猪轮状病毒(RV)---精品资料

1 病原学

猪轮状病毒(RV)属于呼肠弧病毒科轮状病毒属的A、B、C、E 群[4]。成熟完整的病毒粒子略呈圆形,没有囊膜,具有双层表壳,直径为65~75nm的二十面体对称。电镜观察,病毒的中央为一个电子致密的六角形棱心,直径37~40nm,即芯髓;周围有一电子透明层,壳粒由此向外呈辐射状排列,构成中间层衣壳;外周为一层光滑薄膜构成的外层衣壳,厚约20nm,形成一个轮状结构,RV由此而得名[5]。在感染的粪样和细胞培养物中均存在两种形式的病毒粒子:具有双层表壳的光滑型(S型)双层颗粒,有感染性,直径为75nm;没有外表壳的粗糙型(R型)单壳颗粒,无感染性,直径为65nm。

有关RV的超微结构,学者们的意见尚不一致,Martin等(1975年)认为RV与环状病毒一样,也有32个大的环形壳粒,且其180个三联亚单位按T=9的、方式组成20个三角面体。每个三联亚单位包含3个结构单位,所以一共有540个结构单位。但据Esparza(1978年)报道,RV表面有162个孔,由320个三联亚单位按T=9方式组成20个三角面体。因每个三联亚单位包含三个结构单位,所以一共有960个结构单位。出现上述不同的观察结果,也许是标本制作方法不同的缘故。Stannard氏等(1977年)对乳鼠流行性腹泻轮状病毒和猴RVSA11株进行了细致的电子显微镜观察,发现其内衣壳有180个形态亚单位,排列成晶格状。12个顶各为一个空隙,由5个壳粒围绕,另外80个空隙各由6个壳粒围绕。外衣壳由蜂窝样的晶格组成,且与内衣壳的晶格排列相符。

1.1 分子生物学特性

通过X-射线晶体结构研究发现,完整的病毒粒子具有复杂的结构。最外层核衣壳由结构蛋白VP7和VP4组成,中间层衣壳由VP6组成,最内层衣壳由VP2和少量的VP1、VP3组成。VP7是构成外衣壳最丰富的外壳蛋白,是分子量为37KD的糖蛋白。VP4是88KD的红血球凝集素纤突蛋白,沿VP7形成的光滑表面向外突出。不完整的病毒粒子是完整的病毒粒子在进入被感染细胞过程当中外衣壳蛋白VP4和VP7被溶解掉而形成的两层核衣壳结构(DLP)。除了VP4、VP7、VP6、VP2、VP1和VP3这6种结构蛋白以外,还有5种非结构蛋白,分别是NSPl、NSP2、NSP3、NSP4和NSP5。

病毒的基因组由11个独立片段的双股正链RNA组成。除了片段11具有两个开放阅读框(0RD)外,其他的片段只有1个ORF。在各个ORF的5’端和3’端都有非编码区(UTRs ),不同毒株的UTRs高度保守,而ORF的差异比较大。轮状病毒的mRNA分子具有5’端m7GpppGn帽子结构,而3’没有Poly(A)尾。ORF的基因编码结构蛋白和非结构蛋白,两端的UTRs可能与调节蛋白的结合以及核酸的复制、表达有关。

早期的研究结果认为VP7与病毒的附着有关,但现在越来越多的证据表明VP7具有稳定VP4结构的作用。在病毒侵入细胞的过程当中VP4起到关键作用。VP4能被胰蛋白酶(Trypsin) 分解为VP5(60KD) 和VP8(26KD) 两个结构部分,与病毒附着、聚集有重要关系,

可以数倍提高轮状病毒的感染性[7]。VP5含有一个与有膜病毒如流感病毒类似的区域,它能增加细胞膜的渗透性,加强病毒进入细胞的能力。VP8含有唾液酸附着(Sialic acid binding)的区域,这一区域对于需要硅酸进行感染的轮状病毒亚单位来说至关重要。VP6与内衣壳蛋白VP1和VP3的转录活性有关[8]。VP4和VP7被溶解掉之后,VP1和VP3的转录酶活性被激活,转录产物被合成和排出。最内层的病毒粒子衣壳由包裹基因组的VP2、VP1、VP3组成,基因组核酸通过VP1、VP3与VP2紧密相连。VP1和VP3具有RNA转录酶和修饰酶的潜在活性。

非结构蛋白NSP1、NSP2、NSP3、NSP5都是RNA结合蛋白,与病毒的复制,合成和表达有关。NSP5可与VP2作用,进而影响VP1/2/3的核心结构,同时也能影响VP6的稳定性。而NSP4是一种糖蛋白,与病毒粒子从内质网出芽有关,在病毒的复制以及致病机理方面具有重要作用。NSP4的突变可以影响病毒的毒力。

1.2 病毒分型

轮状病毒具有不同的群型和血清型。将轮状病毒的核酸进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,可以将病毒的11个双链RNA片段分离,形成特定的电泳带模型。这11条带可以分为4个区段,常见的人和动物的电泳带的排列位置为4:2:3:2,统称为A群,又叫典型RV。根据第1O和11节段之间的距离,又分为长型和短型。其他的轮状病毒的电泳型与A群不同,分别为B、C、D、E、F和G群,统称为非典型RV。在发生腹泻的动物中最常见的是A群,感染猪的轮状病毒有A群、B群、C群和E群。

