结核病实验室诊断技术及应用
肺结核的检查项目有哪些？
肺结核的检查项目有哪些？检查项目：病原学检查、X线胸片检查、胸部CT扫描、经皮肺穿刺术、结核菌素试验实验室诊断：1.细菌学检查痰涂片及培养查找结核菌是诊断肺结核最特异的方法，也是监测疗效、病原传染性和选择用药的重要依据。
沉淀或漂浮集菌法涂片，或采用荧光镜检可提高阳性率，若无痰可采用导痰法，或取气管灌洗液或取清晨胃液均可。
2.结核菌素试验：是判断结核感染的主要手段，但不论是旧结核菌素(OT)或纯蛋白衍生物(PPD)均非纯化抗原，对于鉴别是结核杆菌感染还是非结核杆菌感染或是卡介苗接种后反应有局限性。
结素试验强阳性(局部肿结>2cm或有水疱、坏死)提示处于结核超敏状态，对原发型肺结核、结核性胸膜炎有诊断参考价值。
3.血清学检查由于结核菌的弱抗原性以及抗原的非特异性，结核病的血清诊断学至今未取得实质性进展。
近年大量报道的酶联免疫吸附试验(ELISA)，敏感性颇高，但方法学尚不成熟，特异性也不满意。
采用PPD复合蛋白抗原剂，虽然敏感性和特异性可提高，但其仍非单一特异性抗原。
4.基因诊断近几年结核菌基因诊断技术受到广泛的关注。
有关文献报道最多的是PCR技术的应用，具有快速、特异、灵敏的特点，但其操作有很高的技术要求，可因扩增气溶胶污染而致假阳性或标本中抑制物的存在而致假阴性。
5.纤维支气管镜检查：可为病理学诊断和病原学诊断提供标本。
影像学诊断：1.X线检查不同类型和性质的病变表现不同，对于诊断肺结核无特异性，但是诊断肺结核的必备检查，可为进一步病因学检查提供对象，并为确定病变部位、范围、性质，了解其演变和选择治疗提供重要依据。
原发型肺结核典型X线表现为肺内原发灶、淋巴管炎和肿大的肺门或纵膈淋巴结组成的哑铃状阴影。
急性血行播散型肺结核胸片可见散布于两肺野，分布较均匀，密度和大小相近的粟粒状阴影，早期有时难以分辨;亚急性或慢性血行播散型肺结核粟粒大小和密度不一，或为结节状病变，范围较局限。
继发性肺结核，多为渗出，浸润和纤维结节的混合病灶，X线表现为云絮状或斑点结节状阴影，干酪性病变阴影密度偏高而不均匀，或有空洞形成而出现透亮区，结核空洞一般洞壁较光整液平少或仅见浅液平。
结核病血清学诊断进展
结核病血清学诊断进展结核病的细菌学检查目前是结核病实验室诊断的金标准。
由于痰涂片阳性率较低，镜检需要经验，难以区分环境分枝杆菌造成的假阳性；痰培养需时太长，因此细菌学检查对结核病的诊断价值有限。
随着分子生物学技术的迅速发展，用高度敏感的方法检测结核菌及其特异性DNA 片段，如PCR、生物探针和基因芯片等，需要相应的检测设备和检测费用高未能广泛推广。
血清学诊断技术有其固有的优势，如操作简便、快速、便于推广、无需特殊精密仪器，已有多种纯化的特异性抗原可采用，可以发展成自动化检测，尤其是对痰培养阴性和肺外结核病有较为重要的辅助诊断价值，受到广泛的重视。
本文从靶抗原的选择和检测技术的改进等方面综述了结核病血清学诊断的现状和进展。
抗原的选择特异性的抗原是提高血清学检测敏感性、特异性的重要环节。
应用于血清学诊断的理想抗原应具有种的特异性及强的免疫原性。
尤其是结核分枝杆菌全基因组序列测定以后，单克隆抗体、分子生物学、蛋白质组学和比较基因组学等技术的应用，已获得多种纯化和特异性的诊断抗原。
现将当前最受关注的抗原及其临床评估结果归纳如下：1.脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)抗原 脂阿拉伯甘露聚糖是分枝杆菌细胞壁的重要组成部分，是属特异性抗原，具有较强的免疫原性和免疫调节功能，可刺激机体产生相应的抗体，因而是结核病的血清学诊断应用较广的抗原。
有关LAM抗原的应用报道很多, Antunes等用美国生产的结明(MycoDot TM)试剂盒检测活动性肺结核病人的敏感性为63.0%，特异性为92.4%，认为检测LAM抗体是结核病一项有效的辅助诊断方法。
