点阵C02激光和Nd：YAG激光对自然老化小鼠真皮重塑的比较研究

中国美容医学２０１２年１Ｏ月第２１卷第１０期（』　１　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｅｓｔｈｅｔｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｏｃｔ．２０１２．Ｖｏ１．２１．Ｎｏ．１０　１７７９　・论著・　点阵ＣＯ２激光和Ｎｄ：ＹＡＧ激光对自然老化小鼠真皮重塑的比较研究　李蕊联，应朝霞，王梅，王永贤，王琼玉，张淑兰　（西安交通大学医学院第二附属医院皮肤科陕西西安７１　０００４）　

［摘要］目的：比较点阵ｃ０　激光和Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）对老化昆明小鼠真皮重塑的作用，并探讨二者嫩肤作用　机制，为临床选择治疗方法提供理论依据。方法：应用两种波长激光照射自然老化昆明小鼠背部脱毛皮肤，通过ＨＥ染色进行成　纤维细胞计数及真皮厚度测量，饱和苦味酸一天狼猩红染色观察皮肤Ｉ型、ＩＩＩ型胶原纤维的表达及Ｇｏｍｏｒｉ醛品红染色观察弹　力纤维的变化。结果：两组照射组中真皮厚度、成纤维细胞计数和弹力纤维容积分数的值均高于正常对照组（Ｐ均＜０．０５）；点阵　ｃ０：激光组均高于Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）组（Ｐ均＜Ｏ．０５）；两组照射组中Ｉ型．￣ＩＩＩ型胶原蛋白容积分数均高于正　常对照组（Ｐ均＜Ｏ．０５），但照射两组问差别无统计学意义。结论：点阵Ｃ¨Ｏ　激光和Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）均可引发　小鼠真皮重塑，前者效果优于后者。　［关键词］点阵ｃＯ　激光；Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）；自然老化小鼠；真皮重塑　［中图分类号］Ｒ６１　６．４　Ｒ３　３２　［文献标识码］Ａ　［文章编号］１　００８—６４　５５（２Ｏ１　２）１　０—１　７　７９一Ｏ５　

Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅ　ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｄｅｒｍａｌ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ　ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ　ｆｒＯｍ　ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ　ＣＯ２　ｌａｓｅｒ　ａｎｄ　Ｎｄ：ＹＡＧ　ｌａｓｅｒ　Ｌｏｎｇ－ｐｕｌｓｅ　１　０６４ｎｍ　ｉｎ　ａｇｉｎｇ　ｍｏｕｓｅ　ＬＩ　Ｒｕｉ—ｌｉａｎ，ＹＩＮＧ　Ｚｈａｏ－ｘｉａ，ＷＡＮＧ　Ｍｅｉ，ＷＡＮＧ　Ｙｏｎｇ—ｘｉａｎ，ＷＡＮＧ　Ｏｉｏｎｇ—ｙｕ，ＺＨＡＮＧ　Ｓｈｕ—ｌａｎ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｄｅｒｍａｔｏｌｏｇｙ，Ｔｈｅ　Ｓｅｃｏｎｄ　Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｘｉ　ａｎ　Ｊｉａｏｔｏｎｇ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉ　ａｎ７１０００４，　Ｓｈａａｎｘｉ，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｍｏｕｓｅ　ｄｅｒｍａＩ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ　ｆｒｏｍ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎａｆ　ＣＯ。ｌａｓｅｒ　ａｎｄ　Ｎｄ：ＹＡＧ　ｌａｓｅｒ　ｌｏｎｇ—ｐｕｌｓｅ　１　０６４ｎｍ，ａｎｄ　ｐｒｉｍａｒｉｌｙ　ｅｘｐｌｏｒｅ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｆｏｒ　ｔｈｅ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ．Ｍｅｔｈｏｄｓ　Ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ　ＣＯ。ｌａｓｅｒ　ａｎｄ　

Ｎｄ：ＹＡＧ　ｌａｓｅｒ　ｌｏｎｇ—ｐｕｌｓｅ　１　０６４ｎｍ　ｉｒｒａｄｉａｔｅ　ｍｏｕｓｅ　ｂａｃｋ　ｒｅｍｏｖｅｄ—ｈａｉｒ　ｓｋｉｎ　Ａｆｔｅｒ　ｉｒｒａｄｉａｔｉｏｎ　ｔｈｅ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ　ａｒｅａ　ａｎｄ　ｃｏｎｔｒｏ　Ｊ　ａｒｅａ　ｏｆ　ｓｋｉｎ　ｔｉｓｓｕｅ　ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｏｒ　ＨＥ　ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｓｉｒｉｕｓ　ｒｅｄ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　ａｎｄ　Ｇｏｍｏｒｉ　ｓ　ａｌｄｅｈｙｄｅ　ｆｕｃｈｓｉｎ　ｓｔａｉｎｉｎｇ　Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ　ｉｎ　ｄｅｒｍｉｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｕｎｔｅｄ；ｔｈｅ　ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ　ｏｆ　ｄｅｒｍｉｓ，Ｉ，ＩＩＩ　ｔｙｐｅ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｆｉｂｅｒｓ，ａｎｄ　ｅｌａｓｔｉｃ　ｆｉｂｅｒｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｓｅｒｖｅｄ　

ａｎｄ　ａｎａｌｙｚｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｉｎ　ｂｏｔｈ　ｆｒａｃｔｉｏｎａＩ　ＣＯ２　Ｉａｓｅｒ　ａｎｄ　Ｎｄ：ＹＡＧ　Ｉａｓｅｒ　ｌｏｎｇ—ｐｕｌｓｅ　１０６４ｎｍ　ｅｘｐｏｓｅｄ　ａｒｅａｓ．ｔｈｅ　ｄｅｒｍａｌ　

ｔｈｉｃｋｎｅｓｓ，ｎｕｍｂｅｒ　ｏｆ　ｄｅｒｍａＩ　ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓ，ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｉ　ａｎｄ　ＩＩＩ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｆｉｂｅｒｓ．ａｎｄ　ｅｌａｓｔｉｃ　ｆｉｂｅｒ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ａｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏＩ　ａｒｅａ（Ｐ＜Ｏ．ｏ５）．Ｉ　ａｎｄⅢＩ　ｃｏｌｌａｇｅｎ　ｆｉｂｅｒｓ　ｖｏｌｕｍｅ　ｆｒａｃｔｉｏｎ　ｊｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｇｒｏｕｐｓ　ｏｆ　ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ　ｇｒｏｕｐｓ　ｗｅｒｅ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈａｔ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｏｎｔｒｏｌ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５），ｂｕｔ　ｎｏ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｉｒｒａｄｉａｔｅｄ　ｇｒｏｕｐｓ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ　Ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ　ＣＯ２　ｌａｓｅｒ　ａｎｄ　Ｎｄ：ＹＡＧ　ｌａｓｅｒ　ｌｏｎｇ—ｐｕｌｓｅ　１　０６４ｎｍ　ｃａｎ　ｉｍｐｒｏｖｅ　ｍｏｕｓｅ　ｄｅｒｍａＩ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ　ＣＯ，Ｉａｓｅｒ　ｗｅｒｅ　ｂｅｔｔｅｒ　ｔｈａｎ　Ｎｄ：ＹＡＧ　Ｉａｓｅｒ　ｌｏｎｇ—ｐｕｌｓｅ　１０６４ｎｍ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｆｒａｃｔｉｏｎａｌ　ＣＯ２　ｌａｓｅｒ；Ｎｄ：ＹＡＧ　ｌａｓｅｒ　ｌｏｎｇ—ｐｕｌｓｅ　１０６４ｎｍ；ａｇｉｎｇ　ｍｏｕｓｅ；ｄｅｒｍａｌ　ｒｅｍｏｄｅｌｉｎｇ　

激光医学的迅速发展，已经广泛地应用于皮肤科的临床　实践中。近几年，非剥脱性激光以及点阵激光的发展更为迅　速，已经占有了一席之地　］。虽然有关两者作用机制的研究也　有报道　，但是二者针对皮肤组织结构作用机制的比较研究　却鲜见报道。通过对二者作用的靶组织或细胞变化的深入比　较研究，可以进一步揭开二者作用差异的面纱，为临床制定具　体治疗方法提供理论依据。因此，本实验旨在分析点阵ｃＯ，激　光及Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）对昆明小鼠真皮的　影响并进行对比研究，以进一步明确其作用机制的差异。　１　材料和方法　１．１材料　１．１．１实验动物：清洁级雌性自然老化昆明小白鼠２４只，体　重（４５±７）ｇ，鼠龄１１～１２个月，由西安交通大学医学院实验　动物中心提供。　１．１．２仪器设备：点阵ｃ０。激光治疗仪（上海康奥），Ｎｄ：ＹＡＧ激　光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）（韩国Ｌｕｔｒｏｎｉｃ　ｓ６）；石蜡切片　机（德国Ｌｅｉｃａ）；偏振光显微镜（奥林巴斯）；光学显微镜及医　学图像分析系统（麦克奥迪）。　１．２实验方法：１０％水合氯醛（４ｍｌ／ｋｇ）腹腔麻醉。小鼠背部　皮肤脱毛后，以脊柱为纵线和垂直于脊柱纵线的二分之一处　为横线将背部皮肤分为四个区。左侧为对照区，不做任何处　理；右侧头部区为点阵ｃ０　激光照射区（简称点阵区），尾部区　为Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）照射区（简称长脉宽　

基金项目：陕西省１３１１５重大科技专项，两安市科技计划项目（ＳＦ０８００５）（２）　通讯作者：王梅，医学博士，副主任医师，主要研究方向：皮肤激光美容、银屑病的生物治疗及皮肤肿瘤的早期诊断治疗　Ｅ—ｍａｉ１：ｗａｎｇｍｅｉ６９７２＠１６３．ｃｏｍ）　ｒｒｌ国美容医学２０１２年１ｏ月第２１卷第１０期（上）Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａ　！！　Ｐｆｉ！　竺：　！！：　：！！！：　：　！：　２　１　表１　两种照射后不同时间的成纤维细胞计数　（个／４００倍高倍镜视野）　

