒 子 的直径 约 １ ０ｎ ０ ｍ， ５ ｍ。该病 毒 为有囊 膜病 毒 ， 乙 醚 、 仿 、 酮 等脂 溶 剂 都 很 敏 对 氯 丙
（ ． ｑ 业 大 学 动物 生 物 技 术 中 心 ， Ｊ 安 ６５ １ ；． １ Ｎ） 农 Ｎ） 雅 ｌ ２ ０ ４ ２ 四川 省 畜 牧 科 学 研 究 院 ， 川 成 都 ６０ ６） 四 １０ ６
摘 要 ： 国外早 已对 牛疱 疹病 毒 ４ ＢＨＶ一 ） 了广 泛 的研 究 ， （ ４做 尤其 是 作 为 有 潜 力 的病毒 载 体 ， 它更是 引 起 了诸 多 学者 的兴趣 ， 国 内尚 未见 对该 病毒 的 深入研 究 。为 了更 加全 面地认 识 该 病毒 ， 文 对 Ｂ 一 但 论 ＨＶ ４基
亚科猴 病毒 属 （ ｈ ｄ ｎ ） ３。 Ｒ ａ ｉｏ Ｌ ］ 根据 Ｂ ＨＶ一 ４的 限制 性 酶 切 图 谱 ， ＨＶ－ 要 Ｂ ４主
型疱 疹 病 毒科 的新 成 员 ， ａｔａＡ 等 ［ 首 次 从 匈 牙 Ｂ ｒｈ １ 利患 有 呼吸 系统 疾 病 和 结 膜 炎 的犊 牛 身 上 分 离 出 ， 该毒 株 被 称 为 Ｍｏ ａ３ ／ ３ ｖ ｒ ３ ６ 。Ｍｏ ａ ｔ ｈ ｎ ｙＳ Ｂ等 在 美 国新 泽 西州 从有 呼 吸系统 临 床症 状 的阉 牛鼻 拭 中 分离 出 １株类 似 的病 毒 ， 为 Ｄ ５ ９ 称 Ｎ一９ 。随后 在 科 罗 拉多 、 阿华 、 衣 明尼苏达 、 盛顿 、 克 萨 斯 和加 利 福 华 得
牛传染性鼻气管炎病毒gB_ELISA_抗体与中和抗体相关性分析
·研究论文·摘 要：牛传染性鼻气管炎病毒（IBRV ）是牛传染性鼻气管炎（IBR ）的病原体，常引起流产和呼吸道感染等综合征，给养牛业造成了巨大经济损失。
gB 作为IBRV 中最保守的抗原蛋白，是IBRV 诊断的重要靶蛋白。
为探究牛gB–ELISA 抗体水平与VNT 效价的相关性，本研究采用阻断ELISA 和VNT 两种不同的方法对某一牛场50份血清进行IBRV gB ELISA 抗体检测和中和抗体测定。
gB ELISA 结果显示，阳性血清19份，阴性血清31份；中和抗体结果阳性17份，阴性33份。
通过统计学相关系数分析，gB 抗体阻断率和中和抗体效价值的相关系数为1.0，从而说明IBRV gB ELISA 抗体和中和抗体呈较强的正相关。
本研究为使用IBRV gB ELISA 抗体水平评估牛群中IBRV 抗体保护效果提供理论依据。
关键词：传染性鼻气管炎病毒；gB ELISA 抗体；中和抗体；相关性中图分类号：S852.4 文献标志码：A 文章编号：1674-6422（2023）03-0172-06Correlation Between gB ELISA and Viral Neutralizing Antibodies of BovineInfectious Rhinotracheitis VirusSHI Xijuan, SHEN Chaochao, ZHANG Dajun, YANG Bo, ZHANG Ting, ZHENG Haixue,ZHANG Keshan(State Key Laboratory of Veterinary Etiological Biology, National Foot-and-Mouth Disease Reference Laboratory, Lanzhou VeterinaryResearch Institute, CAAS, Lanzhou 730046, China)牛传染性鼻气管炎病毒gB ELISA 抗体与中和抗体相关性分析史喜绢，申超超，张大俊，杨 博，张 婷，郑海学，张克山（中国农业科学院兰州兽医研究所 家畜疫病病原生物学国家重点实验室 国家口蹄疫参考实验室，兰州730046）Abstract: Bovine infectious