卵泡的募集 选择 优势化和排卵
炔雌醇环丙孕酮对多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织形态影响的研究
・１３６８・ 中国药物与临床２０１１年１２月第１１卷第１ 期Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｒｅｍｅｄｉｅｓ ｉ玎ｉｃｓ，Ｄｅｃｅｍｂｅｒ Ｑ ： ．
炔雌醇环丙孕酮对多囊卵巢综合征
大鼠卵巢组织形态影响的研究
王永红王洪丽
【摘要】 目的观察炔雌醇环丙孕酮对多囊卵巢综合征（ＰＣＯＳ）模型大鼠卵巢组织形态和超微结构的影 响。方法应用来曲唑造模法建立ＰＣＯＳ大鼠模型，随机分为正常对照组、ＰＣＯＳ模型组、炔雌醇环丙孕酮组，应用 放射免疫法测定各组大鼠性激素水平、光镜观察大鼠卵巢组织形态改变、电子显微镜观察卵巢超微结构。结果 ①应用来曲唑干预２１ ｄ后，ＰＣＯＳ模型大鼠血清黄体生成素（ＬＨ）、睾酮和卵泡刺激素（ＦＳＨ）的水平明显高于正常 对照组，而雌二醇和孕酮水平低于对照组（Ｐ＜Ｏ．０１），提示造模成功。药物干预后，与ＰＣＯＳ模型组比较，炔雌醇环 丙孕酮组大鼠血清ＬＨ、ＦＳＨ和睾酮水平下降，血清雌二醇、孕酮水平升高，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。②光镜观 察：ＰＣＯＳ组大鼠卵巢组织呈多囊性改变，未见成熟卵泡及黄体生成；对照组卵巢组织可见不同发育阶段的卵泡 及黄体的生成；炔雌醇环丙孕酮组较ＰＣＯＳ组大鼠有所改善，可见成熟卵泡及黄体的生成。③电镜观察：ＰＣＯＳ组 比正常对照组大鼠卵巢电镜下见颗粒细胞出现凋亡形态特征，卵泡膜细胞较多，内可见脂滴明显增多；炔雌醇环 丙孕酮组大鼠卵巢镜下颗粒细胞凋亡所特有的超微结构变化明显改善，可见正常的颗粒细胞和卵丘，线粒体增 多，有大量滑面内质网；卵泡膜细胞凋亡明显增多。结论用来曲唑建立ＰＣＯＳ大鼠模型是一种较为理想的方法； 炔雌醇环丙孕酮能够从形态学上改善ＰＣＯＳ大鼠的卵巢组织，恢复排卵功能。 【关键词】多囊卵巢综合征；环丙孕酮；大鼠；颗粒细胞
Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ ａｎｄ ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｏｖａｒｉｅｓ ｏｆ ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ ｏｖａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ ｍｏｄｅｌ ｒａｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈｉｎｙｌｅｓｔｒａｄｉｏｌ ａｎｄ ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ ｔａｂｌｅｔｓ ＷＡＮＧ Ｙｏｎｇ－ｈｏｎｇ，ＷＡＮＧ Ｈｏｎｇ－ｌｉ．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＯｂｓｔｅｔｒｉｃｓ ａｎｄ Ｇｙｎｅｃｏｌｏｇｙ，Ｓｅｃｏｎｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｓｈａｎｘｉ Ｍｅｄｗａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｔａｉｙｕａｎ ０３０００１，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃ ａｎｄ ｕｈｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｏｖａｒｉｅｓ ｏｆ ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ ｏｖａｒｙ ｓｙｎ－ ｄｒｏｍｅ（ＰＣＯＳ）ｍｏｄｅｌ ｒａｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｅｔｈｉｎｙｌｅｓｔｒａｄｉｏｌ ａｎｄ ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ ｔａｂｌｅｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｅｍａｌｅ ｒａｔ ｍｏｄｅｌｓ ｏｆ ＰＣＯＳ ｗｅｒｅ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｗｉｔｈ ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ ａｎｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ（ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ＰＣＯＳ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ， ｅｔｈｉｎｙｌｅｓｔｒａｄｉｏｌ ａｎｄ ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ ｔａｂｌｅｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ）．Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｓｅｘ ｈｏｒｍｏｎｅ ｗｅｒｅ ｅｘａｍｉｎｅｄ ｂｙ ｒａ— ｄｉｏｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙ．Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｈｉｓｔｏｌｏｇｉｃ ｃｈａｎｇｅｓ ｉｎ ｒａｔ ｏｖａｒｉａｎ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｂｙ ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ—ｅｏｓｉｎ （Ｈ＆Ｅ） ｓｔａｉｎｉｎｇ ｉｎ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ，Ｔｈｅ ｕｈｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｔ ｏｖａｒｙ ｉｎ ｔｈｅ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ ｂｙ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｒｅｓｅｔｓ①１’ｈｅ ｓｅｒｕｍ ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＬＨ），ｔｅｓｔｏｓｔｅｒｏｎｅ ａｎｄ ｆｏｌｌｉｃｌｅ ｓｔｉｍｕｌａｔｉｎｇ ｈｏｒｍｏｎｅ（ＦＳＨ） ｉｎ ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｏｓｅ ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．Ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｅｓｔｒａｄｉｏｌ（Ｅ２） ａｎｄ ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ（Ｐ）ｉｎ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｌｏｗｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１）．Ｃｏｍｐａｍｄ ｗｉｔｈ ＰＣＯＳ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ．ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ＬＨ。ＦＳＨ．Ｔ ｉｎ ｔｌ】ｅ ｅｔｈｉｎｙｌｅｓｔｒａｄｉｏｌ ａｎｄ ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ ｔａｂｌｅｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｌｏｗｅｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｅ２，Ｐ ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ａｆｔｅｒ ｄｒｕｇ ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎ ＣＰ＜０．０５）．②Ｔｈｅ ｏｖａｒｉａｎ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ＰＣＯＳ ｍｏｄ— ｅｌ ｒａｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｍｕｌｔｉｐｌｅ ｃｙｓｔｓ ａｎｄ ｎｏ ｍａｔｕｒｅ ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ ａｎｄ ｌｕｔｅｉｎｉｚｉｎｇ ｕｎｄｅｒ ｏｐｔｉｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ．Ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｏ— ｖａｒｉａｎ ｔｉｓｓｕｅ ｃａｎ ｂｅ ｓｅｅｎ ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｆｏｌｌｉｃｌｅ ａｎｄ ｃｏｒｐｕｓ ｌｕｔｅｕｍ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ．Ｅｔｈｉｎｙｌｅｓｔｒａｄｉｏｌ ａｎｄ ｃｙｐｒｅｔｅｒｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ ｔａｂｌｅｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ ｓｈｏｗｅｄ ｉｍｐｒｏｖｅｄ ｍａｔｕｒｅ ｆｏｌｌｉｃｌｅ ａｎｄ ｃｏｒｐｕｓ ｌｕｔｅｕｍ ｆｏｒｍａｔｉｏｎ ｕｎｄｅｒ ｏｐｔｉｃａｌ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ． ③Ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｇｒａｎｕｌｏｓａ ｃｅｌｌｓ ａｎｄ ｔｈｅｃａ ｃｅｌｌｓ ａｒｅ ｍｏｒｅ ｖｉｓｉｂｌｅ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｌｉｐｉｄ ｄｒｏｐｌｅｔｓ ｕｎｄｅｒ ｔｒａｎｓｍｉｓｓｉｏｎ ｅｌｅｃｔｒｏｎｉｃ ｍｉ— ｃｒｏｓｃｏｐｅ ｉｎ ｔｈｅ ＰＣＯＳ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｉｎ ｒａｔｓ．Ｉｎ ｔｈｅ ｅｔｈｉｎｙｌｅｓｔｒａｄｉｏｌ ａｎｄ ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ ａｃｅｔａｔｅ ｔａｂｌｅｔｓ ｔｒｅａｔｅｄ ｇｒｏｕｐ，ｍｉｃｒｏ— ｓｃｏｐｉｃ ｕｌｔｒａｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃ ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｇｒａｎｕｌｏｓａ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｍｐｒｏｖｅｄ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ①Ｔｈｅ ｒａｔ ｍｏｄｅｌ ｉｎｄｕｃｅｄ ｗｉｔｈ ｌｅｔｒｏｚｏｌｅ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｍｏｄｅｌｓ ｆｏｒ ＰＣＯＳ ｓｔｕｄｙ．②Ｔｈｅ ｅｔｈｉｎｙｌｅｓｔｒａｄｉｏｌ ａｎｄ ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ ａｃ— ｅｔａｔｅ ｔａｂｌｅｔｓ ｍａｙ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｏｖａｒｉａｎ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ ｏｆ ＰＣＯＳ ａｎｄ ｒｅｓｔｏｒｅ ｏｖｕｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｒａｔ ｍｏｄｅｌｓ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ ｏｖａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ；Ｃｙｐｒｏｔｅｒｏｎｅ；Ｒａｔｓ；Ｇｒａｎｕｌｏｓａ ｃｅｌｌ
动物繁殖学名词解释2016最全版
A
安静发情：又称隐形发情、安静排卵，是指发情时缺乏发情的外表征象，但卵巢上有卵泡的发育、成熟并排卵。
B
白体：随着微血管退化，供血减少，黄体体积逐渐变小，黄体细胞的数量也显著减少，颗粒层细胞逐渐被纤维细胞所代替，黄体细胞间结缔组织侵入、增殖，最后整个黄体细胞被结缔组织所代替，形成一个斑痂，颜色变白，残留在卵巢上
不返情率(non-return rate)：指配种后一定时间内,不再表现发情的母畜头数占配种母畜总头数的百分比，反映配种质量和母畜数生殖能力
哺乳动物胚胎干细胞(mammalian embryonic stem
cell)：又称ES细胞或EK细胞，它是从早期胚胎或胎儿中分离出来的具有发育全能性的细胞系
不孕：是指母畜没有先天性的生殖机能异常而在应当生殖的时间内未能产出活的后代。（不孕的发生原因可能来自雌雄性任何一方。不孕可能是暂时的，经过正确地治疗可以恢复生育力）
不育：泛指公母畜繁殖能力的永久性丧失【不育是无法治愈的】
C
次要生殖激素：与生殖活动无直接关系，但可影响机体的生长和发育及代谢机能而间接影响生殖机能，如生长激素GH、促肾上腺皮质激素、促甲状腺激素、甲状腺激素、皮质醇、醛固酮、胰岛素、甲状旁腺激素等
持久黄体：妊娠或周期黄体超过正常时限而继续保持功能（分泌孕酮）
初乳:母畜分娩后最初几天（4-7天内）的乳汁，以后分泌的为常乳
初情期(puberty)：公畜初次释放有受精能力的精子，并表现出完整性行为序列的年龄，即为公畜初情期；母畜初次发情和排卵的时期
采精频率：是指每周内对公畜的采精次数
成活率(survival rate)：一般指断奶成活率，即断奶时成活仔猪数占出生时活仔畜总数的百分率，反映母畜的泌乳力和护仔性及饲养管理成绩
超数排卵（MOET）：在母畜（供体）发情周期的某一时期，用外源性的促性腺激素处理，从而促使其卵巢上较正常有更多个卵泡同时发育，并且能够同时或准同时排出多个具有受精能力的卵子的技术，筒称“超排”山羊和牛常用促性腺激素：FSH
促排卵的具体做法和步骤
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导语：现在由于环境问题和人们的饮食结构的变化，已经有越来越多的家庭成为遭遇了生育障碍，其中很多不孕不育的家庭都是由于女性的排卵问题而不孕
现在由于环境问题和人们的饮食结构的变化，已经有越来越多的家庭成为遭遇了生育障碍，其中很多不孕不育的家庭都是由于女性的排卵问题而不孕的。其实，如果新婚夫妇们的不孕的原因真的是由于女性排卵问题，那么大家完全可以参考一下促排卵方案。下面就促排卵的方法和步骤给大家详细的解说一下。 究竟为什么会不易排卵？要通过什么方式促进排卵呢？需要药物治疗吗？需要进行手术吗，相信这时候每对夫妻都化身成为了十万个为什么。那么下面就从促进排卵的步骤和监测角度来介绍。 首先是促排卵的方法与步骤： 1、促进卵泡募集、选择与发育 2、促进卵泡发育成熟，促进排卵或取卵 3、确保卵泡正常发育，必须确保卵泡发育期的内分泌环境，调整卵泡期LH水平与抑制早发LH峰