病毒粒子表面共有三种抗原,分别为群抗原,中和抗原和血凝素抗原。群抗原是VP6,中和抗原是VP7,而血凝素抗原是VP4。根据群抗原VP6可以分为不同的亚群。大多数动物的A群轮状病毒为I亚群,而人类大多数A群轮状病毒为Ⅱ亚群。VP4和VP7在病原的检测和产生中和抗体以及免疫性保护过程中具有重要意义,可以根据VP4和VP7分为不同的血清型系统。根据VP4形成的血清型叫P(protease sensitive)型,根据VP7形成的血清型叫G(glycoprotein)型。轮状病毒不同血清型之间的交叉反应性较差,免疫反应主要是针对特异血清型的,但现在也有报道利用交叉免疫保护的。目前已经知道至少有14个G型和18个P型。通过轮状病毒的分子流行病学调查发现,在世界广泛流行的A组RV主要有4种G、P血清型组合, 分别是G1P8、G2P4、G3P8和G4P8。从各大洲分离的仔猪的基因型主要有以下两种:类OSU型和类Gotfield型。

1.3 理化特性

RV对理化因素的作用有较强的抵抗力,所以清洗和消毒猪舍时必须注意此特点。它耐乙醚、氧仿、去氧胆酸钠、次氯酸盐;反复冻融,声波处理。以及37℃下1h仍不失活;pH3.5~10.0范围内病毒保持感染力,对胰蛋白酶稳定,1moL/LMgCL2不能增高其对56℃30min的稳定性;粪便中的RV在18~20℃室温中经7个月仍有感染性;能耐10mL/L甲醛1h以上;氯、臭氧、碘、酚等可灭活病毒;100g/L聚维酮碘、950mL/L乙醇和670g/L氯胺T是有效的消毒剂[4~5]。

1.5 抗原性

RV与呼肠孤病毒和环状病毒无抗原关系,但用补反结合试验、免疫荧光试验和免疫扩散试验和免疫电镜技术检测各种动物的RV,发现具有共同抗原---出现交叉反应。这种共同抗原与内衣壳有关,也就是说,内衣壳具有各种RV共有的属抗原。外衣壳内糖蛋白抗原有种特异性,交叉保护试验或中和试验可区别各种动物RV,但Thouless氏等(1977年)对人、牛、猪、小白鼠、狗、羊、马和兔的RV作交叉中和试验,发现高浓度的抗血清可能引起一定程度的种间交叉现象,但同源血清的中和效价通常都比异源血清高8—10倍以上。1976年Woode氏等应用免疫电镜技术测人、牛、猪、小白鼠、马等RV抗原性关系,发现抗人RV免疫血清以外,其余四种血清能对四种动物RV呈现交叉凝集现象,人的R型也可以被四中抗血清凝集,但S型只能被人抗RV血清凝集。证明动物感染RV后产生两中抗体:抗内衣壳的群特异性抗体,产生种间交叉反应。抗外衣壳的种特异性抗体,中和抗体或保护性抗体作用。

1.4 培养特性

1980年美国的Waytt将人的Wa株首次利用非洲绿猴肾原代细胞培养成功。轮状病毒在体外不易培养。轮状病毒在培养的过程中需要用胰酶处理,病毒接种前用终浓度为10ug/ml的胰酶处理。病毒接种24h后就可出现细胞病变,表现为细胞肿大变圆、边缘模糊、细胞聚集、萎缩,有的细胞间有胞浆相连,最后细胞死亡脱落。随着传代次数的增加,病变程度加深,出现病变的时间也越来越快。病毒接种后一般用不含血清的维持液培养。但是黄旭雯等人在研究鸡血清对轮状病毒增殖的影响中发现,鸡血清(CS)能增加单层细胞的活力,延迟细胞衰老2~3d,但细胞对病毒的易感性降低。同时添加4%的CS和10mg/L的胰蛋白酶效果最好,细胞病变明显,细胞单层能维持到被病毒破坏为止,有利于RV的复制。

轮状病毒感染细胞具有特定的趋向性。在体内只感染肠绒毛的上皮细胞,在体外尽管可以吸附许多细胞,但是只感染肾或肠道上皮细胞来源的细胞。轮状病毒可以在MA-104、CV-1、MARC-145等细胞系培养,但最适合用MA-104培养。Carlos A.Guerrero等人通过不同的方法处理MA-104细胞,然后用RRV,SA11,SA感染来检验细胞上的受体,结果发现N-多聚糖(N-glycans)、神经节苷脂(gangliosides)、胆固醇类(cholestero1)及其相关的蛋白质是不同基因型的轮状病毒侵入细胞的不同受体。

