高二生物人教版选修一讲义：专题二 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 含答案
人教版高中生物选修一 1 一、研究思路 1．筛选菌株 (1)原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物的生长。 (2)选择培养基：允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 2．统计菌落数目 (1)常用方法：稀释涂布平板法。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)测定微生物数量的常用方法还有显微镜直接计数法。 3．设置对照：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。 二、实验设计 土壤取样→样品的稀释→微生物的培养与观察 1．土壤取样一般要铲去表层土，因为绝大多数细菌分布于距地表约 3～8_cm的土壤层。 2．样品的稀释：不同的微生物需要稀释的倍数不同。(填表) 微生物 细菌 放线菌 真菌 稀释倍数 104、105、106 103、104、105 102、103、104 3.微生物的培养与观察 (1)培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。 (2)观察：每隔24_h统计一次菌落数目，最后选取菌落数目稳定时的记录作为结果。
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 人教版高中生物选修一 2 三、操作提示 1．无菌操作：取土样用的小铁铲和盛土样的信封都要进行灭菌；称取土样要在火焰旁进行，稀释样品要在火焰旁操作。 2．做标记：对平板和试管进行标记，尤其进行系列稀释时要按照稀释度递增的顺序将试管排列成行。 3．制定计划：对于耗时较长的生物实验，要事先规划时间，以便提高工作效率。 四、菌种鉴定 1．原理：分解尿素的细菌合成的脲酶将尿素分解成氨，使培养基的碱性增强。 2．方法：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。
探究点一 筛选微生物的研究思路 [共研探究] 1．筛选菌株 分析下表所示培养基的配方，回答下列问题： 成分 含量 成分 含量 KH2PO4 1.4 g 葡萄糖 10.0 g Na2HPO4 2.1 g 尿素 1.0 g MgSO4·7H2O 0.2 g 琼脂 15.0 g 将上述物质溶解后，用自来水定容到1 000 mL (1)在该培养基的配方中，为微生物提供碳源的物质是葡萄糖，提供氮源的物质是尿素。
1．尿素能被尿素分解菌分解的原因是什么？ 2．筛选菌落和统计菌落数目的方法及对照实验的设计方法是什么？ 3．如何利用选择培养基分离细菌？ 4．样品如何进行稀释？如何测定分解尿素的细菌数量？ 5．脲酶的检测方法是什么？ 人教版高中生物选修一
3 (2)该培养基是否具有选择作用，为什么？ 提示：是。绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，本培养基以尿素为唯一氮源，可以分离得到产生脲酶的微生物(即分解尿素的微生物)。 2．统计菌落数目 (1)为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。 (2)要设置对照实验，且一定要涂布至少3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性。 (3)用此种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低。这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。因此，统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示。 (4)活菌数的计算方法(公式)：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M。C表示某一稀释度下平板上生长的平均菌落数；V表示涂布平板时所用的稀释液的体积；M表示稀释倍数。 3．设置对照 教材P22～23提供的案例中A同学的结果与其他同学不同，可能的解释有两种。一是由于土样不同，二是由于培养基污染或操作失误。如何设置对照实验来确定原因？ 提示：方案一：其他同学用与A同学一样的土样进行实验，如果结果与A同学一致，则证明A同学操作无误；如果结果不同，则证明A同学存在操作失误或培养基的配制有问题。 方案二：将A同学配制的培养基在不加土样的情况下进行培养，作为空白对照，以证明培养基是否受到污染。
[总结升华] 1．微生物的筛选 (1)选择培养微生物的两种方法 ①可利用该分离对象对某种营养物质有“嗜好”的原理，专门在培养基中加入该营养物质，并且使该营养物质成为培养基中某类基本营养物质的唯一供给者。如筛选能分解尿素的细菌，就可将尿素作为培养基中的唯一氮源。 ②可利用该分离对象对某种抑菌物质的抗性，在混合培养物中加入该抑菌物质，经培养后，其他微生物生长受到抑制，而该分离对象却可乘机大量增殖，在数量上占据优势。 (2)常见的选择培养基 ①将培养基放在高温环境中培养，分离耐高温的微生物。 人教版高中生物选修一 4 ②以石油为唯一碳源的培养基，可以分离能消除石油污染的微生物。 ③不含有机碳源的培养基可以分离自养型微生物。 ④无氮源培养基可以分离固氮微生物。 ⑤加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 ⑥加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 2．统计菌落数目的方法 微生物生长量的测定有计数法、重量法、生理指标法等方法，但是一般使用计数法，计数法可分为直接计数法和间接计数法。二者的比较如表所示： 项目 直接计数法 间接计数法
