发光方法ppt课件
合集下载
化学发光原理及检测项目PPT课件
triglycerides2
The Intestines Constipation4 Decreased GI motility4
泛的影响
The Brain
Depression1 Decreased concentration1 General lack of interest1 Impaired fetal intellectual
The Kidneys Decreased function5 Fluid retention and edema5
1. Nemeroff CB. Clinical significance of psychoneuroendocrinology in psychiatry: focus on the thyroid and adrenal. J Clin Psychiatry. 1989;50(suppl):13-20. 2. Klausen IC, Nielsen FE, Hegedüs L, Gerdes LU, Charles P, Faergeman O.Treatment of hypothyroidism reduces low-density lipoproteins but not lipoprotein (a) Metabolism. 1992;41:911-914. 3. Polikar R, Burger AG, Scherrer U, Nicod P. The thyroid and the heart. Circulation. 1993;87:1435-1441. 4. Vassilopoulou-Sellin R, Sellin JH. The gastrointestinal tract and liver in hypothyroidism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:816-820. 5. Moses AM, Scheinman SJ. The kidneys and electrolyte metabolism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:812-815. 6. Emerson CH.Thyroid function and disease in the female. In: Gold JJ, Josimovich JB, eds. Gynecologic Endocrinology. 4th ed. New York, NY:Plenum Publishing Corp; 1987:109-133. 7. Haddow JE, Palomaki GE, Allan WC, et al. Maternal thyroid deficiency during pregnancy and subsequent neuropsychological development of the child. N Engl J Med. 1999;341:549-555.
The Intestines Constipation4 Decreased GI motility4
泛的影响
The Brain
Depression1 Decreased concentration1 General lack of interest1 Impaired fetal intellectual
The Kidneys Decreased function5 Fluid retention and edema5
1. Nemeroff CB. Clinical significance of psychoneuroendocrinology in psychiatry: focus on the thyroid and adrenal. J Clin Psychiatry. 1989;50(suppl):13-20. 2. Klausen IC, Nielsen FE, Hegedüs L, Gerdes LU, Charles P, Faergeman O.Treatment of hypothyroidism reduces low-density lipoproteins but not lipoprotein (a) Metabolism. 1992;41:911-914. 3. Polikar R, Burger AG, Scherrer U, Nicod P. The thyroid and the heart. Circulation. 1993;87:1435-1441. 4. Vassilopoulou-Sellin R, Sellin JH. The gastrointestinal tract and liver in hypothyroidism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:816-820. 5. Moses AM, Scheinman SJ. The kidneys and electrolyte metabolism. In:Braverman LE, Utiger RD, eds. Werner and Ingbar’s The Thyroid. 7th ed. Philadelphia, Pa: Lippincott-Raven Publishers; 1996:812-815. 6. Emerson CH.Thyroid function and disease in the female. In: Gold JJ, Josimovich JB, eds. Gynecologic Endocrinology. 4th ed. New York, NY:Plenum Publishing Corp; 1987:109-133. 7. Haddow JE, Palomaki GE, Allan WC, et al. Maternal thyroid deficiency during pregnancy and subsequent neuropsychological development of the child. N Engl J Med. 1999;341:549-555.