2 流行病学

2.1 传染源

病猪、隐性感染及带病毒者是本病的传染源,由于后两者不易被发现,因而起着重要的传染源作用。

2.2 传播途径

RV通过密切接触尤其是粪-口途径引起传播或流行;呼吸道传播和垂直传播也已被证实。

2.3 易感动物

自然情况下,多发于2~56日龄仔猪,成年猪感染不会发生严重的临床症状。KaminjoIo

JS等的实验表明RV检出率最高的仔猪周龄为2~8周龄(91.1%),检出率峰值为8周龄仔猪。Gelerg等发现仔猪体内排出RV的峰值周龄是3~4周龄。Morilla认为非典型RV感染仔猪的日龄要小于A型,因母猪不能通过被动免疫保护其仔猪口。RV感染具有明显的季节性,高峰在晚秋及冬季,步数地区季节性不明显而呈终年流行。散发,偶见爆发。一旦发生本病,随后将每年连续发生,因为RV在体外有较强的抵抗力,且隐性感染的成年动物不断向外排毒。

3 临床症状

病初,病猪精神不振,食欲不良,不愿活动。随后出现呕吐和腹泻。腹泻是本病的主要症状,粪便呈黄色、灰色或黑色,水样或糊样,严重者带有黏液和血液。腹泻3~4d后,部分病例出现严重脱水。此病多在2~3d内恢复,死亡率一般为10%。如继发其他疾病,使病情恶化,死亡率可达10%~20%。

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仔猪轮状病毒FQ-PCR检测方法的建立

仔猪轮状病毒FQ-PCR检测方法的建立

558 中国人兽共患病学报 Chinese Journal of Zoonoses 2010,26(6) 

文章编号:1002—2694(2010)06—0558—04 

仔猪轮状病毒FQ—PCR检测方法的建立* 

魏锁成 ,巩转娣 ,宋昌军 

摘要:目的探讨动物轮状病毒分离鉴定方法,建立实时荧光定量PCR(FQ-PCR)快速检测法。方法 用RV敏感的 

MA-lO4细胞分离病毒,测定其VP6基因序列和同源性分析,建立FQ-PCR检测方法。结果 MA-104细胞接毒并传代18h 

后出现明显的细胞病变(CPE),分离到1株猪轮状病毒(PRV),经RT-PCR扩增得到1 200bp的VP6片段,与标准株(AV-55) 

的同源性达88.50 ;且建立了PRV的FQ-PCR检测方法,其灵敏度比普通PCR高数十倍,具有较强的特异性。结论 建立 

了PRV的FQ-PCR检测方法,其灵敏度和特异性比普通PCR高数十倍,PRV的VP6与参考株具有88.5O 同源性,建立了 

PRV的FQ—PCR检测方法,其灵敏度和特异性普通PCR和ELISA均高。 

关键词:轮状病毒;MA-104细胞;实时荧光定量PCR;仔猪 

中图分类号:R373.2文献标识码:A 

FQ—PCR detection method for piglet rotavirus 

WEI Suo—cheng .GONG Zhuan—di .SONG Chang-j un。 

(1.Institute of Animal Medicine,Northwest University for Nationalities,Lanzhou 730030: 

2.The Affiliated Hospital of Northwest University for Nationalities,Lanzhou 730030,China) 

ABsTRACT:The purpose of this study was to explore the method of isolation and identification of animal rotavirus(RV), 

常见猪病英文缩写

常见猪病英文缩写

常见猪病英文缩写

AR: 传染性萎缩性鼻炎(萎鼻) APP: 传染性胸膜性肺炎(传胸) CT: 先天性震颤

CDCD: 初乳缺乏症

Cp: 猪衣原体

ES: 内毒素引起休克

Ery: 猪丹毒

ED: 大肠杆菌病

EC: 肠道病毒

FMD: 口蹄疫(五号病) HC: 猪瘟

Hps: 副嗜血杆菌

JE: 流行性乙型脑炎

Lister: 李氏杆菌病

Lepto: 钩端螺旋体病

MH(Mp): 支原体肺炎(气喘) OD: 水肿

PWT: 仔猪腹泻

PRRS: 繁殖与呼吸综合障碍症(蓝耳)

PRV: 伪狂犬

PPV: 细小病毒

PRCV: 呼吸道冠状病毒

PCV2: 圆环2型病毒

PDE: 增生性肠炎

PMWS: 断奶仔猪多系统衰竭综合症 PDNS: 皮炎肾病综合症 PED: 流行性腹泻

PCV: 间质性肺炎与繁殖综合症 PSS: 猪应激综合症

PRDC: 出血性巴氏杆菌引起的炎呼吸道综合症

Pasteur: 猪肺疫

RV: 轮状病毒

Rr: 布氏杆菌病

SD: 猪痢疾

SVD: 水泡病

SVE: 水泡性疹

SC: 猪霍乱

SI: 流感

SS: 链球菌

Salm: 副伤寒

TGE: 传染性胃肠炎 TP: 弓形虫体病

TB: 结核病

一、 常见禽病的英文缩写 AI: 禽流感

ACH: 禽衣原体

ATB: 结核

AVN: 鸡病毒性肾炎 ARI: 禽轮状病毒感染 APV: 禽肺病毒

AS: 腹水综合症

BLS: 大肝和大脾病

CRD: 慢呼败血

DVH: 鸭乙性肝炎 DVE: 鸭病毒性肠炎,又名鸭瘟(DP)

FC: 霍乱 FP、PX: 鸡痘

FT: 伤寒

HE: 火鸡出血性肠炎 HPS: 心包积水综合症

MG: 支原体

MS: 滑液囊支原体 ND: 新城疫

MD: 马立克

MM: 火鸡支原体 MP: 番鸭细小病毒

最新常见猪病英文缩写教学提纲

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AR: 传染性萎缩性鼻炎(萎鼻)