rhinotracheitis virus (IBRV) causes abortion and respiratory infection, which leads to huge economic losses to the cattle industry. gB is the most conservative antigen protein in IBRV and used as an important target protein for IBRV diagnosis. In order to explore the correlation between bovine gB ELISA and viral neutralization test (VNT), 50 serum samples from a cattle farm were tested using blocking ELISA and VNT. As a result, 19 serum samples were positive and other 31 samples were negative in gB ELISA while 17 serum samples were positive and 33 were negative in VNT. The statistical analysis showed that the correlation coeffi cient between the blocking rate of gB antibody and the value of neutralizing antibody was 1.0, indicating a strong positive correlation between these two methods. This study provided a theoretical basis for using gB ELISA antibody level to evaluate the protective effect of IBRV antibodies in cattle.Key words: IBRV; gB ELISA; neutralization antibody; correlation收稿日期：2021-08-18基金项目：国家绒毛用羊产业技术体系建设专项资金（CARS-39-13）作者简介：史喜绢，女，硕士，主要从事兽医微生物及其分子生物学研究通信作者：张克山，E-mail：**************Chinese Journal of Animal Infectious Diseases中国动物传染病学报2023,31(3):172-177· 173 ·史喜绢等：牛传染性鼻气管炎病毒gB ELISA 抗体与中和抗体相关性分析第31卷第3期牛传染性鼻气管炎（infection bovine rhinotrcheitis,IBR）是由牛传染性鼻气管炎病毒（Infection bovine rhinotracheitis virus, IBRV）引起的高度接触性传染病。
牛传染性鼻气管炎病毒与单纯疱疹病毒的比较分析
牛传染性鼻气管炎病毒与单纯疱疹病毒的比较分析牛传染性鼻气管炎病毒（Bovine Respiratory Syncytial Virus，BRSV）和单纯疱疹病毒（Herpes Simplex Virus，HSV）都是影响牛的常见病毒感染病原体。
它们在牛的感染过程中表现出一些相似之处，也有一些不同之处。
本文将对这两种病毒进行比较分析，以便更好地了解它们的特点和对牛的影响。
一、病毒特征BRSV是一种RNA病毒，属于副黏液病毒科，是致使牛呼吸道疾病的主要病原体之一。
它主要引起牛呼吸道上皮细胞的感染，导致呼吸道炎症和呼吸道疾病的发生。
