山楂叶提取物中总黄酮和金丝桃苷的含量测定
http://www.paper.edu.cn - 1 - 山楂叶提取物中总黄酮和金丝桃苷的含量测定 王敏，周立，王凌，叶娉，董芳，吕芳 成都中医药大学，成都（610075） E-mail：wangmin8782@163.com 摘 要：目的：为山楂叶提取物建立专属性含量测定方法。方法：以芦丁为对照品，采用紫外-可见分光光度法，在500nm波长处测定总黄酮的含量；以金丝桃苷为对照品，采用高效液相色谱法,用C18色谱柱,以乙腈-甲醇-四氢呋喃-0.5%冰醋酸溶液(1:1:19.4:64.2)为流动相，检测波长为363nm，测定金丝桃苷的含量。结果：芦丁浓度在0.0085-0.0511mg/mL范围内,与吸光度线性关系良好，相关系数为0.9997，平均回收率为98.95%，RSD=1.02%(n=9)；金丝桃苷含量在0.0888～0.4444µg范围内，与峰面积线性关系良好，相关系数为0.9995，平均回收率为99.24%，RSD=1.21%。结论：该法操作简便、准确，可作为山楂叶提取物的质量控制。 关键词：山楂叶提取物；总黄酮；金丝桃苷；含量测定
山楂叶为蔷薇科植物山里红Crataegus pinnatifida Bge var major N.E.Br.或山楂Crataegus pinnatifida Bge.的干燥叶，具有活血化瘀，理气通脉的功效[1]。本实验以总黄酮和金丝桃苷
为指标，对山楂叶提取物建立了含量测定方法，并测定了其所含总黄酮和金丝桃苷的含量，为山楂叶提取物的质量控制提供一定的参考。
1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent 1100高效液相色谱仪（AgiLent公司）；UV-VIS 8500紫外-可见分光光度计（无锡科达仪器厂）；satorius BP211S型电子分析天平（1/万，1/10 万）（赛多利斯公司）。
1.2 试药 芦丁对照品、金丝桃苷对照品（中国药品生物制品检定所）；山楂叶提取物为自制；四氢呋喃、乙腈、甲醇为色谱纯，水为高纯水，其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果 2.1 总黄酮的含量测定 2.1.1 对照品溶液的制备 精密称取芦丁对照品26.63mg，置于50mL量瓶中，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，加乙醇至刻度，摇匀。精密吸取20mL，置50mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，即得(0.213mg/mL)。
2.1.2 供试品溶液的制备 取山楂叶提取物约0.1g，精密称定，置50mL量瓶中，加稀乙醇适量，超声处理30分钟，放冷，用稀乙醇定容至刻度，滤过，取续滤液作为供试品溶液。 http://www.paper.edu.cn - 2 - 2.1.3 测定波长的选择 精密量取对照品溶液和供试品溶液各2mL，分别置25mL量瓶中，照线性关系的考察项下的方法，在波长300～800nm内进行光谱扫描，结果对照品溶液和供试品溶液在500nm处均有最大吸收，故选择测定波长为500nm。
2.1.4 线性关系的考察 精密量取对照品溶液1mL，2mL，3mL，4mL，5mL，6mL分别置于25mL量瓶中，各加水至6mL，加5%亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加10%硝酸铝溶液1mL，摇匀，放置6分钟，加氢氧化钠试液10mL,再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以相应试剂为空白，在500nm的波长处测定吸光度，以吸光度(A)为纵坐标，对照品的浓度（C）为横坐标，得回归方程：A=10.406C-0.0006，r=0.9997，结果表明，芦丁对照品溶液的浓度在0.0085-0.0511mg/mL范围内,线性关系良好.
