奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项

奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项
性别控制是指雌性动物通过人为地干预而繁殖出人们所期望性别后代的一种繁殖新技术。

奶牛XY精子分离性别控制技术是指将牛的精液根据含X染色体和Y 染色体精子的DNA含量不同而把这两种类型的精子有效的进行分离后，将含X染色体的精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，而使母牛怀孕产母牛犊的技术；这种根据精子X、Y染色体的不同而分装冷冻的冻精就叫性控冻精；使用我公司的牛性控冻精产品对发情母牛进行配种可以使90%以上的受配怀孕母牛产母牛犊。

一、奶牛性控冻精在生产中使用的重要意义
（一）奶牛公、母犊牛的价格差一般在1000元以上，母牛同样的饲养管理成本和怀孕时间，用性控冻精冷配，可以使怀孕母牛的产犊效益显著提高。

（二）使用性控冻精可以显著的提高母牛数和群体产奶量，这是因为与常规冷冻精液配种相比，使用性控冻精，可以大量的繁殖出母牛后代，最终使母牛数和产奶量都得到提高，从而提高生产效益。

（三）使用性控冻精可繁殖出大量的优质高产的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生产效率。

以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛产业的生产效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使牛的品种改良一步到位。

二、性控冻精的特点
（一）解冻后精子活力要比常规冷冻精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分选时被筛除；
（二）性控冻精细管分装精子的密度显著地低于非性控冻精（性控：230万个/0.25ml，非性控：2500万个/0.25ml）；
（三）奶牛含X染色体性控冷冻精液的存活时间相对于常规冷冻精液要短。

三、使用性控冻精进行人工授精的母牛的选择按下列步骤和标准执行。

首先是品种的选择，选择中、高产奶牛及其后代做为使用对象；其次是年龄和胎
次，首选初配母牛和生产三胎内母牛；最后是营养和健康，膘情适中健康无疾病和繁殖疾病史。

四、性控冻精输精技术的操作要点和注意事项
（一）准确的发情观察（步骤）
1、每天早晚对放牧或在运动场运动牛群进行至少半小时的观察，记录接受爬跨的牛号；
2、不能放牧或不能在运动场运动的牛，等到牛吃草挤奶后静卧休息时，观察其尾部分泌物的粘性和颜色，记录牛号；
3、对外阴红肿爬跨其它牛只骚动不安的牛只记录牛号；
4、对上述三种情况记录的牛只在观察完成后立即查阅繁殖记录，剔除产后时间不合适、正在进行繁殖疾病治疗和其它不适合进行配种的牛只；
5、对观察到上述症状的适合冷配的空怀牛只，在10-12小时后进行直肠检查，首先判断子宫的大小和质地，然后检查两侧卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根据卵泡的大小和质地推测排卵时间，判断在8小时之内排卵并适合进行冷配的牛只立即进行配种，对适合使用性控冻精的牛只（本手册第三条）用性控冻精配种，不适合的用常规冻精配；并做好包括子宫、卵巢情况和发情时间及输精时间和部位等内容的详细记录；
（二）输精操作要点
1、使用性控冻精配种时，配种时间尽量控制在排卵前6小时之内或排卵后4小时之内；使用性控冻精时，尽量缩短解冻与输精之间的时间，最好是解冻一支输一支；
2、解冻方法：从液氮罐中取冻精时，提漏中的冻精不可超过液氮罐口，如果10秒钟内还没有将冻精取出，应将冻精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重复操作；单支冻精取出后在空气中先停留5秒左右，然后放入38-40摄氏度清水中10秒中后取出用干脱脂棉擦干后剪断封口，装入输精器准备输精；
3、输精器最好是使用一次性外套的，输精时要保证输精器的无菌和与输精
器接触的部位及器具的干净卫生；输精部位一般在排卵侧子宫角或者是采用子宫体后拉法，也就是说，如果能够准确判断出排卵侧并能使输精器顺利的放到排卵侧子宫角就采用子宫角输精，否则，采用子宫体输精器后拉发法输精，保证两侧子宫角都能有精子进入和受精。

（三）跟踪观察
1、对于已经参加配种的牛只，在8小时之内进行第二次直肠检查卵泡侧；如果已经确认排卵，做好配种记录；没有排卵的参配牛只采取补救措施，本条第（四）；
2、其它适合配种的牛只重复本手册第四条第（一）的第5步操作程序。

3、配种后在下个情期继续观察是否有发情表现，如果受配母牛连续两个情期以上没有发情，在配种60天后，直肠检查确定是否妊娠；对于没有妊娠的母牛采取补救措施---本条第（四）；
（四）补救措施
1、在冷配8小时之内进行第二次直肠检查卵泡侧，对于没有排卵的参配牛只，在推断了排卵时间后要继续适时输精，并根据具体情况结合外源激素的使用。

