脂肪间充质干细胞调节 CD4 T
间充质干细胞治疗1型糖尿病及其并发症的研究进展

间充质干细胞治疗1型糖尿病及其并发症的研究进展许跃;顾志峰【摘要】1型糖尿病是一种T细胞介导的组织特异性自身免疫性疾病,以抗胰岛细胞抗体出现、严重的胰岛炎症和自身免疫性胰岛β细胞破坏为特征.间充质干细胞(mesenchylnal stem cells,MSCs)是一类具有自我更新,多向分化潜能,免疫调节和低免疫原性的细胞.近年来越来越多的研究表明,间充质干细胞移植对1型糖尿病及其慢性并发症治疗有效.本文就间充质干细胞治疗1型糖尿病及其慢性并发症研究进展做一综述.【期刊名称】《交通医学》【年(卷),期】2011(025)003【总页数】4页(P220-223)【关键词】间充质干细胞;1型糖尿病;糖尿病性心脏病;糖尿病肾病;糖尿病性多神经病变;糖尿病性视网膜病变【作者】许跃;顾志峰【作者单位】南通大学附属医院,江苏,226001;南通大学附属医院,江苏,226001【正文语种】中文【中图分类】R587.11型糖尿病是一种T细胞介导的器官特异性自身免疫性疾病[1-2]。
在遗传、环境等诸多种因素作用下机体产生胰岛自身抗体,T淋巴细胞浸润,使胰岛β细胞破坏,最终引起胰岛素分泌绝对缺乏。
近年来1型糖尿病的发病率不断增加,由于其并发糖尿病性心脏病、肾病、多神经病变和视网膜病变等严重并发症,目前已成为危及人类健康的重要问题[1]。
1型糖尿病一旦发病需要终身依赖胰岛素,胰岛移植虽能达到不依赖胰岛素效果,但因排斥反应和供体来源不足限制其临床应用。
近年来干细胞理论和技术快速发展,给糖尿病患者治疗带来新的希望,干细胞移植有望替代胰岛移植治疗糖尿病。
间充质干细胞(MSCs)由于其多向分化潜能及免疫调节功能,提示其具有治疗1型糖尿病及其慢性并发症的能力。
本文就MSCs治疗1型糖尿病及慢性并发症做一综述。
1 间充质干细胞生物学特性及免疫特性MSCs是一种来源广泛的多能祖细胞,骨髓、脐带、脐带血等各种组织中均可获得,其形态与成纤维细胞相似,不表达造血细胞标志CD14,CD31、CD34和CD45,表达基质细胞特有标志CD73和CD105及Stro-1,CD71,CD106,CD120,CD124 等表面抗原,表达极低水平MHC-I类抗原,不表达MHC-Ⅱ类抗原及FasL。
骨组织工程常用间充质干细胞的研究进展

十几年的研究,骨组织工程在种子细胞、支架材料以及细 胞一支架材料复合体等方面的研究取得了很大进展,为临床 骨缺损修复重建打下了良好的基础。其中种子细胞的研究与 应用主要集中在以下几种间充质干细胞:骨髓问充质干细 胞、脐血『日J充质干细胞、脂肪干细胞、肌源性下细胞等。 MSC是一类具有多向分化潜能的干细胞。可来源于骨髓、 脂肪、胎盘、脐血、脐静脉内皮下层、外周血及肌肉等各种组 织中。在特定条件下可向骨、软骨、心肌、脂肪、血管内皮等间 叶组织细胞转化。来源小问的MSCs,虽在生物学特性方面均 表现干细胞特性,但相互之间仍有一定差异。目前对于MSCs 的生物学特性研究主要集中在以下几个方面: 1.1分离培养 1.1.1骨髓问允质T.细胞(BMSCs):具有来源广泛、相对容易 获取、扩增表型稳定,无医学伦理学争议及过人的骨异常增 殖趋势等优点,被公认为是骨组织上程最为常用的种子细 胞。目前分离BMSCs的常用方法有5种:即全骨髓法、密度梯 度离心法、贴肇筛选法、流式细胞仪法及免疫磁珠法。全骨髓 法即根据干细胞贴壁特性,定期换液弃去不贴壁细胞,从而 达到纯化细胞的目的:密度梯度离心法是根据BMSCs与其他 细胞的密度不同而采用percoll分离液将其分离出来;贴壁 筛选法则是根据BMSCs具有在塑料组织培养瓶中贴肇生长 的特性对其进行分离:流式细胞仪分选法则是根据BMSC体 积小、相对缺少颗粒的特性对它进行分选:而免疫磁珠法则 根据细胞表面带有或缺失的抗原成分进行正选或负选。用抗 体包被磁珠,获得相对纯化的细胞。其中由于经过流式或磁 珠分选后的干细胞会H{现增殖缓慢等一些问题,加之耗费较 大和技术的难度,两者应用并不广泛。目前最为常用分离 BMSCs的方法主要是全骨髓法和密度梯度离心法,由于单独
2在骨组织工程中的应用 鉴于上述l’HJ充质十细胞的牛物学特性及各自优势,它们 在骨组织工程研究中的心用越来越广泛,并在基础实验与临 床应用研究两个环节都取得了可喜的成果。目前,伴随基因 工程的发展,它们在骨组织工程研究中的作用得到了更大的 体现和发挥。 2.1基础研究:由于大块骨缺损修复面临的血管化难题日前 还没能得到很好解决,利用骨组织工程技术仍无法满足临床 上形式各异的骨缺损修复需要,因而大量的基础研究正在为 解决血管化难题,尽快实现由基础研究向临床过渡而努力。
骨髓间充质干细胞研究与应用概况