4、必须维持黄体功能，以利于怀孕正常进行。 关键点还是促排卵监测 1、实施前了解生殖系统状态，特别是子宫与卵巢解剖与功能基础状态 2、观察卵巢对促排卵药物的反应，以调整药物用量和用药时间 3、了解卵泡生长、发育与成熟情况，识别低反应周期和过激反应周期，评估卵子质量，了解获得成熟卵子合适时机，决定注射药物时间，以便获得较多的成熟卵子
从募集优势卵泡开始提高胚胎质量
从募集优势卵泡开始提高胚胎质量
叶虹
【期刊名称】《生殖医学杂志》
【年(卷),期】2013(22)4
【摘 要】Ovarian stimulation is an integral procedure in assisted
reproduction treatment. It is achieved by the administration of exogenous
gonadotropins to increase follicular recruitment and oocyte yield. At
present, two follicle-stimulating hormone ( FSH ) products are
commercially available for controlled ovarian stimulation(COS): highly
purified human-derived FSH(HP-FSH)and recombinant FSH (rFSH). HP-FSH
contains a higher proportion of acidic isoforms whereas rFSH contains a
higher proportion of less-acidic isoforms. Less-acidic isoforms exhibit high
bioactivity in vitro, but they have a faster clearance,and thus a shorter
circulatory half-life than the acidic FSH isoforms. The slow clearance of the
acidic isoforms results in more estrogenic follicles, follicular maturation
一氧化氮与哺乳动物卵泡发育
动物医学进展．２００６，２７（８）：３６—３８ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｉｎ Ｖｅｔｅｒｉｎａｒｙ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ 一氧化氮与哺乳动物卵泡发育 朱必龙，陶 勇，丁建平。，章孝荣，陈 华 （安徽农业大学动物科技学院，安徽合肥２３００３６） ＿氧 氮 竺 ．卵 苎！ Ｍ黝ａｔｓ ｕｍｉ 的定位，一氧化氮与卵母细胞的成熟、排卵及 ； 段，ｅＮ０ 猪卵 。 喜 荟
雯 。一ＮＯ ３ ， 兰 一定浓度的ＮＯ能够促进卵母细胞的成熟，ｉＮ 型 ？ ０ 、 ｓ！ｅ ． ０ｓ来源的ＮＯ调节 泡 破 ‘ 体的 ｓ 氅 要 爿 竺筌竺排出嘲，诱导型和 皮主 ｓ 。ＮＯ。对 ； ：。 呈 酶 墨 ， 发 的 。ＮＯ 少将 ｌ不 口＾ 巴 窖苎 ．呈苎 ２ 茹分 ，；二 等 实ｉ ： ｅ ２ Ｎ ： 苎！兰 ￣～Ｎ…（Ａ…Ｇ。； 显地抑 母细胞 二 ０兰 。 、 曼竺＝ｆ＝ ．主￣，ｅＮＯＳ ｉ 磊 苎苎 兰 妻位和表 时间 。 基酯（Ｌ－ＮＡＭＥ） 。 ＿ 主 Ｎ０ｓ的卵泡空间定位研究发现，ｉＮＯＳ和ｅＮＯＳ在 磊 ０也抑制卵 ， 霉 收稿日期：２００６－０５－１８ 作者简介：朱，￣（１９７６－－），男，江苏建湖人，
硕士研究生，主要从事动物胚胎工程研究。＊通讯作者 维普资讯 朱必龙等，一氧化氮与哺乳动物卵泡发育 ３７ 细胞的成熟，如通过体外培养鼠排卵前卵巢，发现 ＡＧ促进卵母细胞生发泡的破裂，而 亚硝基一Ｎ＿乙 酰青霉胺（ｓＮＡＰ）阻止生发泡的破裂［８］。过量的 ＮＯ可通过抑制孕马颗粒细胞Ｅ２的分泌，抑制卵母 细胞的成熟［９］。 ＮＯ通过不同的通路抑制或促进卵母细胞的成 熟，不同通路中某一物质是否存在，可影响ＮＯ对卵 母细胞成熟的作用［ ］。ＮＯ在卵母细胞中通过何种 通路起作用还不太清楚，有待于人们更深刻的了解 ＮＯ的具体作用方式。 ３ Ｎ０与排卵 在正常的排卵过程中，ＮＯ的产生是重要的生 理特征。在鼠卵泡的研究中发现，ＮＯ局部水平的 活动对于正常的卵泡发育是必须的。ＮＯ缺少将使 鼠卵泡的生长抑制和排卵减少［｜］，如兔体内用Ｌ＿ ＮＡＭＥ处理减少了大卵泡的产生比例，体外Ｌ＿ ＮＡＭＥ处理可降低卵泡破裂率，ＮＯ含酶基因敲除 鼠改变了发情周期，降低了排卵率［ｎ］。过量的ＮＯ 同样抑制排卵，如鼠ＴＫ受体敲除导致ＮＯ水平升 高促使卵巢体积的减小和排卵率的降低［ ］。 ＮＯ可通过激素调节排卵。ＮＯ调节的激素范 围较广，涉及整个生殖内分泌轴，最终是通过Ｅ２调 节排卵，如Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ等（１９９７）发现排卵前鼠卵巢 ＮＯ持续升高，并上调Ｅ２和ＬＨ，排卵时ＮＯ达到高 峰，高水平的ＮＯ抑制Ｅ２的分泌，促进排卵。ＮＯ对 颗粒细胞】１２合成的抑制作用，其生理机制主要有以 下几种：①ＮＯ通过降低芳香化酶的ｍＲＮＡ和对芳 香化酶活性的抑制，抑制鼠雌二醇的合成（Ｍａｔｓｕｍｉ 等，１９９８）Ｉ②ＮＯ通过连接于芳香酶亚铁血红素的 半胱氨酸上的亚硝基尿的形成发生抑制作用（Ｇａｒｙ 等，１９９６）。③ＮＯ通过受素来调节颗粒细胞，抑制 人雌二醇的合成［ｎ］。 ＮＯ的缺少将抑制ＧｎＲＨ，继而影响ＦＳＨ和 ＬＨ的释放。Ｂａｒｎｅｓ等发现，ＮＯ的慢性缺乏降低了 雌鼠下丘脑ＧｎＲＨ的释放，并伴随着ＬＨ和ＦＳＨ 分泌的下降。同样，ＮＯ的过量也可抑制垂体、下丘 脑激素的：分泌，鼠体外移植物试验证明了过量ＮＯ 可抑制Ｇｎ．ＲＨ和ＬＨ的释放。 ＮＯ还可通过影响其他生殖激素调节排卵，在 雌鼠，ＮＯ可抑制由ＦＳＨ刺激的卵母细胞成熟相伴 随产生的抑制素Ａ（ｉｎｈｉｂｉｎ Ａ）的释放（Ｓｒｉｖａｓｔａｖａ， １９９７），可介导排卵前泌乳刺激素峰的形成［１ ，还可 通过三加氧酶通路产生ＰＧＥ和ＰＧＦ２ ，加强卵泡破 裂（Ｆａｌｅｔｔｉ等，１９９９）。ＮＯ协助激素排卵的过程是 比较复杂的，不仅彼此相互影响，而且有许多其他的 物质参与。 ＮＯ还可利用其对血管通透性的作用调节卵泡 压，进而调节卵泡的破裂，如ＮＯＳ抑制剂可抑制鼠 卵泡血管的膨胀性，降低卵泡液流人卵泡腔［１ ，降 低卵泡压并影响排卵。 ４ Ｎ０与卵泡闭锁 卵巢中最终排卵的卵泡经历了卵泡发生、卵泡 募集、卵泡的选择和优化在选择过程中，经过精密的 生理机制的调控，大部分卵泡发生闭锁，最终只有少 数卵泡发育成优势卵泡并最终成熟排卵。发育最终 的卵泡是发育成优势卵泡还是发生闭琐，影响的因 素较多，研究发现ＮＯ可影响卵泡的闭锁。 ＮＯ主要是通过影响颗粒细胞的凋亡来影响卵 泡闭锁。ＮＯ在细胞凋亡方面的研究涉及的细胞类 型较多，ＮＯ一方面促进细胞凋亡，另一方面也有抑 制细胞凋亡的作用。同样，ＮＯ在颗粒细胞凋亡方 面也有双向作用。但目前研究较多的是抑制颗粒细 胞凋亡，即抑制卵泡闭锁。ＮＯ可通过以下几个方 面抑制凋亡：①ＮＯ以自分泌和旁分泌的方式抑制 大鼠颗粒细胞的凋亡来阻止成熟前卵泡的闭锁 （Ｍａｔｓｕｍｉ等，１９９８）；②ＮＯ可调节凋亡相关基因在 颗粒细胞的表达。在相关蛋白检测中发现ＮＯ通过 降低促进颗粒细胞凋亡基因如Ｆａｓ、Ｐ５３，Ｂａｘ等的 表达和促进在凋亡中有抑制作用的基因如Ｂｃｌ－２，热 激蛋白Ｈｓｐ７０等的表达来抑制人颗粒细胞的凋 亡［１阳；③ＮＯ通过抑制凋亡通路某一环节抑制凋亡， Ｃｈｅｎ Ｏ等在鼠中发现ＮＯ通过抑制由Ｆａ８／Ｆａ８Ｌ介 导的凋亡通路中半胱氨酸天冬酶（ｃａｓｐａｓｅ）来抑制颗 粒细胞的凋亡ｌＩＴ］。Ｎ０不仅参与卵泡发育阶段中细 胞凋亡而且参与卵泡排卵后黄体颗粒细胞的维持与 凋亡，从而达到对发情周期的调控。可见，ＮＯ有可 能参与卵泡的整个发育周期中细胞凋亡的调节Ｉ④ ＮＯ可通过激素调节卵泡的闭锁。如孕酮通过抑制 ＬＨ波动频率可促进卵泡的闭锁，Ｄｏｎｇ等研究发现 ＮＯ能上调大鼠卵巢孕酮的分泌，能够逆转前列腺 素（ＰＧＦ２．）对孕酮的抑制作用。但Ｌｉｓａ等证明ＮＯ 能下调大鼠孕酮的分泌。目前，ＮＯ对卵巢中雌激 素和孕酮分泌的调节作用还没有系统的研究，有待 证实。 ５小结
