防风通圣丸微生物限度检查法验证实验论文
防风通圣丸微生物限度检查法验证实验【摘要】中成药是含有多种成分的复合制剂,其中任何成分具有抑菌作用均可影响微生物限度检查的准确性。
当建立药品的微生物限度检查方法时,应进行方法学的验证,以证明所采用的方法适
合于该药品的细菌、霉菌及酵母菌数的测定及控制菌检查。
通过对防风通圣丸微生物限度检查方法的验证,得出适合防风通圣丸微生物限度检查的正确方法。
【关键词】防风通圣丸；微生物限度检查；验证
【中图分类号】r286 【文献标识码】a 【文章编号】1004-7484（2012）07-0198-01
1 材料和方法
1.1 样品防风通圣丸，批号100305
1.2 验证用菌种
枯草杆菌cmcc（b）63501；金黄色葡萄球菌cmcc（b）26003；大肠埃希菌cmcc（b）44102；
白色念珠菌cmcc (f) 98001；黑曲霉cmcc(f)98003；
1.3试验用培养基
ph7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液（批号1002222）；营养琼脂培养基（批号091228）；玫瑰红钠琼脂培养基（批号100309）；胆盐乳糖培养基（批号1003012）；营养肉汤培养基（批号101214）；改良马丁培养基（批号100125）；曙红亚甲蓝琼脂培养基（批号091226）。
以上培养基均由中检所提供。
1.4方法中国药典有关微生物限度检查法方法验证试验。
1.4.1 菌液制备
取金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌新鲜斜面培养物接种于营养肉汤培养基中，30～35℃培养18～24小时，取白色念珠菌的新鲜斜面培养物至改良马丁培养基中，于23～28℃培养24小时，分别取上述培养液用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-6、 10-6、10-5、 10-5、约为50～100cfu/ml，备用。
取黑曲霉新鲜斜面培养物，加0.9%无菌氯化钠溶液5ml，将孢子洗下，吸取菌液1ml至一个无菌比色管中，加适量0.9%无菌氯化钠溶液，与标准比浊管比浊，取比浊后菌悬液用0.9%无菌氯化钠溶液10倍稀释至10-4,约为50～100cfu/ml，备用。
1.4.2供试液的制备
取本品10g，加ph7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，振摇，作为1:10的供试液。
细菌、霉菌及酵母菌计数验证试验
1.4.
2.1实验组
细菌计数采用常规法：取1:10供试液1ml，分别加入金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌各1ml，立即倾注营养琼脂培养基，按规定条件培养，细菌、霉菌及酵母菌计数采用常规法；取1:10供试液1ml，分别加入白色念珠菌、黑曲霉各1ml，立即倾注相应琼脂培养基，按规定条件培养，计霉菌及酵母菌数。
1.4.
2.2菌液组
取稀释好的各菌液1ml，分别加入平皿中，加入相应培养基，置规定条件培养，测定所加的试验菌数。
1.4.
2.3供试品对照组按试验组方法，测定供试品本底菌数。
因其本底菌数干扰加菌回收，所以试验前先对本底经行了灭菌，经测定本底数为零。
1.4.
2.4稀释剂对照组取稀释剂供试液，按试验组方法测定其菌数。
1.4.3试验组菌回收率
试验组平均菌落数-供试品对照组平均菌落数
试验组菌回收率（%）= —————————---------×100% 菌液组平均菌落数
稀释剂对照组平均菌落数
稀释剂对照组菌回收率（%）= ————————— -----×100%
菌液组平均菌落数
三次验证结果见（表1、表2、表3）
1.5控制菌检查方法的验证
1.5.1菌种
阳性菌：大肠埃希菌[cmcc(b)44102]；阴性菌：金黄色葡萄球菌[cmcc(b)26003]
1.5.2试验方法
1.5.
2.1试验组
取1:10的供试液10ml，加胆盐乳糖培养基100ml，再加阳性对照菌大肠埃希菌菌液1ml，摇匀，置35～37℃培养18～24小时。
大肠埃希菌浓度同细菌、霉菌及酵母菌数验证。
1.5.
