常用缓冲溶液的配制及氨基酸常数等
附录四 常用缓冲溶液的配制 （一）甘氨酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至200毫升。
pH X Y pH X Y 2.2 50 44.0 3.0 50 11.4 2.4 50 32.4 3.2 50 8.2 2.6 50 24.2 3.4 50 6.4 2.8 50 16.8 3.6 50 5.0 甘氨酸分子量＝75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。
（二）邻苯二甲酸-盐酸缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾＋Y毫升0.2 mol/L HCl，再加水稀释至20毫升。
pH(20℃) X Y pH (20℃) X Y 2.2 5 4.670 3.2 5 1.470 2.4 5 3.960 3.4 5 0.990 2.6 5 3.295 2.6 5 0.597 2.8 5 2.642 3.8 5 0.263 3.0 5 2.032 邻苯二甲酸氢钾分子量＝204.23。 0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。
（三）磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (mL) 0.1 mol/L 柠檬酸 (mL) pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (mL) 0.1 0.1 mol/L 柠檬酸 (mL) 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 19.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55
Na2HPO4分子量＝141.98；0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 C6H8O7·H2O分子量＝210.14；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。
（四）柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 pH 钠离子浓度 (mol/L) 柠檬酸 (g) C6H8O7·H2O 氢氧化钠 (g) NaOH 97％ 盐酸 (mL) HCl (浓) 最终体积 (L)① 2.2 0.20 210 84 160 10 3.1 0.20 210 83 116 10 3.3 0.20 210 83 106 10 4.3 0.20 210 83 45 10 5.3 0.35 245 144 68 10 5.8 0.45 285 186 105 10 6.5 0.38 266 156 126 10 ① 使用时可以每升中加入1克酚，若最后pH值有变化，再用少量50％氢氧化钠溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。 （五）柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）
pH 0.1 0.1 mol/L 柠檬酸 (mL) 0.1 mol/L 柠檬酸钠 (mL) pH 0.1 mol/L 柠檬酸 (mL) 0.1 mol/L 柠檬酸钠 (mL) 3.0 18.6 1.4 5.0 8.2 11.8 3.2 17.2 2.8 5.2 7.3 12.7 3.4 16.0 4.0 5.4 6.4 13.6 3.6 14.9 5.1 5.6 5.5 14.5 3.8 14.0 6.0 5.8 4.7 15.3 4.0 13.1 6.9 6.0 3.8 16.2 4.2 12.3 7.7 6.2 2.8 17.2 4.4 11.4 8.6 6.4 2.0 18.0 4.6 10.3 9.7 6.6 1.4 18.6 4.8 9.2 10.8 柠檬酸：C6H8O7·H2O分子量＝210.14 ；0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 柠檬酸钠：Na3C6H5O7·2H2O分子量＝294.12 ；0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。
（六）醋酸-醋酸钠缓冲液（0.2 mol/L） pH (18℃) 0.2 mol/L NaAc (mL) 0.2 mol/L HAc (mL) pH (18℃) 0.2 mol/L NaAc (mL) 0.2 mol/L HAc (mL) 3.6 0.75 9.35 4.8 5.90 4.10 3.8 1.20 8.80 5.0 7.00 3.00 4.0 1.80 8.20 5.2 7.90 2.10 4.2 2.65 7.35 5.4 8.60 1.40 4.4 3.70 6.30 5.6 9.10 0.90 4.6 4.90 5.10 5.8 6.40 0.60 NaAc·3H2O分子量＝136.09；0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。 冰乙酸11.8 mL稀释至1 L（需标定）。