卵泡的发育和调控机制研究进展
・３６・ 国际生殖健康／计划生育杂志２０１４年１月第３３卷第１期Ｊ Ｉｎｔ Ｒｅｐｒｏｄ Ｈｅａｈｈ／Ｆａｍ Ｐｌａｎ，Ｊａｎｕａｒｙ ２０１４，Ｖｏ１．３３。Ｎｏ．１
卵泡的发育和调控机制研究进展
黄品秀，李蓉，韦继红 ・综述・
【摘要】静止的始基卵泡激活后经过初级卵泡、次级卵泡的发育阶段到达窦前卵泡阶段，接着窦卵 泡族被募集，进一步发育，经过卵泡选择、优势化，最后发育成成熟的排卵前卵泡。该过程复杂，许多不同来 源的细胞因子和内分泌激素在不同时间和空间上共同完成。随着分子生物学技术的发展，人们对卵泡发育 和调控机制的认识大大提高。然而，卵泡发育的调控机制极其复杂，尤其是始基卵泡的激活机制至今仍不 清楚。因此，透彻理解卵泡发育和分子调控机制在转化医学和人类生殖中的临床应用非常重要。 【关键词】卵母细胞；卵泡；卵原细胞；细胞因子类
Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｐｒｏｇｒｅｓｓ ｏｆ ｔｈｅ Ｆｏｌｌｉｃｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓ ａｎｄ Ｉｔｓ Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ＨＵＡＮＧ ｎ—— Ｍ，ＬＩ Ｒｏｎｇ， Ｊ 一 ｏ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＲｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｍａｔｅｒｎａｌ＆Ｃ Ｈｅａｌｔｈ Ｃａｒｅ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ Ｇｕａｎｇｘｉ Ｌｉｕｚｈｏｕ Ｃｉｔｙ，Ｌｉｕｚｈｏｕ ５４５００１，Ｇｕａｎｇｘｉ，Ｃ＾ｉｎａ（Ｈ ⅣＧ Ｐｉｎ—ｘｉｕ，ＷＥ１ 一ｈｏｎｇ）；Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＰｅｋｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｚｈｅｎ ５１８０３６，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，Ｃｈｉｎａ（Ｌｌ Ｒｏｎｇ） Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ ａｕｔｈｏｒ：ＷＥ１ Ｊｉ—ｈｏｎｇ，Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｊｈｉ１２１＠１２６．ｃｏｍ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】，Ｉ’｝ｌｅ ｑｕｉｅｓｃｅｎｔ ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ，ａｆｔｅｒ ａｃｔｉｖａｔｅｄ，ｇｒｏｗ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐ ｔｈｒｏｕｇｈ ｓｔａｇｅｓ ｏｆ ｐｒｉｍａｒｙ ａｎｄ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ．ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｈｅ ａｎｔｒａｌ ｓｔａｇｅ．Ａ ｃｏｈｏｒｔ ｏｆ ａｎｔｒａｌ ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ ａｒｅ ｒｅｃｒｕｉｔｅｄ ｆｏｒ ｆｕｒｔｈｅｒ ｇｒｏｗｔｈ ａｎｄ ｄｏｍｉｎａｎｃｅ．Ｔｈｅ ｍａｔｕｒｅｄ ｆｏｌｌｉｃｌｅ ｗｉｌｌ ｂｅ ｏｖｕｌａｔｅｄ ａｔ ｌａｓｔ．Ｔｈｉｓ ｐｒｏｃｅｓｓ ｉＳ ＳＯ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ．ｗｈｉｃｈ ｉＳ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｂｙ ａ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｄｉｆｅｒｅｎｔ ｓｏｕｒｃｅｓ ｏｆ ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ ａｎｄ ｅｎｄｏｃｒｉｎｅ ｈｏｒｍｏｎｅｓ，ａｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｓｐａｃｅ．Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｙ ｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ，ｍａｎｙ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓ ｏｆ ｆｏｌｌｉｃｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓ ｗｅｒｅ ｕｎｃｏｖｅｒｅｄ ｄｅｅｐｌｙ． Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ ｆｏｌｌｉｃｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓ ｉＳ ｃｏｍｐｌｉｃａｔｅｄ，ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ ｔｈｅ ｉｎｉｔｉａｔｉｏｎ ａｎｄ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｉｍｏｒｄｉａｌ ｆｏｌｌｉｃｌｅｓ．Ｉｔ ｉＳ ｖｅｒｙ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｔｏ ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄ ｔｈｏｒｏｕｇｈｌｙ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｓｐｅｃｔｓ ｏｆ ｆｏｌｌｉｃｕｌｏｇｅｎｅｓｉｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎａｌ ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｉｎ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ ｍｅｄｉｃｉｎｅ． 【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】Ｏｏｃｙｔｅｓ；Ｏｖａｒｉａｎ ｆｏｌｌｉｃｌｅ；Ｏｏｇｏｎｉａ；Ｃｙｔｏｋｉｎｅｓ （Ｊｌｎｔ Ｒｅｐｒｏｄ Ｈｅａｌｔｈ／Ｆａｍ Ｐｌａｎ，２０１４，３３：３６—３９）
颗粒细胞与卵母细胞发育
颗粒细胞与卵母细胞发育
沈浣
【摘 要】颗粒细胞在卵母细胞发育、成熟中起着重要的营养及信号传导作用,同时卵母细胞对颗粒细胞的分化及发育也起着中心调节作用.研究颗粒细胞的基因表达改变可以对卵母细胞发育的微环境进行评估.颗粒细胞基因差异表达可能与卵母细胞质量有关,有可能通过对颗粒细胞基因表达谱的分析,寻找卵母细胞及胚胎选择的生物标记,以提高体外受精的受精率、胚胎种植率及临床妊娠率,降低流产率.
