鱼类应激与应激性综合症的研究进展

鱼类应激与应激性综合症的研究进展 自1998年以来，国内有关鱼类应激以及由应激因素引起的鱼类病理性疾病研究逐步开展，国内学者对应激及应激性综合症的研究涉及该病的病因、病理学研究、流行学初步调查、组织学观察，并尝试多种防治方法，但是对该病的防治方法尚未取得突破性进展，该病在全国范围内尚未得到有效的预防和控制，而且，鱼类应激性综合症的发病数量和发病范围仍在不断扩大，对渔业生产造成更大的危害。因此，笔者在国内外学者研究的基础上，结合该病实践中防治措施，对该病进行较为系统的阐述，为鱼类应激性综合症研究和防治提供必要的参考。 1 鱼类应激与应激性综合症应激是指对动物产生有害作用的应激因子引起的非特异性、生理性紧张状态的现象，称为应激。应激反应是鱼类对不良环境因素刺激的忍受达到或接近极限时所表现的异常状态，而不是一种独立的疾病。凡是偏离鱼类正常生活范围的不良刺激因素就是应激原。生物的应激因子虽然包括物理的、化学的、生物的、精神的多种，但是对饲养鱼类而言，主要应激因子除低温、高温、振动等物理因子，低溶氧、水污染等化学因子，病原微生物、寄生虫等生物因子之外，还有高密度、起网、分池、运输等社会和精神因子。 应激因子可引起鱼类交感神经的兴奋，血液中产生儿茶酚胺— 肾上腺素和去甲肾上腺素浓度升高，进而血液中的皮质固醇激素(皮质醇、皮质酮、可的松、醛固酮、脱氧皮质酮等)增高。表现在鱼类行为异常，食欲下降，生长受抑制，生殖力降低，皮肤渗透性增强，对疾病的抵抗力下降等，甚至死亡。因此，由应激因子引起的一系列鱼类的异常症状统称为应激性综合症。 在水产养殖上发生了一种以出血为主要症状的鱼类应激综合病症，该病主要表现为鱼在捕捞拉网、分池、转箱及长途运输等应激因子刺激下，鱼类全身体表在短时间内发生充血、出血，并导致大批鱼的死亡，从而造成大量养成的商品鱼不能出塘。该病首先在四川、贵州、云南等地发现，此后在河南、河北、天津、湖北等省份发现，全国以吃食性以商品饵料为主的池塘、网箱出现多，危害重大。2004年据笔者在河南主养鲤鱼高产池塘中调查发现，以出血为主要症状的应激性综合症发病率在20％～40％左右，发病以局部集中特点，给集约化精养池塘造成重大损失。以出血为主要症状的鱼病早期被统称为“出血病”或“出血性败血症”，这是不准确的，因为出血病在水产疾病中一般是指由病毒引起的，具有高度传染性，以肠道出血、肌肉出血或红鳍红鳃盖的症状的疾病，可以用注射疫苗加以防治。细菌性败血症则是有细菌或病毒引起的高度传染性、以体表出血为主要症状的，危害几乎所有的淡水鱼类的疾病。本文所述的应激性出血性综合症特指由应激引起的，只在外界应激因子刺激下才表现出典型症状，并不具有传染性(目前未分离出病原微生物)的综合症，在此加以区别。 2 应激性综合症的发病特点 2．1 发病季节 无明显的季节性，一年四季均可发生，但发病的高峰期为7～10月，以夏季高温季节最严重。水温25℃以上多发生，28℃～32℃最严重，20℃以下发病较少，随水温降低出血症状逐步减轻。 2．2 危害品种 多种鱼类均可发生，且从鱼种到成鱼阶段皆可发生，但一般以成鱼发病率较高。对应激比较敏感的鱼主要是鲤鱼、草鱼、鲫鱼、斑点叉尾鲴、云斑刍回、团头鲂和花、白鲢，尤其以鲤鱼为主要危害品种。 