发酵法生产L-丙氨酸提取工艺的研究

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赖氨酸的生产工艺

1.赖氨酸概述 2
赖氨酸广泛存在于动物蛋白质中,赖氨酸的生产最早是用酸水解酪素,经分离谷氨酸后制得,其后又从血粉中提取猪血粉中赖氨酸含量约9%～10% ,但这种方法,工艺比较复杂,产量受到限制,
1.赖氨酸概述 3
1960年以来,日本用营养缺陷型的谷氨酸菌株直接发酵生产赖氨酸,其产量不断扩大,
2.赖氨酸的性质 1
赖氨酸盐酸盐的化学式为C6H14O2N2·HCl, 含氮量为15.34%,相对分子质量182.65,
由于游离的赖氨酸易吸收空气中的二氧化碳,故制取结晶比较困难，一般商品都是赖氨酸盐酸盐的形式，
2. 赖氨酸的性质 2
赖氨酸的化学名为2,6-二氨基己酸,具有不对称的α-碳原子,故有两种光学活性的异构体 L/D型 ,
氨水+氯化铵洗脱
通过调节氨水与氯化铵的物质的量之比为 1:1,可直接使赖氨酸成单盐酸盐形式存在, 不需在中和,
洗脱剂 3
3 氢氧化钠洗脱特点是没有氨味,容易操作,但在洗脱液中Na+含量较高,影响赖氨酸的提纯精制,
洗脱剂 4
洗脱剂的浓度对洗脱效果有影响,一般来讲,为了分离只能用适当浓度的洗脱剂，如果洗脱剂浓度太高,达不到洗脱目的，如果洗脱剂浓度太低,洗脱时间长,收集不集中,赖氨酸浓度低，
赖氨酸发酵工艺及控制要点 8
生物素对赖氨酸生物合成的影响在以葡萄糖,丙酮酸为唯一碳源的情况下,添加过量生物素 200～500μg/L ,赖氨酸积累量显著增加,因为生物素量增加,促进了草酰乙酸的合成,增加了天冬氨酸供给，
生物素对赖氨酸生物合成的影响续
另一方面,过量生物素使细胞内合成的谷氨酸对谷氨酸脱氢酶起反馈抑制作用,抑制谷氨酸的大量合成,使代谢流转向合成天冬氨酸的方向进行,

赖氨酸的生产工艺【共66张PPT】

赖氨酸提取精制工艺流程
6.4 离子交换法提取赖氨酸
离子交换法提取赖氨酸可用三柱串联的方式，以提高收率。
上柱吸附：上柱方式、交换量、上柱流速
洗脱剂（氨水洗脱、氨水+氯化铵洗脱、氢氧化钠洗脱）
上柱吸附－上柱方式
上柱方式上柱方式有正上柱和反上柱两种。如果发酵液含菌体等固形物较多，流速较快时，容易造成树脂层堵塞，这是采用反上柱较好。
（2）菌体
菌体一般含量在15~20g（干重）/L。
（3）培养基残留物
培养基残留物如残糖6~20g/L(随原料不同而异)，无机离
子（如NH4+、Ca2+、Mg2+、K+和一些阴离子，其中NH4+浓度较高）。
（4）色素
色素发酵液中的这些杂质对赖氨酸的提取和精
制影响很大，特别是菌体和钙离子等，应尽量除去。
2. 赖氨酸的性质 (3)
赖氨酸盐酸盐熔点为263℃，单斜晶系，比旋光度+21°。
在水中的溶解度为 0℃ 时 53.6g/100mL， 25℃ 时为 89g/100mL ， 50℃ 时为 111.5 g/100 mL，70℃时为142.8 g/100 mL。
在酒精中的溶解度为0.1g/100mL。
培养条件：培养温度 30-32℃ 。通风比 1:0.2m3/(m3 • min)，搅拌转速200r/min。培养时间 8～11h。
根据发酵规模，必要时可采用三级培养。
4.2 赖氨酸发酵工艺及控制要点
（1）发酵工艺流程
赖氨酸发酵工艺及控制要点(2)
（2）发酵培养基组成不同菌株，发酵培养基的组成不完全
第十讲赖氨酸的生产工艺Leabharlann 优选第十讲赖氨酸的生产工艺