而HSV是一种双链DNA病毒，属于疱疹病毒科，会引起牛和其他动物、人类的感染，主要表现为皮肤和黏膜的疱疹样病变。
二、传播途径BRSV主要通过呼吸道分泌物直接接触或空气传播而传播。
当感染牛打喷嚏、咳嗽时，可将病毒释放到周围环境中，其他牛接触其中后易受感染。
HSV主要通过接触被感染的皮肤或黏膜传播，也可通过性接触或母婴传播。
BRSV的传播方式更多样、更容易传播。
三、临床表现BRSV感染的牛主要表现为高烧、流涕、咳嗽、呼吸困难等呼吸道症状，严重者还可能出现肺炎和死亡。
HSV感染的牛则主要表现为疱疹样皮肤病变，包括脓疱、溃疡等皮肤损伤，严重时还会出现体温升高、食欲不振等全身症状。
可以看出，两者的主要临床症状存在一定的差异。
四、诊断方法BRSV和HSV的诊断方法主要有临床症状观察、病原学检测和分子生物学检测等。
BRSV 的诊断常用的方法包括病原学检测（如病毒分离和鉴定）、免疫学检测（如ELISA检测）和分子生物学检测（如PCR检测）等。
HSV的诊断方法也包括病原学检测、免疫学检测和分子生物学检测，其中病原学检测主要包括病毒分离和细胞培养等。
需要指出的是，HSV的检测相对更为复杂，需要更多的实验室条件和仪器设备。
五、防控措施针对BRSV的防控措施主要包括减少感染源、增强牛的抵抗力、改善环境卫生等，最重要的是通过免疫接种来提高牛的免疫力。
几种常见奶牛疾病的诊治
几种常见奶牛疾病的诊治奶牛是现代农业生产中的一种非常重要的畜牧动物，但是由于环境、饲养条件等因素的影响，奶牛常常会发生不同程度的疾病。
这些疾病对于奶牛的健康和生产都会产生重要的影响，因此，正确地进行奶牛疾病的诊治非常重要。
本文将介绍几种常见的奶牛疾病及其诊治方法。
一、瘤胃酸中毒瘤胃酸中毒是奶牛生产中非常常见的疾病，主要是由于奶牛进食过度或采食过短的草原或饲料等原因引起。
疾病的早期症状主要是奶牛食欲不振，消化不良，随着病情的加重，奶牛会出现牛产后厌食、躁动、痉挛、呼吸急促、心跳加快等症状。
若不采取有效治疗措施，奶牛可能会患上深度昏迷，甚至死亡。
治疗方法：1. 饲喂药物：使用吸附剂等方法来清除胃中多余的酸，如活性炭、氢氧化铝等；2. 液体补液：使用电解质溶液、葡萄糖酸钙等来补充奶牛的水分和电解质；3. 给予静脉注射药物：利用静脉注射药物来补充奶牛体内缺少的糖、水和电解质。
二、乳房炎乳房炎是奶牛生产中非常常见的疾病，主要是由于乳房细菌感染引起。
该疾病通常会使奶牛的乳汁变质，导致奶牛产生发热、乳房肿胀、乳汁分泌减少等症状，这些都会对奶牛的身体和生产产生重要的影响。
治疗方法：1. 给予抗生素治疗：使用广谱抗生素治疗该疾病，如青霉素、四环素等；2. 清洁和消毒：定期对奶房和乳头进行清洁和消毒，防止细菌感染；3. 鉴定干奶牛：对干奶牛进行诊断和鉴定，防止疾病的潜在传播。
三、疱疹病疱疹病是一种由疱疹病毒感染引起的病毒性疾病，主要通过直接接触等途径传播。
该疾病通常会引起奶牛的发热、流泪、鼻塞、咳嗽、呼吸急促等症状，特别是对于产后奶牛，该疾病对于乳汁的生产还会造成重要影响。
治疗方法：1. 给予抗病毒药物：使用抗病毒药物治疗该疾病，如阿昔洛韦等；2. 采取隔离措施：及时将感染病毒的奶牛进行隔离，防止疾病的传播；3. 强化营养：在奶牛的进食中添加维生素、微量元素等营养元素，保证奶牛的免疫力。
四、乳热病乳热病是一种由衣原体感染引起的疾病，主要是由于奶牛的乳房和生殖道受到感染所引起。
牛疱疹病毒1型检测技术及疫苗研究进展
