高碘酸钠的紫外吸收光谱
《现代化学实验与技术2》实验讲义(48课时) 实验1 邻二氮菲分光光度法
《现代化学实验与技术2》实验讲义（48课时）实验1 邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验原理邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ508=1.1 × 104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。
其吸收曲线如图1-1所示。
显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。
有关反应如下：2Fe3++2NH2OH·HC1＝2Fe2++N2↑+2H2O+4H++2C1－图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
在同样实验条件下，测定待测溶液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。
二、仪器和试剂1．仪器721或722型分光光度计。
2．试剂(1)0.1 mg·L-1铁标准储备液准确称取0.702 0 g NH4Fe(S04)2·6H20置于烧杯中，加少量水和20 mL 1:1H2S04溶液，溶解后，定量转移到1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
(2)10-3 moL-1铁标准溶液可用铁储备液稀释配制。
(3)100 g·L-1盐酸羟胺水溶液用时现配。
(4)1.5 g·L-1邻二氮菲水溶液避光保存，溶液颜色变暗时即不能使用。
(5)1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液。
(6)0.1 mol·L-1氢氧化钠溶液。
三、实验步骤1．显色标准溶液的配制在序号为1～6的6只50 mL容量瓶中，用吸量管分别加入0，0.20，0.40，0.60，0.80，1.0 mL铁标准溶液(含铁0.1 g·L-1)，分别加入1 mL 100 g·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液、5 mL 1.0 mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。
溴酸钠含量的测定原理
溴酸钠含量的测定原理
溴酸钠是一种常用的化学试剂，广泛应用于化学分析、制药、电子工业等领域。
在实际应用中，需要对溴酸钠的含量进行测定，以保证其质量和稳定性。
本文将介绍溴酸钠含量的测定原理。
一、溴酸钠的化学性质
溴酸钠的化学式为NaBrO3，是一种白色晶体，易溶于水。
在水中可以形成弱酸性溶液，可以与酸反应生成溴酸和二氧化碳。
溴酸钠还可以与还原剂反应，生成溴化物和氧气。
二、溴酸钠含量的测定方法
1. 碘量法
碘量法是一种常用的溴酸钠含量测定方法。
其原理是利用溴酸钠与过量的碘酸钾反应，生成碘酸钠和溴化钾。
反应后，用亚硫酸钠溶液滴定剩余的碘酸钾，计算出溴酸钠的含量。
2. 氧化还原滴定法
氧化还原滴定法是一种快速、准确的溴酸钠含量测定方法。
其原理是利用溴酸钠与还原剂反应，生成溴化物和氧气。
反应后，用标准的碘酸钾溶液滴定剩余的还原剂，计算出溴酸钠的含量。
3. 紫外分光光度法
紫外分光光度法是一种基于溴酸钠的吸收特性进行测定的方法。
其原理是利用溴酸钠在紫外光谱区域的吸收特性，通过测量样品的吸光度来计算出溴酸钠的含量。
三、结论
以上三种方法都可以用于溴酸钠含量的测定，具有各自的优缺点。
在实际应用中，需要根据具体情况选择合适的方法进行测定。
无论采用哪种方法，都需要注意实验条件的控制和数据的准确性，以保证测定结果的可靠性。
分析化学课后习题答案(第六版-李发美)
第十章紫外－可见分光光度法1．名词解释：吸光度、透光率、吸光系数(摩尔吸光系数、百分吸光系数)、发色团、助色团、红移、蓝移。
2．什么叫选择吸收？它与物质的分子结构有什么关系？物质对不同波长的光吸收程度不同，往往对某一波长(或波段)的光表现出强烈的吸收。
这时称该物质对此波长(或波段)的光有选择性的吸收。
由于各种物质分子结构不同，从而对不同能量的光子有选择性吸收，吸收光子后产生的吸收光谱不同，利用物质的光谱可作为物质分析的依据。
3．电子跃迁有哪几种类型？跃迁所需的能量大小顺序如何？具有什么样结构的化合物产生紫外吸收光谱？紫外吸收光谱有何特征？电子跃迁类型有以下几种类型：σ→σ*跃迁，跃迁所需能量最大；n →σ*跃迁，跃迁所需能量较大，π→π*跃迁，跃迁所需能量较小；n→ π*跃迁，所需能量最低。
而电荷转移跃迁吸收峰可延伸至可见光区内，配位场跃迁的吸收峰也多在可见光区内。
分子结构中能产生电子能级跃迁的化合物可以产生紫外吸收光谱。