2.1.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液4mL，共6份，按线性关系的考察项下的方法，自“各加水至6mL”起，依法测定。结果表明，吸光度的RSD为0.96%，精密度良好。
2.1.6 稳定性试验 精密吸取对照品溶液和同一供试品溶液2mL，分别在0，30，60，90，120，150，180min
测定吸光度。结果其吸光度RSD分别为1.64%和1.33%，表明对照品溶液和供试品溶液在3小时内稳定。
2.1.7重复性试验 精密称取同批山楂叶提取物约0.1g，平行取6份，按供试品溶液的制备方法制备，测定。结果总黄酮的平均含量为26.64%，RSD为1.00%，表明该方法的重复性良好。
2.1.8 回收率试验 取同批山楂叶提取物约50mg，精密称定，共9份，分别加入不同体积的芦丁对照品溶液，按供试品溶液的制备方法制备，测定。结果表明，本方法平均回收率为98.95%，RSD=1.02%，可靠性良好。见表1。
表1回收率试验结果 编 样品取样 样品中芦丁 芦丁加入 实测芦丁 回收率（%） 平均回收 RSD 号 量（g） 含量（mg） 量（mg） 含量（mg） 率（%） (%) 1 50.13 13.35 10.60 23.82 98.77 2 51.07 13.61 10.60 24.12 99.16 3 51.14 13.62 10.60 24.12 99.06 4 50.32 13.41 13.25 26.64 99.85 5 49.87 13.29 13.25 26.34 98.45 98.95 1.02 6 51.24 13.65 13.25 26.52 97.13 7 50.03 13.33 15.90 29.11 99.25 8 48.99 13.05 15.90 28.63 97.99 9 49.74 13.25 15.90 29.29 100.88 http://www.paper.edu.cn - 3 - 2.1.9 样品测定 取山楂叶提取物约0.1g，按供试品溶液的制备方法制备，依法测定。结果见表2。
表2 总黄酮含量测定结果（n=3） 批次 总黄酮含量（%） 均值(%) 1 26.64 2 24.75 26.63 3 28.51
2.2 金丝桃苷的含量测定 2.2.1色谱条件 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-四氢呋喃-0.5%冰醋酸溶液（1：1：19.4：64.2）为流动相；检测波长为363nm；柱温30℃；流速：1.0mL/min。在此条件下，金丝桃苷与杂质峰能得到了较好的分离效果（见图1、图2）。
图1 金丝桃苷HPLC图谱 图2 供试品溶液HPLC图谱 2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取金丝桃苷对照品10.70mg 于50ml 量瓶中，加稀乙醇使溶解，并稀释至刻度，取5ml 置50ml 量瓶中，加稀乙醇至刻度，即得(C：21.40µg/mL)。
2.2.3供试品溶液的制备 取山楂叶提取物约0.3g, 精密称定，置25mL量瓶中，加稀乙醇20mL，超声处理30分钟，放冷，加稀乙醇稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45µm）滤过，取续滤液，即得。
2.2.4 线性关系考察 精密吸取对照品溶液2µL、4µL、8µL、12µL、16µL、20µL，分别注入液相色谱仪，测定峰面积，以峰面积(A)为纵坐标，对照品的量（X）（µg）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=1686.2X-1.9271，r=0.9997。结果表明，金丝桃苷的量在0.0428～0.428µg范围内，线性关系良好。
2.2.5 精密度试验 精密吸取对照品溶液10µL，连续进样6次，测定峰面积。结果表明，金丝桃苷峰面积的RSD为1.08%，精密度良好。
2.2.6 稳定性试验 精密吸取对照品溶液和同一供试品溶液，分别在0，4，8，12，16，24h，按上述色谱条http://www.paper.edu.cn - 4 - 件，进样10µl，测定峰面积。结果表明，金丝桃苷峰面积的RSD分别为1.54%和1.23%，对照品溶液和供试品溶液在24h内稳定。
2.2.7 重复性试验 取山楂叶提取物0.3g, 精密称定，平行取样6份，制备供试品溶液，测定。结果，金丝桃苷的平均含量为1.82mg/g，RSD为1.14%，表明该方法重复性良好。
