TCR重排
免疫球蛋白及其编码基因
and early in immune response. 3. Natural antibodies against blood
cell determinants.
IgD
u各种基因片段都有多个只有一个参与组成编码基因bcr编码基因的结构特点人类tcr胚系基因结构示意图aaaaexon1exon2exon3exon3exon3exon2exon2exon1exon1intron1intron2intron1intron2mrnaproteingermlinednaprimaryrnabcrtcr基因重排重链基因的重排recombinationu重排有关的酶u末端脱氧核苷酸转移酶tdt抗体基因表达的一些特点u等位基因排斥allelicexclusion位于一对染色体上的轻重链基因只有其中一条染色体上的基因得到表达
具有杀伤活性的细胞通过其Fc受体识别结合于 靶抗原上的抗体Fc段，直接杀伤靶细胞。NK细 胞是介导ADCC的主要细胞。
穿过胎盘和黏膜
uIgG可穿过胎盘屏障，在新生儿抗感染免疫 中起重要的作用。
u分泌型IgA的黏膜局部免疫作用
各类抗体的生物学活性
CHARACTER OF EACH CLASS
IgG IgM IgA IgE IgD
BASIC STRUCTURE
1.重链和轻链
重链 (Heavy chain,H) u分子量比较大 u据恒定区氨基酸的组成和排列顺序的不同， 可分为5类(同种型) u不同的同种型有不同的特征
免疫球蛋白分类（class）
1. IgG - Gamma (γ) heavy chain IgM - Mu (μ) heavy chain IgA - Alpha (α) heavy chain IgD - Delta (δ) heavy chain IgE - Epsilon (ε ) heavy chain
T细胞淋巴瘤的治疗
T细胞非霍奇金淋巴瘤诊疗进展山西医学科学院山西大医院张巧花侯淑玲T细胞非霍奇金淋巴瘤（T-NHL）是一种来源于T淋巴细胞的恶性克隆性增殖性疾病。
异质性强，病理诊断类型复杂，2008年WHO病理分20种类型，临床表现与治疗因不同发病部位、不同病理类型以及基因型而差异较大。
T-NHL的发病机制尚不清楚，近年来随着对T淋巴细胞作用机制以及T-NHL的生物学、细胞遗传学以及分子生物学研究的不断深入，T-NHL的诊治取得了瞩目的进展。
一、T-NHL的流行病及诊断与分型1.流行病因。
T-NHL的发病率远低于B-NHL,而且与地域分布有关，亚洲人群发病率高于欧美地区。
T-NHL在我国占非霍奇金淋巴瘤的34%，而在欧美国家仅占所有5%-15%。
亚洲地区以节外病变为主，如EB病毒相关的鼻部自然杀伤细胞（NK）淋巴瘤/T-NHL；在欧美地区主要是淋巴结内型，包括非特指型的外周T细胞淋巴瘤（PTCL-NOS）、间变型大B细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性T-NHL。
2.诊断WHO于2008年更新的NHL疾病分类中，在2001年基础上进行了更精细的分类，将T-NHL分为20种独立的疾病，每种独立的类型都有其各自的定义及相应的病理形态、免疫表型和遗传特点。
按照发病部位可分为：播散型、节内型、节外型和皮肤型。
原发性全身型ALCL中有分为ALK+和ALK-两个独立的亚型。
将皮肤脂膜炎样T-NHL仅限于表型为αβ。
原表型为γδ的皮肤脂膜炎样T-NHL由于预后较差，另外归类于原发性皮肤型PTCL。