（七）磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L） X 毫升 0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。 pH (20℃) X (mL) Y (mL) pH (20℃) X (mL) Y (mL) 5.8 5 0.372 7.0 5 2.963 6.0 5 0.570 7.2 5 3.500 6.2 5 0.860 7.4 5 3.950 6.4 5 1.260 7.6 5 4.280 6.6 5 1.780 7.8 5 4.520 6.8 5 2.365 8.0 5 4.680
（八）磷酸盐缓冲液 磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液（0.2 mol/L）
pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (mL) 0.2 mol/L NaH2PO4 (mL) pH 0.2 mol/L Na2HPO4 (mL) 0.2 mol/L NaH2PO4 (mL) 5.8 8.0 92.0 7.0 61.0 39.0 5.9 10.0 90.0 7.1 67.0 33.0 6.0 12.3 87.7 7.2 72.0 28.0 6.1 15.0 85.0 7.3 77.0 23.0 6.2 18.5 81.5 7.4 81.0 19.0 6.3 22.5 77.5 7.5 84.0 16.0 6.4 26.5 73.5 7.6 87.0 13.0 6.5 31.5 68.5 7.7 89.5 10.5 6.6 37.5 62.5 7.8 91.5 8.5 6.7 43.5 56.5 7.9 93.0 7.0 6.8 49.0 51.0 8.0 94.7 5.3 6.9 55.0 45.0 Na2HPO4·2H2O分子量＝178.05；0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量＝358.22；0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4·H2O分子量＝138.01；0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量＝156.03；0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。 （九）巴比妥纳-盐酸缓冲液
pH （18℃） 0.04 mol/L 巴比妥钠 (mL) 0.2 mol/L HCl (mL) PH （18℃） 0.04 mol/L 巴比妥钠 (mL) 0.2 mol/L HCl (mL)
6.8 100 18.4 8.4 100 5.21 7.0 100 17.8 8.6 100 3.82 7.2 100 16.7 8.8 100 2.52 7.4 100 15.3 9.0 100 1.65 7.6 100 13.4 9.2 100 1.13 7.8 100 11.47 9.4 100 0.70 8.0 100 9.39 9.6 100 0.35 8.2 100 7.21 巴比妥钠分子量＝206.18；0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。
（十）Tris-HCl缓冲液（0.05 mol/L） 50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷（Tris）溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100毫升。 pH (25℃) X (mL) pH (25℃) X (mL) 7.10 45.7 8.10 26.2 7.20 44.7 8.20 22.9 7.30 43.4 8.30 19.9 7.40 42.0 8.40 17.2 7.50 40.3 8.50 14.7 7.60 38.5 8.60 12.4 7.70 36.6 8.70 10.3 7.80 34.5 8.80 8.5 7.90 32.0 8.90 7.0 8.00 29.2 Tris分子量＝121.14 ；0.1 mol/L溶液为12.114 g/L。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳，使用时注意将瓶盖严。 （十一）、硼酸-硼砂缓冲液 (0.2 mol/L硼酸根)
pH 0.05 mol/L 硼砂 (mL) 0.2 mol/L 硼酸 (mL) pH 0.05 mol/L 硼砂 (mL) 0.2 mol/L 硼酸 (mL) 7.4 1.0 9.0 8.2 3.5 6.5 7.6 1.5 8.5 8.4 4.5 5.5 7.8 2.0 8.0 8.7 6.0 4.0 8.0 3.0 7.0 9.0 8.0 2.0 硼砂：Na2B4O7·10H2O分子量＝381.43；0.05 mol/L溶液（等于0.2 mol/L硼酸根）含19.07 g/L。 硼酸：H3BO3分子量＝61.84；0.2 mol/L的溶液为12.37 g/L。 硼砂易失去结晶水，必须在带塞的瓶中保存。
（十二）甘氨酸-氢氧化钠缓冲液（0.05 mol/L） X毫升0.2 mol/L甘氨酸＋Y毫升0.2 mol/L NaOH加水稀释至200毫升。 pH X (mL) Y (mL) pH X (mL) Y (mL) 8.6 50 4.0 9.6 50 22.4 8.8 50 6.0 9.8 50 27.2 9.0 50 8.8 10 50 32.0 9.2 50 12.0 10.4 50 38.6 9.4 50 16.8 10.6 50 45.5 甘氨酸分子量＝75.07；0.2 mol/L溶液含15.01 g/L
缓冲溶液的配置应遵循的原则和步骤
缓冲溶液的配置应遵循的原则和步骤