2.A60(antigen 60) A60是从牛分枝杆菌胞浆中提取的一种大分子物质，是脂质蛋白和多糖的复合抗原。
Wu等用ELISA法检测了178例活动性肺结核患者和151例其他疾病患者血清中的IgG A60，根据受试者工作特性曲线(ROC)取261.2单位为截切值(cutoff point)，其敏感性和特异性分别为49.4%和79.5%，认为胸部X片异常的患者结合IgG A60阳性将有助于肺结核病的准确临床诊断。
结核分枝杆菌诊断技术的发展及目前临床应用的新型诊断技术产品分析
结核分枝杆菌诊断技术的发展及目前临床应用的新型诊断技术产品分析快速准确地诊断出结核分枝杆菌感染是控制和治疗结核病的前提和关键。
多年来，结核杆菌的诊断技术在不断地发展和创新，近年来，一些针对结核杆菌检测的新方法陆续被报道，一些新型的诊断技术产品也陆续上市。
本资料综述了结核杆菌的主要诊断方法，并对目前国际市场上广泛应用的商业化诊断技术产品进行了简要分析。
标签：结核分枝杆菌；诊断技术；分析Advance in diagnosis techniques of Mycobacterium tuberculosis and analysis of new diagnostic technologies and products in clinical applicationFENG?Meimei1??SU?Wenqin21.Haikou VTI Biological Institute,Haikou 570311,China;2.Department of Pharmacy,Hainan Medical College,Haikou 571199,China[Abstract] Fast and accurate diagnosis of Mycobacterium tuberculosis infection is the key and prerequisite to control and treatment tuberculosis.For many years,the diagnostic techniques of Mycobacterium tuberculosis have been developing and innovating.In recent years,some new techniques for Mycobacterium tuberculosis detection were reported and some new diagnostic products have been listed.This paper reviewed the main diagnosis techniques of Mycobacterium tuberculosis,and analysed briefly the commercialized diagnostic products which are used widely in the international market now.[Key words] Mycobacterium tuberculosis;Diagnosis;Analysis结核分枝杆菌（mycobacterium tuberculosis，MTB）是引起结核病的病原菌，可侵犯全身各器官，以肺结核最多见。
肺结核的诊断
病例分析患者，女性,35岁，因间断低热、咳嗽1个月，咳痰带血1周入院。
1个月前开始出现发热，体温37.5C左右,伴咳嗽，应用抗炎、止咳药物症状无好转。
1周前出现咳痰，时有痰中带血。
病程中伴盗汗、食欲减退、乏力。
体格检查:体温37.4C,双肺呼吸音清,未闻及干湿性哆音，心率90次/分，节律齐，腹部平软，双下肢无水肿。