原发皮肤侵袭性嗜表皮性CD8+细胞毒性T-NHL和原发性皮肤小/中CD4+T-NHL也归类在原发性皮肤型PTCL中。
蕈样霉菌病(MF)和sezary综合征分为不同两型。
增加了EB病毒相关的克隆性淋巴组织增殖性疾病（儿童）。
NCCN2009年制定的NHL分类中，T-NHL按照细胞形态分为间变性和非间变性两种。
非间变性又可分为：节内型、节外型和皮肤型。
tcrα基因结构
tcrα基因结构
TCRα基因是编码T细胞受体α链的基因，它位于人类17号
染色体上。
其结构包括一段可变区（V区）、一段多样性区
（D区）、一个连接区（J区）和一个常规区（C区）。
V区是最变异的部分，包含了多个V基因。
D区和J区也存在
多个基因供选择。
这些区域在基因重排过程中，会随机组合成TCRα基因的可变区(SeqV)。
连接区(Joining region, SeqJ)位于V区和C区之间，它连接了
V区和C区。
C区是编码常规段的基因，确定了TCRα链的结
构和功能。
不同的组合方式可以产生不同结构和功能的TCRα链，这样T细胞就能识别和应对多样性的抗原。
总的来说，TCRα基因的结构包括了V区、D区、J区和C区，这些区域在基因重排过程中组合形成不同结构和功能的TCRα链。
ctl细胞全称核心标记
ctl细胞全称核心标记CTL细胞全称为Cytotoxic T Lymphocyte，是一种重要的免疫细胞。
它们能够通过特异性识别和杀伤感染体内的病原微生物或肿瘤细胞，从而保护机体免受感染和癌症等疾病的侵袭。
一、CTL细胞的结构和功能1. CTL细胞的结构CTL细胞是一种淋巴细胞，具有球形或卵圆形的形态。
它们表面有许多受体，包括T细胞受体（TCR）、CD8分子等。
此外，CTL细胞还可以分泌多种免疫因子，如干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）等。
2. CTL细胞的功能CTL细胞主要通过两种方式发挥作用：直接杀伤和诱导凋亡。
直接杀伤：CTL细胞能够通过其表面的TCR与MHC-I分子上呈现的抗原肽结合，并释放出多种蛋白酶、穿孔素等物质，直接杀伤感染体内的病原微生物或肿瘤细胞。
诱导凋亡：CTL细胞还能够分泌多种免疫因子，如干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子（TNF-α）等，诱导感染体内的病原微生物或肿瘤细胞凋亡。
二、CTL细胞的产生和分化CTL细胞的产生和分化经历了一系列复杂的过程，包括：1. T细胞受体（TCR）基因重排：在胸腺中发生，用以产生不同的TCR结构。
2. 活化：当T细胞受体与MHC-I分子上呈现的抗原肽结合时，会激活T细胞并引发其增殖。
3. 分化：活化后的T细胞会分化成CTL细胞，并开始表达CD8分子，从而具有直接杀伤和诱导凋亡的能力。
4. 存活和记忆：部分CTL细胞会存活下来，并形成记忆性CTL细胞。
这些记忆性CTL细胞能够长期存活在机体内，并在再次遇到相同抗原时迅速作出反应。
三、CTL细胞与免疫应答1. CTL细胞的作用CTL细胞主要通过直接杀伤和诱导凋亡的方式，清除机体内的病原微生物或肿瘤细胞。
在免疫应答中，CTL细胞是一种非常重要的免疫细胞。
2. CTL细胞的识别和选择性杀伤CTL细胞能够通过其表面的TCR与MHC-I分子上呈现的抗原肽结合，并选择性地杀伤感染体内的病原微生物或肿瘤细胞。
高中生物奥赛辅导 第十章 T淋巴细胞(共77张PPT)
单阳性阶段 SP细胞（ single positive cell，CD3+CD4+CD8-