牛疱疹病毒1型检测技术及疫苗研究进展马玉梅;冯若飞;李倬【摘要】牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis,IBR)是由牛疱疹病毒I型(Bovine herpes virus-1,BHV-1)引起的牛的一种急性、热性、接触性传染病.该病毒的危害性在于病毒侵入牛机体后,潜伏在一些特定的部位,致使病毒持续性感染,病牛长期甚至终身带毒,给控制和消灭本病带来很大困难,给全球养牛业造成了重大经济损失.文章就BHV-1分子生物学、诊断及各类疫苗进行阐述,旨在为该病的进一步研究提供理论参考.【期刊名称】《西北民族大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2015(036)003【总页数】5页(P42-46)【关键词】牛疱疹病毒Ⅰ型;检测技术;疫苗研究【作者】马玉梅;冯若飞;李倬【作者单位】甘肃省动物细胞工程技术研究中心,甘肃兰州730030;甘肃省动物细胞工程技术研究中心,甘肃兰州730030;西北民族大学生物工程与技术国家民委重点实验室,甘肃兰州730030;甘肃省动物细胞工程技术研究中心,甘肃兰州730030【正文语种】中文【中图分类】Q342+.4;S852.5牛疱疹病毒I型( Bovine herpes virus-1,BHV-1)，又称牛传染性鼻气管炎病毒(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)，它是全球公认的牛传染性鼻气管炎(IBR)的致病因子，它具有典型的泛嗜性，能感染多种器官和组织，并且具有多种临床症状.该病表现为呼吸道黏膜及气管黏膜发炎、呼吸困难、结膜炎、脑膜炎，使怀孕母牛流产，还可引起母牛传染性脓疤性外阴阴道炎(IPV)、公牛传染性脓疤性龟头包皮炎(IPB).该病毒也与中枢神经紊乱有关[1,2].美国于1955年首次报导了该病，1956年Madin第一次从病牛中分离到BHV-1.我国是在20世纪80年代初由周泰冲等首次从新西兰进口奶牛中分离得到该病毒[3].BHV-1主要感染的宿主为牛，其中较为多见的是肉牛，其次是奶牛，又以20~60日龄的犊牛最为易感.据报道，本病毒能使山羊、猪和鹿感染发病[4].目前，我国大多数省市和地区的各类牛群中也有此病毒感染，且呈现上升趋势，对牛群育肥率、产奶量和繁殖率产生了严重影响，一定程度上阻碍了养牛业的发展，也对我国动物和动物产品的国际贸易带来不良影响.1964年Huck确认BHV-1属于疱疹病毒，属a-疱疹病毒亚科，水痘病毒属,球形有囊膜病毒.该病毒成熟的病毒粒子直径约为150 nm~220 nm，核衣壳为二十面体，直径约80 nm~ll0 nm，表面有162个壳粒.牛疱疹病毒1型的抵抗力较强，在pH 4.5~5.0时不稳定，pH 6.0~9.0时稳定，在pH 7.0的细胞培养液内最稳定.BHV-1对温度十分敏感，37 ℃时，经10 h左右即死亡一半，56 ℃经21 min 即可灭活.22 ℃保存5天，BHV-1毒价可下降到1/10；4 ℃以下保存30天，其毒价几乎不变；-70 ℃可保存数年.该病毒对胰蛋白酶、酸性和碱性磷脂酶等较敏感，对有机溶剂氯仿、酚类、甲醛亦敏感[5].BHV-1基因组为双股线性DNA分子，基因组全长约为137 kb，其中鸟嘌呤和胞嘧啶(G+C)的含量高达72%，由一个长独特区(UL)和一个短独特区(US)序列构成.US区一端是内部重复序列(IR)，另一端是外部重复序列(TR).1995年，完成了对BHV-1的基因组测序[6].BHV-1的所有基因可以分成两大类：非必需基因和必需基因.病毒缺失了某些基因以后仍然可以在体外增殖，这些基因就被称为非必需基因.反之，若缺失了某些基因后可引起致死性突变的基因，则被称为必需基因.BHV-1基因组编码的约70个基因中有30%以上的基因在病毒增殖中是非必需的[5].BHV-1基因编码很多种蛋白，包括与核酸代谢、DNA合成以及蛋白组装有关的蛋白[7].BHV-1基因编码约33种结构蛋白[8]，其中13种为囊膜蛋白[9]，10种为糖蛋白[10].目前已知的糖蛋白有gB、gC、gD、gE、gH、gI、gK和gL，主要囊膜糖蛋白为gB、gC和gD.其中UL区编码了6种糖蛋白分别是：gK (UL53)、gC (UL44)、gB (UL27)、gH (UL22)、gM(UL10)、gL(UL1)；US区编码了gG (UL4)、gD (UL6)、gI (US7)和gE (US8)4个糖蛋白.