骨髓间充质干细胞研究与应用概况于雷;高俊玲【摘要】骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞,但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究,发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群,在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长;1987年,又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell,MSC)。
【期刊名称】《华北理工大学学报:医学版》【年(卷),期】2018(020)002【总页数】5页(P164-168)【关键词】骨髓间充质干细胞;肺纤维化;缺血性脑卒中【作者】于雷;高俊玲【作者单位】[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;[1]华北理工大学基础医学院,河北唐山063000;【正文语种】中文【中图分类】R329.2骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal cells,BMSCs)是当下热点研究对象之一。
1867年德国病理学家Cohnheim教授[1]在研究创口愈合过程中发现骨髓中存在一种非造血系统的多潜能细胞,但研究因为条件原因未能深入。
后来有研究者[2]在20世纪60年代开展一系列开创性研究,发现从骨髓中分离得到长梭状、成纤维细胞样的细胞群,在塑料培养皿中呈集落样贴壁生长;1987年,又发现这种骨髓单核细胞可在一定的条件下分化为成骨细胞、成软骨细胞、脂肪细胞和成肌细胞。
培养增殖二十代后仍保有其多向分化的潜能。
于是把这种多能细胞称为间充质干细胞(mesenchyma stem cell,MSC)。
脐带来源间充质干细胞的免疫抑制功能研究

前持评件耐觅 Drug Evaluation Research 第43卷第12期2020年12月• 2385 ・脐带来源间充质干细胞的免疫抑制功能研究杨 莹,李政楠,王秀娟,李 伟,牟春琳,金 星,徐永胜•天津长和生物技术有限公司,天津301925摘 要:目的观察人源脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对异体总淋巴细胞和不同淋巴细胞亚群增殖能力的影响,以及对 细胞因子分泌的影响。
方法分离并培养hUC-MSCs 及健康成人外周血淋巴细胞,以淋巴细胞为阴性对照,MTT 法检测共 培养(淋巴细胞:hUC-MSCs 为1:0.5、1 : 1、1 : 5、1 : 10) 3 d 后淋巴细胞的增殖情况;流式细胞仪检测共培养体系中 CD4 CD25 FOXP3\ CD3 CD16* C D56\ CD4 CD45RA CCR7*的细胞比例;ELISA 法检测白细胞介素(IL) -2、IL-4、IL-10、 Y-干扰素(INF-?)细胞因子分泌情况。
结果 与阴性对照组比较,hUC-MSCs 对淋巴细胞的增殖具有显著抑制作用(P< 0.05),抑制效果随数量增加而增强;hUC-MSCs 能够显著增加共培养体系中CD4CD25FOXP3*细胞比例(PV0.05),显著 降低CD4*C D45RA'CCR7‘细胞比例(PV0.05),对CD3 CD16 CD56*细胞比例无显著影响;hUC-MSCs 能够显著降低IL-2、 IL-4、INF-y 水平,显著增加IL-10的分泌水平(P<0.05)。
结论hUC-MSCs 具有免疫抑制功能。
收稿日期:2020-09-11基金项目:国家重点研发计划"干细胞及转化研究"重点专项(2019YFA0112100);天津市科技计划项目(17ZXXYSY00020)*通信作者:徐永胜 E-mail :***********************关键词:脐带间充质干细胞;淋巴细胞;免疫反应;细胞因子中图分类号:R329 文献标志码:A 文章编号:1674-6376 (2020) 12-2385-05DOI : 10.7501/j.issn.l674-6376.2020.12.005Research on immunosuppressive function of umbilical cord mesenchymal stem cellsYANG Ying, LI Zhengnan, WANG Xiujuan, LI Wei, MU Chunlin, JIN Xing, XU Yongsheng Ever Union Biotechnology Company Limited, Tianjin 301925, ChinaAbstract: Objective To