发光小夜灯课件ppt
详细描述
如果灯珠老化，需要更换新的灯珠。如果是电路设计不合理，需要对电路进行 优化。如果是电源电压不足，可以尝试更换电池或使用外接电源。
产品寿命短
总结词
产品寿命短可能是由于频繁开关、使用环境恶劣、产品质量问题或使用不当等原 因导致。
详细描述
频繁开关会影响产品的寿命，建议避免频繁开关。同时，避免将产品置于高温、 高湿等恶劣环境中使用。对于产品质量问题，可以联系厂家进行维修或更换。此 外，按照说明书正确使用产品也是延长寿命的重要因素。
感谢观看
THANKS
和如厕。
02
发光原理
光的产生
01
02
03
光的产生
发光小夜灯通过电能激发 荧光物质，使其发出可见 光。
荧光物质
荧光物质在受到紫外线的 照内部的电路 转化为紫外线，激发荧光 物质发光。
光的传播
光的直线传播
光在同一种均匀介质中沿 直线传播。
光的折射
光从一种介质斜射入另一 种介质时，会因为速度的 改变而发生方向的变化。
光的反射
光遇到光滑表面的物体时 ，会以相同的角度反射回 去。
光的颜色与温度
光的颜色
光的颜色由其波长决定，不同波 长的光呈现出不同的颜色。
光的温度
光的温度取决于其能量和波长，波 长越短，能量越高，温度也越高。
温度与舒适度
发光小夜灯通常采用低色温的光源 ，营造舒适的睡眠环境。
01
02
03
04
LED灯珠
选择低电压、低电流、高亮度 的LED灯珠，以保证发光效果
和延长使用寿命。
电池盒
选择合适的电池盒，以满足电 源需求并方便更换电池。
导线
选择适当长度的导线，用于连 接LED灯珠和电池盒。
如果灯珠老化，需要更换新的灯珠。如果是电路设计不合理，需要对电路进行 优化。如果是电源电压不足，可以尝试更换电池或使用外接电源。
产品寿命短
总结词
产品寿命短可能是由于频繁开关、使用环境恶劣、产品质量问题或使用不当等原 因导致。
详细描述
频繁开关会影响产品的寿命，建议避免频繁开关。同时，避免将产品置于高温、 高湿等恶劣环境中使用。对于产品质量问题，可以联系厂家进行维修或更换。此 外，按照说明书正确使用产品也是延长寿命的重要因素。
感谢观看
THANKS
和如厕。
02
发光原理
光的产生
01
02
03
光的产生
发光小夜灯通过电能激发 荧光物质，使其发出可见 光。
荧光物质
荧光物质在受到紫外线的 照内部的电路 转化为紫外线，激发荧光 物质发光。
光的传播
光的直线传播
光在同一种均匀介质中沿 直线传播。
光的折射
光从一种介质斜射入另一 种介质时，会因为速度的 改变而发生方向的变化。
光的反射
光遇到光滑表面的物体时 ，会以相同的角度反射回 去。
光的颜色与温度
光的颜色
光的颜色由其波长决定，不同波 长的光呈现出不同的颜色。
光的温度
光的温度取决于其能量和波长，波 长越短，能量越高，温度也越高。
温度与舒适度
发光小夜灯通常采用低色温的光源 ，营造舒适的睡眠环境。
01
02
03
04
LED灯珠
选择低电压、低电流、高亮度 的LED灯珠，以保证发光效果
和延长使用寿命。
电池盒
选择合适的电池盒，以满足电 源需求并方便更换电池。
导线
选择适当长度的导线，用于连 接LED灯珠和电池盒。
化学发光法检测传染病.ppt
1、关于灵敏度的两个概念
（1）分析灵敏度 决定因素： a.单个抗原决定族的抗原性强弱。 b.试剂盒的信号放大能力
（2）流行病学敏感度 决定因素： a.抗原片段的种类是否齐全。 b.是否含构像抗原。 c.分析灵敏度的高低。
• 2、抗原片段种类不全
C E1E2/NS1 NS2 NS3 NS4a NS4b NS5a NS5b
4、光信号检测，提高信噪比
信号放大代替靶标放大，减少靶标放大带来的非特异性 反应，远远大于ELISA的信噪比。
60 50 40 30 20 10
0 ELISA
CLIA
本底噪音 信号
新型丙肝化学发光试剂---降低漏检率
1、在CORE、NS3、NS4、NS5的基础上增加了E1区 ，保证抗原片段的齐全
分析敏感度
adr 0.1IU/mL adw 0.1IU/mL ay 0.2IU/mL
10 mIU/mL 1# ≥1:64 2# ≥1:128 3# ≥1:32 1# ≥1:32 2# ≥1:64 3# ≥1:64 1# ≥1:128 2# ≥1:128 3# ≥1:256
L1、L2阳性， L3阴性，L4阴性
(-/-)30/30 (+/+)30/30 (-/-)20/20 (+/+)20/20 (-/-)20/20 (+/+)10/10
