谈一测多评法测定黄连及其炮制品中6 种生物碱
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种生物碱
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黄连为毛茛科(Ranunculaceae)黄连属CoptisSalisb.植物黄连Coptis chinensis Franch.、三角叶黄连Coptis
deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao 或云连Coptis teeta Wall.
的加工品，据文献报道，其化学成分主要为生物碱类物质。黄连的广泛利用与其所含各种生物碱的药理作用有密切的关系，且研究表明，黄连的药理作用并不是某单一生物碱作用的结果，如黄连中小檗碱具有较强的抗炎作用，但是黄连水提液的最低抑菌能力要强于小檗碱，说明黄连中含有其他抗菌或对抗菌有协同作用的成分。所以，只有对其主要的多个生物碱(如小檗碱、黄连碱、非洲防己碱、表小檗碱、巴马汀等)的质量分数进行全面控制，才能保证药材的质量。但对照品来源限制了多个生物碱的含量控制。有研究者提出了一测多评的多指标质控模式，即在多指标质量控制时，利用中药有效成分内在函数关系和比例关系，以药材中对照品廉价易得的典型成分为内标，建立该成分与其他成分间的相对校正因子，再通过校正因子---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------
---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-------------- 同步计算出其他成分的量。在方法实施时，可在只有一个对照品的情况下，实现这些成分的同步测定，并成功应用于薄荷，五味子，白芷、丹参、赤芍、淫羊藿、连翘、黄芩、黄连、人参和枳实等药材的质量控制，以及热毒宁注射液、复方丹参、清开灵注射液等中成药的质量控制。其中黄连药材的一测多评方法被《中国药典》2010 年版采用，但只对其中4 种生物碱进行了控制。同时测定黄连中6 种生物碱更有利于黄连药材质量的控制。本研究采用一测多评的方法同时检测黄连中6 种生物碱的量，相较于《中国药典》方法增加指标成分的种类，不受对照品来源的限制，更有利于黄连及其炮制品的质量控制。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪(Waters 2695-2998，Agilent1200S，岛津LC-20A);KQ5200 型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);CPA225D 型电子天平(十万分之一，德国赛多利斯公司);BS224S 型电子天平(万分之一，德国赛多利斯公司)。对照品盐酸巴马汀(批号110732-200506)、盐酸小檗碱(批号110713-200609)由中国食品药品检定研究院提供;对照品盐酸药根碱(质量分数%)、盐酸非洲防己碱(质量分数%)、盐酸表小檗碱(质量分数%)、盐酸黄连碱(质量---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------
---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-------------- 分数%)由重庆市中药研究院药化室提供;乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。黄连 Coptidis Rhizoma 药材(批号2008004、080803、080805、080804、2008005、20120905、080810、2008008、2008007、2008006)，黄连饮片Coptidis Rhizoma decoction pieces(批号20080501、0808003、080802、080801、0801101、0809021、0803180、060401、2008007、0801005、08031801、080101)，酒黄连Coptidis Rhizoma stir-fried