observe the effects of human umbilical cord mesenchymal stem cells (hUC-MSCs) on the proliferation of allogeneic total lymphocytes and different lymphocyte subsets, as well as the secretion of cytokines. Methods hUC-MSCs and peripheral blood lymphocytes of healthy adults were isolated and cultured; MTT method was used to detect the proliferation of lymphocytes by after co-culture for 3 days; the proportion of CD4+CD25 FOXP3 ., CD3 CD16 CD56* and CD4 CD45RA CCR7 in the co-culture system was detected by flow cytometry; ELISA was used to detect the secretion of IL-2, IL-4, IL-10 and INF-y. Results hUC-MSCs could significant inhibit the proliferation of T lymphocytes, and the anti-proliferative effect was enhanced with the increase of the number of lymphocytes; the proportion of CD4 CD25 FOXP3 cells in co-culture system was increased by hUC- MSCs (P < 0.05); the proportion of CD4TD45RA +CCR7+ cells showed a downward tendency, and the difference was statistically significant (P < 0.05); however, there was no significant difference in CD3 CD16 CD56+ cells. hUC-MSCs could reduce the levels of IL-2, IL-4 and INF-y, but increase the secretion level of IL-10, and the difference was statistically significant (P < 0.05). Conclusion HUC-MSCs had immunosuppressive function.Key words: umbilical cord mesenchymal stem cells; lymphocytes; immune response; cytokines间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs) 来源于发育早期的中胚层和外胚层,属于多能干细 胞,因其具有多向分化潜能⑴、造血支持和促进干细 胞植入、免疫调控和自我复制等特点而日益受到人 们的关注。
干细胞移植治疗1型糖尿病_孙成君

and polyglandular autoimmune syndrome:a review[J].WorldJ Diabetes,2015,6:67-79.[14]Alonso N,Soldevila B,SanmartíA,et al.Regulatory T cells in diabetes and gastritis[J].Autoimmun Rev,2009,8:659-662.[15]Kahaly GJ.Polyglandular autoimmune syndromes[J].Eur J Endocrinol,2009,161:11-20.[16]Tuomi T,Björses P,Falorni A,et al.Antibodies to glutamic acid decarboxylase and insulin-dependent diabetes in patientswith autoimmune polyendocrine syndrome type I[J].J ClinEndocrinol Metab,1996,81:1488-1494.