大鼠神经营养因子3(NT-3)说明书
大鼠大鼠神经营养因子神经营养因子3（NT-3）酶联免疫酶联免疫分析分析分析
试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用。
检测范围检测范围：： 96T
20 ng/L -480 ng/L
使用目的使用目的：： 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及组织样本中神经营养因子3（NT-3）含量。 实验原理 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠神经营养因子3（NT-3）水平。用纯化的大鼠神经营养因子3（NT-3）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入神经营养因子3（NT-3），再与HRP标记的神经营养因子3（NT-3）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的神经营养因子3（NT-3）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中大鼠神经营养因子3（NT-3）浓度。
试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml×1瓶 7 终止液 6ml×1瓶
2 酶标试剂 6ml×1瓶 8 标准品（960 ng/L） 0.5ml×1瓶
3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶
4 样品稀释液 6ml×1瓶 10 说明书 1份
5 显色剂A液 6ml×1瓶 11 封板膜 2张
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个
标本标本要求要求 1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融 2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。 操作步骤 1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
480 ng/L 5号标准品 150µl的原倍标准品加入150µl标准品稀释液
240 ng/L 4号标准品 150µl的5号标准品加入150µl标准品稀释液
120 ng/L 3号标准品 150µl的4号标准品加入150µl标准品稀释液
60 ng/L 2号标准品 150µl的3号标准品加入150µl标准品稀释液
30 ng/L 1号标准品 150µl的2号标准品加入150µl标准品稀释液
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、标准孔、
待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl，待测样品孔中先加样品稀释液40µl，然后再加待测样品10µl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。 3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。 4. 配液：将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50µl，空白孔除外。 7. 温育：操作同3。 8. 洗涤：操作同5。 9. 显色：每孔先加入显色剂A50µl，再加入显色剂B50µl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色10分钟. 10. 终止：每孔加终止液50µl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作程序总结操作程序总结：：
计算 以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。 注意事项 1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。 2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。 3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。 4． 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请最后乘以总稀释倍数（×n×5）。 5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。 6．底物请避光保存。 7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9．本试剂不同批号组分不得混用。 保存条件及有效期 1．试剂盒保存：；2-8℃。 2．有效期：6个月
新生大鼠脑白质损害时神经胶质细胞凋亡与神经营养因子GDNF的表达变化
第３７卷第２期第２２５页 ２００８年４月 华中科技大学学报（医学版） Ａｃｔａ Ｍｅｄ Ｕｎｉｖ Ｓｃｉ Ｔｅｃｈｎｏｌ Ｈｕａｚｈｏｎｇ Ｖ０Ｉ．３７ Ｎｏ．２ Ｐ．２２５ Ａｐｒ． ２００８
新生大鼠脑白质损害时神经胶质细胞凋亡
与神经营养因子ＧＤＮＦ的表达变化
覃 琳 熊 英△ 阳 倩 卓平辉
四川Ｉ大学华西第二医院新生儿科，成都６１００４１
