人血小板衍生生长因子(PDGF)分析检测ELISA试剂盒使用说明书
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书

夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。
人碱性成纤维细胞生长因子ELISA 检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
夏科雷登氏结晶蛋白(CLC)ELISA试剂盒说明书样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
高效人生长激素(GH)ELISA

人生长激素(GH)ELISA Kit酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E04567h检测范围:0.8 ng/ml, - 50 ng/ml,最低检测限:0.2 ng/ml,特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的人GH,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中GH含量。
说明●试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
●浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
●中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
●刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗GH抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗GH抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的GH.呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)。
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)。
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
ww人肝细胞生长因子(HGF)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明

人肝细胞生长因子(HGF)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!预期应用ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中HGF含量。
实验原理用纯化的HGF抗体包被微孔板,制成固相载体,往微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的HGF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物(TMB)显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的HGF呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1、酶标板:一块(96孔)2、标准品(冻干品):2瓶,请临用前15分钟内配制。
每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为5,000pg/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成5,000pg/ml,2,500pg/ml,1,250pg/ml,625pg/ml,312pg/ml,156pg/ml,78pg/ml,样品稀释液直接作为空白孔0pg/ml。
如配制2,500pg/ml标准品:取0.3ml(不要少于0.3ml)5,000pg/ml的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、样品稀释液:1×20ml。
4、检测稀释液A:1×10ml。
5、检测稀释液B:1×10ml。
6、检测溶液A:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液A1:100稀释(如:10检测溶液A/990检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100/孔),实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
7、检测溶液B:1×120/瓶(1:100)。
临用前以检测稀释液B1:100稀释。
稀释方法同检测溶液A。
小鼠神经生长因子(NGF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书【模板】

小鼠神经生长因子(NGF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中神经生长因子(NGF)的含量。
试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:请来电咨询保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠神经生长因子(NGF)水平。
用纯化的小鼠神经生长因子(NGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入神经生长因子(NGF),再与HRP标记的神经生长因子(NGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的神经生长因子(NGF)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠神经生长因子(NGF)浓度。
人血管内皮生长因子(VEGF)酶联免疫检测试剂盒使用说明

人血管内皮生长因子(VEGF)酶联免疫检测试剂盒使用说明书AE98006Hu使用前仔细阅读本说明书。
本酶联免疫试剂盒是基于双抗体夹心技术原理,来检测人血管内皮生长因子(VEGF),只能用于研究用途,不得用于医学诊断。
用途:用于人血清、血浆及相关液体样本中血管内皮生长因子(VEGF)测定。
工作原理本试剂盒采用的是生物素双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)测定样品中人血管内皮生长因子(VEGF)水平。
向预先包被了人血管内皮生长因子(VEGF)单克隆抗体的酶标孔中加入人血管内皮生长因子(VEGF),温育;温育后,加入生物素标记的抗VEGF抗体。
再与链霉亲和素-HRP结合,形成免疫复合物,再经过温育和洗涤,去除未结合的酶,然后加入底物A、B,产生蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅与样品中人血管内皮生长因子(VEGF)的浓度呈正相关。
试剂盒组成试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品1200ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存链霉亲和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素标记的抗0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存VEGF抗体显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存需要而未提供的试剂和器材1.37℃恒温箱。
2.标准规格酶标仪。
3.精密移液器及一次性吸头4.蒸馏水,5.一次性试管6.吸水纸注意事项1.从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。
人破骨细胞分化因子(ODF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书