紫外吸收光谱又称紫外吸收曲线，是以波长或波数为横坐标，以吸光度为纵坐标所描绘的图线。
在吸收光谱上，一般都有一些特征值，如最大吸收波长(吸收峰),最小吸收波长(吸收谷)、肩峰、末端吸收等。
4．Lambert-Beer定律的物理意义是什么？为什么说Beer定律只适用于单色光？浓度C与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素有哪些？朗伯－比耳定律的物理意义：当一束平行单色光垂直通过某溶液时，溶液的吸光度A与吸光物质的浓度c及液层厚度l成正比。
Beer定律的一个重要前提是单色光。
也就是说物质对单色光吸收强弱与吸收光物质的浓度和厚度有一定的关系。
非单色光其吸收强弱与物质的浓度关系不确定，不能提供准确的定性定量信息。
浓度C与吸光度A线性关系发生偏离的主要因素（1）定律本身的局限性：定律适用于浓度小于0.01 mol/L的稀溶液，减免：将测定液稀释至小于0.01 mol/L测定（2）化学因素：溶液中发生电离、酸碱反应、配位及缔合反应而改变吸光物质的浓度等导致偏离Beer定律。
甘油浓度测定方法
甘油浓度测定方法Nash试剂:精确称取乙酸按150 g,蒸馏水溶解，加入2 mL冰醋酸，2 mL乙酰丙酮，定容至1 000 mL。
0.015 mol·L-1高碘酸钠溶液:精确称取高碘酸钠3.2 g,溶于0.12 mol·L一1的HCl，定容至1 000mL。
0.1%L-鼠李糖:精确称取L-鼠李糖0.1 g溶于蒸馏水，定容至100 mL。
甘油标准溶液的配制:先配制0.1 g·L的母液，再根据需要稀释成不同浓度的甘油溶液。
以上所用试剂均为分析纯。
1.3.2最大吸收波长的测定比色法的原理是酸性高碘酸盐氧化糖醇产生甲醛，在Nash试剂参与下生成黄色的化合物，该化合物在412 nm下有最大吸收峰。
取一定浓度的标准品甘油溶液和样品稀释液各1 mL，分别置于不同比色管中，然后分别加入1 mL 0.015 mol *L-高碘酸钠溶液，混匀，室温放置10 min，然后加入2mL0.1%L-鼠李糖溶液，以除去过多的高碘酸盐，混匀后加入4 mL新鲜配制的Nash试剂，在53℃水浴中加热15 min,侧其充分呈色，然后以试剂空白作参比，在400-700 nm波长区段测定其吸收光谱，样品和甘油标准品的吸书光谱均在412 nm 处有最大吸收，故选择412 nm作为测定波长。
1.3.3标准曲线的绘制取不同浓度的标准品甘油溶液各1 mL，按上述最大吸收波长的测定方法操作，显色后在412 nm下测其吸光度，绘制标准曲线。
1.3.4样品的刚定取不同时间的发酵液，3 500 r *min-1，离心2min，取上清液，稀释至适当浓度，然后按1.3.3标准曲线绘制方法进行测定，以试剂空白作参比。
2结果与讨论2.，标准曲线的绘制通过测定多批不同浓度的甘油标准溶液的结果表明，甘油浓度在0-40 mg·L时，吸光度与甘油浓度线性关系良好(图1)，回归方程为:y=0.0236x-0.003 6,R2=0.9997，重复性很好。
仿贻贝类含儿茶酚改性聚乙烯醇黏附凝胶的合成
仿贻贝类含儿茶酚改性聚乙烯醇黏附凝胶的合成杨潇;贾二鹏;易世雄;冉小琪【摘要】In this work,we grafted polyvinyl alcohol (PVA)with a functionality of adhesive structure,3,4-di-hydroxybenzaldehyde,to obtain a mussel-inspired modified PVA (m-PVA).Firstly,m-PVA was synthesized with PVA and 3,4-dihydroxybenzaldehyde via acetalization.The m-PVA was characterized by UV-spectra,FT-IR and H 1 NMR,which confirmed the catechol was grafted in the polymer.And the grafting ratio is about 10%. In addition,the thermal stability of m-PVA was also measured by TG analysis method.For mimic of mussel ad-hesive protein gel,UV-spectra were usedto study the formation of m-PVA adhesive gel,which was obtained by coordinating with Fe3 + with different pH.UV-spectra were also used to investigate the formation of m-PVA ad-hesive gel,which formed by oxidation of NaIO 4 that can oxidize the catechol to form quinone.Through our pri-mary work,adhesive gel was synthesized successively,which mimics mussel adhesive protein gel to some extent.%将儿茶酚(catechol)接枝到聚乙烯醇(PVA)侧基上，得到改性聚乙烯醇(m-PVA)，以模拟贻贝类分泌的黏附蛋白液。