摘要 目的探讨新生大鼠脑白质损害时神经胶质细胞凋亡与内源性胶质细胞源性神经营养因子（ＧＤＮＦ）表达的
变化。方法实验组和对照组各４５只大鼠分别于缺氧缺血后３０ ｍｉｎ、１ ｈ、４ ｈ、１２ ｈ、１ ｄ、３ ｄ、７ ｄ、１４ ｄ及２１ ｄ处死，免疫 组化（ｓＰ）法检测ＧＤＮＦ，ＴＵＮＥＬ法测定细胞凋亡。结果新生大鼠脑白质损害时，细胞凋亡在缺氧缺血后３ ｄ达到高
峰，与对照组比较，在４ ｈ、１２ ｈ、１ ｄ、３ ｄ、７ ｄ均有统计学意义（均Ｐ＜０．０５）。实验组ＧＤＮＦ表达在缺氧缺血后７ ｄ达到
高峰，与对照组相比，在３、７、１４ ｄ有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）。结论新生大鼠脑白质损害时，ＧＤＮＦ于细胞凋亡的高峰
时间开始表达，与此同时，细胞凋亡逐渐减少。表明在缺氧缺血所致的新生大鼠脑白质损害时，内源性ＧＤＮＦ的表达升
高可能通过抑制细胞凋亡来发挥保护作用，并对后期的神经修复起一定作用。
关键词脑白质损害；脑室周围白质软化； 神经营养因子； 细胞凋亡 中图法分类号Ｒ７２２．６
Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＧＤＮＦ Ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｏｆ ｎｅｕｒｏｇｌｉａｌ
Ｃｅｌｌｓ ｉｎ Ｎｅｏｎａｔａｌ Ｒａｔｓ ｗｉｔｈ Ｗｈｉｔｅ Ｍａｔｔｅｒ Ｄａｍａｇｅ
Ｑｉｎ Ｌｉｎ，Ｘｉｏｎｇ Ｙｉｎｇ△，Ｙａｎｇ Ｑｉａｎ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，Ｗｅｓｔ Ｃｈｉｎａ Ｓｅｃｏｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｉｃｈｕａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｅｎｇｄｕ ６１００４１
神经营养因子的两类受体：Trks及p75(综述)
中国神经免疫学和神经 苤圭 生 旦蔓！鲞笙 塑 』 ！ ！ ： ！ ！ ： ！：！！ ： 神经营养因子的两类受体：Ｔｒｋｓ及ｐ ７ ５（Ｎ￣） 杨卫红 ，林敬明 （第一军医大学附属珠江医院．１．神经内科，２．药剂科，广东广州５１０２８２） 摘要：此文简要回顾了神经营养因子的两类受体——酪氨酸激酶受体家族（Ｔｒｋｓ）￣ｐ７５的分子结构、分布、相 互作用，与神经营养因子的结合及其后的信号传导路径。 关键词：Ｔｒｋｓ；ｐ７５；神经营养因子 中图分类号：Ｒ３３８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—２９６３（２００２）０４—０２４４—０３ 神经营养因子（ＮＴ）家族包括神经生长因子 （ＮＧＦ）、脑衍生的神经营养因子（ＢＤＮＦ）、ＮＴ一３、 ＮＴ一４／５￣Ｉ］，他们之间有很高的同源性，作用也很相 近，其受体分为两类：酪氨酸激酶受体家族（Ｔｒｋｓ） 及ｐ７５受体。 ｌ Ｔｒｋｓ １．１ Ｔｒｋｓ的结构及其分布Ｔｒｋｓ包括ＴｒｋＡ、 ＴｒｋＢ及ＴｒｋＣ，其细胞膜外结构包括独特的ＩｇＧ— ｃ 区及富含半胱氨酸、亮氨酸的重复结构，膜内结 构为酪氨酸激酶及短的Ｃ末端（图１）。ＴｒｋＡ分布 于感觉、交感神经元、纹状体及大鼠前脑基部的胆 碱能神经元等，ＴｒｋＢ及ＴｒｋＣ在中枢神经系统 （ＣＮＳ）中的分布范围则要广得多［２］。 图１ Ｔｒｋｓ及ｐ７５结构模式图 １．２ ＮＴ与Ｔｒｋｓ的结合Ｔｒｋｓ的ｌｇＧ—Ｃ２区是 ＮＴ的结合位点，为结晶状结构，ＮＴ与Ｔｒｋｓ之间 的亲和力高（Ｋｄ约为１０ ｔｏｏｌ／Ｌ），结合后的解离 速度很慢。一般来说，ＴｒｋＡ是ＮＧＦ的受体，ＴｒｋＢ 是ＮＴ一４／５和ＢＤＮＦ的受体，ＴｒｋＣ则是ＮＴ一３的 受体，在一些特殊情况下，ＮＴ一３也可与ＴｒｋＡ、 ＴｒｋＢ结合。 １．３ Ｔｒｋｓ的激活Ｔｒｋ与ＮＴ结合后形成二聚 体并被初步激活一其“活化圈”内的酪氨酸被磷酸 化，继而整个Ｔｒｋ被激活一其“活化圈”外的酪氨 酸自动磷酸化并与信号传导分子连接一使信号传 导分子活化，信号被传播。在没有ＮＴ的情况下，高 密度表达的Ｔｒｋ还可通过相互作用引发自动磷酸 化而被激活口］ 。神经节苷脂及神经酰胺等糖脂类物 质能通过增强Ｔｒｋ—Ｔｒｋ间的相互作用引发Ｔｒｋ非 ＮＴ依赖性的磷酸化并激活其后的信号传导，这可 能是此类物质有神经营养作用的原因之一［４］。 １．４ Ｔｒｋｓ的信号传导系统 １．４．１ Ｔｒｋｓ的上游信号传导系统： １．４．１．１ Ｙ４９０、Ｙ７８５及Ｙ７５１：人类Ｔｒｋ（ｈＴｒｋ） 与ＮＴ结合后，其上的２个酪氨酸残基Ｙ４９Ｏ及 Ｙ７８５自动磷酸化，Ｙ７８５靠近Ｔｒｋ的Ｃ端，磷酸化 的Ｙ７８５（ｐＹ７８５）￣将Ｔｒｋ与磷酸酶Ｃ一７（ＰＬＣ一７） 的ＳＨ２区连接，使ＰＬＣ一－／磷酸化并被激活；磷酸 化的Ｙ４９Ｏ（ｐＹ４９Ｏ）能促进Ｔｒｋ与Ｓｈｃ结合，并使 Ｓｈｃ中的酪氨酸残基磷酸化，磷酸化的Ｓｈｃ与Ｇｒｂ一 ２／ＳＯＳ复合物相互作用，从而激活Ｒａｓ信号传导 路径。Ｔｒｋ上的Ｙ ７ ５１残基能使Ｔｒｋ与磷脂酰肌 醇一３ 激酶（ＰＩ３Ｋ）连接，从而激活ＰＩ３Ｋ，ＰＩ３Ｋ路 收稿Ｅｔ期：２００１—０３—１９；修订日期：２００１ ０７—０２ 作者简介：杨卫红（１９６７一）・女・ｔｌＪＮｉ￣＂人・硕ｊ ・主冶医师（讲师）、主要从事神经免疫学研究。通讯地址：第一军医大学附属珠江医院神经内 科、Ｆ＇Ｊｑ１
乙醇性痴呆大鼠海马区脑源性神经营养因子的表达变化
中国神经免疫学和神经病学杂志２０１３年１１月第２ｏ卷第６期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｎｅｕｒｏｉｍｍｕｎｏｌ＆Ｎｅｕｒｏｌ ２０１３，Ｖｏ１．２０，Ｎｏ．６ ・４０５・