withwine(批号071224、080301、080301、071124、080805、080301、08032101、080401、080804、20081001)，萸黄连Coptidis Rhizoma stir-fried
withEvodiae Fructus(批号20080301、080313、071201、080301、080805、080301、08032101、20080401、080804 、20081001 )， 姜黄连Coptidis
RhizomaStir-fried with ginger juice(批号080301、080313、080804、08032101、071130、080401、080301、080803、080805、20081001)，以上药材及炮制品均由太极集团有限公司提供;云连Coptis teeta Wall.和三角叶黄连Coptis deltoidea C. Y. Cheng et Hsiao(雅连)自采，各3 批，以上药材均由江西中医药大学钟国跃研究员鉴定。
2 方法与结果 ---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------
---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-------------- 一测多评方法学考察
对照品溶液的配制
精密称取盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱各适量，用50%乙腈制成含有 μg/mL 盐酸药根碱、 μg/mL
非洲防己碱、 μg/mL 盐酸表小檗碱、 μg/mL 盐酸黄连碱、 μg/mL 盐酸巴马汀、 μg/mL 盐酸小檗碱的混合对照品溶液。
供试品溶液的制备
取药材粉末约 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙腈-盐酸(100∶1)50 mL，密塞，称定质量，超声处理30 min，放冷，再称定质量，用50%乙腈-盐酸(100∶1)补足减失的质量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2 mL，置10 mL 量瓶中，加各溶剂至刻度，摇匀，滤过，取续滤液即得。
色谱条件
色谱柱为Gemini-NX C18(250mm× mm，5 μm);流动相为乙腈- mol/L 乙酸铵和8 mmol/L 十二烷基硫酸钠(SDS)水溶液(氨水调节pH 值为)(36∶64);柱温35 ℃;体积流量1 mL/min;检测波长270 nm;进样量10
μL。上述色谱条件下，盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------
---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-------------- 碱分离良好，各组分的理论塔板数均>7 500。
线性关系的考察
将混合对照品溶液依次稀释2、4、8、16、32、160 倍，精密吸取混合对照品溶液及其稀释液各10 μL
进样。以进样量对峰面积积分值进行线性回归处理，得盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的回归直线方程及线性范围。
精密度试验
取盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱混合对照品溶液，各重复进样6 次，测得盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱平均峰面积的RSD 依次为%、%、%、%、%、%。表明有较好的精密度。
重复性试验
取同一批次的样品6 份，照上述制定的方法制备供试品溶液和进行HPLC 测定，测得盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的平均质量分数依次为%、%、%、%、%、%，RSD 依次为%、%、%、%、%、%。表明该法重复性良好。 ---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------