配置缓冲溶液原则和步骤:
一、原则
1. 选择合适的酸碱：缓冲溶液是一种常用的pH调节剂，一般需要选用氯化钠或氯化钾作为基本盐，采用溶于水的氨基酸、弱酸弱碱或离子液体等作为酸碱配体，以便调节pH值，并保持系统稳定。
2. 确定有效成分：缓冲溶液的有效成分要满足后续应用的需要，以满足特定的酸碱性质和强度和缓冲范围的需求，另外还需考虑溶解度的大小。
3. 优化配比：从实际需求出发选择合适的配比，满足稳定性、可控性和效率等要求。
二、步骤
1. 根据实际应用需求，确定缓冲溶液的正确pH值范围。
2. 在该范围内，选用适当的酸碱和配体。
3. 按照一定的比率将酸碱和配体混合，以获得一定的缓冲范围。
4. 调整比率，使得缓冲溶液的稳定性和可控性得到满足。
5. 测量缓冲溶液的pH值，确保正确的缓冲作用。
6. 完善相应的存储条件，以确保长期维持系统的有效性。
常用pH缓冲溶液的配制和pH值
常用pH缓冲溶液的配制和pH值序号溶液名称配制方法pH值1氯化钾-盐酸13.0 ml 0.2 mol/L HCl 与25.0 ml 0.2mol/L KCl混合均匀后，加水稀释至100ml1.72氨基乙酸-盐酸在500 ml 水中溶解氨基乙酸150 g，加480 ml浓盐酸，再加水稀释至1L2.33 一氯乙酸-氢氧化钠在200 ml 水中溶解2 g 一氯乙酸后，加40 g NaOH，溶解完全后再加水稀释至1L2.84 邻苯二甲酸氢钾-盐酸把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0 ml 0.1 mol/L HCl混合均匀，加水稀释至100 ml3.65 邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17.5 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml4.86 六亚甲基四胺-盐酸在200 ml水中溶解六亚甲基四胺40 g，加浓HCl 10 ml，再加水稀释至1 L5.47 磷酸二氢钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的磷酸二氢钾与23.6 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml6.88 硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L的硼酸-氯化钾与4.0 ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至100 ml8.09 氯化铵-氨水把0.1 mol/L 氯化铵与0.1 mol/L 氨水以2：1比例混合均匀9.110 硼酸-氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L 的硼酸-氯化钾与43.9 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100 ml10.011 氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠把49.0 ml 0.1 mol/L 氨基乙酸-氯化钠与51.0 ml 0.1 mol/L NaOH混合均匀11.612 磷酸氢二钠-氢氧化钠把50.0 ml 0.05 mol/L Na2HPO4与26.9ml 0.1 mol/L NaOH 混合均匀，加水稀释至100 ml12.013 氯化钾-氢氧化钠把25.0 ml 0.2 mol/L KCl与66.0 ml 0.2mol/L NaOH混合均匀，加水稀释至100ml13.0pH0.2mol/L NaH2PO4(ml)0.2mol/L Na2HPO4(ml) 5.793.5 6.55.892.08.05.990.010.06.087.712.36.185.015.06.281.518.56.377.522.56.473.526.56.568.531.56.662.537.56.756.543.56.851.049.06.945.055.07.039.061.07.133.067.07.228.072.07.323.067.07.419.081.07.516.084.07.613.087.07.710.589.57.88.591.57.97.093.08.0 5.394.725℃下0.1mol/l磷酸钾缓冲液的配制来源：互联网作者：未知发布时间：2006-09-25你会看到这个提示，那是因为你的系统无法识别某栏目的模型信息，或者你新建模型后，没为这个模型设计单独的模板。
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表
实验室常用试剂缓冲液配制方法一览表实验常用试剂、缓冲液的配制方法1、1MTri-HCl□组份浓度1MTri-HCl（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.称量121.1gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。
pH值浓HCl7.4约70mL7.6约60mL8.0约42mL4.将溶解定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
2、1.5MTri-HCl□组份浓度1.5MTri-HCl（pH8.8）□配制量1L□配置方法1.称取181.7gTri置于1L烧杯中。
2.加入约800mL的去离子水，充分搅拌溶解。
3.用浓盐酸调pH值至8.8。
4.将溶液定容至1L。
5.高温高压灭菌后，室温保存。