2.2阴性对照组：方法同试验组，另取100ml胆盐乳糖培养基，加入1ml阴性菌金黄色葡萄球菌（金黄色葡萄球菌浓度同细菌、霉菌及酵母菌数验证），置35～37℃培养18～24小时。
三次结果见表4。
2结果
2.1细菌、霉菌及酵母菌数计数验证结论
在三次独立的平行试验中，稀释剂对照组的菌回收率均大于90%，试验组的菌回收率均大于70%，故可用常规法制备供试液进行防风通圣丸的细菌、霉菌及酵母菌数测定。
2.2控制菌验证结论
在三次独立的平行试验中，阴性对照组未检出阴性对照菌，试验组检出阳性试验菌，故可用常规法制备供试液进行防风通圣丸的控制菌检查。
参考文献：
[1] 中华人民共和国药典（一部）[m].北京：化学工业出版社，2005..1.
[2] 中国药品检验标准操作规范[m].中医药科技出版社，2005：335-341.
[3] 药品微生物手册[m]. 北京科学出版社，2000:89-90.。
微生物限度检查法方法验证结果报告模板(1)
微生物限度检查法方法验证结果报告一、验证用样品：********片（批号：********）二、验证用菌种（1）枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) [CMCC(B)63501]（2）金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus )[CMCC(B) 26003]（3）大肠杆菌（Escherichia coli）[CMCC(F) 44102]（4）白色念珠菌(Candida a lbicans )[CMCC(F )98001]（5）黑曲霉菌(Aspergillus niger)[CMCC(F)98003]均为第3代，由山东省药品检验所提供三、方法中国药典2005年版二部附录XⅠ J。
四、培养基制备：(1)营养琼脂培养基批号********称取 32 g，加入 1000 ml蒸馏水(2)改良马丁琼脂培养基批号********称取 42 g，加入 1000 ml蒸馏水(3)MUG培养基批号********称取 23.37 g，加入 1000 ml蒸馏水(4)玫瑰红钠培养基批号********称取 31.5 g，加入 1000 ml蒸馏水(5)胆盐乳糖培养基批号********称取 38.5 g，加入 1000 ml蒸馏水五、菌数、霉菌数、酵母菌数计数方法学验证1、菌液制备：（1）取经30～35℃培养18～24小时，大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌营养琼脂培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，做活菌计数备用。
（2）取经23～28℃培养24～48小时的白色念珠菌改良马丁琼脂培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，做活菌计数备用。
（3）取经23～28℃培养1周的黑曲霉菌斜面培养物，加3～5ml盐水洗下霉菌孢子，吸出孢子悬液，（用管口带有薄的无菌棉花能过滤菌丝的无菌毛细吸管）至无菌试管内，用0.9%无菌氯化钠溶液制成每ml含菌数为50～100cfu的菌悬液，做活菌计数备用。
熄风通脑胶囊微生物限度检查方法的验证
物 限 度 检 查 方 法 的验 证 。 结 果 ： 常规 方 法 显 示 ， 细 菌 计 数 、霉 菌 及 酵 母 菌计 数 ，试 验 菌 的 回 收 率 均 达 ７ ０ ％以 上 ：控 制 菌试 验 组 呈 阳性 ， 阴性 菌对 照 组 呈 阴 性 。 结 论 ：细 菌 、 霉 菌 、酵 母 菌 检 查 可按 常规 平 皿 法 ；控 制 菌 检 查分 别按 大肠 埃希 菌和 沙 门 菌 常规 检 查
法。处方 中某些 药味 虽然有一 定的抗 菌作 用，但 组成制剂后，在验证试验 中并不体现 出抑 菌活性。