HRP标记抗体原理及方法(戊二醛二步法和过碘酸钠法)
HRP标记抗体原理及方法（戊二醛二步法和过碘酸钠法）酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA 等。
酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否，因此被称为关键的试剂。
酶标记物中最常用的是酶标记抗体，它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。
酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体，其次要有良好的制备方法。
目前，高质量的酶(如辣根过氧化物酶，简称HRP)国内已有商品供应。
高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。
在制备方法上，宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。
(一) 酶制剂及其底物凡无毒性又能呈现有色化学反应的酶，原则上均可作为标记用。
但作为标记抗体用的酶应满足下列要求：(1)来源方便，易于纯化；(2)比活性高，性质稳定；(3)酶活性和量能用简单方法测定。
目前在免疫酶技术中常用的酶为辣根过氧化物酶(HRP)和硷性磷酸酶(AP)，其次还有葡萄糖氧化酶，β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。
由于辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)比活性高，稳定，分子量小，纯酶容易制备，所以最常用。
HRP广泛分布于植物界，辣根中含量高，它是由无色的酶蛋白和棕色的铁卟啉结合而成的糖蛋白，糖含量18％。
HRP由多个同功酶组成，分子量为40,000,等电点为PH3～9,酶催化的最适PH因供氢体不同而稍有差异，但多在PH5左右。
酶溶于水和58％以下饱和度硫酸铵溶液。
HRP的辅基和酶蛋白最大吸收光谱分别为403nm和275nm，一般以OD403nm／OD275nm的比值RZ(德文ReinheitZahl)表示酶的纯度。
高纯度的酶RZ值应在3.0左右(最高可达3.4)。
RZ值越小，非酶蛋白就越多。
值得注意的是，纯度并不表示酶活性，如当酶变性后，RZ值仍可不变。
HRP的催化反应需要底物过氧化氢(H2O2)和供氢体(DH2)。
供氢体多为无色的还原型染料，通过反应可生成有色的氧化型染料(D)。
林可霉素人工抗原的合成与鉴定
林可霉素人工抗原的合成与鉴定张小辉;职爱民;侯玉泽;宋春美;王耀;龚芳;赵启法;张改平【摘要】拟合成并鉴定林可霉素( Lincomycin,LIN)人工抗原,通过动物免疫生产亲和力高、特异性好的鼠源LIN多克隆抗血清.采用高碘酸钠法将林可霉素与牛血清白蛋白(BSA)及鸡卵清蛋白(OVA)分别偶联,合成免疫原LIN-BSA和包被原LIN-OVA,并采用紫外分光光度法(UV)和聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定.结果表明,半抗原LIN和载体蛋白偶联成功.动物免疫试验(免疫BALB/c纯系小鼠)结果显示,3只小鼠效价均达1∶3 000,且2号小鼠多抗血清抗LIN的半数抑制质量浓度IC50为3.85 μg/L,与莫能菌素的交叉反应率为6.19％,与其他药物无交叉反应.表明成功获得高效价、特异性好、亲和力高的鼠源抗LIN多抗血清.%The goal of this study was to synthesize artificial antigen of lincomycin and to obtain its mice polyclonal antiserum. Artificial antigen LIN-BSA and LIN-OVA were synthesized using sodium perio-date by linking carrier proteins BSA and OVA to LIN. The antigen LIN-BSA and LIN-OVA was identified by ultraviolet scanning and SDS-PAGE. The results showed that the hapten LIN was successfully linked to carrier proteins. The animal immunization results showed that three BALB/c mice indirect ELISA titer against LIN were 1 : 3 000 and the IC50 of No. 2 mice was 3. 