乙醇性痴呆大鼠海马区脑源性神经营养
因子的表达变化
杨海玉 吴晓牧 曾玉娥 刘勇
摘要：目的 探讨乙醇性痴呆大鼠海马区脑源性神经营养因子（ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ，ＢＤＮＦ） 的表达变化及其与学习记忆功能损害的关系。方法 ＳＤ大鼠随机分为２组，每组６只，其中一组按体质量８ ｍＬ／（ｋｇ・ｄ）给予２Ｏ （体积分数）乙醇灌胃持续２８ ｄ，建立乙醇性痴呆大鼠模型；另一组予等量生理盐水灌胃作 为对照。观察两组大鼠Ｍｏｒｒｉｓ水迷宫行为（逃避潜伏期），采用ＨＥ染色方法观察海马组织形态改变，采用免疫 组化检测大鼠海马区ＢＤＮＦ表达。结果 乙醇组大鼠灌胃后逃避潜伏期时间（ＥＬ）［（１６．３９±３．ｕ）ｓ３较灌胃前 ［（７．１２±１．１８）ｓ］明显延长（Ｐ＜Ｏ。０５）；与生理盐水组灌胃后ＥＬ＜（５．７６±０．８６）ｓ］比较，乙醇组大鼠灌胃后ＥＬ 明显延长（Ｐ＜０．０１），且海马形态结构明显破坏。免疫组化结果显示，与生理盐水组相比，乙醇组大鼠海马齿状 回（ＤＧ）区（积分光密度值为ｌ１１．６５±１４．４４ ｖｓ．６１．５５±１７．４４）和ＣＡ１区（积分光密度值为８８．９８±９．１５ ｖｓ． ５５．２１±８．９３）ＢＤＮＦ相对表达明显降低（均Ｐ＜０．０５）。结论 乙醇可导致大鼠学习记忆功能及海马组织损 伤，其机制可能与抑制海马ＢＤＮＦ表达有关。 关键词：乙醇性痴呆；学习记忆；脑源性神经营养因子；海马；ＳＤ大鼠
中图分类号：Ｒ７４２．８ ９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６－２９６３（２０１３）０６—０４０５—０４
Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｔｈｅ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｏｆ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｗｉｔｈ ａｌｃｏｈｏｌ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｄｅｍｅｎｔｉａ ｙＡＮＧ Ｈａｉ—ｙｕ ， Ｕ Ｘｉａｏ—ｍｕ，ＺＥＮＧ Ｙｕ—ｅ，ＬＩＵ Ｙｏｎｇ． Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｊｉａｎｇｘｉ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｐｅｏｐｌｅ’ｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｎａｎｃｈａｎｇ Ｊｉａｎｇｘｉ ３３０００６，Ｃｈｉｎａ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＹＡＮＧ Ｈａｉ—ｙｕ，Ｅｍａｉｌ：ｙａｎｇｈａｉｙｕ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｒｎ ＡＢＳＴＲＡＣＴ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ（ＢＤＮＦ）ｉｎ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｅｔｈａｎｏｌ—ｉｎｄｕｃｅｄ ｄａｍａｇｅ ｏｆ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ｉｎ ａｌｃｏｈｏｌ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｄｅｍｅｎｔｉａ（ＡＡＤ）ｒａｔ ｍｏｄｅ１． Ｍｅｔｈｏｄｓ ＳＤ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ（６ ｒａｔｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ）ａｎｄ ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃｌｙ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏｌ （２０ ，８ ｍｌ／ｋｇ）ｏｒ ｓａｌｉｎｅ（ａｓ ｃｏｎｔｒｏ１）ｆｏｒ ２８ ｄａｙｓ．Ａｎｄ ａｎｉｍａｌｓ ｗｅｒｅ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｂｙ ｏｂｓｅｒｖｉｎｇ Ｍｏｒｒｉｓ Ｍａｚｅ ｂｅｈａｖｉｏｒ（ｅｓｃａｐｅ ｌａｔｅｎｃｙ，ＥＬ）ａｎｄ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｗｉｔｈ ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＢＤＮＦ ｗａｓ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｐｒｉｏｒ ｔｏ ｅｔｈａｎｏｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ［（７．１２土１．１８）ｓ］，ｔｈｅ ＥＬ ｔｉｍｅ ｏｆ ｒａｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｅｔｈａｎｏｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｅｘｔｅｎｄｅｄ ａｆｔｅｒ ｅｔｈａｎｏｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ［（１６．