急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群和调节性T细胞的检测及临床意义
淋巴细胞及其亚群检测的临床意义ppt新版
1、T细胞在胸腺中的发育
三个阶段 三个重要事件 三个重要结果
双阴性阶段 (DN) 双阳性阶段 (DP) 单阳性阶段 (SP)
TCR基因重排 阳性选择 阴性选择
获得功能性TCR 获得MHC限制性 获得自身耐受
T细胞受体（TCR）的发育
过程： DP细胞
CD8+ T细胞
杀伤靶细胞 有重要的负 答 初始T细胞（naive T cell） 引起迟发 调节功能 型超敏反 CD4+和CD8+T细胞有助于监测患有免疫缺陷疾病（如SCID、AIDS的病人体内CD4+细胞亚群的百分率相对降低，而CD8+群体的百分
率相对升高），自身免疫性疾病（如在SLE病人中，CD8+淋巴细胞的相对百分比往往会降低，但当使用类固醇药物治疗时，也可能上
TCR
和
TCR
两种类型。
二、 T淋巴细胞的分化发育
释放穿孔素，颗粒酶杀伤靶细胞
CD3分子的低度表达 按T细胞的CD4和CD8分子表型
主要表面标志：CD8+CD28初始T细胞（naive T cell）
对免疫应答有重要的负调节功能
部位：胸腺皮髓质交界处及髓质区。
初始T细胞（naive T cell）
按T细胞所处的活化阶段 初始T细胞（naive T cell） 效应T细胞（effector T cell） 记忆性T细胞（memory T cell）
按TCR的表型分类 TCR + T细胞 TCR + T细胞
按T细胞的CD4和CD8分子表型 CD4+ T细胞 CD8+ T细胞
按T细胞的功能分类 Th（help T cell） Tc/C TL（cytotoxic T cell） Tr（regulatory T cell）
淋巴细胞亚群检测的临床意义
CD4+CD25+： 调节性T细胞，抑 制免疫应答
CD3-CD56+： NK细胞，非特异 性杀伤作用
B淋巴细胞亚群
B淋巴细胞是淋巴细胞亚群中的一种，具有产生抗体的能力，是免疫应答的重要成分。
B淋巴细胞可以分为两个主要亚群：成熟B细胞和记忆B细胞。
成熟B细胞是B淋巴细胞发育的最终阶段，可以分化为浆细胞并产生抗体。
记忆B细胞具有长期记忆能力，可以快速响应再次接触相同抗原的刺激，并迅速产生 大量的抗体。
NK淋巴细胞亚群
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定义：自然杀伤细胞，是淋巴细胞的一种类型
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功能：直接杀伤某些肿瘤细胞和病毒感染细胞，参与免疫监视和免疫防御
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分类：CD56bright和CD56dim两种表型
在免疫缺陷病的治疗过程中，淋巴 细胞亚群检测可以评估免疫重建的 效果，指导治疗方向。
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通过淋巴细胞亚群检测，可以监测 免疫缺陷病的治疗效果，为调整治 疗方案提供依据。
淋巴细胞亚群检测还可以用于评估 免疫缺陷病患者的预后情况，预测 疾病进展和并发症的风险。
自身免疫性疾病的监测与治疗
原理：通过抗体与淋巴细胞亚群表面抗原的特异性结合，利用酶或其他显色剂显色， 对抗体进行定位、定量和定性分析
优点：灵敏度高、特异性强、定位准确
缺点：操作复杂，需要专业人员操作，且成本较高
基因表达谱分析
检测方法：通过基因表达谱分析， 可以检测淋巴细胞亚群中基因的表 达水平，从而确定亚型。
应用：基因表达谱分析在淋巴细胞亚 群检测中具有重要的临床意义，有助 于疾病的诊断、治疗和预后评估。
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临床分离外周血淋巴细胞的意义
临床分离外周血淋巴细胞的意义1. 引言外周血淋巴细胞是免疫系统中重要的组成部分，对于人体免疫功能的评估和疾病诊断具有重要意义。
临床上，分离外周血淋巴细胞可以通过各种实验室技术进行，如流式细胞术、离心法等。
本文将详细探讨临床分离外周血淋巴细胞的意义及其应用。
2. 外周血淋巴细胞的组成和功能外周血淋巴细胞主要由T细胞、B细胞和自然杀伤(NK)细胞组成。
它们在人体免疫系统中发挥着重要的作用。
•T细胞：T细胞是一类重要的免疫调节细胞，包括辅助性T细胞（Th）、抑制性T细胞（Treg）和杀伤性T细胞（CTL）。
它们能够识别并攻击感染体内的病原体，并参与调节和协调免疫反应。
•B细胞：B细胞是免疫系统中的另一类重要细胞，主要负责产生抗体以及参与体液免疫反应。