精密度
8.03% 7.45% 8.03%
8.20%
10.34%
7% 10% 7.98%
试剂性能多中心临床评估（乙肝）
乙肝 HBsAg Anti-HBs hiv Anti-HBe Anti-HBc
4.50% 1.79%
AFP
批内 批间
4.91% 2.14%
（1）分析灵敏度 决定因素： a.单个抗原决定族的抗原性强弱。 b.试剂盒的信号放大能力
（2）流行病学敏感度 决定因素： a.抗原片段的种类是否齐全。 b.是否含构像抗原。 c.分析灵敏度的高低。
• 2、抗原片段种类不全
C E1E2/NS1 NS2 NS3 NS4a NS4b NS5a NS5b
4、光信号检测，提高信噪比
信号放大代替靶标放大，减少靶标放大带来的非特异性 反应，远远大于ELISA的信噪比。
60 50 40 30 20 10
0 ELISA
CLIA
本底噪音 信号
新型丙肝化学发光试剂---降低漏检率
1、在CORE、NS3、NS4、NS5的基础上增加了E1区 ，保证抗原片段的齐全
分析敏感度
adr 0.1IU/mL adw 0.1IU/mL ay 0.2IU/mL
10 mIU/mL 1# ≥1:64 2# ≥1:128 3# ≥1:32 1# ≥1:32 2# ≥1:64 3# ≥1:64 1# ≥1:128 2# ≥1:128 3# ≥1:256
L1、L2阳性， L3阴性，L4阴性
(-/-)30/30 (+/+)30/30 (-/-)20/20 (+/+)20/20 (-/-)20/20 (+/+)10/10
精密度
8.03% 7.45% 8.03%
8.20%
10.34%
7% 10% 7.98%
试剂性能多中心临床评估（乙肝）
乙肝 HBsAg Anti-HBs hiv Anti-HBe Anti-HBc
4.50% 1.79%
AFP
批内 批间
4.91% 2.14%
光致发光(PL)光谱 ppt课件
3
PPT课件
e-h
e-h e-A 声子参与 D-h
e-D+
D-A
(a)
(b)
(c)
图1 半导体中各种复合过程示意图（a）带间跃迁（b）带－ 杂质中心辐射复合跃迁（c）施主－受主对辐射复合跃迁
4
PPT课件
在这个过程中，有六种不同的复合机构会发射光
子，它们是： （1）自由载流子复合 —— 导带底电子与价带顶空穴 的复合； （2）自由激子复合 —— 晶体中原子的中性激发态被
（X1）、上偏振带峰（Xup）以及第一激发态自由激子峰
（ X2 ）。对于质量较差的 CZT晶体，无法看到其自由激 子峰（X1）和一次激发态自由激子峰（X2）。低温PL谱 可以用来比较全面的评价 CZT 晶体的质量，并由此来推 断晶体的探测性能。
17
PPT课件
2、杂质识别 根据特征发光谱线的位置，可以识别GaAs和GaP 中的微量杂质。
12 3 、硅中浅杂质的浓度测定
PPT课件
4、辐射效率的比较 半导体发光和激光器件要求材料具有良好的发光性 能，发光测量正是直接反映了材料的发光特性。通过 光致发光光谱的测定不仅可以求得各个发光带的强度 ，而且也可以的到积分的辐射强度。在相同的测量条 件下，不同的样品间可以求得相对的辐射效率。 5、 GaAs材料补偿度的测定 补偿度NA/ND（ND，NA分别为施主、受主杂质浓度 ）是表征材料纯度的重要特征参数。 6、少数载流子寿命的测定
2自由激子复合自由激子复合晶体中原子的中性激发态被晶体中原子的中性激发态被称为激子称为激子激子复合也就是原子从中性激发态向基态激子复合也就是原子从中性激发态向基态称为激子称为激子激子复合也就是原子从中性激发态向基态激子复合也就是原子从中性激发态向基态导带底电子与价带顶空穴的跃迁而自由激子指的是可以在晶体中自由运动的的跃迁而自由激子指的是可以在晶体中自由运动的激子这种运动显然不传输电荷
让电灯发光课件 (共21张PPT)
画出下面实物图的电路图：
电路图如图所示：
L1 L2 S
课堂练习： 使用干电池或蓄电池时，绝不允许用导线把 两极直接连接起来，是因为 （ B） A.放电电流过小损坏电源 B.放电电流过大会损坏电源 C.放电电流过大会损坏导线 D.有触电危险
通路——处处连通的电路
开路——开关没有闭合和电路中某处断开 的电路
短路——不经过用电器而直接将电源两极用导 线连通的电路
电路图： 用规定的电路元件符号来表示实际 电路连接情况的图叫电路图.