85 μg/L and the high-titer; the rate of cross reaction of LIN mAb with Monensin was 6. 19%, and there was no cross-reactivity to other compounds; sensitivity LIN polyclonal antiserum has been generated. The artificial antigen of LIN and its mice polyclonal antiserum laid a foundation base for product the monoclonal antibodies and rapid test reagent against LIN.【期刊名称】《西北农业学报》【年(卷),期】2012(021)008【总页数】6页(P1-6)【关键词】林可霉素;人工抗原;合成;多抗血情【作者】张小辉;职爱民;侯玉泽;宋春美;王耀;龚芳;赵启法;张改平【作者单位】河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南科技大学食品与生物工程学院,河南洛阳471003;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院,农业部动物免疫学重点开放实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002【正文语种】中文【中图分类】S859.84林可霉素（lincomycin，LIN）又称洁霉素，是由林肯链霉菌发酵产生的林可酰胺类抗生素［1－2］。
钢铁中锰含量的三种检测方法比较
品溶 液 中 Ｍｎ元 素 的 浓 度 值 ， 进 一 步 根 据 称 样 量 得 出钢
铁样 品 中的 Ｍｎ含量 。
５ 三 种检 测方 法的优 缺点
５ ． １ 原 子 吸收光 谱仪 优点 ： 选择 性强 ， 精 密度高 ， 使得 它分 析结果 精确 ； 灵 敏度 高 、 分 析范 围广 ， 即可 测 定低 含 量 和 主量 元 素 ， 又可
钢 铁 中锰含 量 的检 测方 法很 多 ， 有 纯 化学分 析 方法 ，
表１ 原 子 吸收 光 谱 仪 工 作 条 件
比如可 视滴 定法 ， 有 化学 与仪 器结 合 的分析 方法 ， 比如火 焰 原子 吸 收光谱 法 、 高碘 酸钠 （ 钾） 分 光 度法 、 ， 也 有 纯 仪
器 分析 方法 ， 比如火 花源 原 子 发 射 光谱 分 析法 等 。在 实
测定 微量甚 至 痕量元 素 ； 抗 干扰 能力 强 ， 既可测定 金 属元
收 稿 日期 ： ２ ０ １ ６—０ ９— ０ ６
会 以标 准 溶 液 的 吸 光 度 值 对 应 浓 度 自动 绘 制 出 标 准 曲
线， 再 根 据标 准 曲线 和样 品 溶 液 的 吸光 度 自动 计 算 出样
《 计量 与测试技 术》 ２ ０ １ ７年 ￣ ｔ ４ ． ４卷第 ６期
法并 进 行 了 比较 。
１ 主 要仪 器和 样 品 主要仪 器 ：
２ ． ３ 直读光谱 仪 直 读光 谱仪 的工作条 件见 表 ３ 。
表 ３ 直 读 光 谱 仪工 作 条 件
Ｚ Ｅ Ｅ ｎ ｉ ｔ ７ ０ ０ Ｐ原 子 吸收 光谱仪 （ 德 国耶拿分 析仪 器 股
份公司）
７ ３ ０ ０ Ｖ 电感 耦 合 等 离 子 体 发 射 光 谱 仪 （ Ｉ Ｃ Ｐ） （ 美 国
多糖的结构分析课件
第6章 多糖的结构分析
多糖结构测定的意义 从天然物质中分离得到的单体多
糖化合物即使具有很强的活性与具有较 大的安全性, 但如果结构不清楚, 则无法 进一步开展其药理学与毒理学研究, 也 就不可能进行人工合成或结构修饰改造 工作, 更谈不上进行高质量的新药开发 研究, 其学术及应用价值将会大大降低。
OH 2 OC2 H OHC2 H OH
以1→2位键合(1→2,6类似)
O H H
HO
0
H O H
C2 H OH
CH2O H
IO -4
O N aB H 4
O H+
CH 2OH
CH OO HCOOC H 2O HH O H 2C
OH 2O2CHOH
O
CH 2OH
以1→4位键合(1→4,6类似)
.