B细胞可以通过识别和结合病原体抗原来触发免疫反应，并分泌特异性抗体来中和病原体。
•NK细胞：NK细胞是一类具有自然杀伤活性的淋巴细胞，能够直接杀伤肿瘤细胞和感染的细胞。
它们起到了重要的免疫监视作用，帮助清除异常或被感染的细胞。
3. 临床意义3.1 免疫功能评估外周血淋巴细胞的分离可以用于评估人体免疫功能的状态。
通过对淋巴细胞亚群进行计数和表型分析，可以了解患者的免疫系统是否正常工作。
例如，T细胞亚群CD4+/CD8+比值异常增高可能提示免疫功能紊乱，而B细胞数量下降可能与体液免疫缺陷有关。
3.2 炎症反应评估外周血淋巴细胞的分离还可以用于评估炎症反应的程度。
在某些炎症性疾病中，如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等，淋巴细胞亚群的变化可以反映疾病的活动性和严重程度。
例如，风湿性关节炎患者外周血中CD4+T细胞和CD8+T细胞比例的改变与关节受累程度密切相关。
3.3 肿瘤诊断和监测外周血淋巴细胞的分离在肿瘤诊断和监测中也具有重要意义。
淋巴细胞亚群的异常计数和表型分析可以作为肿瘤早期诊断的辅助指标。
例如，在白血病患者中，外周血中异常淋巴细胞数量增加，而正常淋巴细胞数量减少。
淋巴亚群临床意义
淋巴亚群临床意义淋巴亚群是指免疫系统中的一类特殊细胞群，主要包括T细胞、B细胞、自然杀伤细胞（NK细胞）等。
它们在机体免疫应答过程中发挥着至关重要的作用。
淋巴亚群检测在临床诊疗中具有广泛的应用，通过对患者淋巴亚群的比例和功能进行分析，有助于揭示免疫系统的异常，为诊断、治疗和预后评估提供重要依据。
淋巴亚群在临床检测中的应用主要体现在以下几个方面：1.感染性疾病诊断：通过对淋巴亚群的比例进行分析，可以判断患者是否存在免疫功能紊乱，从而协助诊断感染性疾病。
例如，病毒感染可能导致淋巴细胞亚群比例失衡，从而导致免疫功能受损。
2.肿瘤免疫监测：肿瘤的发生、发展与免疫系统密切相关。
淋巴亚群检测可以帮助评估患者的免疫状态，为肿瘤的早期发现、诊断和治疗提供依据。
例如，某些肿瘤患者存在免疫抑制现象，表现为淋巴亚群比例失衡。
3.免疫相关性疾病诊断：淋巴亚群异常与许多免疫相关性疾病（如自身免疫性疾病、移植排斥反应等）的发生和发展密切相关。
通过对淋巴亚群进行检测，可以协助临床医生进行病因诊断和病情评估。
4.免疫缺陷病筛查：淋巴亚群检测有助于发现免疫缺陷病，如先天性免疫缺陷病、后天获得性免疫缺陷病等。
这类疾病患者往往存在淋巴亚群数量或功能异常，通过检测可以指导临床治疗和预防。
尽管淋巴亚群检测在临床应用中具有较高的价值，但仍存在一定的局限性。
例如，检测方法和技术受限，导致结果的准确性和重复性较低；检测项目较为单一，难以全面评估患者的免疫状态等。
未来，随着科学技术的不断发展，淋巴亚群检测将更加精确、全面，为临床诊疗提供更为可靠的手段。
总之，淋巴亚群检测在临床具有重要意义，通过对患者淋巴亚群的比例和功能进行分析，有助于揭示免疫系统的异常，为诊断、治疗和预后评估提供重要依据。
淋巴细胞亚群测定的临床意义
淋巴细胞亚群测定的临床意义
淋巴细胞亚群测定是一种检测体内淋巴细胞数量和比例的方法，通过测定不同亚群的百分比，可以了解到人体免疫系统的状态和功能。
淋巴细胞亚群包括T细胞、B细胞、NK细胞等，它们在人体免疫系统中具有不同的作用。
T细胞是免疫系统中最重要的细胞类型之一，分为CD4+ T细胞
和CD8+ T细胞。
CD4+ T细胞可以激活其他免疫细胞，调节和协调免疫反应，而CD8+ T细胞可以识别并杀死感染人体的细胞。
B细胞主要负责产生抗体，对抗体介导的免疫反应非常重要。
当人体遭受感染时，B细胞会产生与病原体相匹配的抗体，以保护人体免受感染。
NK细胞是一种能够杀死病毒感染和肿瘤细胞的特殊淋巴细胞。
它们对于保持人体健康非常重要，因为它们可以识别和消除异常细胞，防止癌症和病毒感染的发生。
淋巴细胞亚群测定可以帮助医生诊断和治疗一些免疫系统相关
的疾病，如自身免疫性疾病、感染病和癌症等。
通过检测不同亚群的比例，可以了解到免疫系统中的异常情况，为治疗提供有力的依据。
淋巴细胞亚群测定也可以帮助预测某些疾病的预后和疗效，为患者提供更好的治疗方案。
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t淋巴细胞亚群临床意义
t淋巴细胞亚群临床意义t淋巴细胞是免疫系统中的一类重要细胞，它们在维护机体免疫平衡和抵抗外界病原体方面起着重要作用。
t淋巴细胞根据表面抗原的不同可以分为多个亚群，每个亚群在免疫反应中发挥着不同的作用。
因此，对于t淋巴细胞亚群的临床意义的研究对于诊断和治疗一些疾病具有重要价值。
t淋巴细胞亚群的检测可以用于辅助诊断某些疾病。
例如，在艾滋病的诊断中，t淋巴细胞亚群CD4+和CD8+的测定是非常重要的指标。