画电路图的注意事项： （1）电路元件要用统一的符号，不能自造 符号. （2）要注意所使用的符号和实物的对应性. （3）合理安排电路元件符号，使之均匀地 分布在电路图中，具有对称性. （4）电路图最好呈长方形，有棱有角. 导线 要横平竖直，力求把电路图画得简洁、美观、 大小比例适中.
电流的方向： 电流是电荷定向移动形成的，物理学中规 定，正电荷定向移动的方向为电流的方向. 当把用电器接在电池正负两极形成闭合电 路时，电流就沿着“电源正极——用电器—— 电源负极——电源正极”的方向流动.其中电 流的方向与电子定向移动的方向相反！
生活中的电源.
大型发电厂中所用的发电机 蓄电池
开关和用电器.
第十四章 了解电路
第二节 让电灯发光
认识下面的电器吗？
美丽的夜景，实用的家电，在我们的日 常生活中，处处用到电，离开了电，我们的 生活就很难进行！ 这些灯是怎么亮起来的呢？这些家电又 是怎么工作的呢？
你认识下面的这些器材吗？
小灯泡
开关
电铃
电池
导线
如何让小灯泡亮起来呢？你觉得要让小 灯泡亮起来需要哪些器材？ 你做过下面的实验吗？
利用提供的器材连接电路，看看小灯泡 能否亮起来？ 注意： 连接电路时，不要将电池的两端直接连 在一起.
电化学发光免疫分析法课件
案例总结
通过实验技巧的分享，帮助读者更好地掌握电化学发光免 疫分析法的实验操作和优化方法。
案例三：疑难问题解答
案例名称
解决电化学发光免疫分析法中的常见问题
案例描述
列举一些在电化学发光免疫分析法中常见的疑难问题，如信号干扰、非特异性吸附等，并 提供相应的解决方案和注意事项。
案例总结
通过疑难问题解答，帮助读者更好地规避实验中可能出现的问题，提高实验的准确性和可 靠性。
03
实验步骤
样本准备
样本采集
采集血液、尿液等生物样本，确 保样本质量和代表性。
样本处理
对样本进行离心、分离、稀释等 操作，以去除杂质并获得纯度较 高的待测组分。
加样和反应
加样
将处理后的样本加入到电化学发光免 疫分析试剂中，确保加样量准确。
反应条件
控制温度、pH值等反应条件，确保反 应顺利进行。
电化学发光免疫分析法PPT课件
目录
• 引言 • 工作原理 • 实验步骤 • 仪器与试剂 • 结果解读 • 应用与优势 • 案例分析
01
引言
目的和背景
01
介绍电化学发光免疫分析法的目 的和背景，包括其在医学、生物 、环境等领域的应用。
02
分析电化学发光免疫分析法的发 展历程，以及当前的研究热点和 挑战。
定期对仪器进行校准和维护，保 证检测结果的准确性和可靠性。
05
结果解读
结果判读方法
确定参考值范围
根据不同年龄、性别和生理状态 ，确定各项指标的正常参考值范
围。
观察指标变化趋势
注意各项指标的变化趋势，如逐 渐升高或降低，可能提示某种疾
病或生理变化。
综合分析
结合其他检查结果和患者的临床 表现，进行综合分析，以得出准
通过实验技巧的分享，帮助读者更好地掌握电化学发光免 疫分析法的实验操作和优化方法。
案例三：疑难问题解答
案例名称
解决电化学发光免疫分析法中的常见问题
案例描述
列举一些在电化学发光免疫分析法中常见的疑难问题，如信号干扰、非特异性吸附等，并 提供相应的解决方案和注意事项。
案例总结
通过疑难问题解答，帮助读者更好地规避实验中可能出现的问题，提高实验的准确性和可 靠性。
03
实验步骤
样本准备
样本采集
采集血液、尿液等生物样本，确 保样本质量和代表性。
样本处理
对样本进行离心、分离、稀释等 操作，以去除杂质并获得纯度较 高的待测组分。
加样和反应
加样
将处理后的样本加入到电化学发光免 疫分析试剂中，确保加样量准确。
反应条件