３９土３．１１）ｓ，Ｐ＜０．ｏ５］．Ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓａｌｉｎｅ ｇｒｏｕｐ［（５．７６±０．８６）ｓ］，ｔｈｅ ＥＬ ｔｉｍｅ ｏｆ ｒａｔ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｅｔｈａｎｏｌ ｗａｓ ａｐｐａｒｅｎｔｌｙ ｅｘｔｅｎｄｅｄ ａｆｔｅｒ ｅｔｈａｎｏｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ［（１６．３９±３．１１）ｓ，Ｐ＜ ０．０ １）］．Ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｗａｓ ａｐｐａｒｅｎｔｌｙ ｄａｍａｇｅｄ ｉｎ ｒａｔ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ａｆｔｅｒ ｅｔｈａｎｏｌ—ｉｎｔｒａｇａｓｔｒｉｃ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．Ａｓ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓａｌｉｎｅ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ＢＤＮＦ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ（ＤＧ：１ｌ１．６５±１４．４４ ｖｓ．６１．５５±１７．４４；ＣＡ１：８８．９８±９．１５ ｖｓ．５５．２１± ８．９３，Ｐ＜０．０５）ｏｆ ｒａｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈａｎｏ１．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎｓ Ｔｈｅ ｄａｍａｇｅ ｏｆ ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ｒａｔｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｅｔｈａｎｏｌ ｉｓ ｃｌｏｓｅｌｙ ｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｅｔｈａｎｏｌ ｏｎ ＢＤＮＦ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ａｌｃｏｈｏｌ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｄｅｍｅｎｔｉａ；ｌｅａｒｎｉｎｇ ａｎｄ ｍｅｍｏｒｙ；ＢＤＮＦ；ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ；ＳＤ ｒａｔ
电针对抑郁模型大鼠五羟色胺及脑源性神经营养因子的影响
中日友好医院学报２０１２年第２６卷第５期Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＣｈｉｎａ—Ｊ＿印０ｎ Ｆｒｉｅｎｄｓｈｉｐ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，２０１２ Ｏｃｔ，ＶｏＬ２６，Ｎｏ．５ ２８７
电针对抑郁模型大鼠
五羟色胺及脑源性神经营养因子的影响
史榕荇 ，吴 茜 ，于战歌 ，李 辉 ，田旭升 ，唐学章
（１．中日友好医院针灸科，北京 １０００２９；２．黑龙江中医药大学，哈尔滨 １５００４０）
摘要 目的：观察电针对抑郁模型大鼠５一羟色胺（５－ＨＴ）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）表达水平的影响，探讨
电针改善大脑功能可能存在的机制。方法：采用慢性应激抑郁模型，将大鼠分为空白对照组、抑郁模型组、阳性 西药组、电针治疗组（以电针刺激百会、印堂穴）；Ｅｌｉｓａ法检测各组大鼠海马内５－ＨＴ含量、Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ法检测 海马内ＢＤＮＦ蛋白表达水平。结果：给予慢性应激刺激后，模型组大鼠海马５－ＨＴ含量较正常组显著减少（Ｐ＜ ０．Ｏ１），电针组大鼠海马５－ＨＴ含量较模型组显著增加（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）。Ｗｅｓｔｅｒｎ—ｂｌｏｔ印迹结果显示与正常组相比，模 型组ＢＤＮＦ蛋白表达量显著降低（Ｐ＜０．０１）：电针组ＢＤＮＦ蛋白表达量较模型组显著增加（Ｐ＜０．０１）。结论：提高 海马内５一ＨＴ含量及ＢＤＮＦ表达，增强神经可塑性是电针抗抑郁可能的机制。 关键词：抑郁症：电针；脑源性神经营养因子 中圈分类号：Ｒ７４９．９２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１—００２５（２０１２）０５—０２８７—０３
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１００１—００２５．２０１２．０５．０１０
Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｌｅｃｔｒｏａｃｕｐｕｎｃｔｕｒｅ ｏｎ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ５－ｈｙｄｒｏｘｙｔｒｙｐｔａｍｉｎｅ ａｎｄ ｂｒａｉｎ—－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈ－ ｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ ｒａｔｓ／／ＳＨＩ Ｒｏｎｇ－ｘｉｎｇ，ＷＵ Ｑｉａｎ，ＹＵ Ｚｈａｎ－ｇｅ，ｅｔ ａｌ／／Ｊｏｕｒｎａｉ ｏｆ Ｃｈｉｎａ－Ｊａｐａｎ
间充质干细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑内胶质细胞源性神经营养因子含量的影响
・２３６０・ 广东医学２０１１年９月第３２卷第ｌ８期 Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ Ｓｅｐ．２０１１，Ｖｏ１．３２，Ｎｏ．１８
间充质干细胞移植对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠
脑内胶质细胞源性神经营养因子含量的影响
周媛莉 ，苏浩彬
广东省广州市妇女儿童医疗中心儿内科（５１０１２０）； 中山大学孙逸仙纪念医院新生儿科（广州Ｉ ５１０１２０） ：ｌ：
【摘要】 目的观察间充质干细胞（ＭＳＣｓ）移植对缺氧缺血性脑损伤（ＨＩＢＤ）新生大鼠脑内胶质细胞源性神
经营养因子（ＧＤＮＦ）含量的影响，初步探讨ＭＳＣｓ移植治疗新生大鼠ＨＩＢＤ的机制。方法体外分离培养４～６周
龄ＳＤ大鼠骨髓ＭＳＣｓ。采用新生７日龄ＳＤ大鼠结扎左颈总动脉后低氧暴露２．５ ｈ制作ＨＩＢＤ模型。２４ ｈ后，
ＭＳＣｓ移植组（ｎ＝２０）经尾静脉注射ｌ×１０。个／ｍＬ ＭＳＣｓ，ＰＢＳ对照组（ｎ＝２０）尾静脉注射ＰＢＳ（０．０１ ｍＬ／ｇ），ＨＩＢＤ
手术组（ｎ＝２０）和正常对照组（ｎ＝２０）不作注射。采用大鼠改良神经功能损害评分及ＥＬＩＳＡ法分别检测移植后
１、３、７、１４ ｄ各组大鼠神经功能及脑内ＧＤＮＦ含量。结果ＭＳＣｓ移植后７、１４ ｄ，ＭＳＣｓ移植组的神经功能损害评分
明显低于ＰＢＳ对照组和ＨＩＢＤ手术组（Ｐ＜０．０５）。造模后，所有ＨＩＢＤ大鼠的ＧＤＮＦ含量均较正常对照组明显升
高（Ｐ＜０．０５）。与ＰＢＳ对照组和ＨＩＢＤ手术组比较，ＭＳＣｓ移植组在各个时间点的ＧＤＮＦ含量升高更为明显（Ｐ＜
０．０５）。结论ＭＳＣｓ移植可改善ＨＩＢＤ新生大鼠的神经功能，促进脑内ＧＤＮＦ的合成和分泌，从而发挥神经保护
和修复作用。
【关键词ｌ 间充质干细胞；缺氧缺血性脑损伤；胶质细胞源性神经营养因子
Ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｏｎ ＧＤＮＦ ｉｎ ｎｅｏｎａｔａｌ ｒａｔｓ、 ｔｈ ｈｙｐｏｘｉｃ—ｉｓｃｈｅｍｉｃ ｂｒａｉｎ
“黏”“粘”的用法
中国中西医结合儿科学２０１０年１月第２卷箩 塑 ！！ 望！！！ ！ ！！ ！Ｅ生 ！ ！ ！ ： 环境，如调节众多神经营养因子或激素的分泌等，从 而进一步激活处于静止状态的干细胞Ｌ１］。众多研究 已经表明，早期干预能刺激脑损伤大鼠的热休克蛋 白７０阳性神经元明显增加，热休克蛋白７Ｏ是大脑 对不良刺激的反应性蛋白，它可以保护脑梗死灶周 边区（半暗带）的神经元，同时也保护了迁移至该区的 ＮＳＣｓ，以防其受自由基、兴奋性氨基酸的损伤Ｌ５］。同 时神经生长因子／营养因子，迁移相关蛋白如神经肽 Ｙ、神经营养因子３、脑源性神经营养因子、表皮细胞 生长因子、胰岛素样生长因子１、神经生长因子受体 （Ｔｒｋ）、ｒｅｅｌｉｎ蛋白的合成也明显增强Ｌ１ 。这些因子 对干细胞增生、分化潜能的激发具有重要的作用。如 往实验动物的纹状体、侧脑室等部位灌注外源性的生 长因子能明显促进内源性ＮＳＣｓ的增殖、分化和迁 移［１ 。此外，早期干预还有促进降钙素基因相关肽、 一氧化氮等血管舒张因子的合成和释放改善脑血管 循环，减轻脑细胞缺氧，抑制伤灶局部炎症反应，改善 大脑电生理活动等功效，这些条件的变化也会进一步 影响ＮＳＣｓ的增殖分化［Ｊ引。Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ等［１巧的研究 结果也证实了该观点，他们发现丰富环境可以促进 脑缺血大鼠前脑室下带ＮＳＣｓ的增殖。本研究结果 提示早期干预在降低宫内感染所致脑瘫神经组织再 生方面有积极的作用，可能是脑损伤大鼠运动和学 习能力恢复的重要机制之一，也为宫内感染所致新 生儿脑损伤康复提供一种有效治疗手段。 （本文图１见封三） 参考文献 ［１］ Ｓｕｇａｙａ Ｋ．Ｎｅｕｒｏｒｅｐｌａｃｅｍｅｎｔ ｔｈｅｒａｐｙ ａｎｄ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌ ｂｉｏｌｏｇｙ ｕｎｄｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ［Ｊ￣．Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉ，２００３，６０（９）： １８９Ｉ－Ｉ９０２． ［２］李树春．小儿脑性瘫痪Ｉ＇Ｍ３．郑州；河南科学技术出版社， ２０００：１—３． ［３］李晓捷，高晶，孙忠人．宫内感染致早产鼠脑瘫动物模型制备 及其鉴定的实验研究ＥＪ－Ｉ．中国康复医学杂志，２００４，１９（１２）， ８８５—８８９． ［４］李晓捷，吕智海，孙忠人．早期丰富环境刺激对脑瘫大鼠脑发 育的影响ＥＪ］．中国康复医学杂志，２００６，２１（１２）；１０６１—１０６４． ・ ７・ ［５］李玲，袁华，牟翔，等．