注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tri溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低0.03个单位。
3、10某TEBuffer□组份浓度100mMTri-HCl，10mMEDTA（pH7.4，7.6，8.0）□配制量1L□配置方法1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。
1MTri-HClBuffer（pH7.4，7.6，8.0）100mL500mMEDTA（pH8.0）20mL2.向烧杯中加入约800mL的去离子水，均匀混合。
3.将溶液定至1L 后，高温高压灭菌。
4.室温保存。
4、3M醋酸钠□组份浓度3M醋酸钠（pH5.2）□配制量100mL□配置方法1.称取40.8gNaOAc3H2O置于100～200mL烧杯中，加入约40mL的去离子水搅拌溶解。
2.加入冰乙酸调节pH值至5.2。
3.加入去离子水将溶液定容至100mL。
4.高温高压灭菌后，室温保存。
5、PBSBuffer□组份浓度137mMNaCl，2.7mMKCl，10mMNa2HPO4，2mMKH2PO4□配制量1L□配置方法1.称量下列试剂，置于1L烧杯中。
各种缓冲液的配制方法_
各种缓冲液的配制方法Na2HPO4-柠檬酸钠缓冲液24。
2柠檬酸. H2O，分子量=210.14 0.1mol/L溶液含21.01g/L2柠檬酸钠. 2H2O，分子量=294.12；0.1mol/L溶液含29.4 g/LNaAC.3 H2O,分子量=136.09 0.2mol/L溶液含27.22g/L（1）醋酸盐溶液的配制：醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.6)取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml，再加水稀释至250ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml，至溶液从蓝色转变为纯绿色，再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.5)取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4.6)取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解，用冰醋酸调节pH值至4.6，再加水稀释至100ml，即得。
醋酸－醋酸钠缓冲液(pH6.0)取醋酸钠54.6g，加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后，加水稀释至500ml，即得。
用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAc)]（在此，C(HAc)指醋酸的浓度，C(NaAc)指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5（1.8乘10的-5次方），PKa=-lgKa=4.75，将PH=5.5代入，可得C(NaAc)/C(HAc)=5.6 通常我们配制时会使C(HAc)=0.1mol/L，或是C(HAc)=0.2mol/L等。
若是配制C(HAc)=0.1mol/L，则C(NaAc)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000/17.5=5.7mL。
m9缓冲溶液成分
m9缓冲溶液成分m9缓冲溶液是一种常用的实验缓冲液，用于细菌培养基的制备以及细菌生长实验中。
它的成分精确，能够维持生物体内的平衡pH值，提供细菌所需的营养物质，有助于细菌生长和繁殖。
本文将详细介绍m9缓冲液的成分及其功能。
m9缓冲溶液的成分主要包括无机盐和有机物质，以下是其中的主要成分及其作用：1.硫酸铵：作为氮源，提供细菌所需的氮元素，促进蛋白质合成。
2.磷酸钠：提供磷元素，参与细胞内ATP等能量物质的合成，维持细胞内能量平衡。
3.氯化钠：提供细菌所需的钠元素，维持细胞内外渗透平衡。
4.氯化钾：提供细菌所需的钾元素，参与细胞内外的离子平衡。
5.硫酸镁：提供镁元素，参与细胞内酶的活性，促进一些生化反应的进行。
6.亚铁氯化物：提供铁元素，参与细胞色素和酶的合成，调控细菌的呼吸过程。
7.葡萄糖：提供细菌所需的碳源，提供能量和碳源用于生物体的生长和代谢。
8. D-生物素：促进微生物的生长和细胞分裂，对核酸和蛋白质合成中的羧化反应有重要作用。
9.酵母膏：提供维生素B的复杂源，为细菌提供维生素和其他生长所需的因子。
10.纯化水：用于稀释其他成分，确保溶液的浓度适宜。
m9缓冲液的配制方法如下：1.首先准备所需的各种成分，按照所需体积计算并称量出来。
2.将适量的纯化水倒入容器中，溶解硫酸铵、磷酸钠、氯化钠、氯化钾、硫酸镁、亚铁氯化物等无机盐。
3.在溶液中加入适量的葡萄糖和D-生物素。
4.将溶液充分搅拌混合，并使用纯化水稀释至指定浓度。
5.最后加入适量的酵母膏，充分搅拌使其溶解均匀。
6.检查溶液的pH值，如果需要调整pH值，可以使用稀盐酸或稀碱溶液进行调节。
m9缓冲液的pH值通常控制在pH 7.0左右，这是因为大多数细菌在中性环境中生长和繁殖最好。
pH值过高或过低都会对细菌生长产生不利影响。
在细菌培养基的制备中，m9缓冲液通常会作为基础培养基。
根据实际需求，可以通过添加抗生素、色素、氨基酸等物质对m9缓冲液进行进一步改良，以满足特定实验的需要。
3-3第三章-缓冲溶液.