第6章 多糖的结构分析
3.甲基化（单糖残基的连接方式） 是用甲基化试剂将糖分子中的游离羟基
甲基化成甲醚，然后水解，检识这些甲基糖 产物，就可能推测组成多糖分子中单糖间连 接的位置（羟基所在的位置，即为原来单糖 残基的连接点）。 （氢化钠、碘甲烷） （1）制备负碳离子：无水二甲亚砜30ml于 100ml试剂瓶中，通入氮气几分钟后，加入 1.5gNaH，渐渐加温，然后恒温在65-70℃46小时。最终颜色为墨绿色。整个过程通氮， 并搅拌。
多糖的非还原末端或非末端的（1→6）键与邻三元醇相似, 其与过碘酸盐作用则糖环开裂得到一分子比例的甲酸而消耗二 分子比例之过碘酸盐。非末端的（1→2）或（1→4）键与邻二 元醇相似, 其开裂后产生二分子醛而消耗一分子比例之过碘酸盐。 对于非末端的（1→3）键或C-2和C-4有分枝的则不受过碘酸盐 影响。因此多糖氧化后定量测定过碘酸盐的消耗、甲酸的生成 和剩余糖的比例, 就可确定多糖中各种单糖的键型及其比例。
现代分析化学实验(2012-9-25)
现代分析化学实验2012年9月25日前言现代分析化学实验是一门实践性很强的学科，它分为两大部分：化学分析实验和仪器分析实验。
其实验课时占整个课时的一半甚至高出理论课课时，但仍觉得不够。
因为，现代分析化学实验技术发展快速，新技术、新方法不断涌现，实验教材很难跟上分析化学技术的发展步伐，加上分析仪器种类多，同一种类型型号多，更新快。
我们在编写此《现代分析化学实验》的编写过程中，分析仪器尽量使用国产仪器；在贯彻教学大学本科生分析化学教学大纲对基本仪器、基本方法和基本操作技术训练的要求同时，编写的实验项目力求理论联系实际，做到适用、简便、先进。
本书的内容包括两大部分：化学分析实验和仪器分析实验。
化学分析和仪器分析都是分析化学不可或缺的内容。
化学分析法适用于常量和半微量组分的分析，具有简单，价廉，准确度和精密度高的特点；国家标准的分析方法中就规定有大量的化学分析法，而且随着自动滴定仪等的出现，化学分析法也更加快捷准确。
仪器分析法特别适用于微量组分、痕量组分、超痕量组分的分析，具有灵敏度高、分析速度快、自动化程度高的特点。
由此，化学分析法和仪器分析法是相辅相成的，在应用上应根据具体情况，取长补短，互相配合，充分发挥各种方法的特长，才能更好地解决分析化学中的问题。
化学分析实验中包含化学分析实验的基本知识、基本操作技能及化学分析实验项目。
仪器分析实验包含仪器分析实验的基本知识、常用仪器使用说明和仪器分析实验项目。
其宗旨在于加强实验基本技能训练，系统掌握分析化学基础和现代技术，巩固和加深对分析化学理论知识的理解和应用，同时适应新形势下分析实验课教学改革要求。
那就既要增加知识面，获得知识，提高素质，又通过综合和设计实验训练，调动积极性，改变单纯依赖实验讲义做实验的现象，培养和启发同学们发现问题，思考问题，自己动手解决问题的综合能力。
教材首先选用有代表性的分析化学基础实验内容作为必做实验，目的是熟悉和掌握常用分析实验操作，加深理解基础理论知识的和常用分析仪器的原理，并且对现代比较先进的分析仪器使用有一定程度的了解。