---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-------------- 稳定性试验
取同一供试品溶液，分别于0、2、4、8、12、24
h 测定峰面积，结果盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱的RSD依次为%、%、%、%、%、%。说明供试品溶液在24 h 内稳定。
加样回收率试验
精密称取适量已测定的黄连药材粉末约 g，精密称定，共6 份，加入混合对照品溶液适量，按供试品制备方法制备样品进行HPLC 测定，计算回收率。结果盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的平均回收率依次为%、%、%、%、%、%，RSD依次为%、%、%、%、%、%。
相对校正因子的确定
相对校正因子计算
以盐酸小檗碱为内标(S)，分别计算盐酸小檗碱(berberine hydrochloride，B)对盐酸药根碱(jatrorrhizine
hydrochloride，J)、盐酸非洲防己碱(columbamine
hydrochloride，C1)、盐酸表小檗碱(epiberberine
hydrochloride，E)、盐酸黄连碱(coptisine hydrochloride，C2)、盐酸巴马汀(palmatine hydrochloride，P)的相对校正因子(fs/k)，结果见表2。 相对校正因子的重现性考---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载--------------
---------------本文为网络收集精选范文、公文、论文、和其他应用文档，如需本文，请下载-------------- 察考察了3种高效液相色谱系统：Waters 2695-2998、岛津LC-20A 和Agilent 1200S 型高效液相色谱仪和3
种色谱柱：Gemini-NX C18(250 mm× mm，5 μm)，XtimateTMC18(250 mm× mm，5 μm)，BETASIL
C18(250mm× mm，5 μm)并进行了不同实验室的考察，盐酸小檗碱对盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀的fs/k 均基本一致，RSD 小于2%，其结果比较稳定可靠。
待测组分色谱峰的定位
利用相对保留值(rk/s)定性，测得盐酸药根碱、盐酸非洲防己碱、盐酸表小檗碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀和盐酸小檗碱的rk/s ，RSD≤5%，表明利用rk/s
酸性染料比色法测定黄连中总生物碱的含量
江西中医学院学报２ ０ １ ０年８月第２ ２卷第４期 ＪＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＪｆＡＮＧＸＩ ＵＮｌｖＥＲｓｌＴＹ ｏＦ ＴＣＭ２０１０ Ｖｏ１．２２ Ｎｏ．４
４．１７６～１６．６８ ｍｌ，ｒ＝０．９９９７，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ １００．１％，ＲＳＤ １．８４％，ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｆｒｏｍ Ｃｏｐｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｗｅｒｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｓ ０．１１２ ｇ／ｇ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｈｉｇｈｌｙ ｓｅｎｓｉｔｉｖｅ，ａｃｃｕｒａｔｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ
ｆｏｒ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ ｉｎ Ｃｏｐｔｉｓ ｅｈｉｎｅｎｓｉｓ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｃｉｄｉｃ ｄｙｅ ｃｏｌｏｒｉｍｅｔｒｙ；Ｃｏｐｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ；ｔｏｔａｌ ａｌｋａｌｏｉｄｓ 黄连为毛茛科植物黄连（Ｃｏｐｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ 中总生物碱含量的方法，灵敏度高，操作简便，重现
Ｆｒａｎｃｈ．）、三角叶黄连（Ｃｏｐｔｉｓ ｄｅｌｔｏｉｄｅａ Ｃ．Ｙ．Ｃｈｅｎｇ 性好，更适合于总生物碱的含量测定。
ｅｔ Ｈｓｉａｏ）或云连（Ｃｏｐｔｉｓ ｔｅｅｔａ Ｗａｌ１．）的干燥根茎，具 １仪器与试药
有清热燥湿，泻火解毒的功效…，其主要含有小檗 １．１ 仪器ｕＶ一２５５０型紫外可见分光光度计（日本
碱（ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ）、巴马汀（ｐａｌｍａｔｉｎｅ）、黄连碱（ｃｏｐ一 岛津公司），ｐＨＳ一３Ｃ型ｐＨ计（上海虹益仪器仪表有
ｔｉｓｉｎｅ）、表小檗碱（ｅｐｉｂｅｒｂｅｒｉｎｅ）和药根碱（ｊａｔｒｏｒｒｈｉｚ． 限公司），ＴＧ３２Ａ十万分之一天平（北京赛多利斯仪
ｉｎｅ）、甲基黄连碱（ｗｏｒｅｎｉｎ）等多种生物碱 ，具有 器系统有限公司），旋转蒸发仪（厦门精艺兴业科技
一测多评法测定三颗针中4种生物碱类成分的含量
一测多评法测定三颗针中4种生物碱类成分的含量
田妮娜;封士兰;周丽
【期刊名称】《卫生职业教育》
【年(卷),期】2015(000)015
【摘 要】目的：建立三颗针中小檗碱、巴马汀、尖刺碱、小檗胺一测多评法，验证该方法的可行性和技术适应性。方法以小檗碱为指标，计算巴马汀、尖刺碱、小檗胺与小檗碱的相对校正因子，并用该校正因子进行巴马汀、尖刺碱、小檗胺的含量计算，同时采用外标法测定三颗针中该4种生物碱的含量，并比较外标法与一测多评法的结果，以验证一测多评法的准确性和可行性。结果外标法与一测多评法的结果无显著性差异（RSD＜5.0%）。结论以一测多评法测定三颗针中小檗碱、巴马汀、尖刺碱、小檗胺的含量是准确可行的。
【总页数】4页(P113-115,116)
【作 者】田妮娜;封士兰;周丽
【作者单位】兰州大学药学院，甘肃 兰州 730000; 兰州市食品药品检验所，甘肃
兰州 730000;兰州大学药学院，甘肃 兰州 730000;宁夏医科大学药学院，宁夏 银川 750004
【正文语种】中 文
【中图分类】R284.1
【相关文献】 1.一测多评法与外标法测定胆黄连中生物碱类成分含量比较2.“一测多评”法测定卷叶贝母中生物碱类成分含量3.HPLC-一测多评法测定参芪延肾颗粒中淫羊藿药材中的6个黄酮类成分的含量4.一测多评法测定刺五加叶中5个酚类成分含量的研究5.一测多评法测定固本统血颗粒中7种成分的含量
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一测多评法综述
一测多评法在中药材含量测定中应用进展
摘要：影响中药材质量因素很多，导致市场上中药材质量控制困难，目前仅凭单一成分评价中药材质量过于片面，不能很好反应中药材质量优良。一测多评法以中药材本身具有成分为内参物，同时测定多种成分，可以很好反应中药材质量。笔者结合近年一测多评法在中药材中应用实例进行探讨，为中药材质量控制提供参考。
关键词：中药材，含量测定，一测多评
影响中药材质量的因素很多，有不同产地、不同炮制加工方法、不同储藏方式等[1]。因此，目前中药材市场药材质量良莠不齐，直接影响中医临床辨证施治的治疗效果。现阶段中药标准多用单一成分含量高低来反应中药材质量，但中药材成分复杂多样，作用机制模糊，大多靠几种成分协同发挥药效，这样仅以一种成分含量无法全面反映中药质量。但如果以传统测定方法同时测中药材中几种成分不但面临对照品难得，检验周期长，还耗能、耗时。2006年王智民等[2]首次提出一测多评法（quantitative analysis of multi-components by
single-marker，QAMS），该通过中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系法，测定一个成分（对照品易得、价廉、有效者）实现多个成分（对照品难以得到或难供应者）同步测定。不仅解决了中药多成分定量和多指标质量控制中存在的对照品缺乏问题，同时实现多指标同步质量控制反映中药质量。该法提出后得到业内学者广泛认可和应用，并于2010版《中国药典（一部）》收载。现就一测多评法原理及应用进展进行概述，并对存在的问题和发展前景进行探讨，为中药质量控制提供参考依据。