赖氨酸的生产工艺

赖氨酸发酵工艺及控制要点(2)
（2）发酵培养基构成不同菌株，发酵培养基旳构成不完全
相同，赖氨酸发酵培养基旳构成见有关文件。
赖氨酸发酵工艺及控制要点(3)
（3）发酵工艺条件及影响原因温度、 pH值控制、种龄和接种量、供氧对赖氨酸发酵旳影响、生物素对赖氨酸生物合成旳影响、硫酸铵对赖氨酸发酵旳影响。
直接发酵法工艺流程
赖氨酸旳两步发酵法
先使用大肠杆菌旳赖氨酸缺陷型菌株，因缺乏二氨基庚二酸脱羧酶，不能生成赖氨酸，于是积累大量旳二氨基庚二酸（DAP）。
然后再选用具有二氨基庚二酸脱羧酶旳产气杆菌或大肠杆菌，进行酶法脱羧而生成 L-赖氨酸。
4.1 L-赖氨酸生产菌种及扩大培养
直接发酵法生产赖氨酸工艺生产菌种：中科院北京微生物研究所选育旳北京棒杆菌
1977年，日本东丽企业以合成旳己内酰胺为原料，用酶法生产L-赖氨酸。
1.赖氨酸概述 (4)
目前，国际上赖氨酸产生菌种旳生产水平一般为12～14 g/L，对糖旳转化率为45%。采用淀粉水解糖（或纯糖）发酵，其产酸率、提取率较高；而采用糖蜜发酵，其产酸率、提取率要低某些。
1.赖氨酸概述 (5)
赖氨酸发酵工艺及控制要点(9)
硫酸铵对赖氨酸发酵旳影响硫酸铵对赖氨酸发酵影响很大。当硫酸铵含量大时菌体生长迅速，使赖氨酸产量低。但在无其他铵离子情况下，用量为4.0%～4.5%时赖氨酸产量最高。
6. 赖氨酸旳提取和精制
赖氨酸旳提炼过程涉及：发酵液预处理提取精制
6.1 赖氨酸发酵液旳主要性质
采用淀粉水解糖(或纯糖)发酵，其产酸率为9%～11%，提取率为83%～87%，原ห้องสมุดไป่ตู้消耗3.2～3.5t(淀粉)/t(赖氨酸)；

215502053_酵母生物活性物质及其化妆品功效研究进展

生物技术进展 2023 年第 13 卷第 3 期 345 ~ 352Current Biotechnology ISSN 2095‑2341进展评述Reviews酵母生物活性物质及其化妆品功效研究进展鲍佳生，潘丙珍，乔栖梧，刘慧智，潘素华广州海关技术中心，广州 510623摘要：随着《化妆品监督管理条例》及其配套文件的实施，对化妆品原料安全性和功效性都提出了更具体的要求。

酵母能够合成多种生物活性物质且安全性高，利用酵母来获取化妆品功效原料已成为化妆品行业的创新突破口。

概述了酵母作为细胞工厂生产活性糖类、多肽类、萜类、维生素、多酚类等天然产物方面的研究进展，梳理总结了酵母提取物以及酵母相关生物活性物质的美白、保湿、舒缓、防晒、抗皱等多种化妆品功效，并展望了酵母在化妆品原料领域的开发和应用前景。

关键词：酵母；生物活性物质；化妆品功效DOI ：10.19586/j.20952341.2023.0013中图分类号：Q939.97, TS974 文献标志码：AAdvances in Yeast Bioactive Substances and Their Cosmetic EfficacyBAO Jiasheng ， PAN Bingzhen ， QIAO Qiwu ， LIU Huizhi ， PAN SuhuaGuangzhou Customs Technology Center ， Guangzhou 510623， ChinaAbstract ：With the implementation of Cosmetic Supervision and Adminstration Regulation and its supporting documents ， there are more specific requirements for the safety and efficacy of cosmetics. Because yeast can synthesize various bioactive substances with high safety ， using yeast to obtain effective raw materials for cosmetics has become an innovation breakthrough in the indus⁃try. In this review ， the research progress of yeast as a cell factory to produce bioactive sugars ， peptides ， vitamins ， terpenoidsand other natural products was summarized. The effects of yeast extract and bioactive substances in yeast on whitening ， moisturiz⁃ing ， sunscreen ， anti -aging and other cosmetics were introduced. The development and application of yeast as raw material of cos⁃metics were also prospected.Key words ：yeast ； bioactive substances ； cosmetic efficacy酵母中富含活性糖类、多肽、核苷酸、氨基酸、维生素等天然成分，广泛应用于生物医药、保健食品及化妆品等领域。