【期刊名称】《国际生殖健康/计划生育杂志》
【年(卷),期】2012(031)005
【总页数】4页(P344-347)
【关键词】卵母细胞;卵泡;受精,体外;转录,遗传
【作 者】沈浣
【作者单位】100044 北京大学人民医院生殖医学中心
【正文语种】中 文
卵母细胞发育成熟的过程是在由颗粒细胞包绕的环境中完成的，因此颗粒细胞尤其是与卵母细胞之间形成大量缝隙连接的卵丘颗粒细胞，对支持卵母细胞发育成熟、传递内分泌及其他环境信号有至关重要的作用；同时，卵母细胞对颗粒细胞的分化、发育及功能也起着重要的调节作用。Vanderhyden等[1]在大鼠未成熟卵培养的实验中，发现了颗粒细胞对卵母细胞成熟的重要性：将未成熟的卵母细胞与颗粒细胞共同培养，卵母细胞能够成熟，并能获得与常规体外受精（IVF）相近的活胎出生率，而在缺乏颗粒细胞的条件下培养GV期或MⅠ的卵母细胞，则成熟率大为降低。
颗粒细胞与卵母细胞之间的相互依赖关系涉及到一整套复杂多变的双向信号传导系统，研究卵泡发育各阶段的分子及细胞调控机制，了解卵母细胞的发育及成熟过程，有助于理解一些诸如多囊卵巢综合征、卵巢反应不良、卵母细胞成熟障碍等疾病的病理机制，改进诱发排卵、控制性卵巢刺激、未成熟卵母细胞培养等临床方案。颗粒细胞是在人类辅助生殖技术实施过程中被丢弃的细胞成分，但有可能提供了卵母细胞发育及成熟的重要信息，因此，分析人类颗粒细胞，寻找可能预测卵母细胞质量及胚胎发育潜能的标记，将会给今后胚胎选择方法提供新的思路。
促排卵会把卵子提前排空吗
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促排卵会把卵子提前排空吗
作者：
来源：《家庭百事通·健康一点通》2017年第05期
最近，有相关媒体报道，一个94年出生的大学生，为了买一部苹果手机，前后卖了20颗卵子，换取了25000元。那么，促排卵和取卵的危害有多大？有篇文章写道：“女性一生中，从青春期发育到更年期绝经，只有400～500个卵泡，正常女性一个月一般排出1个卵泡，当体内的卵泡排尽，卵巢的功能也就开始退化了。如果女性胡乱服用促排卵药，一个月排出数个卵子，可能到了30多岁就要面临卵泡枯竭的情况，更年期也就提前来临了。”这段文字貌似逻辑清楚，但是其表达的知识是不准确的。
卵子的发育进程
卵泡自胚胎形成后即进入自主发育和闭锁的轨道。胚胎16～20周时两侧卵巢共含600万～700万个卵泡（此时还是初级卵母细胞）。胚胎16周至生后6个月，初级卵母细胞形成始基卵泡。胎儿期的卵泡不断闭锁，出生时约剩下200万个，儿童期多数卵泡退化，至青春期只剩下30万个。
进入青春期后，卵泡由自主发育推进至发育成熟的过程依赖于促性腺激素的刺激。女性一生中一般确实只有400～500个卵泡发育成熟并排卵。每个月，健康生育年龄的女性每个月经周期至少排出一个卵子。并且，生育期每月是发育一批（3～11个）卵泡，但是经过募集、选择，其中一般只有一个优势卵泡可达完全成熟，并排出卵子。
当卵泡直径达0.2～0.4毫米时，颗粒细胞间产生液体，堆积形成腔，称为“窦卵泡”。“窦卵泡”的募集一般发生在月经的第1～4天。卵泡的发育需要符合一定的条件，有些卵泡对低卵泡刺激素（FSH）敏感，而有些不敏感，故敏感的卵泡进入了生长的下一阶段。
促排卵的原理
促排卵则是通过增加低卵泡刺激素的剂量使部分不敏感的卵泡进入了敏感行列，进一步生长，达到成熟卵泡的标准。故通常情况下，促排卵可以获得比自然周期更多的卵泡。前面讲到，卵泡自胚胎形成后即进入自主发育和闭锁的轨道，卵泡的闭锁又是什么情况？其实，卵泡闭锁是女性胎儿妊娠7周即开始的过程，进入一个周期的卵泡虽然是一批，但是自然周期中最终成熟的在大部分人群中均只有一个，其余对低卵泡刺激素水平不能很好地匹配，都相应进入了闭锁阶段。
妇产科学重点归纳
妇产科学重点归纳
妇产科学重点概述
子宫峡部是指子宫体与子宫颈之间最狭窄的部分，在非孕期长约1cm。而月经是指伴随卵巢周期性变化而出现的子宫内膜周期性脱落及出血。卵泡闭锁是指生育期每月发育一批卵泡，经过募集和选择，其中只有一个优势卵泡可达完全成熟并排出卵子，其余卵泡发育到一定程度通过细胞凋亡机制而自行退化。而排卵是指卵细胞和它周围的卵丘颗粒细胞一起被排出的过程。
黄体是指排卵后卵泡液流出，卵泡腔内压下降，卵泡壁塌陷，形成许多皱襞，卵泡壁的卵泡颗粒细胞和卵泡内膜细胞向内侵入，周围由结缔组织的卵泡外膜包围，共同形成的结构。下丘脑-垂体-卵巢轴（HPO）是月经周期的调节过程中涉及的神经内分泌系统，主要包括下丘脑、垂体和卵巢，它们之间相互调节、相互影响。
获能是指射入内，离开经宫颈管、子宫腔进入输卵管腔，在此过程中顶体表面的糖蛋白被生殖道分泌物中的α、β淀粉酶降解，同时顶体膜结构中胆固醇与磷脂比率和膜电位发生变化，降低顶体膜稳定性，此过程需要7小时。而顶体反应是指卵子从卵巢排出，经输卵管伞部进入输卵管内，当停留在输卵管处等待的与卵子相遇，头部顶体外膜破裂，释放出顶体酶，溶解卵子外围的放射冠和透明带。
着床是指晚期囊胚侵入到子宫内膜的过程，也称植入。而希克氏征（Braxton-Hicks收缩）是指自妊娠12-14周起，宫缩稀发、不规律和不对称，随妊娠进展而逐渐增加，但宫缩时宫腔内压通常为5-25mmHg，持续时间不足30秒，不伴宫颈的扩张，这种生理性无痛宫缩。
黑加征是指停经6-8周时，双合诊检查子宫峡部极软，感觉宫颈与宫体之间似不相连。而胎产式是指胎体纵轴与母体纵轴的关系，胎方位是指胎儿先露部的指示点与母体骨盆的关系。
异常妊娠是指种植部位不在宫腔内或在宫内生长发育的时间过短或过长的情况。而流产是指妊娠不足28周、胎儿体重不足1000g而终止的情况。生化妊娠则是指早期流产中，约2/3为隐性流产，即发生在月经期前的流产。 17.稽留流产是指胚胎或胎儿已死亡滞留在宫腔内未能及时自然排出的情况。
影响始基卵泡启动募集的调控因素