艾滋病病毒（HIV）可以攻击和破坏CD4+ T细胞，导致机体免疫功能受损。
因此，通过检测CD4+ T细胞的数量，可以判断艾滋病的病情和预测疾病的进展程度。
t淋巴细胞亚群的检测可以用于评估免疫功能状态。
免疫功能的衰退会导致机体对感染和肿瘤的抵抗力下降。
通过检测t淋巴细胞亚群的比例和数量，可以评估机体免疫功能的状态。
例如，CD4+/CD8+比值的改变可以反映免疫功能的紊乱，提示机体免疫功能受损。
t淋巴细胞亚群的检测还可以用于监测免疫治疗的效果。
对于一些免疫性疾病和恶性肿瘤，免疫治疗已经成为重要的治疗手段。
通过监测t淋巴细胞亚群的变化，可以评估免疫治疗的效果。
例如，在免疫抑制剂治疗过程中，CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的数量和比例的变化可以反映治疗的效果和安全性。
t淋巴细胞亚群的研究还可以为新药的研发和临床应用提供指导。
不同亚群的t淋巴细胞在免疫反应中的作用不同，对于某些疾病的治疗可能具有潜在的作用。
因此，研究t淋巴细胞亚群的功能和相互作用，可以为新药的研发和临床应用提供重要的理论依据。
t淋巴细胞亚群的临床意义非常重要。
通过对t淋巴细胞亚群的检测和研究，可以辅助诊断疾病、评估免疫功能状态、监测治疗效果，并为新药的研发和临床应用提供指导。
随着技术的不断进步和对t 淋巴细胞亚群功能的深入了解，相信其在临床应用中的价值将会越来越大。
希望未来能有更多的研究能够深入探讨t淋巴细胞亚群的临床意义，为人类健康做出更大的贡献。
淋巴瘤患者外周血调节性T细胞和NKT细胞水平及临床意义的开题报告
淋巴瘤患者外周血调节性T细胞和NKT细胞水平及
临床意义的开题报告
标题：淋巴瘤患者外周血调节性T细胞和NKT细胞水平及临床意义
研究背景：
淋巴瘤是一种恶性肿瘤，来源于淋巴组织或造血系统中的恶性淋巴
细胞。
虽然现有的治疗手段已经能够显著延长淋巴瘤患者的生存期，但
是由于化疗和免疫系统的破坏，淋巴瘤患者普遍存在免疫机能减弱的问题，易发生感染和肿瘤复发。
调节性T细胞和NKT细胞作为免疫系统中的重要成分，可促进和调节免疫应答，维持免疫平衡，保护机体免受自身免疫和恶性肿瘤的侵害。
因此，研究淋巴瘤患者外周血调节性T细胞和NKT细胞的水平及其与患
者预后的关系，对深入了解淋巴瘤免疫机制、优化治疗策略具有重要意义。
研究内容：
本研究拟采用回顾性病例对照的方法，收集2015年至2020年在我
院诊断为淋巴瘤的患者共计100例，其中包括40例弥漫大B细胞淋巴瘤、25例滤泡性淋巴瘤、20例辅助T细胞淋巴瘤和15例恶性淋巴样肉瘤，
同时随机选取100名正常人群作为对照组。
对照组和患者组均进行外周
血T细胞亚群分析，包括CD4+CD25+调节T细胞、CD8+调节T细胞、CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞和NKT细胞的数量和比例，并探讨其
与病理类型、分期、治疗方案及预后的关系。
研究意义：
本研究有望明确淋巴瘤患者外周血调节性T细胞和NKT细胞的水平和比例，为淋巴瘤的基础研究提供参考，同时也可为临床治疗策略的制
定提供参考。
探讨老年急性髓系白血病患者调节性T细胞的表达特点及临床意义
探讨老年急性髓系白血病患者调节性T细胞的表达特点及临床意义摘要】目的：通过对老年（年龄≥60岁）急性髓系白血病患者外周血中调节性T细胞的表达水平及特点的研究，探究其可能具有的临床意义。
方法：选自2012年7月至2013年12月收住我院的首次确诊老年急性髓系白血病患者计52例以及老年健康志愿者计52例、中青年健康志愿者计52例。
在签署知情同意书后，收集三组共计156份外周血标本，使用流式细胞术检测标本的CD4+细胞及CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达水平。
给予足疗程常规化疗后，再次收集老年急性髓系白血病组外周血进行流式细胞术测定标本中调节性T细胞的表达水平。
结果：三组被试外周血中CD4+CD25+CD127-调节性T细胞的表达水平以其所占CD4+T细胞比例作为标准，其中老年AML组、老年组、中青年组的CD4+CD25+CD127-调节性T细胞分别为7.913±1.692%、6.804±1.315%、5.734±1.036%；老年AML组指标高于老年组及中青年组，中青年组指标最低，差异具有统计学意义。
化疗敏感的AML患者计17例，其中CR后复发的患者计10例；化疗敏感的AML患者较难治AML患者的外周血调节性T细胞水平低，差异具有统计学意义；CR后复发患者的表达水平较长期CR患者高，获得长期CR患者的外周血调节性T细胞水平与正常老年对照组相当，均具有统计学意义。
结论：老年髓系白血病患者外周血调节性T细胞的表达水平与疾病的的发展和预后存在一定联系，可作为临床对于预后及疗效评价的标准之一。