L-苯丙氨酸

种子培养
斜面培养：LB培养基斜面培养：LB培养基种子培养基：蛋白胨1 氯化钠1 酵母粉0 种子培养基：蛋白胨1%;氯化钠1%;酵母粉0.5%;葡萄糖2 萄糖2%;调pH=7.5;抗菌素Km(硫酸卡那霉素) pH=7 抗菌素Km(硫酸卡那霉素) 发酵培养基：Na2HPO4 12H 20g/L; 发酵培养基：Na2HPO4·12H2O20g/L;柠檬酸钠 6g/L; g/L; 谷氨酸钠 0.4g/L; 酪氨酸 0.6g/L; 葡萄糖 g/L; g/L; 20g/L;Km40mg/L 20g/L;Km40mg/L 补料培养基：CaCL2 补料培养基： CaCL2·2H2O0.6g/L;酪氨酸 500mg/L;葡 g/L;酪氨酸500mg/L; 萄糖500g/L;MgSO4 萄糖500g/L;MgSO4·7H2O1g/L;VB1500mg/L;氨水28% g/L;VB1500mg/L;氨水28% 斜面培养→一级种子培养→二级种子培养→ 斜面培养→一级种子培养→二级种子培养→三级种子培养→ 种子培养→发酵罐
L-苯丙氨酸在国内的生产状况
目前国内有10余家制药厂和试剂厂生产L 目前国内有10余家制药厂和试剂厂生产L- 苯丙氨酸（见下表），但生产规模普遍偏小，产量极低，见下表）但生产规模普遍偏小，产量极低，产品一般用于本厂生产药品和生化试剂，产品一般用于本厂生产药品和生化试剂，不能满足国内市场日益增长的需求。足国内市场日益增长的需求。
提高Ｌ－苯丙氨酸产量的策略提高Ｌ－苯丙氨酸产量的策略Ｌ－
选育L 酪氨酸和L 选育L-酪氨酸和L-色氨酸营养缺陷型突变株选育L 选育L- 苯丙氨酸、 L-酪氨酸 ﹑ L-色氨酸抗性突变株敲除合成丙酮酸激酶基因来增加PEP的供应敲除合成丙酮酸激酶基因来增加PEP的供应扩增大肠杆菌中合成转酮醇酶（扩增大肠杆菌中合成转酮醇酶（磷酸戊糖途径中合成E 的关键酶）的基因来增加E 合成E4P的关键酶）的基因来增加E4P的供应降低副产物乙酸的生成筛选抗噬菌体（BP筛选抗噬菌体（BP-1）的突变菌株

大肠杆菌发酵生产L-色氨酸工艺简析

大肠杆菌发酵生产L-色氨酸工艺简析廖韦红;褚宏;纪衍英【摘要】本文对L-色氨酸进行了简要概述,指出利用大肠杆菌工程菌直接发酵生产L-色氨酸为国内主流方法,并对其成熟的发酵工艺控制、提取工艺进行了简析,并指出部分可进一步优化的工艺点。

其中发酵工艺简析包括菌种培养基增加一定溶度抗生素和控制发酵温度来控制质粒稳定性;分析物料作用并提出优化后的种子、发酵培养基组成;菌种无需控制溶氧,而发酵则用溶氧反馈补料;控制乙酸和氨氮浓度、顺序升温缩短周期降低抑制性副产物作用。

分离提取工艺简析包括硫酸酸化p H2-3,陶瓷膜过滤并控制滤液平均单位为14000-18000u/ml,阳离子树脂纯化,醋酸调pH5.89,0.5%活性炭60℃脱色20-30min,蒸发浓缩结晶,纯化水洗涤整条工艺路线。