TianjinMedJ,Apr2010,Vol38No4始基卵泡是女性的基本生殖单位，也是卵细胞储备的唯一形式。自胚胎16周至出生后6个月，卵巢内单层梭形前颗粒细胞围绕初级卵母细胞形成始基卵泡。随着始基卵泡池的建立，始基卵泡就开始了启动和凋亡的过程。始基卵泡的募集分为启动募集和周期募集。启动募集是指始基卵泡在卵巢内因子以及未知的调控机制作用下脱离始基卵泡池向初级卵泡转化，此阶段不受促性腺激素影响。周期募集是指在每个月经周期中，当内分泌环境（主要指促性腺激素分泌情况）发生变化时，能够对这种变化发生应答的卵泡开始转变为次级卵泡。始基卵泡的启动募集过程分为两个阶段：第一阶段为前颗粒细胞由扁平状向立方状转变，并伴随颗粒细胞的增生；第二阶段为卵母细胞体积增大和颗粒细胞的继续增殖。始基卵泡的募集过程直接影响了女性一生中能够提供的卵子数量，在卵巢生物学上有很重要的意义。本文对目前研究较多的几种影响始基卵泡启动募集的因素进行综述如下。1始基卵泡的启动募集不受下丘脑-垂体-卵巢轴直接调节始基卵泡的启动募集与促卵泡生成素（folliclestimulatinghormone，FSH）和黄体生成激素（luteinizinghormone，LH）无关。到次级卵泡阶段才出现FSH和LH受体，因此始基卵泡中没有功能性的FSH和LH受体。垂体切除的大鼠、小鼠的始基卵泡同样可被启动募集，并发展为初级卵泡。Braw等[1]研究表明，在不添加FSH和血清的条件下，体外培养的鼠、兔、牛和羊的始基卵泡均可进入生长池。因此可以证明FSH和LH不参与始基卵泡的启动募集，始基卵泡的启动募集主要受卵巢局部调节因子的控制。2卵巢局部调节因子2.1始基卵泡生长促进因子干细胞因子（stemcellfactor,SCF）属于白细胞介素-6家族成员，是最早发现的能够促进始基卵泡募集的旁分泌因子。因SCF是酪氨酸激酶受体（c-Kit）的配体（ligandofc-Kitreceptor,KL），因此SCF又称KL。KL及其受体在卵巢组织的表达存在物种差异性。山羊卵巢组织中各级卵泡的颗粒细胞内均可检测到KLmRNA和蛋白，卵母细胞内则检测到c－KitmRNA和蛋白[2]。在人卵巢中，颗粒细胞、卵泡膜细胞、间质细胞和卵巢上皮细胞均产生KL。c-Kit则主要表达于卵母细胞，同时在人的卵巢颗粒细胞和卵泡膜细胞上也检测到了c-Kit的表达,表明除颗粒细胞与卵母细胞之间相互作用以外，KL还可能直接作用于颗粒细胞和卵泡膜细胞并调控其生长分化，从而间接调控卵母细胞的生长发育。但近年来的研究表明，不同物种间KL及其受体对卵泡发育的作用不尽相同。Hutt等[3]对家兔的研究表明，虽然在卵泡早期发育过程中KL及其受体具有促进家兔卵母细胞生长的作用，但却无启动始基卵泡发育的作用。Moniruzzaman等[4]研究证实KL与猪始基卵泡的启动和发育无明显相关性,而仅与维持卵母细胞存活、发挥抗卵母细胞凋亡有关。Carlsson等[5]也用不同浓度的KL与卵巢组织体外共同培养,结果外源性KL不能增加初级卵泡数，也不能提高体外培养中各级生长卵泡数；阻断KL作用后，体外培养卵巢组织中各级卵泡凋亡率增加，因此外源性KL可能仅与卵泡早期发育中的抗凋亡有关。碱性成纤维细胞生长因子（basicfibroblastgrowthfactor，bFGF）是成纤维细胞生长因子超家族成员之一。目前已经发现5种形式的bFGF，其中分泌到胞外的主要是分子质量为18ku的bFGF，也是目前研究最多的bFGF[6]。在小鼠卵巢中，bFGF在所有阶段的卵母细胞中均有表达。在人类卵巢中,bFGF及其受体FGFR-2、FGFR-3、FGFR-4在各阶段卵泡卵母细胞均有表达，在青春期后的女性卵巢颗粒细胞也有表达。bFGF是一种强有力的有丝分裂原，是诱导始基卵泡募集的重要细胞因子，它能够调节颗粒细胞的有丝分裂、分化、凋亡及甾体激素的合成，刺激卵泡膜细胞和间质细胞生长，通过作用于周围的颗粒细胞促进始基卵泡向初级卵泡转化。此外，bFGF还以旁分泌途径影响卵泡内膜细胞血管的发生。白血病抑制因子（leukemiainhibitoryfactor,LIF）是白细胞介素-6家族成员，其可调节多种组织和细胞的生长及凋亡。Nilsson等[7]对大鼠卵巢内LIF的研究表明，在始基卵泡和初级卵泡阶段，LIF在颗粒细胞及周围体细胞中的表达高于卵母细胞；而在次级卵泡中，LIF主要在卵母细胞中表达，而在颗粒细胞及周围的体细胞中的表达很少。LIF促进始基卵泡募集，抗LIF抗体可降低自发的始基卵泡的转化率。该实验还发现LIF能上调颗粒细胞KL的表达，而对始基卵泡颗*国家自然科学基金资助项目（项目编号：30801479）作者单位：300193天津中医药大学（李爽，马灵芝）；天津中医药大学第一附属医院（夏天，夏阳）**审校者△通讯作者E-mail：xiatian1976@影响始基卵泡启动募集的调控因素*李爽马灵芝夏天**△夏阳**关键词卵泡细胞凋亡卵巢干细胞因子成纤维细胞生长因子2白血病抑制因子骨形态发生蛋白质类表皮生长因子生长调节素类综述与讲座342天津医药2010年4月第38卷第4期粒细胞的生长没有直接影响，以此推测LIF可能是通过促进颗粒细胞产生KL来促进始基卵泡向初级卵泡的过渡。骨形态发生蛋白（bonemorphogenicproteins，BMP）属于转化生长因子-β超家族成员。第一个显示与始基卵泡发育相关的BMP是BMP－15。BMP－15与其他家族成员不同，缺乏形成共价二聚体的半胱氨酸残基，由卵母细胞分泌[8-9]。在人类始基卵泡、初级卵泡和次级卵泡，甚至成熟卵泡中均有表达[10]。BMP-15作为颗粒细胞有丝分裂的刺激因子，主要通过促进颗粒细胞减数分裂、刺激KL的表达来影响早期卵泡的发育。在以后的发育中BMP-15也可以通过自分泌或旁分泌的方式影响卵泡的闭锁以及优势卵泡的选择[11]。BMP-4是由间质细胞分泌的维持始基卵泡存活的必需因子，其作用于邻近的颗粒细胞，可以显著增加始基卵泡向初级卵泡的转化率。BMP-4不但可以提高FSH诱导的颗粒细胞分泌雌二醇，抑制孕激素的分泌，而且还可以与激活素、促性腺激素释放激素相互作用从而调节促性腺激素的分泌[12]。动物实验显示向培养液中加入BMP-4中和抗体后,卵巢细胞减少的同时凋亡细胞相应增加，卵巢体积缩小，正常形态丧失；人体试验也得出相似结论[13]。生长分化因子－9（growthdifferentiationfactor－9，GDF－9）也是转化生长因子－β超家族成员。其在自始基卵泡起的各阶段卵母细胞中均有表达。Wang等[14]发现GDF-9促进始基卵泡形成，用GDF-9的小干扰RNA抑制GDF-9活性可以抑制始基卵泡的形成。Juengel等[15]在对牛的研究中发现，GDF-9是调节卵泡正常发育和排卵的关键因素。最新的研究表明，卵母细胞通过GDF-9调节卵丘胆固醇的合成[16]。Gilchrist等[17]进一步研究表明，当卵母细胞缺乏胆固醇时，卵母细胞源性的GDF-9通过促进卵丘合成胆固醇来弥补卵母细胞中胆固醇产生的不足，证明卵母细胞和卵丘间具有双向调节作用。GDF-9对卵泡膜细胞功能方面也有重要的调节作用，并且小的卵泡膜细胞比大的卵泡膜细胞对GDF-9更加敏感[18]。Shi等[19]研究表明GDF-9可调控激活信号传导通路的关键部分，通过增强细胞对激活素A的反应性，从而增强激活素A诱导的抑制素B在人类颗粒细胞的产生。角化细胞生长因子（keratinocytegrowthfactor,KGF）是成纤维生长因子家族成员，由新募集的前体膜细胞产生，作用于临近的颗粒细胞，是目前发现的第一个发育中的前体膜细胞标志物。