原理 利用特定血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物的数量 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌 主要用具 显微镜、血细胞计数板 培养基 计数依据 菌体本身 培养基上菌落数 优点 计数方便、操作简单 计数的是活菌 缺点 死菌、活菌都计算在内 操作较复杂，有一定误差
计算公式 每毫升原液含菌数＝400×104×每小格平均菌体数×稀释倍数① 每毫升原液含菌数＝培养基上平均菌落数÷涂布液体积×稀释倍数 注：①400、104是常数。
3．实验设计原则 (1)单一变量原则。对照实验中除测试因素(自变量)不同外，其他因素要保证和实验组相同。 (2)平行重复原则。任一稀释度至少涂布3个平板，以增强实验结果的可信度与准确性。 (3)对照原则。 ①判断培养基是否有杂菌污染，需要将未接种的相同培养基在相同条件下同时进行培养。 ②判断培养基是否起到了筛选的作用，需要同时设立牛肉膏蛋白胨培养基进行同样接种后培养，观察两种培养基上的菌落数目是否有显著差异。
[对点演练] 1．下列关于统计菌落数目方法的叙述，错误的是( ) 人教版高中生物选修一 5 A．当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落 B．为了保证结果准确，一般采用菌落密度较大的平板进行计数 C．采用稀释涂布平板法计数获得的菌落数往往少于实际的活菌数 D．在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果 [解析]选B 当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落；为了保证结果准确，一般选取菌落数在30～300之间的平板进行计数；采用稀释涂布平板法计数获得的菌落有可能是由多个细菌形成的，所以往往少于实际的活菌数；在某一浓度下涂布三个平板，若三个平板统计的菌落数差别不大，则应以它们的平均值作为统计结果以减小实验误差。 2．(2017·全国卷Ⅰ)某些土壤细菌可将尿素分解成CO2和NH3，供植物吸收和利用。回答下列问题： (1)有些细菌能分解尿素，有些细菌则不能，原因是前者能产生__________。能分解尿素的细菌不能以尿素的分解产物CO2作为碳源，原因是__________________。但可用葡萄糖作为碳源，进入细菌体内的葡萄糖的主要作用是_____________________(答出两点即可)。 (2)为了筛选可分解尿素的细菌，在配制培养基时，应选择________(填“尿素”“NH4NO3”或“尿素＋NH4NO3”)作为氮源，不选择其他两组的原因是____________________________________________________。 (3)用来筛选分解尿素细菌的培养基含有KH2PO4和Na2HPO4，其作用有________________________________________________(答出两点即可)。 [解析](1)土壤中的某些细菌之所以能够分解尿素，是因为它们能产生脲酶。尿素分解菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物，必须利用现成的有机物(如葡萄糖)作为碳源；葡
萄糖通过呼吸作用被分解时，能为细胞生命活动提供能量，同时，葡萄糖还可以转化成脂肪、某些氨基酸等物质，所以进入细菌体内的葡萄糖能为其他有机物的合成提供原料。(2)选择培养基只是允许特定种类的微生物(目的微生物)生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。本实验的目的菌是可分解尿素的细菌，因此配制的培养基应只允许尿素分解菌生长，NH4NO3可以作为所有细菌的氮源，培养基中如含有NH4NO3，将不能起到筛选作用。
(3)KH2PO4和Na2HPO4能为细菌生长提供钾盐、钠盐和磷酸盐，而H2PO4－/HPO42
－
可作为
缓冲剂，使培养基中pH保持相对稳定。 [答案](1)脲酶 分解尿素的细菌是异养生物，不能利用CO2来合成有机物 为细胞生命活动提供能量，为其他有机物的合成提供原料 (2)尿素 其他两组都含有NH4NO3，能
2.2课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数11
计算方法：
每克样品中的菌落数＝（C÷V）×M
其中，C代表某一稀释度下平板上生长的 平均菌落，V代表涂布平板时所用的稀释 液的体积（mL），M代表稀释倍数。
例题：在稀释度105下求出3个平板上菌落
的平均值是63，那么每克样品的菌落数是
多少？
6.3 × 107
第 二 位同学的结果接近真实值。
这两位同学的实验需要改进的操作是第一位同学需设 置重复实验组；第二位同学统计的三个菌落数第一个 与后两个相差太大，说明操作有误，需重新实验。
生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以 通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生 物。
〖思考1〗在该培养基的配方中，为微生物的生长提供 碳源和氮源的分别是什么物质？
在该培养基配方中，为微生物的生长提供碳源的是 葡萄糖 ，提供氮源的的是 尿素。
〖思考2〗课本P22的培养基配方对微生物是否具有选 择作用？如果具有，是如何进行选择的？
由于初次实验，对于稀释的范围没有把握，
因此选择了一个较为宽泛的范围：稀释倍
数为( 103－)1每07个稀释度下需要( )
选3择个培养基，测定土壤中细菌一般选用的
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