研究表明，gB、gC、gD 等糖蛋白与病毒吸附宿主细胞以及病毒在细胞间扩散有关，其中gB、gC、gD是引起宿主免疫应答的主要抗原，gD能诱导最高水平的体液和细胞免疫反应[11,12]，编码gC, gD, gE, gG, gl, UL49h以及胸腺激酶(TK)的基因与病毒毒力有关[13-20].gE 的存在对病毒有效地感染中枢神经系统方面有重要作用，gE是病毒复制非必需的，这有望成功研制基因缺失疫苗.缺失gE特定部位的编码区能降低疫苗的毒力并能抗病毒地入侵.薛飞等[21]研究表明，gE 可用于建立ELI SA 诊断方法.牛传染性鼻气管炎IBR可结合临床症状、病理变化和流行病学作出初步诊断，但确诊需依靠实验室检查.IBR 的实验室诊断方法主要包括病毒分离鉴定、免疫组织化学检测以及血清学和分子生物学技术等.牛肾或睾丸的单层细胞、牛肾传代细胞(MDBK)和牛气管传代细胞(BTC)均可用于BHV-1分离.将待检样品接种到上述敏感细胞后，每天观察病变情况，该病毒的细胞致病性来得快，正常情况下接种后3～5天内产生细胞病变效应(CPE).开始呈局灶性细胞变圆、变暗，聚集成葡萄样群落，在向四周扩散的同时，中心部细胞逐渐脱落，3～4天后细胞单层基本脱光.若7天仍不出现细胞病变，应再盲传两次，将培养物经过反复冻融后离心去除细胞碎片，取上清接种于新的单层细胞做进一步病毒分离.牛传染性鼻气管炎病毒只有一个血清型，只要有一个已知标准毒株的免疫血清，然后在敏感细胞培养物上进行中和试验，就可作出鉴定.Terpstra等以直接荧光抗体法检查病牛的鼻液涂片，结果全部人工感染牛均于接种后2～7天检出了病毒抗原[22].免疫酶实验和放射免疫测定等方法[23]也可用于病毒抗原的检测.这些方法的主要缺点是敏感性低、耗时耗力且受不确定因素的影响.中和试验、琼脂扩散试验、间接血凝试验及酶联免疫吸附试验(ELISA)均能检测牛血清中牛传染性鼻气管炎抗体.由于BHV-1有潜伏感染的特性，因此，即使牛群血清抗体阴性，仍难以保证牛群就没有BHV-1感染.ELISA 比中和试验操作简单、快速，不需要细胞培养设备，比中和试验敏感，适合大量样品检测等优点，适用于一般实验室，是较常用的血清学方法.Suresh[23]报道了用免疫扩散和对流免疫扩散检测 BHV-1 的方法.据陈天祥等(1987)报道[24]，间接血凝试验(IHA)对本病是一种简单、快速、准确的血清学诊断方法.聚合酶链式反应(PCR)方法，1993年Engelenburg等[25]用于IBR的检测.Rocha MA 等[26～28]在1998年建立了高度敏感的巢式聚合酶链式反应( Nest-Polymerase chain reaction PCR) 检测BHV-1 ,能够检测10-3TCID50/50 μL的细胞上清液.PCR后，接着进行脱氧核糖核酸杂交(Southern blotting)试验是检测BHV -1 DNA 的最敏感的方法[29].陈茹等[30]采用LUX新型荧光PCR建立了快速检测牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)以及鉴别野毒感染和基因缺失疫苗免疫动物的二重实时荧光PCR方法.本方法全程仅需约2 h，双基因鉴别检测的敏感性可达1 TCID50以上，可应用于临床快速检测BHV-1病毒.目前，PCR已经是检测IBR的一种特异性强、快速、准确、常规的方法且被广泛应用.近年来，核酸探针已被广泛应用于病毒检测，核酸探针检测的阳性结果能确定是BHV-1阳性牛的判断标准，为流行病学调查和临床诊断提供了依据.吴时友等[31]从纯化的BHV-1提取全基因DNA，用32P 标记作为探针，进行点杂交.试验结果表明，该探针可检出10 pg的BHV-1 DNA，能明显区别BHV-1感染细胞和未感染细胞，具有很高的灵敏度和特异性.