【关键词】老年患者；急性髓系白血病；调节性T细胞；预后评估【中图分类号】RA 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2013）36-0039-02急性髓系白血病是我国成人急性白血病的常见类型，近年来在老年人群中发病率呈增高趋势，而对于其发病机制的研究一直未见突破性进展。
淋巴细胞亚群检测的临床意义
淋巴细胞亚群与临床人体外周血的淋巴细胞是机体重要的免疫细胞,主要包括三种:T淋巴细胞（TC）、B淋巴细胞（BC）、自然杀伤细胞（NK）。
TC主要表达CD3+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的60-—80%；BC主要表达CD19+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的15--20%；自然杀伤细胞(NK）主要表达CD3—-CD16+CD56+，约占正常人外周血淋巴细胞总数的10—-20％。
通过T淋巴细胞亚群的监测可以了解在不同疾病状态下患者的细胞免疫功能状态，已经广泛在肿瘤、自体免疫、感染性疾病中，辅助临床诊断、帮助了解发病机理、判断预后和指导临床治疗.T淋巴细胞亚群检测的内容为总T细胞（CD3+)及其亚群（辅助性T淋巴细胞，CD4+；抑制性或细胞毒T淋巴细胞，CD8+）的数量和比例。
在某些自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎、自体免疫性溶血性贫血患者中CD3+/CD4+细胞的比值升高.在病毒感染（上感,AIDS等)、恶性肿瘤、再生障碍性贫血等疾病中，患者CD4+/CD8+比值降低，三种淋巴细胞的数量和比例均可能有相应的改变。
T细胞亚群已被用来监测器官移植病人的免疫状态，协助发现和使其避免受到GVHD的攻击.由于在感染性、肿瘤性疾病、自体免疫性疾病和器官移植中患者的免疫功能和预后之间有着密切的关系，对其给予密切注意并及时采取适当措施、调节患者的免疫状态以改善预后就成为现代医学的一个重要内容。
常见疾病T淋巴细胞的改变（参考）疾病 T细胞亚群CD4+/CD8+ CD4+（辅助T） CD8+（抑制T）类风关↑（活动期) ↑↑SLE —-或↓（活动期) ↑↓↑胰岛素依赖性糖尿病↑多发性硬化症↓↓↑乙型肝炎↑自身免疫溶血性贫血↑↑上呼吸道感染↓↓↓结核↓AIDS ↓↓↑CD4+/CD8+ CD3+ （总T） CD4+( 辅助T） CD8+(抑制T) 恶性肿瘤（白血病）↓↓↓↓↑↑↑↑再障及粒细胞减少症↓↑↓CMV感染↓↑↓血小板减少↓↓↓↓↓↓CD19为全部B细胞共有的表面标志，增高见于B细胞系统的恶性肿瘤，减低见于体液免疫缺陷病.BC主要介导抗感染等体液免疫，故不作为肿瘤患者的检测指标.NK细胞主要表达CD3--CD16+CD56+ ，约占淋巴细胞的10-—15%左右。
Treg和淋巴细胞亚群在急性髓系白血病中的意义
Treg和淋巴细胞亚群在急性髓系白血病中的意义孔令君;葛健;夏瑞祥【摘要】Objective To explore the alterations, relationship and clinical significance of CD4 +CD25 +CD127 low/ - <br> regulatory T cells ( Treg ) and lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with acute myelocytic leukemia ( AML) . Methods The level of peripheral blood lymphocyte subsets and Treg of untreated AML patients and com-plete remission( CR) patients were tested by flow cytometry,and were compared with that of 30 normal controls. Re-sults The proportions of Treg were much higher in untreated AML patients and CR patients than in normal con-trols, while the mean proportion of Treg in untreated AML patients was higher than that in CR patients(P<0. 