稀释度为（
104、105、）1，06 放线菌为
（ 103 104 ）10、5、真菌为
（ 102、103、104 ）。
将10 g土样加入盛有90mL水的锥形瓶中
土壤中分解尿素的细菌的分离与计数
1 、什么是尿素 ？ 2、为什么从热泉中能把耐热细菌筛选出来？ 3、如何统计菌落数目？方法有哪些？ 4、如何设置对照？
尿素是一种重要的氮肥，农作物不能直接吸收利用， 但土壤中有能分解尿素的细菌，细菌的作用是能够合
2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数
是
分离 只生长 尿素 尿素细
养基
细菌 菌
对照组
牛肉膏蛋 白胨培养
基
判断该培 生长多
是
养基有无 种微生 选择性 物
㈡.统计菌落数目：
1、显微镜直接计数：
利用血球计数板(血细胞计数板），在显微镜下计算一定 容积里样品中微生物的数量。
优点： 设备简单、能观察微生物的形态特征
缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
DNA多聚酶链式反应（PCR）是一种在体外将少量DNA大量复制 的技术，而此项技术的实施必须使用耐高温（93℃）的DNA聚合酶。
or ?
水生栖热菌Taq
Taq酶
因为热泉温度为70～800C，淘汰了绝大多数微生物只有
Taq细菌被筛选出来。
1.启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境要求，到相应的 环境中去寻找。
每隔24h统计一次菌落数目。 选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培 养时间不足而导致遗漏菌落的数目。
菌落的特征：形状、大小、隆起程度和颜色等。
三、操作提示
[一]无菌操作 1、取土用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都需要灭菌。 2、应在火焰旁称取土壤。在火焰附近将称好的土样倒入锥形瓶中，塞好棉塞。 3、在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在火焰旁操作。 [二]做好标记 注明培养基种类、培养日期、平板培养样品 的稀释度等。 [三]规划时间
石油分解菌
纤维素分解菌 尿素分解菌
2、实验室中微生物的筛选原理：
人为提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，
同时抑制或阻止其他微生物生长。
3.选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微 生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培 养基。
高中生物 专题二 微生物的培养与应用 2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件 新人教版选修1
课堂探究
考点一 筛选微生物的研究思路 要把某种微生物和其他的微生物分开，就要利用其代谢特点 设计合适的培养基。 1.筛选菌株 (1)实例：DNA 多聚酶链式反应(PCR)是一种在体外将少量 DNA 大量复制的技术，此项技术要求使用耐高温(93 ℃)的 DNA 聚合 酶。
1966 年美国微生物学家布鲁克在美国黄石国家公园的一个 热泉中发现了水生耐热细菌 Taq，并从该细菌中分离得到了耐高 温的 DNA 聚合酶。
原因：热泉 70～80 ℃的高温条件，淘汰了绝大多数微生物， 而使耐热的 Taq 细菌被筛选出来。
(2)启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求，到 相应的环境中去寻找。
(3)实验室中微生物的筛选原理：提供有利于目的菌株生长 的条件(包括营养、温度、pH 等)，同时抑制或阻止其他微生物生 长。
(2)常见的选择培养基： ①加入青霉素可以分离出酵母菌和霉菌。 ②加入高浓度的食盐可得到金黄色葡萄球菌。 ③无氮源培养基可以分离固氮微生物。 ④石油是唯一碳源的培养基，可以分离能消除石油污染的微 生物。 ⑤将培养基放在高温环境中培养，可以分离耐高温的微生 物。
1.根据选择培养基的原理，如何筛选出耐酸菌？ 【提示】 可将培养基的 pH 调至酸性，再接种培养。
(3)操作： ①设置重复组，增强实验的说服力与准确性。 ②为保证结果准确，一般选择菌落数在________的平板进行 计数。 ③统计的菌落数往往比活菌实际数目低。 (4)计算公式：每克样品中的菌株数＝(C÷V)×M，其中 C 代 表某一稀释度下平板上生长的____________，V 代表涂布平板时 所用的____________，M 代表________。
(4)缺点：不能区分死菌与活菌；不适于对运动细菌的计数； 个体小的细菌在显微镜下难以观察。
人教版高中生物选修一培优练习：专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 含解析
课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课时过关·能力提升基础巩固1.在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或者阻止其他种类微生物生长的培养基称做()A.鉴别培养基B.加富培养基C.选择培养基D.基础培养基[解析]:选择培养基可选择目标微生物,同时抑制或阻止其他微生物生长。
[答案]:C2.测定土壤中某细菌和真菌数量的过程中,和真菌相比,细菌需要选用稀释倍数更高的稀释液进行平板培养的原因是()A.细菌个体小,真菌个体大B.细菌易稀释,真菌不易稀释C.在土壤中细菌比真菌多D.随机的,没有原因[解析]:在土壤中,细菌比真菌多,所以为了确保获得菌落数在30~300之间的培养平板,测定细菌数量时一般选用104、105和106倍的稀释液进行平板培养,而测定真菌数量时一般选用102、103和104倍的稀释液进行平板培养。