2．3 发病鱼池特点 发病鱼比不发病的长速快，在同一发病鱼池或网箱中，长得较快、体态肥大的鱼患病严重，而个体小的鱼患病轻，甚至不患病。此病多发生在主要靠投喂配合颗粒饵料的精养鱼塘或网箱中，密度较稀，饵料品质较低，粗纤维含量较高的养殖条件下少发，尤其是投喂添加了喹乙醇的饵料后，发病率增高，且病情更严重。且往往是投喂某些厂家饵料的发病，而投喂另外一些厂家饵料的鱼却不发病。 2．4 病程特点 发病突然，发病前鱼无明显的症状，但当受到应激因子如捕捞拉网、水质、水温突变和长途运输等刺激时，鱼在几十到几分钟时间内即可发病。而且，必须有外界的应激因子才可发病，否则鱼类尚且摄食生长正常。 2．5 对病鱼的主要危害 主要该病损伤主要发生在鳃、心、头肾和中肾等器官，引起这些器官组织变性和坏死，特别是对各器官的血管损伤具有一定的特征性，血管壁发生透明变性。也可引起肝脏脂肪变性、引起脾、肾等器官的变性或坏死。 由于鱼类毛细血管通透性增强，腹部、头部、鳃盖、鳃丝、鳍条基部出血，有时鱼的口角或上下颌部充血，象“VI红”症状；严重时鳃和皮下大量出血，体表全部发红。在长途运输中应激而大量死亡，即使不死也表现为生命垂危，全身变为桃红色，鱼体发硬，体表粘液脱落，鳞片松动，最终死亡或失去商品价值。 3 发病原因 目前对该病的病因主要有以下几方面的观点：一是放养密度过大，造成鱼类对应激因子的敏感，抵抗能力下降；二是投喂商品饵料营养不全面，特别是维生素和矿物质的含量偏低，因足最的维生素可增强鱼类免疫能力和抗应激能力；矿物质添加不平衡使鱼体在生长过程中发生生理平衡失调，特别是酸碱平衡、水代谢的失调。鱼体组织、器官的发育及生长失调，某些结构性物质的合成受阻，使鱼体出现生理性水肿，表面上鱼体生长较肥，其实是细胞外液的增多，体内潴留，腹腔积水；鱼体胶原、透明质酸的合成受阻血管弹性减弱，通透性增大，某些部位微m管破裂，造成出血症状；三是饵料中添加的促生长添加剂过多，特别是喹乙醇的添加量过多。笔者曾对喹乙醇的添加量做初步的研究，发现在饵料中添加80×10时，随鱼体生长即可造成龟体发红，肌体应激反应强烈。据2003年和2004年的部分鱼料生产厂家了解，现大多厂家仍然以添加喹乙醇为主要促生长药物；四是养殖水质长期恶化，降低肌体对应激因子的抵抗力。 目前，形成该病的主要原因倾向于认为是由营养代谢不平衡引起的鱼类生理机能的紊乱，使毛细血管的细胞间隙增大、通透性增强，心脏机能衰弱，鳃部血液回流受阻，鳃部血压升高，同时鳃部气体交换不完全，肌体血液循环不畅，造成抗应激能力减弱而出血。另一引起该病的主要病因是饵料中添加喹乙醇，喹乙醇中毒鱼表现出特征性症状。 4 病理、组织学变化 4．1 病理变化 轻者腹部充血发红和有少量的出血斑；病情较严重者，其头部特别是嘴部、腹部、鳃盖和鳍条基部明显地充血、出血；而最严重者，鳃丝出血特别严重．大量的鲜血从鳃盖下涌出，而染红水体。病鱼体表无粘液或粘液分泌减少，手摸鱼体有粗糙感；肛门红肿，有的流出淡黄色粘液或腹腔内有大量的淡黄色液体。肠道充血、出血严重；肝、脾淤血肿大；机体产生损伤，严重时甚至导致死亡。该病的病理损伤主要发生在鳃、心、头肾和中肾等器官，引这些器官组织变性和坏死，特别是对各器官的血管损伤具有一定的特征性，血管壁发生透明变性。