血常规: WBC 5. 8X10⁹/L,N56%,L44%，血Hb 110g/L, ESR 35mm/h。
PPD 试验:强阳性。
胸片:右上肺见斑片状密度增高影，边缘不清,其内见空洞样病变。
1.分析该患者的临床诊断及诊断依据。
2.说出对该患者的治疗原则。
肺结核( unmom tereuoin是由结核分枝杆菌引起的肺部慢性传染病。
结核面可侵及全身多个脏器，以肺部受累最常见。
临床上多星慢性过程，表现为低热、消瘦.乏力等全身症状与咳嗽咳痰、咯血等呼吸系统症状。
结核病是全球流行的传染性获病之一，是危害人类健康的公共卫生问题。
世界生组WHO于1993年宣布结核病处于“全球紧急状态”,并推行全程督导短程化学治疗策略作为国家结核病规划的核心内容。
[病因]结核病的病原菌为结核分枝轩菌复合群包括结核分枝杆菌牛分枝杆菌、非洲分枝杆菌和田鼠分枝杆菌。
人肺结核的致病菌90%以上为结核分枝杆菌。
结核分枝杆菌抗酸染色呈红色，可抵抗盐酸酒精的脱色作用,故称抗酸杆菌。
结核分枝杆菌对干燥、冷、酸、碱等抵抗力强,对紫外线比较敏感，太阳光直射下痰中结核杆菌经2~7小时可被杀死。
结核菌生长缓慢，培养时间一般为2-8周。
结核分枝杆菌菌体结构复杂，与结核病的组织坏死、干酪液化、空洞发生以及结核变态反应有关。
[发病机制]的越精病的传摸结钱病在人时中的传染源主要是结核病患者即费直接徐片阳性者，传染性的大小取决于痰内结核分枝杆菌量的多少。
法传播是肺结核最重要的传播途径，经消化道和皮肤等其他途径传播现已罕见。
婴幼儿细胞免疫系统不完善，老年人、HIV感染者、免疫抑制剂使用者，慢性疾病患者等免疫力低下，都是结核病的易感人群。
IFN-γ释放试验（T-SPOT.TB）在结核病诊断中的应用
IFN-γ释放试验（T-SPOT.TB）在结核病诊断中的应用孔令和;柯云霞;高素香;杨剑;雷桂萍;史国香;黄洁【摘要】目的：探讨T淋巴细胞感染结核后IFN-γ释放斑点试验(T-SPOT.TB)在结核病诊断中的应用及价值。
方法采用T-SPOT.TB方法对疑诊或待排结核患者外周血液中释放IFN-γ的结核杆菌特异性淋巴细胞的测定。
结果 T-SPOT.TB方法的阳性率是83.1%(89/107)，结核菌素试验(tuberculin skin test,TST)的阳性率40.2%(43/107)，涂片找抗酸杆菌阳性率是25.6%(21/82)， TB-DNA的阳性率是9.4%(5/53)，分枝杆菌分离培养阳性率是21.4%(9/42)。
结论 T-SPOT.TB方法检测诊断结核性疾病敏感性为83.1%、特异性为95.2%；其阳性率明显高于TST、涂片找抗酸杆菌、TB-DNA、分枝杆菌分离培养，采用该方法检测T淋巴细胞感染结核IFN-γ释放快速敏感，特异性高，在结核性疾病诊断中具有重要价值。
%Objective To explore the application and value of T-SPOT.TB method in the diagnosis of tuberculosis. Methods T-SPOT.TB method was used in the detection of mycobacterium tuberculosis specific lymphocytes which released IFN-γin the TB patients' peripheral blood. Results The positive rates of T-SPOT.TB, TST, acid-fast bacilli finding in sputum smears, TB-DNA detection and mycobacterium cultivation were 