1一测多评概念与原理
研究思路起源于内标法、校正因子法、主成分自身对照法以及紫外百分吸收系数法等几个概念。在一定线性范围内，成分的量（质量或浓度）与检测器响应成正比的原理，在多指标质量评价时，引入相对校正因子的概念，以样品中某一典型成分( 有对照品供应者、价
廉、有活性) 为内标，根据中药有效成分间存在的内在函数关系和比例关系，建立该成分与其他成分之间的相对校正因子(relative correction factor,RCF)，通过RCF计算其他成分的含量。这种测定一个成分，实现对多个成分定量的方法命名为“一测多评”法。
HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究
HPLC法鉴定不同产地黄连饮片中含生物碱的研究
摘要】 目的：研究高效液相色谱法（HPLC）在不同产地黄连饮片中生物碱检测中的价值。方法：选择HPLC法分别检测各区域黄连中生物碱情况。结果：不同区域黄连中小檗碱、黄连碱、表小檗碱、巴马汀生物碱以及总含量具有一定差别，其中四川洪雅县的黄连生物碱含量较高，而云南德钦县较低。结论：HPLC在不同区域黄连生物碱的检验中效果显著，操作较为方便，具有一定重复性，鉴定结果的准确率较高，值得广泛推广及应用。
【关键词】 生物碱；黄连；高效液相色谱法；饮片
【中图分类号】R927.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2018）21-0362-01
黄连属于常见的中药饮片，具有泻火解毒、清热燥湿的功效，取得了较高的临床价值。黄连的主要成分为生物碱，若能够准确掌握黄连中有效成分，选择疗效确切的鉴定方式在保证饮片质量中具有重要意义。临床上常采取紫外分光光度计或者薄层扫描方式进行鉴定，虽然取得过一定检验价值，但效果并不明显[1]。其中薄层扫描鉴定结果的准确性较低，而紫外分光光度计仅能够检出黄连中生物碱的总含量。随着鉴定技术不断完善，临床认为采取HPLC法鉴定效果显著，不仅能够检出各生物碱含量，同时能够保证结果准确[2]。因此本文展开研究，探讨HPLC法在不同区域黄连生物碱的检验中的价值，现作出如下报道。
1.资料与方法
1.1 仪器与试剂
日本日立公司生产的高效液相色谱仪器、色谱柱、超声波清洗器、电子分析天平、色谱数据工作站、乙腈色谱纯试剂、盐酸小檗碱以及双蒸水等。
1.2 方法
将盐酸小檗碱判定为对照，按照HPLC法分别检测黄连中各生物碱含量。
一测多评法测定三颗针中4种生物碱类成分的含量 2
Ｖ０１．３３ ２０１５ Ｎｏ．１５
一测多评法测定三颗针中４种生物碱类
成分的含量
田妮娜 ，一，封士兰 ，周 丽
（１．兰州大学药学院，甘肃兰州７３００００；２．兰州市食品药品检验所，甘肃兰州７３００００；
３．宁夏医科大学药学院，宁夏银川７５０ｏｏ４）
摘要：目的建立三颗针中小檗碱、巴马汀、尖刺碱、小檗胺一测多评法，验证该方法的可行性和技术适应性。方法以小檗
碱为指标，计算巴马汀、尖刺碱、小檗胺与小檗碱的相对校正因子，并用该校正因子进行巴马汀、尖刺碱、小檗胺的含量计 算，同时采用外标法测定三颗针中该４种生物碱的含量，并比较外标法与一测多评法的结果，以验证一测多评法的准确性
和可行性。结果外标法与一测多评法的结果无显著性差异（ＲＳＤ＜５．０％）。结论以一测多评法测定三颗针中小檗碱、巴马
汀、尖刺碱、小檗胺的含量是准确可行的。
关键词：一测多评法；三颗针；生物碱；外标法
中图分类号：Ｒ２８４．１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７１—１２４６（２０１５）１５—０ｌ１３—０４
三颗针为常用中药，是小檗科植物拟獠猪刺、小黄连刺、细
叶小檗或匙叶小檗等同属数种植物的干燥根，主要用于湿热泻
痢、黄疸、湿疹、咽痛目赤等症，小檗碱的含量是目前对三颗针
药材、饮片质量控制的主要依据【１】。但随着对三颗针生物活性及
化学成分的深入研究，发现巴马汀、小檗胺、尖刺碱均具有较为
显著的生物活性，且含量较高口～，在多个品种中均有分布，亦可