控制温度、pH值等反应条件，确保反 应顺利进行。
电化学发光免疫分析法PPT课件
目录
• 引言 • 工作原理 • 实验步骤 • 仪器与试剂 • 结果解读 • 应用与优势 • 案例分析
01
引言
目的和背景
01
介绍电化学发光免疫分析法的目 的和背景，包括其在医学、生物 、环境等领域的应用。
02
分析电化学发光免疫分析法的发 展历程，以及当前的研究热点和 挑战。
定期对仪器进行校准和维护，保 证检测结果的准确性和可靠性。
05
结果解读
结果判读方法
确定参考值范围
根据不同年龄、性别和生理状态 ，确定各项指标的正常参考值范
围。
观察指标变化趋势
注意各项指标的变化趋势，如逐 渐升高或降低，可能提示某种疾
病或生理变化。
综合分析
结合其他检查结果和患者的临床 表现，进行综合分析，以得出准
复合发光讲解 PPT
• 间接跃迁光吸收系数
– 吸收一个声子
(h
)
A(h
Eg
Ep
)2 exp
Ep K BT
1 1
(5)
– 发射一个声子
(h
)
A(h
Eg
Ep
)2 1
exp
Ep K BT
1
(6)
3、 缺陷及其对发光得影响
一、点缺陷 化合物
空位 、 填隙原子 、 位错原子 、 同时存在空位或填隙原子 杂质原子替位 、 杂质原子填隙
几种混晶材料得转变点与禁带宽度
材料
GaAs1-xPx
AlxGa1-xAs In1-xGaxP In1-xAlxP
xc 0、46 0、31 0、70 0、40
(eV) 1、99 1、90 2、18 2、23
当x<xc时,为直接带发光效率高 当x>xc时为间接带,发光效率大大降低
5 边缘发射
未激活得ZnS、ZnO、CdS等材料在低温下受到激发后,在本征吸收边附近出 现得发光就是由许多狭窄得等距离谱线组成。这种发光称为边缘发射 边缘发射得光子能量总比禁带宽度小 被认为就是一个价带中得空穴与一个俘获在浅施主上得电子得复合
发光过程
导带电子俘获在定域能级 上,然后由这些定域能级上 得电子与价带得空穴复合 发光
定域能级应当就是晶体得物理缺陷(空位或间隙)引起得
实验证实
用115KeV加速电子轰击CdS,(能量大于在CdS中产生S空位得能量阈 值),在CdS中产生空位或间隙
产生520nm得边缘发射
边缘发射通常伴随着声子发射
7 通过杂质中心得复合
1 激发产生自由电子与空穴,很快驰豫到导带底 (价带顶)——光电导 2 导带电子在导带中扩散,可以被陷阱D俘获 3 落入陷阱得电子也可以通过热扰动从D再跃迁 回到导带 4价带空穴被未电离得发光中心A俘获 5 俘获在A上得空穴也可以通过热扰动从A再跃迁 回到价带 6 导带电子与发光中心A上得空穴复合产生发光
光致发光和电致发光谱课件
电致发光的未来发展
1 2 3
高效节能技术 随着环保意识的提高，电致发光技术将不断向高 效节能方向发展，降低能耗，提高发光效率。
多功能化 电致发光技术将不断拓展其应用领域，如开发具 有温度、湿度、压力等多功能的电致发光器件， 满足更复杂的应用需求。
柔性化与可穿戴化 结合柔性电子技术，实现电致发光器件的柔性化 和可穿戴化，使其能够应用于可穿戴设备、智能 家居等领域。
02
光致发光和电致发光的材料
光致发光材料
光致发光材料在受到光照后，能够将吸收的光能转换为荧 光或磷光并释放出来。
光致发光材料通常由无机晶体、玻璃、陶瓷或高分子聚合 物等组成，它们能够将吸收的光能转换为较低能量的光辐 射，如荧光或磷光。这种材料广泛应用于照明、显示、生 物成像和传感等领域。
电致发光材料
发展趋势
光致发光和电致发光的发展趋势也不同，光致发光将更加注重智能化控制和与其他技术的 结合，而电致发光则将更加注重节能环保和柔性化、可穿戴化的发展。