随后用生物素代替32P 制备探针，也取得相同结果.同位素标记的探针可以在-20 ℃保存1年以上，有利于推广应用，又可弥补放射性同位素探针半衰期短及对人体健康有害的弊端[32].常用的常规疫苗有灭活苗和减毒或无毒活苗两类.有些学者认为灭活苗在灭活前的病毒的滴度必须达到106.5PFU，低于此抗原浓度容易引起免疫失败，而且不能保护强毒的攻击.1956 年BHV- 1首次被分离后，同年就报道了第1株减毒疫苗，至今，已有十多种代表不同毒株的IBR弱毒疫苗用于牛的预防接种.弱毒苗的优点是产生免疫效应快，接种2～3天后由于鼻分泌物中干扰素的作用即可防止感染.另外，其安全性好，不引起流产.弱毒苗的广泛使用的确降低了本病的发病率，减少了经济损失.但已有不少报道接种疫苗后并没有保护牛免于IBR病毒引起的呼吸道疾病以及与BHV-1有关的结膜炎.另外，给自然带毒牛进行疫苗接种也不能阻止其排毒，其潜伏感染可能引起接种动物的免疫抑制，导致对其他感染的易感性增加或对其他疫苗的反应性降低，且疫苗株在牛群之间传播时能引起毒力返强，从而使免疫牛群成为该病潜在的传染源，因此，有些国家已不再使用.传统疫苗最大缺点是由于疫苗株和野毒株之间的交叉反应性，接种后无法鉴别接种牛和野毒感染牛.由此可见，长期使用常规疫苗(包括灭活苗和弱毒苗)不利于联合接种和本病的根除[32].BHV- 1的糖蛋白gB、gC、gD都能诱发中和抗体，该抗体能阻碍病毒的体外感染和体内复制.尤其根据gD在病毒早期感染阶段所产生的作用及作为产生中和抗体的主要靶蛋白而被认为是潜在的亚单位疫苗的候选蛋白.由于不含病毒的核酸物质而安全有效且不存在潜伏感染的危险，但因其不能在体内复制，所需接种量大，成本也高，因而至今未得到广泛使用.现已发现BHV-1基因组中包含TK、gC、gE等病毒复制非必需基因，成为构建基因缺失疫苗的缺失对象.目前已有多个单基因、双基因乃至三基因缺失苗问世.BHV-1 TK基因缺失苗采用各种免疫接种方式均无致病性，标记疫苗接种后能有效地保护牛，再用其鉴别诊断试剂盒检验能使自然感染牛和接种牛区别开来，其缺点是疫苗病毒具有潜伏性.gE基因缺失苗免疫牛可产生早期的免疫应答，在IBR爆发早期使用可有效地预防BHV-1流行，gE基因缺失疫苗十分适合BHV-1的防治和根除[33].随着第一代基因缺失疫苗的开发使用，第二代基因缺失活载体疫苗正在研制和开发之中[34].此疫苗能同时启动机体细胞免疫和体液免疫，避免了灭活苗的缺陷，又无常规活苗毒力反祖之虞，更重要的是活载体苗可同时构成多价和多联苗.关于BHV-1的活载体疫苗国外学者早有报道，但是绝大多数还处于实验室研究阶段，国内学者李继昌已经成功构建表达牛流行热病毒( Bovine ephemeral fever virus ,BEFV) G 基因的牛传染性鼻气管炎病毒转移载体[35,36]，为开发BEFV/BHV- 1二联基因工程疫苗奠定了基础[37].随着我国规模化养殖业的发展，尽快启动牛的重大疾病的根除或控制计划势在必行.科学技术的进步，对该病的诊断方法在不断的完善，快速、有效、敏感的诊断方法在临床上得到了广泛的应用.相信不久的将来，随着多基因缺失苗和病毒活载体重组苗的成功研制，根除牛传染性鼻气管炎的计划将成为现实.【相关文献】[1] Abril C, Engels M, Liman A, et al. 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几种流行性牛病的发病特点及防治建议
几种流行性牛病的发病特点及防治建议发布时间：2021-11-10T07:00:40.207Z 来源：《科学与技术》2021年第29卷17期作者：赫清华[导读] 近年来，我国畜牧养殖业发展规模不断加大赫清华云南省大理州巍山县牛街乡农业综合服务中心畜牧兽医站云南大理 672400摘要：近年来，我国畜牧养殖业发展规模不断加大，逐渐迈向了集约化与现代化发展方向，带动了当地养殖地区的经济发展。