康复训练对大鼠脑梗死后Ｆ０ｓ和 ＨＳＰ７０表达的影响［Ｊ］．第四军医大学学报，２００１，２２（１０）： ９Ｏｌ－９０４． ［６］Ｌｏｒｅｎｚ ＪＭ，Ｗｏｏｌｉｅｖｅ ＤＥ，Ｊｅｔｔｏｎ ＪＲ，ｅｔ ａ１．Ａ ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅ ｒｅ— ｖｉｅｗ ｏｆ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ ｄｉｓａｂｉｌｉｔｙ ｉｎ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｐｒｅｍａｔｕｒｅ ｎｅｗｂｏｒｎｓ［Ｊ］．Ａｒｃｈ Ｐｅｄｉａｔｒ Ａｄｏｌｅｓｅ Ｍｅｄ，１９９８， １５２（５）：４２５—４３５． ［７］雷志年．神经干细胞研究进展及应用前景立体定向和功能性 ［Ｊ３．神经外科杂志，１９９９，１２（４）：５２－５５． ［８］刘辉，杨树源．神经干细胞及其临床应用前景［Ｊ］．国外医学： 神经病学神经外科学分册，２０００．２７（１）：１０－１２． ［９］Ｃｉａｒｏｎｉ Ｓ，Ｃｅｃｃｈｉｎｉ Ｔ，Ｆｅｒｒｉ Ｐ，ｅｔ ａ１．Ｉｍｐａｉｒｍｅｎｔ ｏｆ ｎｅｕｒａｌ ｐｒｅ— ｃｕｒｓｏｒ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｉｎｃｒｅａｓｅｓ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｏｆ ｃｅｌｌ ｐｒｏｇｅｎｙ ｉｎ ｔｈｅ ａ， ｄｕｈ ｒａｔ ｄｅｎｔａｔｅ ｇｙｒｕｓＥＪ］．Ｍｅｃｈ Ａｇｅｉｎｇ Ｄｅｖ，２００２，１２３（１０）： ｌ３４１－１３５２． ［１Ｏ３ 张国庆．丰富环境干预对新生大鼠ＨＩＢＤ的神经康复作用及 其机制的研究［Ｊ］．中华神经外科杂志，２００４，９（２０）：４０３－４０５． ［ｎ］骆健明，庄明华，刘明发，等．缺血缺氧可促进新生鼠神经于细 胞的增殖［刀．中国神经精神疾病杂志，２００５，３１（５）：３７９—３８０． ［１２］Ｌｅｖｉｓｏｎ ＳＷ，Ｒｏｔｈｓｔｅｉｎ ＲＰ，Ｒｏｍａｎｋｏ ＭＪ，ｅｔ ａ１．Ｈｙｐｏｘｉａ／ｉｓ— ｃｈｅｍｉａ ｄｅｐｌｅｔｅｓ ｔｈｅ ｒａｔ ｐｅｒｉｎａｔａｌ ｓｕｂｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ ｚｏｎｅ ｏｆ ｏｌｉｇｏ— ｄｅｎｄｒｏｃｙｔｅ ｐｒｏｇｅｎｉｔｏｒｓ ａｎｄ ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓＥＪ＇１．Ｄｅｖ Ｎｅｕｒｏｓ— ｃｉ．２００１，２３（３）：２３４—２４７． ［１３］蔡文琴，李海标．发育神经生物学［Ｍ］．北京ｔ科学出版社， ２００１：５７－２００． ［１４３陈敏，刘玲，陈燕惠．早期干预对脑损伤大鼠神经可塑性相关 蛋白的影响［Ｊ］．福建医科大学学报，２００６，４０（４）：３４４—３４７． ［１５］Ｍａｒｔｅｎｓ ＤＪ，Ｓｅａｂｅｒｇ ＲＭ，Ｖａｎ ｄｅｒ Ｋｏｏｙ ｎ Ｉｎ ｖｌｖｏ ｉｎｆｕｓｉｏｎｓ ｏｆ ｅｘｏｇｅｎｏｕｓ ｇｒｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒｓ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｆｏｕｒｔｈ ｖｅｎｔｒｉｃｌｅ ｏｆ ｔｈｅ ａ— ｄｕｈ ｍｏｕｓｅ ｂｒａｉｎ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｅｕｒａｌ ｐｒｏｇｅｎｉ－ ｆｏｒ ａｒｏｕｎｄ ｔｈｅ ｆｏｕｒｔｈ ｖｅｎｔｒｉｃｌｅ ａｎｄ ｔｈｅ ｃｅｎｔｒａｌ ｃａｎａｌ ｏｆ ｔｈｅ ｓｐｉｎａｌ ｃｏｒｄ［Ｊ］．Ｅｕｒ Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２００２，１６（６）：１０４５－１０５７． ［１６３ Ｚｈａｎｇ ＲＬ，Ｚｈａｎｇ Ｚ。Ｚｈａｎｇ Ｌ．Ｄｅｌａｙｅｄ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｗｉｔｈ ｓｉｌｄｅｎａ— ｆｉＩ ｅｎｈａｎｃｅｓ ｎｅｕｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ ｉｍｐｒｏｖｅｓ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｎ ａｇｅｄ ｒａｔｓ ａｆｔｅｒ ｆｏｃａｌ ｃｅｒｅｂｒａｌ ｉｓｃｈｅｍｉａ［Ｊ］．Ｊ Ｎｅｕｒｏｓｅｉ Ｒｅｓ， ２００６，８３（７）：４７２—４８２． ［１７］Ｊｏｈａｎｓｓｏｎ ＢＢ．Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ａｎｄ ｃｅｌｌｕｌａｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎ ｔａｌ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ａｆｔｅｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｂｒａｉｎ ｉｎｆａｒｃｔ３［刀．Ｒｅｓｔｏｒ Ｎｅｕｒｏｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２００４，２２（３—５）：１６３－１７４． （收稿日期：２０１０－０１一ｉ０） （本文编辑ｔ黄伟） 黏 ”“粘”的用法 黏（ｎｉｄｎ）：黏是指像糨糊或胶水等具有能使一个物体附着在另一个物体上的性质，常作名词性词素。如黏土、黏性（黏性土）、黏 米、黏膜、黏液、黏稠、黏度（动力或运动黏度）、黏滞、黏着（黏着力。黏着系数）、发黏、黏附、黏合（黏合剂）、黏结（黏结力）、黏糊。 粘（ｚｈａｎ）：粘是用黏的东西附着在物体上或用黏的东西使物体连接起来，常作动词性词素。如粘连、粘贴、粘在一起、不粘锅。