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CT: 先天性震颤

CDCD: 初乳缺乏症

Cp: 猪衣原体

ES: 内毒素引起休克

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ED: 大肠杆菌病

EC: 肠道病毒

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Lepto: 钩端螺旋体病

MH(Mp): 支原体肺炎(气喘)

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PWT: 仔猪腹泻

PRRS: 繁殖与呼吸综合障碍症(蓝耳)

PRV: 伪狂犬

PPV: 细小病毒

PRCV: 呼吸道冠状病毒

PCV2: 圆环2型病毒

PDE: 增生性肠炎

PMWS: 断奶仔猪多系统衰竭综合症

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PRDC: 出血性巴氏杆菌引起的炎呼吸道综合症

Pasteur: 猪肺疫

RV: 轮状病毒

Rr: 布氏杆菌病

SD: 猪痢疾

SVD: 水泡病

SVE: 水泡性疹

SC: 猪霍乱

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SS: 链球菌

Salm: 副伤寒

TGE: 传染性胃肠炎

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一、 常见禽病的英文缩写

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ATB: 结核

AVN: 鸡病毒性肾炎

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AS: 腹水综合症

BLS: 大肝和大脾病

CRD: 慢呼败血

DVH: 鸭乙性肝炎

DVE: 鸭病毒性肠炎,又名鸭瘟(DP)

FC: 霍乱

FP、PX: 鸡痘

FT: 伤寒

HE: 火鸡出血性肠炎

HPS: 心包积水综合症

MG: 支原体

MS: 滑液囊支原体

ND: 新城疫

MD: 马立克

MM: 火鸡支原体

MP: 番鸭细小病毒

A群轮状病毒的分类及命名

A群轮状病毒的分类及命名

研究与综述 A群轮状病毒的分类及命名 杨彪1 陈 军2谢金鑫。 (1.黑龙江省密山市八五七农场七连朝阳奶牛场158322,2.黑龙江农垦宝泉岭分局动物卫生监督所154211, 3.哈尔滨市华农威普动物保健品有限公司150025) 1分类 轮状病毒(RV)属于呼肠孤病毒科(Reoviridae)、 轮状病毒属(Rotavirus)。完整病毒粒子为无囊膜,球 状,呈20面体结构,直径小于100纳米,由外层衣 壳,内层衣壳和核心衣壳3层蛋白衣壳组成。轮状病 毒基因组由1 1节段双股RNA组成,包裹于内层衣 壳。根据中层衣壳蛋白VP6的抗原性和RNA PAGE 电泳图的差别,轮状病毒可分为A~G这7个血清群, 感染人、牛和猪的是A、B和C群轮状病毒,其中危害 最严重的是A群轮状病毒,一直以来是科学工作者 研究的重点,而D、E、F和G群只在动物中发现。 A群轮状病毒的第11段RNA编码2个蛋白,其 余每段均编码1种蛋白,即轮状病毒基因组共编码6 种结构蛋白,分别是VP1、VP2、VP3、VP4、VP6和 VP7和6种非结构蛋白,分别是NSP1、NSP2、NSP3、 NSP4、NSP5和NSP6。根据内壳蛋白VP6的抗原性不 同,可将A群轮状病毒分为SG1、SG1 1、SGI+SG11和 非SG1+SG1 1亚群。非结构蛋白NSP4根据氨基酸同 源性分为A、B、C、D和E这5个基因群。通常,以编 码可刺激机体产生中和性抗体并介导病毒进入细胞 的蛋白酶敏感蛋白VP4和糖蛋白VP7的基因起始字 母P和G代表轮状病毒的基因型,有人根据RNA杂 交结果的不同,将A群轮状病毒分为wa_like、 DS一1一like和AU一1一tike3个基因群。 2命名 为了解轮状病毒分离株是否存在种内和种问的 重配,有人提出A群轮状病毒分类和命名的新方法。 该研究小组通过对GeneBank中众多已知不同轮状 病毒毒株的基因节段VP7(Glycolated1、VP4(Protase 子产生效应,如EGF。 3小结 在次级毛囊分化的关键时期加强营养可以促进 次级毛囊的分化,提高产绒量。因为早期营养好可以 促进皮肤毛囊原始体的数量增加,并发育成羊毛而 sensitive protein1、VP6(Intermediate capsid shel1)、VP1 (RNA—dependent RNA polymerase)、VP2(Core shell protein)、VP3(Methyhransferase)、NSP1(Interferon an— tagonist)、NSP2 fNTPase)、NSP3(Translation enhancer)、 NSP4(Enterotoxin)和NSP5(Phsphoprotein)编码区核苷 酸进行多序列比对分析,进而确定上述1 1基因节段 对应的基因型的编码区核苷酸序列同源性的临界值 分另0为8O%、80%、85%、83%、84%、81%、79%、85%、 85%、85%和91%。根据此标准该研究小组提出了如 下轮状病毒毒株的命名方法为 Gx—Px—Ix—Rx—Cx—Mx—Ax—Nx—Tx—Ex—Hx,大写字母 顺序分别代表以下基因节段VP7一 VP4一VP6一VP1一VP2一VP3一NSP1一NSP2一NSP3一NSP4一 NSP5,X代表所命名毒株相应的基因型。到目前为为 止,已经有24个G基因型、33个P基因型、14个I 基因型、6个R基因型、6个C基因型、7个M基因 型、16个A基因型、6个N基因型、8个T基因型、12 个E基因型和8个H基因型被确认。 通常,以编码可刺激机体产生中和性抗体并介 导病毒进入细胞的糖蛋白VP7和蛋白酶敏感蛋白 VP4的基因的基因型G和P代表轮状病毒的基因 型。已经发现了24个G基因型和33个P基因型,其 中腹泻牛群中10个G型(G1—3、G5—8、G10、G1l、 G15)和6个P型(P6[1】、P7f5]、P8[I1]、P11[14]、P[17]、 P[211),健康牛群中发现了轮状病毒G21P[29]型和 G24P[33J型。我国仅有G6型和G10P[1 11型牛轮状病 毒被报道。 依托此分类标准,很容易确定1个新轮状病毒 分离株全序列的基因型,同时根据系统遗传进化树 长出体表,这些早期的形态学指标可以用于优质山 羊的早期选种。汗腺的深度与大小等附属结构特点, 可以为全面提示皮肤的层 的遗传机制奠定基础,并 供理论依据。 :结构与毛曩及毛反品庾 7优质山羊的育种选择提 养殖技术顾问2010.1 1