05). The proportions of NK( CD3 -CD16 +CD56 +) cells in untreated AML patients and CR patients were both decreased compared with normal controls,and the mean proportion of NK cells in untreated AML patients was lower than that in CR patients(P<0. 05). Compared with the normal controls,the proportions of CD3 +T cell, CD4+T cell,and the ratio of CD4 +/CD8 + decreased in untreated AML patients ( P <0. 05 ) , but the proportions of CD8 +T cell was higher than in normal controls;the proportions of CD3 +T cell, CD4 + T cell, CD8 +T cell and the ratio of CD4 +/CD8 + in CR patients were close to the proportions in normal controls, but there was significant difference between CR patients and untreated AML patients(P<0. 05). Conclusion The increase of Treg,CD8 +T cell and decrease of NK cells, CD3 +T cell, CD4 +T cell, and theratio of CD4 +/CD8 + in peripheral blood of patients with AML in-dicate that the immune function of patients with AML is depressed. Treg control the immune response of CD8 +T cells,at the same time inhibit the natural immune response of NK cells, playing a major role in the disorders of CD4 +T cells and CD8 +T cell balance,and closely relate with the developmentof AML. The immune treatment of patients with AML will be optimised by reducing the amount of Treg or removing the suppression function.%目的：研究 CD4+CD25+CD127 low/-调节性 T 细胞(Treg)和淋巴细胞亚群在急性髓系白血病(AML)患者外周血中的变化、相互关系及临床意义。
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・２２３０・ ＭＯＤＥＲＮ ０ＮＣ０ＬＯＧＹ．Ｎｏｖ．２０１０．ＶＯＩ．１８．Ｎ０．１１ 急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群和调节性Ｔ细胞的检测及临床 意义 陆春伟 ，佟海侠 ，陆美言 Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｓｕｂｓｅｔｓ，ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ ｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａ－
ＬＵ Ｃｈｕｎ—ｗｅｉ‘，ＴＯＮＧ Ｈａｉ—ｘｉａ ，ＬＵ Ｍｅｉ—ｙａｎ Ｓｅｃｔｉｏｎ ｏｆＨｅａｌｔｈ Ｔｅｓｔｉｎｇ，Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆＰｕｂｌｉｃ Ｈｅａｌｔｈ，Ｃｈｉｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅ＝ｉ＠，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１０００１，Ｃｈｉｎａ； Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆＨｅｍａｔｏｌｏｇｙ， Ｓｈｅｎｇｆｉｎｇ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＣｈｉｎａ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１００２２，Ｃｈｉｎａ； Ｄａｌｉａｎ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｄａｌｉａｎ １１６０２７，Ｃｈｉｎａ． 