表２两种激光照射后不同时间段的真皮厚度（ｔＬｍ）　表３两种激光照射后不同时间段的Ｉ型胶原纤维容积分数　（％）　

２．２点阵ｃ０　激光及Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽ｌ　０６４ｎｍ波长）　照射对胶原增生的影响：点阵Ｃ０。激光及Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长　脉宽１０６４ｎｍ波长）照射自然老化昆明小白鼠后，经偏振光镜　检饱和苦味酸一天狼猩红切片可见Ｉ型胶原纤维呈红黄色，　较粗大，而ＩＩＩ型胶原纤维呈绿色细丝状，交织于Ｉ型胶原纤　维问。在两波长激光分别照射后２周、１个月及３个月，照射　区与对照区相比，Ｉ型及ＩＩＩ型胶原纤维容积分数增加明显　（见表３、表４、图４）。点阵Ｃ０　激光与Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽　１　０６４ｎｍ波长）照射后一个月的Ｉ型及ＩＩＩ型胶原纤维容积分　数差别不明显（见图３）。　２．３点阵ｃ０　激光及Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）照　射对弹力纤维增生的影响：点阵ＣＯ。激光及Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准　长脉宽１０６４ｎｍ波长）照射自然老化昆明小白鼠后２周、１个　月及３个月，Ｇｏｍｏｒｉ醛品红染色标本显示照射区弹力纤维染　色深，呈较长细丝状，波浪状交织于增生胶原纤维间（见图５　箭头所示），而对照区真皮弹力纤维短、染色浅；在激光照射　后一个月，点阵ｃ０　激光较Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１０６４ｎｍ波　长）照射区的弹力纤维容积分数增加明显（见表５、图６）。　中国美容医学２０１２年ｌＯ月第２１卷第ｌＯ期ｆ上）Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ａｅｓｔｈｅｔｉｃ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ．Ｏｃｔ．２０１２．Ｖｏ１．２１．Ｎｏ．１０　１７８３　２两　３　—・●　意辩Ｉ匮．｜区　卅●　意肆对瞩鞋　●一　长鼙童腻科匠　＋怪鼙蠢对黑嚣　

（腻甜盾时间）　图６点阵ｃ０２激光及Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１　０６４ｎｍ波长）照射区　与对照区在不同时段的弹力纤维容积分数　

原纤维沉积，１月时达到最高值，３月时沉积较前减少，但仍　高于对照区，这些结果有助于我们了解激光照射后刺激胶原　纤维合成的时间；而ＩＩＩ型胶原纤维至３月时仍呈现明显沉积　趋势，其合成大于降解　，可能与ＩＩＩ型胶原纤维在老化皮肤沉　积较多有关　。］；同时，弹力纤维亦呈现出时间依赖性沉积关　系［１　］；均表明其临床治疗间隔可以在三个月以后进行。　本实验结果表明，点阵ＣＯ。激光及Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉　宽１　０６４ｎｍ波长）照射均可明显引发真皮重塑，前者较后者具　有更好的照射效果，造成这种差异的可能原因在于点阵ＣＯ，　激光的波长（１０６００ｎｍ）高于Ｎｄ：ＹＡＧ激光波长（１　０６４ｎｍ）。相比　而言，较长的点阵ｃＯ　激光波长穿透能力强，可达真皮的中　层，能够更好的将机械效应及光热效应作用于真皮中上层的　成纤维细胞及真皮血管，激活组织自我修复，其中成纤维细　胞和真皮血管内皮细胞分泌的炎症介质和细胞因子可能参　与组织修复，刺激成纤维细胞增殖，使胶原蛋白发生重组和　增生：Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１０６４ｎｍ波长）其作用机理可能　是真皮及其血管受激光光热效应及机械效应损伤，胶原蛋白　热变性，继而激活组织修复过程，引发成纤维细胞增殖，引起　胶原蛋白重组增生以达到真皮重塑的目的嘲。点阵ＣＯ　激光　照射后的成纤维细胞数目及真皮厚度在１个月时较Ｎｄ：ＹＡＧ　激光（准长脉宽１０６４ｎｍ波长）照射效果明显，但其长期效果　并不具有明显优势，说明二者均能有效改善皮肤质地、增加　皮肤弹性，是进行真皮重塑的很好的选择。比较多位学者的　治疗结果，发现点阵ＣＯ　激光效果虽好，但点阵ｃＯ。激光治疗　时患者的疼痛感高于Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽１０６４ｒｉｍ波长），　且恢复期也较长　，“］。相对临床而言，二者皆可作为治疗皮肤　光老化进行真皮重塑的良好选择０，　，Ｎｄ：ＹＡＧ激光（准长脉宽　１　０６４ｎｍ波长）损伤小，停工期短，更适合现在的快节奏生活，　但对于较重的老化皮肤或对疗效有强烈愿望，建议用点阵　Ｃ０。激光。本实验未明确真皮发生变化的分子机理，有待于在　今后的学习中进一步研究。