不同产地红景天药材中酪醇的含量测定
双菌株协同发酵提高红景天中苷和酪醇含量的研究
双菌株协同发酵提高红景天中苷和酪醇含量的研究【摘要】目的从已分离的具有红景天苷转化能力的霉菌中，筛选能协同发酵红景天苷的双菌株组合。
方法以重氮盐比色法初步确定菌株组合和双菌株协同主要发酵条件，并用高效液相色谱(HPLC)法复筛。
结果选出的最优双菌株组合编号为35-42，该组合在最优发酵条件下，发酵后红景天中红景天苷和酪醇含量比原药材分别提高86.29%和118.14%，总有效成分提高94.68%。
结论表明双菌株的协同转化作用明显优于单菌株。
【关键词】双菌株发酵；红景天苷；酪醇；重氮盐比色法；高效液相色谱红景天为景天科（Crassulaceae）红景天属Rhodiola crenulata Hook.f.et Thoms植物的根及根茎［1］，我国红景天资源大多分布在高寒地区。
其有效成分主要是红景天苷及其苷元-酪醇，二者均具有抗缺氧、抗疲劳、抗微波辐射、抗病毒、抗肿瘤等作用。
红景天制品是抗高原反应的必备品。
随着红景天产品广泛开发和应用，过度采挖使天然资源日趋枯竭［2］，对高原藏区生态环境的破坏严重。
因此，保护性开发野生资源，提高红景天有效利用率显得更加重要。
在其他一些植物药材中，苷是从无活性的苷元脱去糖基获得的，可以采用酸解或酶法来水解糖基，简便易行。
与之不同，红景天苷和苷元生成是合成代谢，其前体来源不太清楚，从而造成提高其有效成分研究的难度。
目前已有的研究主要包括：添加前体物和酶催化剂合成红景天苷、化学合成法［3］、植物细胞组织培养和基因克隆等方法［4，5］，但与应用还有不小距离。
文章在前期研究中，已分离到对红景天苷具有转化能力的菌株，通过单一菌株发酵，最高可使红景天原药材中苷含量提高52.83%。
本研究进一步采用双菌株协同发酵红景天，使其中苷含量大大高于单一菌株发酵。
混合菌株发酵提高红景天苷和酪醇含量研究还未见报道，为利用生物技术提高野生藏药材资源利用率提供新途径。
1 材料红景天购于成都五块石药材市场，经四川大学生命科学学院许介眉教授鉴定系景天科（Crassulaceae）红景天属Rhodiola crenulata Hook.f.et Thoms。
高山红景天在药品检验中含量测定方法研究
高山红景天在药品检验中含量测定方法研究高山红景天，我国古代第一部医学典籍《神农本草经》中，红景天被列为上品，称其具有“主养命以应天，无毒，多服久服不伤身”，“轻身益气，不老延年”之功效。
《月王药珍》中也有关于红景天的记载。
据记载，清代康熙皇帝就曾钦封红景天为“仙赐草”，并下令民间不得食用，指定其为宫廷专用的御用品。
鉴于红景天的特殊功效，早在七十年代中期国外就将其制成浸膏，给宇航员、飞行员、潜水员、运动员等作为保健品，广泛用于保健医学、运动医学、军事医学、航天医学及预防医学。
库页红景天药用记载源于《长白山植物药志》，药用部位为全草，根及根茎。
功效应用全草：滋补强壮，降压，安神，用于气虚体弱，病后畏寒，气短乏力，肺热咳嗽，咳血，白带，腹泻，跌打损伤，烫火伤，神经症，高原反应。
根及根状茎：抗寒，抗疲劳，抗缺氧和适应原作用。
库页红景天不但具有类似中医“扶正固本”的适应原样作用，而且其药理作用效果和强度是已知补益药中罕见的。
在长白山地区，当地居民称其为“长生不老草”，神农架地区亦称之为“九死还生草”。
标签：高山红景天；药品检验；含量测定参照中国药典2015年版一部红景天项下和大株红景天注射液项下含量测定方法，采用高效液相色谱法测定红景天苷和酪醇的含量。
1 方法考察与结果1.1 仪器与试药Agilent 1200液相色谱仪，LC-2010CHt高效液相色谱仪，对照品购于中检定院，供含量测定用，高山红景天批号：110818-201507（含量99.4%），酪醇111676-200401；乙腈为色谱纯，水为超纯水，其它试剂均为分析纯。
1.2 测定波长的选择取红景天苷、酪醇对照品适量，精密称定，分别加甲醇溶解，在紫外区200～400 nm扫描，结果，红景天苷、酪醇在275 nm附近有最大吸收，与大株红景天注射液方法所采用的检测波长（278 nm）基本一致。
故选定278 nm作为本品的测定波长，见图1、图2。
1.3 流动相的选择参照2015年版药典的方法，采用乙腈-水系统为本法流动相，通过试验，将二者比例调至7：93，在此条件下，供试品图谱基线平稳，供试品色谱图中红景天苷和酪醇能得到很好的分离，主峰前后无杂峰。
不同地区红景天植物红景天苷含量比较研究