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｆｉｖｅ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｓｕｂｓｅｔｓ，ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｐａ— ｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＡＬ）ａｎｄ ｉｔｓ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｌｅｖｅｌ ｏｆ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｓｕｂｓｅｔｓ，ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ６０ ＡＬ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｎｄ ４０ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｗｉｔｈ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍ－ ｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌｓ，ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ＣＤ３ Ｔ ｃｅｌｌ，ＣＤ４ Ｔｃｅｌｌ，ＣＤ１６ ＣＤ５６ ＮＫ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ＣＤ４ ／ＣＤ８ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｉｎ ｎｅｗｌｙ ｄｉａｇｎｏｓｅｄ ＡＬ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０５），ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ＣＤ８ Ｔ ｃｅｌｌ ａｎｄ ＣＤ１９ Ｂ ｃｅｌｌ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ（Ｐ＜０．０１）．Ｔｈｅ ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ ｏｆ ＣＤ４ Ｔ ｃｅｌｌ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ＣＤ４ ／ＣＤ８ ｉｎ ａ— ｃｕｔｅ ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＡＬＬ）ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｍｕｃｈ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｇｅｎｏｕｓ ｌｅｕｋｅｍｉａ（ＡＭＬ）ｇｒｏｕｐ （Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈａｔ ｏｆ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｒｔｉｏｎ ｏｆ ＣＤ４ ＣＤ２５ ｈｉ ｇｈ Ｔｒｅｇ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｎｅｗｌｙ ｄｉａｇｎｏｓｅｄ ＡＬ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ａｂｎｏｒｍａｌ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＡＬ．Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｌｌ ＡＭＬ．ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ＡＬＬ ｈａｄ ｍｏｒｅ ｐｏｏｒ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｉｍｍｕｎｅ ｆｕｎｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ＣＩＭ’ＣＤ２５ ｈｉｇｈ Ｔｒｅｇ ｃｅｌｌｓ ｍｉｇｈｔ ｂｅ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｒｅａｓｏｎ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｓｕｐ— ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ＡＬ．Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｓｕｂｓｅｔｓ ａｎｄ ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｏｆ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｖａｌｕｅ ｏｎ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｅｆｆｅｃｔ ａｎｄ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｏｆＡＬ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ；ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅ ｓｕｂｓｅｔｓ；ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌ Ｍｏｄｅｍ Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ２０１０，１８（１１）：２２３０—２２３３
【摘要】 目的：研究急性白血病患者外周血淋巴细胞亚群、调节性Ｔ细胞水平的变化及临床意义。方法：采 用流式细胞仪对６Ｏ例急性白血病（ＡＬ）患者［急性髓细胞性白血病（ＡＭＬ）３０例、急性淋巴细胞性白血病 （ＡＬＬ）３０例］及４Ｏ例正常人外周血淋巴细胞亚群及调节性Ｔ细胞水平进行检测。结果：初诊ＡＬ组与正常 对照组比较，ＣＤ３ Ｔ淋巴细胞百分比、ＣＤ４ Ｔ淋巴细胞百分比、ＣＤ４ ／ＣＤ８ 比值及ＣＤ１６ ／５６ ＮＫ细胞百 分比均明显降低（Ｐ＜０．０５）；ＣＤ８ Ｔ淋巴细胞百分比与ＣＤ１９ Ｂ淋巴细胞百分比均明显升高（Ｐ均＜ ０．Ｏ１）。ＡＬＬ组ＣＤ４ Ｔ淋巴细胞百分比及ＣＤ４ ／ＣＤ８ 比值明显低于ＡＭＬ组（Ｐ＜０．０１）。与对照组相比 较，初诊ＡＬ患者外周血ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔ细胞和ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞均明显升高（Ｐ＜０．０１）。结论：ＡＬ患 者细胞免疫功能明显异常；与ＡＭＬ患者相比，ＡＬＩＪ患者细胞免疫功能更为低下。ＣＤ４ ＣＤ２５ ｈｉｇｈ Ｔｒｅｇ细胞增 多可能是ＡＬ患者免疫功能受抑的重要原因之一。淋巴细胞亚群及调节性Ｔ细胞水平检测在评价ＡＬ疗效及 判断预后方面具有一定的临床价值。 【关键词】急性白血病；淋巴细胞亚群；调节性Ｔ细胞 【中图分类号】Ｒ７３３．７１ 【文献标识码】Ａ ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２—４９９２．２０１０．１１．５６ 【文章编号】１６７２—４９９２一（２０１０）１１—２２３０—０４
【收稿１３期】２０１０—０３—０９ 【修回１３期】２０１０—０６—２２ 【作者单位】 中国医科大学公共卫生学院卫生检验教研室，辽宁沈阳１１０００１ 中国医科大学附属盛京医院血液研究室，辽宁沈阳１１００２２ 大连医科大学口腔医学院，辽宁大连１１６０２７ 【作者简介１陆春伟（１９６７一），男，辽宁沈阳人，主管技师，主要从事血液肿瘤的研究工作。Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｕｃｈｕｎｗｅ￣００２＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ．ｃｕ 现代肿瘤医学２０１０年１１月 第１８卷第１１期 急性白血病（ａｃｕｔｅ ｌｅｕｋｅｍｉａ，ＡＬ）是造血干细胞的恶性 克隆性疾病，其发生、发展与机体免疫水平降低密切相关，尤 其是细胞免疫异常。Ｔ淋巴细胞和ＮＫ细胞执行细胞免疫功 能，是机体抗肿瘤免疫的重要活性细胞。