2.2.8 加样回收率试验 精密称取同批山楂叶提取物约0.15g，共9份，分别加入不同体积的金丝桃苷对照品溶液，按供试品溶液的制备方法制备，照样品测定项下方法测定。结果表明，平均回收率为99.24%，RSD=1.21%，表明该方法可靠性良好，见表3。
表3 金丝桃苷回收率试验结果 编号 样品取样量（mg） 加入量（mg） 测得量（mg） 回收率（%） 平均回收率（%） RSD(%) 1 150.7 227.2 500.8 99.69 2 150.8 227.2 499.2 98.90 3 149.5 227.2 493.8 97.58 4 151.1 284.0 561.2 100.77 5 150.3 284.0 554.6 98.98 99.24 1.21 6 151.4 284.0 558.7 99.72 7 150.8 340.8 619.9 101.35 8 149.6 340.8 607.2 98.27 9 151.5 340.8 609.3 97.89
2.2.9 样品测定 取山楂叶提取物约0.3g, 精密称定，按供试品溶液的制备方法制备，精密吸取供试品溶液与对照品溶液各10µL，注入液相色谱仪，测定，计算含量。结果见表4。
表4 金丝桃苷含量测定结果（n=3） 批次 金丝桃苷含量（mg/g） 均值（%） 1 1.82 2 1.58 1.76 3 1.87
3 讨论 （1）实验所用山楂叶提取物为自制，具体制备方法为：加8倍量50%乙醇回流提取2次，每次1.5小时，合并提取液，滤过，回收乙醇并浓缩至相对密度为1.35～1.40（80℃）的稠膏，减压干燥，粉碎成细粉，即得。 （2）文献报道采用HPLC测定金丝桃苷含量的方法较多[2-4]，本实验参照《中国药典》2005年版一部山楂叶金丝桃苷的含量测定项下，但对流动相的比例进行了调整，采用乙腈-甲醇-四氢呋喃-0.5%冰醋酸（1：1：19.4：64.2）作为该流动相，出峰时间约为14min，且能达到满意的分离效果。
HPLC法同时测定山楂叶提取物中的7种主要成分
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ｉ １４ ０ ． ５％和 ９ ． ７ ， ＲＳ 分 别 为 １ ２ 、 ． ８ 、 ． ５ 、． ９ 、 ＿ ２ 、 ． １ 和 １ ４ （ ＝ ６ 。结 论 该方 法简便 、 ８ ３ 其 Ｄ ． ６ １ ２ １ ３ ％ １ ４ ｌ ３ １ ５ ．４ ）
中药总黄酮的含量测定方法
中药总黄酮的含量测定方法
中药总黄酮的含量测定方法常用的有以下几种：
1. 酸碱比色法：先将中药样品提取，然后加入酸性试剂，使黄酮化合物转化为黄色络合物，再通过比色法测定黄色染色的强度，从而计算出黄酮的含量。
2. 高效液相色谱法（HPLC）：中药样品经过适当溶剂提取后，利用高效液相色谱仪对黄酮进行分离和检测，通过峰面积或峰高与标准品进行比较计算黄酮的含量。
3. 紫外分光光度法：根据黄酮化合物在紫外可见光区域的吸收特性，在一定波长范围内测定样品的吸光度，通过比较吸光度与标准曲线计算黄酮的含量。
4. 荧光法：将黄酮溶液与适当溶剂混合后，在特定波长下激发，并测定荧光强度，通过标准曲线计算黄酮的含量。
以上方法可根据实际研究需求和条件选择适合的方案进行测定。
值得注意的是，不同的中药样品可能有不同的成分和浓度，因此在具体测定过程中需根据样品特点进行方法优化和验证。
山楂叶中药分析图谱
山楂叶中药分析图谱摘要：中国药典-中药标准物质分析图谱：山楂叶（Shanzhaye）分析图谱,金丝桃苷分析图谱【药材基本信息】别名无来源蔷薇科植物山里红CrataeguspinnatifidaBge.var.major N.E.Br.或山楂CrataeguspinnatifidaBge.的干燥叶功能活血化瘀，理气通脉【对照药材提取和对照品溶液的配制】对照药材的提取：精密称取本品中粉1.0091g，置索氏提取器中，加三氯甲烷加热回流提取至提取液无色，弃去三氯甲烷，药渣挥去三氯甲烷，加甲醇继续提取至无色（约4小时），提取液蒸干，残渣加乙醇溶解，转移至50ml容量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，作为供试品储备液，采用0.45μm滤膜过滤，取滤液即得供试品。
对照品溶液的配制：精密称取金丝桃苷对照品1.32mg，置50ml棕色容量瓶中，用稀乙醇使其溶解并定容至刻度，摇匀，即得（每1ml含金丝桃苷0.026mg）。