83.1%(89/107),40.2%(43/107), 25.6 (21/82), 9.4%(5/53) and 21.4%(9/42), respec-tively. Conclusion The sensitivity of T-SPOT.TB for the diagnosis of tuberculosis is 83.1%, and the specificity is 95.2%, and the positive rate is higher than that of the other methods. Thus, T-SPOT.TB has important value in tuberculous disease diagnosis.【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2013(000)006【总页数】3页(P535-537)【关键词】结核病;T-SPOT.TB检测;IFN-γ;特异性;敏感性【作者】孔令和;柯云霞;高素香;杨剑;雷桂萍;史国香;黄洁【作者单位】九江市第三医院，江西九江332000;九江市第三医院，江西九江332000;九江市第三医院，江西九江332000;九江市第三医院，江西九江332000;九江市第三医院，江西九江332000;九江市第三医院，江西九江332000;九江市第三医院，江西九江332000【正文语种】中文【中图分类】R52;R378.91+1结核病是一种严重危害人民健康的慢性传染病，据WHO统计，全球有约20亿人感染结核分枝杆菌，每年约为200万死于结核病[1]。
上海市结核病实验诊断操作规程完整
上海市结核病实验诊断操作规程完整一、引言结核病是一种严重的传染病，对社会公共卫生和个体健康造成严重威胁。
为准确、及时地诊断和治疗结核病，制定结核病实验诊断操作规程是十分必要的。
本操作规程旨在规范上海市结核病实验诊断工作，确保检测结果的准确性和可靠性。
二、基本原则1.遵循资格认证的检测人员进行实验室操作，确保实验操作的准确性和可靠性。
2.保证实验环境的洁净，避免实验样本的污染。
3.严格遵循实验安全操作规程，保护检测人员和实验室环境的安全。
4.使用符合国家和行业标准的实验设备和试剂，确保实验的准确性。
三、操作步骤1.标本采集和运输1.1标本采集①选择无症状结核病患者或疑似结核病患者进行标本采集。
②采集痰液标本时，要求患者进行深咳嗽，采集清晨第一次咳嗽产生的痰液。
③采集标本后，将标本密封并注明采样日期和编号。
1.2标本运输①标本应在采样后尽快送往实验室，避免标本质量的下降。
②运输途中标本的温度应稳定在2-8摄氏度之间。
③送样人员应填写标本送检单，并负责将标本交到实验室进行检测。
2.标本处理和前处理2.1标本处理①标本到达实验室后，应立即进行标本处理。
②检查标本的容器和密封性，若有损坏应重新采集标本。
2.2前处理①标本前处理包括离心、去除杂质等步骤，以获得清晰的标本液。
②标本离心前，应先检查离心机的运转情况，确保其正常工作。
③标本处理过程中，应注意避免标本的污染。
3.标本检测3.1结核菌培养①取适量的标本液，接种于含有结核菌培养基的培养皿中。
②培养皿密封后，放入恒温培养箱进行培养。
③培养周期约为4-8周，出现结核菌结节后进行观察和识别。
3.2酸酒精染色①取培养皿中的结核菌结节，放入干燥的载玻片上。
②滴加酸酒精染色液，静置数分钟后洗净，待干后镜检。
3.3PCR法检测结核菌DNA①取培养液进行DNA提取。
②使用PCR试剂盒进行PCR扩增。
③扩增产物经凝胶电泳分析，判断是否存在结核菌DNA。
4.结果判断和报告4.1结果判断根据培养和染色结果，判断标本中是否存在结核菌。
结核病实验室诊断新技术
敏 感 性 和 特 异 性 最 好 。Ｐ Ｒ检 测 较 病 理 检 查 Ｃ