CD3+CD4-CD8+）
9、要学生做的事，教职员躬亲共做；要学生学的知识，教职员躬亲共学；要学生守的规则，教职员躬亲共守。2021/9/62021/9/6Monday, September 06, 2021 10、阅读一切好书如同和过去最杰出的人谈话。2021/9/62021/9/62021/9/69/6/2021 7:11:24 AM 11、只有让学生不把全部时间都用在学习上，而留下许多自由支配的时间，他才能顺利地学习……（这）是教育过程的逻辑。2021/9/62021/9/62021/9/6Sep-216-Sep-21 12、要记住，你不仅是教课的教师，也是学生的教育者，生活的导师和道德的引路人。2021/9/62021/9/62021/9/6Monday, September 06, 2021
医学免疫学：第10章 T淋巴细胞
第二节 T细胞的表面分子及其作用
TCR-CD3复合物； CD4和CD8； 共刺激分子； 丝裂原结合分子及其他表面分子。
17
一、TCR-CD3复合物
18
1、TCR的结构和功能
• TCR-CD3复合体 ：是T细胞抗原识别受体（TCR）与CD3 分子以非共价键结合而形成的复合物，是T细胞识别抗原和 转导信号的主要单位。
– 黏附作用（T细胞与APC或者靶细胞之间的黏附）； – 为T细胞提供活化信号。
SRBC T细胞
E-玫瑰花环
36
6、CD40配体（CD40L，CD154）
• CD40L：Ⅱ型跨膜蛋白，表达于活化的CD4+T细胞表面， CD40表达于APC表面。
• CD40L-CD40双向效应：一方面促进APC活化，B7表达增 加和细胞因子合成；另一方面APC上B7和细胞因子也促进 T细胞活化。
第十章 T 淋巴细胞
第十章 T 淋巴细胞
• 目的要求 – 掌握T细胞主要表面分子结构和作用； – 掌握T细胞亚群的分类及特性。
2
主要内容
• T细胞的分化发育 – 胸腺中进行，经历阳性选择和阴性选择
• T细胞的表面分子及其作用 – TCR/CD3复合体 – CD28；CTLA-4
• T细胞的分类和功能
23
MHC II类分子2结构域 HIV受体
MHC 分子3结构域
p56lck
p56lck
CD4/CD8分子可使T细胞对抗原肽的亲合力提高100倍
25
三、共刺激分子
• 第一信号：TCR识别APC提呈的抗原肽-MHC分子复合物， 由CD3分子传导活化第一信号。
• 第二信号：APC与T细胞之间的辅助分子为T细胞活化提供 第二信号，使已活化的T细胞克隆扩增，并分化为效应细胞， 扩大适应性免疫应答的效应。
最新：中国成人急性淋巴细胞白血病诊断与治疗指南(2021年版)
矿产资源开发利用方案编写内容要求及审查大纲
矿产资源开发利用方案编写内容要求及《矿产资源开发利用方案》审查大纲一、概述
㈠矿区位置、隶属关系和企业性质。
如为改扩建矿山, 应说明矿山现状、
特点及存在的主要问题。
㈡编制依据
(1简述项目前期工作进展情况及与有关方面对项目的意向性协议情况。
(2 列出开发利用方案编制所依据的主要基础性资料的名称。
如经储量管理部门认定的矿区地质勘探报告、选矿试验报告、加工利用试验报告、工程地质初评资料、矿区水文资料和供水资料等。
对改、扩建矿山应有生产实际资料, 如矿山总平面现状图、矿床开拓系统图、采场现状图和主要采选设备清单等。
二、矿产品需求现状和预测
㈠该矿产在国内需求情况和市场供应情况
1、矿产品现状及加工利用趋向。
2、国内近、远期的需求量及主要销向预测。