猪轮状病毒GD1株VP7基因的克隆及序列分析

猪轮状病毒GD1株VP7基因的克隆及序列分析

广东畜牧兽医科技2010年(第35卷 箜 塑 试验研究 ・29・ 

猪轮状病毒GD1株VP7基因的克隆及序列分析 

田小艳,孙华,邓雨修,苏润环,王东东,宋延华 (广东省温氏集团研究院,广东新兴 52740@ 

摘要:参考GenBank中发表的PRV OSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异 引物,以PRV GD1株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1 kb的基因片段,并克隆到pMDI8-T 载体中进行序列测定。测序结果表明:VP7基因全长1 062 bp,含有一个981 bp的开放阅读框,编码326 个氨基酸。与国内外已知的1 3个毒株VP7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较,相似性分别为77. 4%一1 00%和78.6%~99.7%;核苷酸系统发育进化树结果表明,GDI毒株与轮状病毒A2,JP3-6毒株亲缘关 系较近,为一个进化群。 关键词:猪轮状病毒;VP7基因;克隆;序列分析 中图分类号:¥852.65 1 文献标识码:A 文章编号:1005—8567(2010)O1—0029~03 

Clone and sequence analysis ofVP7 gene ofporcine rotavirus strain GD1 

Tian Xiaoyan,Sun Hua,Deng Yuxiu,Su Runhuan,Wang Dongdong,Song Yanhua (Guangdong Win’S Group Academy,Xinxing 527400,China) 

Ab ̄raet:A pair of primers targeted the conserved region flanking the ORF of VP7 gene of porcine rotavims(PRV)strain OSU were designed according to the published sequences.The PCR product of approximately lkb long was amplified from CDNA of PRV strain GD1.The PCR product was cloned into pMD18-T vector and sequenced.nle full-length of VP7 gene was 1062 bp long including a coding region of 98lbp,which encoded a protein with 326 amino acids.The VP7 gene of the PRV strain GD1 shared 77.4%to l O0%necleotide homology Wi也that of other 1 3 PRV strains.The amino acids of VP7 gene of the PRV strain GD1 shared 78.6%to 99.7%amino acids homology wim that of other 13 PRV strains.The results showed that the strain GDl was more close to strains A2 and JP3.6. Key :Porcinerotaviru(PRV);VP7gene;clone;sequenceanalysis 

猪轮状病毒GD株VP6基因的克隆及序列分析

猪轮状病毒GD株VP6基因的克隆及序列分析

一33一 中国动物检疫2010年第27卷第2期 

猪轮状病毒GD株VP6基因的克隆及序列分析 

田小艳,邓雨修,孙华,苏润环,王东东,宋延华 

(广东省温氏集团研究院,广东新兴 527400) 

摘要:参考GenBank中发表的PRV 0SU毒株VP6基因核苷酸序列ORF两端保守区序列,设计1对特异引物,以 

PRV GD株反转录cDNA为模板,通过PCR方法扩增出长约1.4 kb的基因片段,并克隆到pMDI8-T载体中进行序列测 定。测序结果表明:VP6基因全长1 320 bp,含有一个1194bp的开放阅读框,编码397个氨基酸。与国内外已知的l1 个毒株VP6基因的核苷酸及其推导的氨基酸序列比较,同源性分别为76.5%一95.6%和88.7%一99.2%;核苷酸系统发育 

进化树结果表明,GD毒株与轮状病毒JL94,CN86,OSU毒株亲缘关系较近,为一个进化群。 

关键词:猪轮状病毒;VP6基因;克隆;序列分析 中图分类号:¥852.659.4 文献标识码:A 文章编号:1005-944X(2010)02—0033—03 

se 吼I∞Amlym of VP6 G衄e of Pta' ̄i ̄Romvinm GD Stmin 

TIAN Xiao—yan,DENG Yu.xju,SUN Hua,SU Run-huan,ⅥrANG Dong.dong,SONG Yan-hua* (Guangdong Win’S Group Academy,Xinxing Guangdong.527400 China) A鼬曩cI:A pair of primers derived from the conserved region flanking the ORF of VP6 gene of porcine ro— 

tavirus(PRV)OSU strain was designed according to the published sequence.A PCR product of approximately 1 400bp was amplified from cDNA of RV GD strain.The PCR product was inserted into pMD 1 8一T vector and sequenced.Tl1e full—length VP6gene contained 1320bp including a coding region of 1 194bp.which encodes a pro— 