[答案]:C3.下列能选择出分解尿素的细菌的培养基是()A.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、尿素、琼脂、水B.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、葡萄糖、琼脂、水C.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、尿素、琼脂、水D.KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H2O、牛肉膏、蛋白胨、琼脂、水[解析]:分解尿素的细菌能利用尿素,因此选择培养基中应只有尿素这一种氮源。
此外,培养基中还应含有碳源。
[答案]:A4.能够测定样品活菌数的方法是()A.稀释涂布平板法B.直接计数法C.重量法D.比浊法[解析]:利用稀释涂布平板法能够在不影响细菌生存的情况下将细菌个体从固体培养基上分离出来,并可根据菌落数测定出样品活菌数,故稀释涂布平板法可用于测定样品活菌数。
直接计数法计得的是活菌和死菌的总和。
[答案]:A5.下列关于微生物分离和培养的叙述,错误的是()A.微生物培养前,需对培养基进行消毒B.测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法C.分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度D.分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源[解析]:微生物培养前,需对培养基进行灭菌,而不是消毒;测定土壤样品中的细菌数目,常用菌落计数法,而一般不用活菌计数法;分离土壤中不同的微生物,要采用不同的稀释度以便能选择出菌落数在30~300的平板进行计数;分离能分解尿素的细菌,要以尿素作为培养基中唯一的氮源。
生物人教版高中选修1生物技术实践《课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》知识点归纳
课题二土壤中分解尿素的细菌的分离与计数尿素是一种重要的农业氮肥，尿素并不能直接被农作物吸收。
只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之后，才能被植物利用。
土壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为他们能合成脲酶尿素最初是从人的尿液中发现的筛选菌株（1）实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
（2）选择性培养基在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。
（3）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。
例如，培养基中不加入有机物可以选择培养自养微生物；培养基中不加入氮元素，可以选择培养能固氮的微生物；加入高浓度的食盐可选择培养金黄色葡萄球菌等。
统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。
（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。
通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。
为了保证结果准确，一般设置3～5个平板，选择菌落数在30～300的平板进行计数，并取平均值。
统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。
采用此方法的注意事项：1.一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数2.为了防止菌落蔓延，影响计数，可在培养基中加入TTC（在计数琼脂中加入适量的TTC% TTC 1ML加到100ML琼脂中),细菌菌落长成红颜色,对去除食品本底颗粒物干扰非常有意义）.3.本法仅限于形成菌落的微生物设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。
对照实验是指除了被测试的条件以外，其他条件都相同的实验，其作用是比照试验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。
人教版高中生物选修一2-2《土壤中分解尿素的细菌的分离与计数》ppt同步课件
验操作与评价
1．实验设计 (1)土壤取样 ①土壤微生物大约70%～90%是 细菌 。
②细菌适宜在酸碱度接近中性 的 潮湿 土壤中生长，绝大多
数分布在距地表 3～8 cm 的土壤层。
(2)样品处理
样品的 稀释程度 直接影响平板上生长的 菌落数目，选用一定稀释 范围的样品液进行培养，保证菌落数在30～300 之间，便于计数。 (3)微生物的培养与观察 将培养基平板放置于 30～37 ℃ 温室中培养1～2d，每隔 24h 统计
(5) 在进行分离分解尿素的细菌的实验时， A同学从培养基上筛选
出大约150个菌落，而其他同学只筛选出大约50个菌落。A同学的
实验结果产生的原因可能有______。(填序号) ①由于土样不同 ③由于操作失误 思维导图： ②由于培养基污染 ④没有设置对照
深度剖析
(1)培养基中加入尿素的目的是筛选尿素细菌。
( ①加尿素 糖 ②不加尿素 ③加琼脂 ④不加琼脂 )。 ⑤加葡萄
⑥不加葡萄糖
⑦加硝酸盐
⑧不加硝酸盐
A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．①③⑤⑧ D．①④⑥⑦