【分析条件】色谱柱：Agilent Zorbax SB-C18250×4.6mm,5μm进样量：20μl检测波长：363nm；柱温：28.0℃流速：1ml/min流动相：乙腈: 甲醇: 四氢呋喃: 0.5％醋酸= 1 : 1 : 19.4 : 78.6方法来源：《中国药典》2010版一部对照药材：中国食品药品检定研究院对照品：上海诗丹德生物技术有限公司对照品含量：金丝桃苷99.0%仪器：Agilent 1200配置：四元梯度，在线脱气机，DAD检测器，柱温箱，自动进样器【分析色谱图】【分析结果】【注意事项】● 在此分析条件下，金丝桃苷出峰时间为34.0分钟。
根据操作条件的不同，出峰时间会有少许变化，但在同一仪器和相同操作条件下，RSD≤2.0%；● 若采用手动进样器进样时，建议采用定量环定量，每次进样体积为定量环体积的两倍以上；● 对照品称量天平精度须达到十万分之一；● 稀乙醇的配制：取无水乙醇529ml，加水稀释至1000ml，即得。
新疆地产山楂总黄酮和多糖的含量测定_王晋
药物定性定量研究新疆地产山楂总黄酮和多糖的含量测定王晋*杜华**王鲁石**摘要:为进一步研究和开发山楂资源,采用微波技术辅助测定山楂中总黄酮和多糖的含量。
经测定山楂总黄酮含量为8. 14%多糖含量为9.31%。
关键词:微波技术;山楂;总黄酮;多糖;含量测定中图分类号:R285.5文献标识码:B文章编号:1006)0979(2006)01)0032)02山楂为蔷薇科植物山里红(Crataeg us pinnatifida Bgc.var. major N.E.Br.)或山楂(Cr ataegus pinnatifida Bge.)的干燥成熟果实。
主要产于江苏、浙江、安徽、河南,新疆主要产于伊犁地区112。
文献报道:山楂含有山楂酸、枸橼酸、琥珀酸、绿原酸、咖啡酸、齐墩果酸、熊果酸等有机酸和槲皮素、牡荆素、槲皮苷、金丝桃苷、矢车菊素、儿茶精等黄酮类化合物。
此外,还含有内酯、脂肪酶、蛋白质、维生素C、核黄素、胡罗卜素等。
其主要药理作用是能增强心肌收缩力,增加心输出量,减慢心率;扩张冠状血管,增加冠脉流量,降低心肌耗氧量:还有降压、降脂及抗心律失常作用;并能增加胃中酶类,促进消化及有较强的抑菌作用。
此外,还有收缩子宫、驱绦虫及解痉、镇静作用。
近年发现山楂对人脑中的衰老物质单胺氧化酶有明显的抑制作用,显示其具有延年益寿的功效122。
针对新疆丰富的山楂资源,一方面深入研究山楂的提取工艺,另一方面要充分开发利用这一优良野生果实的降血压作用,以及用于制作保健食品等。
我们运用微波技术辅助测定山楂中总黄酮和多糖的含量132。
1仪器材料与试剂1.1仪器:U V2401型分光光度计(日本岛津),M CL-3型连续微波反应器(四川大学无线电系)。
1.2材料:山楂,购置于新疆伊犁市中药材公司,烘干后粉碎置于干燥器中备用。
1.3试剂:对照品芦丁购自中国药品生物制品检定所。
其余试剂均为分析纯。
2实验方法与结果2.1样品溶液制备:取山楂细粉2g,精密称定,置于索氏提取器中,用石油醚(60e~90e)水浴回流脱脂2次(每次2h)。
比色法测定市售大山楂丸中总黄酮的含量
化学工业
何姗 （天津渤海职业技术学院 天津 ３ ０ ０ ４ ０ ２ ）
摘 要：采用以槲皮素为对照品，比色法测定大山楂丸中总黄酮的含量（λ ｍａｘ ＝ ５ｌ０ｎｍ）。绘制了标准曲线并做了线性方程回归，测得含 量为 ２．６３％。此测定方法结果准确，操作方便，重复性好，可作为大山楂丸中总黄酮物质含量测定方法。
表 １ 标准溶液浓度与吸光度的关系表
９８
科技创新导报 Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｎｏｖａｔｉｏｎ Ｈｅｒａｌｄ
黄酮类化合物具有 ４－ 羰基，３－ 或 ５－ 羟基和邻二酚羟基的结构，可与铝盐、铅 盐、镁盐等金属盐类试剂反应，生成有色 配合物，可用分光光度法测定其含量。利 用黄酮类化合物在亚硝酸钠的碱性溶液 中，与 Ａｌ３＋ 产生高灵敏度的橙红色配合物 （λ ｍａｘ ＝ ５ｌ０ｎｍ），从而用可见分光光度法 （比色法）测定大山楂丸中总黄酮的含量。
精密量取提取液 ５ｍＬ，按上述标准曲 线制备方法进行测定，并由标准曲线，计算 样品中总黄酮的含量。
３ 试验结果与讨论
３ ． １ 对照品与供试品的称量 利用电子天平，称取槲皮素质量为 ０．０２０９
克，大山楂丸质量 ３．３２１５ 克。 ３ ． ２ 标准曲线的绘制（ 见表 １ 及图 １ ） 。
ｎ ——溶液稀释倍数； ｍ ——待测物质质量 ｍ ｇ 。 带入公式计算得： 大山楂丸中总黄酮物质的
关键词：比色法 大山楂丸 总黄酮 含量
中图分类号： Ｇ ４ ２ ４ ． ３ １
文献标识码： Ａ
文章编号：１６７４－０９８Ｘ（２００９）０８（ｂ）－００９８－０１
总黄酮的提取和测定
总黄酮的提取和测定实验原理黄酮类化合物是植物的重要次生代谢产物，也是一些保健品和中药材的有效成分之一。