浅谈春季猪病毒性腹泻病的治疗及预防措施

中国畜牧兽医文摘2013年29卷第1期 临床兽医 浅谈春季猪病毒性腹泻病的治疗及预防措施 林晓红 (江苏省丹阳市延陵镇畜牧兽医站,丹阳212342) 近年来,猪病毒性腹泻呈上升趋势,让许多养殖户措手不 及,造成不小的损失。猪病毒性腹泻一般不会死猪,但因未断奶 的仔猪抵抗力比较弱,经常会因脱水而死亡,因此,损失比较严 重。 春季空气潮湿,气候多变,温差变化大,是猪病毒性腹泻多 发高发季节,且在近年呈持续上升的趋势,已成为造成规模场损 失的重要原因之一。主要病原有猪传染性胃肠炎病毒、流行性腹 泻病毒和轮状病毒,它们有时也和其他病原混合感染引起腹泻, 因此临床上很难简单区分病原。此种腹泻一旦发生,便会迅速波 及全群,此类传染病虽然病原和流行规律不同,但其临床症状、 病理变化和致病机理相似。病毒性腹泻传播快,主要表现水样腹 泻、呕吐、脱水,给不同类别猪群生产带来不同程度的危害,特 别是低日龄仔猪死亡率高,它可以引起仔猪死亡,肥猪掉膘,饲 料报酬降低,给生猪养殖带来极大的损失。 1 流行病学 该病每年冬春季从11月一次年4月多发,潮湿多雨天气高发, 早春的寒冷季节易发,但近年来,部分猪场在盛夏季节也有发 生,应引起足够注意。流行主要形式分为暴发.f生和区域性2种。一 般首次感染多呈暴发性流行,某些猪传染性胃肠炎病毒污染比较 严重的猪场,常呈区域性流行。病猪和带毒猪可通过粪便、呕吐 物、乳汁、鼻分泌物和呼气排出病毒,污染饲料、饮水、空气、 土壤以及车辆、用具,经消化道和呼吸道感染其他猪只。各种日 龄、品种的猪均易感染,但感染病毒种类有差别:成年猪多感染 流行性腹泻病毒、传染性胃肠炎病毒;60日龄以内的仔猪则这3种 病毒均易感染。发病程度也有差别:10日龄内的仔猪则不但最易 发,且可导致仔猪大批死亡,50日龄以上的猪只死亡率低,后备 猪、妊娠母猪、哺乳母猪易发生,但影响小;成年猪经3 7 d腹 泻后,可逐渐康复,几乎没有死亡,但可能形成僵猪。 2临床症状及病理变化 2.1猪传染性肠胃炎(TGE) 本病发病急,传播迅速,主要以7—10日龄以内仔猪呕吐、严 重腹泻和高死亡率(通常100%)为主要特征,会造成病仔猪严重 脱水、电解质紊乱和酸中毒,死亡率很高,耐过和自然痊愈的仔 猪常因生长发育受阻而成为僵猪。出现的症状依病猪年龄的不同 而有差异。仔猪病初出现呕吐,接着出现严重的水样腹泻,粪便 为白色、黄白色或黄绿色,不久病猪严重脱水,眼球凹陷,皮肤 干燥、无弹力,毛长,体重迅速下降,常于2—3 d内死亡,较快 的在l d内就可引起死亡;发病持续时间长短和死亡率随感染日龄 的增加而降低。育肥猪、母猪和公猪的临床症状表现轻重不一, 一般表现为厌食,个别猪出现呕吐,严重腹泻的猪排出水便呈喷 射状,也有些母猪症状轻微或没有症状。如果泌乳母猪发病严 重,体温升高,厌食、呕吐和腹泻,泌乳停止。 剖解表现:胃内充满凝乳块,胃底黏膜有时出血严重;小肠 充血膨大,肠壁变薄、透亮;肠腔内充满黄绿色或灰白色液体, 含有气泡和未消化的凝乳块,肠黏膜有时出血明显。 2.2猪流行性腹泻(PED) 该病临床症状类似于胃肠炎,但较缓和,以水样腹泻、呕 吐、脱水和新生仔猪的高死亡率为特征。哺乳仔猪,病初体温升 高或正常,精神沉郁,食欲减少,继而排出水样粪便,呈灰黄色 或灰色,粪便恶臭。l周龄以内仔猪呕吐症状多发生在吃奶后, 吐出物含有凝乳块;病猪很快消瘦,后期粪水从肛门流出,污染 臀部及足;病猪不食,不愿走动,通常2~4 d内因脱水而死亡, 死亡率几乎100%。成年猪则可见呕吐和厌食而不腹泻,死亡率很 低。架子猪、育肥猪和成年猪,精神萎顿、厌食和持续3 7 d腹 泻,恢复后容易造成生长发育不良。 剖检表现:尸体消瘦、皮肤暗灰色;皮下干燥,脂肪蜂窝组 织表现不佳;肠管膨胀扩张,充满黄色液体,肠壁变薄,肠系膜 充血,肠系膜淋巴结肿胀。 2.3猪轮状病毒(RV)感染 感染7日龄以内仔猪的死亡率极高,随着日龄增大,患猪死亡 率降低。病猪精神沉郁,食欲减退,不愿走动,腹泻,粪便呈黄 色、灰色或黑色,呈水样或糊状较腥臭。新生仔猪腹泻严重,一 般腹泻后3 7 dg因严重脱水而死亡,如环境温度下降而造成混 合感染时,就会使症状加重,死亡率增加可达100%。1 4周龄 猪发病率高,持续1—3 d,死亡率低,约7%一15%;成年猪、经 产母猪与种公猪一般呈隐性感染,极少发病,感染一般不呈现症 状。 剖检病变局限于胃肠道:胃内充满水样液体内容物,外观呈 特征性地弛缓;小肠壁变薄、半透明,绒毛萎缩、变形、脱落。 3鉴别诊断 很多传染性疾病的发生都伴有腹泻症状。但是,他们都不是 以腹泻症状为主,且都伴随着其他症状,必须结合其他症状来区 分这些疾病与病毒性腹泻。如猪瘟表现为腹泻与便秘交替出现, 同时,伴随高热和全身出血;伪狂犬病发生后也出现呕吐和腹泻 的症状,但仔猪都伴随有神经症状,母猪可出现流产、产死胎和 木乃伊胎儿等。 4治疗 4.1保守疗法 抗菌消炎,强心补液。对大群猪可用口服补液盐预防因严重 腹泻而造成的脱水(配方:每1 000 ml水加食盐3.5 g、小苏打粉 2.5 g、氯化钾1.5 g、葡萄糖20 g),自由饮水,并加入预防剂 量的抗生素。症状严重猪只需注射用药或灌服,具体方法:2.5% 恩诺沙星4—8 ml,灌服1O ml藿香正气水;不能饮水的病仔猪, 应静脉注射或腹腔内注射5%一lO%葡萄糖盐水和5%碳酸氢钠溶液, 以防酸中毒和脱水;同时应限制饲喂,以减少胃肠功能负担,加 快恢复,饲料中也可加入少量涩肠收敛剂如腐植酸钠等。 4.2血清疗法 可选择典型发病、康复后13~18 d而无其他继发病的猪,无 菌操作采取无菌血清,供治疗或预防用。治疗剂量为:哺乳仔猪 每头皮下注射3—5 ml,后备母猪20 mY头,哺乳母猪30 mY头。 4.3中药治疗 肉桂15 g、板蓝根20 g、槐花10 g、大青叶30g、赤石脂 20g、莨菪子5g,粉碎并混匀,1剂,d,小猪酌减,连服3 d,效果 显著。 5预防 5.1引种检疫 禁止从疫区引进种猪;对外地引进的种猪必须隔离观察1个月 以上,在发现病猪时,应隔离治疗。春季特别要注意提高饲料中 