不同地区红景天植物红景天苷含量比较研究陶贵荣;赵银萍;齐建红;徐鵾;杨靓【期刊名称】《西北植物学报》【年(卷),期】2010(030)009【摘要】采用高效液相色谱法(HPLC)测定了6种不同地区红景天植物红景天苷含量.以甲醇为提取溶剂,室温超声提取45 min,HPLC测定条件:岛津C18柱(4.6×250 mm,5 μm);流动相为甲醇∶水=3∶7;柱温25℃;检测波长为275 nm.结果表明,红景天苷含量分别为:大花红景天0.36%,狭叶红景天(狮子七)0.32%,宽果红景天0.14%,白三七0.04%,在小丛红景天、洮河红景天中未检测到红景天苷.【总页数】4页(P1902-1905)【作者】陶贵荣;赵银萍;齐建红;徐鵾;杨靓【作者单位】西安文理学院,生命科学系,西安,710065;西安文理学院,生命科学系,西安,710065;西安文理学院,生命科学系,西安,710065;西安文理学院,生命科学系,西安,710065;西安文理学院,生命科学系,西安,710065【正文语种】中文【中图分类】Q946.83【相关文献】1.RP-HPLC法同时测定红景天苷原料药中红景天苷及其有关物质的含量 [J], 张罗红;彭艳;徐燕2.红景天属植物生长和红景天苷r含量影响因素研究进展 [J], 郭娜;接伟光;张颖智;乔巍3.红景天属植物根中红景天苷及其苷元酪醇含量的HPLC分析 [J], 王洋;于涛;阎秀峰4.4种红景天属植物根茎中Rosavin和红景天苷的含量测定 [J], 王曙;张曙光;徐小平;吴静5.HPLC法测定不同产地红景天属植物中红景天苷 [J], 安伟建;陈冠;王文彤;陶遵威;刘伟新因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
超声波提取红景天酪醇工艺研究及数学模拟
超声波提取红景天酪醇工艺研究及数学模拟目的研究红景天酪醇的超声波提取工艺，同时对提取过程进行数学模拟。
方法采用高效液相色谱法，以酪醇含量为指标，通过正交设计及数学模拟优化红景天酪醇的超声波提取工艺。
结果红景天酪醇最佳超声波提取工艺为：80%乙醇为提取溶剂，料液比为1∶35（g∶mL），提取时间30 min，超声功率240 W。
在此条件下，酪醇提取率可达0.150 1%。
与加热回流法比较，提取时间缩短66.7%，提取效率提高12%。
结论该提取方法操作简单，有效成分提取率高。
超声波提取的数学模拟值与试验结果吻合。
Abstract：Objective To study the ultrasonic extraction technology of tyrosol in Rhodiolae Crenulatae Radix et Rhizoma；To mathematically simulate the extraction process. Methods The content of tyrosol was set as index；HPLC was used；the ultrasonic extraction process of tyrosol in Rhodiolae Crenulatae Radix et Rhizoma was optimized by an orhogonal experiment and mathematic simulation. Results The optimum ultrasonic extraction conditions were as follows：80%ethanol was used as extraction solvent，the ratio of material to liquid was 1∶35 （g∶mL），with the extraction time of 30 min and ultrasonic power of 240 W. In these conditions，the extracting rate of tyrosol was 0.150 1%. Compared with the heating reflux method，the extraction time should be shortened by 66.7% and the extracting rate should be increased by 12%. Conclusion The extraction method is simple and the extraction rate of effective components is high. Mathematical simulation values based on ultrasonic extraction are consistent with experiment values.Key words：Rhodiolae Crenulatae Radix et Rhizoma；tyrosol；ultrasonic extraction；mathematic simulation红景天为景天科红景天属植物Rhodiola L.的根及根茎，主要分布于亚洲北部、欧洲北部和阿拉斯加地区[1]。