大鼠睫状神经营养因子siRNA的设计及其有效性验证的体外实验方法
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1页 大鼠睫状神经营养因子siRNA的设计及其有效性验证的体外实验方法
作者：郑翔， 李瑛， 孙运花， 丁艳， 毕文杰， 周雪
【关键词】 RNA干扰; 睫状神经营养因子(CNTF); 大鼠; 体外实验
RNA干扰(RNAi)是近年发展起来的一项具有巨大医疗应用潜力的反向遗传学技术[1]。该技术有双链干扰RNA设计与合成、序列有效性的体外实验验证和体内实验等重要环节[2]。其中，前两个环节是保证实验成功的先决条件。与植物和低等动物不同，在哺乳动物细胞内进行RNA干扰的条件更加苛刻，尚存在许多困难。比如，体外实验中，小干扰RNA(siRNA)的设计和有效性验证必须依据特定的规律[3-5]，并且对操作的要求较高。尽管如此，我们在实验中不断总结经验教训，认为很多siRNA的设计、合成和效应验证在操作上有很强的规律可循，具备一定经验后就能事半功倍。因此，我们以大鼠睫状神经营养因子(ciliary neurotrophic factor, CNTF)的RNA干扰为例，介绍siRNA设计合成及其体外有效性验证的全过程，，希望这些经验能够为其他实验人员提供一些有帮助的信息。
1 材料和方法
1.1 大鼠CNTF siRNA分子的设计合成和修饰
在PubMed主页(网址http:∥，大鼠CNTF的cDNA序列链接Accession号为 “NM_013166”。进入Invitrogen公司的BLOCKiTTM
RNAi Designer主页，选择“siRNA”设计模式(即19nt靶序列选择)，如有你有帮助，请购买下载，谢谢！
2页 然后依次进行如下操作：将大鼠CNTF mRNA的Accession号输入到“Accession number”对话框中，勾选“Open reading frame(ORF)”选项(表示在开放读码框中寻找靶序列)，选择物种为“RatRattus
睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后视网膜神经节细胞的保护作用
４０６ 内蒙古医学杂志Ｉｎｎｅｒ Ｍｏｎｇｏｌｉａ Ｍｅｄ Ｊ ２００８年第４０卷第４期
睫状神经营养因子对大鼠视神经损伤后
视网膜神经节细胞的保护作用
王山丹 ，钱志敏
（１．内蒙古医学院２００５级研究生，内蒙古呼和浩特０１００５９；
２．内蒙古自治区医院眼科，内蒙古呼和浩特０１００１７）
［摘要］目的：探讨玻璃体腔内注射外源性睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）是否对大鼠视神经中度不全损伤
视网膜神经节细胞（ＲＧＣｓ）具有保护作用。方法：采用无创血管钳对成年大鼠造成视神经中度不全损伤，实
验组伤后即时１、２、４周分别向玻璃体腔内注射ＣＮＴＦ溶液２ ｌ；同实验组操作，对照组在每个时间点向玻璃
体腔内注射２ 双蒸水。在伤后１、２、４、８周时分别做生长相关蛋白一４３（ｇｒｏｗｔｈ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｐｒｏｔｅｉｎ一４３，
ＧＡＰ一４３）免疫组织化学检测和光镜的组织学观察。结果：①伤后１周对照组和实验组视网膜均有水肿，
ＲＧＣＳ肿胀。伤后２周２组视网膜神经节细胞层（ＧＣＬ）均变稀疏，实验组水肿明显减轻。伤后４周水肿消
退，ＧＣＬ层细胞数明显下降。８周实验组视网膜厚度正常，对照组各层变薄。②伤后１周对照组和实验组 ＧＡＰ一４３在ＧＣＬ层表达呈阳性。伤后２、４、８周ＧＡＰ一４３在ＧＣＬ层表达至高峰。实验组明显强于对照组
（Ｐ＜０．０１）。结论：ＣＮＴＦ对大鼠视神经损伤后ＲＧＣｓ具有明显的保护作用。
［关键词］睫状神经营养因子；视网膜神经节细胞；生长相关蛋白一４３
［中图分类号］Ｒ７７４．６［文献标识码］Ａ［论文编号］１００４—０９５１（２００８）０４～０４０６—０３
Ｔｈｅ Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＣＮＴＦ ｏｎ ｔｈｅ Ｒｅｔｉｎａｌ Ｇａｎｇｌｉｏｎ Ｃｅｌｌｓ Ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ
Ｉｎｃｏｍｐｌｅｔｅ Ｏｐｔｉｃ Ｎｅｒｖｅ Ｉｎｉ ｕｒｙ ｉｎ Ｒａｔｓ
ＷＡＮＧ Ｓｈａ—ｄａｎ 。ＱＩＡＮ Ｚｈｉ—ｍｉｎ
脑源性神经营养因子对急性高眼压大鼠视网膜突触囊泡素表达的影响
ＣＨＩＮＥＳＥ ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＡＮＡＴＯＭＹ Ｖｏ１．３５ Ｎｏ．４ ２０１２ 解剖学杂志２０１２年第３５卷第４期
脑源性神经营养因子对急性高眼压大鼠视网膜突触囊泡素表达的影响
王 慧 罗 佳 周利红黄菊芳 陈 旦△
（中南大学湘雅医学院人体解剖学与神经生物学系，长沙４１００１３）