【 关 键 词 】 熄 风 通 脑 胶 囊 ：微 生 物 限度 检 查 ； 方 法验 证 ：常 规 法 ［ Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ］ Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ ： Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ａ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｆ ｏ ｒ ｔ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ａ ｌ ｌ ｉ ｍｉ ｔ ｔ ｅ ｓ ｔ ｏ ｆ Ｘｉ ￣ ｎ ｇ Ｔ ｏ ｎ ｇ ｎ ａ ｏ ｃ ａ ｐ ｓ ｕ ｌ ｅ ｓ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ ： Ａｃ ｃ ｏ ｒ ｄ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｔ ｈ ｅ Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ Ｐ ｈ ａ ｒ ｍａ ｃ ｏ ｐ ｏ ｅ ｉ ａ（ ｐ ｕ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｅ ｄ ｉ ｎ ２ ０ １ ０ ） ， ｔ ｈ ｅ ｍｉ ｃ ｒ ｏ ｂ ｉ ｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ ｔ ｅ ｓ ｔ ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｏ ｎ Ｘｉ ￣ ｎ ｇ Ｔ ｏ ｎ ｇ ｎ ａ ｏ ｃ ａ ｐ ｓ ｕ ｌ ｅ ｓ ｗ ｅ ｒ ｅ ｖ ａ ｌ ｉ ｄ ａ ｔ ｅ ｄ ． Ｒ ｅ ｓ ｕ ｌ ｔ ｓ ： Ｂ ｙ ｕ ｓ ｉ ｎ ｇ
微生物限度方法学验证方案
微生物限度检测方法学验证方案文件编号：P-批准签字页目录1.目的 (4)2.范围 (4)3.责任者及职责 (4)4.验证简介 (4)5．验证过程 (7)6．结果判断 (8)7．结论和建议 (8)8．异常情况报告 (8)9．再验证 (8)10．附件 (8)附件1：培养基的灵敏度复核 (9)附件2：稀释液的无菌性检查 (10)附件3：方法验证 (11)1. 目的按照中国药典2010版（第三部），采用薄膜过滤法进行微生物限度检查，本方案对新修订的方法进行验证。
2. 范围本公司要求进行微生物限度检查的原辅料和制剂，中间制品以及消毒剂。
3. 责任者及职责4. 验证简介4.1 定义●CFU：菌落数●供试品对照组取规定量供试液，按菌落计数方法测定供试品本底菌数。
●试验组当采取薄膜过滤法时，取规定量供试液，过滤，冲洗，试验菌加在最后一次冲洗液中，过滤后，取出滤膜接入对应培养基中。
●菌液组测定所加的试验菌数。
●稀释剂对照组用相应的稀释液替代供试品，按试验组规定的方法进行菌落计数。
4.2 菌悬液4.2.1菌种及来源检查人：复核人：检查日期：4.2.2菌液制备接种大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至营养肉汤培养基中或营养琼脂培养基上，30~35℃培养18~24h；接种白色念珠菌的新鲜培养物至改良马丁培养基中或改良马丁琼脂培养基上，20~25℃培养24~48h。
上述培养物用0.9％无菌氯化钠溶液制成每1ml含菌数50~100CFU的菌悬液。
接种黑曲霉的新鲜培养物至改良马丁琼脂斜面培养基上，23~28℃培养5~7天，加入3~5ml含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的0.9％无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。
然后，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05％（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成每1ml含孢子数50~100CFU的孢子溶液。
4.3 培养基及稀释液4.3.1培养基和稀释液的名称培养基：营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基稀释液：pH7.0的氯化钠蛋白胨缓冲溶液、灭菌纯化水4.3.2培养基灵敏度复核培养基灵敏度复核，参见《培养基的灵敏度检查操作规程》QC2524.3.3稀释液的无菌性检查对稀释液进行无菌检查，14天规定温度培养后应无菌。