【期刊名称】《生物技术世界》【年(卷),期】2016(000)004【总页数】2页(P11-12)【关键词】L-色氨酸;大肠杆菌;发酵生产;提取;工艺【作者】廖韦红;褚宏;纪衍英【作者单位】[1]山东鲁抗生物制造有限公司，山东邹城273517;[2]山东鲁抗医药股份有限公司，山东济宁272000;[3]山东鲁抗立科有限公司，山东济宁272000【正文语种】中文【中图分类】TQ92L-色氨酸，1825年首次被发现，是第二必需氨基酸，广泛应用于各行业。

化学名为α-氨基-β-吲哚丙酸，白色或微黄色片状晶体或粉末，溶于水，在稀酸或稀碱中较稳定。

在有NaOH、CuSO4存在下加热会分解产生大量吲哚。

其生产方法最早是化学合成法和蛋白质水解法，在上世纪90年代就被酶促转化法所替代。

又因酶促反应法底物价格高，转化率低，很快被微生物发酵法替代，有添加前体发酵和直接发酵两种形式。

前体物的价格比较昂贵，不利于降低成本。

又随着重组DNA技术在L-色氨酸生产菌株的筛选中的可靠应用，使直接发酵法更具优势，成为目前的主流工业方法。

L-色氨酸生产菌株有谷氨酸棒杆菌，黄色短杆菌，枯草杆菌，重组大肠杆菌。

酶法制备D-氨基酸

酶法制备D-氨基酸进展姓名施绘程学号 3100104825 课程名称生物有机化学指导老师徐刚专业生物工程酶法制备D-氨基酸进展摘要：酶法制备D-氨基酸具有其他方法所不可比拟的优势。

目前应用最广泛的是N-乙酰-氨基酰化酶和D-海因酶手性拆分途径。

氨基酰化酶可以用于生产多种不同氨基酸，海因酶途径副产物可以自发消旋化。

对于这两种途径，目前的研究主要集中在通过改变反应条件提高酶的活性和选择性，以及通过固定化技术提高酶的生产率。

1.概述在自然界中已经发现了300种氨基酸中，虽然其中约有90%为L-型氨基酸，只有约10%为D-型氨基酸或其它氨基酸，而且D-型氨基酸不能构成重要的生物分子——蛋白质，但是近年来，随着科学研究的深入，人们发现许多植物、微生物和高等植物中都有D-氨基酸的存在，D-型氨基酸虽然不是构成蛋白质的基本结构单元，但D-氨基酸同样具有非常重要的作用，D-型氨基酸所具有的特殊性质和功效是L-氨基酸不可代替的[1，2]。

D-型氨基酸在食品行业中主要用作甜味剂。

D-苯丙氨酸、D-天冬氨酸和D-丙氨酸都是合成甜味剂的重要原料，其中D-丙氨酸本身就是一种强甜味剂。

由于D-氨基酸及二肽在人体内几乎不发生代谢作用，而且没有毒性，可以作为非营养性甜味剂，适于肥胖症、高血压以及糖尿病患者食用[3]。

在农业上，D-缬氨酸可用于合成新型高效农药拟除虫菊酯和氯氟戊菊酯，由D-缬氨酸与相应的醇经酯化而制得缬氨酸杀虫菊酯是一类广谱的很有发展前景的杀虫杀螨剂，能有效她防治棉花、果树、蔬菜等作物的包括鳞翅目和双翅目等在内的主要害虫。