pH 4.75 lg 0.101 4.75 0.009 4.76 0.099
pH 4.76 4.75 0.01 b 0.001mol L1 β b 0.001 0.1 pH 0.01
pH = 12
一升HAc+NaAc 混合液
加0.01mol HCl 或加0.01mol NaOH pH基本不变（pH试纸检测）
缓冲溶液的组成和作用机制
定义：由弱酸及其共轭碱所组成的具有抵抗少量 酸、碱或稀释而保持 pH 值基本不变的混合液， 称为缓冲溶液。
缓冲溶液的这种抗酸、抗碱、抗稀释的作用称 为缓冲作用。
符合近似公式计算条件，可按近似公式（3.17）计算
[H] Ka1 Ka2
或
1
1
pH 2 (pKa1 pKa2 ) 2 (2.16 7.21) 4.68
由弱酸和弱碱组成的两性物质溶液
以NH4Ac为例,它在水中发生下列质子传递平衡
NH4+ + H2O
NH3 + H3O+
Ac- + H2O
第五节 缓 冲 溶 液
一、缓冲溶液的组成和作用机制 二、缓冲溶液的PH计算 三、缓冲容量和缓冲范围 四、缓冲溶液的配置 五、缓冲溶液在医学上的意义
对比实验：
pH=7
pH=4.66
一升纯水
加0.01mol HCl，pH = 2
pH = 7
pH = 2
加0.01molNaOH，pH=12
pH = 7
两性物质溶液
(一) 两性阴离子溶液
常用缓冲溶液配制方法
常用缓冲溶液的配制方法1．甘氨酸–盐酸缓冲液（0.05mol/L）X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI，再加水稀释至200毫升2．邻苯二甲酸–盐酸缓冲液（0.05 mol/L）X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl，再加水稀释到20毫升邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23，0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3．磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液24Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液含35.01克/升。
C4H2O7·H2O分子量 = 210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
4．柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液溶液或浓盐酸调节，冰箱保存。
5．柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液（0.1 mol/L）柠檬酸C6H8O7·H2O：分子量210.14，0.1 mol/L溶液为21.01克/升。
柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O：分子量294.12，0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。
7．磷酸盐缓冲液Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05，0.2 mol/L 溶液为85.61克/升。
Na 2HPO 4·12H 2O 分子量 = 358.14，0.2 mol/L 溶液为71.628克/升。
NaH 2PO 4·2H 2O 分子量 = 156.01，0.2 mol/L 溶液为31.202克/升。
磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂，由于它们是二级解离，有二个pKa 值，所以用它们配制的缓冲液，pH 范围最宽：NaH 2PO 4： pKa1＝2.12，pKa2＝7.21； Na 2HPO 4：pKa1＝7.21，pKa2＝12.32配酸性缓冲液：用NaH 2PO 4，pH ＝1～4，配中性缓冲液：用混合的两种磷酸盐，pH ＝6～8， 配碱性缓冲液：用Na 2HPO 4，pH ＝10～12。
常用缓冲溶液的配制
常用pH缓冲溶液的配制和pH值Preparation and pH Values of Common pH Buffer Solutions缓冲溶液的配制三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH8.0）取三羟甲基氨基甲烷12.14g，加水800ml，搅拌溶解，并稀释至1000ml，用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0，即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH8.1）取氯化钙0.294g，加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。
三羟甲基氨基甲烷缓冲液（pH9.0）取三羟甲基氨基甲烷6.06g，加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。
乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml，即得。
巴比妥缓冲液（pH7.4）取巴比妥钠4.42g，加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4，滤过，即得。