光致发光与电致发光的比较
光致发光和电致发光虽然都是发光现 象，但它们的激发机制、光谱特性和 应用场景有所不同。
VS
光致发光是由光子激发产生的，其光 谱特性与吸收的光线波长有关；而电 致发光是由电流作用产生的，光谱特 性可以通过调节电流和电压进行控制。 光致发光通常用于荧光标记、生物成 像等领域；而电致发光则广泛应用于 显示器和照明技术。
03
光致发光和电致发光的谱线特征
光致发光谱线特征
连续光谱
温度依赖性
光致发光过程中，发射光谱通常是连 续的，这是因为发光过程中涉及的能 级差较小，导致光谱分布广泛。
光致发光谱线的强度和宽度随温度变 化，温度越高，强度越低，谱线越宽。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
对不同工业类型测试种和复杂性不同 针对工业类型分3个步骤 以过筛方式为主
1 PEEP log [ 1 N (i ) Q ] 10 N N
瑞典：多指标急慢性毒性，可降解性，致突变性，富集性 挪威：多指标急慢性毒性，可降解性，致突变性
加拿大：Microtox, DM, Algae, Ames
美国：全排水毒性控制方案
采样
发光酶
过滤
提取剂
培养
发光
ATP提取
培养
Tanaka等发展的快速微生物测定体系，1997
四种常用的ATP提取体系及优缺点
高氯酸
步骤费时，有干扰，适合野外使用
丁醇/辛醇
加氯仿煮沸 加TRIS缓冲液煮沸
提取速度快，增强荧光，稳定性差
提取速度快，适合大批量样品操作 稀释比较大，灵敏度受影响
利用生物发光方法监测活性污泥生物量
AMP
+ hv
560 nm
水母发光蛋白
蚯蚓发光体系
生物发光体系的应用 无细胞体系 （发光酶）
闪烁记数器
发光细胞体系 （发光菌）
发光酶活性测定 发光酶的核酸探针
定量
LUMINO光度计 电荷偶合成象
实时跟踪
光子影象系统
实时跟踪
典型的无细胞发光测试体系及其应用
直接用细菌发光酶构建的典型发光体系
NADH
FMNH2
RCOOH
黄素单核苷酸还原酶
细菌荧光素酶
NAD
FMN
RCHO
测定相关酶反应程度
测定大肠杆菌含量 105个
测定长链脂肪醛含量 2 ng
直接用萤火虫发光酶构建的典型发光体系
荧光素
AMP
萤火测定不同体系中细菌数 测定系统能量代谢改变
利用生物发光方法分析食品中微生物含量
发光菌的分类(P. Baimann)
属 弧菌 G+C （ %） 45-48 来源 海洋 名称 哈维氏弧菌 I 型美丽弧菌 费氏弧菌 火神弧菌 霍氏弧菌易北变种 明亮发光杆菌 鲋鱼发光杆菌 曼达帕姆发光杆菌 发光异短杆菌
发光杆菌 39-44
非海洋 海洋
异短杆菌 43-44
非海洋
利用发光菌测试毒性时一般操作规程 将4℃保存的斜面菌种转接到新鲜斜面上 22℃培养24h 接种到50 mL液体培养基中 22℃振荡（180r/min）培养16－18h 2000 r/min 离心10分钟 收集菌体并用蒸馏水制成菌悬液 调整菌液浓度 取0.1ml菌悬液加入到0.9ml样品或空白溶液中
重组大肠杆菌
光功率计
苯系物专属型生物传感器
Kobatake, et al., Biosensors & Bioelectronics 1995 ， 10 ( 6-7): 601
Reconstracted Plasmid with Luxgene from V. Qinghainesis Q67 (PACYC L184, 9000 bps, for recombinants of TA98 and TA100)
cml Sall BamH I
2000 8000
Hind III PS II