[17]Anaya JM.The diagnosis and clinical significance of polyauto⁃immunity[J].Autoimmun Rev,2014,13:423-426.[18]Cutolo M.Autoimmune polyendocrine syndromes[J].Autoim⁃mun Rev,2014,13:85-89.[19]Kadiyala R,Peter R,Okosieme OE.Thyroid dysfunction in patients with diabetes:clinical implications and screeningstrategies[J].Int J Clin Pract,2010,64:1130-1139.[20]Boelaert K,Newby PR,Simmonds MJ,et al.Prevalence and relative risk of other autoimmune diseases in subjects with au⁃toimmune thyroid disease[J].Am J Med,2010,123:183.e1-183.e9.[21]Lupi I,Raffaelli V,Di Cianni G,et al.Pituitary autoimmuni⁃ty in patients with diabetes mellitus and other endocrine disor⁃ders[J].J Endocrinol Invest,2013,36:127-131.[22]Dittmar M,Kahaly GJ.Polyglandular autoimmune syndromes:immunogenetics and long-term follow-up[J].J Clin Endocri⁃nol Metab,2003,88:2983-2992.[23]杨敏,辛颖,张丽华,等.1型糖尿病患儿胰岛自身抗体与甲状腺自身免疫的关系[J].实用儿科临床杂志,2012,27(20):1572-1575.(2015-04-23收稿)文章编号:1005-2224(2015)10-0744-04DOI:10.7504/ek2015100607干细胞移植治疗1型糖尿病孙成君,罗飞宏摘要:1型糖尿病(T1DM)发病的根本原因在于胰岛β细胞的破坏,抑制或消除患者的自身免疫、增加胰岛β细胞数量是治愈该病的根本方法。
人类脐带血间充质干细胞的培养及鉴定

复旦学报(医学版)Fudan Univ J Med Sci2007Nov ,34(6)人类脐带血间充质干细胞的培养及鉴定马晓生1 姜建元1△ 吕飞舟1 李小康2(1复旦大学附属华山医院骨科 上海 200040;2日本国立成育医疗中心研究所移植免疫研究室 日本 东京 157-8535)【摘要】 目的 对人类脐带血中的有核细胞进行分离培养及鉴定,观察能否得到间充质干细胞。
方法 抽取人类脐带静脉血,进行细胞分离和培养,并进行荧光激活细胞分析。
结果 脐带血中间充质干细胞与骨髓中的类似,其外表呈纤维样;流式细胞术鉴定结果表明这种细胞能表达CD29、CD44、CD90、CD95、CD105、CD166以及M HC Ⅰ(组织相容性抗原复合体Ⅰ),但不能表达CD14、CD34、CD40、CD45、CD80、CD86、CD117、CD152以及M HC Ⅱ(组织相容性抗原复合体Ⅱ);并且具有分化成骨细胞和脂肪细胞的潜能。
结论 可以从人类脐带血中成功分离培养得到间充质干细胞。
【关键词】 人脐带血; 间充质干细胞; 成骨细胞; 脂肪细胞【中图分类号】 R392.12 【文献标识码】 B 国家自然科学基金项目(333);上海市卫生局基金项目 △通讯作者 2x 83@Cultiva tion a nd identif ica tion of mesenchyma l stem cells f r omhuman umbilical cor d bloodMA Xiao 2Sheng 1,J IAN G Jia n 2Y uan 1△,L V Fei 2Zhou 1,L I X iao 2Kang 2(1D epa rtment of Or thopaedics ,H uashan H o s pita l ,Fudan Univ e rsit y ,S hanghai 200040,China ;2L abor atory of T ra nsplantation Immunity ,J a pa nese Chengyu Resea rch Institute ,Tokyo 157-8535,J a pa n )【Abstract 】 Purpose To cultivat e and identify mesenchymal st em cells (MSCs)fro m h uman umbilicalcord blood. Methods Hu man umbilical cord blood was draw n o ut ,t hen MSCs was sep arat ed and cultivated.They were identified by FA C 2Scan. R esul ts MSCs were fo und in human u mbilical cord bloo d wit h fibro bla st 2li ke ap pearin g.Flow Cyto metry result s showed t hat t hey exp ressed CD29,C D44,CD90,CD95,CD105,CD166and M HC class Ⅰ,but the exp ressio n of CD14,CD34,CD40,C D45,CD80,CD86,CD117,CD152and MH C class Ⅱwas negative.These cell s had t he p otential of differentiatio n i nto o steo blast s and fat cell s. C onclusion s MSCs can be separat ed and culti vated fro m human umbilical cord bloo d.【Key words 】 hu man umbilical co rd blood ; mesenchymal st em cell s ; o st eoblast s ; fat cell s 在骨髓中存在间充质干细胞和造血干细胞早已是被研究者广泛接受的事实。
骨髓间充质干细胞修复急性肺损伤气血屏障的研究进展_甘辉立
DOI:10.3969/j.issn.1007-5062.2016.04.019基金项目:国家自然科学基金(81070041);北京市卫生系统高层次卫生人才队伍建设专项经费(学科带头人)(项目编号:2013-2-02);北京市科技计划项目(项目编号:Z121107*********)作者单位:100029首都医科大学附属北京安贞医院-北京市心肺血管疾病研究所心脏外科中心通信作者:甘辉立,教授,医学博士,主任医师,博士研究生导师,研究方向:肺动脉栓塞,冠心病、瓣膜病,成人先心病。
E-mail:ganhuili@ hotmail.com ·综述·骨髓间充质干细胞修复急性肺损伤气血屏障的研究进展甘辉立孙建超[关键词]骨髓间充质干细胞;气血屏障;急性肺损伤[中图分类号]R56[文献标志码]A[文章编号]1007-5062(2016)04-326-04急性肺损伤(acute1ung injury,ALI)以及它的危重形式—急性呼吸窘迫综合征(acute respiratiory distress syn-drome,ARDS),是由感染、氧中毒及机械刺激等多种原因引起的肺部弥散性损害,以顽固性低氧血症、呼吸窘迫、肺顺应性下降和弥散性渗出为主要特征,典型病理改变是因气血屏障受损,导致广泛严重的肺泡损害和间质性肺水肿,肺泡腔内可见大量炎性细胞浸润,目前尚无特异有效的治疗方法,病死率一直居高不下。
目前,一些心肺研究中心在不同的模型中应用骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)防治ALI,取得了一定的效果[1],展现出进一步研究的前景。
MSCs移植治疗ALI已经成为研究热点,本文现就MSCs修复ALI气血屏障的研究进展进行综述。
1急性肺损伤发机病制研究进展ALI/ARDS的主要病理生理改变实质上是气血屏障的损伤,肺泡上皮细胞和肺微血管内皮细胞弥散性损伤是其主要特征[2]。
胡凯移植后免疫功能重建及调节修订
Recovery Following T-Cell Depleted Allogeneic Hematopoietic Stem Cell Transplant In Patients with Myeloid Malignancies. [Abstract]. In press 2010)
移植后T细胞重建的调节
• 富含CD4+细胞的供者淋巴细胞输注
• 肿瘤抗原特异性T细胞、造血组织MiHA特异供者T细胞
• 病毒与造血组织MiHA双特异性T细胞
间充质干细胞的免疫调节作用及应用
• 间充质细胞40年前被发现,具有多向间质组织分化能力是其 基本特征 • 间充质细胞广泛存在于多种组织中:骨髓、脐血、骨膜、脂 肪、胎儿组织、羊水等 • 具有免疫调节、抗炎及组织修复能力 • 已应用于造血干细胞移植后治疗及自身免疫病治疗等
移植后免疫功能重建及调节
——2012 EHA