黄酮类化合物的定量方法常用的有 HPLC法和分光光度法，在实际生产和科研过程中，对于黄酮单体的定量常采用HPLC法，而对总黄酮的测定，考虑到方法的简便、快捷以及可行性，多采用在碱性介质中加铝盐显色的分光光度法。
在碱性条件下黄酮类化合物与铝盐形成络合物、在500nm波长处有最大吸收峰。
标准品选用芦丁。
试剂和器材一、试剂芦丁标准品。
5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH；70％乙醇。
二、材料新鲜银杏叶。
三、器材容量瓶10ml（×7），25ml（×1），100ml（×2）；吸管 0.5ml（×2），1ml（×2），2ml（×1），5ml（×1）；分光光度计。
操作方法一、制作标准曲线精密称取芦丁标准品5mg，用70％乙醇溶解，定容于25mL容量瓶中，摇匀，得0．2mg／mL的标准溶液。
精确吸取标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL，分别置于10mL容量瓶中，加入 5％NaNO2 0.4mL，摇匀，放置6min；加入10%A1 (NO3)3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入5％NaOH 4.0mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min。
以试剂空白作为参比溶液。
用1cm比色皿，在500nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。
二、总黄酮的提取把新鲜的银杏叶低温烘干，使水分小于8％，制成干粉。
精确称取干粉1．0g，置于 100mL容量瓶中，加入70％乙醇30mL，浸泡24h。
超声波提取30min，过滤，滤液用70％乙醇定容于100mL容量瓶中，得到黄酮提取液，待用。
三、测定吸取黄酮提取液1.00mL, 置于10mL容量瓶中，加入5％NaNO3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入10%A1(NO3)3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入5％NaOH 4.0mL，再加水至刻度，摇匀，放置15min。
山楂的降血脂有效部位提取工艺研究
山楂的降血脂有效部位提取工艺研究学生：指导教师：摘要：心血管疾病是目前威胁我国人民健康的重大疾病之一目前用于高血脂治疗的药物主要有他汀类、贝丁酸类、多烯脂肪酸类、绞股蓝、山楂、刺玫果等。
降血脂药物需要长期服用，患者对药物的副作用敏感，均有一定的副作用，如他汀类影响肝功能、还可能引起横纹肌溶解症、严重时导致急性肾功能衰竭；贝丁酸类有胃肠道反应、皮疹等副作用。
本文采用大孔树脂处理、酸碱处理等技术手段，提取了山楂果中的三萜酸类成分和山楂叶中的黄酮类成分。
关键词：山楂；提取；黄酮Abstract: cardiovascular disease is one of the most important diseases that threaten the health of our people at present. At present, the main drugs used in hyperlipidemia therapy are statins, bebutyric acid, polyene fatty acids, gynostemma pentaphyllum, hawthorn, rose fruit and so on. hypolipidemic drugs need to be taken for a long time, patients are sensitive to the side effects of the drug, all have certain side effects, such as statins affect liver function, may also cause rhabdomyolysis, and lead to acute renal failure in severe cases; bebutyric acid has gastrointestinal reactions, rash and other side effects. In this paper, three terpene acids and flavonoids from hawthorn leaves were extracted by macroporous resin