㈡产品价格分析
1、国内矿产品价格现状。
2、矿产品价格稳定性及变化趋势。
三、矿产资源概况
㈠矿区总体概况
1、矿区总体规划情况。
2、矿区矿产资源概况。
3、该设计与矿区总体开发的关系。
㈡该设计项目的资源概况
1、矿床地质及构造特征。
2、矿床开采技术条件及水文地质条件。
医学免疫学第九,十章 B、T 淋巴细胞
浙中医大 微免教研室 刘文洪
9
重组酶包括：①重组激活酶基因（RAC）②末端脱 氧核苷酸转移酶③DNA外切酶，DNA合成酶等。
重组酶作用：可以从众多的V(D)J基因片段中个选择 1个V片段，1个D片段和一个J片段重排在一起，形 成V(D)J连接，最终表达为有功能的BCR
4.体细胞高频突变：在已完成Ig基因重排的基础上 ，成熟B细胞在外周淋巴器官生发中心接受抗原刺 激后发生。不仅能增加抗体的多样性，而且可导致 抗体的亲和力成熟。
浙中医大 微免教研室 刘文洪
14
（三）B细胞在中枢免疫器官中的分化发育
造血干细胞→淋巴样干细胞→祖B细胞→前B细胞 →未成熟B细胞→成熟B细胞
CD32 有a和b两种亚型，其中b亚
型即FcγRIIB ，负向调控B细胞 的活化及抗体的分泌。
浙中医大 微免教研室 刘文洪
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Fc受体 (1) 组成：主要为FcγRⅡ-B1分子，含一个ITIM
（immuno-receptor tyrosine-based inhibitory motifs）免疫受体酪氨酸抑制基序基序。
52
第一节 T细胞的分化发育
HSC在骨髓中分化成淋巴样祖细胞。可经血液循 环进入胸腺，在胸腺中完成T细胞的发育，成为成 熟T细胞，再经血液循环进入外周淋巴器官，主要 定居于外周淋巴器官的胸腺依赖区，接受抗原刺 激发生免疫应答。
高 糖类 多反应性 IgM>IgG
低/无 低/无
B-2 -
出生后 由骨髓产生
低 蛋白质 单特异性,尤其在免疫后 IgG>IgM
高 有
浙中医大 微免教研室 刘文洪
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第四节 B细胞的功能
免疫学第九章 T细胞介导的细胞免疫应答
二. T细胞活化的信号刺激
1. T细胞活化的双信号刺激：至少需要二
个独立信号刺激，由APC提供。
信号
T细胞
APC
第一信号： TCR和CD4 —— MHC-肽复合物
或CD8
第二信号： CD28 —— B7(7.1、B7.2)
2. T细胞活化中细胞粘附分子的辅助作用：
(如细菌、细胞等)及细菌增殖中新合成的抗原 成分。 （2）APC通过吞噬和吞饮作用摄取内化的细菌代谢 产物和其它可溶性蛋白质抗原。
二．T细胞的抗原识别
（一）对 MHC I类分子递呈抗原的识别 --- 内源性抗原的递呈过程：
指胞浆内的抗原，经酶降解成小的肽片段，与 MHC I类分子结合成复合物，然后转送到细胞膜表 面，供CD8+ T细胞识别的过程。
CTL杀伤靶细胞机制（两种）：
(1) 穿孔素依赖性机制 --- 破坏细胞膜 CD8CTL特异识别MHC I-肽复合物(靶细胞表
面)释放活性溶解颗粒 毒性蛋白质： 穿孔素形成膜孔道 细胞死亡。 颗粒酶(颗粒酶B) 进入靶细胞(通过膜孔道)
胱门蛋白酶（caspases, CPP- 32）活化 CAD 活化 降解DNA。
主要效应功能：杀伤表达有同MHC I类分子结合的 特异性抗原的细胞。
1. 特异性细胞毒效应 在宿主抵抗细胞内寄生物的防御中起重要作用。 如病毒、一些细菌及寄生虫等病原体。