解析
土壤中分解尿素的细菌能够合成脲酶，将尿素分解生
成氨，利用尿素中的氮合成自身有机物。培养基中只加尿素， 分解尿素的细菌能生长，其他微生物不能生长；分离微生物 要用固体培养基；土壤中分解尿素的细菌属于异养微生物， 需要加葡萄糖作为碳源。
实验中要注意单一变量原则和对照原则，操作中要严格进行无菌
操作。 答案 (1)苯酚 A 稀释涂布平板 (2)④的培养基没有加入苯酚 稀释涂布平板法或平
作为碳源，⑤的培养基加入苯酚作为碳源 板划线
以防止冷凝后形成的水珠滴落在培养基上污染培养基
(3)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作
高中生物专题二课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数课件新人教版选修1
2．计数方法 利用_显__微__镜__
1．土壤取样
从富含有__机__质____、酸碱度接近中性的潮湿________土 壤中取样。取样时，一般要铲去表层土，在距3地～表8 的 ________ cm的土壤层取样。
2．样品的稀释
_____样__品___稀的，释选__度用__一__定__稀直释接范围影的响样平品液板菌进上落行数培生目养长，的
(3)想一想这种培养基对微生物是否具有选择作用？ 如果具有，又是如何进行选择的？ _______________________________________________ ____
接链目栏
解析：碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮 元素的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。该培养 基的配方中含有凝固剂 ——琼脂，因此，配制的一定为 固体培养基。绝大多数生物都能利用葡萄糖，但是只有 能合成脲酶的微生物才能分解尿素，因此这种培养基对 微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的 微生物才能够生长。
答案： (1)葡萄糖 尿素 (2)固体 含有凝固剂 琼脂
(3)有选择作用。此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有 能够利用尿素的微生物才能够生长
变式
训练
1．用来判断上述选择培养基是否起到了选择作 用需要设臵的对照是( )
A．未接种的选择培养基
接链目栏
B．未接种的牛肉膏蛋白胨培养基
C．接种了的牛肉膏蛋白胨培养基
O
葡萄 糖
尿 素
琼 脂
水
接链目栏
含 量
1.4 g
2.1 g
0.2 g
10.0 1.0 15.0 1 000 g g g mL
接链目栏
请分析后回答：
(1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳 源和氮源的分别是________和________。
高中生物 人教版 选修1 专题2 微生物的培养与应用 2.2 土壤中分解尿素的细菌的分离和计数课件 (36张PPT)
【解析】稀释倍数为106，0.1 mL稀释液的菌落数的平均值为234，则每 毫升样品中菌落数就为234/0.1×106=2.34×109。
2020/6/12
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一、研究思路
（二）统计菌落数目 2.间接计数法→活菌计数法 （1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生 长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 （2）常用方法：稀释涂布平板法。 （3）公式：每克样品中的菌落数＝(C÷V)×M C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂 布平板时所用的稀释液的体积(ml)，M代表稀释倍数。
原因：高温条件淘汰了绝大多数微生物。
获得启示：寻找目的菌种时要根据它对生存环境的要求， 到相应的环境中去寻找。
2020/6/Байду номын сангаас2
5
一、研究思路
（一）筛选菌株 2、实验室中微生物的筛选原理： 人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度 、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。
方法：
（1）提供有利于目的菌株生长的条件(包括营养、温度、
缺点
✓不能区分死菌与活菌；
✓不适于对运动细菌的计数；
✓ 2020/6/12 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
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一、研究思路
（二）统计菌落数目 2.间接计数法→活菌计数法 （1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生 长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。 （2）常用方法：稀释涂布平板法。
2020/6/12
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一、研究思路
（二）统计菌落数目
2.间接计数法→活菌计数法
（1）原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生 长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。