纳入三颗针药材质量控制体系。目前虽有用高效液相色谱法测 定三颗针中小檗碱、巴马汀的含量嘲，但因某些对照品（如尖刺
碱提纯难度较大）难以获得或分析成本过高等，还未见用外标
法同时测定三颗针中小檗碱、巴马汀、尖刺碱、小檗胺含量的文
献报道，这对三颗针药材进行多指标质量控制造成了较大困
难。
一测多评法（ＱＡＭＳ）以样品中某一成分为内参物，建立该
成分与其他成分间的相对响应因子，通过相对响应因子计算其
一测多评法测定黄连配方颗粒中4个成分的含量
２０１２年５月２０日第２１卷第ｌＯ期 Ｖｏ１．２１，Ｎｏ．１０，Ｍａｙ ２０，２０１２ 中ｌ虱荔
Ｃｈｉｎａ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃ ｌｓ ・药物鉴定・ Ｄｒｕｇ Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
一测多评法测定黄连配方颗粒中４个成分的含量
刘晖晖 ，张辉 ，莫结丽 ，贾宜军 ，陈馥 ，冯昀熠
（１．深圳市三九现代中药有限公司，广东深圳 ５１８０２９； ２．广东省药品检验所，广东广州 ５１０１８０）
摘要：目的验证２０１０年版《中国药典（一部）》测定黄连药材的方法能否适用于黄连配方颗粒，建立黄连配方颗粒的一测多评标准 （ＱＡＭＳ）。方法仅测定其中小檗碱的含量，通过确定它与其余待测成分（巴马汀、黄连碱、表小檗碱）间的内在函数关系，建立其一测多
评法的多指标质量控制方法。结果小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀重复性试验结果的ＲＳＤ分别为０．８７％，０．７３％，０．８８％，１．２３％， 小檗碱进样量在０．２２７ ３７～０．９０９ ４９ ｇ范围内与峰面积呈良好线性关系（，－２：０．９９９ ９），小檗碱平均回收率为１０３．２３％，ＲＳＤ为１．１０％
（ｎ＝６）。结论黄连配方颗粒中４个生物碱的含量可以用一测多评法进行测定，可用于黄连配方颗粒的质量控制。 关键词：一测多评；高效液相色谱法；黄连配方颗粒；小檗碱；表小檗碱；黄连碱；巴马汀
中图分类号：Ｒ２８４．１；Ｒ２８６．０ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６—４９３１（２０１２）１０—００３９—０２
Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ４ Ｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓ ｉｎ Ｃｏｐｔｉｓ Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｆｏｒｍｕｌａ Ｇｒａｎｕｌｅｓ ｂｙ ＱＡＭＳ
Ｌｉｕ Ｈｕｉｈｕｉ｜，Ｚｈａｎｇ Ｈｕｉ｜，Ｍｏ Ｊｉｅｌｉ２，Ｊｉａ ｒｉｊｕ￣２，Ｃｈｅｎ Ｆｕ２，Ｆｅｎｇ Ｙｕｎｙｉ２ （ ．Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｓａｎｊｉｕ Ｍｏｄｅｒｎ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅｓ Ｃｏ．， ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ ５１８０２９； ２．Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｉａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ， Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ ５１０１８０） Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｖａｌｉｄａｔｅ ｗｈｅｔｈｅｒ ｔｈｅ ａｓｓａｙ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ ｃｏＤｔｉｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｃｈｉｎｅｓｅ ＰｈａＩＴｎａｃｏｐｏｅｉａ（ｅｄｉｔｉｏｎ ２０１０）ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ
黄连中小檗碱的提取和鉴定
黄连中小檗碱的提取和鉴定
黄连是一种常见的中药材，其中主要有效成分是小檗碱。小檗碱具有抗菌、消炎、抗肿瘤等多种药理作用，因此在医药、保健品等领域有广泛的应用。本实验旨在提取黄连中的小檗碱，并进行鉴定，以了解其化学组成和性质。
一、实验材料
1. 原料：黄连（购自当地中药店）
2. 试剂：乙醇、浓盐酸、石油醚、乙醚、甲醇、氢氧化钠、醋酸铅、明矾、醋酸铜、硅胶G、三氯甲烷、甲酸、乙酸乙酯
二、实验步骤
1. 提取：将黄连粉碎后，用乙醇浸泡24小时，过滤，滤液浓缩至干，得到乙醇提取物。将提取物溶于少量水中，用石油醚和乙醚分别萃取，得到石油醚和乙醚萃取物。
2. 分离纯化：将石油醚萃取物用硅胶G进行柱层析分离，以三氯甲烷-甲酸-水（80:10:10）为洗脱剂，得到A组分。将乙醚萃取物用硅胶G进行柱层析分离，以三氯甲烷-乙酸乙酯（7:3）为洗脱剂，得到B组分。
3. 鉴定：对A组分和B组分进行红外光谱、核磁共振等测试，确定其化学结构。同时，进行薄层色谱和高效液相色谱等分析，以确定组分的纯度和含量。
三、实验结果
1. 提取物得率：经过称重和计算，得到黄连乙醇提取物的得率为5.8%。
2. 组分纯度：经过柱层析和洗脱剂洗脱，得到A组分和B组分。经过薄层色谱和高效液相色谱分析，A组分的纯度为92%，B组分的纯度为85%。
3. 鉴定结果：经过红外光谱和核磁共振等测试，确定A组分和B组分的化学结构分别为小檗碱和黄连碱。
四、实验结论 本实验成功从黄连中提取并鉴定出了小檗碱和黄连碱。实验结果表明，黄连中含有较高浓度的小檗碱，这为其在医药和保健品等领域的应用提供了依据。同时，实验中使用的柱层析方法能够有效分离纯化小檗碱和黄连碱，为进一步研究其药理作用和临床应用提供了技术支持。
五、实验建议与展望
本实验中使用的提取和分离纯化方法相对简单易行，但在实际应用中可能存在提取效率不高、分离纯度不够理想等问题。未来研究可进一步优化提取和分离纯化工艺，提高小檗碱和黄连碱的提取率和纯度。此外，可进一步研究小檗碱和黄连碱的药理作用机制及其与其他药物相互作用的关系，为临床应用提供更多依据。
一测多评法测定苦参中5种生物碱的含量
一测多评法测定苦参中5种生物碱的含量
[通信作者] *梁生旺，Tel： （020）39352172，Email： swliang371@163. com
苦参的主要活性成分为生物碱类、黄酮类合物。研究表明，苦参中的生物碱类具有抗炎、抗心律失常、抗肿瘤、免疫调节等多方面的药理作用。目前苦参的质量评价多以苦参碱和氧化苦参碱作为指标，此外苦参中槐果碱、氧化槐果碱以及槐定碱也具有较高的含量。中药的多成分、多功效的作用特点，决定着单一成分难以表达中药的质量，因此，多成分多指标含量测定是当前国际上广泛认可的质量评价模式。将5种生物碱同时测定运用于苦参药材的质量评价，能使结果更具准确性和科学性。为了方便日常苦参药材质量评价研究工作，本研究尝试使用“一测多评”法，以氧化苦参碱为参照物，计算氧化苦参碱与苦参碱、槐果碱、氧化槐果碱以及槐定碱的相对校正因子，建立苦参药材的一测多评多指标质量控制方法。
1 材料
Waters 29962695，Agilent 1200，Shimadzu LC20A，Sartorius BP211D 1/10万电子天平，KQ500E超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）。乙腈（欧普森色谱纯）；无水乙醇（天津科密欧色谱纯）；其他试剂为分析纯；水为超纯水；苦参碱对照品（批号110805200508），氧化苦参碱对照品（批号110780201007），槐定碱对照品（批号110784200804），氧化槐果碱对照品（批号111652200301）均购自中国食品药品检定研究院；槐果碱对照品（成都曼斯特生物科技有限公司，批号11052422）。苦参药材和饮片采购自山西、内蒙古、贵州、广西等地，经广东药学院生药教研室李书渊教授鉴定为苦参S. flavescens药材。
2 方法与结果
2.1 一测多评方法学考察
2.1.1 色谱条件[1] InertsilNH2色谱柱 （4.6 mm×250 mm，5 μm），流动相为乙腈无水乙醇3%磷酸溶液（80∶10∶10）；流速1.0 mL·min-1；柱温30 ℃；检测波长210 nm；进样量20 μL。在上述色谱条件下，各组分分离度良好，色谱图见图1。