发育中始基卵泡的前体膜细胞能产生KGF，KGF又作用于邻近颗粒细胞使其产生KL，KL有助于募集前体膜细胞，产生KGF的同时也增强了KL的表达，从而产生正反馈回路。表皮生长因子（epidermalgrowthfactor,EGF）是由153个氨基酸组成的单链多肽。在羊的始基卵泡和初级卵泡的卵母细胞和颗粒细胞均表达EGFmRNA和蛋白[20]。在人类的卵巢中，EGF在始基卵泡和初级卵泡的卵母细胞中表达量较高，在初级卵泡的颗粒细胞以及各级卵泡的卵泡膜细胞中表达量也较高。EGF在人类始基卵泡募集和卵泡的发育过程中起重要作用，其可促进静息细胞表达增殖细胞核抗原（PCNA），导致细胞周期改变，促进细胞增殖，使卵泡进入生长相。同时EGF也能刺激始基卵泡类固醇激素的分泌。柳海珍等[21]以PCNA为指标，研究EGF和FSH对新生大鼠始基卵泡生长启动的作用，结果显示，EGF能促进始基卵泡前体颗粒细胞增殖分化，而FSH对始基卵泡生长启动则不发挥作用。胰岛素样生长因子（insulin-likegrowthfactor,IGF）系统是一组多功能细胞增殖调控因子，由2类多肽生长因子（IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ）、2类IGF受体（IGFR-Ⅰ、IGFR-Ⅱ）和至少7种结合蛋白（IGFBPs）及IGFBP特异性蛋白分解酶构成，因其化学结构与胰岛素原类似而得名。Louhio等[22]研究表明雄激素通过促进始基卵泡卵母细胞表达IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ、IGFR-Ⅰ和IGFR-Ⅱ参与始基卵泡的启动过程。IGF-Ⅰ和IGFR-Ⅰ可介导雄激素促进早期卵泡发育。IGF-ⅡmRNA在卵母细胞任何发育阶段上均高表达，在卵泡发育的起始阶段，IGF-Ⅱ不仅与IGFR-Ⅱ，还可与IGFR-Ⅰ结合，通过两种不同途径传递信号，激活抗凋亡基因，促进始基卵泡的颗粒细胞和卵母细胞的发育。2.2始基卵泡生长抑制因子抗苗勒激素（anti-Müllerianhormone,AMH）是转化生长因子－β超家族成员，是目前发现的唯一抑制始基卵泡募集的生长因子。人类AMH最初表达于初级卵泡的颗粒细胞，在窦前卵泡及小窦状卵泡中表达最强，随着卵泡逐渐增大，AMH表达量也逐渐减少，当卵泡直径＞8mm时，AMH表达几乎完全消失，仅在卵丘的颗粒细胞中有少量残存。AMH可抑制体外培养的新生卵巢始基卵泡的募集。Durlinger等[23]通过添加AMH和不添加AMH体外培养新生小鼠卵巢的研究表明，2日龄新生小鼠的卵巢中含有始基卵泡和裸卵，但不含生长卵泡；而添加AMH实验组经体外培养2d或4d后发现生长卵泡数量较对照组减少40%～50%。实验还发现，AMH基因缺失的小鼠出生25d后卵巢内生长卵泡数量较同窝小鼠明显增多，至4月龄时卵巢内生长卵泡数目是正常小鼠的3倍，并且始基卵泡数明显减少，最终导致始基卵泡池过早耗竭。大量实验表明，AMH可作为始基卵泡生长抑制因子，抑制始基卵泡的启动募集。作为旁分泌因子，AMH的分泌不受促性腺激素的调控。体外受精的患者给予单一、大剂量的促性腺激素释放激素激动剂后，尽管内源性FSH及LH水平均升高，但AMH含量却未受到影响。Wouter等[24]通过观察44例正常月经周期妇女整个月经周期中血清AMH水平的变化发现，AMH水平在月经周期的各个阶段均无实质性波动。Kevenaar等[25]研究发现，小鼠卵巢内生长卵泡数目与始基卵泡数目呈明显相关性，血清中AMH水平与生长卵泡及始基卵泡的数目呈强相关性。所以AMH不受促性腺素影响，也不受月经周期的限制，又可相对地反映始基卵泡池的存量，因而AMH也可作为卵巢储备的标志之一。3始基卵泡细胞之间的相互作用始基卵泡的启动募集不受促性腺激素的调节，因而其卵巢内部的生长环境尤为重要。由卵母细胞、颗粒细胞和卵泡343TianjinMedJ,Apr2010,Vol38No4膜细胞构成的卵巢微环境是卵泡发育的重要场所。严密的信号传导结构和交错的信息调节网络是卵泡启动和发育的必备条件。在结构方面，始基卵泡细胞之间为了相互传递信息的需要，在卵泡细胞之间、卵母细胞和颗粒细胞间、颗粒细胞之间、颗粒细胞和卵泡膜细胞间建立了广泛的信号联系，这些信号联系参与调节始基卵泡的启动募集过程。透明带是卵母细胞和颗粒细胞间主要的物质、能量及信息交换结构。缝隙连接是卵丘颗粒细胞形成的突出物穿过透明带与卵母细胞表面的突起形成的接触。构成缝隙连接的主要成分和标志物是连接蛋白。同样参与卵泡早期生长启动的重要因素还有细胞黏附分子E-钙黏素、P-钙黏素等。这些细胞之间的相互联系在始基卵泡的启动过程中都起了重要的作用。体外培养表明，将不成熟的卵母细胞与颗粒细胞分离培养时，二者均不能生长；共培养时，卵母细胞与颗粒细胞间自动形成缝隙连接，这与它们在卵泡中的空间结构相似。在信息调解网络方面，卵泡细胞间存在复杂的信号传导系统。始基卵泡细胞之间通过细胞因子相互作用调节始基卵泡的募集。卵母细胞产生的细胞因子bFGF作用于颗粒细胞和卵泡膜细胞上的bFGF受体，使颗粒细胞和卵泡膜细胞增生；同样的颗粒细胞分泌的KL也作用于卵母细胞和卵泡膜细胞，调节始基卵泡的募集。Eppig等[26]将次级卵泡的卵母细胞取出植入到始基卵泡内，始基卵泡迅速生长，颗粒细胞分化加快，并且卵母细胞发育正常，能够受精形成胚胎，说明卵泡细胞之间具有双向调节作用。不仅卵泡细胞之间具有信息调节作用，各种细胞因子之间也形成各种相互交错的调节网络。研究表明BMP-15与KL之间存在负反馈调节系统，Otsuka等[27]在体外培养小鼠卵泡细胞发现，卵母细胞产生BMP-15促进颗粒细胞表达KL，而过量的KL反过来又抑制卵母细胞表达BMP-15，两者之间形成双向的调节环路，共同调控始基卵泡的启动募集。卵泡的启动受多种自分泌和旁分泌等因素的影响，是一个极其复杂的过程。探讨卵泡发育的本质和卵巢局部调节因子对卵巢微环境的作用，对揭示始基卵泡的启动机制和卵母细胞的体外成熟大有裨益。参考文献[1]BrawTR,YossefiS.Studiesinvivoandinvitroontheinitiationoffolliclegrowthinthebovineovary[J].JReprodFertil,1997,109(1):165-171.[2]SilvaJR,vandenHurkR,vanTolHT,etal.TheKitligand/c-Kitre-ceptorsystemingoatovaries:geneexpressionandproteinlocaliza-tion[J].Zygote,2006,14(4):317-328.