treatment and acid-base treatment. Ingredients.Keywords: Hawthorn; Extraction; Flavonoids目录前言 (2)一、山楂的研究概述 (3)（一）山楂来源 (3)（二）山楂的化学成分 (4)（三）山楂的药理作用 (4)二、山楂总黄酮类研究 (5)（一）总黄酮的提取分离 (5)（二）单成分的分离 (6)（三）成分的测定 (6)三、有效部位的提取精制工艺研究 (6)（一）山楂叶中总黄酮的提取精制工艺研究 (6)（二）山楂果中总三萜酸部位提取工艺的研究 (14)（三）本章结论 (18)四、结论与展望 (18)（一）结论 (18)（二）展望 (19)参考文献： (20)前言心血管疾病是目前威胁我国人民健康的重大疾病之一目前用于高血脂治疗的药物主要有他汀类、贝丁酸类、多烯脂肪酸类、绞股蓝、山楂、刺玫果等。
山楂叶质量标准及检验操作规程
XXXXXXXXX有限公司成品质量标准及检验操作规程1 品名：1.1 中文名：山楂叶1.2 汉语拼音：Shanzhaye2 代码：3 取样文件编号：4 检验方法文件编号：5 依据：《中国药典》（2020年版一部）。
6 质量标准：7 检验操作规程：7.1 试药与试剂：稀乙醇、水、石油醚、乙酸乙酯、乙醇、丙酮、三氯化铝试液、5%亚硝酸钠溶液、10%硝酸铝溶液、氢氧化钠试液、乙腈、甲醇、四氢呋喃、0.5%醋酸溶液、芦丁对照品、金丝桃苷对照品。
7.2 仪器与用具：显微镜、电子天平、电热套、水浴锅、聚酰胺薄膜、三用紫外分析仪、烘箱、马弗炉、紫外-可见分光光度计、索氏提取器、高效液相色谱仪、超声波清洗器、二氧化硫测定仪。
7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。
7.4 鉴别：7.4.1取本品制片置10×10显微镜下做显微观察。
7.4.2取本品粉末2g，加稀乙醇50ml，加热回流1.5小时，放冷，滤过，滤液蒸至无醇味，加水10ml，用石油醚（30~60℃）洗涤2次，每次20ml，弃去石油醚液，水液加乙酸乙酯振摇提取2次，每次20ml ，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加乙醇2ml使溶解，作为供试品溶液。
另取芦丁对照品、金丝桃苷对照品，加乙醇分别制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述三种溶液各l ~2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙醇-丙酮-水（7 ：5 ：6）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以三氯化铝试液，热风吹干,置紫外光灯（365nm）下检视。
供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
7.5 检查：7.5.1水分不得过12.0％（附录15第二法）。
7.5.2酸不溶性灰分不得过3.0％（附录17）。
7.5.3二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。
7.6 浸出物：照醇溶性浸出物测定法（附录19）项下的冷浸法测定，用稀乙醇作溶剂，不得少于20.0%。
山楂叶提取物中牡荆素、金丝桃苷、异槲皮苷对照品的制备
山楂叶提取物中牡荆素、金丝桃苷、异槲皮苷对照品的制备文蕾;林云良;高红梅;李峰;姜姣姣;宋祥云;付瑞明;王岱杰【摘要】采用高速逆流色谱结合半制备液相色谱技术快速分离山楂叶中低含量的牡荆素、金丝桃苷、异槲皮苷单体.以氯仿-甲醇-水-正丁醇(4∶3∶2∶1.5,V/V)为溶剂系统,流速为5.0 mL/min,转速为850 r/min,检测波长为254 nm,从山楂叶黄酮提取物中富集得到含牡荆素、金丝桃苷、异槲皮苷3种化合物的混合组分,经半制备液相进行二次分离纯化,得到纯度大于98%的牡荆素、金丝桃苷、异槲皮苷单体.研究结果表明,该技术对山楂叶中低含量黄酮类化合物的分离快速、高效,且纯度高.