Hind III
6000
4000
Luxgene (Q67)
朱文杰等., 1999
将发光酶基因标记到具有特殊环境意义的启动子下游
环境应激
（蛋白质结构, DNA损伤, 过氧化氢, 超氧化物，营养缺乏等）
大肠杆菌的启动子
(grpE, dnaK, uspA, lon, lysU, uvrA, recA, xthA, katG, micF, phoA, lac and his)
发光方法
常用的发光方法体系
• • • • 化学发光 发光酶方法 重组发光酶基因的工程菌方法 发光菌方法
化学发光分析中常用的发光体系
鲁米诺发光体系（LUMINOL+H2O2） 过氧草酸盐发光体系
洛粉发光体系（LOPHINE） 光泽精发光体系(LUCIGENIN)
钌(II)-联吡啶配合物发光体系
LUMINOL化学发光体系
发光酶结构基因 (lux genes) 标记细菌细胞
将含发光酶基因的质粒融合到细菌细胞中
例：发光标记荧光假单孢菌研究农用稀土元素对土壤微生物的影响
黄褐土
红壤
菌密度 0
500 稀土元素浓度
1000 0
5 稀土元素浓度
10
安徽农大未发表数据，1999
部分其他环境应用
用发光标记方法跟踪工程菌在环境中的 稳定性和分布特性
Cr(III) SO2 . . .
用LUMINOL化学发光体系构建在线监测传感器 样品
流动相
Lumino
进样器
测量仪
H2O2
蠕动泵
混合管
生物发光体系
发光菌
RCHO
+ +
O2 FMNH2
细菌荧光素酶
RCOOH
+ +
FMN
+ hv
590 nm
萤火虫
O2 ATP
萤火虫荧光素酶
Luciferin
Oxyluciferin
控制标准
不明确
德国：Fish，Microtox，Algae, Ames, DM
爱尔兰：Rainbow Trout
用获得NOEC 的稀释倍数控制
TU1-25，取决于工业类型，每排放1TU需20倍稀释 仅针对典型工业污染评价
荷兰：急慢性毒性，可降解性，致突变性，富集性
英国： Microtox， DM，Oyster, Algae….
采样
稀释
取部分溶液 加入TRIS
加热沸腾 30-60秒
加入荧光素荧光素酶溶液 测量 发光
冷却后加入 TRIS溶液
典型的细胞发光测试体系及其应用
构造带有发光基因的微生物
能够降解苯系物的细菌(Pseudomonas putida)
TOL 质粒
萤火虫发光基因 插入到xylS蛋白启动子位置
融合基因质粒 pTSN316
用标记噬菌体监测宿主细胞种类和密度 根据原生动物/微生物(发光标记)之间的 捕/被食关系研究土壤微生物活性改变
用接种发光标记微生物的方法研究植物 根际动态
用LUX报告基因融合方法研究化学品降 解速率和途径
1995年欧洲部分国家毒性排放控制标准及实施细节 （红色部分是计划1995年以后实施的项目） 法国：DM，Microtox，fish, Ames
电极反应
鲁米诺 + 氧化剂 + 催化剂 + 抑制剂
H2O2 Cu(II) Co(II) Zn(II) Cr(III) Fe(CN)53. . . 胺 醇 磷酯 氨基酸 胆碱 . . .
用LUMINOL化学发光体系测定重金属浓度
体系
对象
Cu(II) Co(II)
鲁米诺 + H2O2 + 隐蔽剂
Zn(II)
TU
i
CMC和CCC
国家环保局生物监测方法规范
GB/T 12990-91
水质: 微生物的PFU测试方法
GB/T 13266-91
水质: 大型蚤急性毒性测试
GB/T 13267-91
水质: 鱼(Pinto)急性毒性测试
GB/T 15441-95
水质: P. phosphoreum (T3) 急性毒性测试