北医三院血液科 胡凯
• 造血干细胞移植后T细胞免疫重建与调节 • 供者淋巴细胞输注的免疫学及临床应用
• 间充质干细胞的免疫调节作用及应用
造血干细胞移植后T细胞免疫 重建与调节
T细胞的发育是在胸腺内进行的一系列精细调控的过程
• T细胞前体细胞通过表达CCR9和PSGL-1与粘附分子相互作用,从 而进入胸腺
DLI的剂量与时机
• 移植后早期(大约3个月内)低剂量的DLI可以产生较强烈的 GVHD及GVL,需要免疫抑制剂预防 1)早期存在患者来源的APC高效递呈患者MiHAs,可诱导 产生供者型MiHAs特异性T淋巴细胞 2)早期存在预处理及感染损伤等炎症环境
人骨髓间充质干细胞的分离培养、多向分化与鉴定
DAIW e — a n d ,FANG o l ,LIXi e ,LI Ho g,DONG in Ta -i n — i l N n Ja A,CHEN h n -o g Z e gr n
( p r n r o a d c ,Z o g h nHop t l e a t n f S r e y, De a t t f O t p e i me o h s h n sa s i - p r a D me t u g r o
戴 达 涛 李熙 林 红 健 陈 嵘 文 方 林 雷 董 峥
( 复旦 大学 附属 中山医院骨科 一复旦大学上海 医学院外科学系 上海 203 ) 0 0 2
【 摘要】 目的 定 。方法
探索一个高效分 离和扩 增人 骨髓 间充 质干细 胞的方 法 , 通过形 态 学和 多向分 化能 力进 行鉴 并
glc r p s ha e L- s o b c cd 2 p s h t y eo ho p t , a c r ia i- 一 ho p a e,d x m e h s n n e a t a o e a d FK5 6;t h n r c t s b 0 O c o d o y e y TGF- b t ea 3,r c m b ln,s d u y u a ea d s lno s a i eo ui o im p r v t n e e iu cd;t dp c t sby I O a io y e BM X n nd m e h cn;t a di o t a i O
脐带间充质干细胞概述
脐带间充质干细胞概述医学实验班 70080103 王雪彤脐带是胎儿时期连接母体与胎儿的索状结构,其外被羊膜,内含2条脐动脉、1条脐静脉,在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织———华尔通氏胶(Whartonps Jelly) ,从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 。
1人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 的形貌分析:倒置显微镜下观察人脐带间充质干细胞贴壁生长, 为形态相对均一的梭形细胞,呈平行排列生长或旋涡状生长,低密度时较扁平, 密度增加趋于融合时细胞变细长。
扫描电镜下观察呈长条状纤维样, 细胞膜表面不光滑, 有小结节状物, 细胞无明显突起,细胞间无网络状连接。
透射电镜观察核大, 不规则, 核仁明显, 常染色质多, 异染色质少, 胞浆少。
胞质内细胞器较少, 以粗面内质网和线粒体为主, 内有大量游离核糖体, 部分细胞可见内质网肿胀。
——植块法培养获得的人脐带间充质干细胞(×200)例如三代细胞的形态学特征——人体脐带间充质干细胞离体培养后,培养至第三代。
第三代人脐带间充质干细胞以均一长梭形的细胞为主,细胞周边有较多的丝状伪足,见图1,2;并形成毗邻细胞之间的网状连接,见图3;细胞核较大,核膜清晰,含两三个核仁,核质比较小,见图4。
2人脐带间充质干细胞(HUMSCs) 的生物学特性:HUMSCs既非胚胎干细胞又非成体干细胞,是别于两者之间的一类新的多能间充质细胞,它们之间既有联系又有差异。
根据国际细胞疗法间充质与组织干细胞委员会( the Mesenchymal and Tissue Stem Cell Committee of the Internation2 al Society for Cellular The rapy)制定的最低标准, 脐带间充质干细胞(MSCs)需满足以下条件: 1)MSCs在标准培养条件下呈贴壁生长; 2 )MSCs表达CD105, CD73和CD90,不表达CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a 或CD19和HLA2DR; 3)MSCs在体外至少能向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。