人破骨细胞分化因子(ODF)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆、组织等样本中破骨细胞分化因子(ODF)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人破骨细胞分化因子(ODF)水平。
用纯化的人破骨细胞分化因子(ODF)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入人破骨细胞分化因子(ODF),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的人破骨细胞分化因子(ODF)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人破骨细胞分化因子(ODF)含量。
注:标准品浓度依次为:8、4、2、1、0.5、0 ng/mL.样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
慢性乙型肝炎的血清血小板衍生生长因子BB检测相关性分析
12 方法 .
所 有 样 本 均 为 清 晨 空 腹 采 血 3mL 3 7℃ 水 浴 3 O
性 肝 病 发 生 和发 展 过 程 中 起 着 重 要 作 用 。 本 研 究 通 过 检 测
了 7 4例 C HB患 者 血 清 P F B DG — B含 量 , 时 检 测 血 清 HB 同 V
中、 度 。 重
要 原 因 , 纤 维 化 ( e ai f rs ) 肝脏 慢 性 损 伤 中 , 细 胞 肝 h p t i o i 是 c b s 肝
外 间质 ( e ai e taellr E M) 积 或 肝 细 胞 干 枯 减 少 所 h p t xr cl a , C 沉 c u 导 致 的病 理 改变 , 期 HB 持 续 感 染 , 复 炎 症 活 动 , 产 生 长 V 反 可
me t f Cln c lLa o a o y,h c n o l s ia f Ch n j , n in 3 1 0, ia n i ia b r tr teSeo d Pe p esHo p t lo a g i Xija g 8 1 0 Ch n ) o
[ sr c] Ob et e An lzn h p lig v l e o e u e e f paee eie r wt a t rBB Abta t jci v ay ig t e a pyn au fs r m lv lo ltltd rv d g o hd wi h B DNA e e ( i n f n l c r ea e t t e H V c y h 1 v l P> 0 0 ) Co c u i n Th e u lv l f . 5 . n l so e s r m e e o PDGF B sc o ey r — — B i l s l e
人可溶性血管内皮生长因子受体1sVEGFR1ELISA试剂盒使用说明书
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断。
人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒使用说明书【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒试剂盒名称】人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒试剂盒用途】定量人血清、血浆及相关液体样本中可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)的含量【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒检测原理】本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法(ELISA)。
将标准品、待测样本加入到预先包被可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)透明酶标包被板中,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分,再加入酶标工作液,温育足够时间后,洗涤除去未结合的成分。
依次加入底物A、B,底物(TMB)在辣根过氧化物酶(HRP)催化下转化为蓝色产物,在酸的作用下变成黄色,颜色的深浅与样品中可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)浓度呈正相关,450nm波长下测定OD值,根据标准品和样品的OD值,计算样本中可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)含量。
【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒试剂盒组成】1酶标包被板12孔×8条7底物夜A6mL 2标准品:200ng/ml0.6mL8底物夜B6mL20mL9终止液6mL 320倍浓缩洗涤液4标准品稀释液6mL10说明书1份5样本稀释液6mL11封板膜1张6酶标试剂6mL12密封袋1个备注:标准品用标准品稀释液依次稀释为:200、100、50、25、12.5、6.25ng/ml【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒需要而未提供的试剂和器材】1、37℃恒温箱2、标准规格酶标仪3、精密移液器及一次性吸头4、蒸馏水5、一次性试管6、吸水纸【人可溶性血管内皮生长因子受体1(sVEGFR1)ELISA试剂盒操作步骤】1、准备:从冰箱取出试剂盒,室温复温平衡30分钟。
人碱性成纤维细胞生长因子bFGFELISA试剂盒使用说明
人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)ELISA试剂盒使用说明书(SBJ-H0015)本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平。
用纯化的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)再与HRP标记的bFGF抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
人碱性成纤维细胞生长因子酶联免疫分析试剂盒使用说明书
人碱性成纤维细胞生长因子酶联免疫分析试剂盒使用说明书使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平。
用纯化的人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入碱性成纤维细胞生长因子(bFGF),再与HRP 标记的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)浓度。
试剂盒组成1 30 倍浓缩洗涤液20ml×1 瓶7 终止液6ml×1 瓶2 酶标试剂6ml×1 瓶8 标准品(40ng/L)0.5ml×1 瓶3 酶标包被板12 孔×8 条9 标准品稀释液1.5ml×1 瓶4 样品稀释液6ml×1 瓶10 说明书1 份5 显色剂A 液6ml×1 瓶11 封板膜2 张6 显色剂B 液6ml×1/瓶12 密封袋1 个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3 的样品,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
20 ng/L 5 号标准品150μl 的原倍标准品加入150μl 标准品稀释液10 ng/L 4 号标准品150μl 的5 号标准品加入150μl 标准品稀释液5 ng/L 3 号标准品150μl 的4 号标准品加入150μl 标准品稀释液2.5 ng/L 2 号标准品150μl 的3 号标准品加入150μl 标准品稀释液1.25 ng/L 1 号标准品150μl 的2 号标准品加入150μl 标准品稀释液2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
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人血小板衍生生长因子(PDGF)分析检测ELISA试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用
Purpose目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中转化生长因
子(PDGF)的含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人血小板衍生生长因子(PDGF)