限度检查论文：硅霜微生物限度检查方法学验证
限度检查论文：硅霜微生物限度检查方法学验证【摘要】目的验证硅霜微生物限度检查方法的专属性和有效性。
方法采用直接接种法和培养基稀释法对硅霜进行验证试验，并测算菌回收率。
结果硅霜以直接接种法检查，白色念珠菌、黑曲霉菌的菌回收率＞70%，采用培养基稀释法后金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的菌回收率＞70%。
结论硅霜可以用直接接种法进行控制菌、霉菌及酵母菌总数检查，以培养基稀释法测定细菌总数。
【关键词】硅霜；微生物；限度检查；验证硅霜用于治疗皲裂、皮炎，并能防止银宵病治愈后复发。
主要是护肤防裂。
为保证药品质量，按照中国药典2005版［1］的要求，对其微生物限度检查方法进行验证，如下。
1实验材料1.1培养基:培养基均购自中国药品生物制品检定所。
1.2菌种:大肠埃希菌（cmccb44102）第2代，枯草芽孢杆菌（cmccb63501）第2代，金黄色葡萄球菌（cmccb26003）第2代，白色念珠菌（cmccf98001）第2代，黑曲霉菌（cmccf98003）第2代1.3稀释液:ph=7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液。
1.4样品:硅霜（201006022010060320100604 牡丹江市皮肤病防治研究所）2方法2.1直接接种法供试液制备:取供试品10g三份，加至含20ml无菌十四烷酸异丙酯和无菌玻璃珠的容器中，充分振摇使供试品溶解，然后加入40℃～45℃的ph7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，振摇5～10分钟，萃取，静置，使油水明显分层，取其水层作为1：10的供试液，取2ml分别加入置2个平皿中。
2.2直接接种法菌液制备:取1 ∶ 10 供试液2ml，分别加入置2 个平皿中，再分别加入大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉菌50～100 个菌/ml 的菌液1ml，作为加阳性菌供试液样。
每种菌制备2 份。
2.3培养基稀释法供试液的制备:将1∶10供试品溶液1ml，分别注入10个平皿中，每个0.1ml，10个为一组，共两组。
利巴韦林片的微生物限度法验证实验
利巴韦林片的微生物限度法验证实验
田光彩
【期刊名称】《医药论坛杂志》
【年(卷),期】2007(28)1
【总页数】1页(P106-106)
【关键词】利巴韦林;微生物;验证实验
【作者】田光彩
【作者单位】濮阳市食品药品检验所
【正文语种】中文
【中图分类】R978.7
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药品微生物限度检测方法验证报告
阿莫**微生物限度检测方法验证报告摘要通过此次验证证明薄膜过滤法可用于含抑菌成分的阿莫**微生物限度菌数的检验，提高抗菌药物的检出率和回收率。
阿莫**微生物限度检查法系指非规定灭菌制剂及其原、辅料受到微生物污染程度的一种检测方法，包括染菌量及控制菌的检查。
微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单相流空气区域内进行。
检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。
此方法能有效消除阿莫**的抑菌性，同时不会影响阿莫**中可能存在的微生物生长，采用此方法可以使阿莫**中的微生物检出，从而确保了检验结果的准确性、可靠性及检验方法的完整性。
关键词：阿莫**，验证，菌种，供试品。
前言随着人们质量意识的提高，人们对阿莫**质量检验指标中微生物限度的要求也越来越高，由于抗生素类药物的活性成分直接影响微生物在培养基中正常生长，选择正确的检测方法，提高抗菌药物的检出率是解决问题的关键，通过对阿莫**微生物限度检测方法----薄膜过滤法的验证，可以证明所采用的方法能有效消除阿莫**的抑菌性，同时不会影响阿莫**中可能存在的微生物生长，采用此方法可以使阿莫**中的微生物得以检出，确保检验结果的准确性、可靠性及检验方法的完整性。
微生物限度检查方法学验证报告模板