靶细胞特点： (1) 寄生物在感染细胞内增殖， a. 不被所感染的细胞破坏； b. 不能接触细胞外的抗体。 (2) MHC I类分子表达下降。
（2）传送活化信号给T细胞，进一步刺激T细胞克隆增
殖。活化的APC表达B7分子增加。
医学免疫学 T淋巴细胞 PPT教案
是TCR的共受体
CD4基本结构及作用
CD4分子是由一条肽链 组成的跨膜蛋白。胞外 区具有4个Ig样结构域， 其中远膜端的2个结构 域能够与MHCⅡ类分 子的β2结构域结合。
CD8基本结构及作用
CD8分子由α和β肽链组成， 2条肽链均为跨膜蛋白，由二 硫键连接。胞外区各含一个 Ig样结构域， 能够与MHCⅠ 类分子的α3功能区结合 。
7．LFA-1和ICAM-1
T 细 胞 表 面 的 淋 巴 细 胞 功 能 相 关 抗 原 -1 （LFA-1）与APC细胞上细胞间黏附分子1（ICAM-1）相互结合，介导T细胞与APC 或靶细胞的黏附。T细胞也可表达ICAM-1， 同APC、靶细胞或T细胞自身表达的LFA-1 结合。
四、丝裂原受体及其他表面分子
（四）T细胞发育的阴性选择（negative selection)
部位：胸腺皮髓交界处、髓质，主要由胸腺
DC、Mφ起选择作用。
SP
胸腺DC、Mφ
高亲和力结合自身肽:MHC-Ⅰ类分子
凋亡或无能
CD8+T
不结合 自身肽:MHC-Ⅰ类分子
成熟CD8+T细胞
高亲和力结合 自身肽:MHC-Ⅱ类分子
凋亡或无能
2．CD3的结构和功能 1) 是成熟T细胞又一特征性表面标志。
2）是TCR-CD3复合体中信号转导的亚单位， 将TCR接受的抗原刺激信号转导至细胞内，使T 细胞活化。
3) 组成与结构：由、、、、五种
肽链组成。两两形成二聚体与TCR组成复合体。
4）每条肽链胞质区较长，均含有 免疫受体 酪氨酸激活基序（ITAM），由18个aa组成，含2 个YxxL/V保守序列。
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TCR重排
一、临床意义：近年来小儿急性淋巴细胞白血病的发生日趋增多, 并且在成年人的发病率也呈增长的趋势, 虽然部分患者经过化疗或干细胞移植, 能够达到临床或血液学的完全缓解( Complete Remission, CR) , 但白血病微小残留病(Minimal Residual Disease, MRD) 导致白血病复发的问题一直困扰着医务人员。
目前检测MRD 的手段很多, 如流式细胞仪检测白血病细胞、RT-PCR 检测白血病基因等方法, 其中白血病基因检测具有灵敏度高的特点具有很高的参考价值。
然而淋巴细胞白血病因为不具有高特异性的白血病基因, 所以在MRD 的监测上比较困难。
1、TCR基因重排技术是检测淋巴细胞克隆性增生的金标准，应用于恶性淋巴瘤的早期诊断和鉴别诊断有重大意义，特别是对于经常规HE、免疫组化检测仍不能确诊的病例有较好的用途和前景。
非霍奇金淋巴瘤是发生于单一亲本细胞的单克隆恶性增殖，瘤细胞的基因重排高度一致。
而正常淋巴组织和良性淋巴组织增生性疾病呈多克隆性，因此可作为非霍奇金淋巴瘤的基因标志。
TCRγ或TCRβ基因重排常作为T 细胞淋巴瘤的基因标志，阳性率可达70%～80%。
为非霍奇金淋巴瘤的诊断、分型及评估预后提供参考依据。
由此可见TCR 基因重排是淋巴细胞恶性增生的特异性标志。
2、我们通过对T 细胞受体(Tcell receptor , TCR) 检测以及它们在监测MRD 中的临床意义的研究, 观察到这种TCR基因重排的检测持续阳性的患者, 更容易导致白血病的早期复发。