摘要 目的：探讨脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）在急性高眼压后大鼠视网膜突触可塑性中的作用。方法：ＳＤ大鼠随机分为 正常对照组、假手术组、单纯高眼压组、溶媒预处理急性高眼压组、ＢＤＮＦ预处理急性高眼压组和ＢＤＮＦ抗体预处理急性高 眼压组。预处理后２ ｄ，制作急性高眼压模型。动物存活１、３、７或１４ ｄ后处死，冷冻切片行突触囊泡素（ｓＹＮ）免疫组织化 学检测。结果：ＳＹＮ蛋白的免疫阳性产物主要分布于视网膜外网层和内网层，ＳＹＮ在高眼压３ ｄ后在外网层分布增宽，７ ｄ 时最宽，１４ ｄ时又回复到与正常相似的模式；ＢＤＮＦ预处理后，在急性高眼压早期，ＳＹＮ在视网膜外网层分布范围增宽的现 象延后，至１４ ｄ阳性产物分布面积达到高峰；ＢＤＮＦ抗体预处理后，ＳＹＮ阳性产物分布范围增宽现象前移，在３ ｄ时达到高 峰，但与正常水平差异无统计学意义，至７ ｄ和１４ ｄ ＳＹＮ回落。结论：急性高眼压后外源性ＢＤＮＦ干预延后了视网膜逆行 性跨神经元突触改变的发生时间。 关键词脑源性神经营养因子；高眼压；突触囊泡素；视网膜；大鼠 ，
Ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｂｒａｉｎ－ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｏｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｓｙｎａｐｔ０ｐｈｙｓｉｎ
ｉｎ ｒｅｔｉｎａ ｆｏｌｌｏｗｉｎｇ ａｃｕｔｅ ｈｉｇｈ ｉｎｔｒａｏｃｕｌａｒ ｐｒｅｓｓｕｒｅ
Ｗａｎｇ Ｈｕｉ，Ｌｕｏ Ｊｉａ，Ｚｈｏｕ Ｌｉｈｏｎｇ，Ｈｕａｎｇ Ｊｕｆａｎｇ，Ｃｈｅｎ Ｄａｎ△ （Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ａｎａｔｏｍｙ ａｎｄ Ｎｅｕｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，Ｘｉａｎｇｙａ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｃｅｎｔｒａｌ Ｓｏｕｔｈ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｓｈａ ４１ ００１ ３，Ｃｈｉｎａ）
脑源性神经营养因子诱导缺氧神经干细胞分化的作用研究
中华老年心脑血管病杂志２０ｌ ３年４月第ｌ５卷第４期Ｃｈｉｎ Ｊ Ｇｅｎａｔｒ Ｈｅａｒｔ Ｂｒａｉｎ Ｖｅｓｓｅｌ Ｄｉｓ，Ａｐｒ２０１３，Ｖｏｌ １５，Ｎｏ．４ ・４２３・
脑源性神经营养因子诱导缺氧神经
干细胞分化的作用研究
吴剑涓，苏心 基础研究
摘要：目的 探讨脑源性神经营养因子（ｂｒａｉｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ，ＢＤＮＦ）诱导经缺氧培养的大鼠胚胎大脑 神经干细胞分化作用。方法 将体外培养至第２代的神经干细胞分为３组：对照组（正常培养）、缺氧组（缺氧培 养）和ＢＤＮＦ组（缺氧培养同时加入ＢＤＮＦ），分别培养３６ ｈ后，改变培养条件令细胞分化２４、４８、７２ ｈ，ＲＴ－ＰＣＲ测 定各组ｂｃｌ一２、ｂａｘ、ｎｓｅ、ｎｎｅ、ｇｆａｐ的ｒｎＲＮＡ水平，通过Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测培养４８ ｈ后的各基因表达。结果 与缺氧 组比较，ＢＤＮＦ组凋亡基因４８ ｈ ｂｃｌ一２表达明显增高，４８、７２ ｈ ｂａｘ表达明显降低，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）；分 化基因在细胞分化２４ ｈ ｎｓｅ、ｎｎｅ表达明显升高，ｇｆａｐ表达明显降低，４８ ｈ ｎｓｅ表达明显升高，ｇｆａｐ明显降低，差异有 统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０１）。结论缺氧可引起神经干细胞向神经胶质细胞分化的增殖，ＢＤＮＦ具有诱导神经干细胞 向神经元分化的功能。 关键词：脑源性神经营养因子；缺氧；干细胞；逆转录聚合酶链反应；ＲＮＡ，信使；细胞分化
Ｒｏｌｅ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｉｎｄｕｃｉｎｇ
ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉ０ｎ Ｏｆ ｈｙｐｏｘｉａ ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ
ＷＵ Ｊｉａｎ—ｊｕａｎ，ＳＵ Ｘｉｎ （Ｄｅｐａｒｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｍｅｎｔ，Ｔｉａｎｊｉｎ Ｈｕａｎｈｕ Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｔｉａｎｊｉｎ ３０００６０，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ｒｏｌｅ ｏｆ ｂｒａｉｎ ｄｅｒｉｖｅｄ ｎｅｕｒｏｔｒｏｐｈｉｃ ｆａｃｔｏｒ（ＢＤＮＦ）ｉｎ ｉｎｄｕｃｉｎｇ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｙｐｏｘｉａ ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｉｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｎｅｕｒａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｔＯ ｔｈｅ