牛作为畜牧养殖行业重要的一种养殖类型，牛的健康对养殖户的经济效益具有重要影响，一旦牛在感染交叉性疾病后，很有可能对养殖人员生命健康安全构成威胁。
不过当前如何对流行性牛病进行防控，成为了牛养殖用户所需要解决的主要难题。
因此，本文通过对几种流行性牛病发病特点进行具体分析，从而对牛病进行有效防治，保障牛养殖健康安全，提高牛养殖用户的经济效益。
关键词：流行性牛病；发病特点；防治建议前言：我国养牛业在养殖行业中发展十分迅速，而且养殖规模逐渐加大，为了有效保障牛养殖健康安全，必须要掌握流行性牛病发病特点，及时防控流行性牛病，避免牛病传染率增加。
因此，在牛养殖期间内，养殖用户必须要加强对牛的几种流行性疾病加强重视程度，了解不同流行性牛病的发病特点，从而及时对流行性牛病进行防治。
1几种流行性牛病的发病特点1.1牛口蹄疫的发病特点牛口蹄疫是由一种口蹄疫病毒所引发的感染性疾病，牛口蹄疫通过空气作为介质，就可以进行传播，而且携带口蹄疫病毒的牛与其余健康牛一起饲养，会加大该病毒的传播率。
牛在患有口蹄疫后，牛的蹄部部位以及口腔等无毛部位会出现水泡，该病毒无论在任何季节都有可能传播，这也说明了牛口蹄疫病毒具有抗温性，不过在冬季与春季的发病率要远高于夏季与秋季。
另外，牛一旦感染口蹄疫疾病后，就会迅速进行传播，严重的情况下，会导致牛死亡，特别是牛犊，一旦患有口蹄疫，其死亡率相对较高，对牛养殖业的健康发展会造成严重影响。
1.2牛病毒性腹泻的发病特点牛病毒性腹泻主要是由于病毒感染造成的腹泻，也是一种传播性疾病。
牛疱疹病毒Ⅰ型检测技术概述
牛疱疹病毒Ⅰ型检测技术概述张帆王禹淳姜坤生李思瑶宋佰芬*（黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院，黑龙江大庆163319）摘要：牛疱疹病毒Ⅰ型（BoHV-1）可以引起多种临床疾病，如牛传染性鼻气管炎（IBR）、传染性脓疱性外阴阴道炎（IPV）以及结膜炎等，是牛的一种急性、热性、接触性传染病，对乳牛产奶量、公牛繁殖力及役用牛的使役力均有较大影响，每年造成极大的经济损失。
牛疱疹病毒Ⅰ型的早期准确诊断和治疗对于该病的防控具有重要作用。
目前，牛疱疹病毒Ⅰ型的检测方法主要有临床诊断、病原学诊断和血清学诊断等，各有优缺点。
该文总结概述了牛疱疹病毒Ⅰ型的各种常用诊断方法，旨在为该病的进一步研究和诊断防控提供参考。
关键词：BoHV-1；临床诊断；病原学诊断；分子生物学诊断；血清学诊断中图分类号S852.65+9.1文献标识码A文章编号1007-7731（2021）02-0093-05 Overview of Bovine Herpesvirus Type I Detection TechnologyZHANG Fan et al.（College of Life Science and Technology，Heilongjiang Bayi Agricultural University，Daqing163319，China）Abstract:Bovine Herpesvirus Type I（BoHV-1）can cause a variety of clinical diseases，such as bovine infectious rhinotracheitis（IBR），infectious pustular vulvovaginitis（IPV）and conjunctivitis.It is an acute，heat and contact in⁃fectious disease of cattle.It has a great impact on the milk yield of dairy cows，the fertility of bulls and the