因而在ALL 病程中对TCR基因重排进行动态监测, 极大的提高MRD 检出的特异性和敏感性,对ALL患儿的预后、复发的判断及制定相应的个体化治疗方案有重要的指导意义,可以使患儿最大程度的长期无病生存,减少化疗所致的远期不良反应。
二、检测方法：
1、S outhern杂交技术（印迹杂交）
优点是稳定、可靠, 被称为基因重排的金标准,
缺点是成本较高, 需要较多新鲜组织、操作复杂和费时, 且国内收费标准较低, 无法广泛应用于淋巴瘤的鉴别诊断。
2、采用PCR/ SSP（聚合酶链反应-序列特异性引物法）的方法对克隆性标记TCR 基因重排进行检测研究, 该方法具有敏感、特异、重复性好等优点。
通过对标准细胞系所做的倍比稀释检测可知该方法的敏感性达到10- 4- 10 - 5。
3、PCR结合毛细管电泳技术：是美国病理学家协会(CAP)推荐的经美国FDA批准的检测方法，其方法学基础是发挥荧光标记化学与毛细管电泳的双重优势,实现了多重PCR产物的简便、快速、高分辨和自动化检测。
借助荧光标记PCR结合毛细管电泳的检测平台,将使检测过程变得更简便和高效,检测结果更优质精确。
4、实时荧光定量PCR
采用荧光染料SYBR Green Ⅰ和Eva Green RQ-PCR技术。
优点：特异性好，灵敏度高，线性关系好，操作简单，自动化程度高、防污染，有比较大的线性范围等优点。
缺点：由于影响因素较多，假阳性和假阴性率较高，引物的设计也影响检出。
5、荧光原位杂交技术
是一种高灵敏度和高分辨率的染色体和基因分析技术。
它通过特定分子的标记探针与染色体原位杂交和荧光显色，直接显示特定细胞核中或染色体上的DNA 序列间相互位置的关系，成为连接细胞遗传学和分子生物学的桥梁。
FISH 具有灵敏度高，操作简单，取材方便，不受细胞周期限制，还能揭示某些肉眼不能识别的基因缺失和断裂点改变。
竞争对手的检测项目：
1、金域：IgH/TCRr重排检测淋巴瘤的诊断及鉴别诊断复杂，为临床病理工作中的难题之一.作为检测淋巴细胞克隆性增生的金标准, IgH、TCR 基因重排技术
可辅助淋巴瘤的诊断、鉴别诊断和治疗.我中心实验室应用美国病理学家协会(CAP)推荐的经美国FDA批准的检测方法: PCR结合毛细管电泳技术可准确的检测IgH、TCR 基因的重排状态,可为淋巴瘤的诊断,鉴别诊断,治疗方法评估等提供辅助依据.
2、道培医院：IgH、TCRγ、TCRδ基因重排（基因Scan法）500（一项200）
3、中国人民解放军空军航空医学研究所附属医院分子病理中心：
IgH、TCRγ、TCRδ全套基因重排辅助诊断急性淋巴细胞白血病和淋巴瘤及残留监测（设计107 条引物,分为18个多重PCR扩增管）
IgH、TCRγ、TCRδ残留监测
参考文献：
【1】何云燕罗建明：急性淋巴细胞白血病患儿T细胞受体γ基因重排的检测及临床意义《实用儿科临床杂志》2009年第15期
【2】潘胜美陈国安：T细胞受体基因VγⅠ—Jγ重排检测在血液病中的临床意义
《实验与检验医学》2008年03期
【3】陈建华魏文宁邹萍急性淋巴细胞白血病TCR/IgH基因重排的联合检测及临床意义《中华实验诊断学》2007年05期
【4】倪灿荣1, 张太明2, 何妙侠1, 陈颖1, 朱明华1基因重排检测技术操作体会及注意事项临床与实验病理学杂志2007 Aug; 23( 4)
【5】钟梅, 吕亚莉, 李冰, 赵坡用IgH、TCR基因重排技术检测疑难淋巴组织增生性病变《肿瘤防治研究》。