猪疫苗英文缩写

猪疫苗英文缩写

【篇一:猪疫苗英文缩写】

猪常用疫苗主要有猪瘟,猪丹毒,副伤寒,伪狂犬,细小病毒,大肠杆菌等。这些疫苗简单可以分为灭活疫苗(又称死疫苗)和弱毒疫苗(又称活疫苗),另外还有就是单价疫苗、多价疫苗、混合疫苗、同源疫苗、亚单位疫苗、基因工程疫苗,这些是从疫苗的制备情况和疫苗的发展阶段来划分的。

【篇二:猪疫苗英文缩写】

常见猪病的缩写

ar: 传染性萎缩性鼻炎(萎鼻),swine infectious atrophic

rhinitis

app: 传染性胸膜性肺炎(传胸)porcine in fectious p

leuropneumonia

胸膜肺炎放线杆菌(a ctinobacillus p leuropneum on iae,app

ct: 先天性震颤 congenital tremors

cdcd: 初乳缺乏症 colostrum deficency

cp: 猪衣原体 chlamydia pneumoniae

es: 内毒素引起休克 endotoxic shock

ery: 猪丹毒 erysipelas (swine)

ed: 大肠杆菌病,仔猪水肿病( edema disease, ed)又称猪溶血性大肠杆菌病

ec: 肠道病毒

fmd: 口蹄疫(五号病)foot and mouth disease

hc: 猪瘟 the hog cholera或the classical swine fever

hps: 副嗜血杆菌haemophilus parasuis

je: 流行性乙型脑炎流行性乙型脑炎 (日本脑炎) (japanese

encephalitis (je)

lister: 李氏杆菌病 listeriosis

lepto: 钩端螺旋体病 leptospirosis

mh(mp): 支原体肺炎(气喘)mycoplasmal pneumonia ofpig

od: 水肿

pwt: 仔猪腹泻 仔猪断奶腹泻(post-weaning escherichia coli

江苏省农科院动物疫病诊断检测中心收费标准收费标准20141220

项目

分类 病原 方法 送检样品 时间(天) 收费(元)