此类情况不妊娠与性控冻精的质量无关，主要是发情母牛的排卵时间与人工授精的时间没有掌握好。

2、参配母牛在配种后的第一或第二情期观察到了明显的发情表现，在确认发情后要及时进行重复冷配，冷配时如果发现发情黏液不干净或其它繁殖疾病，要停止冷配并采取相应的治疗措施；如果对排卵时间把握不准确，就采用常规冻精进行复配。

五、合格冷配技术员的评估标准
1、耐心的、准确的发情观察和鉴定：主要是通过外观观察包括是否接受爬跨和黏液等，最终通过直肠检查卵巢是否有排卵卵泡来确定是否发情和什么时间输精。

－－如果能做到这一点可以得到30分
2、直肠把握输精器能熟练通过牛的子宫颈并在整个操作过程中做到无菌操
作。

－－如果能做到这一点可以得到30分
3、繁殖疾病的及时发现和及时、有效的预防与治疗的能力（激素使用）冷配技术人员在人工授精操作之外能够及时的对适繁母牛做到包括子宫、卵巢和其它繁殖器官疾病的有效的预防和治疗，充分的保证繁殖母牛在最合适的妊娠时间妊娠。

－－如果能做到这一点可以得到30分。

4、其它：认真的做好繁殖记录，冻精的保存、解冻和显微镜检查活率的技能－－如果能做到这些可以得到10分
对以上四点熟练而系统的掌握的牛人工授精技术人员才算是一个技术精湛、在生产中能够为养牛事业做出贡献并为自己创造美好生活的人！
六、影响人工授精受胎率的主要因素
（一）母牛自身的因素：母牛的健康状况对受胎是非常重要的，健康的牛激素水平才正常，才能正常排卵和保证卵子的受精和维持胎儿的正常的发育，所以要想得到高的人工授精受胎率，保证繁殖母牛的健康和繁殖器官的健康是必须的；
（二）冷配技术人员的技术水平是能够让健康空怀母牛受胎率得到提高的必要条件（技术人员的评估标准已经说过了）；
（三）当一个健康的适配母牛经过一个高技术水平的人工受精员的冷配之后，仍然没有怀孕或整个牛群的怀孕率依然很低时，就要考虑冻精的因素，主要是从冻精自身的活率是否很高和在保存及解冻过程是否出现了问题等环节逐个分析；所以为了避免冻精在使用和保存中出现问题，最好定期抽检冻精的品质，最简单的就是采用光学显微镜进行检查。

由此可见，在使用人工授精技术进行配种时，冻精只是影响受胎率的一个因素，当受配母牛的怀孕率较低时，我们要综合分析，才能发现问题的原因和找到提高受胎率和情期受胎率的办法。

七、同期发情技术的应用
（一）适合进行同期发情处理的牛：空怀，健康，产后时间合适，繁殖状况
正常，无繁殖疾病；
（二）目前可以让牛同期发情的办法很多，但在生产中最方便实用的是以下两种方法。

方法一：直检有黄体时，直接采用PG肌注或宫注，此方法可使处理母牛在处理后72小时的发情排卵率达到70%以上；方法二：对于卵巢静止和无黄体的母牛，采用放置CIDR在9天后于撤出CIDR时注射PG，两天后开始观察发情并根据发情情况适时配种；或者间隔11天两次肌注PG的方法；在第二次注射PG 两天后开始观察发情并根据发情情况适时配种。

八、常见繁殖疾病的预防和治疗原则
（一）子宫疾病的临床诊断和治疗原则
1、外观观察：尾部分泌物的颜色、气味，生殖器官的外部形状；发情时粘液的情况并结合产后时间来与正常情况对比后做出初步的判断；
2、直肠检查：子宫的大小、质地、是否对称等从形状和质地的比较并结合外观观察来最终得出诊断结论；
3、预防为主：首先，保持牛床环境卫生的清洁；其次，清洗子宫和输精时做好无菌工作，不重复使用已经污染的器具，避免交叉感染；最后，对产后的母牛的生殖系统做好及时的保健和预防及治疗。

4、治疗方法（对因、对症）：冲洗，子宫注射，全身症状的消除；
5、常用药物：消毒防腐、抗生素、激素和中草药治疗。

（二）卵巢机能性障碍的临床诊断和治疗原则
1、通过发情周期和发情时间、症状来判断：周期是否固定时间是否正常、发情的持续时间、症状是否正常；
2、直肠检查两侧卵巢：大小、质地是否正常，通过以上两点来诊断卵巢机能是否正常；
3、卵巢囊肿、卵泡囊肿的治疗原则：采用物理方法、抗生素、激素的使用来治疗；
4、排卵延迟的治疗原则：调整输精时间和使用激素，激素一般采用肌注促排2号和促排3号；
5、卵泡闭锁和交替发育的治疗原则：加强饲养管理和使用外源生殖激素。