D-色氨酸可以作为6-苯基腺嘌呤的合成前体，6-苯基腺嘌呤能够很好的刺激植物细胞和组织的生长，促进花芽的分化，提高作物的产量[2]。

多种D-氨基酸是合成成抗生素、抗糖尿病、抗癌、镇定、抗心血管疾病等多种药物的重要中间体。

图1列出了目前医药市场上部分含有D-型氨基酸的药物及其临床应用。

[1]另外，D-氨基酸还可以应用于化妆品添加剂、染发剂等日用化学品中。

氨基酸生产

25.2 氨基酸发酵的代谢控制与育种 25.2.2生产中代谢控制的措施
1、控制发酵的环境条件
氨基酸发酵受菌种的生理特性和环境条件的影响，对专性需氧菌来说环境条件的影响更大。谷氨酸产生菌因环境条件的影响会引起发酵的转换，生成各种不同的产物。
25.2 氨基酸发酵的代谢控制
溶解氧：乳酸或琥珀酸←→谷氨酸←→α－酮戊二酸
25.1 概述
氨基酸的生产方法
1、发酵法（1）直接发酵
第一类用野生菌株直接由糖和铵盐发酵生产氨基酸，如谷氨酸、丙氨酸和缬氨酸。
第二类用营养缺陷型突变株直接由糖和铵盐发酵生产氨基酸，如谷氨酸棒状杆菌的高丝氨酸缺陷型生产赖氨酸；酪氨酸缺陷型生产苯丙氨酸；苯丙氨酸缺陷型生产亮氨酸；亮氨酸缺陷型生产缬氨酸。
25.1 概述
氨基酸的国内外生产概况
日本和德国为世界主要氨基酸生产国。日本的味之素、协和发酵及德国的德固沙是世界氨基酸生产的三巨头。它们能生产高品质的氨基酸，可直接用于输液制剂的生产。日本在美国、法国等建立了合资的氨基酸生产厂家，生产氨基酸和天冬甜精等衍生物。
25.1 概述
氨基酸的国内外生产概况
25.1 概述
氨基酸的生产方法
第三类用抗氨基酸结构类似物突变株，如利用乳糖发酵
短杆菌的S-(2-氨基乙基）-L-半胱氨酸（AEC,赖氨酸结构类食物）抗性菌株生产赖氨酸。利用黄色短杆菌的5-甲基色氨酸（5-MT，酪氨酸结构类似物）抗性菌株生产酪氨酸。
第四类抗氨基酸结构类似物突变株的营养缺陷型菌株，如利用乳糖发酵短杆菌的抗AEC腺嘌呤、鸟嘌呤缺陷型生产赖氨酸。
氨基酸的应用
1、食品工业：营养强化剂；鲜味剂；甜味剂。 2、饲料工业：营养强化剂。 3、医药工业：氨基酸输液；氨基酸衍生物；氨基酸盐。 4、化学工业：洗涤剂；护肤品；人造革。 5、农业：无公害农药。