病毒(RNA) 猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV) RT-PCR 肺、脾、淋巴、血 2-3 40

猪瘟病毒(CSFV) RT-PCR或

ELISA 肺、脾、肾、淋巴、血 2-3 40

猪流行性腹泻(PEDV) RT-PCR 腹泻粪样及病死猪小肠 2-3 40

猪传染性胃肠炎病毒(TGEV) RT-PCR 腹泻粪样及病死猪小肠 2-3 40

猪轮状病毒(RV) RT-PCR 腹泻粪样及病死猪小肠 2-3 40

口蹄疫病毒(FMDV)A/O/AsiaI RT-PCR 水泡皮或水泡液 2-3 40

猪乙型脑炎病毒(JEV) RT-PCR 流产胎儿、肺、淋巴、 2-3 40

病毒(DNA) 猪圆环病毒(PCV1和PCV2) PCR 肺、淋巴、血 2-3 30

猪伪狂犬野毒PRV gE/疫苗PRV gB PCR 肺、脑、肝、肾、血 2-3 40

猪细小病毒(PPV) PCR 流产胎儿组织,血 2-3 30

博卡病毒(Bov) PCR 粪样、肺、 2-3 30

细菌 猪链球菌(1、2、7、9型、C群) PCR 新鲜肺、脑、肝、肾、血、关节液 2-3 30

细菌分离 100

猪传染性胸膜肺炎杆菌(APP)及血清分型 PCR 新鲜肺、呼吸道分泌物、胸腔积液 2-3 30

细菌分离 100 猪副猪嗜血杆菌(HPS) PCR 新鲜肺、呼吸道分泌物、胸腔积液 2-3 30

细菌分离 100

产肠毒素性大肠杆菌(ETEC) PCR 新鲜肠道内容物及腹泻粪样 2-3 30

细菌分离 100

注:1、一般细菌分离100.0元/份;细菌药敏试验200.0元/份;病料为新鲜或者冷藏,不能冷冻。2、样品测序200.0元/份。具体的检测时间根据样品的数量和检测项目而定。3定量检测抗原含量,每份200.0元/份。

抗体检测项目 方法 样品 时间(天) 收费(元)

猪繁殖与呼吸综合症病毒(PRRSV)抗体N ELISA(进口IDEXX / 韩国JBT) 血清 1-2 45

猪轮状病毒

猪轮状病毒

猪轮状病毒病( Swine rotavirus disease)是轮状病毒引起的仔猪的急性胃肠炎,特征为急性腹泻。本病最早(1943年)在患腹泻的儿童中发现,1974年由FLEWE等首次提出轮状病毒这个名称,并为1976年的国际病毒命名委员会所采用。该病病毒主要存在于肠道,可随粪便排出外界,经消化道途径传染易感的人、畜和禽。轮状病毒感染通常以突然发生和迅速传播的方式在动物群中广泛流行,常呈地方流行性。具有明显的季节性,多发生于晚冬 至早春的寒冷季节。少数地区季节性不明显而呈终年流行。

流行病学

1.易感性 7-41日龄仔猪易感,并出现严重临诊症状。1-3周龄仔猪的感染率高于4-6周龄仔猪。初产母猪的仔猪比经产母猪的仔猪更易感。7日龄以前仔猪可能受母源抗体保护而不常感染。成年猪多呈隐性感染。此外本病的易感宿主还有犊牛、羔羊、狗、幼兔、幼鹿、猴、小鼠、鸡、火鸡、鸭、珍珠鸡和鸽以及儿童。其中以犊牛、仔猪及儿童的轮状病毒病最为常见。轮状病毒有一定的交互感染作用,人的轮状病毒能感染猴、仔猪和羔羊,并引起发病;犊牛和鹿的轮状病毒能感染仔猪。由此可见,轮状病毒可以从人或一种动物传给另一种动物,只要病毒在人或一种动物中持续存在,就有可能造成本病在自然界巾长期传播。

2.传染源 患病的人、畜及隐性感染的带毒猪,都是重要的传染源。病毒经粪-口途径在猪群中传播。由于病毒稳定性强,不清洁的环境因素对病毒在畜舍中的存留起重要作用。

3.传播途径 病毒存在于肠道,随粪便排出外界,经消化道途径传染易感的人、畜和禽。痊愈动物从粪便中排毒的持续时间尚不清楚。污染的环境对猪群中轮状病毒的持续存在有着重要的作用。猪轮状病毒在极端环境条件下是很稳定的,它对常用消毒药的抵抗力很强,在干粪、尘埃、分娩和断乳猪舍的污水中都能检出,在空关3个月的猪舍中仍能存活。 4.流行特点 轮状病毒感染通常以突然发生和迅速传播的方式在动物群中广泛流行,常呈地方流行性。动物和人的轮状病毒感染在流行病学上的特征基本相似。具有明显的季节性,多发生于晚冬至早春的寒冷季节。少数地区季节性不明显而呈终年流行。只要本病在一种动物群中长期传播,各种年龄的动物对轮状病毒均有易感性,感染率可高达90%-100%,但病死率低。以新生和幼龄动物发病为主,成年动物常呈隐性经过。卫生条件不良,致病性大肠杆菌和冠状病毒、慢病毒等混合感染,可使病情加剧,病死率增高。

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