不同产地红景天药材中酪醇的含量测定
伤必止处方 中马钱子具有大毒 ， 炮制后马钱子 中士 的宁含量 由原
不 同产 地 Ｌ 天 药 材 中酪醇 的含 量 测 定 生 旦 Ｔ ＿ － 尿
胡 海英 ，张 正 全 ，胡 海 云
（ ．郑 州 大学 药学 院 ， １ 河南 郑 州 ４ ０５ ； ５ ０２ ２ ．广 东康 美药业 股 份有 限公 司技 术研 究 中心 ， 东 普宁 广 ５５０ ） １３０
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． ％ ２ ２ 降至 ０ ７ ％ ０ ８ ％ ［ ， 用量微 ， ．％ ．８ ．２ ２ 其 ３ 且与多种 ２ ４ 病理学检查 伤必止各剂量组涂药部位 皮肤 未见药物引起 来 的 １２ ． 因此无 明显 的毒性作 用 。结果表 明， 伤必 止长期 的病变 ， 将各脏器作病理组织学 检查 ， 其组织学变化一 致 ， 未见 药物配伍合理 ， 均 药物引起的病理变化 。与空 白对照组 比较均无 显著性 差异 （ 外 用 是 安 全 的 。 Ｐ＞
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不同产地红景天药材中红景天甙含量的测定
不同产地红景天药材中红景天甙含量的测定
罗晓;杨庆雄;刘绣华;张颖君;杨崇仁
【期刊名称】《化学研究》
【年(卷),期】2006(17)3
【摘要】以红景天甙含量为指标建立了红景天药材的HPLC定量分析方法.色谱条件:C18柱(250 mm×4.6 mm, 25 μm),甲醇-乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长为275 nm.该法灵敏度高,重现性好.利用本方法对六种不同产地红景天药材中红景天甙的含量进行了分析比较.结果表明,产地不同,红景天甙的含量差别很大,其中以云南丽江地区产的含量最高.
【总页数】3页(P83-84,97)
【作者】罗晓;杨庆雄;刘绣华;张颖君;杨崇仁
【作者单位】中国科学院,昆明植物研究所,云南,昆明,650204;河南大学,化学化工学院,河南,开封,475001;云南云药实验室有限公司,云南,昆明,650032;河南大学,化学化工学院,河南,开封,475001;中国科学院,昆明植物研究所,云南,昆明,650204;中国科学院,昆明植物研究所,云南,昆明,650204
【正文语种】中文
【中图分类】R284.2
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1.不同产地红景天中红景天多糖含量的测定和对比分析 [J], 方勇
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一种红景天药材中主要成分的含量测定方法[发明专利]
(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.05.21C N 103808819A (21)申请号 201210484505.0(22)申请日 2012.11.12G01N 30/02(2006.01)G01N 30/06(2006.01)(71)申请人江苏康缘药业股份有限公司地址222047 江苏省连云港市经济技术开发区江宁工业城(72)发明人萧伟 王振中 毕宇安 李家春林夏 胡军华秦建平(54)发明名称一种红景天药材中主要成分的含量测定方法(57)摘要本发明涉及一种红景天药材中没食子酸、红景天苷、酪醇和对香豆酸含量测定方法，包括：分别制备没食子酸对照品溶液、红景天苷对照品溶液、酪醇对照品溶液、对香豆酸对照品溶液和制备红景天药材供试品溶液；以PhenomenexLunaC 18(4.6mm×250mm ，5μm)色谱柱、乙腈-0.3％冰醋酸溶液流动相、柱温40℃、体积流量0.7mL·min -1，分别在波长275nm 和308nm 下测定对照品溶液和的供试品溶液并记录色谱图并计算红景天供试品溶液中没食子酸、红景天苷、酪醇和对香豆酸的含量。