水平。用纯化的转化生长因子(PDGF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被
单抗的微孔中依次加入转化生长因子(PDGF),再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,
形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP
酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品
中的转化生长因子(PDGF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD
值),通过标准曲线计算样品中人血小板衍生生长因子(PDGF)浓度。
试剂盒内容及其配制 :
试剂盒成份 96孔配置 48孔配置
96/48人份酶标板 1块板(96T) 半块板
(48T)
塑料膜板盖 1块 半块
标准品:100ng/ml 1瓶(1.0ml) 1瓶
(0.5ml)
空白对照
1瓶(1.0ml) 1瓶
(0.5ml)
标准品稀释缓冲液 1瓶(8.0ml) 1瓶
(4.0ml)
生物素标记的抗OT抗体 1瓶(8.0ml) 1瓶
(4.0ml)
亲和链酶素-HRP 1瓶
(12ml)
1瓶(5ml)
洗涤缓冲液 1瓶(20ml) 1瓶(10ml)
底物A
1瓶(6.0ml) 1瓶
(3.0ml)
底物B
1瓶(6.0ml) 1瓶
(3.0ml)
终止液
1瓶(6.0ml) 1瓶
(3.0ml)
试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片(48) 2片(96)
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品:45μ
mol/L
0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8℃保存
酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
浓缩洗涤液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存
自备材料 :
1. 蒸馏水。
2. 加样器:5ul、10ul 、 50ul 、 100ul 、 200ul 、500ul、1000ul。
3. 振荡器及磁力搅拌器等。
样品收集、处理及保存方法 :
1、血清……操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收
集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2、 血浆……EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000 ×g离心30分钟
去除颗粒。
3、 细胞上清液……1000 ×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4、 组织匀浆……将组织加入适量生理盐水捣碎。1000 ×g离心10分钟,取
上清液。
5、 保存……如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70℃保存,避免反复
冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心
或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀
地充分解冻。
人血小板衍生生长因子ELISA试剂盒操作注意事项:
● 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢
弃,不可保存。
● 实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
● 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使
用。
● 使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使
用带金属部分的加样器。
● 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份
及样品。
● 底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴
露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
● 加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
● 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
安全性 :
1. 避免直接接触终止液和底物A、B,一旦接触到这些液体,请尽快用水冲
洗。
2. 实难中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3. 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
试剂的准备 :
1. 标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准
品振荡混匀。稀释比例按下表中进行:
100 ng/ml (6号标准品) 原倍浓度不用稀释直
接加入50ul
50 ng/ml (5号标准品) 100ul的原倍标准品
加入100ul的标准品
稀释液
25 ng/ml (4号标准品) 100ul的5号标准品加
入100ul的标准品稀
释液
12.5 ng/ml (3号标准品) 100ul的4号标准品加
入100ul的标准品稀
释液
6.25 ng/ml (2号标准品) 100ul的3号标准品加
入100ul的标准品稀
释液
3.12 ng/ml (1号标准品) 100ul的2号标准品加
入100ul的标准品稀
释液
0 ng/ml (空白对照) 原倍浓度不用稀释直
接加入50ul
2. 洗涤缓冲液(50×)的稀释:蒸馏水50倍稀释。
试剂盒性能 :
1. 灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回
归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特异性:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
人血小板衍生生长因子ELISA检测试剂盒 操作步骤:
1. 使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样
时加入大量的气泡,产生加样上的误差。
2. 根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和
空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。
3. 加入稀释好后的标准品50ul 于反应孔、加入待测样品 50 ul 于反
应孔内。立即加入 50 ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,
37℃温育45分钟。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍
干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入100ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37℃温育30分钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍
干。重复此操作4次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育5分钟。避免光
照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的OD值。
结 果 判 断 与 分 析 :
1、 仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、 以吸光度OD值为纵坐标( Y ),相应的 OT 标准品浓度为横坐标
( X ),做得相应的曲线,样品的 OT 含量可根据其OD 值由标准曲线换
算出相应的浓度,再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线
的回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,
即为样品的实际浓度。
3、 检测值范围: 0-100ng/ml
4、 敏感度:0.39ng/ml