在抗肿瘤免疫效应 中，细胞免疫比体液免疫起着更为重要的作用。因此，检测 ＡＬ患者淋巴细胞亚群水平，对于探讨白血病免疫异常的实 质及指导治疗有重要的意义。ＣＩＭ ＣＤ２５ 调节性Ｔ细胞 （ｒｅｇｕｌａｔｏｒｙ Ｔ ｃｅｌｌ，Ｔｒｅｇ细胞）是近年来新发现的一群表型和 功能特异的Ｔ细胞亚群，具有免疫无能性和免疫抑制性。肿 瘤免疫研究证实，多种实体肿瘤患者外周血或肿瘤局部 ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞增多，提示Ｔｒｅｇ细胞的免疫抑制作用 与实体肿瘤的发生发展有一定的关系 。急性白血病为非 实体肿瘤，Ｔｒｅｇ细胞与此类疾病的关系如何，目前国内外文 献少见报道，本文采用流式细胞术（ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）检测 急性白血病患者及健康人群外周血淋巴细胞亚群和Ｃ１Ｍ ＣＤ２５ Ｔｒｅｇ细胞的水平，并探讨其临床意义。 １资料与方法 １．１临床资料 全部病例均为本院血液科门诊及住院ＡＬ患者，诊断根 据临床血象和骨髓检查确诊，符合张之南《血液病诊断及疗 效标准》 ｊ，ＡＬ组６Ｏ例，ＡＬＬ组３０例，其中男１８例，女ｌ２ 例，年龄３—６３岁，中位年龄ｌ８岁；ＡＭＬ组３Ｏ例，其中男１４ 例，女１６例，年龄３—７８岁，中位年龄３８岁。健康对照组４Ｏ 例，男２４例，女１６例，年龄１９—５４岁，中位年龄３５岁。 １．２主要试剂和仪器 ＭｕｌｔｉＳＥＴ四色免洗淋巴细胞亚群试剂盒、ＦＡＣＳ Ｌｙｓｉｎｇ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ红细胞裂解液、鼠抗人单克隆抗体ＣＤ２５、ＣＤ４及同 型对照Ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ１购自美国ＢＤ公司；ＦＡＣＳＣａｌｉｂｕｒ流式细胞 仪为美国ＢＤ公司产品。 １．３淋巴细胞亚群检测方法 采取外周静脉血２．０ｍｌ，ＥＤＴＡ—Ｋ２抗凝后备用。取两 支ＦＡＣＳ专用试管，各加入５０１ｘｌ充分混匀的抗凝全血，分别 加入２０ｔｚｌ ＣＤ３／ＣＤ８／ＣＤ４５／ＣＩＭ抗体和２０ｔｚｌ ＣＤ３／ＣＤ１６ ５６／ ・２２３１・ ＣＩＭ５／ＣＤ１９标记的抗体。涡旋混匀，室温避光放置ｌ５— ２０ｒａｉｎ。取出加入４５０￣１ １ Ｘ ＦＡＣＳ溶血素，充分混匀，避光放 置１５ｍｉｎ。２４小时内上机，用ＭｕｌｔｉＳＥＴ软件获取１５０００个细 胞进行检测。 １．４ ＣＩＭ ＣＤ２５ 调节性Ｔ细胞检测方法 取两支ＦＡＣＳ专用试管，对照管中加入２０ｔｘｌ ＣＤ４一 ＦＩＴＣ、Ｍｏｕｓｅ ＩｇＧ１一ＰＥ，实验管中加入２０ ｌ ＣＤ４一ＦＩＴＣ、ＣＤ２５ 一ＰＥ；再加入ＥＤＴＡ—Ｋ２抗凝的全血ｌＯＯｐ￣ｌ，孵育１５ ｍｉｎ后 加ｌ×ＦＡＣＳ溶血素２ｍｌ，涡旋混匀，避光１０ｍｉｎ。然后３００ｇ 离心５ｒａｉｎ，弃去上清液。每管加入２ｍｌ的ＰＢＳ，涡旋混匀， ３００ｇ离心５ｍｉｎ，弃去上清液。然后加入０．５ｍｌ ＰＢＳ混匀，４￣Ｃ 避光１ ｈ内上机检测。流式细胞仪检测分析应用ＣｅｌｌＱｕｅｓｔ软 件，在ＦＳＣ—ＳＳＣ散点图上选定淋巴细胞群，再以ＣＩＭ和ＳＳＣ 设门选择ＣＩＭ阳性细胞分析ＣＤ４ ＣＤ２５ 细胞群比例，检测 结果分别以ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔ细胞、ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔ细胞占 ＣＩＭ Ｔ细胞的百分率表示。以Ｃ１Ｍ Ｔ细胞中表达ＣＤ２５ 荧光强度＞ＣＤ４一细胞中ＣＤ２５ 荧光强度者定义为ＣＤ４ ＣＤ２５ Ｔ细胞。收集细胞数５００００个／管。 １．５统计学处理 应用ＳＰＳＳ １１．５统计软件进行统计学分析，数值用 ± 表示，验证两样本资料符合正态分布且分差齐性后采用ｔ检 验比较两组问差异。 ２结果 ２．１淋巴细胞亚群检测结果 初诊ＡＬ组与正常对照组比较，ＣＤ３ Ｔ淋巴细胞百分比 明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０５），ＣＤ４ Ｔ淋巴细胞百分比及 ＣＤ４ ／ＣＤ８ 的比值均明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０１）， ＣＤ８ Ｔ淋巴细胞百分比明显升高（Ｐ＜０．０１）；ＣＤＩ９ Ｂ淋巴 细胞百分比则显著高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；ＣＤ１６ ／５６ ＮＫ细胞百分比明显低于正常对照组（Ｐ＜０．０５）（见表１）。 初诊ＡＬＬ组ＣＤ４ Ｔ淋巴细胞卣分比及ＣＤ４ ／ＣＤ８ 比值明 显低于初诊ＡＭＬ组（Ｐ＜０．０１）。