(51)Int.Cl.权利要求书2页 说明书10页 附图9页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书2页 说明书10页 附图9页(10)申请公布号CN 103808819 A1.一种红景天药材中主要成分的含量测定方法，其特征在于，包括下述步骤：1)红景天药材供试品溶液制备：①取红景天药材用6～10倍量的水煎煮1～3h，过滤，得第一次滤液和滤渣，滤渣再加6～10倍量的水煎煮1～3h，过滤，得第二次滤液，合并两次滤液并减压浓缩至滤液的1/20～1/12体积，获得浓缩液I；②用大孔树脂对浓缩液I进行纯化，以红景天药材与树脂的重量比1∶1～3进行上样；然后先以水洗脱，弃去水液，再以15～30％乙醇洗脱，收集15～30％乙醇洗脱液；③将洗脱液浓缩至密度1.05～1.10，得浓缩液II；④用75～85％乙醇醇沉浓缩液II12～36h，得上清液，弃沉淀；⑤将醇沉上清液浓缩、干燥、粉碎，获得红景天提取物；⑥称取红景天提取物，加入10～30％乙醇溶解并定溶，每毫升含红景天提取物1～5mg，即得；2)分别制备没食子酸对照品溶液、红景天苷对照品溶液、酪醇对照品溶液和对香豆酸对照品溶液；3)利用高效液相色谱分析法在双波长同时检测红景天药材中没食子酸、红景天苷、酪醇和对香豆酸含量；色谱条件为：HPLC色谱柱为Phenomenex Luna C18柱，流动相为乙腈(A)-0.1～0.5％冰醋酸溶液(B)，洗脱程序为：0→5min，A从0线性上升至6～12％，B从100％线性下降至94～88％；5→30min，A从6～12％线性上升至20～30％，B从94～88％线性下降至80～70％；30→35min，A从20～30％线性上升至35～45％，B从80～70％线性下降至65～55％；柱温：20～40℃；体积流量0.5～1.5mL·min-1；检测波长：275nm、308nm；进样量2～20μl；4)根据高效液相色谱分析结果计算红景天药材中没食子酸、红景天苷、酪醇和对香豆酸的含量。
红景天中红景天苷和酪醇提取工艺研究
红景天中红景天苷和酪醇提取工艺研究红景天是一种生长在我国高原草甸、腹地山区的名贵野生草药，已被认为拥有一定的调节心血管功能、提高免疫力等保健作用，特别是红景天中含有的红景天苷和酪醇是两种具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生理活性成分。
在对红景天进行深入研究和开发利用的过程中，红景天苷和酪醇的提取工艺显得尤为重要。
本文将从以下三个方面来阐述红景天中红景天苷和酪醇的提取工艺研究。
一、红景天苷的提取工艺研究：1. 选择优质红景天原料：由于红景天苷的含量因不同的生长环境、生长状态和季节等因素而异，因此选择优质红景天原料非常重要。
2. 优化提取工艺：根据红景天苷的特性，采用水提醇沉法进行提取，调整不同的提取参数如时间、温度、浓度等以达到红景天苷提取效果最佳。
3. 精制和净化红景天苷：将提取得到的红景天苷采用ABS-8型吸附树脂进行分离纯化，得到含红景天苷98%以上的制剂。
二、酪醇的提取工艺研究：1. 选择优质红景天原料：同样，酪醇的提取也需要选择优质红景天原料。
2. 优化提取工艺：酪醇的提取可采用乙醇浸提法加分级分离提高提取效果，通过控制原料粉碎度、醇浓度、提取时间等参数，充分提取酪醇。
3. 精制和净化酪醇：采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和光谱技术对酪醇进行精制和净化，并经过低温真空干燥制为粉末。
三、酪醇和红景天苷共同提取工艺研究：1. 选择优质红景天原料：这一点同样适用于酪醇和红景天苷共同提取工艺。
2. 优化提取工艺：在提高红景天苷提取效果的同时，采用合适的有机溶剂如乙醇、丙酮等进行酪醇的提取，调整提取参数使两种物质得以充分提取。
3. 精制和净化酪醇和红景天苷：可将提取得到的物质分别采用吸附剂、凝胶电泳等技术进行精制和净化，制得高纯度的酪醇和红景天苷。
通过上述分步骤阐述，可以看出红景天中红景天苷和酪醇的提取工艺是通过优化提取参数、精制和净化等方面来一步步提高提取效果和制备高纯度产品的。
这些研究成果为红景天的进一步开发应用提供了有力保障。
红景天不同工艺炮制品中红景天苷和酪醇含量比较