临床表现鱼体较黑营养良好。肌肉丰满。肝脏肿大，质地变脆，胆囊扩张、胆汁充盈。脾淤血肿大，呈紫黑色。心脏轻度扩大，颜色变淡；腹腔内积有多少不等的淡黄色腹水。 4．2 组织学变化 皮肤肌肉：表皮细胞未见异常，但真皮血管扩张充血和出血，皮下组织松散有水肿液，肌纤维水肿变性，肌问隙增宽水肿。 鳃病变：鳃丝水肿增粗，鳃小片呼吸上皮与毛细血管间的间隙增宽，呼吸上皮肿胀变性，脱落。鳃小片基部大最粘液细胞、上皮细胞和纤维细胞增生，这种增生并向整个鳃小片发展，严重者增生的细胞几乎完全填充了鳃小片之间的间隙，相邻的鳃小片发生融合，鳃的气体交换功能减弱或完全丧失。入鳃动脉和出鳃动脉扩张充血，血管壁发生透明变性、纤维素样变，血管壁破裂出血，红细胞和血浆逸出。 心脏病变：心外膜增厚，疏松水肿，有较多的淋巴细胞和单核细胞浸润；心肌纤维间的间隙增宽水肿，间质内有局部灶性的出血，并有一定数量的淋巴细胞和单核细胞浸润；肌纤维染色变淡，染色不均，发生空泡变性，甚至溶解消失，形成大小不等的溶解灶。 肝病变：肝细胞肿胀，脂肪变性，有脂肪肝的表现，中央静脉扩张淤血。 胰病变：胰腺泡细胞发生肿胀，变性，从基膜脱落，酶原颗粒减少，严重者腺泡结构紊乱，腺细胞离散、溶解而形成溶解坏死灶。间质增宽水肿。血管扩张淤血，有的血管壁发生变性和纤维索样坏死而破裂引起局灶性的出血。 脾病变：脾实质内淋巴细胞减少，脾窦和毛细血管扩张，大量血液淤积，实质内有大量含铁血黄素颗粒沉积，黑素巨噬细胞中心数量增多，体积增大，其内有大量黄褐色和黑色的颗粒样物质沉积。 头肾病变：松水肿，血窦扩张淤血，窦壁细胞肿胀，组织内有多量的含铁血黄素颗粒沉着，毛细血管扩张淤血，小血管壁发生变性，纤维素样坏死，管壁破裂，红细胞和血浆逸出，一些坏死的管壁上有草绿色的盐类沉积。淋巴细胞相对减少，嗜铬细胞肿胀，空泡变性。 肾病变：细胞发生颗粒变性，空泡变性，严重者发生坏死，溶解消失，有的肾小球囊内有炎性渗出物和钙盐沉着形成的钙化团块，从而压迫肾小球使其发生萎缩。 肠病变：肠道上皮细胞有轻度的变性。 4．3 超微病理学变化肝：肝细胞内糖原颗粒减少，粗面内质网扩张，线粒体肿胀，嵴断裂，一些线粒体内有异物沉积，双层膜向内凹陷形成一些囊袋状的结构；心：心肌细胞间的细胞连接破坏，细胞间隙水肿增宽，肌原纤维溶解；肾：肾小管上皮细胞膜增厚发生折叠，细胞内次级溶酶体增多，出现较多的异噬泡，其内有圆形或椭圆形的吞噬物，粗面内质网脱颗粒，高度扩张，形成大小不等的囊泡，线粒体肿胀，嵴断裂，有的形成髓鞘样小体，有的发生固缩；鳃：鳃小片血窦基膜增厚，血浆渗出使其均质化，有的部位发生破裂而致出血。 4．4 血液学研究 病鱼的血栓细胞较健康鱼的血栓细胞有明显的减少，且病变越明显的病鱼栓细胞的减少更明显，从而影响血液的凝固，故在血管破裂时出血不止。通过病笪的过氧化物同工酶酶谱与健康对照研究发现，病鱼过氧化物酶同工酶的组成发生异常和酶活力下降，表明鱼体的抗氧化机能失调，导致体内超氧根(02一)的增加，从而导致细胞膜的损伤，引起病变。如引起溶血、血管内皮细胞的损伤等。血清脂酶同工酶电泳分析，发现病鱼的脂酶同工酶酶谱较健康鱼的酶谱出现了条带的移位、条带的缺失等异常现象，表明病鱼的脂类