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酵动力消耗低，产品收率高、成本低，Ｌ一丙氨
酸的生产成本约为１２万ｔ．，并且符合欧美国家绿色、健康的消费理念，具有广阔的市场前
景。我们对从发酵液中提取Ｌ一丙氨酸的工艺进行了初步的研究，得出了一条合理的工艺路线，
中图分类号：Ｔ２２３Ｓ０．文献标识码：Ａ
文章编号：１０２１（０１０００ — ６０６— ５３２１Ｊ３— １１０
ＳｔｄｎｒｃｖｒｆＬ—ａａｎｎｒｕｙｏｅｏｅｙｏｌｉｅｆＯｍｅｒｎａｉｏｈｆｍｅｔｔｏｎｂｒｔ
一
丙的浓度（Ｌ）ｇ・；Ｖ为所取清夜的体积（）Ｌ。平衡吸附率和吸附量的计算平衡吸附率Ｅ计算公式：
Ｅ：
Ｐ１
丙氨酸提供了可能。
× １０％０
１材料与方法
１１材料．
式中：Ｅ是平衡吸附率；Ｐ、Ｐ分别为吸附：前后水相中Ｌ一氨酸的质量浓度（Ｌ）丙ｇ・。吸附量Ｑ的计算公式：
得Ｌ一丙氨酸成品，总提取收率平均为９．％，产品质量符合日本味之素企业（Ｊ９）和中国药典１３ＡＩ７
（Ｐ００Ｃ２１）标准。
关键词：Ｌ一丙氨酸；厌氧发酵；提取；超滤；离子交换；工艺条件
作者简介：蒋光玉，男（９２一）工程师，学士；主要研究方向：生物工程。１８
Ｃ口Ｏｄｖ：ｈＦｉｓｉＡ｜整：｝ｄｉ：象Ｏｄｅ：ｌ
目前，Ｌ一丙氨酸的工业化生产方法就是酶法转化，即通过富有Ｌ一天冬氨酸一１脱羧酶活３一力的微生物（ｐｅｄｍｎｓｄｃｎａ如ｓｕｏｏａａｕｈｅ等）细胞催化Ｌ一天冬氨酸而得到，其中日本多采用固定化细胞法，而我国均采用游离完整细胞法。酶法转化工艺的特点是酶活力高，设备投资小，提取工艺简单；但其主要原材料Ｌ一天冬氨酸价格较贵，造成其生产成本较高，成本一般
发酵法生产Ｌ一丙氨酸提取工艺的研究
蒋光玉
（安徽华恒生物工程有限公司，合肥
摘
２１３）３１１
要：运用超滤、７２型阳离子树脂以及活性炭脱色等工艺从Ｌ一丙氨酸的发酵液中提取Ｌ一丙氨酸，３
并对工艺条件进行了研究。研究表明，超滤能有效地去除Ｌ一丙氨酸发酵液中的菌体，Ｌ～丙氨酸的平均收率为９．％。通过树脂的吸附实验，考察了ｐ和流速对树脂吸附量的影响，确定了７２型强酸性阳离子交换９５Ｈ３树脂最大吸附量为８．３ｋ。，提取最佳工艺条件为：ｐ５０，上柱速度５ｍ・ｉ～・ｇ２２ｇ・ｇ。Ｈ．０Ｌｍｎｋ～，洗脱液为４的氨水。洗脱液最适的脱色条件为：温度为６ ℃ ，活性炭用量为１５Ｌ～。洗脱液经脱色、浓缩结晶后％０．ｇ・
近年来有文献报道，利用基因工程手段构建的ｅｃｅｉｉｃｌ，以葡萄糖为原料厌氧发酵法ｓｈｒｈａｏｃｉ生产Ｌ一丙氨酸，１０／２ｇＬ的葡萄糖发酵液最终生
成１７ｍｏ的Ｌ一丙氨酸，相对于葡萄糖的质量２９ｍｌ收率为９％，光学纯度大于９．％。发酵法主要５９５
ＪＡＮＧａｇｙＩＧｕｎ－ｕ
（ｎｕＨａｅｇＢｏｎｅｒｇＣ．ｔ，Ｈｆ３１１Ａｈｉｕｈｎｉｇｅｉｏ，Ｌｄｅｎｅｅ２１３）ｉ
ＡｂｔａｔＬ—ａａｉｅｗａｅｏｅｅｒｍｔｅｆｒｎａｉｎｂｏｈｕｉｇｕｔａｉｒｔｎ，７２ｃｔｎｒｓｎ，ａｔａｅａ。ｓｒｃ：ｌｎｎｓｒｃｖｒｄｆｏｈｅｍｅｔｔｒｔｓｎｌｆａｉｏｒｈｏ３ａｉｅｉｏｃｉｔｄｃｒｖ