３ ．％ ， 易 误 诊 为 其 它 疾 病 ， 诊 率 高 达 ３６ 极 误
维普资讯
哮 喘与肺部 疾病 杂志 ２０ ０２年 第 １～２期
应在淋 巴结结核诊 断中的应用 ） 中介绍［ ： 在 ］
７ 标 本 中 ， 病 理 诊 断 证 实 为 淋 巴结 结 核 ３例 经
者４ ７例 。 用 Ｐ Ｒ法 检 测 Ｔ Ｃ Ｂ—Ｄ Ａ 阳 性 者 Ｎ
４ ８例 ， 中 ２例 为假 阳性 （ 结 核 病 ） 另 有 １ 其 非 ； 例为 假 阴性 。 其 中 淋 巴 结 结 核 组 ３ ５例 标 本 仍 病 理诊 断 与 Ｐ Ｒ检 测 结 果 完 全 一 致 ； 诊 Ｃ 疑 淋 巴 结结 核 组 ２ ｌ例 中 病 理 诊 断 １ ２例 阳性 ，
维普资讯
哮喘与肺部疾病杂志 ２０ 年第 １ ？ ０２ 一 期
结 核 病 实 验 室诊 断 新 技 术
天津市肺科 医院 秦 超
按 照 传 统 习惯 ， 规 细 菌 学 涂 片 和 培 养 常 法 虽 阳性 率 各 异 但 临床 已将 “ 阳” 为诊 断 菌 作 病 的重 要 参 考 依 据 。但 由 于 这些 检 测 手 段 本 身 存 在 一 些 缺 点 ， 涂 片法 特 异 性 差 ， 结 核 如 非 分 支杆 菌 （ ｙ 或 其 他 细 菌 、 子 等 抗 酸 染 Ｍ（Ｉ Ｔ） 孢 色 亦 为 阳 性 ， 灵 敏 度 低 ， Ｈ 痰 液 中 含 且 每 ｌ ｌ ５０ ０ ０条 以 上 才 能 检 出 。培 养 法 虽 有 检 出 ｌ ０
Ｐ Ｒ法 检 出 １ 例 阳性 。 以上 结 果 表 明 Ｐ Ｒ Ｃ １ Ｃ
结核感染T细胞(TB-IGRA)检测及意义
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与免疫学指标关联
分析TB-IGRA检测与免疫学指标（如CD4+T细胞计数、干扰素-γ释放等）的关系，发现这些 指标在结核病患者中异常表达，且与TB-IGRA检测结果相互印证。
与临床表现及预后关联
探讨TB-IGRA检测结果与结核病患者临床表现及预后的关系，发现阳性结果与患者病情严 重程度、治疗反应及预后密切相关。
完善相关法规和政策支持
01
制定行业标准
建立TB-IGRA检测技术的行业标 准和质量管理体系，确保检测结 果的准确性和可靠性。
02
加强政策扶持
03
完善医保报销政策
政府应加大对TB-IGRA检测技术 的投入和支持力度，推动相关产 业的发展和创新。
将TB-IGRA检测技术纳入医保报 销范围，减轻患者的经济负担， 提高检测的可及性。
05
临床案例分析与解
读
不同类型结核病患者案例分析
活动性结核病案例
通过对比活动性结核病患者的TB-IGRA检测结果，发现其 阳性率较高，表明该检测对于活动性结核病的诊断具有较 高敏感性。
潜伏性结核病案例
分析潜伏性结核病患者的TB-IGRA检测结果，可见部分患 者呈现阳性反应，提示存在结核分枝杆菌感染，但无明显 临床症状。
加强国际间合作与交流
分享经验与技术
加强与其他国家和地区的交流与合作，分享TB-IGRA检测技术的研 发和应用经验，共同推动技术的进步和发展。
参与国际标准制定
积极参与国际标准的制定和修订工作，推动TB-IGRA检测技术的国 际化和标准化进程。
加强科研合作
鼓励科研机构和企业加强合作，共同开展TB-IGRA检测技术的基础 研究和应用研究，推动技术的不断创新和发展。
GeneXpert 检测在肺结核病的临床诊断及治疗中的应用价值分析
GeneXpert 检测在肺结核病的临床诊断及治疗中的应用价值分析刘畅【摘要】目的：探讨GeneXpert检测方法在临床诊断及肺结核病治疗中的应用效果。
方法：收集已经确诊及治疗的80例肺结核病住院患者的痰标本，对其进行痰涂片法、罗氏固体培养法、比例法药敏和GeneXpert检测，观察其特异性以及敏感度。