微生物限度检查法验证试验报告1、样品：奥氮平盐酸氟西汀胶囊（批号20140807，20140808，20140809），规格：12mg/25mg2、试液与稀释液：pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（批号：）、0.9%无菌氯化钠（批号：）、1%红四氮唑（批号：）、含1%聚山梨酯80的pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液（批号：）。
3、主要的设备及器具：净化工作台（型号）、培养箱（型号）、电子天平（型号）、恒温摇床（型号）、生物安全柜（型号）、无菌培养皿、菌落计数器、接种环、、酒精棉球、酒精灯、刻度吸管（1ml，10ml）、锥形瓶、试管及试管塞、吸耳球、显微镜等。
4、验证试验用菌种：大肠埃希菌CMCC(B)44 102、枯草芽孢杆菌CMCC(B)63 501、金黄色葡萄球菌CMCC(B)26 003、白色念珠菌CMCC(F)98 001、黑曲菌CMCC(F)98 003，均由中国药品生物制品鉴定所提供。
5、对照培养基：4-甲基伞形酮葡萄苷酸（MUG）培养基（批号），胆盐乳糖发酵培养基（批号），胆盐乳糖培养基（批号）；玫瑰红钠琼脂（批号）；营养琼脂（批号），营养肉汤培养基（批号），均由中国食品药品检定研究院提供。
6、试验用培养基：营养琼脂培养基（批号）；玫瑰红钠琼脂培养基（批号）；营养肉汤培养基（批号）；改良马丁培养基（批号），胆盐乳糖培养基（批号）；4-甲基伞形酮葡萄苷酸(MUG)培养基（批号），由******公司提供（配制）。
7、试验方案按《中国药典》2010年版二部附录ⅪJ微生物限度检查法规定，本品微生物限度标准应为：1g供试品中，细菌数不得过1000cfu，霉菌和酵母菌数不得过100cfu，大肠埃希菌不得检出。
7.1 验证试验的目的对所采用的方法进行验证，确认该方法适用于本品的微生物限度检查，即确认本品在该检验量及检验条件下无抑菌活性或其抑菌活性已被充分消除至可忽略不计，以确保检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。
抗菌药物微生物限度检查要点研究
抗菌药物微生物限度检查要点研究摘要】我国现行的《中国药典》对于药品微生物的限度检查在检查的基础上还需要进行方法验证。
企业所生产的药品必须要对全部采用微生物限度检查的产品进行检查方法的验证，通过验证之后才能够得到可靠的结论。
本文就抗菌药物微生物限度检查要点进行了一定的分析和探讨。
【关键词】抗菌药物微生物限度检查验证【中图分类号】R978 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2012）19-0123-02微生物限度的检查是对于非规定的灭菌制剂和制剂所使用的原料、辅助材料进行微生物污染检查。
药品微生物限度检查法验证工作毫无疑问是一项系统性的工程，其中考虑到细菌选择、供试液处理、对供试品进行考察以及试验方法和环境等等方面，这些都是影响微生物的因素。
一．抗菌药物微生物限度检查中的完整性分析对于抗菌药物进行微生物限度检查，验证过程如果不够完善，遗漏或者是缺少了某些环节，就不能够完善体现供试品以及试验过程对于微生物的影响，干扰了最终结果的判断与分析。
我国的药典规定了，计数方式的验证应该采用五种试验菌，也就是金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌、枯草芽胞杆菌和黑曲霉菌。
不能够只采用部分菌种进行验证，有的供试品中含有抗微生物的物质，需要通过一定的方法来祛除或者抑制该物质的活性。
在进行计数验证的时候应该进行3次的平行试验，需要对其进行分别取样3次，在刺激出上进行判断计算。
二．抗菌药物微生物限度检查中的科学性分析1. 菌种选择我国的药典规定了微生物限度检查中使用的试验菌理论上不能够超过5代，同时需要根据不同的制剂的给药方式或者是剂型来对菌种进行挑选控制。
不过在当前的申报资料中，经常会出现忽视菌种选择的现场，他们所选择的控制菌并不符合有关要求。
对于某些包含有动物组织的制剂，我国的新版药典规定需要特别对沙门菌进行检查，如果是非动物组织，但是是来源于动物的，比如在牛尿中提取的药品，是否要对沙门菌进行检查，并没有明确的规定。
新版GMP微生物限度检查法验证报告