红景天不同工艺炮制品中红景天苷和酪醇含量比较何宝佳;钱丽;魏蔚【摘要】本文探讨了不同炮制方法对红景天中红景天苷和酪醇含量的影响.方法:以红景天苷和酪醇含量为指标,对红景天的不同工艺炮制品进行比较;用HPLC法测定红景天苷和酪醇的含量.实验条件:色谱柱:VP-ODS,250L* 4.6,7092187;流动相为乙腈-水(8:92);流速1.0mL/min;检测波长:224nm;柱温:25℃;进样量10μL.结论:红景天经过不同方法的炮制后,红景天苷和酪醇含量均有不同程度的升高,尤以红景天苷含量增加更为显著,且炮制方法不同,含量有所差别,说明不同炮制方法对红景天活性成分含量有影响,为实际应用提供很好的理论指导.【期刊名称】《通化师范学院学报》【年(卷),期】2016(037)004【总页数】4页(P46-49)【关键词】红景天;红景天苷;酪醇;炮制;HPLC【作者】何宝佳;钱丽;魏蔚【作者单位】皖南医学院,安徽芜湖241000;皖南医学院,安徽芜湖241000;皖南医学院,安徽芜湖241000【正文语种】中文【中图分类】R284饮片炮制工艺是我国中医药宝库的重要组成部分，饮片入药、生熟异治是中医用药的特色和优势所在[1].而中药炮制的研究平台的组成核心就是传统中药饮片炮制原理、炮制规范化和饮片质量评价方法研究的技术平台[2]，只有对中药炮制前后的理化性质和药理的变化有充分的了解，同时知晓这些变化所具备的临床意义，才能对炮制方法作出比较科学的评价，进而改进炮制工艺[3].然而，到目前为止，绝大多数的中药炮制原理仍不清楚.因此，在中医药学的理论指导下，利用现代知识技术可以对中药炮制原理进行研究，推动中医炮制理论的发展，并提高中药的临床使用价值.红景天是景天科多年生草木或灌木植物[4]，生长在海拔800～2500m高寒无污染地带.由于其生长环境恶劣，如缺氧、低温干燥、狂风、受紫外线照射、昼夜温差大，因而具有很强的生命力和特殊的适应性,为亚洲地区常用传统药材，能够补气清肺，益智养心，具有刺激神经系统、增加工作效率、消除疲劳和预防高山症等作用,亦有很好的美容效果，可做护肤品，也可食用.民间常用来煎水或泡酒，以消除劳累或抵抗山区寒冷.同时还具有防病健体和滋补益寿等作用.随着人体逐渐衰老，人的免疫力不断下降，红景天的适应原样作用能提升肌体对有害刺激的非特异性抵抗力，加强肌体的适应性.同时，红景天能迅速提高血红蛋白与氧的结合能力，提高血氧饱和度，降低机体的耗氧量，增加运动耐力，恢复运动后疲劳，具有极大的抗氧化作用.研究指出，氧化作用在很多疾病的发展过程扮演着十分重要的角色，例如癌症、心血管病、糖尿病、神经退化及类风湿性关节炎等.总之，红景天作为近年来新发现的适应原样补益药，在国外已进行了较为深入的研究，前苏联保健部药理委员会将红景天列为人参型兴奋剂及“适应原”样药，临床应用于抗疲劳、提高体力和脑力劳动功能、神经官能症、张力减退综合征、糖尿病和贫血等病症.目前，国内对红景天的研究还远不及对人参、刺五加等研究得那么透彻、深入，对其有效成分的研究也仅限于红景天苷及其苷元的研究.张立海[5]等研究指出,不同来源以及不同炮制方法的女贞子中红景天苷含量存在差异,本研究以红景天苷和酪醇含量为指标，通过反相高效液相色谱法对红景天加黄酒的不同工艺炮制品进行比较[6]，为探讨红景天炮制机理，优化红景天炮制工艺提供实验依据.1.1 仪器UV-2501PC紫外分光光度计(日本岛津)；高效液相色谱仪：系统控制器(CBM-20Alite)、泵A(LC-20AT)、柱温箱(CTO-10ASvp)、PDA检测器(SPD-M20A);分析天平(感量：0.0001g)；超声波清洗器(KQ5200E，昆山市超声仪器有限公司)；真空压力泵(DP-01).1.2 试剂及材料红景天药材饮片(1kg)购自芜湖市张恒春大药房，产地为新疆，批号为130401，生产日期为2013年4月；红景天苷(大连美仑生物技术有限公司，批号为20140326)；酪醇对照品(大连美仑生物技术有限公司，批号为A1015AS)；高效液相用乙腈、甲醇(均为色谱纯)；黄酒；怡宝矿泉水.1.3 样品的制备生品：取红景天原材料烘干样品.红景天酒炖品：取净红景天干燥样品50g置100mL烧杯中，加入黄酒、水拌匀，密封闷润，转移至不锈钢盒中，放入锅屉，用蒸汽加热炖制，取出放凉，烘箱中50℃烘干，取出放凉，塑料袋密封，分别得到1-9号酒蒸品，具体操作方法如表1：2.1 水分含量测定取各样品粉末25g，按《中国药典》酒蒸品2005年版一部附录IXH水分测定法测定，结果生品为7.37%、酒蒸品1为8.34%、酒蒸品2为8.48%、酒蒸品3为8.85%、酒蒸品4为7.92%、酒蒸品5为8.44%、酒蒸品6为8.65%、酒蒸品7为8.68%、酒蒸品8为8.98%、酒蒸品9为8.46%.2.2 红景天苷和酪醇含量测定(1)对照品溶液的制备.