供氨基供体，在临床上常添加到输液中；在食品
工业中，Ｌ一丙氨酸可作为甜味剂和鲜味剂正越
收稿日期：２１叭一７０１一Ｏ基金来源：科技型中小企业技术创新基金（ｏ７２２３０５１。Ｎ．０Ｃ６１４０２）
ｒｓｎｔｅｍａｍｕａｏｐｔｏａａｉｙｏ２．３ｇ・ｋｇ～．ｔｅｏｔｍａｒｃｓｏｄｉｉｎｓｏｅｏｅ — ａａｎｒｓｅｉｈｘｉｍｄｓｒｉｎｃｐｃｔｆ８２ｈｐｉｌｐｏｅｓｃｎｔｏｆｒｃｖｒＬｙｌｎｉｅｗｅｅａｆｌｏｎｏｌｗｉｇ：ｆｍｅａｉｎｂｏｈｏｅｒｎｔｔｏｒｔｆｐＨ５．０，ｆｏｒｔｆ５０ｍＬ・ｍｉｌｗａｅｏｎ～－一，４％ａｍｍｏａａｈｅｅｕａｔＴｈｐｔａｎｉｓｔｌｎ．ｅｏｉｌｍ
Ｋｅｒｓｙｗｏｄ：Ｌ —ａａｉｅａａｒｂｃｆｒｎａｉｎ；ｒｃｖｒ；ｕｒｆｒｔｎ；ｉｎ—ｅｃａｇ；ｐｏｅｓｃｎｉｏｓｌｎｎ；ｎｅｏｉｅｍｅｔｔｏｅｏｅｙｈａｉａｉｈｏｏｘｈｎｅｒｃｓｏｄｔｎｉ
Ｔｅｅｆｅｔｗｓｔｅｅｏｏｅｈｆｕｎａｈｎｄｃｌｒｄ．ｃｎｅｔａｅｎｒｓａｌｅｌｏｃｎｒｔｄａｄｃｙｔｌｚｄ．ＴｅｔｔｌｒｃｖｒａｉＳ９．％．Ｐｏｕｔｑａｉｎｉｈｏａｅｏｅｙｒｔｉ１３ｏｒｄｃｕｌｙｉｔ
。
ｄｅｏｏｉａｉｎｃｎｄｔｏｆｔｆｕｎｒｓｆｌｏｎｃｌｒｚｔｏｏｉｉｎｓｏｈｅｅｌｅｔｗｅｅａｏｌｗｉｇ：ｔｍｐｅａｕｅｉ０￣ｅｒｔｒｓ６（２
ａｔｖｔｄｃｒｏｏａｅ１５ｇ・Ｌ～．ｃｉａｅａｂｎｄｓｇ．
ｌｅｗｔＪｐｎｊｏｏｏｐｎ（Ｊ９）ａｄｔｅＣｉｓｈｒａｏｏｉ（Ｐ００ｓｎａｓｉｉａａｇａｉｍｔＣｍａｙＡＩ７ｎｈｎｅＰａｃｐｅｎｈｎｏｈｅｍａＣ２１）ｔｄｒ．ａｄ
检测：茚三酮法］Ｏ一ｏ一的定性检测： “。Ｐ：、ｓ
Ｂ（Ｈ）法（去离子水配成５的浓度）ａＯ用％。产
品的检验：按中国药典（００版）标准进行。２１ ¨ 收率的计算：
枷ｘＹｌ
原料葡萄糖廉价易得，培养基成分简单，厌氧发
ｏｄｏｐｉｎｃｐｃｔｆｒｓｎｂａｓｏｔｔｎｙａｃａｓｒｔｎ，ｔｅｒｓｈｈｗｅｈｔ７２ｉｎ—ｅｃａｇｎａｓｒｔａａｉｏｅｉｙｍｅｎｆｓａｉａｄｄｎｍｉｄｏｐｉｏｙｃｏｈｅｕｓｓｏｄｔａ３ｏｘｈｎｅ
１３分析方法．
发酵液中Ｌ一丙氨酸含量的测定：ＨＬＰＣ法。发酵液残糖的测定：斐林法］ｍ。溶液透光率的测定：分光光度法（纯水作参比，１ｍ光０ｍ
程，波长４０ｍ）３ｎ。溶液吸光度（Ｄ）的测定：Ｏ分光光度法（水作参比，１ｍ光程，波长纯０ｍ５０ｍ）Ｈ的测定：ｐ５ｎ。ｐＨ计。Ｌ一丙氨酸的定性
为２万ｔ右。左
精密科学仪器有限公司。ＳＺ—Ｄ（１）循环水Ｈ１Ｉ真空泵，上海申光仪器仪表有限公司。ＲＥ一５Ｃ２Ｓ旋转蒸发器，上海振捷实验设备有限公司。ｐＨＳ
一
２显ｐ５数Ｈ计，上海精密科学仪器有限公司。
Ｌ一氨酸是一种非必需氨基酸，但却是人丙体血液中含量最高的氨基酸 … 。它可为转氨酶提
来越受到人们的欢迎和重视；在医药行业，Ｌ一
丙氨酸是生产维生素Ｂ及Ｌ一氨基丙醇的主要原料；另外，在高分子材料方面，近年来发现聚乳酸中添加Ｌ一氨酸可有效提高聚乳酸的．丙生物工程有限公司中
试车间，菌株ｅｃｅｉｉｃｌＸ２１厌氧发酵。ｓｈｒｈａｏＺ３ｃｉ７２型强酸性阳离子交换树脂，天津南开和成科３