enabling power of cattle.It causes great economic losses.The early accurate diagnosis and treatment of bovine herpesvirus type I plays an important role in the prevention and control of the disease.At present，the detection methods of bo⁃vine herpesvirus type I mainly include clinical diagnosis，pathogenic diagnosis，and serological diagnosis，and each has its own advantages and disadvantages.This articlesummarizes the various commonly used diagnostic methods for bovine herpesvirus type I，aiming to provide reference for further research and diagnosis and prevention of the dis⁃ease.Key words:BoHV-1;Clinical diagnosis;Pathogenic diagnosis;Molecular biological diagnosis;Serological diagnosis牛疱疹病毒Ⅰ型（bovine herpesvirus type-1，BoHV-1）是一种粒子直径为150～200nm、具有脂质囊膜的DNA 球状病毒，该病毒具有162个壳粒的20面体核衣壳［1］。
牛疱疹病毒I型的病因 牛疱疹病毒I型的症状和控制措施 - 养牛技术
牛疱疹病毒I型的病因牛疱疹病毒I型的症状和控制措施-养牛技术牛传染性鼻气管炎，又称坏死性鼻炎、红鼻病，是由牛疱疹病毒1型（Bovineherpesvirus1，BoHV-1）引起牛的一种接触性传染病，表现上呼吸道及气管黏膜发炎、呼吸困难、流鼻汁等症状，BHV-1还可引起生殖道感染、结膜炎、脑膜脑炎、流产、乳房炎等多种病症。
该病被OIE列为B类传染病，也被我国列为二类动物传染病。
下面一起具体来了解一下：牛疱疹病毒I型的病因牛疱疹病毒I型的症状和控制措施。
1、病因和机理本病通过呼吸道途径感染，传染性脓疱性外阴阴道炎可通过性交传染。
本病还可以通过垫草传染或者通过嗅闻感染动物的阴门和会阴部传染，此外也可通过被污染的精液传染。
流产排出物也是重要的传染源。
感染后患牛表现严重程度不同的临床症状，有些牛在感染后无临床表现，或症状消失后成为潜在带毒者。
潜伏感染时，病毒在三叉神经和荐骨神经节持续存在。
本病潜伏期10~20天，之后患牛可出现急性呼吸道和生殖器官疾病症状。
通常呼吸症状持续时间短，而传染性脓疱性外阴阴道炎引起的病变可长期存在，有时可达数星期以上。
病毒随呼吸道和生殖道分泌物排出的时间约在14天左右，而隐性携带者可周期性排毒，应激时、注射皮质类固醇后或在动物存活的任何时期排毒。
感染流产株和排出胎儿之间的间隔时间差别很大，有些为数天，有些则在妊娠期满后产出死胎或感染的犊牛。
2、临床症状本病生殖道型不表现其他症状，不伴发呼吸型疾病，传染性脓疱性外阴道炎很少与流产同时发生。
传染性脓疱性外阴阴道炎发病突然并且呈急性，往往在配种感染后24~48小时内出现症状，初产奶牛的症状比经产奶牛更为严重，阴唇开始肿胀并疼痛，而肤色浅的牛充血更为明显。
黏膜上很快出现许多红色小疱，这些小疱可能会很快破溃或发展为脓疱，由此形成直径3毫米左右的出血性溃疡灶。
阴门流出分泌物的量不尽相同，有些仅有少量粘附在外阴和尾毛上的渗出液，有些则有大量的粘液脓性分泌物。