精密称量红景天苷标准品5.000mg和酪醇标准品5.000mg分别至10mL容量瓶中，加入甲醇超声溶解，待冷至室温后，定容至刻度，摇匀，分别得0.5mg/mL的红景天苷对照品溶液和0.5mg/mL酪醇对照品溶液，0.45μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即为对照品溶液；分别精密吸取红景天苷和酪醇对照品溶液各5mL，混匀，即得红景天苷与酪醇对照品混合液.(2)检测波长的选择.分别吸取红景天苷对照品溶液和酪醇对照品溶液，用紫外分光光度计在200～400nm波长范围内扫描，结果发现，红景天苷在224.2nm处有最大吸收，酪醇在224.6nm处有最大吸收，由此确定224nm为检测波长.(3)色谱条件.色谱柱：VP-ODS，250L*4.6，7092187 ;流动相为甲醇-水(8：92)；流速1.0mL/min；检测波长：224nm;柱温：25℃进样量10μL.(4)线性关系考察.精密吸取红景天苷和酪醇对照品混合液1μL、2μL、4μL、6μL、8μL、10μL注入液相色谱仪，测定峰面积.以进样量(μg)为横坐标，峰面积为纵坐标绘制成标准曲线，红景天苷的线性范围为0.25～2.5μg，回归方程是Y=924156X-21798，r=0.9998，如图1所示；酪醇的线性范围为0.25～2.5μg回归方程是Y=2*106X+431.05，r=0.9996，如图2所示.(5)供试品溶液的制备.精密称取各样品粉末约1.0g，置于50mL容量瓶中，加少量甲醇溶解，超声处理30min，取出，放冷，用甲醇定容至刻度，摇匀，用0.45nm微孔滤膜过滤后即得(每1mL相当于原药材0.02g).(6)精密度实验.取酒蒸品2供试品溶液,连续进样6次,记录峰面积,计算红景天苷的RSD=1.49%,酪醇的RSD=1.55%,表明仪器精密度良好.(7)稳定性实验.取酒蒸品2供试品溶液,在室温下自然放置,分别在0h、2h、4h、6h、8h、12h进行测定,结果表明，红景天苷的RSD=1.34%,酪醇的RSD=1.32%,表明供试品溶液在12 h内稳定.(8)重复性实验.取酒蒸品3,平分6份,按供试品溶液的制备方法制备并测定,结果表明，红景天苷的RSD=1.56%,酪醇的RSD=1.89%,表明测定方法重复性良好.(9)加样回收率实验.取酒蒸品2,共6份,各约0. 2 g,精密称定,分别精密加入红景天苷和酪醇对照品混合溶液各0. 75 mL,再精密加入30%乙醇至4mL,按供试品溶液的制备方法制备并测定,结果见表2、表3.(10)样品测定.取各供试品溶液，用0.45nm滤膜过滤，分别取滤液20μL注入高效液相色谱仪，即含有原材料0.4μg/20μL(每1μL相当于原药材0.02μg)，测定峰面积，色谱图见图3-6，按标准曲线计算样品中红景天苷和酪醇的含量见表4和表5.以红景天苷和酪醇含量为指标,对红景天不同工艺炮制品进行比较.测定了红景天生品及炮制品中红景天苷和酪醇的含量，并对其结果进行比较，由结果可知，红景天经不同方法炮制后的红景天苷和酪醇含量均有不同程度的变化，红景天苷含量由多到少的顺序为：酒蒸品2，酒蒸品5，酒蒸品8，生品，酒蒸品4，酒蒸品3，酒蒸品1，酒蒸品7，酒蒸品9，酒蒸品6，通过与生品的对比，酒蒸品2、酒蒸品5、酒蒸品8的红景天苷含量升高，其中酒蒸品2升高最为明显，其红景天苷含量达到了0.566018%,即加黄酒用量20%+水用量10%、闷润2h、炖制8h的炮制品中红景天苷含量最高；酒蒸品1、3、4、6、7、9中测得的红景天苷含量比生品要低；酪醇的含量由多到少的顺序为: 酒蒸品8，酒蒸品4，酒蒸品5，酒蒸品3，酒蒸品9，酒蒸品7，酒蒸品2，酒蒸品1，酒蒸品6，生品，经过黄酒炮制后的酪醇含量均升高，且酒蒸品8的酪醇含量最高，酪醇含量达到了0.782044%，即加黄酒用量30%+水用量10%、闷润1h、炖制10h的炮制品中酪醇含量最高.在实际运用中可根据需要来选择不同的炮制工艺,若重点在于红景天苷的含量,则选用酒蒸品2的炮制方法来制作炮制品,即加黄酒用量20%+水用量10%、闷润2h、炖制8h加工而成;若需要酪醇含量较高,则选用酒蒸品8的炮制方法来制作, 即加黄酒用量30%+水用量10%、闷润1h、炖制10h加工而成；综合来看,选用酒蒸品8的炮制工艺可以同时得到相对较高含量的红景天苷和酪醇.【相关文献】[1]周莹.制定饮片质量标准，促进饮片生产规范[J].中药研究与信息，2001,3(1):23-24.[2]肖永庆，张村，李丽.中药炮制学科学展望[J].中华中医药杂志,2009(10).[3]杨家驹.古今中药炮制经验[M].长沙:湖南科学技术出版社, 1991: 144.[4]魏志莉.红景天的生理特点及保健功能[J].实用医技杂志，2011(12).[5]张立海，宋友华，孙春华等.反相高效液相色谱法测定女贞子中红景天苷的含量[J]. 中国药学杂志,2001,36(11):760-761.[6]胡海英，杨丽嘉，胡海云，李继成.不同产地红景天药材中红景天苷含量的测定[J].安徽农业科学,2009(19).。