巴比妥缓冲液（pH8.6）取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g，加水使溶解成2000ml，即得。
巴比妥－氯化钠缓冲液（pH7.8）取巴比妥钠5.05g，加氯化钠3.7g及水适量使溶解，另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。
然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH磷酸盐缓冲液（pH2.5）取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5，用水稀释至1000ml.磷酸盐缓冲液（pH5.0）取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量，用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
磷酸盐缓冲液（pH5.8）取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g，加水使溶解成1000 ml，即得。
磷酸盐缓冲液（pH6.5）取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
氨基酸测定
茚三酮显色法测定氨基酸的含量一．原理：凡含有自由氨基的化合物，如蛋白质、多肽、氨基酸的溶液与水合茚三酮共热时，能产生紫色化合物，可用比色法进行测定。
氨基酸与茚三酮的反应分两个步骤。
第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被还原成还原型茚三酮；第二步是所形成的还原型茚三酮与另一个茚三酮分子和NH3缩合生成有色物质。
二．仪器：721型分光光度计台天平减压蒸馏器干燥容量瓶移液枪烧杯试管架试管水浴锅。
三．药品：（1）标准氨基酸溶液：配制成0.3 mmol/L 溶液（2）pH5.4，2mol/L 醋酸缓冲液：量取86mL 2mol/L 醋酸钠溶液，加入14mL 2mol/L 乙酸混合而成。
用pH 检查校正。
（3）茚三酮显色液：称取170mg 茚三酮和30mg 还原茚三酮，用20mL 乙二醇甲醚溶解（4）60％乙醇。
（5）样品液：每毫升含0.5～50μg 氨基酸。
茚三酮若变为微红色，则需按下法重结晶：称取5g 茚三酮溶于15～25mL 热蒸馏水中，加入0.25g 活性炭，轻轻搅拌。
加热30min 后趁热过滤，滤液放入冰箱过夜。
次日析出黄白色结晶，抽滤，用1mL 冷水洗涤结晶，置干燥器干燥后，装入棕色玻璃瓶保存。
还原型茚三酮按下法制备：称取0.5g 茚三酮，用12.5mL 沸蒸馏水溶解，得黄色溶液。
将0.5g 维生素C 用25mL 温蒸馏水溶解，一边搅拌一边将维生素C 溶液滴加到茚三酮溶液中，不断出现沉淀。
滴定后继续搅拌15min，然后在冰箱内冷却到4℃，过滤、沉淀用冷水洗涤3 次，置五氧化二磷真空干燥器中干燥保存，备用。
乙二醇甲醚若放置太久，需用下法除去过氧化物：在500mL 乙二醇甲醚中加入5g 硫酸亚铁，振荡1～2h，过滤除去硫酸亚铁，再经蒸馏，收集沸点为121～125℃的馏分，为无色透明的乙二醇甲醚。
四、操作步骤1．标准曲线的制作分别取0.3mmol/L 的标准氨基酸溶液0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0mL 于试管中，用水补足至1mL。
常用pH缓冲液 缓冲液缓冲范围
资料]常用pH缓冲溶液的配制和pH值•常用pH缓冲溶液的配制和pH值常用pH缓冲溶液的配制和pH值一、常用溶液的配制（一）溶液配制注意事项1．药品要有较好的质量试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical reagent，A．R．）化学纯（Chemical pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory reagent，L．R．）等等。
工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。
2．药品称量要精确。
3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。
４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。
（二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1 000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1 000ml）。
2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O 11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1 000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1 000ml）。
3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。
•（三）0.15Mol/L PB 液Na 2HPO 4·2H 2O 分子量=175.05 0.15Mol/L 溶液含26.7g/L 。
Na 2HPO 4·12H 2O 分子量=358.22 0.15Mol/L 溶液含53.7g/L 。
NaH 2PO 4·H 2O 分子量=138.00 0.15Mol/L 溶液含20.7g/L 。