[3]HuttKJ,McLaughlinEA,HollandMK.KIT/KITligandinmam-malianoogenesisandfolliculogenesis:rolesinrabbitandmurineo-varianfollicleactivationandoocytegrowth[J].BiolReproduction,2006,75(3):421-433.[4]MoniruzzamanM,MiyanoT.KIT-KITligandinthegrowthofporcineoocytesinprimordialfollicles[J].Reprod,2007,53(6):1273-1281.[5]CarlssonIB,LaitinenMP,ScottJE,etal.Kitligandandc-Kitareexpressedduringearlyhumanovarianfolliculardevelopmentandtheirinteractionisrequiredforthesurvivaloffolliclesinlong-termculture[J].Reprod,2006,131(4):641-649.[6]MalkowskiA,SobolewskiK,JaworskiS,etal.FGFbindingbyex-tracellularmatrixcomponentsofWharton’sjelly[J].ActaBiochimPol,2007,54(2):357.[7]NilssonEE,KezeleP,SkinnerMK.Leukemiainhibitoryfactor(LIF)promotestheprimordialtoprimaryfollicletransitioninratovaries[J].MolCellEndocrinol,2002,188(1-2):65-73.[8]GueripelX,BrunV,GougeonA.Oocytebonemorphogeneticprotein15,butnotgrowthdifferentiationfactor9,isincreasedduringgo-nadotropin-inducedfolliculardevelopmentintheimmaturemouseandisassociatedwithcumulusoophorusexpansion[J].BiolReprod,2006,75(6):836-843.[9]Martinez-RoyoA,JuradoJJ,SmuldersJP,etal.Adeletioninthebonemorphogeneticprotein15genecausessterilityandincreasedprolificacyinRasaAragonesasheep[J].AnimGenet,2008,39(3):294-297.[10]MeryL,LefevreA,BenchaibM,etal.Folliculargrowthinvitro:de-tectionofgrowthdifferentiationfactor9(GDF-9)andbonemorpho-geneticprotein15(BMP-15)duringinvitrocultureofovinecorticalslices[J].MolReprod,2007,74(6):767-774.[11]LiuL,RajareddyS,ReddyP,etal.Infertilitycausedbyretardationoffolliculardevelopmentinmicewithoocyte-specificexpressionofFoxo3a[J].Development,2007,134(1):199-209.[12]NicolL,FaureMO,McNeillyJR,etal.Bonemorphogeneticprotein-4interactswithactivinandGnRHtomodulategonadotrophinsecre-tioninLbetaT2gonadotrophs[J].Endocrinol,2008,196(3):497-507．[13]TanwarPS,O′sheaT,McFarlaneJR.Invivoevidenceofroleofbonemorphogeneticprotein-4inthemouseovary[J].AnimReprodSci,2008,106(3/4):232-240．[14]WangC,RoySK.Expressionofgrowthdifferentiationfactor-9intheoocytesisessentialforthedevelopmentofprimordialfolliclesinthehamsterovary[J].Endocrinology,2006,147(4):1725-1734.[15]JuengelJ,HudsonN,BergM,etal.Effectsofactiveimmunizationagainstgrowthdifferentiationfactor9(GDF9)and/orbonemorpho-geneticprotein15(BMP15)onovarianfunctionincattle[J].Repro-duction,2009,138(1):107-114.[16]SuYQ,SugiuraK,WigglesworthK,etal.Oocyteregulationofmetaboliccooperativitybetweenmousecumuluscellsandoocytes:BMP15andGDF9controlcholesterolbiosynthesisincumuluscells[J].Development,2008,135(1):111-121.[17]GilchristRB,LaneM,ThompsonJG.Oocyte-secretedfactors：regu-latorsofcumuluscellfunctionandoocytequality[J].HumReprodUpdate,2008,14(2):159-177.[18]SpicerLJ,AadPY,AllenetDT,etal.Growthdifferentiationfactor9(GDF9)stimulatesproliferationandinhibitssteroidogenesisbybovinethecacells:influenceoffolliclesizeonresponsestoGDF9344