HPLC测定不同产地高山红景天中甙元酪醇的含量
用。
4实验结论（1）中药滴丸剂是一种具有发展前途的药物新剂型，具有提高难溶性药物的生物利用度等突出优点，近年来已有较大发展。
其成型工艺研究是制剂中非常重要的一个环节，其影响因素较多。
我们通过正交实验优选出了黄连滴丸的最佳成型工艺为：以PEG4000和PEG6000等量混合物为基质，二甲基硅油为冷却剂，滴制口径为1mm ，滴速为40滴／min ，滴距为15cm ，药物与基质的配比为1:50，料温为90℃，冷却液温度为15℃。
（2）黄连主要成分为小檗碱，小檗碱目前主要剂型为片剂和胶囊，溶解度较差，药物溶出速度慢，吸收差。
制成滴丸剂后，药物在基质中以微细状态存在，能提高药物的溶出速度，起到速效、高效，降低不良反应，提高生物利用度等作用。
（3）对滴丸的质量评价，不同实验室方法各异。
本实验为避免主观评分方法中人为因素的干扰，采用多指标的客观评价体系,从丸重差异、圆整度和溶散时限三个方面对滴丸进行综合评分。
通过客观数值的比较，以及指标的权重特征进行综合评分，可取得理想并合理的效果。
（4）在前人中药滴丸剂的研究中，药物主要以浸膏形式与基质混合。
但不同实验室做出的中药浸膏质量有差异，为滴丸中药物成分的计算带来误差。
本实验中，药物以干粉的形式与基质混合，定量性好，便于滴丸中有效成分的计算。
参考文献：［1］刘伟键，蔡琪．从周易哲学、古今药理运用浅谈黄连—肉桂药对［J ］．光明中医，2009，24（4）：757－759．［2］王志华，陈碧，陈新玉．黄连提取方法的试验研究［J ］．实用药物与临床，2008，11（3）：191－192．［3］张兆旺．中药药剂学［M ］．北京：中国中医药出版社，2003：382－383．［4］陈三宝．板蓝根滴丸制剂的工艺研究［J ］．海峡药学，2008，20（6）：22－23．（责任编辑：王尚勇）收稿日期：2010－06－24作者简介：陈珊珊（1980－），女，吉林大学助理工程师，研究方向为天然植物的提取与检测。
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不同产地红景天药材中酪醇的含量测定（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）
作者：胡海英，张正全，胡海云
【摘要】目的测定并比较不同产地红景天药材中酪醇的含量。
方法高效液相色谱（HPLC）法，乙腈-水(1∶9)为流动相，检测波长为280 nm。
结果11个不同产地红景天药材中酪醇含量在0.048%～0.382%，其中新疆诚德所产红景天药材酪醇含量最高（0.382%）。
结论不同产地红景天药材中酪醇的含量差异显著。
【关键词】红景天；酪醇；高效液相色谱
Abstract：ObjectiveTo measure and compare the content of Ptyrosol in Rhodiola L. from different areas.MethodsThe content of Ptyrosol in Rhodiola L. was measured by high performance liquid chromatography. The conditions for HPLC were as follows: the mobile phase: acetonitrile-water (1:9); the detection wavelength :280nm.ResultsPtyrosol contents in 11 samples from different areas were in the range of 0. 048%～ 0. 382%. The sample with the highest content was from Chengde,Xinjiang province .ConclusionThe contents of Ptyrosol
in Rhodiola L. from different areas are different greatly.