结果：GeneXpert检测与罗氏固体培养金标准之间具有较好的一致性，同时比例法药敏与GeneXpert检测也具有较好的一致性。
结论：与常规检测方法相比，GeneXpert检测能够快速有效对早期结核病进行诊断，同时可以为利福平耐药情况提供数据支持，值得临床上推广使用。
【期刊名称】《医学理论与实践》【年(卷),期】2016(029)024【总页数】3页(P3392-3393,3394)【关键词】GeneXpert检测;结核病;罗氏固体培养法;比例法药敏【作者】刘畅【作者单位】云南省第二人民医院检验科，云南省昆明市 650021【正文语种】中文【中图分类】R446结核病通常是指结核分枝杆菌通过侵犯肺部等器官后导致产生结核疾病的统称。
肺结核为结核分枝杆菌引起的肺部感染性疾病，其传播途径主要为呼吸道，潜伏期4～8周，患者发病后常常会出现乏力、咳嗽、咯血等症状。
目前临床上普遍采用痰涂片抗酸染色、固体培养法等方式来诊断结核病，由于此类检测标本中含菌量低，并且诊断方式时间长，阳性率低，因此会极大地影响结核病患者治疗[1]。
此外随着结核菌耐药问题日趋严重，如何采用快速有效的方式诊断结核病一直是人们重点研究的问题[2]。
最新研究发现GeneXpert等新技术检测结核病在临床诊断及治疗上具有重要意义，其可以有效降低患者诊断所需时间，增加阳性诊断率[3]。
本文选取80例确诊及治疗的肺结核病患者的痰标本，对标本进行罗氏固体培养法、痰涂片法、比例法药敏和GeneXpert MTB/RIF检测，现将结果报道如下。
1.1 一般资料收集2016年1-8月在本市结核病定点医院经细菌学、病理学、分子生物学及影像学等确诊及治疗的80例住院肺结核病患者的痰标本作为观察对象，对其临床资料进行回顾性分析。
结核病诊断、治疗
（2）根据感染病原和药敏结果治疗 在得到感染病原和药敏结果后，应参考先前的治疗效果，
继续应用或换用敏感药物。 （3）抗感染用药注意事项
– 选药要有明确的指针,不仅要有适应证,还要详细询问其 他病史及药物过敏史，以排除禁忌症；
– 要有目的地联合用药,可用可不用的药物尽量不用,联合 用药时要排除药物之间相互作用可能引起的不良反应。
1、肺结核诊断标准（WS 288－2008） 确诊病例、临床诊断病例、疑似病例。 （1）凡符合下列条件之一者可诊断为确诊病例：
– 痰涂片检查阳性即涂阳肺结核； – 痰涂片阴性但结核分枝杆菌分离培养阳性即仅
培阳肺结核； – 肺部病变标本病理学诊断为结核病变者。
凡符合下列三项之一者为确诊病例之一涂阳肺结核病例： – 2份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性； – 1份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性加肺部影像学 检查符合活动性肺结核影像学表现； – 1份痰标本直接涂片抗酸杆菌镜检阳性加 1份痰标本 结核分枝杆菌培养阳性。
结核病诊断和治疗
内容
一、发现对象和方式 二、接诊和诊断程序 三、肺结核疫情报告 四、肺结核患者转诊与追踪 五、涂阳肺结核患者密切接触者检查 六、免费检查和激励补助 七、肺结核患者病案记录，联系卡及登记本 八、流动人口、耐药、TB/HIV 双重感染患者发现 九、抗结核治疗
一、发现对象和方式
（一）肺结核可疑症状者
（四）诊断性抗结核治疗
适应症： （1）临床表现、影像学变化及其他检查结果证明有活
动性病变者； （2）诊断性抗感染治疗无效及/或其他检查基本上可
除外非结核感染性疾病； （3）具有并发活动性肺外结核病的证据； （4）对诊断性抗结核治疗无禁忌症。
注意事项：
（1）推荐使用初治活动性肺结核治疗方案，治疗1-2月； （2）化疗方案中最好不含对其他病原菌也有抗菌活性的