*******微生物限度检查法验证报告文件编号：VMP-VV-502REP-00起草人：审核人：批准人：批准日期：年月日通过验证以确认所采用的方法适合于该药品的细菌、霉菌及酵母菌的测定；确认所采用的方法适合于该药品的控制菌的检查，根据样品特性制订检验方法和检验条件，按制定的方法进行试验，根据验证结果判断是否符合验证标准。
若符合，按验证的方法和条件进行药品的微生物限度检查；若不符合，重新建立制订检验方法和检验条件，再进行验证，直至验证结果符合设立的验证标准。
2.验证目的及范围确认所采用的细菌、霉菌及酵母菌计数方法和控制菌检查方法适合该品种药品的微生物限度检查，以保证检验结果的准确、可靠及检验方法的完整性。
本次验证为试验组和对照组的菌回收率试验；控制菌检验方法的灵敏性、检出率及专属性试验。
3.验证风险评估对于本次验证的执行进行了如下的风险分析：4.验证前准备4.1验证人员培训：验证报告起草人有责任在方案批准后（且在验证实施前）对本次验证相关人员进行培训。
培训人员记录见附件1。
4.2将所有的平皿和稀释剂都应该严格按照相关的灭菌程序消毒，以确保其对试验的结果没4.3仪器与器具：恒温培养箱、生化培养箱、电子天平、高压蒸汽灭菌器、净化工作台、无菌培养皿、无菌移液管。
5.验证内容5.1测试环境条件要求所有检查在环境洁净度C级下的局部A级洁净度的单向流空气区域内隔离系统内进行，其全过程严格遵守无菌操作，能防止微生物污染。
5.2试验样品*******批号：；规格：）5.3验证用菌种及培养基：5.3.1来源：食品药品检验所5.3.2菌落计数用菌种注：编号由菌种首字母-传代代数-配制日期组成。
5.3.3培养基及其制备方法：取市售的脱水培养基，分别按照规定方法进行配制后灌装于洁净的三角烧瓶中，然后加塞灭菌，在实验前加温熔化备用。
5.4细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证：按照中国药典2010年版微生物限度检查法中的平皿法进行细菌、霉菌及酵母菌计数的方法学验证试验及菌落计数。
药品微生物限度检查方法验证试验
吉林九鑫药业有限公司检验原始记录药品微生物限度检查方法验证试验1、检品名称：更年宁检品批号：201110012、验证依据：《中国药典2010年版》微生物限度检查方法验证试验3、仪器：BP211D塞多利斯电子天平SPX－2503型生化培养箱SKP－01电热恒温培养箱YJA－电动匀浆仪4、培养基：营养琼脂培养基批号：081217 玫瑰红钠琼脂培养基批号0902022：营养肉汤培养基批号：20110211 胆盐乳糖增菌液批号：20110612 乳糖胆盐发酵培养基批号：0901052 MUG 培养基批号：20110302甘露醇氯化钠琼脂培养基批号：0930023 麦康凯琼脂培养基批号：2010pH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液批号：20110212 改良马丁琼脂培养基批号 20100101 生产单位：北京三药科技开发公司靛基质试液 0.9%氯化钠溶液5、细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证5.1 验证用菌种：大肠埃希菌枯草芽孢杆菌金黄色葡萄球菌白色念球菌黑曲霉菌来源：巿药检所5．2菌液制备：5．2.1 取经35℃培养18～24小时的金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌与枯草芽孢杆菌肉汤液体培养物2～3白金耳加入9ml 0.9％氯化钠溶液中，10倍稀释至10-3～10-7约为50～100cfu/ml,做活菌计数用。
5、2．2 取经25℃培养18～24小时的白色念珠菌液体培养物2～3白金耳加入9ml 0.9％氯化钠溶液中，10倍稀释至10-3～10-7约为50～100cfu/ml,做活菌计数备用。
5.2.3 取经培养一周的黑曲霉斜面培养物，加0.9％氯化钠溶液3ml，洗下霉菌孢子，取0.1ml 加入9ml 0.9％氯化钠溶液中，10倍稀释至10-3～10-7约为50～100cfu/ml,做活菌计数备用。
5.3 操作方法：本品按照常规方法检验，细菌、霉菌、酵母菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌回收率均大于70％，所以细菌、霉菌及酵母菌数测定应采用常规法。