Key words：Rhodiola; Ptyrosol; HPLC
红景天为红景天科红景天属多种植物的根及根茎，或以全草入药，至今已有一千多年的药用历史，具有清热解毒、燥湿、滋补强壮、扶正固本的功能。
其主要有效成分是红景天苷及其苷元酪醇、酪萨维、二苯甲基六氢吡啶、红景天素等。
其中，红景天苷的化学结构和药理作用明确［1，2］，为红景天属药用植物的主要有效成分之一［3］。
本文参照文献［4］方法，采用HPLC法进行了11个不同产地红景天药材中酪醇含量的测定，结果如下。
1 器材
1.1 仪器Agilent 1100高效液相色谱仪，Sartorius BS 400S-WEI 万分之一分析天平、BT 25 S十万分之一分析天平(北京塞多利斯天平有限公司)；色谱柱：Hypersil ODS(4.6 mm×250 mm，5 μm)；MJ-600超声波发生器(无锡市美洁超声清洗设备有限公司)。
1.2 材料酪醇对照品（中国药品生物制品检定所，批号111676-200401），乙腈（色谱纯，美国Fisher公司 )；水为超纯水，HPLC用所有试剂均经0.45μm微孔滤膜过滤。
红景天药材样品由广东康美药业股份有限公司提供并经郑州大学药学院生药教研室鉴定。
红景天药材样品来源见表1。
表1 红景天样品来源（略）
2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱为Hypersil ODS（4.6 mm×250 mm，5 μm）；
流动相为乙腈-水(1∶9)，流速1.0 ml·min-1；柱温25℃；进样量10μl，检测波长280 nm，参比波长360 nm。
见图1。
2.2 对照品溶液的制备
精密称取酪醇对照品5.27 mg置10 ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。
2.3 精密度实验
取上述对照品贮备液，精密移取1.0 ml置5 ml棕色量瓶，用流动相稀释至刻度，摇匀，即得对照品溶液。
按“2.1”项色谱条件测定峰面积，连续进样6次,计算峰面积的RSD为0.12%。
结果表明仪器精密度良好。
2.4 标准曲线的绘制
分别精密移取“2.2”项对照品贮备液0.1，0.5，1.0，2.0，2.5 ml置5 ml棕色量瓶，用流动相稀释至刻度,摇匀,分别过0.45μm微孔滤膜,按照“2.1”项色谱条件分别进样2次,以浓度（mg·ml-1）为横坐标,峰面积（A）为纵坐标进行回归分析,得回归方程Y=5 581.6X-10.92，r=0.999 6，结果表明酪醇含量在0.105 4～2.625 μg线性关系良好。
2.5 供试品溶液的制备
精密称定称取红景天粉末（过3号筛）2.0 g，置具塞锥形瓶中，精密加水50 ml，密塞，摇匀，称定重量，超声处理50 min（300 W），放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
.
2.6 稳定性实验
以2号样品按照“2.1”项条件进行测定，在0，2，6，12，24 h 进样分析,计算酪醇峰面积的RSD为1.08%,结果表明,样品在24 h内稳定。
2.7 重现性实验精密称取同一批号红景天药材（2号）粉末6份，2.0 g/份，按“2.5”方法分别制备样品溶液，测定，计算酪醇的平均含量为0.086%(RSD =1.25%)。
结果表明，实验重现性良好。
2.8 加样回收率实验精密称取上述已知酪醇含量的红景天药材粉末6份，每份1.0 g，分别加入对照品 0.861 mg，按照“2.5”项方法制备样品溶液，测定，计算酪醇的平均加标回收率为98.82%(RSD=1.19%)。
结果见表2。
表2 加样回收率实验结果（略）
2.9 样品测定
按上述色谱条件测定。
称取红景天药材粉末 2.0 g，精密称定，按上述“2.5”方法制备样品溶液，测定酪醇的含量。
结果见表3。
表3 不同产地红景天药材中酪醇含量测定结果（略）
3 讨论
结果表明不同产地红景天药材中酪醇的含量差异很大，其中以新疆诚德万鑫经贸红景天药材中酪醇含量最高，为0.382%。
红景天原为我国传统藏药，随着现代研究的深入，红景天一跃成为我国继人参、刺五加之后发现的环境适应性药物领域的一支生力军。
目前红景天的商品来源较为复杂。
2005年版《中国药典》只将大花红景天作为收载品种，且规定红景天苷为用药标准，但作者认为单一性的指标成分
不能完全衡量红景天药材的优劣，而只能作为某一批次药材质量的参考依据之一（谷燕莉.红景天的品种整理和质量研究.北京中医药大学硕士论文）。
【参考文献】
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［2］明海泉.红景天苷的合成和药理作用［J］.药学通报，1986，21（6）：373.
［3］胡磬，张国明，童月建.红景天片剂薄层鉴别及红景天苷的含量测定［J］.中成药，2000，22（11）：808.
［4］王洋，于涛，阎秀峰.红景天属植物根中红景天苷及苷元酪醇含量的HPLC分析［J］.林产化学与工业，2006，26（3）：51.。