%Three low content flavonoids, such as vitexin, hyperoside and isoquercitrin from Crataegi Folium were rapidly separated and purified by high-speed counter-current chromatography (HSCCC) combined with pre-HPLC.The total flavonoids from Crataegi Folium were firstly separated by HSCCC, with a solvent system of chloroform/methanol/water/ n-butanol (4∶3∶2∶1.5, V/V), flow-rate of 5.0 mL/min, rotation speed of 850 r/min, detection wavelength of 254 nm.A mixed component was separated from crude flavonoids, containing vitexin, hyperoside, and isoquercitrin.Then, the mixture was separated by pre-HPLC and vitexin, hyperoside, and isoquercitrin were obtained, with the purity over 98%, respectively, as determined by HPLC.Experimental results show that it is an efficient method for separation of low content flavonoids with high purities from Crataegi Folium by HSCCC combined with pre-HPLC.【期刊名称】《山东科学》【年(卷),期】2017(030)004【总页数】6页(P13-18)【关键词】山楂叶;牡荆素;金丝桃苷;异槲皮苷;高速逆流色谱;半制备液相色谱【作者】文蕾;林云良;高红梅;李峰;姜姣姣;宋祥云;付瑞明;王岱杰【作者单位】山东中医药大学药学院,山东济南 250355;山东省分析测试中心,山东省中药质量控制技术重点实验室,山东济南 250014;山东省分析测试中心,山东省中药质量控制技术重点实验室,山东济南 250014;山东省分析测试中心,山东省中药质量控制技术重点实验室,山东济南 250014;山东中医药大学药学院,山东济南250355;山东省分析测试中心,山东省中药质量控制技术重点实验室,山东济南250014;山东省分析测试中心,山东省中药质量控制技术重点实验室,山东济南250014;山东省分析测试中心,山东省中药质量控制技术重点实验室,山东济南250014【正文语种】中文【中图分类】R284.2山楂叶(Crataegi Folium)为蔷薇科(Rosaceae)植物山里红(Crataegus pinnatifida Bge.Var. major N. E. Br.)或山楂(Crataegus pinnatifida Bge.)的干燥叶，具有活血化瘀、理气通脉、化浊降脂等多种功效，在我国山东、陕西、山西等地均广泛分布[1]。
总黄酮含量测定方法
总黄酮含量测定方法总黄酮是指一类在植物中广泛存在的天然化合物，具有多种生物活性，包括抗氧化、抗菌、抗炎等作用。
因此，总黄酮含量的测定方法对于评估植物中潜在的药用价值具有重要意义。
以下是一种常用的总黄酮含量测定方法。
一、试剂与设备准备：1. 酸性乙醇溶液：加入浓盐酸（HCl）和乙醇（C2H5OH）（体积比为1:95）。
2. 铝试管。
3. DNA分光光度计或分光光度计。
4. 普鲁士蓝试液。
二、样品处理：1. 将待测样品（如草药材）洗净并晾干。
2. 将样品研磨成细粉末，通过筛网过筛以去除杂质。
3. 取一定质量的样品，加入酸性乙醇溶液中，浸泡4-6小时，以增加黄酮化合物的浸提效果。
4. 使用离心机离心加速提取，收取上清液并保存备用。
三、测定操作：1. 取适量的上清液，放入铝试管中。
2. 加入1 mL的酸性乙醇溶液，并摇匀，待样品溶解。
3. 将铝试管放入水浴中加热，加热温度为80C，保持10分钟。
4. 待样品冷却后，加入3 mL的普鲁士蓝试液，摇匀。
5. 使用DNA分光光度计或普通分光光度计，设置波长为595 nm，测定吸光度值。
四、数据处理与计算：1. 使用酸性乙醇溶液作为空白试剂进行校正。
2. 通过空白试剂的吸光度值，减去样品吸光度值，获得净吸光度值。
3. 根据普鲁士蓝的吸光度与黄酮的浓度之间的线性关系，计算样品中黄酮的含量。
以上就是一种常用的总黄酮含量测定方法，通过酸性乙醇提取样品中的黄酮化合物，并使用普鲁士蓝试液测定吸光度值，可以获得样品中总黄酮的含量。
为了提高测定结果的准确性，可以多次重复实验，并计算平均值。
此外，还可以使用其他方法进行总黄酮的测定，如高效液相色谱（HPLC）法和分光光度法等，根据实际需求选择合适的方法进行测定。