微波辅助提取黄连生物碱及其含量测定黄连中含量最高的生物碱是
微波辅助提取黄连生物碱及其含量测定黄连中含量最高的生物碱是
黄连属毛茛科植物，为多年生草本，是我国的传统中药，分布在四川、贵州、湖北、陕西等地区。黄连生物碱属于异喹啉类碱，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤、抗血栓、抗胃癌、动脉舒张的作用；可用于食品防腐剂、食品甜味剂、保健食品等，因而在食品、保健、医药等领域应用广泛。
目前对黄连生物碱提取的主要方法有稀硫酸法、石灰乳法、有机溶剂法、液膜法、水提取法、超声法等。微波辅助作为一种新兴的提取技术，具有提取时间短，操作简单，产品纯度好、安全、环保等优点，因而得到广泛应用。本文运用正交试验研究黄连中生物碱微波提取工艺的影响因素，旨在为黄连的开发应用提供依据。
1 实验
1.1 仪器与试剂
1.1.1 仪器
FW-117中草药粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）；
GR-200电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；
WF-2000微波快速反应系统（上海屹尧分析仪器有限公司）；
SHZ-D9III型循环水式真空泵（巩义市予华仪器有限公司）；
800型离心机（上海医疗器械）；
Cary50型紫外可见分光-光度计（美国瓦里安）。
1.1.2 试剂
黄连（本市购买），60℃烘至绝干后粉碎，过40目筛，备用；
盐酸小檗碱对照品（98%，西安凯萌生物技术有限公司）；
其余无水乙醇、盐酸等均为分析纯。 1.2 实验方法
1.2.1 标准曲线的绘制
准确称取盐酸小檗碱对照品0.0150g，用60%乙醇配制0.15mg/mL的标准品溶液。精密吸取上述溶液0.50、0.80、1.10、1.40、1.70mL至25.00mL容量瓶，用60%乙醇定容、摇匀，静置15min。以60%乙醇作参比溶液，在最大吸收波长350nm处测得吸光度。以吸光度为纵坐标，质量浓度为横坐标（mg/mL），绘制标准曲线，得回归方程：A=74.611C+0.00826（R2=0.9890），表明盐酸小檗碱在0.003mg/mL～0.0102mg/mL的范围内有良好的线性关系。
黄连鉴定流程实验报告
一、实验目的
1. 掌握黄连药材的性状特征，学会鉴别黄连的三种不同品种（味连、雅连、云连）。
2. 熟悉黄连中主要生物碱小檗碱的提取、精制和鉴定方法。
3. 了解黄连的药理作用及临床应用。
二、实验原理
黄连为毛茛科植物黄连（Coptis chinensis Franch.）的干燥根茎，具有清热燥湿、泻火解毒的功效。黄连的有效成分主要是生物碱，其中以小檗碱含量最高，具有抗菌、抗病毒、抗肿瘤等作用。本实验通过观察黄连的性状特征、提取小檗碱并进行鉴定，以确定其品种和质量。
三、实验材料与仪器
1. 实验材料：黄连药材（味连、雅连、云连）、药材粉末、甲醇、氯仿、盐酸、硫酸等。
2. 实验仪器：显微镜、紫外分光光度计、磁力搅拌器、旋转蒸发仪、水浴锅、电热恒温干燥箱等。
四、实验方法
1. 黄连性状鉴定
（1）观察黄连药材的形状、颜色、气味等性状特征，比较味连、雅连、云连之间的差异。
（2）显微镜下观察黄连药材的组织结构，包括导管、纤维、淀粉粒等。
2. 小檗碱提取与鉴定
（1）将黄连药材粉碎，用甲醇提取小檗碱。
（2）将提取液浓缩、干燥，得到小檗碱粗品。
（3）将小檗碱粗品用氯仿溶解，加入盐酸酸化，静置，观察沉淀形成。
（4）取沉淀，用甲醇溶解，在紫外分光光度计上测定其在265nm处的吸光度，计算小檗碱含量。 五、实验步骤
1. 黄连性状鉴定
（1）观察黄连药材的外观，记录形状、颜色、气味等性状特征。
（2）将黄连药材制成粉末，在显微镜下观察其组织结构，记录导管、纤维、淀粉粒等特征。
2. 小檗碱提取与鉴定
（1）称取一定量的黄连药材，用甲醇提取小檗碱，记录提取液体积。
（2）将提取液浓缩至约1/10体积，转移至旋转蒸发仪中，在40℃下浓缩至干燥。
（3）将干燥物用氯仿溶解，加入少量盐酸酸化，静置，观察沉淀形成。
（4）取沉淀，用甲醇溶解，在紫外分光光度计上测定其在265nm处的吸光度，计算小檗碱含量。